ĐỀ TÀI KÍCH THÍCH LƯƠN ĐỒNG (Monopterus albus) SINH SẢN BẰNG CÁC LOẠI KÍCH DỤC TỐ HCG, LH-RHa, SUPREFACT

Mục tiêu nghiên cứu là tìm hiểu ảnh hưởng của một số loại kích dụctố khác nhau như HCG, LH-RHa, Suprefact Buserelin lên sự sinh sản lươn đồng Monopterus albus nhằm hoàn thiện quy trình s

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG

(do Nghiên cứu sinh thực hiện)

KÍCH THÍCH LƯƠN ĐỒNG (Monopterus albus) SINH

SẢN BẰNG CÁC LOẠI KÍCH DỤC TỐ HCG,

LH-RHa, SUPREFACT.

Mã số: TNCS2011-21

Chủ nhiệm đề tài: Nguyễn Quốc Thanh

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG

(do Nghiên cứu sinh thực hiện)

KÍCH THÍCH LƯƠN ĐỒNG (Monopterus albus) SINH

SẢN BẰNG CÁC LOẠI KÍCH DỤC TỐ HCG,

LH-RHa, SUPREFACT.

Mã số: TNCS2011-21

Xác nhận của trường Đại học Cần Thơ Chủ nhiệm đề tài

Nguyễn Quốc Thanh

Cần Thơ, tháng 6-2014

DANH SÁCH THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI

1 Ths Nguyễn Quốc Thanh Khoa Thủy sản-Đại học Cần Thơ

2 Ths Nguyễn Thị Kim Hà Khoa Thủy sản-Đại học Cần Thơ

3 Trần Thanh Long Liên Thông NTTS K37

CÁN BỘ HƯỚNG DẪN NCS THỰC HIỆN ĐỀ TÀI

Họ và tên Đơn vị (Bộ môn/Khoa

(Viện, TT))

Nhiệm vụ Chữ ký

PGS.TS Đỗ Thị Thanh Hương Khoa Thủy Sản Đại Học

Cần Thơ Hướng dẫn khoa học

MỤC LỤC

Trang

MỤC LỤC I DANH SÁCH BẢNG III DANH SÁCH HÌNH III TÓM TẮT IV THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU V INFORMATION ON RESEARCH RESULTS VII

PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1

1.1 Tổng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài ở trong và ngoài nước 1

1.1.1 Đặc điểm sinh học lươn đồng 1

1.1.1.1 Đặc điểm hình thái và phân loại lươn đồng 1

1.1.1.2 Phân bố 3

1.1.1.3 Đặc điểm dinh dưỡng 4

1.1.1.4 Đặc điểm sinh trưởng 5

1.1.1.5 Đặc điểm hô hấp 7

1.1.3 Đặc điểm sinh sản 8

1.1.3.1 Mùa vụ và tập tính sinh sản 8

1.1.3.2 Biến động tỉ lệ giới tính và sức sinh sản 10

1.1.4 Các nghiên cứu về đối tượng thí nghiệm 10

1.1.5 Các nghiên cứu về sản xuất giống 13

1.1.5.1 Sinh sản tự nhiên 13

1.1.5.2 Cơ sở khoa học của việc kích thích lươn đồng sinh sản bằng kích dục tố .14

1.2 Lý do chọn đề tài 18

1.3 Mục tiêu nghiên cứu 19

1.4 Nội dung nghiên cứu 19

1.5 Phương pháp nghiên cứu 19

1.5.1 Thời gian và địa điểm thực hiện 19

1.5.2 Vật liệu thí nghiệm 19

1.5.3 Sinh vật thí nghiệm 20

1.5.4 Thuốc thí nghiệm 20

1.5.5 Nguồn nước thí nghiệm 21

1.5.6 Thức ăn 21

1.5.7 Phương pháp thực hiện 21

1.5.8 Các chỉ tiêu theo dõi 23

1.5.8.1 Các yếu tố môi trường 23

1.5.8.2 Xác định các chỉ tiêu sinh học sinh sản: 23

1.5.9 Phương pháp xử lý số liệu 24

1.6 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 24

PHẦN II: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ PHÂN TÍCH KẾT QUẢ 25

2.1 Kết quả nghiên cứu 25

2.1.1 Kết quả nuôi vỗ thành thục lươn đồng 25

2.1.2 Kết quả sự biến động các yếu tố môi trường 26

2.1.2.1 Nhiệt độ 26

2.1.2.2 pH 27

2.1.2.3 Oxy 27

2.1.2.4 NO2 28

2.1.2.5 TAN 28

2.1.3 Các chỉ tiêu sinh học sinh sản 28

2.1.3.1 Tỉ lệ sinh sản 28

2.1.3.2 Tỉ lệ thụ tinh 29

2.1.3.3 Tỉ lệ nở 30

2.1.3.4 Sức sinh sản thực tế 30

2.1.3.5 Nhịp sinh sản 31

2.1.4 Đặc điểm của lươn đồng sau khi sinh sản 32

2.1.4.1 Hình dạng bên ngoài 32

2.1.4.2 Buồng trứng sau khi sinh sản 33

2.2 Thảo luận 34

2.2.1 Các yếu tố môi trường 34

2.2.2 Các chỉ tiêu sinh sản 36

2.2.2.1 Tỉ lệ sinh sản và thời gian sinh sản 36

2.2.2.2 Tỉ lệ thụ tinh và tỉ lệ nở 37

2.2.2.2 Sức sinh sản thực tế 38

PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40

5.1 Kết luận 40

5.2 Kiến nghị 40

TÀI LIỆU THAM KHẢO 41

PHỤ LỤC 46

DANH SÁCH BẢNG

Trang

Bảng 2.1 Nhiệt độ trung bình (0C) giữa các nghiệm thức……… 28

Bảng 2.2 pH trung bình giữa các nghiệm thức ……… ………… 28

Bảng 2.3 Oxy trung bình giữa các nghiệm thức ……… 28

Bảng 2.4 NO2 trung bình giữa các nghiệm thức……… 29

Bảng 2.5 TAN trung bình giữa các nghiệm thức ……… 29

Bảng 2.6 Tỉ lệ sinh sản trung bình của các nghiệm thức……… 30

Bảng 2.7 Tỉ lệ thụ tinh trung bình của các nghiệm thức ……… 30

Bảng 2.8 Tỉ lệ nở trung bình của các nghiệm thức………….… … 31

Bảng 2.9 Sức sinh sản thực tế ….……… ……… 31

Bảng 2.10 Thời gian giữa các lần sinh sản trong một đợt sinh sản của lươn đồng 33 Bảng 2.11 Thời gian lươn ngừng sinh sản đến lúc giải phẫu ……… 34

DANH SÁCH HÌNH Hình 1.1: Hình thái bên ngoài lươn đồng ……… 5

Hình 1.2 Bể thí nghiệm ……… 24

Hình 2.1: (a) Lươn đực sau khi nuôi vỗ; (b) Lươn cái sau khi nuôi vỗ………… 28

Hình 2.2: Buồng trứng của lươn sau khi nuôi vỗ ……… 28

Hình 2.3: Tổ bọt lươn đồng sau khi sinh sản… ……… 33

Hình 2.4: Lươn cái sau sinh sản ….………

Hình 2.5: Lươn đực sau sinh ………

35 35 Hình 2.6: (a) Buồng trứng lươn sau sinh sản của NT tiêm HCG………

(b) Buồng trứng lươn sau sinh sản của NT tiêm Suprefact………

(c) Buồng trứng lươn sau sinh sản của NT đối chứng ………

(d) Buồng trứng lươn sau sinh sản của NT tiêm LH-Rha………

36 36 36 36

TÓM TẮT

Nghiên cứu được thực hiện Tại Bộ môn Dinh Dưỡng và Chế biến Thủysản thuộc Khoa Thủy Sản Đại học Cần Thơ từ tháng 4 năm 2011 đến tháng 12năm 2011 Mục tiêu nghiên cứu là tìm hiểu ảnh hưởng của một số loại kích dục

tố khác nhau như HCG, LH-RHa, Suprefact (Buserelin) lên sự sinh sản lươn

đồng (Monopterus albus) nhằm hoàn thiện quy trình sản xuất giống tiến đến sản

xuất giống đại trà và cung cấp nguồn giống nhân tạo có chất lượng tốt cho nhucầu người nuôi, khắc phục tình trạng con giống đang khan hiếm và kém chấtlượng

Thí nghiệm được bố trí gồm 4 nghiệm thức và 6 lần lặp lại Nghiệm thức

1 (NT1): Tiêm kích dục tố HCG 2.000 UI/kg; (NT2): Tiêm kích dục tố LH-RHa

150 µg/kg + 5 mg DOM/kg; (NT3): Tiêm kích dục tố tố Suprefact 20 µg + 5 mgDOM/kg; (NT4): Không sử dụng kích dục tố, có tiêm nước muối sinh lý

