Tuyến trùng là một trong nhiều đối tượng gây hại chủ yếu trên cây tiêu. Nó không những gây hại rễ tiêu mà tuyến trùng còn gây các vết thương ở rễ. Tạo điều kiện cho các nấm như: Phytophthora Capsici, Fusarium sp…xâm nhập. Là nguyên nhân chính gây bệnh chết nhanh và chết chậm trên tiêu. Bởi vậy để hạn chế bệnh chết nhanh, chết chậm gây hại trên tiêu thì phòng trừ tuyến trùng là điều kiện tiên quyết và hiệu quả nhất.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA NƠNG HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG CHỐNG CHỊU CỦA BỐN GIỐNG HỒ TIÊU (Piper nigrum L.) ĐỐI VỚI TUYẾN TRÙNG SƯNG RỄ Meloidogyne incognita Hướng dẫn Khoa học: TS Nguyễn Vũ Phong Sinh viên : MSSV: Lớp : Nguyễn Thành Công 13145017 DH13BVB GIỚI THIỆU I II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NỘI DUNG III IV KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ I GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề Hình 1.1 Sự gây hại tuyến trùng Đánh giá khả chống chịu bốn giống hồ tiêu (Piper nigrum L.) tuyến trùng sưng rễ Meloidogyne incognita 1.2 Mục đích u cầu Mục đích Nhằm tìm giống có khả chống chịu với tuyến trùng Meloidogyne incognita phục vụ cho công tác chọn tạo giống Yêu cầu Phân lập dòng Meloidogyne incognita Ghi nhận hình ảnh phát triển tuyến trùng Meloidogyne incognita trình ký sinh giống Ấn Độ Đánh giá khả chống chịu giống hồ tiêu với tuyến trùng Meloidogyne incognita 1.3 Giới hạn đề tài Thời gian: 9/2016 – 3/2017 Địa điểm: Đề tài thực khu nhà lưới Thực giống hồ tiêu Vĩnh Linh, Ấn Độ, Mã Lai, Lộc Ninh Thí nghiệm nguồn tuyến trùng Meloidogyne incognita II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Vật liệu 2.1.1 Giống hồ tiêu A B Hình 2.1 (A) Mẫu lá, (B) Đọt non giống hồ tiêu 2.1.2 Nguồn tuyến trùng Bảng 2.1 Kí hiệu mẫu tuyến trùng địa điểm thu thập STT Kí hiệu Địa điểm thu thập Me – ĐN Trảng Bom, Đồng Nai Me – BT Đức Linh, Bình Thuận Me – ĐNơng Đắc Song, Đắk Nơng Hình 2.2 Thu thập mẫu đất tuyến trùng vườn tiêu 2.1.3 Phòng thí nghiệm A B C Hình 2.3 Dụng cụ phòng thí nghiệm A) Rây lọc, B) Đĩa đếm, C) Kính hiển vi 10 2.3.8 Phương pháp xử lí số liệu • Số liệu thơ ghi chép tính tốn phần mềm Microsoft Excel • Số liệu phân tích ANOVA phần mềm SAS 9.1 • Kết đọc dựa bảng ANOVA • Phân tích khác biệt giống đối chứng lây nhiễm thông qua bảng T-Test 21 III KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC 22 3.1 Phân lập dòng Bảng 3.1 Tỉ lệ cà chua bị nhiễm tuyến trùng Tổng số Số nhiễm Tỉ lệ nhiễm lây nhiễm Sau 60 ngày (%) Me-ĐN 15 11 73,3 Me-BT 15 46,7 Me-ĐNông 15 53,3 Mẫu đất 23 3.2 Định danh dựa vào hình thái vân sinh mơn Hình 3.1 Hình thái vân sinh mơn trưởng thành dòng tuyến trùng (a) Theo Eisenback (1985), (b) Me-ĐN, (c,d) Me-BT, (e,f) Me-ĐNông 24 3.3 Sự biến động hình thái tuyến trùng J2 Bảng 3.2 Kích thước J2 dòng Meloidogyne incognita phân lập địa phương Chiều dài thân Chiều rộng thân Chiều dài kim chích Dòng (µm) (µm) (µm) Mi-ĐN 412 ± 26,9 15,8 ± 1,20 15,9 ± 1,30 Mi-BT 420 ± 14,6 15,9 ± 1,18 15,6 ± 1,04 Mi-ĐNông 390 ± 13,7 15,7 ± 0,58 14,9 ± 0,76 Số liệu=Trung bình+SD, n=30 25 3.4 Vòng đời tuyến trùng Meloidogyne incognita NSN NSN NSN NSN Hình 3.3 Sự biến đổi hình thái tuyến trùng Meloidogyne incognita ký sinh rễ hồ tiêu Ấn Độ (NSN: Ngày sau nhiễm, độ dài thước đo:100µm) 26 14 NSN 21 NSN 28 NSN 35 NSN Hình 3.4 Sự biến đổi hình thái tuyến trùng Meloidogyne incognita ký sinh rễ hồ tiêu Ấn Độ (NSN: Ngày sau nhiễm, độ dài thước đo:100µm) 27 3.5 Đánh giá khả chống chịu