Nghiên cứu điều chế phức hợp meloxicam  cyclodextrin

Meloxicam là thuốc kháng viêm nonsteroid thuộc họ oxicam, ức chế COX2 ưu thế hơn COX1, có hoạt tính chống viêm khớp mạnh nhưng ít gây kích ứng dạ dày. Tuy nhiên, độ tan trong nước kém của meloxicam làm cho sinh khả dụng của thuốc thấp. Kỹ thuật tạo phức hợp giữa meloxicam với betacyclodextrin cho phép tăng độ tan của meloxicam trong nước và từng phân tử meloxicam được phóng thích vào niêm mạc dạ dàyruột, thay vì ở dạng tinh thể kém tan. Mặt khác, cyclodextrin làm tăng tính thấm của các thuốc bằng cách làm cho thuốc hiện diện tại bề mặt của các hàng rào sinh học, từ đó thuốc đi vào trong màng mà không gây phá vỡ các lớp lipid màng. Vên nén chứa meloxicam đã được sản xuất trong nước nhưng chưa có biệt dược nào chứa phức hợp meloxicamcyclodextrin. Đề tài này nghieân cöùu áp dụng phöông phaùp nghiền ướt để taïo phöùc hôïp meloxicamcyclodextrin, töø ñoù tạo nguyên liệu để điều chế vieân meloxicam coù sinh khaû duïng cao, giaù thaønh reû phuø hôïp vôùi ñieàu kieän nghieân cöùu trong nöôùc. 2. NGUYEÂN LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP 2.1. Nguyeân lieäu Meloxicam (Trung Quoác) ñaït tieâu chuaån BP 2003 vaø  cyclodextrin (Phaùp) ñaït tieâu chuaån Ph. Eur 2002. Caùc hoùa chaát vaø dung moâi söû duïng ñeàu ñaït chuaån daønh cho phaân tích. 2.2. Phương pháp 2.2.1. Định lượng meloxicam trong phức hợp Định lượng meloxicam (ME) trong phức hợp meloxicam βcyclodextrin (ME – β CD) theo phương pháp đo quang phổ UV ở bước sóng 362 nm. Phương pháp định lượng được thẩm định về độ tuyến tính, về độ chính xác và độ đúng. 2.2.2. Điều chế phức hợp MEβCD ở quy mô labo Nghiên cứu tạo phức theo các tỉ lệ mol của ME và βCD lần lượt là 1:1, 1:1,5, 1:2 ở quy mô labo 100 gammẻ theo 2 phương pháp phương pháp trộn đơn thuần và phương pháp nghiền ướt. Tiếp tục khảo sát các yếu tố khác như loại và lượng dung môi, thời gian trộn. 2.2.3. Đánh giá sự hình thành phưc hợp Phaân tích nhieät vi sai (DSC) : Döïa treân söï thay ñoåi nhieät ñoä noùng chaûy vaø cöôøng ñoä của caùc ñænh noäi nhieät, möùc ñoä tạo phức hợp ñöôïc xaùc ñònh. Phaân tích phoå hoàng ngoaïi: Phaân tích vaø ñaùnh giaù söï thay ñoåi cuûa caùc ñænh ñaëc hieäu cuûa ME nguyeân lieäu so vôùi caùc ñænh cuûa ME chöùa trong phöùc. Xaùc ñònh ñoä tan: Độ tan cuûa ME nguyeân lieäu vaø cuûa ME trong caùc phöùc được xác định ôû moâi tröôøng ñeäm pH 7.4 baèng phöông phaùp ño quang phoå UV taïi böôùc soùng 362 nm. Xác định độ hòa tan: Độ hòa tan của ME nguyên liệu và ME trong các phức được tiến hành trong các điều kiện sau: máy thử độ hòa tan kiểu cánh khuấy, môi trường 900 mL dung dịch đệm phosphat pH 7,4, tốc độ cánh khuấy 50 vòngphút, nhiệt độ: 37 ± 0,5 oC.

Nghiên cứu điều chế phức hợp meloxicam-β-cyclodextrin Nguyễn Thị Thùy Linh, Huỳnh Văn Hóa Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp HCM TÓM TẮT Meloxicam thuốc kháng viêm non-steroid có hoạt tính chống viêm khớp mạnh gây kích ứng dày Tuy nhiên, độ tan nước meloxicam làm cho sinh khả dụng thuốc thấp Kỹ thuật tạo phức hợp meloxicam với beta-cyclodextrin cho phép cải thiện độ tan meloxicam nước Đề tài nghiên cứu áp dụng phương pháp nghiền ướt để tạo phức hợp meloxicam-β-cyclodextrin, từ tạo ngun liệu để điều chế viên meloxicam có sinh khả dụng cao Độ hòa tan ME phức cao điều chế phức với tỉ lệ mol ME β-CD 1:2, dịch làm ẩm nước dung môi B với lượng 40 % so với nguyên liệu rắn, thời gian trộn ướt 30 phút Sự tạo thành phức hợp chứng minh phân tích nhiệt vi sai phân tích phổ hồng ngọai Phức hợp ME-β-CD điều chế máy trộn Erweka LK5 cỡ lơ kg có độ hòa tan không khác với phức điều chế chày cối SUMMARY Nghiên cứu điều chế phức hợp meloxicam-β-cyclodextrin Nguyễn Thị Thùy