Nghiên cứu thu nhận anthocyanin từ phế liệu gạo đen và hoạt tính chống oxy hóa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU THU NHẬN ANTHOCYANIN TỪ PHẾ LIỆU GẠO ĐEN VÀ XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH KHÁNG OXY HĨA Ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS NGUYỄN LỆ HÀ Sinh viên thực MSSV: 1151110478 : LÊ TRÍ KIỂNG Lớp: 11DSH05 TP Hồ Chí Minh, 2015 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Là sinh viên năm năm cuối Trường Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh, vinh dự làm đồ án tốt nghiệp để hoàn tất chương trình học Tơi cam đoan nghiên cứu tơi tiến hành phòng thí nghiệm Khoa Công nghê Sinh học-Thực phẩm-Môi trường, Trường Đại học Công nghệ TP Hồ Chí Minh Những số liệu hồn tồn trung thực chưa có cơng bố Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2015 Sinh viên thực Lê Trí Kiểng Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Tận đáy lòng xin gửi vạn lời cảm ơn đến cha mẹ, cha mẹ gian lao nuôi dạy thành người người thầy đầu đời Cha mẹ chỗ dựa vững con, người giúp đứng vững sau lần vấp ngã, nguồn động viên, động lực để tiếp tục phấn đấu sống Với lòng biết ơn sâu sắc Em xin chân thành cảm ơn tồn thể q Thầy Cơ Khoa Cơng nghệ sinh học-Thực phẩm-Mơi trường, tồn thể Thầy Cơ Trường Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh nhiệt tình giảng dạy truyền đạt cho em kiến thức quý báo sở ngành chuyên ngành từ ngày em bước chân vào giảng đường đại học Đặc biệt, em xin chân thành cảm ơn TS.Nguyễn Lệ Hà, người thầy đáng kính, ln tận tình dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành phần thực nghiệm đồ án Em xin chân thành cảm ơn thầy Huỳnh Văn Thành thầy Nguyễn Trung Dũng tạo điều kiện thuận lợi cho em thực đồ án phòng thí nghiệm Khoa Công nghệ sinh học-Thực phẩm-Môi trường, Trường Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh Cảm ơn tất bạn lớp 11DSH05 ln khích lệ, động viên giúp đỡ suốt trình học tập trường trình làm đồ án tốt nghiệp Xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2015 SVTH: Lê Trí Kiểng Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ, ĐỒ THỊ, SƠ ĐỒ, HÌNH ẢNH vii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Gạo đen 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Thành phần hóa học 1.2 Anthocyanin 1.2.1 Giới thiệu chung 1.2.2 Cấu trúc phân tử 1.2.3 Tính chất, đặc điểm 12 1.2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến màu sắc độ bền anthocyanin 13 1.2.4.1 Cấu trúc 13 a) Cấu trúc chuyển hóa mơi trường lỏng 13 b) Cấu trúc hóa học 15 1.2.4.2 pH 17 1.2.4.3 Nhiệt độ 18 1.2.4.4 Oxy 19 1.2.4.5 Enzyme 20 1.2.4.6 21 1.2.4.7 21 Ánh Đường sản sáng phẩm 1.2.4.8 Các ion kim loại biến tính chúng 22 i Đồ án tốt nghiệp 1.2.4.9 Sulfurdioxide (SO2) 23 1.2.4.10 Acid ascorbic 24 1.2.5 Sự phân bố anthocyanin 25 1.2.6 Các anthocyanin thương mại hóa 27 1.2.7 Ứng dụng anthocyanin 27 1.3 Các thành tựu đạt 28 1.3.1 Phương pháp tách