ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG NHÂN NUÔI SÂU XANH DA LÁNG BẰNG THỨC ĂN NHÂN TẠO

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA NÔNG HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG NHÂN NUÔI SÂU XANH DA LÁNG Spodoptera exigua Hubner Lepidopter

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA NÔNG HỌC

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG NHÂN NUÔI SÂU XANH DA LÁNG

Spodoptera exigua Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) TRÊN

MỘT SỐ CÔNG THỨC THỨC ĂN NHÂN TẠO

SINH VIÊN THỰC HIỆN : PHẠM THỊ TUYẾT TRINH

Tp Hồ Chí Minh tháng 03 năm 2017

ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG NHÂN NUÔI SÂU XANH DA LÁNG

Spodoptera exigua Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) TRÊN

MỘT SỐ CÔNG THỨC THỨC ĂN NHÂN TẠO

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành con đường Đại học và đề tài tốt nghiệp ngoài sự nổ lực của chính bản thân tôi, tôi còn nhận nhiều sự giúp đỡ của gia đình và những người thân yêu luôn kề vai sát cánh bên tôi

Lời đầu tiên con muốn nói là con xin cảm ơn ba mẹ đã sinh ra con, nuôi dạy, tạo mọi điều kiện cho con ăn học Ba mẹ luôn ở bên con quan tâm giúp đỡ con vượt qua khó khăn trong cuộc sống Luôn là chỗ dựa vững chắc và là niềm tự hào của con,

là nguồn động lực lớn giúp con có đủ sức mạnh và sự tự tin để vượt qua mọi khó khăn trong cuộc sống

Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến TS Lê Khắc Hoàng đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ trong quá trình thực hiện đề tài

Tôi chân thành cảm ơn KS Đặng Thiên Ân đã trực tiếp giúp tôi giải quyết những khó khăn trong quá trình làm khóa luận, trao đổi, góp ý về phương pháp luận, nội dung nghiên cứu Như một người Anh luôn động viên giúp đỡ mỗi khi tôi gặp khó khăn

Đồng thời cảm ơn quý thầy cô trong khoa Nông Học đã truyền đạt, giảng dạy cho tôi những kiến thức quý báu

Xin cảm ơn chị Đinh Thị Thu Hà (DH12BV) và những người bạn của tôi là Dương Ngọc Hùng, Phạm Hồng Gấm, Nguyễn Thị Thanh Hiếu, Nguyễn Thành Nhân, Cao Khả Phước, Lê Văn Tú, Nguyễn Ngọc Khoa, Võ Văn Hiệp và Huỳnh Duy Hưng (khóa 39) đã giúp đỡ tôi, động viên trong quá trình làm đề tài

Một lần nữa con xin cảm ơn ba mẹ và những người thân trong gia đình đã tạo điều kiện vật chất lẫn tinh thần cho con hoàn thành tốt đề tài tốt nghiệp

TP Hồ Chí Minh, tháng 03 năm 2017

Sinh viên thực hiện

Phạm Thị Tuyết Trinh

TÓM TẮT

PHẠM THỊ TUYẾT TRINH, Đại Học Nông Lâm TP.HCM tháng 03/2017, đề

tài: “Đánh giá khả năng nhân nuôi sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner

(Lepidoptera: Noctuidae) trên một số công thức thức ăn nhân tạo”

Giáo viên hướng dẫn: TS LÊ KHẮC HOÀNG, KS ĐẶNG THIÊN ÂN

Đề tài: “Đánh giá khả năng nhân nuôi sâu xanh da láng Spodoptera exigua

Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) trên một số công thức thức ăn nhân tạo” nhằm cung cấp cơ sở dữ liệu phục vụ cho công tác nhân nuôi số lượng lớn sâu xanh da láng

S exigua trong phòng thí nghiệm Đề tài được thực hiện tại phòng thí nghiệm côn trùng,

bộ môn Bảo vệ Thực vật khoa Nông học, trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh, nhiệt độ 28 ± 2oC ẩm độ 70 ± 5%, từ tháng 10 năm 2016 đến tháng 03 năm 2017

Đề tài ghi nhận một số kết quả như sau:

Kết quả thời gian hoàn thành vòng đời khi nhân nuôi S exigua trên các công

thức thức ăn nhân tạo thì công thức D1 có thời gian hoàn thành vòng đời ngắn nhất trung bình là 19,2 ± 1,14 ngày

Kết quả tỷ lệ sâu chết thấp và tỷ lệ hóa nhộng cao khi nhân nuôi trên công thức D1 trung bình lần lượt là 29,5 ± 3,69% và 70,5 ± 3,69%

Công thức D1 có chiều dài sâu tuổi 5 và trọng lượng nhộng cao nhất trung bình lần lượt là 18,12 ± 0,63 mm và 65,6 ±2,09 mg Chiều dài sâu tuổi 5 nhỏ thấp nhất là ở cải xanh

Kết quả tỷ lệ vũ hoá và tỷ lệ con cái cao nhất là ở công thức D1 trung bình lần lượt là 92,9 ± 0,38% và 52,0 ± 3,40% so với khi nuôi trên cải xanh

