NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY MÀNG TANG (Litsea cubeba (Lour.) Pers.)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRỊNH THỊ PHI LY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY MÀNG TANG (Litsea cubeba (Lour.) Pers.) LUẬN VĂN THẠC SỸ CÔNG NGHỆ SINH HỌC (NGÀNH KHOA HỌC KỸ THUẬT) Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 3/2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRỊNH THỊ PHI LY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY MÀNG TANG (Litsea cubeba (Lour.) Pers.) Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Mã số : 60.42.80 LUẬN VĂN THẠC SỸ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hƣớng dẫn Khoa học: PGS.TS TRẦN CÔNG LUẬN Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 3/2012 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY MÀNG TANG (Litsea cubeba (Lour.) Pers.) TRỊNH THỊ PHI LY Hội đồng chấm luận văn : Chủ tịch: PGS.TS LÊ ĐÌNH ĐƠN Trƣờng Đại học Nơng Lâm TPHCM Thƣ ký: TS TRẦN THỊ LỆ MINH Trƣờng Đại học Nông Lâm TPHCM Phản biện 1: TS VƢƠNG ĐÌNH TUẤN Phân viện Khoa học Lâm nghiệp Nam Bộ Phản biện 2: TS LÊ QUANG LUÂN Trung tâm Hạt nhân TPHCM Ủy viên: PGS.TS TRẦN CÔNG LUẬN Trung tâm Sâm Dƣợc liệu TPHCM TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH HIỆU TRƢỞNG i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tôi tên Trịnh Thị Phi Ly sinh ngày 07 tháng năm 1983 tỉnh Quảng Ngãi Con ông Trịnh Tiến Dũng bà Bùi Thị Phi Yến Tốt nghiệp Tú tài Trƣờng Trung học phổ thông Đức Phổ I, tỉnh Quảng Ngãi, năm 2001 Tốt nghiệp Đại học ngành Cơng nghệ Sinh học hệ quy Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh năm 2005 Từ năm 2008 đến theo học Cao học ngành Công nghệ Sinh học Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh Hiện cơng tác Viện nghiên cứu Công nghệ Sinh học Môi trƣờng, Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh Tình trạng gia đình: Chồng Nguyễn Quỳnh Anh sinh ngày 30 tháng năm 1983 Hƣng Yên Địa liên lạc: 88/4 Nguyễn Hữu Cảnh, phƣờng Thắng Nhất, thành phố Vũng Tàu Điện thoại: 0909909360 Email: philynguyen@gmail.com ii LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Ký tên Trịnh Thị Phi Ly iii LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến: Q Thầy Cơ trƣờng Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh tận tâm hƣớng dẫn, truyền đạt kiến thức cho suốt thời gian học tập Thầy Trần Cơng Luận tận tình hƣớng dẫn tơi hồn thành cơng trình nghiên cứu Em Trƣơng Thị Bích Liễu, Trần Thị Quỳnh Diệp Trần Hiếu Nhân tham gia thực đề tài Phòng Tài nguyên Dƣợc liệu – Viện Dƣợc liệu công ty cổ phần Y Dƣợc Phẩm Vimedimex giúp đỡ q trình thu thập mẫu Màng tang Bộ mơn Vi sinh – Kí sinh, khoa Dƣợc, đại học Y Dƣợc thành phố Hồ Chí Minh cung cấp chủng vi sinh vật Các quý Thầy cô Viện nghiên cứu Công nghệ Sinh học Môi trƣờng hỗ trợ tơi q trình thực đề tài Bộ mơn Cơng nghệ Hóa học giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Q Nhà trƣờng, Bộ mơn Cơng nghệ Sinh học Phòng Sau đại học tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành khóa học Gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên, chia