Linh, Huỳnh Văn Hóa Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp HCM MỞ ĐẦU Meloxicam thuốc kháng viêm non-steroid thuộc họ oxicam, ức chế COX-2 ưu COX-1, có hoạt tính chống viêm khớp mạnh gây kích ứng dày Tuy nhiên, độ tan nước meloxicam làm cho sinh khả dụng thuốc thấp Kỹ thuật tạo phức hợp meloxicam với beta-cyclodextrin cho phép tăng độ tan meloxicam nước phân tử meloxicam phóng thích vào niêm mạc dày-ruột, thay dạng tinh thể tan Mặt khác, β-cyclodextrin làm tăng tính thấm thuốc cách làm cho thuốc diện bề mặt hàng rào sinh học, từ thuốc vào màng mà khơng gây phá vỡ lớp lipid màng Vên nén chứa meloxicam sản xuất nước chưa có biệt dược chứa phức hợp meloxicam-β-cyclodextrin Đề tài nghiên cứu áp dụng phương pháp nghiền ướt để tạo phức hợp meloxicam-β-cyclodextrin, từ tạo ngun liệu để điều chế viên meloxicam có sinh khả dụng cao, giá thành rẻ phù hợp với điều kiện nghiên cứu nước NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Nguyên liệu Meloxicam (Trung Quốc) đạt tiêu chuẩn BP 2003 β- cyclodextrin (Pháp) đạt tiêu chuẩn Ph Eur 2002 Các hóa chất dung môi sử dụng đạt chuẩn dành cho phân tích 2.2 Phương pháp 2.2.1 Định lượng meloxicam phức hợp Định lượng meloxicam (ME) phức hợp meloxicam - β-cyclodextrin (ME – β -CD) theo phương pháp đo quang phổ UV bước sóng 362 nm Phương pháp định lượng thẩm định độ tuyến tính, độ xác độ 2.2.2 Điều chế phức hợp ME-β-CD quy mô labo Nghiên cứu tạo phức theo tỉ lệ mol ME β-CD 1:1, 1:1,5, 1:2 quy mô labo 100 gam/mẻ theo phương pháp phương pháp trộn đơn phương pháp nghiền ướt Tiếp tục khảo sát yếu tố khác loại lượng dung môi, thời gian trộn 2.2.3 Đánh giá hình thành phưc hợp Phân tích nhiệt vi sai (DSC) : Dựa thay đổi nhiệt độ nóng chảy cường độ đỉnh nội nhiệt, mức độ tạo phức hợp xác đònh Phân tích phổ hồng ngoại: Phân tích đánh giá thay đổi đỉnh đặc hiệu ME nguyên liệu so với đỉnh ME chứa phức Xác đònh độ tan: Độ tan ME nguyên liệu ME phức xác định môi trường đệm pH 7.4 phương pháp đo quang phổ UV bước sóng 362 nm Xác định độ hòa tan: Độ hòa tan ME nguyên liệu ME phức tiến hành điều kiện sau: máy thử độ hòa tan kiểu cánh khuấy, môi trường 900 mL dung dịch đệm phosphat pH 7,4, tốc độ cánh khuấy 50 vòng/phút, nhiệt độ: 37 ± 0,5 oC KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Đánh giá hình thành phức hợp Phân tích nhiệt vi sai Kết phân tích nhiệt vi sai ME nguyên liệu, β-CD phức ME-β-CD điều chế phương pháp nghiền ướt trình bày Hình 3.1 Nhiệt đồ ME tinh khiết cho thấy đỉnh nội nhiệt đặc trưng 264,63 0C Phổ phân tích nhiệt vi sai β-CD không thấy xuất đỉnh nội nhiệt vùng điểm chảy ME, nước kết tinh β-CD quan sát thấy nhiệt độ thấp 116,21 0C Nhiệt đồ phân tích nhiệt vi sai phức ME-β-CD phương pháp nghiền ướt cho thấy có dạng tương tự nhiệt đồ β-CD có tồn đỉnh nội nhiệt ME đỉnh nhỏ giảm mạnh cường độ đồng thời dịch chuyển từ nhiệt độ 264,63 0C xuống 257,06 0C Kết chứng tỏ có tương tác ME β-CD, phân tử ME chui vào khoang β-CD hình thành phức ME-βCD Hình 3.1 Nhiệt đồ phân tích nhiệt vi sai ME, β-CD phức ME-β-CD điều chế phương pháp nghiền ướt Phân tích phổ hồng ngọai(IR) Kết phân tích phổ IR mẫu ME nguyên liệu, β-CD phức ME-β-CD điều chế phương pháp nghiền ướt trình bày Hình 3.2 Phổ IR ME cho thấy diện: dao động co dãn amid bậc (– NH) 3122,8 cm-1 (ME tồn dạng đa hình chuyển đổi qua lại), đỉnh 1655,85 cm -1 tương ứng với nhóm chức carbonyl amid (-CONH-) phân tử Phổ hồng ngoại β-CD cho thấy dải băng hấp thu 3218,17 cm -1 đặc trưng cho liên kết – OH mà đỉnh nhọn β-CD có nhiều nhóm – OH phân tử ME-β-CD β-CD Meloxicam Hình 3.2 Phổ IR ME, β-CD phức ME-β-CD điều chế phương pháp nghiền ướt Phổ hồng ngoại phức ME-β-CD cho thấy có thay đổi khác so với phổ ME nguyên liệu β-CD: dao động