Khả năng đẻ trứng và hiệu suất đẻ trứng cao nhất ở công thức D1 trung bình lần lượt

là 711,6 ± 23,30 trứng và 95,6 ± 3,18% thấp nhất là khi cho ăn cải xanh

Thức ăn nhân tạo không ảnh hưởng đến tỷ lệ trứng nở

Ngài cái S exigua đẻ trứng tốt nhất và có tuổi thọ cao nhất khi ăn thêm mật ong

20%, với số lượng trứng đẻ, hiệu suất đẻ trứng, tuổi thọ trung bình lần lượt là 746,8 ± 87,4 trứng; 95,6 ± 3,71% và 5,8 ± 0,82 ngày Ngài cái tập trung đẻ trứng vào ngày thứ

2 đến ngày thứ 3 sau khi vũ hóa, số trứng đẻ cao nhất vào ngày thứ 2 sau vũ hóa (chiếm khoảng 34,5% tổng số trứng đẻ với số lượng trứng trung bình là 257,3 trứng

Khả năng đẻ trứng của ngài cái S exigua trên mùi cải xanh là cao nhất với số

lượng trứng đẻ trung bình là 703,0 ± 55,13 trứng và hiệu suất đẻ trứng trung bình là 94,9 ± 6,15%

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN ii

TÓM TẮT iii

MỤC LỤC v

DANH SÁCH CÁC BẢNG vii

DANH SÁCH HÌNH viii

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ix

MỞ ĐẦU 1

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

1.1 Phạm vi và phổ kí chủ của sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) 3

1.2 Một số nghiên cứu trong nước về sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) 4

1.2.1 Đặc điểm hình thái 4

1.2.2 Đặc điểm sinh học 6

1.3 Một số nghiên cứu ngoài nước về sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) 8

1.3.1 Đặc điểm hình thái 8

1.3.2 Đặc điểm sinh học 10

1.4 Biện pháp phòng trừ 11

1.5 Một số nghiên cứu về thức ăn nhân tạo 14

Chương 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19

2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 19

2.2 Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm 19

2.3 Nội dung nghiên cứu 19

2.4 Phương pháp nghiên cứu 20

2.4.1 Thu thập và nhân nuôi S exigua 20

2.4.2 Thí nghiệm đánh giá khả năng nhân nuôi S exigua trên một số công thức thức ăn nhân tạo 21

2.4.3 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi thọ của ngài cái S exigua 26

2.4.4 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của ngài cái S exigua 28

2.5 Phương pháp xử lý số liệu 30

Chương 3 31

3.1 Khả năng nhân nuôi S exigua trên một số công thức thức ăn nhân tạo 31

3.2 Ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi thọ của ngài cái S exigua 40

3.2 Ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của ngài cái S exigua 43

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 45

Kết luận 45

Đề nghị 45

TÀI LIỆU THAM KHẢO 46

PHỤ LỤC 51

DANH SÁCH CÁC BẢNG

Bảng 2.1 Thành phần thức ăn nhân tạo (1kg) 25

Bảng 3.1 Kết quả thời gian các pha phát dục và hoàn thành vòng đời trên một số công

thức thức ăn nhân tạo 32

Bảng 3.2 Kết quả tỷ lệ sâu chết và tỷ lệ hóa nhộng khi nhân nuôi S exigua trên một số

công thức thức ăn nhân tạo 33

Bảng 3.3 Kết quả chiều dài sâu tuổi 5 và trọng lượng nhộng khi nhân nuôi S exigua

trên một số công thức thức ăn nhân tạo 35

Bảng 3.4 Kết quả tỷ lệ vũ hóa và tỷ lệ con cái khi nhân nuôi S exigua trên một số

công thức thức ăn nhân tạo 38

Bảng 3.5 Kết quả khả năng đẻ trứng khi nhân nuôi S exigua trên một số công thức

thức ăn nhân tạo với nồng độ mật ong 10% 39

Bảng 3.6 Kết quả tỷ lệ trứng nở khi nhân nuôi S exigua trên một số công thức thức ăn

nhân tạo 40

Bảng 3.7 Kết quả ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi thọ của

ngài cái S exigua 41

Bảng 3.8 Kết quả ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của ngài cái

S exigua 43

DANH SÁCH HÌNH

Hình 2.1 Thu thập và nhân nguồn S exigua 20

Hình 2.2 Nhộng sâu xanh da láng S.exigua 20

Hình 2.3 Lồng nhân nguồn ngài S exigua 21

Hình 2.4 Thức ăn dùng bố trí thí nghiệm 22

Hình 2.5 Bố trí thí nghiệm đánh giá khả năng nhân nuôi S exigua trên một số công thức thức ăn nhân tạo 23

Hình 2.6 Các nồng độ mật ong dùng trong thí nghiệm ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi thọ của ngài cái S exigua 26

Hình 2.7 Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi thọ của ngài cái S exigua 27