sẻ góp ý cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu iv TĨM TẮT Đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học tinh dầu Màng tang (Litsea cubeba (Lour.) Pers.) đƣợc thực Viện nghiên cứu Công nghệ Sinh học Môi trƣờng, Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh; Trung tâm Sâm Dƣợc liệu thành phố Hồ Chí Minh Mục tiêu đề tài đánh giá hàm lƣợng tinh dầu, số hợp chất chính, hoạt tính chống oxy hóa kháng vi sinh vật tinh dầu Màng tang thu thập Việt Nam Tinh dầu Màng tang dao động khoảng lớn từ 0,47% đến 11,85%, mẫu thu thập rừng phòng hộ Đa Nhim có hàm lƣợng tinh dầu cao (11,85%) Quả Màng tang chứa hàm lƣợng tinh dầu cao (6,06 – 10,38%) Tinh dầu Màng tang chứa từ 15 đến 25 cấu tử chiếm 93,45 – 99,98% thành phần tinh dầu, chất chủ yếu monoterpen, sesquiterpen diện với hàm lƣợng thấp Thành phần tinh dầu Màng tang thu thập từ vƣờn quốc gia Tam Đảo, Cúc Phƣơng đèo Đá Đẽo cineol (43,34 – 48,94%) terpineol (20,49 – 28,15%) Tinh dầu mẫu thu thập từ khu vực Tây Nguyên chứa chủ yếu sabinen (6,66 – 41,84%) pinen (11,71 – 18,11%) Quả thu thập Quảng Sơn (Đăk Nơng) có thành phần citral (45,89%) citronellal (34,65%) thu thập núi Ngọc Linh (Kon Tum) giàu citronellal (70,6%) limonen (11,7%) Tinh dầu Màng tang có hoạt tính chống oxy hóa cao tinh dầu lá, cao thu thập núi Ngọc Linh với nồng độ ức chế 50% gốc DPPH 0,89 µl/ml Tinh dầu Màng tang có khả kháng chủng: E coli ATCC 2592 (MIC 1,25 – 10 µl/ml), S aureus ATCC 25923 (MIC 0,25 – 10 µl/ml) C albicans ATCC 10231 (MIC 0,13 – µl/ml) Trong đó, tinh dầu Màng tang kháng E coli ATCC 2592 mạnh quả, tinh dầu Màng tang kháng S aureus ATCC 25923 C albicans ATCC 10231 mạnh v SUMMARY The thesis “Chemical composition and bioactivites of the essential oils of Litsea cubeba (Lour.) Pers.” was carried out at Research Institute for Biotechnology and Environment, Nong Lam University and Research Center for Gingseng and Medicinal materials, Ho Chi Minh city The study was conducted in order to evaluate the essential oils content, major components, antioxidant and antimicrobial activity of the essential oils of Litsea cubeba (Lour.) Pers collected from Vietnam The results showed that the essential oils content of L cubeba leaves were in the wide range of 0.47 – 11.85%, L cubeba leaves from Da Nhim forest (Lam Dong province) had the highest oil content (11.85%) The essential oils content of L cubeba fruits were high (6.06 – 10.38%) GC-MS analysis of the L cubeba essential oils were resulted in determination 15 – 25 different compounds, representing 93.45 – 99.98% of total oil The monoterpenes was predominant portion of the essential oils, sesquiterpenes was much lower The major components in the leaf essential oils from Tam Dao (Vinh Phuc province), Cuc Phuong (Ninh Binh province) national park and Da Deo hill (Quang Binh province) included cineole (43.34 – 48.94%) and terpineole (20.49 – 28.15%) Sabinene (6.66 – 41.84%) and pinene (11.71 – 18.11%) were the main compounds in the leaf essential oils from Vietnam highland region The major constituents in