co dãn amid bậc (– NH) 3122,80 cm -1 ME biến mất, điều xảy đồng thời dải băng – NH với dải băng – OH có cường độ mạnh 3221,46 cm-1 Đồng thời, có dịch chuyển nhẹ – OH từ 3218,17 cm-1 β-CD xuống 3221,46 cm-1 phức hợp tương tác ME với nhóm hydroxyl β-CD để hình thành liên kết hydrogen Hơn nữa, số đỉnh ME biến (1537 cm -1) xuất cường độ đỉnh (1545,13 cm -1) bị che khuất (1116,56 cm-1, 995,60 cm-1, 887,06 cm-1) đỉnh β-CD (1098,34 cm , 981,05 cm-1, 893,53 cm-1) Tất thay đổi chứng tỏ có tương tác ME với nhóm hydrogen β-CD Như vậy, kết phân tích phổ hồng ngoại góp phần khẳng định: có hình thành phức hợp ME-β-CD Độ tan Kết khảo sát độ tan ME nguyên liệu ME phức môi trường đệm phosphat pH 7,4 25 oC trình bày Bảng 3.1 Bảng 3.1 Độ tan ME nguyên liệu ME phức ME-β-CD Độ tan (mg/mL) ± RSD (%) n =3 Hiệu gia tăng độ tan (lần) ME nguyên liệu 0,58 ± 0,63 ME-β-CD trộn khô 1,60 ± 0,64 2,74 ME-β-CD nghiền ướt 1,71 ± 0,23 2,93 Kết cho thấy độ tan ME phức nghiền ướt cao ME nguyên liệu 2,93 lần độ tan ME phức trộn khô cao ME nguyên liệu 2,74 lần, độ tan phức nghiền ướt trộn khô khác có ý nghĩa (p = 0,0026 < 0,05) Độ hòa tan Kết khảo sát độ hòa tan ME nguyên liệu ME phức ME-β-CD phương pháp trộn đơn (PM) nghiền ướt (KS) với tỉ lệ mol ME β-CD 1:1, 1:1,5, 1:2 trình bày Bảng 3.2 đồ thị biểu diển độ hòa tan theo thời gian trình bày Hình 3.3 Bảng 3.2 Độ hòa tan ME nguyên liệu ME phức ME-β-CD Phức Phần trăm ME hòa tan (%) ME-β-CD 0’ 10’ 20’ 30’ 40’ 60’ ME 10,17 30,49 47,97 61,21 76,92 PM 1:1 18,99 38,74 52,78 63,28 75,79 PM 1:1,5 21,75 39,53 53,59 63,31 76,51 PM 1:2 21,90 42,69 56,15 66,25 78,48 KS 1:1 34,89 60,78 75,94 84,17 91,17 KS 1:1,5 40,33 68,67 82,16 87,35 92,38 KS 1:2 53,52 71,92 84,61 90,62 95,48 Kết cho thấy có khác độ hòa tan ME nguyên liệu phức ME-β-CD (p = 7,85E-14 < 0,05) Độ hòa tan phức cao độ hòa tan ME nguyên liệu Trong 10 phút đầu tiên, độ hòa tan ME cải thiện gấp lần ME trộn đơn giản với β-CD, tăng lên 3, 4, lần ME tạo phức phương pháp nghiền ướt với β-CD tỉ lệ 1:1, 1:1,5 1:2 Độ hòa tan cao thu ME tạo phức với β-CD phương pháp nghiền ướt tỉ lệ mol 1:2 Do đó, phương pháp nghiền ướt với tỉ lệ mol ME β-CD 1:2 chọn để tiếp tục khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình tạo phức Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan ME nguyên liệu ME phức ME-β-CD Ảnh hưởng lọai dung môi Các phức hợp nghiền ướt tỉ lệ 1:2 điều chế với dung môi khác nhau: nước, hỗn hợp nước dung môi A, hỗn hợp nước dung môi B, cố định lượng dung mơi thời gian điều chế Kết thử độ hòa tan trình bày Bảng 3.3, thể chất phức sau điều chế thời gian sấy trình bày Bảng 3.4 Bảng 3.3 Độ hòa tan ME phức nghiền ướt tỉ lệ 1:2 với dung mơi khác Dung mơi ME hòa tan (%) 0’ 10’ 20’ 30’ 40’ 60’ Nước 53,52 72,21 81,07 88,07 93,26 Nước + dung môi A 53,70 72,15 80,23 87,52 93,06 Nước + dung môi B 53,52 71,92 84,61 90,62 95,48 Bảng 3.4 Thể chất sau điều chế thời gian sấy 45 oC phức nghiền ướt tỉ lệ 1:2 Dung môi Nước Nước + dung môi A Nước + dung môi B Thể chất Thời gian sấy Nhão, ướt, xát hạt ngay, 17 – 18 phải xử lý nhiệt tiếp Có thể xát hạt sau điều chế, – khơng phải xử lý nhiệt Có thể xát hạt sau điều chế, – xử lý nhiệt Kết cho thấy độ hòa tan phức nghiền ướt tỉ lệ 1:2 điều chế dung môi khác khơng có ý nghĩa (p = 0,057 > 0,05) Tuy nhiên phức điều chế hỗn hợp nước dung mơi B xát hạt thời gian sấy ngắn Do đó, hỗn hợp dung mơi chọn để điều chế phức hợp cho trình nghiên cứu Ảnh hưởng thời gian điều chế Các phức hợp nghiền ướt tỉ lệ 1:2 điều chế mức thời gian khác nhau: 15, 30, 45 phút, cố định lượng dung môi loại dung môi hỗn hợp nước dung môi B Kết thử độ hòa tan trình bày Bảng 3.5 Hình 3.6 Bảng 3.5 Độ hòa tan ME phức nghiền ướt tỉ lệ 1:2 với thời gian điều chế