Hình 2.8 Chuẩn bị mùi kí chủ tương ứng trước khi bố trí thí nghiệm 28

Hình 2.9 Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của S exigua 29

Hình 3.1 Vòng đời S exigua khi nhân nuôi trên công thức D1 31

Hình 3.2 S exigua chết trên các công thức thức ăn nhân tạo 34

Hình 3.3 S exigua sống trên các công thức thức ăn nhân tạo 34

Hình 3.4 S exigua hóa nhộng trên các công thức thức ăn nhân tạo 34

Hình 3.5 Chiều dài sâu tuổi 5 ở các công thức thức ăn nhân tạo D1, D2, D3 và cải xanh 36

Hình 3.6 Trọng lượng nhộng ở các công thức thức ăn nhân tạo D1, D2, D3 và cải xanh 36

Hình 3.7 Nhộng ở các công thức thức ăn nhân tạo D1, D2, D3 và cải xanh 37

Hình 3.8 Khả năng đẻ trứng của S exigua qua các nồng độ mật ong 41

Hình 3.9 Nhịp điệu đẻ trứng của ngài cái S exigua khi cho ăn mật ong 20% 41

MỞ ĐẦU Đặt vấn đề

Sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) là một

trong những đối tượng gây thiệt hại về năng suất cũng như phẩm chất của nhiều loại cây trồng Theo Nguyễn Thị Chắt (1998), có trên 128 loài cây trồng phân bố trong 40

họ thực vật bị sâu xanh da láng phá hoại Ở Việt Nam, sâu xanh da láng phá hoại nhiều loại cây trồng từ miền Bắc, miền Trung, miền Nam Nhóm cây rau, các loại đậu, cây thuốc lá, nho, hành… là những loại cây trồng bị sâu xanh da láng gây hại nặng Trong

đó sâu xanh da láng phá hoại mạnh nhất trên cây hành ta Allicum Ascalonicum L Đối

với nông dân, phòng trừ sâu xanh da láng để giảm thiểu thiệt hại gây ra là rất khó khăn Biện pháp phổ biến hiện nay là sử dụng thuốc hóa học để phòng trừ Tuy nhiên khả năng kháng thuốc hóa học của sâu xanh da láng ngày càng gia tăng nên việc phòng trừ gặp nhiều khó khăn

Trong những năm gần đây, để hạn chế những mặt tiêu cực của việc dùng thuốc hóa học tràn lan, không đúng cách, lập lại cân bằng sinh thái có lợi trong tự nhiên ngoài biện pháp kiểm soát sinh học bằng côn trùng thì biện pháp phòng trừ bằng sinh vật học là được chú ý hơn cả Mục đích của việc phòng trừ sâu hại bằng vi sinh vật bằng cách tạo nên bệnh truyền nhiễm trên cơ thể côn trùng giảm nhẹ mật độ sâu hại, từ

đó có thể khống chế mật độ quần thể loài Muốn thực hiện được mục đích trên phải nắm được cơ sở lý luận và kỹ thuật ứng dụng vi sinh vật gây bệnh sâu hại trong phòng trừ (Trần Thị Thùy Dung, 2008) Bên cạnh đó việc nhân nuôi sâu xanh da láng bằng thức ăn tự nhiên cho tỷ lệ sâu sống không cao, do thức ăn tự nhiên không ổn định về mặt vệ sinh, nguồn cũng như khối lượng nên khó có thể áp dụng được việc nhân nuôi sâu xanh da láng ở quy mô lớn (Lê Văn Hải, 2003)

Vì vậy, việc nhân nuôi lượng lớn sâu xanh da láng Spodoptera exigua bằng thức

ăn nhân tạo trong điều kiện phòng thí nghiệm là cần thiết để phục vụ cho các nghiên

cứu phòng trừ sâu xanh da láng Xuất phát từ các lý do trên, đề tài: “Đánh giá khả

năng nhân nuôi sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner (Lepidoptera:

Noctuidae) trên một số công thức thức ăn nhân tạo” được tiến hành.

Mục đích

Đề tài nhằm cung cấp cơ sở dữ liệu phục vụ cho công tác nuôi số lượng lớn sâu

xanh da láng S exigua trong phòng thí nghiệm

Yêu cầu

Đánh giá được khả năng nhân nuôi S exigua trên một số công thức thức ăn

nhân tạo

Xác định được ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi thọ

của ngài cái S exigua

Xác định được ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của ngài cái

S exigua

Giới hạn đề tài

Đề tài được thực hiện tại phòng thí nghiệm Côn trùng, Bộ môn BVTV khoa Nông học trường Đại Học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh từ tháng 10/2016 đến tháng 3/2017

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 Phạm vi và phổ kí chủ của sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner

(Lepidoptera: Noctuidae)

Sâu xanh da láng xuất hiện ở nhiều nước trên thế giới từ các nước vùng Châu

Á, Châu Phi, Trung Đông đến các nước Châu Âu, vùng ôn đới và cận nhiệt đới của Bắc Mỹ, Úc, Cuba, Colombia và một số nước như Ai Cập, Ấn Độ, Bangladesh, Hàn Quốc, Hoa Kỳ, Hồng Công, Indonesia, Liên Xô (cũ , Malaysia, Myanmar, Nhật Bản, Philippines, Thái Lan, Thổ Nhĩ Kỳ, Trung Quốc, (CABI, 1997 và Việt Nam (Nguyễn Thị Thu Cúc và ctv, 1993)