chiết anthocyanin 28 1.3.2 Phương pháp tách chiết anthocyanin từ dâu Hội An 28 1.3.3 Phương pháp tách chiết anthocyanin từ bắp cải tím 29 1.3.4 Phương pháp tách chiết anthocyanin từ gạo đen 30 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 31 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 31 2.1.1 Thời gian 31 2.1.2 Địa điểm 31 2.2 Nguyên liệu– thiết bị - hoá chất 31 2.2.1 Nguồn gạo đen 31 2.2.2 Một số hóa chất sử dụng nghiên cứu 31 2.2.3 Một số dụng cụ thiết bị chủ yếu dùng nghiên cứu 32 2.2.3.1 Dụng cụ 32 2.2.3.2 Thiết bị 32 2.3 Phương pháp nghiên cứu 33 2.3.1 Thí nghiệm 1: Xác định độ ẩm ban đầu nguyên liệu 34 2.3.2 Thí nghiệm 2: Xác định bước sóng hấp thu cực đại anthocyanin từ mẫu gạo đen 34 ii Đồ án tốt nghiệp 2.3.3 Thí nghiệm 3: Xác định ảnh hưởng kích thước hạt đến hiệu trích ly anthocyanin từ gạo đen 35 2.3.4 Thí nghiệm 4: Xác định ảnh hưởng xử lý nhiệt sơ cho nguyên liệu đến trình trích ly anthocyanin từ gạo đen 37 2.3.5 Thí nghiệm 5: Xác định tỷ lệ HCl pha chế dung mơi để trích ly anthocyanin từ gạo đen 39 2.3.6 Thí nghiệm 6: Xác định nhiệt độ thích hợp để trích ly anthocyanin từ gạo đen 41 2.3.7 Thí nghiệm 7: Xác định thời gian thích hợp trích ly anthocyanin từ gạo đen _ 43 2.3.8 Thí nghiệm 8: Xác định hoạt tính kháng oxy anthocyanin 45 2.3.9 Thí nghiệm 9: Xác định thơng số cho q trình quay thu nhận dịch chiết anthocyanin đặc 46 2.4 Các phương pháp phân tích sử dụng nghiên cứu 47 2.5 Các phương pháp thống kê xử lý số liệu 47 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 Thí nghiệm 1: Xác định độ ẩm ban đầu nguyên liệu 48 3.2 Thí nghiệm 2: Xác định bước sóng hấp thu cực đại anthocyanin từ mẫu gạo đen 48 3.3 Thí nghiệm 3: Xác định ảnh hưởng kích thước hạt đến hiệu trích ly anthocyanin từ gạo đen 49 3.4 Thí nghiệm 4: Xác định ảnh hưởng chế độ xử lý nhiệt sơ cho nguyên liệu đến trình trích ly anthocyanin từ gạo đen 50 3.5 Thí nghiệm 5: Xác định tỷ lệ HCl pha chế dung mơi để trích ly anthocyanin từ gạo đen 52 3.6 Thí nghiệm 6: Xác định nhiệt độ thích hợp để trích ly anthocyanin từ gạo đen _ 53 Đồ án tốt nghiệp 3.7 Thí nghiệm 7: Xác định thời gian thích hợp trích ly anthocyanin từ gạo đen 55 Đồ án tốt nghiệp 3.8 Thí nghiệm 8: Xác định hoạt tính kháng oxy anthocyanin 56 3.9 Thí nghiệm 9: Xác định thơng số cho q trình cô quay thu nhận dịch chiết anthocyanin cô đặc 58 KẾT LUẬN- KIẾN NGHỊ 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 PHỤ LỤC A PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CƯU PHỤ LỤC B SỐ LIỆU THÍ NGHIỆM 11 Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) EtOH (Ethanol) IC50 (Effective concentration of 50%) MeOH (Methanol) Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học gạo đen Bảng 1.2 Các nhóm anthocyanin có tự nhiên 10 Bảng 1.3 Một số anthocyanin phổ biến .11 Bảng 1.4 Bảng anthocyanin có nguồn gốc thực vật 26 Bảng 3.1 Xác định độ ẩm nguyên liệu 48 Bảng 3.2 So sánh giá trị IC50 