Kết quả nghiên cứu cho thấy tỷ lệ sinh sản cao nhất ở nghiệm thức tiêmHCG 2000 UI/Kg là 50%, còn nghiệm thức tiêm LH-RHa bằng với nghiệm thứctiêm Suprefact là 33,33%, đối với nghiệm thức không tiêm kích dục tố tỉ lệ sinhsản thấp nhất là 16,67% Số lần sinh sản trong một đợt của một cặp lươn đồng ởcác nghiệm thức khác nhau, cao nhất ở nghiệm thức sử dụng Suprefact liều 20µg/kg lươn đẻ nhiều nhất là 6 lần và thấp nhất là 2 lần Nghiệm thức tiêm HCGliều 2.000 UI/kg lươn đẻ nhiều nhất 3 lần và thấp nhất là 2 lần, còn tiêm LH-RHa 150 µg/kg lươn đẻ nhiều nhất 3 lần và thấp nhất 1 lần Nghiệm thức đốichứng lươn chỉ đẻ 1 lần Sức sinh sản thực tế của nghiệm thức tiêm Suprefactcao nhất là 10.880 trứng/kg kế đến là nghiệm thức tiêm LH-RHa và HCG là

6806 trứng/kg và 2.686 trứng/kg; thấp nhất là nghiệm thức đối chứng là 150trứng Tỉ lệ nở cũng cao nhất khi tiêm Suprefact là 78,6±23,39% Qua thí nghiệmkhi dùng kích dục tố HCG liều 2000 UI/kg cho kết quả số lượng lươn đẻ nhiềuhơn khi tiêm LH-RHa liều 150 µg/kg và Suprefact liều 20 µg/kg

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

Đơn vị: KHOA THỦY SẢN

THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

1 Thông tin chung:

- Tên đề tài: Kích thích lươn đồng (Monopterus albus) sinh sản bằng các loại

kích dục tố HCG, LH-RHa, Suprefact

- Mã số: TNCS2011-21

- Chủ nhiệm: Ths Nguyễn Quốc Thanh

- Cơ quan: Khoa Thủy Sản Trường Đại học Cần Thơ

- Thời gian thực hiện: tháng 4/2011 đến tháng 12/2011

2 Mục tiêu:

Nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại kích dục tố khác nhau như HCG,

LH-RHa, Suprefact (Buserelin) lên sự sinh sản lươn đồng (Monopterus albus)

nhằm hoàn thiện quy trình sản xuất tiến đến sản xuất giống đại trà và cung cấpnguồn giống nhân tạo có chất lượng tốt cho nhu cầu người nuôi, khắc phục tìnhtrạng con giống đang khan hiếm và kém chất lượng

3 Tính mới và sáng tạo:

Xác định loại kích dục tố cho sinh sản lươn đồng tốt, khi dùng kích thích

tố HCG liều 2.000 UI/kg cho kết quả số lượng lươn đẻ nhiều hơn khi tiêm RHa liều 150 µg/kg và Suprefact liều 20 µg/kg Khi dùng kích dục tố Suprefact liều 20 µg/kg lươn đồng sinh sản nhiều lần hơn HCG và LH-RHa

LH-4 Kết quả nghiên cứu:

Kết quả nghiên cứu cho thấy tỷ lệ sinh sản cao nhất ở nghiệm thức tiêmHCG 2000 UI/Kg là 50%, còn nghiệm thức tiêm LH-RHa bằng với nghiệm thứctiêm Suprefact là 33,33%, đối với nghiệm thức không tiêm kích dục tố tỉ lệ sinhsản thấp nhất là 16,67% Số lần sinh sản trong một đợt của một cặp lươn đồng ởcác nghiệm thức khác nhau, cao nhất ở nghiệm thức sử dụng Suprefact liều 20µg/kg lươn đẻ nhiều nhất là 6 lần và thấp nhất là 2 lần Nghiệm thức tiêm HCGliều 2.000 UI/kg lươn đẻ nhiều nhất 3 lần và thấp nhất là 2 lần, còn tiêm LH-RHa 150 µg/kg lươn đẻ nhiều nhất 3 lần và thấp nhất 1 lần Nghiệm thức đốichứng lươn chỉ đẻ 1 lần Sức sinh sản thực tế của nghiệm thức tiêm Suprefactcao nhất là 10.880 trứng/kg kế đến là nghiệm thức tiêm LH-RHa và HCG là

6.806 trứng/kg và 2686 trứng/kg; thấp nhất là nghiệm thức đối chứng 1316trứng/kg Tỉ lệ nở cũng cao nhất khi tiêm Suprefact là 78,6±23,39%

Qua thí nghiệm khi dùng kích dục tố HCG liều 2.000 UI/kg cho kết quả

số lượng lươn đẻ nhiều hơn khi tiêm LH-RHa và Suprefact Số lần lươn đẻ nhiềunhất ở nghiệm thức Suprefact

INFORMATION ON RESEARCH RESULTS

1 General information:

Project title: Stimulation of rice eel (Monopterus albus) reproduction by different

hormones (HCG, LH-RHa, Suprefact)

Code number: TNCS2011-21

Coordinator: Msc Nguyen Quoc Thanh

Implementing institution: College of Fisheries of Aquaculture Can Tho

Duration: from April 2011 to December 2011

2 Objective(s):

The aim of this study was to improve production process, approach massproduction, and to supplying good quality seed It also provided a solution forscarcity and poor quality of rice eel

3 Creativeness and innovativeness:

The study suggests the best kind of hormones for the artificialreproduction of rice eel The number of spawning eels in 2000 UI/kg HCGtreatment was more than the number of spawning eels in LH-RHa and suprefacttreatment while the largest spawning times of eel was in 20 µg/kg suprefacttreatment

4 Research results:

The result showed that highest reproductive rate was 50% in 2000 UI/kgHCG treatment, followed by 33.33% and 16.67% in suprefact and controltreatment Under different hormone treatment, the highest spawning times was 6,

3 and 3 while the lowest was 2,2 and 1 of rice eel treatment with 20 µg/kgsuprefact of does of, 2.000 UI/kg HCG, and 150 µg/kg LH-RHa, respectively.The highest fertilized rate was 78.6 ± 23.39% at suprefact treatment The resultalso found that the number of eggs per kg was 10,880; 6,806; 2,686 of eelinjected with suprefact, LH-RHa, hCG, respectivety while control eel spawn1,316 eggs per kg

To sum up, the number of spawning eels in 2.000 UI/kg HCG treatmentwas more than in two remaining treatments while the largest spawning times ofeel was in suprefact treatment

5 Products:

6 Effects, technology transfer means and applicability:

The research results can spaciously and easy tranfer to the production

hatchery larvae of Monopterus albus.

PHẦN 1: MỞ ĐẦU

1.1 Tổng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực đề tài ở trong và ngoài nước

1.1.1 Đặc điểm sinh học lươn đồng

1.1.1.1 Đặc điểm hình thái và phân loại lươn đồng

Lươn đồng được phân loại như sau: (http://www.fishbase.org)

Loài: Monopterus albus (Zuiew, 1793)

Tên địa phương: Lươn đồng

Tên tiếng Anh: Asian Swamp Eel (Rice Eel)

Hình 1.1: Hình thái bên ngoài lươn đồng

Đầu lươn hơi dẹp bên Mõm nhỏ, ngắn Miệng trước, rạch miệng nằmngang kéo dài qua đường thẳng đứng kẻ từ bờ sau của mắt, miệng có thể mở rarất rộng Không có rãnh sau môi trên, rãnh sau môi dưới bị gián đoạn ở giữa.Xương hàm cứng chắc, không có râu, mắt nhỏ, bầu dục, được da che phủ Khemang lệch xuống mặt bung, hai khe mang hai bên dính nhau thành một, có hìnhchữ V, nhưng ở phía trong dính với eo mang (Trương Thủ Khoa và Trần Thị ThuHương, 1993).