Theo ghi nhận của nhiều tác giả, sâu xanh da láng là loài đa thực, phá hoại trên

128 loài cây trồng phân bố trong 40 họ thực vật Tại Nhật Bản, ký chủ phổ biến của

S exigua bao gồm: Hành, tỏi, bắp cải, củ cải, cẩm chướng, cây cúc và cà rốt

(Toshiyuki Kawana, 1993) Tại Đài Loan, S exigua được ghi nhận trên bắp, cao

lương, cà chua, măng, đậu tương, thuốc lá và những ký chủ thực vật khác như tại Nhật Bản Tại Việt Nam, ngoài hành lá, tỏi, cà chua, ớt, nho, đậu phộng (lạc , dưa, bông vải, bắp cải và bắp còn gây hại nặng trên đậu tương và đậu xanh (Nguyễn Thị Thu Cúc

và ctv, 1993)

Theo ghi nhận của Mau và ctv (2007), S exigua có phổ kí chủ rộng: Bông cải

xanh, củ cải đường, bắp cải, cà rốt, ngô, bông, đậu xanh, rau diếp, hành tây, tiêu, khoai tây, đậu tương, khoai lang, cà chua, và các loại hoa Loài này được tìm thấy đầu tiên ở Châu Âu và gây hại trên củ cải đường tại Arizina, California, Colorado, Kansas, New Mexico, Oregon, Hawaii

S exigua là sâu hại đứng hàng thứ hai trên cây bông vải phá hoại chủ yếu là gãy

đọt cây tại Mỹ (Gould và Tabashnik, 1998 Năm 1998, S exigua đã phá hoại trên

50% diện tích trồng bông và cây củ cải đường tại Mỹ, gây thiệt hại về kinh tế ước tính khoảng 19,2 triệu USD (William, 1999)

Tại Nhật Bản sâu xanh da láng phát hiện đầu tiên trên củ cải đường và hiện là dịch hại quan trọng trên cây hành tây (Horikiri, 1986; Takai, 1988a, 1988b)

S exigua mới phát hiện gần đây tại Malaysia Phá hoại mạnh trên các loài cây

trồng vùng cận nhiệt đới và vùng nhiệt đới; S exigua là sâu hại nghiêm trọng gây thiệt

hại nặng về kinh tế cho các loại cây trồng nông nghiệp trong 10 năm qua tại Malaysia

và là đối tượng gây mất năng suất cho một số cây như: Hành, cà tím, đậu, ớt, bầu bí,

và cây rau họ thập tự Các nhà côn trùng học ở Malaysia cho rằng loài sâu xanh da láng này di cư từ các nước lân cận là Thái Lan, Việt Nam, Indonesia và Myanmar Đây

là vùng sâu xanh da láng phá hoại nặng nhất (Palasubramaniam, 2000)

1.2 Một số nghiên cứu trong nước về sâu xanh da láng Spodoptera exigua

Hubner (Lepidoptera: Noctuidae)

1.2.1 Đặc điểm hình thái

Theo ghi nhận của Nguyễn Thị Chắt (2006) thì:

Ngài S exigua là một loại ngài đêm có màu nâu đất, có chiều dài cơ thể 10 – 14

mm, sải cánh 25 – 28 mm Cánh trước có màu nâu sáng, rìa mép cánh ngoài có đường vân đôi, trên giữa cánh có vân tròn màu nâu đậm, xung quanh viền đường màu sáng hơn Phía ngoài đường vân tròn là vân hình hạt đậu màu nâu đậm và viền đường màu sáng hơn Cánh sau màu xám trắng hơn có ánh hồng, rìa cánh dài, mép ngoài cánh màu nâu đen Trứng có hình bán cầu, mặt trứng có 40 – 50 đường gân nổi kéo dài từ đỉnh trứng Trứng mới đẻ màu xám trắng, gần nở màu vàng nâu Sâu non có màu sắc thay đổi từ màu xanh đốt cuối màu nâu xám Trên lưng sâu bóng loáng chỉ phủ lớp lông tơ kéo dài từ đốt đầu đến đốt cuối bụng Trên lưng sâu luôn có 5 đường sọc dọc thân, sọc giữa lưng kéo dài từ đầu đến đốt cuối bụng có màu nâu đậm không liên tục Tiếp là hai sọc phụ lưng nhỏ và mờ, hai sọc bên rộng hơn và sáng hơn Phía dưới đường bên là hai đường bụng màu vàng sáng Gần lổ thở của các đốt bụng có những đốm trắng nằm hai bên mỗi đốt Sâu đẩy sức có thể dài từ 25 – 27 mm Nhộng màu

vàng nâu dài từ 10 – 12 mm, cuối bụng có hai gai nhỏ và hai gai nhỏ hơn nằm phía lưng của đốt cuối bụng

Năm 2003, Nguyễn Văn Huỳnh và Lê Thị Sen đã chỉ ra rằng:

Trưởng thành S exigua là loài bướm đêm, màu trắng xám, chiều dài thân từ 7 –

10 mm, sải cánh rộng từ 20 – 25 mm Đầu màu xám, mang nhiều lông, hai mắt kép to, màu đen, râu đầu hình sợi chỉ, dài từ 5 – 6 mm Ngực màu nâu đỏ, được phủ kín bởi một lớp phấn màu xám tro có ánh kim Cánh trước màu xám hơi ngả nâu, thon dài, hình tam giác, góc cánh hơi bầu, có nhiều vân Khoảng 1/3 cánh tính từ chân cánh, gần cạnh trước có một đốm tròn màu lợt, giữa đốm có một điểm đen nhỏ, bên cạnh có một đốm to hơn màu vàng cam Cạnh trên của cánh có một sọc đen không liên tục chạy từ đầu đến cuối cánh, bìa cánh có một hàng chấm đen, tận cùng rìa cánh là một đường vân màu trắng Cánh sau là cánh màng, màu xám trắng, càng ra cạnh ngoài cánh các gân có màu đậm, kế đó là một đường viền màu nâu đậm, ngoài cùng là rìa lông trắng

Cả con cái và con đực đều có chùm lông ở cuối bụng nhưng trên bướm cái thì chùm

lông này dài hơn trên bướm đực S exigua có màu sắc khác nhau tùy theo loại cây kí

chủ Trứng có hình cầu, đường kính từ 0,4 – 0,5 mm, mới đẻ màu xanh đến vàng nhạt, sau chuyển sang màu trắng đục, sắp nở có một chấm đen trên vỏ trứng, đó là mắt của sâu Trứng được đẻ thành từng ổ, trên phủ lớp lông màu trắng ngà Thời gian ủ trứng

từ 2 – 4 ngày Sâu có từ 5 – 6 tuổi, phát triển trong thời gian từ 10 – 19 ngày Mặt lưng của sâu màu xanh và trơn láng nên còn có tên là "Sâu xanh da láng" (để phân biệt với

sâu xanh, Heliothis armigera) Nhìn chung S exigua trên lưng có 5 sọc 2 sọc bên hông

rất to và đậm màu thứ nhất của ngực đến đốt cuối của bụng; một sọc giữa lưng có màu đen xen kẻ màu trắng, cũng chạy từ đốt đầu của ngực đến đốt cuối của bụng nhưng không liên tục; kế đến là 2 sọc nhỏ và mờ nằm cách đều và ở 2 bên sọc giữa lưng Các sọc này càng rõ khi tuổi sâu càng lớn Mặt bụng của mình sâu có màu sắc khác hẳn mặt lưng, thường có màu hồng hay xanh nhạt và có 2 vệt trắng ở hai bên bụng Tuổi 1: Thân sâu có màu xanh lá cây hay vàng xanh, đầu đen bóng, mang nhiều lông, bụng màu vàng nhạt Trên lưng có nhiều chấm to màu nâu nhạt, ở mỗi chấm có một lông dài màu nâu, cơ thể có chiều dài từ 1,2 – 1,5 mm, thường phần đầu có chiều ngang lớn hơn chiều ngang thân mình và các sọc trên cơ thể chưa rõ ràng Thời gian

phát triển của sâu ở tuổi này từ 2 – 5 ngày Từ tuổi 2, màu sắc trên mình sâu bắt đầu thể hiện rõ dần Bụng màu vàng xanh, các đốt trên thân phân biệt rõ dần Mình sâu có

3 sọc màu trắng mờ, một sọc giữa lưng và 2 sọc ở hai bên thân, cả 3 sọc trên chạy từ đốt thứ nhất đến đốt cuối của bụng Ở tuổi này sâu có kích thước cơ thể trung bình là 0,45 x 3,7mm Thời gian phát triển của sâu tuổi 2 từ 2 – 3 ngày Sang tuổi 3, lúc mới lột xác sâu có màu vàng xanh, sau chuyển sang màu xanh lá cây Đầu màu vàng nhạt, bóng; vẫn còn mang nhiều lông Các chấm trên mình sâu nhỏ dần, lông ngắn hơn Thời gian phát triển của sâu ở tuổi này từ 2 – 3 ngày

10 – 16 ngày

Khả năng đẻ trứng: Sau khi vũ hóa 2 – 3 ngày thành trùng giao phối và đẻ trứng Thành trùng thường đẻ trứng ở mặt dưới lá thành từng nhóm nhỏ và phủ một lớp tơ màu trắng Một con cái có thể đẻ từ 300 – 1700 trứng tùy theo chất lượng thức

ăn Giai đoạn ủ trứng kéo dài từ 3 – 5 ngày

Tập Tính: Sâu non mới nở sống xung quanh ổ trứng ăn phần mềm của lá chỉ chừa lạị lớp màng trắng Càng lớn sâu ăn khuyết từng mảng lá, mảng trái non, đứt bông hay nụ, có khi chỉ còn lại cuống lá Khi đẩy sức sâu chui xuống đất làm nhộng Theo kết quả theo dõi gần đây cho thấy, sâu xanh da láng phát triển từ tháng 11 – 12 nhưng phát triển mạnh từ tháng 1 – 3 Trên một vụ đậu có thể phát triển 2 – 3 lứa Gần