Ascorbic acid anthocyanin 57 Bảng 3.3 Kết khả kháng DPPH anthocyanin theo thời gian cô quay 61 Bảng 3.4 Đánh giá sơ cảm quan dịch chiết anthocynin .67 PHỤ LỤC B SỐ LIỆU THÍ NGHIỆM Thí nghiệm 1: Hình Quang phổ mẫu anthocyanin từ bước sóng 400-700nm dung mơi EtOH:0,1N HCl (85:15, v:v) Thí nghiệm 2: Bảng số liệu OD đo từ thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng kích thước hạt đến hiệu trích ly anthocyanin từ gạo đen D ạn gN gu yê n hạ t Kí ch th ớc hạ pH1 53 70 50 0n 07 02 07 02 07 02 07 02 07 02 07 02 07 02 07 02 07 02 12 04 13 04 12 04 12 05 13 04 pH45 53 70 5n 0n 05 02 05 02 05 02 04 02 04 02 04 03 05 02 04 02 04 02 07 03 07 03 07 03 06 03 07 03 H ệ số 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 A a ( m 3, 02 4, 50 02 3, 00 02 4, 67 02 34 4, 02 4, 50 02 84 4, 02 17 4, 02 34 3, 02 7, 34 04 7, 01 04 7, 18 04 51 7, 04 7, 51 04 18 T B (4, 08 ±0 ,4 94 7, 32 ±0 ,2 02 Kí ch hạ t 0, 39 in ch es 12 13 08 08 09 08 09 08 08 09 08 04 04 01 01 01 01 01 02 01 01 01 07 07 06 06 07 07 06 06 06 06 07 03 03 02 02 03 02 03 02 02 02 03 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 04 04 03 03 03 02 03 02 02 03 03 7, 34 7, 51 5, 84 5, 67 5, 01 4, 00 6, 17 4, 50 4, 50 6, 01 5, 17 5, 21 ±0 ,7 64 Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD C M H N ou ea oX gu 08 X 0, 39 7 21 0, X 00 Thí 32 nghiệm Bảng số liệu OD thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ xử lý hạt nguyên liệu đến hiệu trích ly anthocyanin từ gạo đen pH1 53 70 0n m m 08 01 08 02 08 02 08 02 08 02 07 02 08 01 08 02 iH 20 30 05 01 t 05 01 0 05 01 05 01 0 05 01 0 05 00 0 05 01 06 01 D n gH t 0 pH45 53 70 5n 0n m m 0 07 03 07 03 07 03 06 03 07 03 07 03 07 03 06 02 90 90 04 01 04 01 04 01 04 01 04 01 03 01 04 01 04 01 H ệ số p 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 A a ( m 4, 02 17 4, 02 00 4, 02 3, 17 01 17 3, 02 67 3, 01 00 3, 02 3, 84 01 17 90 33, 02 34 3, 02 67 3, 01 2, 17 01 83 3, 02 3, 84 02 34 3, 02 3, 34 02 50 T B 3, 65 ±0 ,4 76 3, 38 ±0 ,3 06 H ạt 0 12 13 12 12 13 12 13 04 04 04 05 04 04 04 07 07 07 06 07 07 07 03 03 03 03 03 03 03 10 10 10 10 10 10 10 04 04 04 04 04 04 04 7, 01 7, 18 7, 51 7, 51 7, 18 7, 34 7, 51 7, 32 ±0 ,2 02 Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD C 90 8o o C 80 o NC hi M H ea X o 38 X 65 X 32 Thí nghiệm Bảng giá trị OD cùa thí nghiệm tối ưu hóa tỉ lệ dung mơi EtOH:HCl 1% việc trích ly anthocyanin từ gạo đen pH1 53 70 50 0n :2 27 08 0 26 07 26 07 26 08 26 07 26 08 26 08 85 :1 31 12 30 13 30 13 30 12 31 13 31 12 30 13 T L D 80 pH45 53 70 5n 0n 49 32 48 31 48 31 48 32 48 31 48 31 48 31 48 33 47 34 48 35 48 34 48 35 48 34 48 35 n A a T ( B 10 m 3, ( 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 02 02 01 02 01 01 01 03 03 03 04 04 04 04 34 3, 34 3, 17 3, 34 3, 00 3, 00 3, 00 6, 51 6, 01 6, 51 7, 34 7, 51 7, 84 7, 34 ± ± Đồ án tốt nghiệp 90 :1 95 :5 98 :2 99 :1 30 30 27 31 31 31 30 43 43 43 43 43 43 