Bài giảng Công nghệ sinh học ứng dụng trong chăn nuôi và thú y PGS. TS. Dương Thanh LiêmMời các bạn cùng tham khảo nội dung bài giảng Công nghệ sinh học ứng dụng trong chăn nuôi và thú y để nắm bắt được công nghệ sinh học trong sinh sản vật nuôi, công nghệ sinh học trong kỹ thuật di truyền, công nghệ sinh học trong sản xuất thức ăn chăn nuôi và thực phẩm. Hy vọng đây là tài liệu tham khảo hữu ích cho các bạn.
Trang 1Công nghệ sinh học ứng dụng
trong Thú Y và Y học
PGS.TS Dương thanh Liêm
Bộ môn Dinh dưỡng Khoa Chăn nuôi – Thú y Trường Đại học Nông Lâm
Trang 2CÔNG NGHỆ SINH HỌC TRONG MIỄN DỊCH HỌC:
1 SẢN XUẤT KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG PHỤC VỤ CHO XÉT NGHIỆM VÀ ĐIỀU TRỊ BỆNH
2 SẢN XUẤT VACCINE TÁI TỔ HỢP PHỤC VỤ CHO CÔNG TÁC PHÒNG CHỐNG BỆNH TẬT
Trang 3Khái niệm miễn dịch
1 Miễn dịch chủ động
Miễn dịch chủ động là phản ứng bảo vệ của cơ thể khi có sự xâm nhập của protein kháng nguyên lạ:
- Một cách tự nhiên do sự xâm nhập của vi khuẩn
hoặc virus vào cơ thể.
- Một cách không tự nhiên thông qua chủng ngừa
vaccin từ vi khuẩn hay virus đã nhược độc.
Khi kháng nguyên xâm nhập,
lập thức sản sinh tín hiệu báo động,
kích thích hệ thống tế bào sinh kháng
thể sản xuất một protein đặc hiệu, kết
dính, trung hoà kháng nguyên Protein
thực hiện việc này gọi là kháng thể.
Trang 4Bảo vệ cơ thể bằng cách đưa trực tiếp kháng thể
hay tế bào miễn dịch (tế bào kháng thể) vào cơ thể
Có hai phương cách đưa kháng thể vào cơ thể:
2 Miễn dịch bị động
Thai nhi nhận
kháng thể từ mẹ qua sữa đầu.
Thông qua việc
tiêm huyết thanh có chứa kháng thể để điều trị bệnh.
Thời gia tồn tại kháng thể ngắn
Trang 5Các giai đoạn phát triển chính của miễn dịch ứng dụng trong phòng chống bệnh.
Thời kỳ sơ khai:
Sau trận dịch, những người sống sót là những người bất tử bởi dịch đó.
Nổ lực đầu tiên trong chủng ngừa bệnh đậu
mùa Pasteur là người có công lớn khai phá.
Những bước đi đầu tiên trong thực nghiệm:
Vi khuẩn là nguyên nhân gây bệnh.
Miễn dịch dịch thể và miễn dịch trung gian qua
tế bào là bước tiến lớn trong quan sát.
Lý thuyết về sự chọn lọc miễn dịch mục tiêu.
Những bước tiến trong miễn dịch phân tử.
Trang 6Một thế kỷ trước, Paul Ehrlich (1854 – 1915) ,
Một nhà hóa học người Phần Lan đã tạo một bước đột phá trong nghiên cứu kháng thể Ông cho rằng phân tử kháng thể được xem
bullet” , có thể định hướng và tiêu diệt các mầm bệnh ở người Với phát minh quan
vào năm 1908.
Trang 7Vào năm 1975, Kohler và Milstein là những người đầu tiên dung hợp tế bào lympho để sản sinh một dòng tế bào có khả năng “bất tử” và sản sinh kháng thể đặc hiệu Hai nhà khoa học nói trên
được tặng giải Nobel Y học vào năm 1984 cho phát
minh “Hybridoma” của họ.
Gía trị của Hybridoma chỉ được khẵn định vào năm 1987 khi kháng thể đơn dòng được sản xuất thành công dùng trong chẩn đoán lâm sàng rất chính xác.
Trang 8César Milstein
Trang 9Nobel Y học (1984): Niels Jerne &
Georges Kohler
Trang 101 Sản xuất kháng thể đa dòng
Phân tử kháng nguyên tinh chế
có thể có nhiều protein kháng nguyên
Gây miễn dịch
1
1
2 3
Trang 11Lượng Ig
trong serum
Tuần lễ ->
0 Gây nhiểm
(Hiệu giá HI)
HI chứa kháng thể
Đa dòng
Trang 12Một kháng nguyên thường chứa nhiều yếu tố
quyết định kháng nguyên (epitope)
Để đáp ứng với kháng nguyên, các lymphocyte cũng sản sinh và tiết nhiều phân tử kháng thể tương ứng có thể kết dính kháng nguyên
KN
A
B
C
lymphocytes
epitope
Trang 13Mặt lợi của kháng thể đa dòng là sẽ có nhiều kháng thể tấn công kháng nguyên cùng một lúc
Ag
Mặt bất lợi của kháng thể
đa dòng là sự kém đặc hiệu, một vài kháng nguyên khác nhau có thể có cùng epitope,
từ đó có thể gây sai lệch khi kết luận các serotyp trong chẩn đoán huyết thanh học.
Trang 14Vấn đề đặt ra từ trước năm 1970:
1 Việc phân biệt giữa các dòng tế bào B, T khác nhau hầu như
không thể thực hiện vì chúng có hơn 95% phân tử bề mặt tế bào giống nhau Kháng thể đa dòng không đặc hiệu, không thể phát hiện được.
2 Không thể chọn lọc được các phân tử kháng thể đặc hiệu cho
một serotyp.
Giải pháp ngày nay:
1 Làm “bất tử” các tế bào sản xuất kháng thể bằng phương pháp
dung hợp tế bào lympho.
2 Chọn lọc dòng tế bào chuyên sản xuất kháng thể đơn dòng
mong muốn.
Kết quả:
Kết quả là giải Nobel Y học dành cho hai nhà khoa học: George
Kohler và Cesar Milstein.
Trang 152 Sản xuất kháng thể đơn dòng
để chẩn đoán các serotyp của vi trùng
Kháng nguyên tinh chế
Gây miễn dịch
Trang 16Cô lập lách chứa các tế bào tạo kháng thể
Mỗi tế bào có khả năng sinh sản một loại kháng thể khác nhau Lách
Chọn lọc + Các tế bào
“bất tử”
Dung hợp
Nuôi các tế bào lai
“Hybridoma”
Trang 17Lựa chọn một trong
số những tế bào này để nuôi cấy thứ cấp nhân lên, tạo sự đồng nhất TB
Trang 18… và tạo quần thể tế bào đơn dòng cùng nguồn gốc
Trang 19Tất cả các tế bào đều tạo một loại kháng thể duy nhất để chống lại một epitope duy nhất
KN
Tính đặc hiệu cao
…nhưng độ nhạy trong nhận biết
và tiêu diệt kháng nguyên kém,
đặc biệt là với một lượng nhỏ
kháng nguyên.
Trang 20Hybridoma