Thân lươn dài, phần trước tiết diện tròn, phần sau dẹp bên và mỏng Haibên sống lưng có hai đường gờ nổi lên Thân trần có nhiều chất nhờn Vi ngực và

vi bung thoái hòa hoàn toàn Vi lưng, vi hậụ môn, vi đuôi, tia vi không rõ rảng và

3 vi này nối liền nhau (Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương, 1993)

Theo Kottelat (1998), lươn đồng không có vi ngực và vi bụng, vi hậu môn

vi đuôi và vi lưng dính liền nhau, lỗ mang kết hợp thành khe bên dưới đầu, cơthể có màu đỏ nâu với một ít vết ngang lưng, miệng rộng mắt nhỏ

Lươn đồng có ruột thẳng, ngắn hơn chiều dài toàn thân giúp lươn đồngtiêu hóa nhanh Thân lươn đồng có nhiều chất nhờn giúp lươn trườn đi nhẹnhàng, đuôi lươn đồng hơi dẹt như một cái bơi chèo (Đức Hiệp, 1999) Mắt lươnđồng nhỏ, được che phủ bởi lớp da (Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương,1993)

Mắt lươn nhỏ, 1 số loài sống ở các hang động ngầm thì mắt ở dưới da vàcác loài này coi như là loài cá mù, các màng mang hợp nhất, còn mang thì mởhoặc là một khe hở hoặc là một lỗ nhỏ bên dưới họng Chúng không có bong hơi

và các xương sườn Điều này có lẽ là sự thích nghi với cuộc sống dưới bùn lầycủa chúng (Nguyễn Chung, 2008) Lươn có màu sậm hay vàng nâu, bụng có màuvàng nhạt một số con lưng có nhiều chấm nhỏ li ti Lươn sống trong môi trườngđất phù sa sẽ có lưng màu vàng, nơi bùn đen có màu xám đen (Inger và Kong,

1962, Trích dẫn bởi Lý Văn Khánh, 2007)

1.1.1.2 Phân bố

Lươn đồng (Monopterus albus) là loài phân bố rộng với 2 dòng phân bố

chính: Dòng bản địa tập trung ở vùng Đông và Nam Châu Á (Bricking, 2002),chủ yếu là các quốc gia như: Ấn Độ, Trung Quốc, Nhật Bản, Philippine, ĐàiLoan, Hồng Kông, Indonesia, Bangladesh, Thái Lan, Việt Nam (Anon, 2005),ngoài ra lươn đồng còn phân bố ở Châu Phi, châu Úc Dòng nhập cư ở Mỹ(Bricking, 2002)

Lươn phân bố rộng trong nhiều loại hình thủy vực như ao đầm, kênhgạch, ruộng Lúa (Shil, 1940), có khả năng chịu được môi trường khô hạn bằngcách chui rút vào đất ẩm và sống ở đây cho đến hết mùa khô (Liem, 1978) Lươnsống dưới đáy, chui rút dưới bùn và đào hang trong đất nhưng độ sâu không quá

3 m (Nguyễn Chung, 2008), có thể tồn tại vài ngày trong môi trường không cónước (Wu và Kong, 1940)

Lươn đồng (Monopterus albus) thích sống ở nơi đất thịt pha sét, đất bùn,

nơi có nhiều ngõ ngách, có thể sống được 2-3 tháng ở lớp đất sâu dưới 1m, ởruộng khô nứt nẻ nhờ có cơ quan hô hấp phụ (Ngô Trọng Lư, 2002) Lươn đồng

có thể sống trong môi trường thiếu oxy, con trưởng thành có thể thở oxy trongkhông khí Tơ mang ở con trưởng thành giảm hô hấp hầu hết qua màng nhầy ởphần còn lại của cung mang

Ở Đồng bằng sông Cửu Long lươn đồng sống chủ yếu trong các ao đìa,kênh rạch (Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương, 1993) Lươn đồng sốngchui rúc trong bùn và làm hang (Ngô Trọng Lư và Lê Đăng Khuyến, 2006).Lươn đồng là loài sống nước ngọt nhưng cũng có thể tìm thấy trong cả nước lợ,nước mặn, hoạt động mạnh về đêm (Nichols, 1943)

Lươn là loài động vật biến nhiệt, nhiệt độ cơ thể thay đổi theo nhiệt độmôi trường Lươn sống bình thường trong khoảng nhiệt độ 15-32oC, thích hợpnhất ở 24-28oC Khi nhiệt độ dưới 15oC lươn chui rút xuống lớp bùn đáy hoặcđáy hang và ngưng hoạt động, sống dựa vào nguồn năng lượng dự trữ trong cơ

thể, khi nhiệt độ trên 32oC lươn giảm ăn và có thể tiết nhớt và chết nóng(Nguyễn Chung, 2008)

1.1.1.3 Đặc điểm dinh dưỡng

Lươn đồng (Monopterus albus) là loài có ruột ngắn so với chiều dài thân

và vách ruột dày, chứng tỏ có tính thiên về ăn động vật Lươn đồng sống chui rúcdưới bùn và làm hang, chúng ăn động vật xác thối rửa chủ yếu là cá, tép, tôm(Mai Đình Yên, 1992) Cũng theo Bricking (2002), lươn là loài ăn thịt Lươn lúcnhỏ ăn sinh vật phiêu sinh, giai đoạn kế tiếp ăn côn trùng, bọ gậy, ấu trùng chuồnchuồn, đôi khi ăn các mảnh vụn hữu cơ vụn nhỏ (rễ lúa, tảo sợi) Lươn đồng lớn

ăn giun ốc tôm tép, cá con, nòng nọc và những động vật trên cạn gần mép nướcnhư giun dế (Ngô Trọng Lư, 2000)

Lươn thường đi ăn mồi chủ yếu vào ban đêm (Yamamoto, 2000) Khảosát hệ tiêu hóa của lươn cho thấy thức ăn phần lớn là tép, cá và cua, chỉ số LRG

là 0,65 (Lý Văn Khánh, 2007) Lượng thức ăn trong ngày không quá 8% khốilượng cơ thể Khi còn nhỏ ăn sinh vật phù du, côn trùng bọ gậy, ấu trùng chuồnchuồn, đôi khi ăn thực vật phù du rễ lúa, tảo sợi

Kết quả khảo sát lươn đồng trong bể cá cảnh ở Florida cho thấy khoảng50% có dạ dày tương đối trống, tất cả các cá thể có lượng thức ăn ít Các loạimồi bao gồm: côn trùng, trứng cá, giun ít tơ, cây cỏ, giáp xác Côn trùng đa số lànhộng Odonate chiếm thành phần chủ yếu trong thức ăn (Hill et al, 2000)

Hầu hết các trại nuôi lươn đồng trên thế giới đều dùng thức ăn nhân tạo:

có năng lượng cao, giàu đạm, thức ăn tổng hợp có dạng hồ ướt cho lươn đồngcon và dạng viên ép hơi nước hoặc ép đùn với những kích thước khác nhau chocác giai đoạn phát triển khác nhau Hệ số thức ăn từ 0,9 tới 1,9 kg thức ăn/kglươn đồng (Oded Golden, Dan Popper, Sagiv Kolkovski, Ilan Karplus 1998)

Theo Nguyễn Chung (2007) thức ăn cho lươn có thể sử dụng các loại nhưtrùn, cá tạp, bột cá, Nhiệt độ nước khoảng 26-280C lươn ăn nhiều và lớn nhanhnên tăng lượng thức ăn và cho ăn thức ăn có nhiều đạm Lươn đồng có tính lựa

chọn thức ăn rất cao (Minh Dũng, 2001), Khi lớn trên 15 cm, lươn ăn chủ yếu làthức ăn động vật như cá, tôm con, côn trùng, ốc, hến, nòng nọc, ếch nhái, giun ốc

và những động vật trên cạn gần mép nước, giun dế…Khi thiếu thức ăn có thể ănrau bèo, mãnh vụn thực vật ngay cả ăn nhau Theo Ngô Trọng Lư (2002), lươn

có khả năng chịu đói trong thời gian dài Lươn ăn giun đất có hệ số thức ăn 4-6,cho ăn bằng thịt trai tươi ở mức 7% khối lượng thân thì hệ số thức ăn nằm trongkhoảng 7,5-10 (Ngô Trọng Lư, 2003)

Lươn thường đi ăn mồi vào chiều tối và rất đúng giờ (Nguyễn Chung,2008) Không cho ăn thức ăn thối, trong phạm vi nhiệt độ thích hợp, nhiệt độ caocho ăn số lượng nhiều, đầu vụ cho ăn khoảng 3-4% khối lượng cơ thể, giữa vụ 5-8% (Minh Dũng, 2001)

Lươn đồng có tập tính kiếm ăn vào ban đêm, ban ngày ẩn nắp trong hang

và rình mồi ở cửa hang Khi kích cỡ không đồng đều và khi đói, hiện tượng ănlẫn nhau có thể xảy ra

Nhìn chung, ở Việt Nam chưa có công bố nào nghiên cứu về nhu cầu dinhdưỡng và chế biến thức ăn nuôi lươn đồng (Lý Văn Khánh, 2007)

Thức ăn nhân tạo đều được dùng ở các trại nuôi lươn trên thế giới, thức ăntổng hợp có dạng hồ ướt cho lươn con và dạng viên ép hơi nước hoặc ép đùngvới kích cỡ khác nhau cho các giai đoạn phát triển khác nhau Hệ số thức ăn từ0,9-1,9 kg TA/kg lươn (Oded Golden, Dan Popper, Sagiv Kolkovski, IlanKarplus 1998)