43 43 27 27 28 27 28 28 28 27 21 20 21 21 21 20 21 21 12 12 11 13 13 13 12 23 23 26 25 24 24 25 24 12 11 11 12 11 12 11 12 12 13 11 13 12 13 11 12 48 45 46 48 45 48 46 46 45 45 46 45 46 46 45 25 26 27 25 27 26 27 26 20 19 21 20 21 20 21 21 33 32 34 34 32 34 32 34 34 35 34 35 34 35 34 12 12 12 12 12 12 12 11 12 14 13 13 13 13 13 13 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 03 04 04 04 04 04 04 07 08 07 06 08 07 06 08 01 01 01 02 01 02 01 00 01 01 01 01 01 01 01 01 5, 51 7, 84 8, 01 7, 34 8, 18 7, 68 8, 01 13 ,1 14 ,3 12 ,8 11 ,3 14 ,5 12 ,6 11 ,0 13 ,3 2, 83 3, 17 2, 67 3, 50 3, 17 4, 50 2, 00 1, 50 2, 17 2, 67 2, 33 1, 67 1, 83 1, 67 2, 50 2, 00 8 ± ± ± ± 14 Đồ án tốt nghiệp Bảng Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD 99 :1 98 :2 80 :2 85 :1 90 :1 95 :5 C 8o 8 M H ea X o 10 X 92 X 17 X X 82 84 X 12 Thí nghiệm Bảng giá trị OD thí nghiệm tối ưu hóa nhiệt độ trích ly anthocyanin từ gạo đen pH1 53 70 0n m m 06 02 50 90 06 02 90 90 07 03 0 07 02 20 50 06 02 0 07 03 30 00 06 02 07 02 10 40 07 03 55 0 13 04 30 60 12 04 13 04 10 40 13 04 12 04 N h i ệ50 pH45 53 70 5n 0n m m 04 03 10 50 04 03 50 90 04 03 0 04 03 20 40 04 03 0 04 03 00 30 04 03 05 03 00 10 04 04 0 07 03 10 50 07 03 0 06 03 90 10 07 03 06 03 H ệ A a ( s10 m 03 10 00 01 03 10 40 62 03 10 67 03 10 90 51 03 10 34 03 10 60 01 02 10 67 02 10 80 67 03 10 34 05 10 10 51 04 10 01 04 18 10 05 10 85 04 7 84 T B (m 54 ±0 76 40 ±0 91 15 Đồ án tốt nghiệp 13 12 13 13 60 12 12 12 12 0 12 12 11 12 60 12 65 08 70 08 09 00 08 08 30 08 08 90 08 70 06 90 07 0 05 0 04 04 04 04 04 04 04 04 05 0 04 04 30 05 01 80 02 0 02 10 01 02 10 01 02 20 01 02 50 02 06 07 06 06 06 07 0 06 07 06 06 07 06 90 07 0 05 90 06 06 90 06 06 70 06 05 90 06 04 90 05 03 03 03 0 03 03 03 03 03 03 04 0 03 03 10 03 01 90 02 02 60 02 0 02 50 01 02 20 02 03 00 02 10 05 10 0 04 10 05 10 05 10 04 10 04 10 04 10 03 10 04 10 05 10 03 10 04 10 50 03 10 02 10 90 02 10 02 10 60 02 10 02 10 00 02 10 03 10 00 02 10 02 10 50 02 34 18 01 68 68 34 51 34 18 68 17 51 34 84 67 34 00 34 00 01 67 17 00 31 ±0 66 23 ±0 85 27 ±0 16 Đồ án tốt nghiệp 07 20 07 06 07 06 07 02 90 02 02 03 0 02 03 0.046 02 0.047 90 03 0.050 02 0.045 03 0.048 03 0.051 02 10 02 02 02 03 03 01 10 10 10 10 10 34 67 67 17 17 00 Bảniple Range Tests g Mul od: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneou t Nhiet DoTri Nhiet DoTri Nhiet DoTri Nhiet DoTri Nhiet DoTri 8 9 4.23762 4.27937 5.54256 7.31033 8.40467 s Groups X X X X X Thí nghiệm Bảng giá trị OD thí nghiệm tối ưu hóa thời gian trích ly anthocyanin từ gạo đen T h i50 pH1 53 70 0n m m 07 03 50 10 06 02 90 80 06 03 0 07 02 pH45 53 70 5n 0n m m 04 03 20 50 03 02 90 80 03 03 0 04 02 H A a ệ ( m s10 g/ 03 17 10 70 95 03 01 05 10 03 34 10 03 34 T B (5 30 ±0 59 17 Đồ án tốt nghiệp 06 06 06 07 06 55 13 12 13 12 13 20 12 13 00 13 13 60 60 13 13 60 13 13 80 13 14 00 13 13 60 13 02 03 03 02 03 0 05 0 05 0 05 05 04 80 