CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH DỊCH ỐI

CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH DỊCH ỐI 1. Dịch ối Khái niệm: Dịch ối là dịch trong suốt nằm trong túi ối, màu vàng nhạt, bao quanh phôi thai trong quá trình mang thai. Dịch ối là sản phẩm của trao đổi chất của thai nhi => các thành phần có trong dịch ối có thể cung cấp thông tin về quá trình trao đổi chất diễn ra trong suốt quá trình phôi phát triển. Nguồn gốc và sản phẩm tạo ra: + Nước ối được tạo ra trong tử cung của mẹ trong suốt 13 thời gian đầu và ở thời điểm đầu của gđ thứ 2 của thai kỳ, đến khi thận của bé hoàn thiện để đảm nhiệm chức năng của mình. + Em bé sd dịch để thở và sau đó bài tiết dưới dạng nước tiểu, duy trì tuần hoàn liên tục. Phần lớn nước tiểu tạo ra trong dịch ối được trao đổi qua nhau thai và lọc bằng thận của mẹ. Chức năng: + Là nơi chứa và cho phép bào thai vận động + Ổn định nhiệt độ để bảo vệ bào thai khỏi những thay đổi về nhiệt độ môi trường. + Cho phép phổi phát triển một cách phù hợp + Trao đổi nước và chất, cho phép diễn ra sự trao đổi chất dịch giữa bào thai và cơ thể mẹ. + Giúp phát triển đồng đều các cơ quan và cơ thể của bé + Hỗ trợ phát triển của xương và cơ. Thể tích ối: + Lượng nước ối tăng dần trong quá trình mang thai, đạt cực đại ở giai đoạn thứ 3 của thai kỳ (khoảng gần 1L) và sau đó giảm dần đến trước khi sinh. + Thể tích nước ối tỷ lệ thuận với sự phát triển của phôi (tuần 127) • Từ tuần 10 20 tăng từ 25 ml lên gần 400 ml. • Từ tuần thứ 8, khi thận của thai nhi bắt đầu hoạt động, thì nước tiểu của thai nhi bắt đầu xuất hiện trong dịch ối. + Sau đó, mối quan hệ tỷ lệ thuận này dừng lại khi thai nhi ở tuần 28 và lượng nước ối khoảng 800 ml. Sau đó lượng nước ối giảm dần, chỉ còn khoảng 400 ml ở tuần thai thứ 42  Thể tích nước ối cực đại ở cuối gđ 2, đầu gđ 3; sau đó giảm trong gđ 3 Phân loại: + Đa ối (8001500ml) => khi đa thai, dị tật bẩm sinh hoặc tiểu đường thai kỳ + Thiểu ối (< 250ml) => khi cuối thai kỳ, màng ối bị vỡ, tử cung giảm hoạt động hoặc có bất thường ở thai nhi. Thành phần: + Dich ối = Nước + Các chất hòa tan + Tương tự huyết tương của mẹ + một lượng nhỏ tb phôi thai được thải ra từ da, hệ thống tiêu hóa và tiết niệu + Chứa các chất sinh hóa tạo ra từ thai nhi (bilirubin, lipid, enzym, chất điện giải, các hợp chất chứa nitơ, protein) + Thành phần hóa học của dịch ối bắt đầu thay đổi khi nước tiểu của thai nhi được hình thành. + Nồng độ của creatinin, ure, axit uric tăng; Nồng độ của glucose, protein lại giảm khi thận của thai nhi bắt đầu hoạt động. 2. Các phương pháp lấy mẫu Chỉ định: + Mẹ > 35 tuổi lúc mang thai + Tiền sử gia đình có người bị bất thường NST. + Cha mẹ có tổ hợp NST bất thường hoặc bất thường chuyển hóa + Phụ nữ sảy thai ≥ 3 lần. + Đánh giá sự hoàn thiện của phổi Chọc ối Chọc nhau (CVS) Lấy máu thai nhi (FBS) Là pp chọc kim qua túi ối để lấy dịch, qt thường được sử dụng cùng siêu âm Ở tuần thai 16 Lấy tối đa 30ml; 23ml đầu có thể bị nhiễm với máu mẹ, dịch và tb mô của mẹ Dịch => phân lập các tb biểu mô thai => nuôi cấy tb => làm NST đồ, nhuộm FISH và xét nghiệm ADN Thu mẫu ở gđ đầu thai kỳ (tuần 911) Lấy 1025 mg mẫu mô dùng để phân