1.1.1.4 Đặc điểm sinh trưởng

Trong hai năm đầu lươn tăng trưởng chiều dài nhanh hơn chiều ngang(Việt Chương và Nguyễn Việt Thái, 2007) Các nghiên cứu ban đầu cho rằnglươn con trong năm thứ nhất nuôi lớn nhanh về chiều dài sau đó tăng trọnglượng là chủ yếu, lươn 1 năm tuổi có chiều dài 27 cm nặng 18-60g, lươn 2 nămtuổi có thể dài 36-48 cm, nặng 40-100g (Ngô Trọng Lư, 2002)

Lươn là loài ăn động vật thủy sinh lớn chậm khối lượng trung bình củalươn sau 6 tháng có thể đạt 100-150 g/con và sau 12 tháng nuôi có thể đạt 200-

300 g/con (Dương Nhựt Long, 2004)

Nguyễn Tường Duy (2010), cho lươn đồng ăn thức ăn tươi sống là cá tạpđạt tốc độ tăng trưởng là 0,084 cm/ngày (0,232g/ngày), thức ăn viên là 0,026cm/ngày (0,035g/ngày) Ở nghiệm thức cho ăn thức ăn tươi sống lươn bố trí banđầu 21,8cm/con (7,18 g/con), sau 120 ngày đạt 31,8cm/con (35,0 g/con); nghiệmthức cho ăn thức ăn kết hợp lươn bố trí ban đầu 23,0 cm/con (7,99 g/con), sau

120 ngày đạt 20,4 cm/con (20,4 g/con), nghiệm thức cho ăn thức ăn viên lươn bốtrí lúc đầu 23,0 cm/con (8,09 g/con) sau 120 ngày đạt 26,2 cm/con (12,3 g/con).Cho thấy thức ăn tươi sống tăng trưởng nhanh hơn thức ăn viên

Theo Nguyễn Hương Thùy (2010), ở nghiệm thức 0 ppt lươn có kích cỡban đầu là (13,95±1,65cm/con) (2,23±0,85g/con), Sau 90 ngày đạt(19,66±2,79cm/con) (7,27± 3,1g/con) và tốc độ tăng trưởng đạt (0,056 g/ngày)(0,218 cm/ngày) Ở nghiệm thức 3 ppt lươn có kích cỡ ban đầu là(14,66±2,13cm/con) (2,82±1,23g/con) sau 90 ngày đạt (21,01±2,78cm/con)(9,19±4,29g/con) và tốc độ tăng trưởng đạt (0,071g/ngày) (0,233 cm/ngày) Chothấy nuôi lươn ở 3 ppt tăng trưởng nhanh hơn ở 0 ppt

Theo Nhan Trung Nghĩa (2010), cho lươn ăn tép nhỏ, lươn bố trí ban đầu

ở tháng tuổi thứ 5 có kích cỡ lần lượt là (16,34±2,6g) (25,03±1,76cm) và(17,00±5,58g) (25,61±2,27cm) đến tháng thứ 9 đạt (27,53±6,83g)(27,52±3,79cm) và (47,21±7,91g) (34,65±1,34cm), nếu tính tốc độ tăng trưởng

là (0,093g/ngày) (0,020cm/ngày) và (0,251g/ngày) (0,075cm/ngày) Lươn bố tríban đầu ở tháng tuổi thứ 6 là (27,84±11,18g) (29,45±2,98cm) đến tháng thứ 9 đạt(75,30±29,12g) (39,58±4,65cm) với tốc độ tăng trưởng là (0,396g/ngày)(0,085cm/ngày)

1.1.1.5 Đặc điểm hô hấp

Các tơ mang của lươn tiêu giảm, khi thở lươn lấy Oxy vào cơ thể phầnlớn thông qua màng nhày của cung mang, bên cạnh đó lươn có thể lấy dưỡng khíqua toàn bộ bề mặt cơ thể (Liem, K.F, 1981) Tơ mang ở lươn trưởng thành giảm

hô hấp hầu hết được thực hiện qua màng nhầy ở phần còn lại của cung mang(Liem, K.F, 1987)

Lươn là loài có khả năng hô hấp bằng khí trời (Shafland, P L., K B.Gestring and M S Stanford, 2010), lươn thường ngoi lên mặt nước để lấy khôngkhí (Bricking, 2002; Jonhson, 1967; Sterba, 1983; Liem, K.F, 1987) Lươn có thểchịu đựng được điều kiện thiếu oxy hoặc hàm lượng amonia cao và có thể sốngtrong thời gian dài khi không có thức ăn (Shafland, P L., K B Gestring and M

S Stanford, 2010)

Đặc điểm nổi bật ở lươn đồng là khả năng hô hấp bằng khí trời, thườngchúng sẽ ngoi lên khỏi mặt nước để lấy không khí Khi đó có sự phối hợp củacác phiến mang chuyên biệt trong thời gian chúng sống chui rúc trong đất hoặctìm một nơi ở mới hoặc để sinh sản; trong nước lợ hoặc điều kiện thiếu oxy trongmáu; ở điều kiện ao khô hoặc bùn lầy (Bricking, 2002)

Lươn đồng trưởng thành có thể lấy oxy trong không khí ở các vùng thiếuoxy (Jonhson, 1967; Liem, K.F, 1987) Các tơ mang của lươn đồng tiêu giảm,khi thở lươn đồng lấy oxy từ ngoài vào cơ thể phần lớn thông qua màng nhầycủa cung mang hoặc có thể lấy oxy trực tiếp từ không khí qua bề mặt toàn bộ cơthể (Liem, K.F, 1981)

Lươn có thể dùng xoang hầu và da để thở, vì vậy khi rời khỏi mặt nướcnếu được giữ ẩm sẽ kéo dài thời gian sống lâu hơn so với để trong không khí(Ngô Trọng Lư và Lê Đăng Khuyến, 2004)

Ở lươn, ngoài mang còn có cơ quan hô hấp phụ là da và khoang miệnghầu Da lươn thuộc da trơn, có nhiều nhớt và dưới da có nhiều mạch máu nhỏnên rất thuận lợi cho việc trao đổi khí qua da Trong khoang hầu của lươn có một

lớp chất nhầy, thành mỏng và chứa nhiều mạch máu giúp cho việc trao đổi khíxảy ra ở đây khi lươn đớp khí Xoang hầu của lươn có cấu tạo đặc biệt là bọnghầu cho phép lươn lấy oxy qua cơ quan này bên cạnh mang và da (NguyễnChung, 2008).

Kết quả cũng cho thấy rằng, lươn lớn có khả năng chịu được môi trườngtrên cạn cao hơn lươn nhỏ Mức độ tiêu hao oxy ở lươn rất thấp so với các loàikhác Ở nhiệt độ 28 – 29oC, tiêu hao oxy của lươn có kích cỡ (41,3g) là 39,35mg/O2/kg/giờ, ở cá mè trắng (39,8 g) là 204 mg/O2/kg/giờ, cá trắm cỏ (74g) là

161 mg/O2/kg/giờ theo Lý Văn Khánh (2007) Hô hấp là biểu hiện của quá trìnhtrao đổi chất trong cơ thể nên nó phụ thuộc vào các yếu tố bên trong và bênngoài

1.1.3 Đặc điểm sinh sản

1.1.3.1 Mùa vụ và tập tính sinh sản

Mùa vụ sinh sản của lươn tập trung vào tháng 3-9 hàng năm, hệ số thànhthục cao nhất vào tháng 3 là 6,74% (Lý Văn Khánh, 2007) Mùa vụ sinh sản củalươn kéo dài từ tháng 5 đến tháng 9 tập trung vào khoảng tháng 6 - 7 (Đức Hiệp,1999)

Mùa vụ sinh sản của lươn miền Bắc bắt đầu sớm từ cuối tháng 3 và có thểkéo dài đến tháng 8 – 9 Tuy nhiên ở miền Nam, lươn bắt đầu sinh sản muộn hơnvào đầu mùa mưa (tháng 4-5) đến giữa mùa mưa Lươn cái phát dục sớm hơnlươn đực Chúng có tập tính đẻ trứng vào tổ và bảo vệ trứng

Lươn ở Đồng Bằng Sông Cửu Long có 2 mùa đẻ trong năm là tháng 5 – 6

và tháng 8 – 9 (Dương Nhựt Long, 2004) Lươn thường đẻ trong tổ và lấp kínmiệng tổ, sau khoảng 7 - 8 ngày nhiệt độ khoảng 29 - 30oC trứng nở và saukhoảng 10 ngày lươn đã tiêu hết noãn hoàng và chui ra khỏi tổ đi kiếm ăn

