xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho dược liệu cây muồng trâu

xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho dược liệu cây muồng trâu

Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L LỜI NĨI ĐẦU  Việt Nam nước nhiệt đới có đặt điểm khí hậu địa lý nhiều vùng khác nhau, có nguồn tài nguyên thiên nhiên phong phú đa dạng Việt Nam lại có y dược học cổ truyền dân tộc, có truyền thống từ lâu đời, nhân dân ta dùng dược liệu thiên nhiên sẳn có xung quanh để làm thuốc, thực phẩm bảo vệ sức khỏe Hiện nay, nước ta có mục tiêu phát triển thuốc cổ truyền theo hướng đại, nhu cầu sử dụng dược liệu lớn Trên thị trường Việt Nam lúc nhiều dược liệu bị giả mạo, chất lượng không đảm bảo, gây hại đến sức khỏe cho người sử dụng Ngoài ra, việc sản xuất mua bán loại thuốc có nguồn gốc dược liệu gặp nhiều khó khăn khơng có tiêu chuẩn chất lượng cụ thể Vì phải xây dựng hệ thống quản lý chất lượng dược liệu để đảm bảo tính an tồn, hiệu quả, chất lượng cho người sử dụng Dược liệu nguyên liệu cho việc bán tổng hợp số thuốc hóa dược Tuy nhiên dược liệu tiêu chuẩn hóa đưa vào chuyên luận Do việc tiêu chuẩn hóa dược liệu cần quan tâm để góp phần nâng cao giá trị sử dụng dược liệu Muồng trâu dược liệu gần gủi với chúng ta, nhiều cơng dụng làm thuốc góp phần chăm sóc sức khỏe đảm bảo nhận thức sử dụng an toàn Muồng Trâu cho nhân dân Nên việc đưa tiêu để làm sở xây dựng tiêu chuẩn chất lượng Muồng Trâu cần thiết Trong phạm vi báo cáo này, em xin trình bày “xây dựng tiêu chuẩn chất lượng” cho dược liệu Muồng Trâu Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L CHƢƠNG I: TỔNG QUAN ĐỊNH DANH DƢỢC LIỆU: Tên khác: Muồng lác Tên khoa học: Senna alata L., họ Đậu (Fabaceae) ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BỐ: Cây nhỏ cao 1,50m có đến 3m, thân gổ mềm có đường kính 10 - 12cm Lá kép lơng chim chẵn, dài 30 - 40cm, có - 14 đơi chét Lá chét hình trứng, gốc đỉnh tròn Đơi chét (phía cuống) nhỏ cách đơi chét thứ hai quãng xa so với quãng cách đôi chét sau Lá chét dài đến 12 - 14cm, rộng - 6cm Cụm hoa mọc thành dày đặc nhiều hoa Bông dài 30 - 40cm Hoa màu vàng sẫm Quả loại đậu dài - 16cm rộng 15 - 17mm, có hai cánh suốt theo chiều dọc Quả có tới 60 hạt Cây mọc hoang trồng nhiều nơi, có nhiều miền Nam miền Trung BỘ PHẬN DÙNG – THU HÁI – CHẾ BIẾN: Lá (Folium Senna alatae), quả, thân Thu hoạch vào mùa hạ, hái lấy lá, phơi âm can, sấy nhẹ hay đến khô TÁC DỤNG DƢỢC LÝ: Nghiên cứu gần nước cho thấy muồng trâu có tác dụng kháng nấm kháng khuẩn, cho có triển vọng làm thuốc điều trị nhiễm trùng hội cho bệnh nhân AIDS Cao muồng trâu có tác dụng bảo vệ gan tốt, thể tác dụng làm giảm có ý nghĩa thống kê 73,58 % hoạt độ ALT 31,32 % hàm lượng bilirubin chuột nhắt trắng bị gây viêm cấp CCl4 Cao nước muồng trâu có tác dụng ức chế xơ gan, làm giảm 12,64 % hàm lượng collagen gan chuột cống trắng bị gây xơ gan CCl4 ( P < 0,01 ) Cao nước muồng trâu có tác dụng chống viêm mạn tốt, làm giảm 26,6 % trọng lượng u hạt chuột cống trắng bị gây amian (P < 0,05 ) Cao nước muồng trâu có tác dụng lợi mật, làm tăng 39,64 % lượng mật