the fruit essential oil from Quang Sơn (Đak Nong province) were citral (45.89%) and citronellal (34.65%), while fruit essential oil from Ngoc Linh mountain (Kon Tum province) contained citronellal (70.6%) as the main compound The antioxidant activity of essential oils from L cubeba fruits was higher than L cubeba leaves, fruit essential oil from Ngoc Linh mountain (Kon Tum province) was shown the strongest DPPH free-radical scavenging activity (IC50 = 0.89 µl/ml) vi Antimicrobial activity of L cubeba essential oil was found on three strains: E coli ATCC 2592 (MIC 1.25 – 10 µl/ml), S aureus ATCC 25923 (MIC 0.25 – 10 µl/ml) C albicans ATCC 10231 (MIC 0.13 – µl/ml) Leaf essential oils were the most effective against E coli ATCC 2592, while fruit essential oils exhibited marked against S aureus ATCC 25923 and C albicans ATCC 10231 These results support the notion that L cubeba essential oils may have a role as pharmaceuticals and preservatives vii MỤC LỤC CHƢƠNG TRANG Trang tựa Trang Chuẩn Y i Lý lịch cá nhân ii Lời cam đoan iii Lời cảm ơn iv Tóm tắt v Summary vi Mục lục viii Danh sách từ viết tắt xi Danh sách hình xii Danh sách bảng xiii MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục tiêu yêu cầu 1.2.1 Mục tiêu .2 1.2.2 Yêu cầu .2 TỔNG QUAN 2.1 Tổng quan Màng tang 2.1.1 Phân loại .3 2.1.2 Đặc điểm sinh học 2.1.2.1 Đặc điểm thực vật học .3 2.1.2.2 Điều kiện sinh trƣởng phân bố 2.1.3 Công dụng 2.2 Tổng quan tinh dầu 2.2.1 Trạng thái tự nhiên q trình tích lũy 2.2.2 Hoạt tính sinh học viii Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua q trình thực hiện, chúng tơi rút số kết luận sau: Hàm lƣợng thành phần hóa học tinh dầu Màng tang Tinh dầu Màng tang dao động khoảng lớn từ 0,47% đến 11,85%, mẫu thu thập rừng phòng hộ Đa Nhim có hàm lƣợng tinh dầu cao (11,85%) Quả Màng tang chứa hàm lƣợng tinh dầu cao (6,06 – 10,38%) Tinh dầu Màng tang chứa từ 15 đến 25 cấu tử chiếm 93,45 – 99,98% thành phần tinh dầu, chất chủ yếu monoterpen, sesquiterpen diện với hàm lƣợng thấp Thành phần tinh dầu Màng tang thu thập từ vƣờn quốc gia Tam Đảo, Cúc Phƣơng đèo Đá Đẽo cineol (43,34 – 48,94%) terpineol (20,49 – 28,15%) Tinh dầu mẫu thu thập từ khu vực Tây Nguyên chứa chủ yếu sabinen (6,66 – 41,84%) pinen (11,71 – 18,11%) Quả thu thập Quảng Sơn (Đăk Nông) có thành phần citral (45,89%) citronellal (34,65%) thu thập núi Ngọc Linh (Kon Tum) giàu citronellal (70,6%) limonen (11,7%) Hoạt tính chống oxy hóa tinh dầu Màng tang Tinh dầu Màng tang có hoạt tính chống oxy hóa cao tinh dầu lá, cao thu thập núi Ngọc Linh (Kon Tum) với nồng độ ức chế 50% gốc DPPH 0,89 µl/ml Khả kháng khuẩn nấm tinh dầu Màng tang Tinh dầu Màng tang có khả kháng chủng: E coli ATCC 2592 (MIC 1,25 – 10 µl/ml), S aureus ATCC 25923 (MIC 0,25 – 10 µl/ml) C albicans ATCC 10231 (MIC 0,13 – µl/ml) Trong đó, dầu Màng tang kháng E coli 51 ATCC 2592 mạnh quả, tinh dầu Màng tang kháng S aureus ATCC 25923 C albicans ATCC 10231 mạnh 5.2 Đề nghị Thu thập nghiên cứu thêm nhiều mẫu (lá quả) Lâm Đồng sơ cho thấy hàm lƣợng tinh dầu khu vực cao Cây Màng tang thuộc loại gỗ, thích nghi