giống hồ tiêu tuyến trùng Meloidogyne incognita Bảng 3.3 Mức độ ảnh hưởng tuyến trùng đến khả sinh trưởng phát triển giống hồ tiêu so với đối chứng Số (cm) Giống Vĩnh Linh Ấn Độ Mã Lai Lộc Ninh Đối chứng Lây nhiễm T-test Đối chứng Lây nhiễm T-test Đối chứng Lây nhiễm T-test Đối chứng Lây nhiễm T-test 5,0 4,3 0,20 4,6 4,2 0,22 6,0 5,4 0,10 3,8 3,2 0,10 Chiều cao (cm) 15,1 14,9 0,46 12,7 12,2 0,35 28,4 27,3 0,26 10,1 9,7 0,27 Khối lượng thân (gram) Tươi khô 11,1 1,93 10,5 1,90 0,22 0,43 9,20 1,64 8,90 1,62 0,26 0,44 14,9 2,52 14,7 2,5 0,38 0,43 9,12 1,91 9,20 1,89 0,26 0,43 Khối lượng rễ (gram) tươi khô 2,34 0,23 2,39 0,29 0,41 0,04* 2,31 0,27 2,43 0,25 0,29 0,24 5,92 1,01 5,81 0,88 0,37 0,08 1,64 0,17 1,62 0,16 0,25 0,16 T-test tính hàm T-test excel, * khác biệt có ý nghĩa (p=0,05) 28 Bảng 3.4 Ảnh hưởng Meloidogyne incognita đến sinh trưởng giống hồ tiêu Giống Số lá/ Chiều cao (cm) Khối lượng thân (gram) Tươi Khô Khối lượng rễ (gram) Tươi Khô Vĩnh Linh 4,3ab ± 1,63 14,9b ±4,07 10,8b ± 1,17 1,95b ± 0,26 2,39b ± 0,43 0,29b ± 0,06 Ấn Độ 4,2ab ±1,03 12,2cb ± 3,08 8,9c ± 0,87 Mã Lai 5,4a ± 0,84 27,3a ± 3,81 14,7a ± 1,35 2,50a ± 0,20 5,80a ± 0,68 0,88a ± 0,15 Lộc Ninh 3,2b ± 0,79 9,7c ± 1,20 Mức ý nghĩa ** ** ** ** ** ** 26,3 20,1 9,91 11,5 15,3 22,4 CV (%) 1,62c ± 0,30 2,43b ± 0,47 0,25bc ± 0,13 9,2c ± 0,82 1,90bc ± 0,08 1,61c ± 0,05 0,16c ± 0,01 Ghi chú: **: Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 0,01 29 Bảng 3.5 Mức độ gây hại tuyến trùng Meloidogyne incognita lên giống hồ tiêu Số trứng Số nốt sưng/ +J2/ 50 gram gram rễ đất Giống Số túi trứng/ gram rễ Vĩnh Linh 11,30a ± 2,82 12,72a ± 2,83 154,5a ± 49,6 33,5a ± 7,95 78,6a ± 14,4 Ấn Độ 1,92b ± 0,64 7,73b ± 2,24 76,6b ± 20,8 12,3bc ± 3,39 12,4b ± 3,77 Mã Lai 1,19b ± 0,38 2,50c ± 0,71 41,2c ± 11,8 8,6c ± 2,50 6,4b ± 2,23 Lộc Ninh 2,23b ± 0,59 3,45c ± 0,88 48,2bc ± 6,08 14,9b ± 2,74 11,6b ± 1,74 ** 35,9 ** 28,7 ** 34,5 ** 27,1 ** 28,3 Mức ý nghĩa CV(%) Số cái/ gram rễ Số trứng +J2/ gram rễ Ghi chú:**: Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 0,01 30 Bảng 3.6 Phân cấp đánh giá mức độ mẫn cảm bốn giống hồ tiêu tuyến trùng Meloidogyne incognita Giống Pf/Pi Cấp bệnh Đánh giá Vĩnh Linh 4,7 2,8 Mẫn cảm Ấn Độ 2,3 2,1 Mẫn cảm Mã Lai 1,2 1,5 Chống chịu Lộc Ninh 1,4 1,9 Chống chịu 31 IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 32 4.1 Kết luận Phân lập thành công 26 dòng tuyến trùng Các dòng tuyến trùng Meloidogyne incognita phân lập dao động hình thái Tuyến trùng Meloidogyne incognita hồn thành vòng đời giống tiêu Ấn Độ khoảng 35 ngày Trong giống Vĩnh Linh, Ấn Độ, Mã Lai, Lộc Ninh giống Vĩnh Linh, Ấn Độ giống mẫn cảm, giống Mã Lai, Lộc Ninh giống chống chịu 33 4.2 Kiến nghị Định danh phương pháp thị phân tử DNA để khẳng định lại cách xác việc định danh lồi Tiếp tục khảo sát tương tác tuyến trùng Meloidogyne incognita hồ tiêu Mã Lai, Lộc Ninh 34 35 ... hại tuyến trùng Đánh giá khả chống chịu bốn giống hồ tiêu (Piper nigrum L.) tuyến trùng sưng rễ Meloidogyne incognita 1.2 Mục đích yêu cầu Mục đích Nhằm tìm giống có khả chống chịu với tuyến trùng. .. hình thái tuyến trùng Meloidogyne incognita ký sinh rễ hồ tiêu Ấn Độ (NSN: Ngày sau nhiễm, độ dài thước đo:100µm) 27 3.5 Đánh giá khả chống chịu giống hồ tiêu tuyến trùng Meloidogyne incognita. .. nghiệm vòng đời 17 2.3.7 Đánh giá khả chống chịu bốn giống hồ tiêu tuyến trùng sưng rễ Meloidogyne incognita Thí nghiệm hồn tồn ngẫu nhiên đơn yếu tố nhà lưới Khi tiêu tháng tuổi, lây nhiễm