sinh chuột nhắt trắng Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L Cao nước muồng trâu có triển vọng nghiên cứu làm thuốc hỗ trợ điều trị viêm gan cấp mãn tính THÀNH PHẦN HĨA HỌC: - Trong lá, rễ có chứa dẫn chất anthranoid Trong có chất sau phân lập xác định: chrysophanol, aloe emodin, rhein, emodin - Trong rễ có dẫn chất anthraquinon phân lập: (Tiwari Ram.D Yadava D.P 1971): 1,3,8-OH, 2-CH3 -anthraquinon; 1,5-OH, 2-CH3 , 8-OCH3, 3-O-glucosyl anthraquinon - Rai K N; Prasad S N chiết xuất phân lập 1,5- dihydroxy- 2- methyl anthraquinon- 1,0- netinosid từ cành muồng trâu - Hemlata Kalidhar chiết xuất anthron từ cành xác định 3.formyl, 1,6,8,10- tetrahydroxy anthron Sau đó, Kelli T Rosa, Ma Zeukun, KuWei xác định lại cấu trúc alatinon 1,6,8- trihydroxy- 3- methyl anthraquinon Như alatinon thực chất emodin - Hemlata Kalidhar S.B phân lập anthraquinon đặt tên alatonan có cấu trúc 2.formyl, 1,3,8- trihydroxy anthraquinon Từ dịch chiết cồn muồng trâu, planichamy S.và Nagarajan S tách riêng flavonglucosid kaempferol - – O – sophorosid Chất có hoạt tính chống viêm mạnh - Hai chất flavonosidglucosid Gupta Dipti; Singh J tách từ hạt muồng trâu chrysoeriol - – O - (2’’ – O - β - D – manno pyranosid) - β - D –allopyranosid rhamnetin – – O – (2’’ – O - β - mannoipyranosyl) - β - D – allopyrannosid - Trong hạt muồng trâu có khoảng 15% protein Các acid béo không no khoảng 60% , lượng acid béo toàn phần chủ yếu gồm acid béo 18 carbon Ngồi ra, có chất Ca, Mg, Na, Mn, Ca chiếm tỷ lệ cao (17mg/100g) Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L ĐỊNH T NH- THAM KHẢO A Lấy g bột lá, thêm 10 ml dung dịch acid sulfuric 25% (TT) đun sôi phút, để nguội, lọc vào bình gạn Cho vào dịch lọc ml cloroform (TT), lắc Để lắng, gạn lấy lớp cloroform (TT), thêm ml dung dịch natri hydroxyd 10% (TT), lắc, để lắng, lớp kiềm có màu hồng đỏ B Phương pháp sắc ký lớp mỏng: Bản mỏng: Silica gel G Dung môi khai triển: Cloroform- aceton - benzen (4 : : 3) Dung dịch thử: Lấy g bột đun cách thủy với 20 ml ethanol 96% (TT) 30 phút, để nguội, lọc, để bay đến cắn khô Cắn thêm vào 10 ml nước ml dung dịch acid hydrocloric 10% (TT) đun cách thủy 30 phút, để nguội sau lắc với 20 ml ether ethylic (TT) lần, dịch ether bay đậm đặc làm dung dịch thử Dung dịch đối chiếu: Pha dung dịch chrysophanol 0,1% ethanol 96% (TT) Nếu khơng có chất đối chiếu, dùng g bột Muồng trâu (mẫu chuẩn), chiết mẫu thử Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 l dung dịch thử dung dịch đối chiếu Sau triển khai, để khô mỏng khơng khí, quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 365 nm amoniac Trên sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết có màu sắc Rf với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Độ ẩm: Không q 13% (Phụ lục 12.13) TÍNH VỊ - CƠNG NĂNG: Tân, ôn Vào kinh can, đại trường CÔNG DỤNG – LIỀU DÙNG – BÀI THUỐC: Nhuận tràng, lợi gan mật, tiêu độc, tiêu viêm, sát trùng, ngứa Chủ trị: Táo bón (dùng sống), viêm gan, da vàng (dùng thc khơ) Lượng thích hợp, rửa sạch, giã nát lá, lấy nước cốt bôi, ngày lần, lấy tươi vò, chà sát vào