với vùng đồi núi cao ngun Có thể trồng thành rừng phòng hộ, chống xóa mòn khai thác tinh dầu, đem lại nguồn thu nhập cho đồng bào miền núi Đồng thời trồng thành vùng nguyên liệu tập trung Đăk Nông Lâm Đồng để khai thác phục vụ nhu cầu sản xuất, xuất Tinh dầ u quả Mà ng tang thu thâ ̣p ở Ngo ̣c Linh (Kon Tum) chƣ́a hàm lƣơ ̣ng cao citronellal (70,6%) khác biệt lớn so với tinh dầu thu thập khu vực khác Cần nghiên cứu chu trình sinh tổng hợp tinh dầu nhƣ tác động điều kiện sinh trƣởng để có kết luận phù hợp 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn, 2006 Cẩm nang ngành lâm nghiệp Chƣơng trình hỗ trợ ngành Lâm nghiệp đối tác Bộ Y tế, 2002 Dược điển Việt Nam III Võ Văn Chi, 1997 Từ điển Cây thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học Nguyễn Khắc Quỳnh Cứ, 1999 Bài giảng chiết xuất dược liệu Trƣờng Đại học Y dƣợc Thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Ngọc Hải Nguyễn Thị Kim Loan, 2009 Thực hành nghiên cứu vi sinh vật Nhà xuất Nông nghiệp học Đỗ Tất Lợi, 2004 Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y Nguyễn Thị Tâm, Vũ Vân Anh, Muselli A., Bighelli A.M., Bessiere J.M, Casanova J., 2002 Nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu Màng tang mọc hoang số tỉnh phía Bắc Việt Nam Tạp chí Dược liệu, tập (5): 141 – 144 Lê Ngọc Thạch, 2003 Tinh dầu Nhà xuất Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh Trần Linh Thƣớc, 2007 Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mỹ phẩm Nhà xuất Giáo dục 10 Phạm Hùng Việt, 2005 Sắc ký khí – Cơ sở lý thuyết khả ứng dụng Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội Tài liệu tiếng Anh 11 Bighelli A.M., Alain C.J and Tam N.T., 2005 Chemical variability of Litsea cubeba leaf oil from Vietnam Journal of Essential Oil Research 17 (1): 86 – 88 12 Burits M., Asres K and Buclar F., 2001 The antioxidant activity of the essential oils of Artemisia afra, Artemisia abyssinica and Juniperus procea Phytotherapy research 15: 103 – 108 53 13 Ernest J.P., 1922 The Chemistry Of Essential Oils Vol II Scott Greenwood and Son 14 Farag R.S., Daw Z.Y and El-Baroty G.S.A., 1989 Antimicrobial activity of some Egyptian spice essential oils Journal of Food Protection 52 (9): 665 – 667 15 Hammer K.A., Carson C.F and Riley T.V., 1999 Antimicrobial activity of essential oils and other plant extracts Journal of Applied Microbiology 86: 985 – 990 16 Helander I.M., Alakomi H.L., Latva K.K., Mattila S.T., Pol I., Smid E.J., Gorris L.G.M and Von W.A., 1998 Characterization of the action of selected essential oil components on Gram-negative Journal of Agricultural and Food Chemistry 46: 3590 – 3595 17 Knobloch K., Weigand H., Weis N., Schwarm H.M and Vigenschow H., 1986 Action of terpenoids on energy metabolism Progress in Essential Oil Research 16th International Symposium on Essential Oils: 429 – 445 18 Knobloch K., Pauli A., Iberl B., Weigand H and Weis N., 1989 Antibacterial and antifungal properties of essential oil components Journal of Essential Oil Research 1: 119 – 128 19 Ko K., Waraporn J and Angsumarn C., 2009 Repellency, fumigant