khác Thời gian điều chế ME hòa tan (%) 0’ 10’ 20’ 30’ 40’ 60’ 15 phút 44,57 69,62 80,81 86,82 92,16 30 phút 61,45 79,69 87,39 92,07 95,79 45 phút 53,52 71,92 84,61 90,62 95,48 Kết cho thấy: phức điều chế 15 30 phút khác có ý nghĩa (p = 0,031 < 0,05), phức điều chế 30 45 phút khác khơng có ý nghĩa (p = 0,07 < 0,05) Vì vậy, thời gian điều chế chọn 30 phút để điều chế phức cho trình nghiên cứu Ảnh hưởng lượng dung môi Các phức nghiền ướt tỉ lệ 1:2 với thời gian 30 phút điều chế mức dung môi 40, 50 60 % so với lượng nguyên liệu rắn Kết thử độ hòa tan trình bày Bảng 3.6 Bảng 3.6 Độ hòa tan ME phức nghiền ướt tỉ lệ 1:2 với lượng dung môi điều chế khác Lượng dung môi Phần trăm ME hòa tan (%) 0’ 10’ 20’ 30’ 40’ 60’ 40 % 50 % 60 % 0 92,75 87,39 87,88 95,33 92,07 92,67 98,82 95,79 96,51 65,34 61,45 62,42 80,37 79,69 79,54 Kết cho thấy độ hòa tan phức điều chế mức dung môi 40, 50 60 % so với lượng nguyên liệu rắn khác có ý nghĩa thống kê (p = 0,034 < 0,05) Phức điều chế với lượng dung mơi 40 % thể độ hòa tan trội so với hai phức lại Nâng cấp quy mơ điều chế phức Độ hòa tan phức ME-β-CD cỡ lô kg điều chế máy trộn Erweka LK5 so sánh với phức điều chế chày cối Kết trình bày Bảng 3.7 Hình 3.4 Kết cho thấy độ hòa tan lơ phức ME-β-CD điều chế thiết bị (cỡ lô kg/lô) khác khơng có ý nghĩa (p = 0,069 > 0,05) Độ hòa tan trung bình lơ phức điều chế thiết bị phức điều chế chày cối khác khơng có ý nghĩa (p = 0,057 > 0,05) Bảng 3.6 Độ hòa tan ME phức ME-β-CD điều chế thiết bị phức điều chế chày cối Phức ME-β-CD ME hòa tan (%) 0’ 10’ 20’ 30’ 40’ 60’ Lô 70,19 86,25 94,12 96,73 99,83 Lô 67,68 86,52 94,98 97,46 99,57 Lô 67,75 84,85 93,21 96,72 98,58 Trung bình 68,54 85,87 94,10 96,97 99,33 Mẻ 100 g 65,34 80,37 92,75 95,33 98,82 ME nguyên liệu 10,17 30,49 47,97 61,21 76,92 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan ME phức ME-β-CD điều chế thiết bị phức điều chế chày cối KẾT LUẬN Độ hòa tan ME phức cao điều chế phức phương pháp nghiền ướt, tỉ lệ mol ME β-CD 1:2, dịch làm ẩm nước dung môi B với lượng 40 % so với nguyên liệu rắn, thời gian trộn ướt 30 phút Sự tạo thành phức hợp chứng minh phân tích nhiệt vi sai phân tích phổ hồng ngọai Phức hợp ME-β-CD điều chế máy trộn Erweka LK5 cỡ lơ kg có độ hòa tan khơng khác với phức điều chế chày cối TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 14 15 Abdoh A A., El-barghouthi M L., Zughul M B., Davies J E., Badwan A A (2007), “Changes in the conformational structure, microscopic and macroscopic pK as of meloxicam on complexation with natural and modified cyclodextrins”, Pharmazie, vol 62, no1, pp 55-59 Banerjee Rona, Chakraborty Hirak, Sarkar Munna (2004), “Host–Guest Complexation of Oxicam NSAIDs with β-Cyclodextrin”, Biopolymers, Vol 75, pp 355–365 Brewster Marcus E., Loftsson Thorsteinn (2007), “Cyclodextrins as pharmaceutical solubilizers”, Advanced Drug Delivery Reviews, 59, pp 645–666 Challa R., Ahuja A., Ali J., Khar R.K (2005), “Cyclodextrins in drug delivery: an update review”, AAPS PharmSciTech , (2) Article 43, pp 329-357 Chinese Pharmacopoeia (2005), “Meloxicam”, Vol II, pp 507 – 508; “Betacyclodextrin”, Vol II, pp 912 – 913 European Pharmacopoeia (2002), Vol I, pp 723-725 Klein Sandra (2007), “Design and calibration of a dissolution test equipment”, “Selection of a dissolution test medium”, International regulatory workshop on bioequivalence and dissolution, Ho Chi Minh city Loftsson T., Brewster M.E., Masson M (2004), “Role of Cyclodextrins in Improving Oral Drug Delivery”, Am J Drug Deliv, (4), pp 261-275 Loftsson Thorsteinn, Duchêne Dominique (2007), “Cyclodextrins and their pharmaceutical applications”, International Journal of Pharmaceutics, 329, pp 1–11 Naidu Buchi