chỗ bị hắc lào Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L MỘT SỐ BÀI THUỐC: - Chữa táo bón: Muồng trâu 20g + Chút chít 20g + Đại hoàng 4-6 g Sắc uống ngày - Chữa hắc lào: + Lá muồng trâu tươi giã nát, lấy nước bơi thêm muối dịch chanh tác dụng mạnh + Lá muồng trâu đem nghiền nát Đổ vào nước đun sơi có pha natri fluorid, để yên 24h, lọc qua vải Thêm vào bã cồn 900, ngâm 24h ép lấy cồn Hợp cồn nước lại, có tới độ cao mềm Cao bảo quản khơng bị mốc có natri fluorid Có thể chế thuốc 1/5 từ cao - Chữa thấp khớp: Muồng trâu 40g + Vòi voi 30 g +Tang ký sinh, Quế chi, Dứa dại, dễ Cỏ xước, vị 20g Sắc uống ngày thang 7-10 ngày - Chữa viêm thần kinh tọa: Muồng trâu 24g + Cây lức 20g + Thần thơng, rễ Nhàu, Kiến cò, ( vị 12g,) + Đỗ trọng 8g Sắc uống ngày thang - Chữa ban trái (ban chẩn): Lá Muồng trâu 8g + Hương bài10g + Đọt Tre non, Ké đầu ngựa + Mùi tàu, Lức.( vị 8g,) + Mức hoa trắng 6g + Vỏ Quýt 4g + Đăng tâm 2g, sắc uống ngày thang KIÊNG KỲ: Phụ nữ có thai khơng nên dùng Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L SẢN PHẨM CÓ CHỨA MUỒNG TRÂU TRÊN THỊ TRƢỜNG HOÀN TIÊU VIÊM Thành phần: Cỏ mực, giấp cá, hoàng đằng, kinh giới, dâu, lốt, mã đề, muồng trâu, nghệ, ngãi cứu, sâm đại hành Công dụng: Tiêu độc, trị mụn nhọt, mẫn ngứa, dị ứng phối hợp phòng ngừa điều trị bệnh trĩ Quy cách: Lọ 40 g viên hồn cứng TRÀ TIÊU ĐỘC BỒ CƠNG ANH Thành phần: Sài đất, hương nhu, kinh giới, thổ phục linh, muồng trâu, bồ công anh Công dụng: Thanh nhiệt, tiêu độc, trị mẫn ngứa, mề đay, mụn nhọt, viêm nhiễm, dị ứng Quy cách:Trà túi lọc Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L CHƢƠNG II: TIÊU CHUẨN CHẤT LƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ Để kiểm nghiệm dược liệu hay sai hay để xây dựng tiêu chuẩn cho dược liệu khơng thể dựa vào mô tả đủ,mà cần phải dựa vào đặc điểm vi học,các số vật lý,định tính,thử tinh khiết, định lượng số nội dung khác Cấu tạo giải phẫu quan thực vật đặc điểm quan trọng kiểm nghiệm dược liệu.Trong phần lớn trường hợp,hình dạng cấu trúc vách tế bào có ý nghĩa quan trọng khảo sát vi học.Vì vậy,khi quan sát mẫu người ta thường loại bỏ tế bào chất,nhuộm màu màng tế bào để việc quan sát dễ dàng Đối với mẫu vi phẫu: a.Chọn mẫu:dùng mẫu tươi b.Cắt vi phẫu:dùng lưỡi lam cắt thật mỏng để nhuộm Khảo sát bột dƣợc liệu: Mỗi dược liệu có đặc điểm mô học đặc trưng,chúng thể phần qua bột dược liệu.Những đặc điểm dùng để phân biệt dược liệu với dược liệu khác,để xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm Khảo sát bột dược liệu kính hiển vi để tìm đặc điểm vi học đặc trưng bột dược liệu,giúp cho việc định danh,xác định độ tinh khiết,phân biệt dược liệu với dược liệu dễ bị nhầm lẫn phát giả mạo có Cách lên tiêu bột soi: Phương pháp thường:Nhỏ 1-2 giọt chất lỏng để soi (thường nước) nhỏ lên lame.Lấy lượng bột dược liệu khoảng đầu tăm cho vào giọt nước đó,khuấy kỹ.