Vào mùa sinh sản, sau những trận mưa lươn thường đẻ tập trung vào buổisáng sớm Tổ lươn có bọt, bọt do lươn nhả ra vừa có tác dụng bảo vệ trứng vừa

có tác dụng giữ trứng tập trung trong tổ (Ngô Trọng Lư, 2002) Lươn thường làm

tổ ở bờ ruộng, ao có đất sét pha thịt, đôi khi là những mô đất cao giữa ruộng.Lươn đực có nhiệm vụ làm tổ Đường kính tổ từ 8-9 cm, có hình chữ U, cao hơnmặt nước 5-10 cm gồm 3 ngách:

- Ngách phụ thường thẳng góc với bờ ruộng để thông khí

- Ngách chính sâu dưới bùn và thông với ngách trên

- Ngách thứ 3 từ trên bờ vòng xuống để tạo thành chữ U

Trước khi lươn đẻ, lươn đực phun bọt làm tổ, sau đó lươn cái đẻ trứng vàcon đực ngậm trứng phun vào tổ Lúc đầu trứng dính trong bọt có màu trắng sauchuyển sang màu vàng khi trứng sắp nở Trong suốt thời gian ấp trứng lươn cáirất dữ, chúng có thể cắn cả những vật lạ hay có khi nuốt cả trứng khi bị động.Lươn đực cũng tiếp với lươn cái giữ trứng trong suốt thời gian này đến khi trứng

nở Tỷ lệ đực cái là 1:1

Trong một tổ trứng, số lượng trứng từ 80 đến 600 trứng Cỡ lươn dài 20

cm có 200–400 trứng, dài 30 cm có 300 – 500 trứng, cỡ lớn có thể đạt 1000trứng Đường kính trứng 3,5 – 4 mm (Ngô Trọng Lư, 2002)

Theo (Phan Thị Thanh Vân, 2006) kích cỡ thành thục của lươn cái cóchiều dài tổng lớn hơn 25cm, khối lượng thân trên 16g Từ đó cho thấy lươnđồng có khả năng thành thục với kích cỡ tương đối thấp

Theo nghiên cứu của Nguyễn Thị Hồng Thắm (2007), có thể dung bểcomposite 500 lít có đấp mô đất cao 40 cm, chiếm ½ diện tích bể cho nước vàokhoảng 30 cm, thả lươn bố mẹ vào cho đẻ bán tự nhiên Theo Nguyễn Chung(2007) có thể cho lươn đẻ tự nhiên bằng cách dùng bể xi măng tô láng hay lót bạtnhựa có diện tích 3-7,5m2 và chiều cao 1,4 m, có hệ thống cấp và thoát nước, đáy

bể cho một lớp đất dày 15-20 cm, trồng thêm khoai nước hoặc lục bình cho lươn

cư trú Chọn 30 đến 40 cá thể bố mẹ khỏe mạnh thả vào bể sinh sản Lươn bố mẹdài 40-60 cm, nặng 250-300 g/con

1.1.3.2 Biến động tỉ lệ giới tính và sức sinh sản

Theo Nguyễn Tường Anh (1999) lươn cái xuất hiện trước, đời sống sinhsản trãi qua 3 pha: cái, lưỡng tính, đực Đa số lươn có chiều dài dưới 30 cm làcon cái, lớn hơn 50 cm là con đực, khoảng giữa là lưỡng tính

Lươn có chiều dài từ 35-50 cm, tính cái chiếm 60%, tính đực 40%, lươn

có chiều dài từ 47-59 cm tính cái giảm xuống 30% và lươn có chiều dài 66-75

cm tính đực chiếm 100% (Đức Hiệp, 1999) Tuyến sinh dục lươn không đốixứng, bên trái phát triển còn bên phải thoái hóa (Ngô Trọng Lư và Lê ĐăngKhuyến, (2004) Theo Mai Đình Yên (1992), lươn nhỏ là cái, lớn là đực nhưngđặc điểm này không rõ ràng đối với lươn ở Đồng Bằng Sông Cửu Long

Những nghiên cứu sức sinh sản cơ bản ban đầu như của Phan Thị ThanhVân (2006) số lượng trứng trong cơ thể lươn dao động từ 143-6813 trứng/con cáivới chiều dài cơ thể từ 25-66 cm Số lượng trứng trong cơ thể lươn đạt 632trứng/con cái với chiều dài cơ thể 27,5 cm (Nguyễn Thị Hồng Thắm, 2007) Cònvới Nguyễn Thị Lệ Hoa (2009) số lượng trứng trong cơ thể lươn dao động từ496-1367 trứng/con cái với chiều dài cơ thể từ 35,5-54 cm

1.1.4 Các nghiên cứu về đối tượng thí nghiệm

Ở nước ta đã có một số nghiên cứu bước đầu thực hiện trên đối tượng

lươn đồng (Monopterus albus) ở khía cạnh sinh sản Tuy nhiên, các kết quả chỉ

dừng lại ở mức độ nghiên cứu nền tảng cho các nghiên cứu tiếp theo như PhanThị Thanh Vân (2006), Lý Văn Khánh (2007), Nguyễn Thị Hồng Thắm (2007),Nguyễn Thị Lệ Hoa (2009), Nhan Trung Nghĩa (2010) Nhu cầu con giống chonghề nuôi lươn đồng là rất lớn Việc nghiên cứu sản xuất giống đại trà là cầnthiết nhằm phát triển nghề nuôi lươn đồng, cung cấp nguồn thực phẩm có giá trịkinh tế cho nhu cầu thị trường trong và ngoài nước

Trên thế giới nghiên cứu ảnh hưởng của kích thích tố lên tuyến sinh dụccủa một số nhóm cá chình và lươn đồng cũng đã được tiến hành, ở cá chình Nhật

Bản (Anguilla japonica) khi tiêm SPH (salmon pituitary homogenate – hormon

tuyến yên của cá hồi) lipid của buồng trứng gia tăng ở giai đoạn giữa của thời kỳ

tạo noãn hoàng và giảm sau đó (Ozaki et al, 2008)

Theo Tang et al (1974) lươn đồng là loài lưỡng tính, nó chuyển đổi từ cái

chức phận, thông qua giai đoạn chuyển giới tính trở thành con đực chức phận.Các loại hormon sinh dục đực bao gồm methyltestosterone, testosterone và 11-ketotestesterone ở những liều khác nhau không dẫn đến việc chuyển đổi giới tính

ở con cái và không có dấu hiệu thay đổi của buồng trứng quan sát được sau khitiêm Bằng việc sử dụng cyanoketone, một loại chất ức chế (kháng) steroid vàkết hợp với methyltestosterone, cho thấy hormon sinh dục đực không gây ảnhhưởng đến sự chuyển đổi giới tính ngay cả sự vắng mặt của chất nội sinh sinhdục cái Do đó hormone sinh dục đực không ảnh hưởng kích thích sự phát triểncủa tế bào phôi ở con cái bởi vì steroid không đóng vai trò trong sự khởi độngchuyển đổi giới tính tự nhiên ngay cả ở các loài cá nguyên thủy

Cũng theo Tang (1974) sử dụng MLH (Mammalian Luteinizing hormone– hormon gây rụng trứng ở động vật có vú) ở liều 3µg/g để tiêm cho lươn đồngcái 1 lần/3 tuần hoặc 1,5 µg/g tiêm mỗi ngày, sau thời gian 7,5 – 8,5 tuần đềuảnh hưởng đến buồng trứng Điều này cho thấy rằng lươn đồng đã phản ứng rấtmãnh liệt với 3-β hydroysteroid dehydrogenase Khoảng 70% lươn đồng có tinhsào phát triển, não thùy điều khiển hoạt động tiết tinh dịch Kết quả chỉ ra rằng:MLH ảnh hưởng kích thích ở lươn đồng, đầu tiên là tế bào phôi ở con cái thayđổi trong sự phát triển của buồng trứng từ tế bào kẽ não thùy với hoạt động tiếttinh dịch, thứ hai là sự gia tăng của tế bào kẽ Leydig trong tuyến sinh dục Vìvậy, tuyến yên của lươn đồng có thể đóng một vai trò quan trọng trong sự khởiđầu mạnh mẽ của sự chuyển đổi giới tính

Theo Tao et al (1993) việc sử dụng sGnRHa (salmon Gonadotropin

Releasing hormone analog – hormon giải phóng kích thích tố cá hồi tổng hợp)đơn độc hoặc kết hợp với DOM (Domperidone – chất đối kháng) 1 lần/9 tuần đểkích thích sự chuyển giới tính con cái thành con đực ở lươn đồng Tuyến sinhdục của lươn đồng được chuyển giới tính có chức năng như một tuyến sinh dục