N., Chowdary K.P.R., Murthy K.V.R., Satyanarayana V., Hayman A.R., Becket G (2004), “Physicochemical characterization and dissolution properties of meloxicam– cyclodextrin binary systems”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 35, pp 75– 86 Nemutlu Emirhan, Kir Sedef (2004), “Validated Determination of Meloxicam in Tablets by Using UV Spectrophotometry”, Hacettepe University, Journal of Faculty of Pharmacy, Volume 24, Number 1, pp 13-24 Rawat S., Jain S K (2007), “Enhancement of intestinal adsorption of few COX-2 inhibitors through interaction with β-cyclodextrin”, Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, pp 529-534 Shimpi Shyam, Chauhan Bhaskar, Shimpi Prajakta (2005), “Cyclodextrins: application in different routes of drug administration”, Acta Pharm., 55, pp 139-156 Stella Valentino J., Rao Venkatramana M., Zannou Erika A., Zia Vahid (2004), “Mechanisms of drug release from cyclodextrin complexes”, Advanced Drug Delivery Reviews, 36, pp 3–16 United States Pharmacopeia 30 (USP) (2007), U.S Pharmacopeial Convention, Inc Rockville, MD, CD-ROM Nghiên cứu điều chế viên nén chứa phức hợp meloxicam-β-cyclodextrin Nguyễn Thị Thùy Linh, Huỳnh Văn Hóa Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp HCM TĨM TẮT Meloxicam thuốc kháng viêm non-steroid có hoạt tính chống viêm khớp mạnh gây kích ứng dày.Tuy nhiên, độ tan nước làm cho sinh khả dụng thuốc thấp Việc tạo phức hợp meloxicam (ME) với β- cyclodextrin (β-CD) giúp cải thiện độ tan ME nước, cho phép phân tử họat chất phóng thích vào niêm mạc dày-ruột thay dạng tinh thể tan, nhờ giúp xuất sớm nồng độ thuốc huyết tương Đề tài nghiên cứu xây dựng công thức tối ưu để điều chế viên nén meloxicam 7,5 mg có độ hòa tan cao từ phức hợp ME-β-CD Độ hòa tan viên nghiên cứu tương đương với độ hòa tan phức ME-β-CD nguyên liệu So sánh với biệt dược ưa chuộng viên Mobic 7,5 mg cho thấy viên nén nghiên cứu có độ hòa tan cao SUMMARY Nghiên cứu điều chế viên nén chứa phức hợp meloxicam-β-cyclodextrin Nguyễn Thị Thùy Linh, Huyønh Văn Hóa Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp HCM MỞ ĐẦU 10 Meloxicam thuốc kháng viêm non-steroid công nhận ức chế COX-2 ưu COX-1 có hoạt tính chống viêm khớp mạnh gây kích ứng dày.Tuy nhiên, độ tan nước làm cho sinh khả dụng thuốc thấp Việc tạo phức hợp meloxicam (ME) với β-cyclodextrin (β-CD) giúp cải thiện độ tan ME nước, cho phép phân tử ME phóng thích vào niêm mạc dày-ruột thay dạng tinh thể tan, nhờ giúp xuất sớm nồng độ thuốc huyết tương Dạng viên nén chứa ME sản xuất nước chưa có biệt dược chứa phức hợp ME-β- CD Đề tài nghiên cứu điều chế viên nén meloxicam 7,5 mg có độ hòa tan cao từ phức hợp ME -β-CD nghiên cứu NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Nguyên liệu Meloxicam (Trung Quốc) đạt tiêu chuẩn BP 2003 β-cyclodextrin (Pháp) đạt tiêu chuẩn Ph Eur 2002 Các hóa chất dung mơi đạt tiêu chuẩn dành cho phân tích 2.2 Phương pháp 2.2.1 Điều chế viên nén meloxicam 7,5 mg từ phức hợp ME-β-CD Cơng thức: Cơng thức thăm dò viên nén ME-β-CD viên 1000 viên trình bày Bảng 2.1 Bảng 2.1 Thành phần công thức viên nén ME-β-CD Thành phần Công thức viên (mg) Phức ME-β-CD chứa 7,5 mg ME Tá dược D hay polyplasdone XL Primojel Talc hay aerosil Magnesi stearat Flow lac vđ ≈ 65 2,7 – 9,0 3,6 – 10,8 3,6 3,6 180 Công thức viên(g) ≈ 65 2,7 – 9,0 3,6 – 10,8 3,6 3,6 180 1000 Phương pháp điều chế Viên nén ME-β-CD điều chế phương pháp dập thẳng Dập viên với khối lượng 180 mg, kích thước 3,7 x mm Thiết kế mơ hình cơng thức: Sử dụng phần mềm Design Expert 7.1(Stat-Ease Inc., USA) Tối ưu hóa cơng thức : Sử dụng phần mềm INForm v3.6 (Intelligensys Ltd., UK) 2.2.2 Kiểm nghiệm Kiểm nghiệm độ cứng, độ mài mòn, độ đồng khối lượng (Theo