Đậy lamelle lên lame,dùng ngón tay di nhẹ lame cho bột phân tán đều.Dùng giấy lọc thấm nhanh nước thừa mép lamelle Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L Phân tích sơ thành phần hóa thực vật Thành phần hóa học dược liệu phức tạp thường khơng thể biết cách tường tận.Vì thế,thơng thường việc nghiên cứu thành phần hóa học dược liệu thường bắt đầu việc xác định nhóm hợp chất thường gặp thực vật phản ứng hóa học Trong phân tích thành phần hóa thực vật,người ta thường sử dụng phản ứng hóa học đặc trưng cho nhóm hợp chất để xác định có mặt hợp chất nguyên liệu thực vật.Việc phân tích tiến hành theo bước: 4.1 Phân tích sơ bộ: Dịch chiết phân thành vài phân đoạn đơn giản cách sử dụng qui trình chiết đơn giản,trong điều kiện định (dung mơi,pH mơi trường…).Định tính nhanh hợp chất phân đoạn thuốc thử chung 4.2 Định tính xác định: Dùng qui trình chiết đặc hiệu hơn,nhiều phản ứng đặc hiệu để xác định có mặt nhóm hợp chất Quy trình dùng để xác định nhanh số nhóm hợp chất thường gặp nguyên liệu thực vật phản ứng hóa học dựa nguyên tắc: Phân tách hỗn hợp chất nguyên liệu thành phân đoạn đơn giãn theo độ phân cực tăng dần:kém phân cực,phân cực trung bình phân cực mạnh Dùng phản ứng hóa học đặc trưng (thường phản ứng kết tủa,phản ứng màu) để phát nhóm hợp chất có dịch chiết Yêu cầu chung phản ứng hay thuốc thử sử dụng định tính nhóm hợp chất chúng phải đặc hiệu,nhạy dễ phát hiện.Chúng phải khơng hay bị ảnh hưởng có mặt hợp chất khác có phản ứng Chiết tách hỗn hợp chất có nguyên liệu thực vật thành phân đoạn với dung môi ether etylic, ethanol nước Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L CHƢƠNG III: THỰC NGHIỆM I MÔ TẢ THỰC VẬT: Cây nhỏ cao 1,50m có đến 3m, thân gổ mềm Lá kép lơng chim chẵn Lá chét hình trứng, gốc đỉnh tròn Đơi chét (phía cuống) nhỏ cách đơi chét thứ hai quãng xa so với quãng cách đôi chét sau Cụm hoa mọc thành dày đặc nhiều hoa Hoa màu vàng sẫm Quả loại đậu dài, có hai cánh suốt theo chiều dọc Quả có tới 60 hạt Cây muồng trâu Quả loại đậu Cây nhỏ, thân gỗ mềm Lá hình trứng Quả có nhiều hạt Lá kép lơng chim chẳn Hoa mọc thành dày đặc nhiều hoa Rễ muồng trâu Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L II ĐẶC ĐIỂM VI HỌC: BÓC TÁCH BIỂU BÌ: 1.1 Chọn mẫu: Lá Xé dùng lưỡi lam cạo, tách lớp 1.2 Các cấu tử quan sát được: Lơng che chở đơn bào, lỗ khí kiểu song bào, lông tiết chân đa đầu đa bào Lông tiết đầu đa bào Lông che chở đơn bào Lỗ khí kiểu song bào Cutin lồi ĐẶC ĐIỂM VI PHẪU: 2.1.VI PHẪU: Lá, thân rễ  Lá: biểu bì trên, nhu mơ diệp lục hình giậu, cutin lồi, mơ mềm, biểu bì  Thân: biểu bì, mơ mềm vỏ, libe 1, gỗ 1, mơ mềm tủy  Rễ: bần, libe 2, gỗ Cắt ngang phiến lá, đoạn rễ non, dùng phương pháp nhuộm kép carmin-lục iod Pha thuốc nhuộm: Dung dịch lục iod 0.1% Hòa tan 0.1g lục iod 90 ml nươc cất, thêm 10 ml cồn 90% Thuốc nhuộm lục iod nhuộm xanh mô gỗ bần Dung dịch carmin 1%: Carmin số 40: 1,0g Phèn nhôm kali: 5,0g Phenol: 0.5g Nước cất: 100g Trang 10 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L 2.1.3 Cấu tạo vi phẫu rễ: Bần Libe Gỗ Cấu tạo rễ 2.2 SOI BỘT: Bằng cảm quan: bột sau xay đem rây tương đối mịn, khơ, bột có mùi thơm đặc trưng, bột rễ màu vàng nâu, bột thân màu xanh, bột màu xanh đậm bột thân bột -Soi kính hiển vi, tìm đặc điểm vi học đặc trưng - Chuẩn bị bột: dược liệu phơi khô, xay