and contact toxicities of Litsea cubeba (Lour.) Persoon against sitophilus Zeamais motschulsky and Tribolium castaneum (Herbst) Kasetsart Journal 43 (1): 56 – 63 20 Lambert R.J.W., Skandamis P.N., Coote P and Nychas G.J.E., 2001 A study of the minimum inhibitory concentration and mode of action of oregano essential oil, thymol and carvacrol Journal of Applied Microbiology 91: 453 – 462 21 Liu Z.L., Goh S.H and Ho S.H., 2007 Screening of Chinese medicinal herbs for bioactivity against Sitophilus zeamais Motschulsky and Tribolium castaneum (Herbst) Journal Stored Product Resource 43 (3): 290 – 296 22 Mau J.L., Lai E.Y.C., Wang N.P., Chen C.C., Chang C.H and Chyau C.C., 2003 Composition and antioxidant activity of the essential oil from Curcuma zedoaria Food Chemistry 82: 583 – 591 23 Nath S.C., Hazarika A.K., Baruah A and Sarma K.K.,1996 Essential oils of Litsea cubeba Pers - an additional chemozype of potential industrial value from northeastem India Essential Oil Rescource (5): 575 – 576 54 24 Reichling J., Schnitzler P., Suschke V and Saller R., 2009 Essential oils of aromatic plants with antibacterial, antifungal, antiviral and cytotoxic properties an overview Forsch Komplementmed 16: 79 – 90 25 Tepe B., Donmez E., Unlu M., Candan F., Daferera D., Vardar-Unlu G., Polissiou M and Sokmen A., 2004 Antibacterial and antioxidative activities of the essential oils and methanol extracts of Salvia cryptantha and Salvia multicaulis Food Chemistry 84: 519 – 525 26 Wang H.W and Liu Y.Q., 2010 Chemical composition and antibacterial activity of essential oils from different parts of Litsea cubeba Chemistry and biodiversity (1): 229 – 235 27 Ultee A., Kets E.P.W and Smid E.J., 1999 Mechanisms of action of carvacrol on the food-borne pathogen Bacillus cereus Applied and Environmental Microbiology 65 (10): 4606 – 4610 28 Yu C.C., Chun C.H and Tsair B.Y., 2007 Antifungal properties of Litsea cubeba essential oils against molds Botany and plant biology joint congress July 7-11, 2007, Hilton Chicago, Illinois 29 Zhili J., Yasmin A., Rod B., Xing Z and Murray B.I., 2009 Comparative toxicity of essential oils of Litsea pungens and Litsea cubeba and blends of their major constituents against the cabbage looper, Trichoplusia ni J Agric Food Chem 57(11): 4833 – 4837 55 PHỤ LỤC Thành phần môi trƣờng TSA (Tryptic soy agar): Tryptone 17 g Soytone 3g Dextrose 3g NaCl 5g K2HPO4 2,5g Agar 15g Nƣớc cất 1000 ml Thành phần môi trƣờng Sabouraud agar: Dextrose 40 g Peptone 10 g Agar 20 g pH 5,6 Nƣớc cất 1000 ml 56 PHỤ LỤC Phƣơng pháp đếm khuẩn lạc Phƣơng pháp đếm khuẩn lạc cho phép xác định số lƣợng tế bào vi sinh vật sống diện mẫu Tế bào sống tế bào có khả phân chia tạo thành khuẩn lạc môi trƣờng chọn lọc Trong phƣơng pháp này, cần thực pha loãng mẫu thành nhiều độ pha loãng bậc 10 liên tiếp cho có độ pha lỗng với mật độ tế bào thích hợp để xuất khuẩn lạc riêng lẻ bề mặt thạch với số lƣợng đủ lớn để hạn chế sai số đếm tính tốn Số lƣợng khuẩn lạc tối ƣu đƣợc FDA (The Food and Drug Administration) hay AOAC (Association of Official Analytical Chemists) đề