DĐVN III, phụ lục 1), độ phân tán khối lượng viên (CV %) Định lượng ME viên nén theo phương pháp đo quang phổ UV bước sóng 362 nm Phương pháp định lượng thẩm định độ tuyến tính, độ xác độ Thử độ hòa tan: Độ hòa tan ME viên nén tiến hành điều kiện sau: máy thử độ hòa tan kiểu cánh khuấy, mơi trường 900 mL dung dịch đệm phosphat pH 7,4, tốc độ cánh khuấy 50 vòng/phút, nhiệt độ: 37 ± 0,5 oC 2.2.3 So sánh độ hòa tan với thuốc đối chiếu 11 Độ hòa tan ME viên nén ME-β-CD tối ưu so sánh với biệt dược lọai có thị trường Việt Nam KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Điều chế viên nén meloxicam 7,5 mg từ phức hợp ME-β-CD Các công thức thăm dò trình bày Bảng 3.2 Bảng 3.2 Thành phần cơng thức thăm dò củaviên ME-β-CD Thành phần (mg/viên) Phức ME-β-CD tương đương 7,5 mg ME Tá dược D Polyplasdone XL Avicel Primojel Aerosil 200 Talc Magnesi stearat Flow lac Khối lượng viên (mg) CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 65,18 65,18 65,18 65,18 65,18 65,18 65,18 7,2 3,6 3,6 100,42 180 2,7 3,6 3,6 3,6 101,32 180 7,2 7,2 3,6 3,6 93,22 180 7,2 7,2 3,6 3,6 93,22 180 7,2 7,2 3,6 3,6 93,22 180 7,2 25,2 3,6 3,6 75,22 180 25,2 7,2 3,6 3,6 75,22 180 Kết khảo sát độ hòa tan cơng thức thăm dò trình bày Bảng 3.3 Hình 3.1 Bảng 3.3 Độ hòa tan ME cơng thức thăm dò Cơng thức ME hòa tan (%) 0’ 5’ 10’ 15’ 30’ 45’ 60’ CT1 32,51 51,03 62,66 76,16 78,47 79,31 CT2 38,97 58,35 68,25 79,94 83,94 86,68 CT3 32,78 55,18 67,62 78,93 84,36 90,08 CT4 46,08 58,26 64,36 71,58 77,82 83,11 CT5 48,12 65,33 72,61 80,12 84,58 89,69 CT6 39,39 56,08 65,48 76,01 82,48 85,14 CT7 41,33 55,67 64,20 73,96 78,78 85,94 Kết cho thấy độ hòa tan cơng thức khác có ý nghĩa (p = 0,0003 < 0,05) CT5 có độ hòa tan cao cơng thức khác nên CT5 chọn làm công thức cho giai đoạn nghiên cứu 12 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan ME cơng thức thăm dò Thiết kế mơ hình cơng thức: Biến độc lập: Biến phụ thuộc: x1 : lượng tá dược D (mg) y1 : độ phân tán khối lượng viên (CV %) x2 : lượng primojel (mg) y2 : độ hòa tan sau phút (%) x3 : tá dược talc hay aerosil y3 : độ hòa tan sau 15 phút (%) Bảng 3.4 Mơ hình cơng thức viên nén ME-β-CD STT 10 11 12 13 14 x1 b b b c b c a a b a a c c c x2 c a a c b a a a c c b b c b x3 b a b a b a b a a a b a b b Mơ hình thực nghiệm gồm 14 cơng thức thiết kế phần mềm Design-Expert 7.1 theo mô hình D-Optimal (Bảng 3.4) Ghi x1 5,4 7,2 9,0 a b c x2 3,6 7,2 10,8 x3 talc aerosil - Dữ liệu thực nghiệm (đầu vào cho Inform) trình bày Bảng 3.5 Bảng 3.5 Dữ liệu thực nghiệm (đầu vào cho Inform) STT x1 x2 x3 y1 y2 y3 7,2 10,8 aerosil 0,48 52,40 70,71 7,2 3,6 talc 1,02 52,28 76,46 7,2 3,6 aerosil 0,84 52,27 71,07 13 9,0 10,8 talc 0,60 56,38 76,62 7,2 7,2 aerosil 0,89 53,81 72,21 9,0 3,6 talc 0,45 51,74 72,56 5,4 3,6 aerosil 0,86 53,67 74,71 5,4 3,6 talc 0,74 47,74 71,89 7,2 10,8 talc 0,55 52,29 74,56 10 5,4 10,8 talc 0,49 57,09 75,91 11 5,4 7,2 aerosil 1,15 53,99 77,28 12 9,0 7,2 talc 0,63 49,39 71,08 13 9,0 10,8 aerosil 1,33 50,35 70,98 14 9,0 7,2 aerosil 0,71 52,15 71,70 Các thơng số luyện mạng tóm tắt sau: Nhóm thử 3, Số lớp ẩn (mặc nhiên) Số nút (mặc nhiên) Thuật toán Stadard Incremantal (y1), Quickprop (y2), Angle Driven Learning (y3) Hàm truyền lớp ẩn Tanh (y1), Symmetric sigmoid (y2), Linear (y3) Hàm truyền lớp Tanh (y1), Symmetric sigmoid (y2), Linear (y3) Yếu tố momen 0,8 (mặc nhiên); Tốc độ luyện 0,7 (mặc nhiên); Số vòng lặp tối đa 1.000 (mặc nhiên); Sai số bình phương trung bình 0,0001 (mặc nhiên); Mầm ngẫu nhiên 10.000 Điều kiện tối ưu hóa a Ràng buộc: không b Trọng số: c Hàm mục tiêu: - Độ phân tán khối lượng viên (CV %): y1 = Flat - Độ hòa tan sau phút (%): y2 = Up - Độ hòa tan sau 15 phút (%): y3 = Up Kết tối ưu hóa : Đầu