đực chứa tinh trùng và tinh tử DOM sử dụng liều đơn không kích thích chuyểngiới tính nhưng có khuynh hướng phát triển buồng trứng đồng đều Cũng nhưviệc xử lý bằng CPH (Carp pituitary homogenate – hormon tuyến yên cá chép)

đã không bắt đầu chuyển giới tính nhưng buồng trứng phát triển, tăng hàm lượnghuyết thanh và tăng hàm lượng 17- β Estradiol Những kết quả nghiên cứu tiênđoán rằng hệ thống não thùy tuyến yên có thể đóng vai trò phát tín hiệu bắt đầuchuyển giới tính ở lươn đồng và sGnRH là tác nhân chủ yếu trong quá trình này

Theo WaiSum et al (1974) lươn đồng tiêm TSH (Thyroid Stimulating

Hormon – hormon kích thích tuyến giáp) ở liều 1USP (unit of ovine TSH) đãkích thích nang tuyến giáp với nhiều mức độ đáp ứng, từ việc tăng cao tế bàobiểu mô trong tế bào đối với sự kích thích dẫn đến sự thoát vị (sự đứt, sự vỡ)nang thận Kết quả của thí nghiệm này là trong cùng một thời điểm có sự thoáihóa rõ rệt về kích cỡ của cả tế bào và nhân loại 5 tế bào ở tuyến yên Lươn đồngtiêm Thiourea (0,15% hòa tan) trong 20 ngày đã nhận thấy rằng tế bào biểu môtuyến yên được kích thích để gia tăng trong cả tế bào và nhân cùng với quá trìnhbiến mất của bạch cầu trong tế bào Ảnh hưởng của tuyến giáp trong nghiệmthức nồng độ hòa tan thyroxine 20 µg/lít, tế bào biểu mô tăng cao và loại 5 tếbào tuyến yên thoái hóa cùng với sự tích lũy của tế bào bạch cầu Tuyến yên chịu

sự chi phối bởi các hormon nhưng việc đáp ứng của loại 5 tế bào trong tuyến yênbiểu hiện chu kỳ mùa vụ mà có lẽ do sự thay đổi về trao đổi chất cũng như đây làkiểu biến đổi của các dạng lưỡng tính

Theo Yeung et al (1993) lươn đồng sau giai đoạn sinh sản, LH

(Luteinizing Hormon – hormon gây rụng trứng) gây ra sự chuyển đổi giới tínhmột cách rõ ràng Tuy nhiên, LH đã ảnh hưởng không đáng kể đến con cái trongsuốt giai đoạn tiền sinh sản Trong khi đó, suốt giai đoạn trước và sau khi đẻtrứng LHRHa (analog of Luteinizing Hormone Releasing Hormone) kích thích

sự phát triển của trứng thụ tinh với sự gia tăng của noãn hoàng Sự chuyển hóasteroid ở tuyến sinh dục của lươn cái trong giai đoạn tiền sinh sản thì không chịu

ảnh hưởng bởi LHRHa Ở giai đoạn sau khi đẻ trứng, LHRHa gây ra sự thay đổihormon steroid của lươn đồng.

Cũng theo nhóm tác giả Yeung et al (1993) lươn đồng sau khi sinh sản,

LH (Luteinizing Hormon – hormon gây rụng trứng) gây ra sự chuyển đổi giớitính trong tuyến sinh dục ở con đực, ở con cái có sự gia tăng hàm lượng hormonsinh dục đực trong huyết tương, testosterol (T), 11 - oxotestosterol (KT), 11- βhydroxytestosterol (OHT) Tuy nhiên, sự ảnh hưởng của LH lên lươn đồng cáikhông thấy rõ ở giai đoạn tiền sinh sản và không có những biểu hiện đáng kể về

sự chuyển đổi giới tính sớm được nhận thấy trong cấu trúc tuyến sinh dục hoặchormon trong huyết tương sau khi tiêm Ở lươn đồng cái tiêm LHRHa trong giaiđoạn trước và sau khi sinh sản cấu trúc của tuyến sinh dục vẫn là “con cái’’ Hàmlượng E2 trong huyết tương được gia tăng sau khi tiêm

Nhìn chung, những nghiên cứu của các tác giả trước đây đã cung cấpnhiều dữ liệu quan trọng về vai trò của kích dục tố lên lên sự phát triển của tuyếnsinh dục cũng như tác dụng kích thích sinh sản, là cơ sở tốt để tiến hành thựchiện nghiên cứu này

1.1.5 Các nghiên cứu về sản xuất giống

mẹ dài khoảng 40-60 cm, nặng 250-300 g/con (Nguyễn Chung, 2007)

Theo Nguyễn Chung (2007), thức ăn cho lươn phải tươi, không ương hư,nên duy trì thức ăn lươn đã quen, nên cho ăn trùng quế, trùng hổ Cứ 2-3 ngàyvào buổi chiều tạo kích thích nước bằng cách phun mưa, chất lượng nước phảiđảm bảo thích hợp cho sự sống tăng tưởng và sinh sản bình thường của lươn

Lươn sẽ bắt cặp và sinh sản sau 15-20 ngày, khi thấy tổ bọt ngã sang màu trắngngà ta bắt đầu vớt trứng ấp riêng.

1.1.5.2 Cơ sở khoa học của việc kích thích lươn đồng sinh sản bằng kích dục tố

Vấn đề sử dụng kích thích tố để kích thích sinh sản cá

Theo Nguyễn Văn kiểm (2004) có 4 nguyên tắc cần lưu ý khi sử dụngkích thích tố bao gồm:

- Đúng liều lượng, đúng chủng loại và theo thứ tự tác dụng của kích thích tố

- Sử dụng theo đúng giai đoạn phát triển của tuyến sinh dục

- Chia nhiều lần để tiêm với liều lượng thấp

- Nên kết hợp các loại kích thích tố với nhau

Nguyễn Tường Anh (1999) cho rằng, ngày nay người ta tránh dùng nãothuỳ ở liều quá cao, đặc biệt là liều tiêm khởi động Ở một chừng mực nhấtđịnh, việc tăng liều khi tiêm liều quyết định có tác dụng rút ngắn thời gian hiệuứng Nhưng liều tiêm não thuỳ quá cao vào cơ thể một lượng lớn hormon củatuyến yên, có thể dẫn đến rối loạn tình trạng sinh lí bình thường, gây chết cá mẹ

và làm giảm chất lượng trứng của chúng Trong trường hợp tiêm 2 lần, thuốctiêm lần đầu nhất thiết phải dùng tuyến yên hoặc hỗn hợp tuyến yên với hormonnhau thai, lượng tiêm lần đầu chiếm 10- 15% toàn bộ liều lượng (Chung Lân,1969) Dùng phương pháp tiêm 2 lần có thể xem lần tiêm thứ nhất để lựa chọn

cá bố mẹ thành thục Tuy nhiên, cũng có những loài cá phải tiêm đến 2- 4 lầnnhư cá tra và có loài chỉ cần tiêm một lần như cá rô đồng, cá sặc rằn, tiêm 1 lần

có thể giảm bớt khối lượng lao động và tỷ lệ thương vong của cá bố mẹ(Nguyễn Văn Kiểm, 2004) Đối với những loài cá được nuôi vỗ trong ao và sinhsản nhân tạo thì những liều tiêm nhỏ (liều sơ bộ) là đặc biệt quan trọng cho sự dichuyển của túi mầm ra biên tức là để chuyển cá sang tình trạng thành thục hoàntoàn (Nguyễn Tường Anh, 1999) Mục đích kết hợp nhiều loại kích thích tố là để

phát huy tác dụng cộng hưởng của kích thích tố đồng thời khắc phục sự khiếmkhuyết một tiểu phần nào đó của một trong những loại kích thích tố sử dụng kếthợp Tóm lại, trong sinh sản nhân tạo cá, tuỳ theo trường hợp cụ thể mà có sốlần tiêm kích dục tố khác nhau Nhưng biện pháp tiêm với liều lượng thấp phùhợp với từng giai đoạn thành thục cùa tế bào trứng được coi là nguyên tắc chungcủa kích thích sinh sản cá (Nguyễn Văn Kiểm, 2004).