đây S exigua phá hoại mạnh trên hành ta Vụ Hè Thu mật số sâu thấp, đậu trồng vụ

Đông xuân sớm số sâu thấp, trồng vụ Đông Xuân trễ và vụ Xuân Hè mật số sâu sẽ rất cao

Theo Nguyễn Văn Huỳnh và Lê Thị Sen (2003):

Vòng đời: Thời gian sống của bướm từ 5 – 10 ngày và thời gian ủ trứng trong vòng từ 3 – 5 ngày Sâu non 10 – 19 ngày

Khả năng đẻ trứng: Một bướm cái có thể đẻ từ 300 – 400 trứng trong vòng từ 3 – 5 ngày, cao nhất vào đêm thứ ba sau khi vũ hóa (trung bình 128 trứng/ngày/con) Trứng được đẻ thành từng ổ, có phủ lông màu trắng ngà, mặt dưới lá, gần cuống lá, mỗi ổ khoảng 20 – 40 trứng.Trứng thường nở vào ban ngày

Tập tính: Đêm thứ hai sau khi vũ hóa, thành trùng bắt đầu bắt cặp và đẻ trứng vài giờ sau Sau khi nở sâu sống tập trung quanh ổ trứng, ăn phần diệp lục của lá thành những lổ nhỏ, chừa lại lớp biểu bì trắng Cuối tuổi 1 sâu bắt đầu phân tán sang các lá lân cận Ấu trùng tuổi 2 ăn lủng lá thành những lổ nhỏ và có tập quán nhả tơ buông mình xuống đất khi bị động Ở tuổi 3 sâu ăn phá mạnh nhất, cắn lá thành những lổ to; sâu còn đeo trên các chùm hoa của cây đậu nành và ăn các cánh hoa vừa mới nhú Ở những ruộng có mật số cao sâu ăn lá còn trơ gân chính và cuống và cả trái non Một sâu tuổi 4 có thể ăn hết 1 lá đậu trong 1 ngày Ở tuổi lớn khi bị động sâu không nhả tơ trốn như sâu tuổi nhỏ mà thường co mình rơi xuống đất hay lá bên dưới để trốn Ngoài đậu nành, đậu xanh, sâu còn gây hại nhiều cho cây hành lá, ớt trồng xen hoặc luân canh với cây đậu nành; sâu gây hại chủ yếu vào vụ Đông – Xuân và Xuân – Hè Trên đậu nành và đậu xanh, sâu có khả năng gây hại từ khi cây đậu còn nhỏ đến khi cây trổ hoa, tượng trái Sâu có thể ăn rụi cả lá, đọt non, hoa và trái non Trên hành lá, bướm đẻ trứng bên ngoài cọng hành, sâu nở ra chui vào bên trong cọng hành ăn phần nhu mô diệp lục, chừa lại lớp biểu bì trắng bên ngoài Khi bị hại nặng lá hành bị vàng và rủ xuống Trên cây ớt, sâu ăn phá đọt non, ăn lủng lá, hoa và trái Trên trái ớt sâu thường

ăn ở phần đầu giáp trái, đài hoa hay đục lổ ở giữa trái, trái bị sâu ăn thường thối và rụng sớm

1.3 Một số nghiên cứu ngoài nước về sâu xanh da láng Spodoptera exigua Hubner

Sâu non trải qua 5 tuổi với sự thay đổi về kích thước và màu sắc Sâu non khi mới nở chui ra khỏi lớp vỏ và bò ra ngoài Sâu non mới nở rất linh hoạt, di chuyển nhanh để tìm thức ăn và trải qua 5 lần lột xác Để chuẩn bị lột xác, sâu non trường nhả

tơ ngay trên lá non gần ngọn nhất, co mình lại, ít di chuyển, ngưng ăn, màu sắc cơ thể thay đổi và bắt đầu lột xác Quá trình lột xác bắt đầu ở phần đầu, dần dần lột xuống phần bụng Sau khi lột xác thì để lại vỏ đầu và có màu sắc thay đổi theo từng tuổi Tuổi 1: Cơ thể màu xanh nhạt trong suốt, đầu to hơn thân, đầu màu nâu đen, trên lưng bóng loáng chỉ phủ lớp lông tơ từ đốt đầu đến đốt cuối bụng Trên lưng có 5 sọc trắng

mờ dọc thân Sâu non nhanh nhẹn nhả tơ khi nghỉ ngay trên mặt lá Kích thước vỏ đầu dài trung bình 0,31 – 0,32 mm Tuổi 2: Cơ thể màu xanh đậm dần, 5 sọc trên lưng dần

lộ rõ, sọc giữa lưng kéo dài từ đầu đến cuối bụng màu nâu đậm không liên tục, tiếp 2 sọc lưng nhỏ và mờ, 2 sọc bên rộng và sáng hơn Phía dưới đường bên là 2 đường bụng màu vàng sáng Gần lổ thở của các đốt bụng có những đốm trắng nằm hai bên mỗi đốt Kích thước vỏ đầu dài trung bình 0,50 – 0,53 mm Tuổi 3: Cơ thể màu xanh lục, đầu màu nâu đậm, 2 đường bụng phía dưới màu vàng sáng rõ, cơ thể phân đốt rõ ràng Kích thước vỏ đầu dài trung bình 0,99 – 1,04 mm Tuổi 4: Cơ thể chuyển sang màu xanh lục đậm hơn, 2 mắt đen rõ rệt, trên đỉnh đầu nhìn rõ ngắn lột xác hình chử