phần mềm thông minh INForm cho kết sau: 14 Thơng số tối ưu (xi): Tính chất dự đoán (yi): - x1: lượng tá dược D = 5,83 (mg) - y1: độ phân tán khối lượng viên = 1,21 % - x2: lượng primojel = 7,65 (mg) - y2: độ hòa tan sau phút = 54,63 % - x3: tá dược talc hay aerosil = aerosil - y3: độ hòa tan sau 15 phút = 77,00 % Cơng thức tối ưu dự đốn cho viên nén ME-β-CD trình bày Bảng 3.6: Bảng 3.6 Cơng thức tối ưu dự đốn viên nén ME-β-CD Thành phần Công thức viên (mg) Công thức 1000 viên (g) Phức ME-β-CD chứa 7,5 mg ME Tá dược D Primojel Aerosil Magnesi stearat Flow lac vđ 65,18 5,83 7,65 3,6 3,6 180 65,18 5,83 7,65 3,6 3,6 180 Thực nghiệm kiểm chứng: Công thức tối ưu kiểm chứng lô thực nghiệm điều chế điều kiện điều chế công thức mơ hình thực nghiệm Kết thực nghiệm trình bày Bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết thực nghiệm kiểm chứng y1, y2 y3 Y Lơ Lơ Trung bình Giá trị dự đốn y1 (CV %) y2 (độ hòa tan thời điểm phút) y3 (độ hòa tan thời điểm 15 phút) 0,69 1,08 0,88 1,21 46,50 51,12 48,81 54,63 79,81 81,27 80,54 77,00 Kết cho thấy giá trị hai lơ kiểm chứng khác khơng có ý nghĩa (p = 0,232 > 0,05) Tương tự, giá trị dự đoán giá trị thực nghiệm khác khơng có ý nghĩa (p = 0,779 > 0,05) 3.2 Kiểm nghiệm viên nén Hai lô công thức tối ưu viên nén ME-β-CD kiểm nghiệm tiêu: hàm lượng, độ đồng khối lượng, độ cứng, độ mài mòn, thời gian rã, độ hòa tan Kết kiểm nghiệm tóm tắt Bảng 3.8 Bảng 3.8 Kết kiểm nghiệm 02 lô công thức tối ưu viên nén ME-β-CD 15 Viên ME-β-CD Hàm lượng (%) KLTB viên (mg) (% chênh lệch) Độ cứng (kP) Độ mài mòn (%) Thời gian rã (phút) Độ hòa tan 30 phút (%) Lô 99,19 178,61 (-1,35→1,28%) 4,16 0,19 2,00 96,55 Lô 99,42 177,01 (-2,72→1,92%) 4,27 0,21 1,83 94,78 Từ kết qủa kiểm nghiệm cho thấy viên đạt yêu cầu Dược điển VN III Độ hòa tan lơ cơng thức tối ưu so sánh với độ hòa tan phức ME-β-CD nguyên liệu Kết trình bày Bảng 3.9 Hình 3.2 Bảng 3.9 Kết khảo sát độ hòa tan viên nén ME-β-CD tối ưu so với phức ME-β-CD Viên/Phức Viên ME-β-CD lô Viên ME-β-CD lô Phức ME-β-CD ME hòa tan (%) 0’ 10’ 30’ 60’ 0 68,06 70,42 68,54 96,55 94,78 94,10 102,02 100,22 99,33 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn độ hòa tan viên nén ME-β-CD tối ưu so với phức ME-β-CD Kết cho thấy độ hòa tan 02 lô công thức tối ưu viên ME-β-CD khác khơng có ý nghĩa (p = 0,779 > 0,05) độ hòa tan trung bình hai lơ khơng khác có ý nghĩa so với độ hòa tan phức ME-β-CD nguyên liệu (p = 0,358 > 0,05) Điều chứng minh tỉ lệ thành phần tá dược công thức tối ưu viên dập viên phương pháp dập trực tiếp không làm thay đổi độ hòa tan hoạt chất ME viên nén so với độ hòa tan ME phức ME-β-CD 3.3 So sánh độ hòa tan với thuốc đối chiếu 16 So sánh độ hòa tan viên nén ME-β-CD tối ưu với biệt dược lọai có mặt thị trường Việt Nam, có viên đối chiếu ưa chuộng viên Mobic 7,5 mg Kết trình bày Bảng 3.10 Hình 3.3 Bảng 3.10 Kết khảo sát độ hòa tan viên nén ME-β-CD 02 biệt dược đối chiếu (n = 6) ME hòa tan (%) Sản phẩm 0’ 5’ 10’ 15’ 30’ 45’ 60’ Viên ME-β-CD lô 46,50 68,06 79,81 96,55 99,94 102,02 Viên ME-β-CD lô 51,12 70,42 81,27 94,78 97,31 100,22 Mobic lô 702134 36,63 57,34 68,35 81,88 87,60 90,68 A.M lô 08001CN 24,90 58,72 72,05 83,18 88,51 91,51 100 80 ME-β-CD lô ME-β-CD lô Mobic lơ 702134 A.M lơ 08001CN 60 40 Độ hòa tan (%) 20 0 10 20 30 40 50 60 Thời (phút) Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn độ hòađiểm tan viên nén ME-β-CD 02 biệt dược đối chiếu Viên nén ME-β-CD có độ hòa tan cao sản phẩm đối chiếu Mobic sản phẩm A.M điều kiện khảo sát Các giá trị yếu tố khác biệt (f > 15) yếu tố tương tự (f < 50) (Bảng 3.11) cho phép kết luận độ hòa tan 02 lơ viên nén ME-β-CD Mobic 7,5 mg lô 702134 không tương tự Bảng 3.11 So sánh độ hòa tan hai lơ viên