05 04 90 05 04 70 04 0 03 90 04 03 90 04 03 70 03 04 00 03 03 04 03 03 04 07 06 07 07 07 80 07 07 50 07 06 90 05 05 10 05 05 20 05 04 90 05 05 00 05 03 03 03 02 03 03 03 03 03 03 70 04 0 03 60 04 03 40 03 03 60 03 03 40 03 03 30 04 0 03 90 03 10 03 10 02 10 03 10 03 10 02 10 04 10 04 10 04 10 03 10 04 10 30 04 10 04 10 20 05 10 0 05 10 40 07 10 08 10 20 07 10 08 10 10 07 10 08 10 70 08 10 08 10 50 07 51 84 01 34 17 34 18 18 51 18 17 34 01 48 34 9 01 712 13 24 93 12 13 91 26 11 14 56 28 14 14 62 94 12 23 57 ±0 83 13 22 ±1 97 18 Đồ án tốt nghiệp 65 09 50 09 0 09 0 09 09 09 09 09 09 70 06 07 06 06 06 07 00 06 07 20 06 02 00 01 02 01 02 01 02 01 02 02 02 02 02 02 02 20 02 0 02 50 01 06 00 06 07 0 06 06 06 06 06 07 04 05 0 04 04 04 04 20 04 04 30 05 02 10 03 03 02 02 03 02 03 0 02 02 02 03 02 03 02 40 02 03 00 02 10 03 10 04 10 0 03 10 03 10 03 10 04 10 03 10 04 10 02 10 02 10 02 10 02 10 02 10 02 10 03 10 00 03 10 0 03 10 40 02 01 26 68 51 34 01 18 84 18 50 84 84 67 50 50 01 05 01 67 84 00 03 ±0 77 56 ±0 78 19 Đồ án tốt nghiệp Bảng 10 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD C ou 9 9 M H ea T oX gi 56 X T gi 30 X X T gi 03 T X gi 57 T 13 X gi Thí nghiệm Bảng 11 giá trị khối lượng nguyên liệu trước sau sấy đên khối lượng không đổi C oc C oc C oc M o 23 22 22 M 28 27 27 M 27 27 26 W (11 11 11 W tb( 11 Thí nghiệm Bảng 12 OD xác định hàm lượng anthocyanin để xác định giá trị IC50 mẫu pH1 53 70 5n 0n 64 33 64 33 65 33 pH4, 553 70 5n 0n 96 67 97 68 97 67 D F 10 010 010 A a ( m 45 02 .0 46 02 .7 46 02 a T B 46 00 ±0 Bảng 13 giá trị OD λ=516nm xác định hoạt tính kháng DPPH anthocyanin Blan k Vita mine C D 4.o F 62 10 08 06 54 03 02 02 60 22 77 01 51 01 Lần 2.153 0.068 A A 10 20 08 08 12 13 31 32 82 83 50 01 99 00 33 31 A 30 08 13 32 82 71 00 32 Lần 2.142 0.067 Q Q 199 299 97 96 88 87 63 63 69 55 29 55 40 39 0 L ần 14 06 Q 399 96 87 63 73 54 39 Trun g2.148 0.067 Qt lo b99 g0 .2 96 66 .8 87 48 .8 63 18 .4 01 57 55 14 -0 39 20 Đồ án tốt nghiệp 38 30 25 15 10 00 00 00 56 00 00 53 62 70 87 05 53 60 70 1 86 04 53 61 69 87 04 29 25 21 19 13 55 29 25 21 67 13 93 29 25 21 12 13 74 29 25 21 00 13 4 74 -0 0 -59 0 Phần trăm bắt gốc tự DPPH chất nghiên cứu tính theo cơng thức sau: Q(%) = [1 − (A − Ac) ] x100 (A0 − Ac) Trong đó: A độ hấp thu dung dịch chứa mẫu thử A0 độ hấp thu DPPH khơng có mẫu thử Ac độ hấp thu dung dịch chứa chất đối chiếu Q % gốc tự bị ức chế Bảng 14 giá trị OD xác định hoạt tính kháng DPPH Ascorbic acid Bl an C o10 50 10 00 00 50 10 05 Lần 1.642 A A 10 20 06 07 08 07 27 27 43 47 46 43 48 49 51 65 57 57 Lần 1.657 A Q 30 196 07 95 0 07 22 25 12 43 10 1 46 .1 43 14 54 37 55 63 Lần 1.598 Q Q 295 395 95 95 23 22 12 70 10 12 .1 12 29 - 16 39 04 Trun g1.632 Qt lo b95 g2 .8 00 95 69 22 00 11 69 10 00 90 81 02 21 Thí nghiệm Bảng15 khối lượng thể tích dịch trước sau quay m m o m 3m m 9m 12 m 15 m 18 K hố i 11 lư 19 17 16 15 14 13 12 K hố i -lư 81 65 50 