“V” Kích thước vỏ đầu dài trung bình 1,54 – 1,64 mm Tuổi 5: Cơ thể màu xanh lục đậm, cơ thể phân đốt rõ Cuối tuổi 5 sâu di chuyển chậm dần về các lá già gần mặt đất,

cơ thể co lại nhả tơ để chuẩn bị hóa nhộng Kích thước vỏ đầu dài trung bình 2,5 –

2,61 mm Cuối tuổi 5 sâu non đẫy sức nhả tơ hóa nhộng trên các lá già, trong thân cây, dưới thảm thực vật, hoặc trong trái bị hại Nhộng nằm trong 2 lớp kén dày, lúc đầu nhộng có màu xanh vàng, sang ngày thứ 2, thứ 3 chuyển sang màu nâu vàng, khi sắp

vũ hóa có màu nâu đậm Chiều dài nhộng trung bình 9 – 12 mm

Trưởng thành S exigua là một loại ngài đêm có màu nâu đất, có chiều dài cơ

thể 10 – 14 mm, sải cánh 25 – 28 mm Cánh trước có màu nâu sáng, rìa mép cánh ngoài có đường vân đôi, trên giữa cánh có vân tròn màu nâu đậm, xung quanh viền đường màu sáng hơn Phía ngoài đường vân tròn là vân hình hạt đậu màu nâu đậm và viền đường màu sáng hơn Cánh sau màu xám trắng hơn có ánh hồng, rìa cánh dài, mép ngoài cánh màu nâu đen

Theo những nghiên cứu của Wilson (1934); Fye và McAda (1972); Heppner (1998) cho thấy rằng:

Trứng được đẻ thành từng ổ và mỗi ổ từ 50 – 150 trứng Sản lượng trứng bình thường là khoảng 300 – 600 trên mỗi con Trứng thường được đẻ bề mặt dưới của lá,

và thường gần hoa và mũi của chi nhánh Nhìn từ trên xuống thì trứng có dạng hình tròn, nhưng khi kiểm tra từ phía bên trong trứng hơi nhọn, thuôn nhọn Những quả trứng có màu trắng, và được phủ một lớp vảy màu trắng làm cho các ổ trứng xuất hiện

mờ hoặc có hình như bông Trứng nở sau 2 – 3 ngày trong thời tiết ấm áp

Trong điều kiện ấm áp sâu non có 5 tuổi Sâu non tuổi 1 và tuổi 2 có màu xanh nhạt hoặc màu vàng nhưng có đường sọc nhạt ở tuổi thứ ba Trong tuổi thứ tư, lưng sâu sẫm màu hơn, và có một sọc ngang đen tối Tuổi 5 trên lưng màu xanh lá cây với màu hồng hoặc màu vàng bụng và một sọc màu trắng sang hai bên Một loạt các đốm đen hoặc dấu gạch ngang Đôi khi sâu non có màu tối Các lỗ thở có màu trắng với một đường viền màu đen hẹp Cơ thể láng không có lông và gai Ở các bang Miền

Nam, ấu trùng của S exigua được dễ dàng nhầm lẫn với loài sâu phía nam S eridania,

nhưng loài sâu phía Nam có thể được phân biệt bởi sự hiện diện của một điểm đen lớn ngang trên đoạn bụng đầu tiên phá vỡ dải bên

Hóa nhộng xảy ra trong đất Sâu non đẩy sức chui vào đất hóa nhộng, sâu cuốn cát và đất lại làm vỏ bộc và nằm hóa nhộng trong đó Nhộng có màu nâu nhạt và dài khoảng 15 – 20 mm

Trưởng thành với sải cánh rộng 25 – 30 mm Các cánh trước được đốm màu xám và nâu, và thường với một mô hình dải không thường xuyên và một ánh sáng màu hình hạt đậu Các cánh sau có màu xám hoặc màu trắng đồng đều hơn Giao phối xảy

ra ngay sau khi bắt cặp và đẻ trứng trong vòng 2 – 3 ngày Trưởng thành

S exigua đẻ trứng mạnh trong khoảng 3 – 7 ngày đầu, và thường chết trong vòng chín

đến 10 ngày kể từ khi vũ hóa

1.3.2 Đặc điểm sinh học

Vòng đời:

Ở nhiệt độ cao, giai đoạn trứng kéo dài khoảng 3 ngày, giai đoạn ấu trùng kéo dài 18 – 20 ngày, giai đoạn nhộng kéo dài 5 ngày, và con trưởng thành sống 4 – 10

ngày Vì vậy, tuổi thọ ngắn nhất S exigua là khoảng 27 ngày Tuy nhiên, hầu hết các

cá nhân có tuổi thọ từ 30 – 40 ngày (Capinera và Đại học Arkansas, 2006 )