thành bột mịn - Cách làm tiêu bản: nhỏ giọt chất lỏng ( thường nước) lên lame, lấy lượng bột khoảng đầu tăm cho vào giọt nước, khuấy kỹ Đậy lamelle lên lame, cầm lamelle tạo với lame góc khoảng 300- 450 sau hạ từ từ xuống để hạn Trang 14 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L chế bọt khí, dùng ngón tay di nhẹ lam để bột phân tán dùng giấy lọc thấm nước thừa có Đem quan sát kính hiển vi, vật kính 10x để xem tổng quát, chuyển sang vật kính 40x để xem chi tiết Các cấu tử quan sát được: Mạch chấm đồng tiền, Tinh thể Calxi Oxalat hình khối mạch vòng Mạch chấm đồng tiền Tinh thể Calxi Oxalat hình khối mạch vòng PHÂN T CH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT: 3.1 Nguyên tắc: Chiết tách hỗn hợp chất có nguyên liệu thực vật thành phân đoạn theo độ phân cực tăng dần: phân cực, phân cực trung bình phân cực mạnh cách chiết nguyên liệu với dung môi: ether ethylic, ethanol (hay methanol) nước Xác định nhóm hợp chất dịch chiết phản ứng đặc trưng Trang 15 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L 3.2 Chuẩn bị dịch chiết: MẪU THỬ Ether ethylic/soxhlet Bã dược liệu Dịch chiết ether Ethanol/hồi lƣu Dịch chiết cồn Bã dược liệu HCl 10% /CT Chiết lại ether Nƣớc/cách thủy Dịch chiết cồn thủy phân Dịch chiết nƣớc Bã dược liệu HCl 10% /CT Chiết lại ether Dịch chiết nước thủy phân Trang 16 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L 3.3 Xác đinh nhóm có hợp chất 3.4 Xác định chất tan dịch chiết ether: Dịch ether dùng để xác định nhóm hợp chất sau: Chất béo, alkaloid, tinh dầu, counmarin, carotenoid, anthraquinone, triterpenoid, flavonoid 3.5 Xác định chất tan dịch chiết cồn: Dịch chiết cồn không thủy phân dùng để xác định nhóm hợp chất sau: Alkaloid, tannin, counmarin, saponin, glycoside tim, chất khử, flavonoid, acid hữu  Dịch chiết cồn thủy phân đƣợc dùng để xác định nhóm hợp chất sau: Triterpenoid thủy phân, glycoside tim, counmarin, flavonoid, anthraquinone 3.6 Xác định chất tan dịch chiết nƣớc: Dịch chiết nước không thủy phân dùng để xác định nhóm hợp chất sau: Alkaloid, saponoside, glycoside tim, chất khử, flavonoid, acid hữu cơ, tannin, polyuronic  Dịch chiết nƣớc thủy phân đƣợc dùng để xác định nhóm hợp chất sau: Triterpenoid thủy phân, anthraquinone, alycoside tim, flavonoid Tiến hành: Chiết dịch chiết ether: Chiết 10g bột dược liệu ether dầu lắc bình nón 20 phút.Chiết dịch chiết ether sau bốc khơng để lại lớp mờ mặt kính đồng hồ Gộp dịch chiết, lọc lại đến khoảng 50ml dịch chiết ether Chiết dịch chiết cồn: Bã dược liệu chiết tiếp cồn cao độ bình nón đun hồi lưu 20 – 30 phút bếp cách thủy, thực – lần Gọp dịch chiết, lọc cô lại đến khoảng 50ml dịch chiết cồn Chiết dịch chiết nước: bã dược liệu sau chiết cồn đem chiết nóng với nước bình nón bếp cách thủy sôi Gọp dịch chiết, để nguội, lọc để thu khoảng 50ml dịch chiết nước Trang 17 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L KẾT QUẢ: Borntrage triterpenoid polyuronid r  Định tính carotenoid: a Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc tới cắn (và gần khơng mùi thơm dịch chiết có tinh dầu) Thêm vào cắn vài