nén ME-β-CD Mobic 7,5 mg lô 702134 Cặp so sánh f1 f2 ME-β-CD lô Mobic lô 702134 16,66 44,31 ME-β-CD lô Mobic lô 702134 17,19 43,56 KẾT LUẬN 17 Công thức tối ưu viên nén ME-β-CD xây dựng Viên nén điều chế đạt yêu cầu kiểm nghiệm Dược điển VN III Độ hòa tan viên nghiên cứu tương đương với độ hòa tan phức ME-β-CD nguyên liệu So sánh với 02 biệt dược có thị trường cho thấy viên nén ME-β-CD nghiên cứu có độ hòa tan cao độ hòa tan 02 biệt dược đối chiếu có viên nén ưa chuộng viên Mobic 7,5 mg Lời cám ơn: Chân thành cám TS Nguyễn Văn Dương giúp đỡ đề tài việc tối ưu hóa cơng thức TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT 16 Đặng Văn Giáp (2002), Thiết kế tối ưu hóa cơng thức qui trình, NXB Y Học, Thành phố Hồ Chí Minh 17 Dược điển Việt Nam III (2002), Phụ lục 1.15, 8.3, 8.4, 8.6 TIẾNG ANH 18 British Pharmacopeia (2005), “Betadex”, Vol I, pp 243-244, “Meloxicam”, Vol II, pp 12731274; “Meloxicam Tablet”, Vol III, pp 2626 19 British Pharmacopeia (2007), “Betadex”, “Meloxicam”, “Meloxicam Tablet”, CD-ROM 20 Challa R., Ahuja A., Ali J., Khar R.K (2005), “Cyclodextrins in drug delivery: an update review”, AAPS PharmSciTech , (2) Article 43, pp 329-357 21 Chinese Pharmacopoeia (2005), “Meloxicam”, Vol II, pp 507 – 508; “Betacyclodextrin”, Vol II, pp 912 – 913 22 European Pharmacopoeia (2002), Vol I, pp 723-725 23 Ghorab Mamdouh M., Abdel-Salam Heba M., El-Sayad Marwa A., Mekhel Mohammed M (2004), “Tablet Formulation Containing Meloxicam and beta-Cyclodextrin: Mechanical Characterization and Bioavailability Evaluation”, AAPS PharmSciTech, (4) Article 59 24 Kim H., Lee I (2005), “A novel drug delivery systm design for meloxicam”, AAPS PharmSciTech 25 Loftsson T., Brewster M.E., Masson M (2004), “Role of Cyclodextrins in Improving Oral Drug Delivery”, Am J Drug Deliv, (4), pp 261-275 26 Loftsson Thorsteinn, Jarho Pekka , Másson Már, Järvinen Tomi (2005), “Cyclodextrins in drug delivery”, Expert Opin Drug Deliv., (2), pp 335-351 27 Naidu Buchi N., Chowdary K.P.R., Murthy K.V.R., Satyanarayana V., Hayman A.R., Becket G (2004),“Physicochemical characterization and dissolution properties of meloxicam – cyclodextrin binary systems”, J of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 35, pp 75–86 28 Nalluri Buchi N., Chowdary K.P.R., Murthy K.V.R., Becket G., Crook Peter A (2007), “Tablet Formulation Studies on Nimesulide and Meloxicam-Cyclodextrin Binary Systems”, AAPS PharmSciTech, (2) Article 36 29 Nemutlu Emirhan, Kir Sedef (2004), “Validated Determination of Meloxicam inTablets by Using UV Spectrophotometry”, Hacettepe University, Journal of Faculty of Pharmacy, Volume 24, Number 1, pp 13-24 30 Szejtli József (2004), “Past, present, and future of cyclodextrin research”, Pure Appl Chem., Vol 76, No 10, pp 1825–1845 31 United States Pharmacopeia 30 (USP) (2007), U.S Pharmacopeial Convention, Inc Rockville, MD, CD-ROM 32 Zawilla N H., Abdul-Azim Mohammad M., El kousy N.M., El-Moghazy Aly S.M (2003), “Determination of meloxicam in bulk and pharmaceutical formulations”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 32, pp 1135-/1144 18 ... nhiên phức điều chế hỗn hợp nước dung môi B xát hạt thời gian sấy ngắn Do đó, hỗn hợp dung mơi chọn để điều chế phức hợp cho trình nghiên cứu Ảnh hưởng thời gian điều chế Các phức hợp nghiền... có biệt dược chứa phức hợp meloxicam- β -cyclodextrin Đề tài nghiên cứu áp dụng phương pháp nghiền ướt để tạo phức hợp meloxicam- β -cyclodextrin, từ tạo ngun liệu để điều chế viên meloxicam có sinh... trung bình lơ phức điều chế thiết bị phức điều chế chày cối khác khơng có ý nghĩa (p = 0,057 > 0,05) Bảng 3.6 Độ hòa tan ME phức ME-β-CD điều chế thiết bị phức điều chế chày cối Phức ME-β-CD