43 32 17 10 T h ể -t 10 79 62 53 40 21 13 Bảng 16 giá trị OD hàm lượng anthocyanin dịch trước sau cô quay T h i p h út p h út p h út p h út 12 p h út 15 p h út 18 p h út pH1 53 70 5n 0n m m 0 64 33 64 33 65 33 64 32 64 32 64 33 64 32 64 32 64 32 63 32 64 32 63 32 63 32 63 32 63 32 63 31 63 31 63 31 63 31 63 31 63 31 pH4, 553 70 5n 0n m m 0 96 67 97 68 97 67 96 67 97 67 97 68 96 67 96 67 96 67 96 67 96 68 96 67 96 67 96 67 96 67 94 65 95 66 95 65 94 94 94 65 64 64 H D A a ệ F ( m s g/ ố1 10 00 10 02 50 00 02 10 67 00 10 02 67 26 10 02 09 26 10 02 46 26 02 10 67 61 10 02 97 61 02 10 50 61 02 10 70 87 02 10 13 87 10 02 44 87 10 02 82 49 10 02 10 57 49 02 10 .8 10 49 10 02 20 4 70 02 10 .3 18 70 02 10 .0 18 70 02 10 .8 25 64 10 02 .5 28 64 10 02 .0 26 64 02 a T B ( 62 0± 74 2± 06 2± 13 6± 10 65 ±0 19 86 ±1 26 95 ±1 Bảng 17 OD hiệu suất thu hồi anthocyanin dịch trích ly sau cô quay T h i p h út p h út p h pH1 53 70 4n 0n m m 0 64 33 64 33 65 33 64 32 64 32 64 33 64 32 64 32 pH4, 70 53 4n 0n m m 0 96 67 97 68 97 67 96 67 97 67 97 68 96 67 96 67 D A a ( F m g/ 10 02 50 10 02 10 67 02 67 10 02 10 84 02 10 34 02 10 50 02 34 10 02 67 a H T i B ệ u ( 10 62 0 ±0 99 56 ±0 95 39 p h út 12 p h út 15 p h út 18 p h út 64 63 64 63 63 63 63 63 63 63 63 63 63 32 32 32 32 32 32 32 31 31 31 31 31 31 96 96 96 96 96 96 96 94 95 95 94 94 94 67 67 68 67 67 67 67 65 66 65 65 64 64 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 02 02 02 02 02 02 02 02 02 02 02 02 02 17 34 50 17 84 34 17 34 84 00 34 67 50 34 ±0 11 ± 06 3 50 ± 94 89 88 76 Bảng 18 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD C M H ou ea oX 62 X 3ph 74 6ph X ph 06 X ph 10 13 12 X ph 19 15 X ph 32 18 X ph Bảng 19 OD khảo sát khả kháng DPPH dịch trích ly anthocyanin từ gạo đen trước sau cô quay Lần Blan 0.612 k Vita 0.118 mine T h Co A ời (mg/ gi 4.620 ±0.09 37 3p 4.564 p ±0.25 4.397 37 p ±0.25 4.342 37 p ±0.16 37 Lần Lần Trung bình 0.633 0.626 0.624 0.12 0.066 0.122 A2 0.378 0.378 0.377 0.378 A 37 37 37 37 % Q 49 49 49 48 %Q2 % Q 48.97 49 49.00 49 449.20 49 349.00 49 4 Qt b 49 49 49 49 12 p 15 p 18 p 11 61 34 38 39 42 38 38 42 38 39 42 47 45 39 48 47 38 48 45 39 48 45 39 Bảng 20 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD 18 ph 15 ph 12 9ph 6ph 3ph 0ph ph C 3ou 3 3 3 M H ea X o 39 45 X X 48 49 X 49 X 49 X 49 X ... giới nghiên cứu khai thác chất màu từ thiên nhiên sử dụng thực phẩm, chúng có tính an tồn cao cho người sử dụng Vì đề tài nghiên cứu thu nhận anthocyanin từ phế liệu gạo đen hoạt tính chống oxy hóa. .. hợp để trích ly anthocyanin từ gạo đen 41 2.3.7 Thí nghiệm 7: Xác định thời gian thích hợp trích ly anthocyanin từ gạo đen _ 43 2.3.8 Thí nghiệm 8: Xác định hoạt tính kháng oxy anthocyanin 45... Hơn nữa, theo nghiên cứu Trung tâm Nông nghiệp Đại học bang Louisiana Baton Rouge, gạo đen chứa nhiều chất chống oxy hóa anthocyanin loại gạo khác Hình 1.1 Gạo đen 1.1.2 Thành phần hóa học Bảng