nghị 25 – 250 khuẩn lạc Sau quy trình thao tác xác định mật độ tế bào phƣơng pháp đếm khuẩn lạc (Trần Linh Thƣớc, 2007): a) Pha loãng mẫu theo dãy thập phân Mẫu đƣợc pha loãng thành dãy nồng độ thập phân 1/10, 1/100, 1/1000…Mỗi bậc pha loãng 1/10 đƣợc thực cách dùng ml mẫu (hoặc dung dịch có độ pha lỗng trƣớc đó) thêm vào ml nƣớc mơi trƣờng ống nghiệm Sau lắc kỹ đƣợc độ pha lỗng 1/10 Có thể tiến hành thể tích khác nhau, vi dụ 0,5 ml + 4,5 ml 0,1 ml + 0,9 ml Thông thƣờng cần thực dãy nhiều nồng độ pha loãng bậc 10 liên tiếp để đƣợc nồng độ pha lỗng thích hợp b) Tạo hộp trải  Dùng pipetman đầu típ vô trùng, thao tác vô trùng chuyển 0,1 ml dịch chứa giống vi sinh vật lên bề mặt môi trƣờng đĩa petri  Nhúng đầu que trải thủy tinh vào cồn 70o, hơ qua lửa để khử trùng Để đầu que trải nguội không gian vô trùng lửa  Mở đĩa petri, đặt nhẹ nhàng que trải lên bề mặt thạch đĩa petri Dùng đầu que trải, trải dịch giống lên bề mặt thạch Trong trải, thực xoay 57 đĩa vài lần, lần khoảng ½ chu vi đĩa tạo điều kiện cho que trải trải dịch giống khắp bề mặt môi trƣờng  Rút que trải khỏi đĩa, đậy đĩa, gói ủ nhiệt độ thời gian thích hợp tủ ủ c) Tính kết Mật độ tế bào vi sinh vật mẫu ban đầu tính từ số liệu độ pha lỗng Di đƣợc tính theo cơng thức: Mi (CFU/ml) = Ai × Di/V Trong Ai số khuẩn lạc trung bình/ đĩa V dung tích huyền phù tế bào cho vào đĩa (ml) Mật độ tế bào trung bình Mi mẫu ban đầu trung bình cộng Mi nồng độ pha loãng khác Công thức nêu đƣợc áp dụng đĩa độ pha loãng cho số khuẩn lạc thích hợp Nhƣ vậy, có độ pha lỗng có cặp đĩa cho số lƣợng khuẩn lạc thích hợp (25 – 250 khuẩn lạc/ đĩa) Mi mật độ vi sinh vật mẫu Nếu có nhiều độ pha lỗng mà độ pha lỗng có cặp đĩa cho số lƣợng khuẩn lạc thích hợp, mật độ vi sinh vật mẫu trung bình số Mi 58 PHỤ LỤC Sắc ký đồ phân tích thành phần hóa học tinh dầu Màng tang thu thập núi Ngọc Linh (TMR, Kon Tum) 59 PHỤ LỤC Sắc ký đồ phân tích thành phần hóa học tinh dầu Màng tang thu thập Pơ Lang (MY1, Gia Lai) 60 PHỤ LỤC Sắc ký đồ phân tích thành phần hóa học tinh dầu Màng tang thu thập vƣờn quốc gia Tam Đảo (TĐ, Vĩnh Phúc) 61 PHỤ LỤC Sắc ký đồ phân tích thành phần hóa học tinh dầu Màng tang thu thập rừng phòng hộ đèo Mang Yang (MY, Gia Lai) 62 PHỤ LỤC Sắc ký đồ phân tích thành phần hóa học tinh dầu Màng tang thu thập vƣờn quốc gia Cúc Phƣơng (CP, Ninh Bình) 63 PHỤ LỤC Sắc ký đồ phân tích thành phần hóa học tinh dầu Màng tang thu thập vƣờn quốc gia Bidoup – Núi Bà (BĐ, Lâm Đồng) 64 PHỤ LỤC Sắc ký đồ phân tích thành phần hóa học tinh dầu Màng tang thu thập Quảng Sơn (Q1, Đăk Nông) 65 ... 0909909360 Email: philynguyen@gmail.com ii LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Ký tên Trịnh Thị Phi Ly iii LỜI CẢM... MINH HIỆU TRƢỞNG i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tôi tên Trịnh Thị Phi Ly sinh ngày 07 tháng năm 1983 tỉnh Quảng Ngãi Con ông Trịnh Tiến Dũng bà Bùi Thị Phi Yến Tốt nghiệp Tú tài Trƣờng Trung học phổ thông...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRỊNH THỊ PHI LY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA TINH DẦU CÂY MÀNG TANG (Litsea cubeba