giọt dung dịch SbCl3 (khan) bão hòa chloroform (Thuốc thử Carr-Price) Dung dịch có màu xanh sau chuyển thành màu đỏ: Có carotenoid b Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc tới cắn (và gần khơng mùi thơm dịch chiết có tinh dầu) Thêm vào cắn vài giọt H2SO4 đđ Dung dịch có màu xanh dương đậm hay màu xanh lục ngả sang màu xanh dương: Có carotenoid  Định tính triterpenoid: Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc tới cắn Hòa tan cắn với 0,5ml anhydrid acetic thêm vào dung dịch 0,5ml chlorofrom Chuyển dung dịch vào ống nghiệm nhỏ, khô Dùng pipet Pasteur thêm cẩn thận 1-2ml H2SO4 đđ lên thành ống nghiệm để nghiêng cho acid chảy xuống đáy ống nghiệm Nơi tiếp xúc lớp dung dịch có màu đỏ nâu hay đỏ đến tím, lớp dung dịch phía khơng chuyển thành màu xanh lục hay tím: Khơng có triterpenoid (phytosetol triterpen) tự  Định tính anthraquinon: Các hợp chất anthraquinon (dạng tự do, oxy hóa ) có dịch chiết ether định tính phản ứng Borntrager Trang 18 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào ống nghiệm nhỏ Thêm vào 1ml dung dịch NAOH 10% lắc kỹ Nếu lớp kiềm có màu từ hồng tới đỏ : có anthraquinon dạng tự  Định tính hợp chất polyuronid: Nhỏ giọt 2ml dịch chiết vào ống nghiệm có chứa 10ml dung dịch cồn 95% Có nhiều tủa bơng tạo thành : Có polyuronid PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỚP MỎNG: Bảnmỏng: Silicagel G Dung môi khai triển: Cloroform- aceton – benzen (4 : : 3) Dung dịch thử: Lấy g bột đun cách thủy với 20ml ethanol 96% (TT) 30 phút, để nguội, lọc, để bay đến cắn khô Cắn thêm vào 10 ml nước ml dung dịch acid hydrocloric 10% (TT) đun cách thủy 30 phút, để nguội sau lắc với 20 ml ether ethylic (TT) lần, dịch ether bay đậm đặc làm dung dịch thử quan sát đếm số vết tách mắt thường, soi UV ( 254nm )  Kết quả: Phát đƣợc vết có cácRf = 0,57 0,74 0,79 Rf = 0,79 Rf = 0,74 Rf = 0,57 Soi UV 254nm Trang 19 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L BẢNG PHÂN TÍCH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HĨA THỰC VẬT Nhóm hợp chất Chất béo Carotenoid Thuốc thử Cách thực Phản ứng dƣơng tính Nhỏ dd lên giấy Carr-Price Vết mờ -Xanh→ đỏ Xanh dƣơng hay lục→ xanh dƣơng Có mùi thơm Đỏ nâu-tím, lớp có màu xanh lục Kết tủa Phát quang mạnh Dd kiềm có màu hồng tới đỏ Dd có màu hồng tới đỏ Tím Đỏ mận Đỏ Xanh Đỏ Xanh rêu hay xanh đen Tủa bơng trắng Đỏ nâu-tím, lớp có màu xanh lục Có vòng tím nâu H2SO4 Tinh dầu Bốc tới cắn Triterpenoid tự Liebermann-Burchard Alkaloid Coumarin Anthraglycosid Flavonoid T/thử chung alkaloid Phát quang kiềm KOH 10% Mg/HCl đđ Thuốc thử vòng lacton T/thử đƣờng 2-desoxy HCl KOH HCl/to Dd FeCl3 Dd gelatin muối Glycosid tim Anthocyanosid Proanthocyanidin Tannin Triterpenoid thủy phân Saponin Acid hữu Chất khử Hợp chất polyuronic Liebermann-Burchard Tt Liebermann Lắc mạnh dd nƣớc Na2CO3 T/thử Fehling Pha loãng với cồn 90% Sủi bọt Tủa đỏ gạch Tủa trắng – vàng nâu Kết định tính dịch chiết Dịch chiết cồn Dịch chiết nƣớc Dịch chiết Không Thủy Không Thủy ete thủy phân thủy phân phân phân + Kết định tính chung + + + + + - - - + - + - - + + + + + + + + + + + + + + + + + - - + + + Trang 21 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L (-) Khơng có (+) Có Ghi nhận kết định tính: Có thể có phản ứng nhƣng khơng thực ; Khơng có mặt nhóm hợp chất dịch chiết Trang 21 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L Trang 21 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L ĐỘ ẨM: - Dùng cân hồng ngoại để xác định độ ẩm dược liệu - Kết quả: % - Chỉ tiêu: không 13% - Vậy bột dược liệu Muồng trâu đạt độ ẩm Trang 21 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L CHƢƠNG III: XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN ĐỊNH NGHĨA THỰC VẬT: Tên khác: Muồng lác Tên khoa học: Senna alata L., họ Đậu (Fabaceae) MÔ TẢ THỰC VẬT: Cây nhỏ cao 1,50m có đến 3m, thân gổ mềm có đường kính 10 - 12cm Lá kép lơng chim chẵn, dài 30 - 40cm, có - 14 đơi chét Lá chét hình trứng, gốc đỉnh tròn Đơi chét (phía cuống) nhỏ cách đôi chét thứ hai quãng xa so với quãng cách đơi chét sau Lá chét dài đến 12 - 14cm, rộng - 6cm Cụm hoa mọc thành dày đặc nhiều hoa Bông dài 30 - 40cm Hoa màu vàng sẫm Quả loại đậu dài - 16cm rộng 15 - 17mm, có hai cánh suốt theo chiều dọc Quả có tới 60 hạt BỘ PHẬN DÙNG – CÔNG DỤNG: Lá (Folium Senna alatae), quả, thân Thu hoạch vào mùa hạ, hái lấy lá, phơi âm can, sấy nhẹ hay đến khô BỘT DƢỢC LIỆU: VI PHẪU: Lá, thân rễ  Lá: biểu bì trên, nhu mơ diệp lục hình giậu, cutin lòi, mơ mềm, biểu bì  Thân: biểu bì, mơ mềm vỏ, libe 1, gỗ 1, mô mềm tủy  Rễ: bần, libe 2, gỗ Bột: Mạch chấm đồng tiền, Tinh thể Calxi Oxalat hình khối mạch vòng ĐỊNH T NH: 5.1 Phƣơng pháp sắc ký lớp mỏng: Bản mỏng: Silica gel G Dung môi khai triển: Cloroform- aceton - benzen (4 : : 3) Dung dịch thử: Lấy g bột đun cách thủy với 20 ml ethanol 96% (TT) 30 phút, để nguội, lọc, để bay đến cắn khô Cắn thêm vào 10 ml nước ml dung dịch acid hydrocloric 10% (TT) đun cách thủy 30 phút, để nguội sau lắc với 20 ml ether ethylic (TT) lần, dịch ether bay đậm đặc làm dung dịch thử Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L Dung dịch đối chiếu: Pha dung dịch chrysophanol 0,1% ethanol 96% (TT) Nếu khơng có chất đối chiếu, dùng g bột Muồng trâu (mẫu chuẩn), chiết mẫu thử Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 l dung dịch thử dung dịch đối chiếu Sau triển khai, để khô mỏng khơng khí, quan sát đếm số vết tách mắt thường, soi UV ( 254nm )  Kết quả: Phát vết có Rf = 0,57 0,74 0,79 5.2 Phản ứng hóa học:  Định tính carotenoid: a Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc tới cắn (và gần khơng mùi thơm dịch chiết có tinh dầu) Thêm vào cắn vài giọt dung dịch SbCl3 (khan) bão hòa chloroform (Thuốc thử Carr-Price) Dung dịch có màu xanh sau chuyển thành màu đỏ: Có carotenoid b Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc tới cắn (và gần khơng mùi thơm dịch chiết có tinh dầu) Thêm vào cắn vài giọt H2SO4 đđ Dung dịch có màu xanh dương đậm hay màu xanh lục ngả sang màu xanh dương: Có carotenoid  Định tính triterpenoid: Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc tới cắn Hòa tan cắn với 0,5ml anhydrid acetic thêm vào dung dịch 0,5ml chlorofrom