tích tb học và phân tích ADN Thu mẫu ở gđ 18 tuần trở về trước (thường là 1113 tuần) Sp thu là mẫu máu của thai nhi => để phân tích tb học và phân tích AND. 3. Các phương pháp phân tích của lấy mẫu xâm lấn Phương pháp Đặc điểm XN sinh hóa Xét nghiệm Giá trị bình thường Ý nghĩa Bilirubin 0.026 mgdl Tan máu sơ sinh LS 2.0 Sự hoàn thiện của phổi thai Phosphatidyl glycerol Có Sự hoàn thiện của phổi thai Creatinin 1.34.0 mgdl Tuổi thai AFP 4 mgdl Dị tật ống thần kinh NST đồ Siêu âm có bất thường, cha mẹ muốn kiểm tra bất thường NST Miễn dịch Nhóm máu Rh, kháng nguyên tiểu cầu Di truyền Rối loạn Hemoglobin, hội chứng chuyển hóa và thiếu hụt enzyme Tình trạng phát triển thai Chầm phát triển thai Phân tích AND PCR: kĩ thuật khuếch đại AND Southern Blotting Kĩ thuật Microarray 4. Các phương pháp phân tích lấy mẫu không xâm lấn Kĩ thuật tiền làm tổ: ứng dụng để phát hiện các bất thường di truyền trong những phôi được tạo ra từ TTTON trước khi được chuyển cho bệnh nhân. Chẩn đoán trước sinh ko xâm lấn NIPT: NIPT là xét nghiệm sàng lọc trước sinh không xâm lấn (còn gọi là xét nghiệm cell free DNA – cfDNA) giúp phát hiện các hội chứng liên quan đến bất thường về số lượng NST (thể dị bội) ở thai nhi qua máu mẹ, có kết quả chính xác cao. Trong quá trình mang thai, một lượng ADN của thai nhi được giải phóng và di chuyển tự do trong máu mẹ , người ta gọi các ADN này là ADN tự do (cfDNA). Với sự ra đời của máy giải trình tự ADN thế hệ mới và hệ thống siêu máy tính, các nhà khoa học Mỹ đã phát triển phương pháp phân tích cfDNA để chẩn đoán các bệnh di truyền của thai nhi mà không cần phải thực hiện các biện pháp can thiệp xâm lấn.

CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH DỊCH ỐI Dịch ối - Khái niệm: Dịch ối dịch suốt nằm túi ối, màu vàng nhạt, bao - - quanh phơi thai q trình mang thai Dịch ối sản phẩm trao đổi chất thai nhi => thành phần có dịch ối cung cấp thơng tin q trình trao đổi chất diễn suốt q trình phơi phát triển Nguồn gốc sản phẩm tạo ra: + Nước ối tạo tử cung mẹ suốt 1/3 thời gian đầu thời điểm đầu gđ thứ thai kỳ, đến thận bé hoàn thiện để đảm nhiệm chức + Em bé sd dịch để thở sau tiết dạng nước tiểu, trì tuần hồn liên tục Phần lớn nước tiểu tạo dịch ối trao đổi qua thai lọc thận mẹ - Chức năng: + Là nơi chứa cho phép bào thai vận động + Ổn định nhiệt độ để bảo vệ bào thai khỏi thay đổi nhiệt độ môi trường + Cho phép phổi phát triển cách phù hợp + Trao đổi nước chất, cho phép diễn trao đổi chất dịch bào thai thể mẹ + Giúp phát triển đồng quan thể bé + Hỗ trợ phát triển xương - Thể tích ối: + Lượng nước ối tăng dần trình mang thai, đạt cực đại giai đoạn thứ thai kỳ (khoảng gần 1L) sau giảm dần đến trước sinh + Thể tích nước ối tỷ lệ thuận với phát triển phơi (tuần 1-27) • Từ tuần 10 -20 tăng từ 25 ml lên gần 400 ml • Từ tuần thứ 8, thận thai nhi bắt đầu hoạt động, nước tiểu thai nhi bắt đầu xuất dịch ối + Sau đó, mối quan hệ tỷ lệ thuận dừng lại thai nhi tuần 28 lượng nước ối khoảng 800 ml Sau lượng nước ối giảm dần, khoảng 400 ml tuần thai thứ 42  Thể tích nước ối cực đại cuối gđ 2, đầu gđ 3; sau giảm gđ - Phân loại: + Đa ối (800-1500ml) => đa thai, dị tật bẩm sinh tiểu đường thai