Kích dục tố hCG và LHRHa và Suprefact

HCG có tên tiếng việt là kích dục tố màng đệm hay kích dục tố nhau thai,được Zondec và Aschheim phát hiện năm 1927 trong nước tiểu người phụ nữ cóthai hCG là loại kích dục tố dị chủng được dùng có hiệu quả cho nhiều loài cánhất gây rụng trứng (Nguyễn Tường Anh, 1999)

Các loài cá được sử dụng hCG trong sinh sản một cách hiệu quả ở nước tanhư: cá chày, cá vền, cá trôi, cá bóng, cá vàng, cá trê, các loài cá mè…, ngoài racòn được dùng tốt cho việc kích thích rụng trứng các loài cá trình, cá nheo mangtúi Ấn Độ, cá chạch… (Nguyễn Tường Anh, 1999)

Ngày nay, hormone gây tiêt kích dục tố GnRH được sử dụng ngày càngkhá phổ biến trong việc kích thích sinh sản cá Tùy vào nguôn gôc mà có tên gọikhác nhau, GnRH của động vật có vú còn được gọi là LHRH (LeutinisingHormone Releasing Hormone) (Nguyễn Văn Kiểm, 2008) Trong vài năm gầnđây, LHRH nhân tạo gọi là LH-RHa, được sử dụng hiệu quả hơn nhiều Vì chúngtinh khiêt hơn LHRH và được cá chuyển hóa chậm, do dó chất này duy trì đượctác dụng trong thời gian dài Trong điều kiện tự nhiên, có thể cá có một cơ chếphản ứng làm hạn chế việc giải phóng chât kích dục Cơ chế này sử dụng mộtchât hóa học có tên là Dopamin, chât này kiềm chế hoạt động của LH-RH Khi

cá có dopamin, thì cả LH-RHa cũng bị hạn chế Chât kháng dopamin thườngđược sử dụng để hạn chế tác dụng của dopamine Khi sử dụng kết hợp LH-RHa

và kháng dopamin, hiệu quả sinh sản tăng đột biến

Nghiên cứu của Đỗ Thị Thanh Hương và ctv (2008) cho thấy hệ số thành

thục và tỷ lệ thành thục của lươn đồng tăng lên theo thời gian nuôi vỗ Hai loạikích dục tố hCG và LH-RHa được sử dụng để kích thích lươn đồng sinh sản cóhiệu quả ở nhóm với liều hCG 2000 UI và LHRHa 150 µg/kg

Theo Nhan Trung Nghĩa (2010), lươn đồng thành thục ở giai đoạn 10tháng tuổi Hàm lượng Vitellines tăng nhanh chóng ở giai đoạn lươn đồng 9-10tháng tuổi từ 1,67 (μgALP/mg protein) lên 2,72 (μgALP/mg protein) Nguồnlươn bố mẹ không được nuôi vỗ thành thục tỉ lệ sinh sản cao nhất khi tiêmLHRHa (150 μg/kg thể trọng) là 50% Nguồn lươn bố mẹ nuôi vỗ thành thục 4tuần, tiêm hCG vào đầu mỗi tuần để kích thích thành thục, tỉ lệ sinh sản cao nhấtkhi tiêm hCG (liều sơ bộ 1.000UI/kg và 24 giờ sau tiêm kiều quyết định 2.000UI/Kg) là 83,3% và thời gian tái sinh sản của lươn đồng trung bình từ 10,6-13,9ngày, thấp nhất là 3 ngày

Vai trò của suprefact trong sinh sản nhân tạo

Suprefact có 2 dạng tiêm và xịt mũi đều có chứa các thành phần hoạt chấtbuserelin, là một loại thuốc được biết đến như là chất tương tự (LHRH)gonadorelin Nó hoạt động trên tuyến yên trong não Tuyến yên sản xuất và lưutrữ nhiều loại hormone, trong đó có hormone giới tính, Follicle hormone (LH) vàhormone kích thích nang trứng (FSH) Ở nam giới, LH từ tuyến yên làm cho tinhhoàn sản xuất testosterone FSH và testosterone gây ra sự sản xuất tinh trùngcủa tinh hoàn Số lượng LH và FSH từ tuyến yên được điều khiển bởi hormonekhác, được gọi là gonadorelin (LHRH) Gonadorelin hoạt động trên các thụ thểLHRH trong tuyến yên, gây ra việc sản sinh LH và FSH và vì thế sản xuấttestosterone ở nam giới Buserelin là một hình thức tổng hợp của gonadorelin(http://www.netdoctor.co.uk/medicines/1000043.html)

Ban đầu, buserelin gây ra một sự tăng FSH và LH từ tuyến yên, gia tăngsản xuất testosterone Tuy nhiên, buserelin gây tê tuyến yên Điều này có nghĩa

là nó sản xuất FSH ít hơn LH, dừng việc sản xuất testosterone ở nam giới.Testosterone giảm vì thế buserelin được sử dụng để điều trị ung thư tuyến tiền liệt.

Theo Đàm Bá Long (2008), Suprefact còn gọi là Buserelin: Công thứccủa Buserelin là C62H90N16O15 [D-Ser(t-Bu)6,Pro9 NEt] –mGnRH(Đức), thuộcnhóm kích thích tố lên tuyến yên, chung nhóm với GnRH-A, có thể kích thíchcho cá sinh sản

Buserelin là một hormone giải phóng gonadotropin (GnRH agonist) Bằngcách kích thích tuyến yên, giảm bài tiết của tuyến yên (LH) và hormone kíchthích nang trứng (FSH) và hỗ trợ sinh sản Acetate Buserelin được bán trên thịtrường do Sanofi-Aventis sản xuất theo thương hiệu Suprefact Buserelin cũng cóthương hiệu Metrelef (WWW.en.wikipedia.org/wiki/Buserelin)

Theo Arabaci (2004) sử dụng Buserelin ([D-Ser(tBu)6,pro9-Net]-GnRHa

trên cá hồi (Oncorhynchus mykiss), con cái thành thục được tiêm một lần với 25

μg/kg GnRHa trong nước muối sinh lý Tất cả các cá tiêm với liều 50 μg/kgGnRHa-FIA rụng trứng trong vòng 10 ngày sau khi tiêm, trong khi cá tiêm vớiliều 25 μg/kg GnRHa-FIA đạt 100% rụng trứng 13 ngày sau khi tiêm (nhiệt độnước 11,50C) Cả hai liều GnRHa-FIA hiệu quả trong việc thúc đẩy sinh sản, liênquan đến kiểm soát hay GnRHa nhóm tiêm GnRHa-FIA không ảnh hưởng đến

tế bào, đường kính trứng hoặc chất lượng trứng dựa trên tỷ lệ thụ tinh và tỷ lệ nở,tuy nhiên tỷ lệ tử vong của cá khi tiêm GnRHa-FIA ở liều thấp và liều cao là46% và 53%

Theo Barrier-Battut (2000) sử dụng Buserelin để gây rụng trứng cá ngựa cáitheo chu kỳ Buserelin đẩy nhanh quá trình rụng trứng Giảm liều một nửa khônglàm thay đổi hiệu quả Buserelin gây ra sự gia tăng nồng độ LH trong thời gian 48giờ của nồng độ thí nghiệm và LH trước khi rụng trứng cao hơn so với nước muốisinh lý Chứng minh buserelin có thể thay thế cho HCG để gây rụng trứng

Thí nghiệm trên 2.346 con ngựa tiêm liều đơn buserelin (20μg đến40μg/con) lên tỉ lệ mang thai của ngựa giữa 8 và 12 ngày tăng khoảng 10%

(Newcombe, J R., T A Matinez and A R Peter 2000) Còn Pycock (1996) khitiêm 40 μg buserelin/con trên 578 ngựa xác định tỉ lệ mang thai ở ngựa Trongthí nghiệm 1, buserelin tăng tốc độ mang thai ngày 14 và 15 (7,25 so với 66,6% ;p< 0,05) tại ngày 14 và 15 Buserelin tăng tỉ lệ mang thai sau khi sinh sản đầutiên và tăng tỉ lệ duy trì thai ở ngày 28-30

Theo Cao Thanh Tuyền (2013) cho lươn đồng sinh sản bằng Suprefact vớiliều 20 μg/kg + 5 mg DOM số lươn tham gia sinh sản là 75% còn ở liều 25 μg/kg+ 5 mg DOM thì số lươn tham gia sinh sản là 25% Nếu không cộng thêm DOM

ở hai liều trên thì lươn chỉ sinh sản 25% Trong thí nghiệm này liều 20 μg/kg + 5

mg DOM lươn tham gia sinh sản tốt hơn liều 25 μg/kg + 5 mg

1.2 Lý do chọn đề tài

Hiện nay, vùng Đồng bằng sông Cửu Long nói riêng và cả nước nói

chung phong trào nuôi lươn đồng (Monopterus albus) đang phát triển, nên nhu

cầu về con giống rất lớn, mà thực tế con giống tự nhiên không đáp ứng được yêucầu về số lượng cũng như chất lượng, con giống tự nhiên không đảm bảo chấtlượng như con giống mang mầm bệnh hoặc dùng mồi thuốc để đánh bắt làm tỉ lệsống con giống thấp hay đánh bắt bằng các ngư cụ cấm như xung điện làm congiống không đảm bảo và chậm lớn Số lượng và chất lượng con giống ngày càngsuy giảm làm cho việc phát triển nuôi lươn gặp khó khăn ở khâu cung cấp congiống

