PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI

PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI

PHÁT TRIỂN MỘT QUY TRÌNH LÊN MEN ĐƠN GIẢN MỚI ĐỂ SẢN SUẤT SINH KHỐI MAGNETOSPIRILLUM GRYPHISWALDENSE MSR-1 NHÓM 3: Nguyễn Thị Bích Lê Nguyễn Khánh Duy Lê Minh Hải Nguyễn Minh Tuấn • • • Kết luận III II Nguyên liệu, phương pháp tiến hành Quy trình lên men I I.Giới thiệu  Vi khuẩn Magnetotactic (MTB) nhóm vi khuẩn đa dạng phát sinh từ loại có khả tổng hợp magnetosome  Magnetosome quan nội bào kích thước nano có chứa hạt từ tính ( magnetite greigite )bao bọc màng phospholipid Tại phải tổng hợp magnetosome ? Ứng dụng Thay sản phẩm nano hạt từ tính Cơng nghệ sinh học y sinh học  Xử lý nước thải Sự hình thành magnetosome  Nồng độ oxygen: điều kiện nghèo oxygen cung cấp khơng khí chứa 1% O2 để trì điều kiện vi hiếu khí  Khử nitrogen đường sinh hóa Năng suất định yếu tố thành phần môi trường, phương pháp feed, chế độ thủy động bioreactor thành phần oxy khả dụng Nguyên liệu Phương pháp tiến hành Magnetospirillum Chủng vsv gryphiswaldense (MSR-1) Môi trường nuôi cấy FSM Hệ thống lên men • • • • • Lưu lượng khí: 0-100mL/phút Màng lọc: 0,22 µm Chế độ khuấy 100-500rpm pH ± 0.05 o Nhiệt độ 30 C Phân tách tế bào theo dòng chảy: BD Accuri C6 Mẫu (PBS) Tạo dịch treo Nhuộm Ánh sáng (488 nm) Tán xạ xuôi Tán xạ ngang Thu nhận liệu Evolution 300 UV-vis (565 nm) Đo phản ứng từ tính (Cmag) Khảo nghiệm nitrate nitrite - 40 lần Mẫu Pha loãng g.L-1 tác nhân Szechrome NAS 85-86% (v/v) H3PO4 95-97% H2SO4 (1:1) - Ủ - 570 nm Đo độ hấp thu Khảo nghiệm acid lactic L-lactic acid (Megazyme, Ireland) Nồng độ sắt Phân tích 248.3 nm đèn cathode rỗng nguyên tố sắt (SMI-LabHut Ltd.) hoạt động cường độ dòng 30 mA với lửa acetylene/khơng khí (0.7 L.phút-1 acetylene 4.0 L.phút-1 khơng khí) Quan sát kính hiển vi điện tử truyền suốt -14000rpm Ly tâm -1 -3 phút mL dung dịch glutaraldehyde Tạo dịch treo 2.5% -potassium phosphate 0.1 M -1 Ủ Rửa cồn Gắn vào nhựa Quan sát II.1 Quy trình lên men  Thành phần magnetosome tế bào xác định phương pháp phân tích quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS)  Đầu tiên chế độ cấp khí (0 – 100 ml.Phút-1) tốc độ khuấy khác (100500 rpm) Lưu lượng khí 10 ml.Phút-1 tốc độ khuấy 300 rpm đầu trình lên men Cung cấp oxygen theo giai đoạn : tăng sinh khối , hình thành magetosome   Tăng sinh khối : Ni cấy hiếu khí MSR-1 ( FMS nồng độ sắt 7.7 mg.L-1 , khuấy 150-400 rpm, lưu lượng khí 10 ml.Phút-1, mức độ po2 >10%). tới ~6 t=60h Hệ thống lọc liên tục khí nitrogen (0.4 – 0.6 l.Phút-1) để giảm nhanh po2 xuống  Hình magetosome: MSR-1 ni cấy điều kiện khí oxygen hạn   chế (pO2 ≤ 0.4%) ,chế độ điều chỉnh pH tự động 54 tới khoảng 4.3 Sau feed sắt chloride tăng Fe3+ lên 414 mg.L-14 Mineral Elixir 1.4mg Fe2+.L-1  Sau ~6.4, nồng độ sắt nội bào tang từ 3.1-6.1 mg.G-1 DCW sau tổng thời gian lên men 71 II.2 Tối ưu hóa lượng acid lactic  Nồng độ acid lactic 50, 100 200 g.L-1 Độ pH dung dịch feed 3.65, 3.05 2.65 Hệ là, dịch feed có tính acid cao cần dung tích để trì giá trị pH (7.0 ± 0.05)  Giá trị OD595 cao thí nghiệm với dung dịch feed có nồng độ acid lactic 50 g.L-1 Độ từ tính tế bào (Cmag)  Lượng acid lactic dung dịch feed tương quan nghịch so với lượng sinh khối sau Nồng độ sinh khối cao thu thí nghiệm với thành phần feed 50 g.L-1 acid lactic, nhiên hàm lượng sắt Cmag cao dụng dịch feed chứa 200 g.L-1 acid lactic  ... lượng khí 10 ml.Phút-1 tốc độ khuấy 300 rpm đầu trình lên men Cung cấp oxygen theo giai đoạn : tăng sinh khối , hình thành magetosome   Tăng sinh khối : Ni cấy hiếu khí MSR-1 ( FMS nồng độ sắt... Kết luận III II Nguyên liệu, phương pháp tiến hành Quy trình lên men I I.Giới thiệu  Vi khuẩn Magnetotactic (MTB) nhóm vi khuẩn đa dạng phát sinh từ loại có khả tổng hợp magnetosome  Magnetosome... glutaraldehyde Tạo dịch treo 2.5% -potassium phosphate 0.1 M -1 Ủ Rửa cồn Gắn vào nhựa Quan sát II.1 Quy trình lên men  Thành phần magnetosome tế bào xác định phương pháp phân tích quang phổ hấp thụ nguyên