kỳ + Thiểu ối (< 250ml) => cuối thai kỳ, màng ối bị vỡ, tử cung giảm hoạt động có bất thường thai nhi - Thành phần: + Dich ối = Nước + Các chất hòa tan + Tương tự huyết tương mẹ + lượng nhỏ tb phôi thai thải từ da, hệ thống tiêu hóa tiết niệu + Chứa chất sinh hóa tạo từ thai nhi (bilirubin, lipid, enzym, chất điện giải, hợp chất chứa ni-tơ, protein) + Thành phần hóa học dịch ối bắt đầu thay đổi nước tiểu thai nhi hình thành + Nồng độ creatinin, ure, axit uric tăng; Nồng độ glucose, protein lại giảm thận thai nhi bắt đầu hoạt động Các phương - Chỉ định: pháp lấy mẫu + Mẹ > 35 tuổi lúc mang thai + Tiền sử gia đình có người bị bất thường NST + Cha mẹ có tổ hợp NST bất thường bất thường chuyển hóa + Phụ nữ sảy thai ≥ lần + Đánh giá hoàn thiện phổi Chọc ối Chọc (CVS) Lấy máu thai nhi (FBS) -Là pp chọc kim qua túi ối để lấy dịch, qt thường sử dụng siêu âm - Ở tuần thai 16 - Lấy tối đa 30ml; 2-3ml đầu bị nhiễm với máu mẹ, dịch tb mô mẹ - Dịch => phân lập tb biểu mô thai => nuôi cấy tb => làm NST đồ, nhuộm FISH xét nghiệm ADN - Thu mẫu gđ đầu thai kỳ (tuần 9-11) - Lấy 10-25 mg mẫu mô dùng để phân tích tb học phân tích ADN - Thu mẫu gđ 18 tuần trở trước (thường 11-13 tuần) - Sp thu mẫu máu thai nhi => để phân tích tb học phân tích AND Các phương pháp phân tích lấy mẫu xâm lấn Phương pháp XN sinh hóa Đặc điểm Xét nghiệm Bilirubin Giá trị bình thường 0.026 mg/dl Ý nghĩa Tan máu sơ sinh L/S Phosphatidyl glycerol Creatinin AFP NST đồ Miễn dịch Di truyền Tình trạng phát triển thai Phân tích AND Kĩ thuật Microarray 2.0 Sự hồn thiện phổi t Có Sự hồn thiện phổi t 1.3-4.0 mg/dl mg/dl Tuổi thai Dị tật ống thần kinh Siêu âm có bất thường, cha mẹ muốn kiểm tra bất thường NST Nhóm máu Rh, kháng nguyên tiểu cầu Rối loạn Hemoglobin, hội chứng chuyển hóa thiếu hụt enzyme Chầm phát triển thai - PCR: kĩ thuật khuếch đại AND Southern Blotting Các phương pháp phân tích lấy mẫu khơng xâm lấn - Kĩ thuật tiền làm tổ: ứng dụng để phát bất thường di truyền phôi tạo từ TTTON trước chuyển cho bệnh nhân - Chẩn đoán trước sinh ko xâm lấn NIPT: NIPT xét nghiệm sàng lọc trước sinh khơng xâm lấn (còn gọi xét nghiệm cell free DNA – cfDNA) giúp phát hội chứng liên quan đến bất thường số lượng NST (thể dị bội) thai nhi qua máu mẹ, có kết xác cao Trong trình mang thai, lượng ADN thai nhi giải phóng di chuyển tự máu mẹ , người ta gọi ADN ADN tự (cfDNA) Với đời máy giải trình tự ADN hệ hệ thống siêu máy tính, nhà khoa học Mỹ phát triển phương pháp phân tích cfDNA để chẩn đốn bệnh di truyền thai nhi mà không cần phải thực biện pháp can thiệp xâm lấn  ... trước (thường 11-13 tuần) - Sp thu mẫu máu thai nhi => để phân tích tb học phân tích AND Các phương pháp phân tích lấy mẫu xâm lấn Phương pháp XN sinh hóa Đặc điểm Xét nghiệm Bilirubin Giá trị bình... Chọc ối Chọc (CVS) Lấy máu thai nhi (FBS) -Là pp chọc kim qua túi ối để lấy dịch, qt thường sử dụng siêu âm - Ở tuần thai 16 - Lấy tối đa 30ml; 2-3ml đầu bị nhiễm với máu mẹ, dịch tb mô mẹ - Dịch. .. kháng nguyên tiểu cầu Rối loạn Hemoglobin, hội chứng chuyển hóa thiếu hụt enzyme Chầm phát triển thai - PCR: kĩ thuật khuếch đại AND Southern Blotting Các phương pháp phân tích lấy mẫu không xâm