Các nghiên cứu sinh sản lươn đồng trước đây chỉ ở mức độ thăm dò vàđặt nền tảng cơ bản Việc nghiên cứu nhằm hoàn thiện quy trình sản xuất giốnghướng đến sản xuất giống đại trà nhằm đáp ứng nhu cầu người nuôi là một yêucầu cấp thiết Vì thế, nghiên cứu sinh sản nhân tạo lươn đồng bằng các loại kíchthích tố khác nhau nhằm tìm ra loại kích thích tố thích hợp có tác dụng kích thíchlươn đồng sinh sản là thật sự cần thiết, phục vụ thiết thực cho công tác nghiêncứu và thực tiễn sản xuất trên đối tượng có giá trị này nhằm tìm được loại kíchthích tố cho lươn đồng sinh sản tốt nên nghiên cứu “Kích thích lươn đồng

(Monopterus albus) sinh sản bằng các loại kích dục tố HCG, LH-Rha,

Suprefact.” được thực hiện

1.3 Mục tiêu nghiên cứu

- Nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại kích dục tố khác nhau như hCG,

LH-Rha, Suprefact (Buserelin) lên sự sinh sản lươn đồng (Monopterus albus)

nhằm hoàn thiện quy trình sản xuất tiến đến sản xuất giống đại trà và cung cấpnguồn giống nhân tạo có chất lượng tốt cho nhu cầu người nuôi, khắc phục tìnhtrạng con giống đang khan hiếm và kém chất lượng

1.4 Nội dung nghiên cứu

- Xác định kích dục tố tốt cho lươn đồng sinh sản

- Xác định một số chỉ tiêu sinh sản lươn đồng

1.5 Phương pháp nghiên cứu

1.5.1 Thời gian và địa điểm thực hiện

Nghiên cứu được tiến hành từ tháng 04/2011 đến tháng 12/2011 tại KhoaThủy Sản Trường Đại học Cần Thơ

- Máy đo oxy, pH

- Máy so màu quang phổ

- Cân điện tử

- Dây nilon

- Các loại kích dục tố hCG, LH-Rha, Suprefect, DOM.

Trong đó:

v : thể tích hCG cần tiêm (ml)

m : khối lượng của lươn đồng (g)

d : độ pha loãng của kích thích tố

c: liều lượng hCG cần tiêm cho 1kg

107:1000 (1 Kg =1000g) x 10.000 (10.000 UI)

- LH-RHa (lọ 200 µg) được sử dụng trong thí nghiệm có nguồn gốc củaTrung Quốc, cách tiêm và tính liều tiêm như sau: pha thuốc với nước muối sinh

lý với lượng vừa đủ để lượng nước không vào cơ thể quá 6%

- Suprefact được sử dụng trong thí nghiệm có nguồn gốc của Thái Lan.Cách tiêm và tính liều tiêm như sau: pha với nước muối sinh lý và tiêm vào cơcủa lươn như LH-RHa

d x c

V HCG = m

107

1.5.5 Nguồn nước thí nghiệm

Nguồn nước thí nghiệm là nước máy của thành phố Cần Thơ

Lươn đồng được nuôi vỗ trong bể 500 lít, chứa 200 lít nước, gồm 4 bể, mỗi

bể 30 con (tương đương mật độ 38 con/m2), kích cỡ trung bình 30 - 40g/con Sửdụng giá thể là dây nylon cho lươn trú ẩn, cấp thêm nước qua hệ thống phun mưa(mỗi ngày phun mưa khoảng 1h từ 16h-17h, thay nước định kỳ 1 lần/tuần, tỷ lệ thaynước 80%) Thức ăn cho lươn ăn là thức ăn tươi sống (tép) khoảng 2-3% khốilượng thân

Hằng ngày rút cặn và cho ăn 1 lần/ngày vào buổi chiều (17h) Thời giannuôi vỗ 3 tháng

Sau thời gian nuôi vỗ tiến hành kiểm tra đánh giá mức độ thành thục củalươn đồng và chọn lựa giới tính (đực, cái) để tiến hành tiêm kích thích tố và bốtrí sinh sản trong bể đất

* Bố trí thí nghiệm

Thí nghiệm gồm 4 nghiệm thức với 6 lần lặp lại và được bố trí theophương pháp hoàn toàn ngẫu nhiên

Nghiệm thức 1 (NT1): Tiêm hCG với liều lượng 2.000 UI/kg

Nghiệm thức 2 (NT2): Tiêm LH-RHa với liều lượng 150 µg/kg + 5 mg

DOM/kg

Nghiệm thức 3 (NT3): Suprefact 20 µg/kg + 5 mg DOM/kg

Nghiệm thức 4 (đối chứng): Tiêm nước muối sinh lý với liều lượng được

tính toán như tiêm kích dục tố

Hình 1.2 Bể thí nghiệm

Lươn đồng cho sinh sản được lấy từ nguồn lươn được nuôi vỗ thành thụctrong hệ thống bể nhựa Sau thời gian nuôi vỗ tiến hành tiêm kích thích tố và bốtrí sinh sản trong bể đất

Chuẩn bị bể cho sinh sản: vệ sinh bể sạch sẽ đắp mô đất cao khoảng 20 cm,cấp nước vào khoảng 15 cm, bố trí mỗi bể 1 sàn ăn, lắp sục khí và hệ thốngphun mưa

Tách lươn bố mẹ thành từng cặp rồi tiêm thuốc Con cái tiêm 2 liều : liềudẫn bằng 10% tổng liều, 24h sau tiêm liều quyết định 90% tổng liều Con đựctiêm 1 liều bằng ½ tổng liều của con cái, tiêm cùng lúc với liều quyết định củacon cái

Sau khi tiêm kích dục tố xong bố trí từng cặp lươn bố mẹ (ngẫu nhiên)vào bể composite đã được chuẩn bị trước Mỗi ngày kích thích sinh sản bằngcách phun mưa 7h-9h và 15h-17h, cho ăn tép rong 1 lần vào lúc 17h, cho ăntheo nhu cầu

1.5.8 Các chỉ tiêu theo dõi

1.5.8.1 Các yếu tố môi trường

Các yếu tố môi trường được theo dõi thông qua các chỉ tiêu:

- Nhiệt độ: Đo bằng nhiệt kế 2 lần/ngày (sáng lúc 8 giờ và chiều lúc 14

giờ)

- pH: Đo bằng máy 1 lần/tuần (sáng lúc 8 giờ và chiều lúc 14 giờ)

- Oxy: Đo bằng máy 556 YSI (USA) 1 lần/tuần (sáng lúc 8 giờ và chiều

lúc 14 giờ)

- TAN: Xác định bằng phương pháp Indophenolblue.

- NO 2: Xác định bằng phương pháp Gress hossway

Các chỉ tiêu TAN, NO2 được thu 1lần/tuần

1.5.8.2 Xác định các chỉ tiêu sinh học sinh sản:

- Phương pháp thu mẫu:

Quan sát các tổ trứng và thu trứng Các bước tiến hành gồm:

+ Đếm số lượng trứng lươn thu được trong mỗi tổ lươn sinh sản

+ Cân khối lượng và đo chiều dài của lươn bố mẹ

+ Mô tả đặc điểm hình dạng bên ngoài của của lươn đồng cái và lươnđồng đực sau khi sinh sản

+ Mô tả buồng trứng sau khi sinh sản

+ Tính tỉ lệ sinh sản: tỉ lệ sinh sản được tính như sau:

Số lươn sinh sản

Tỉ lệ sinh sản (%) = x 100

Số lươn tham gia sinh sản

+ Tính tỉ thụ tinh: tỉ lệ thụ tinh được tính như sau:

Số trứng thụ tinh

Tỷ lệ thụ tinh (%) = x 100

Số trứng thu

+ Tính tỉ lệ nở: tỉ lệ nở được tính như sau:

Sức sinh sản thực tế (trứng/kg lươn cái) = x 1000

Khối lượng lươn cái tham gia sinh sản (g)

+ Đặc điểm của lươn đồng sau khi sinh sản

Lươn bố trí cho sinh sản trong thời gian 73 ngày Sau đó bắt lươn cáicủa các bể đã sinh sản giải phẫu để xác định giai đoạn của buồng trứng

1.5.9 Phương pháp xử lý số liệu

Các số liệu được thu thập, kiểm tra và tính toán bằng phần mềmMicrosoft Excell, phần mềm thống kê Statistica với kiểm định Anova 1 nhân tốDucan và thống kê mức ý nghĩa α = 0.05

1.6 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu

Trong phạm vi nghiên cứu của đề tài, lươn đồng là đối tượng nghiên cứuchính Nghiên cứu được thực hiện tại Bộ môn dinh dưỡng và chế biến thức ănthuộc Khoa Thủy Sản Trường Đại học Cần Thơ