Chuyển dung dịch vào ống nghiệm nhỏ, khô Dùng pipet Pasteur thêm cẩn thận 1-2ml H2SO4 đđ lên thành ống nghiệm để nghiêng cho acid chảy xuống đáy ống nghiệm Nơi tiếp xúc lớp dung dịch có màu đỏ nâu hay đỏ đến tím, lớp dung dịch phía khơng chuyển thành màu xanh lục hay tím: Khơng có triterpenoid (phytosetol triterpen) tự  Định tính anthraquinon: Các hợp chất anthraquinon (dạng tự do, oxy hóa ) có dịch chiết ether định tính phản ứng Borntrager Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào ống nghiệm nhỏ Thêm vào 1ml dung dịch NAOH 10% lắc kỹ Nếu lớp kiềm có màu từ hồng tới đỏ : có anthraquinon dạng tự Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L  Định tính hợp chất polyuronid: Nhỏ giọt 2ml dịch chiết vào ống nghiệm có chứa 10ml dung dịch cồn 95% Có nhiều tủa bơng tạo thành : Có polyuronid ĐỘ ẨM: - Dùng cân hồng ngoại để xác định độ ẩm dược liệu - Kết quả: % - Chỉ tiêu: không 13% - Vậy bột dược liệu Muồng trâu đạt độ ẩm CHẾ BIẾN: Thu hoạch vào mùa hạ, hái lấy lá, phơi âm can, sấy nhẹ hay đến khô BẢO QUẢN: Để nơi khô, mát, tránh ánh sáng TÍNH VỊ, QUY KINH: Tân, ơn Vào kinh can, đại trường 10 CÔNG NĂNG, CHỦ TRỊ: Nhuận tràng, lợi gan mật, tiêu độc, tiêu viêm, sát trùng, ngứa Chủ trị: Táo bón (dùng sống), viêm gan, da vàng (dùng thc khơ) Dùng ngồi chữa hắc lào, viêm da thần kinh, ngứa lở 11 CÁCH DÙNG, LIỀU LƢỢNG: Ngày dùng – g (nhuận tràng), dạng thuốc sắc 12 DÙNG NGỒI: Lượng thích hợp, rửa sạch, giã nát lá, lấy nước cốt bôi, ngày lần, lấy tươi vò, chà sát vào chỗ bị hắc lào 13 KIÊNG KỲ: Phụ nữ có thai khơng nên dùng Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN Trang Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L TÀI LIỆU THAM KHẢO Phương pháp nghiên cứu dược liệu Bộ môn dược liệu-Khoa Dược ĐH Y Dược TPHCM, 2006 Vũ Xuân Phương, Thực vật chí Việt Nam - tập 2, NXB Khoa học Kỹ Thuật (144145) Dược điển Việt Nam III, 2005 Đỗ Tất Lợi, Những thuốc vị thuốc Việt Nam NXB Y Học, TPHCM, 3033, 2000 Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam - tập I NXB KH & KT, Hà Nội, 1039-1044 Kiểm nghiệm dược liệu phương pháp hiển vi - tập I NXB KH & KT, Hà Nội, 149-151 Giang Thị Phương Anh Khóa luận đại học Trường ĐH Y Dược TPHCM, 1995 Lê Thị Hồng Đào Khóa luận đại học Trường ĐH Y Dược TPHCM, 1995 9.Trần Vũ Thùy Trang Khóa luận đại học Trường ĐH Y Dược TPHCM, 1995 10 Nguyễn Tấn Hải Khóa luận đại học Trường ĐH Y Dược TPHCM, 1994 Trang ... bột dược liệu. Những đặc điểm dùng để phân biệt dược liệu với dược liệu khác,để xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm Khảo sát bột dược liệu kính hiển vi để tìm đặc điểm vi học đặc trưng bột dược liệu, giúp... chuẩn muồng trâu: Senna alata L Trang 21 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L ĐỘ ẨM: - Dùng cân hồng ngoại để xác định độ ẩm dược liệu - Kết quả: % - Chỉ tiêu: không 13% - Vậy bột dược liệu. .. không 13% - Vậy bột dược liệu Muồng trâu đạt độ ẩm Trang 21 Xây dựng tiêu chuẩn muồng trâu: Senna alata L CHƢƠNG III: XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN ĐỊNH NGHĨA THỰC VẬT: Tên khác: Muồng lác Tên khoa học: Senna