S exigua hoạt động theo mùa và thay đổi đáng kể theo khí hậu Ở những nơi

ấm áp như Florida, tất cả các giai đoạn có thể được tìm thấy trong suốt cả năm, mặc dù tốc độ phát triển đã giảm trong những tháng mùa đông (Tingle và Mitchell, 1977) Các chu kỳ cuộc sống có thể được hoàn thành trong khoảng 24 ngày, và sáu thế hệ đã được nuôi trong năm tháng của thời tiết mùa hè ở Florida (Wilson, 1934)

Khả năng đẻ trứng:

Trưởng thành cái thường bắt đầu đẻ trứng 3 – 7 ngày sau khi vũ hóa, và đạt khoảng 300 – 600 trứng trong suốt vòng đời Trứng được đẻ thành ổ từ 50 – 150, và mỗi ổ được đẻ ở một nơi riêng biệt, trên cùng một cây hoặc trên các cây khác nhau, để tối đa hóa sự sốngcòn.Sau khi ổ trứng cuối cùng được đẻ ra thì trưởng thành cái sống chỉ một vài ngày nữa (Capinera, 2006; Takai và Wakamura, 2005; Zheng, 2001)

Tập tính:

Theo những nghiên cứu mới nhất của Zalom (2011) đã chỉ ra rằng:

Ngài S exigua hoạt động ban đêm, sâu non mới nở cho đến tuổi 2 có thể gây

hại, phát triển và tập trung thành từng đàn ăn phần thịt lá phía trên, chỉ để chừa lại phần gân lá Cho đến tuổi 3 – 5 bắt đầu phân tán, mức độ ăn mạnh hơn, chỉ chừa lại phần gân lá chính Sâu phá hoại mạnh và lúc sáng sớm và chiều tối Tính chất nguy hại của sâu xanh da láng trên đồng ruộng khi có nguồn thức ăn dồi dào, sâu tập trung phá hoại phần non của cây như lá non, búp,…

Ấu trùng của S exigua dùng miệng ăn phần lá và trái cây Ấu trùng chủ yếu kiếm ăn trên mặt dưới của lá và S exigua được gây hại trên 50 loài thực vật và phân phối trên 10 họ thực vật trên toàn thế giới Loại cây trồng nhạy cảm với S exigua bao

gồm ngô, cỏ linh lăng, đậu Hà Lan, cà chua, khoai tây, các loại đậu, đậu tương, hành tây, rau diếp, bông, thuốc lá Đôi khi còn ăn thịt lẫn nhau đặc biệt là khi thiếu thức ăn Trưởng thành sử dụng mút phần miệng để uống mật hoa của nhiều loài thực vật

có hoa

Một số nghiên cứu của East (1989 và Zalom (1986 đã ghi nhận được sâu non

ăn cả lá và trái cây Ở Florida S exigua được coi là dịch hại nghiêm trọng của cây hoa

và bông Sâu non tuổi nhỏ sống bầy đàn ăn phần biểu bì của lá Khi lớn sâu sống đơn

độc ăn lủng lá gây thiệt hại nghiêm trọng cho năng suất cây trồng S exigua cũng chui

sâu vào bên trong và trên các chồi của cây trồng Cà chua hoa quả là dễ bị tổn thương,

đặc biệt là gần trưởng thành, nhưng S exigua không được coi là như đe dọa cà chua

1.4 Biện pháp phòng trừ

Biện pháp thủ công: Theo ghi nhận của Lê Thị Sen (1999) có thể áp dụng biện pháp phòng trừ sâu xanh da láng như thường xuyên quan sát ruộng để phát hiện ổ trứng và kịp thời ngắt bỏ

Biện pháp canh tác: Để phòng trừ sâu xanh da láng hiệu quả cần phải dọn vệ sinh đồng ruộng trước khi trồng (tàn dư thực vật và cỏ dại); luân chuyển cơ cấu mùa

vụ, trồng cây với mật độ vừa phải; bón phân cân đối; thăm ruộng thường xuyên (Bùi Cách Tuyến và ctv, 2009)

Biện pháp sinh học: Rodrigo Lasa và ctv (2006) ghi nhận việc sử dụng SeMNPV (multiple nucleopolyhedrovirus) trên cây ớt ngọt tại Tây Ban Nha để khống chế mật độ của sâu xanh da láng Theo Wakamura và Takai (1990) đã sử dụng bẫy đèn

để khống chế mật độ thành trùng của sâu xanh da láng trên ruộng củ cải đường và hành tỏi tại Nhật Bản Các kết quả nghiên cứu gần đây cho thấy, các loài thiên địch đống vai trò kìm hãm sự phát triển của sâu xanh da láng một cách rõ rệt Thiên địch sâu xanh da láng có thể chia làm 2 nhóm: Nhóm kí sinh như ong mắt đỏ, ong kén

trắng, Bacillus thuringiensis, virus…Và nhóm ăn thịt: bọ rùa, nhện

Biện pháp hóa học: Một báo cáo của Edward và ctv (1993) đã chỉ ra rằng sử dụng thuốc gốc phethoate, mevinphos, methomyl, carbofuran, cartap có hiệu quả trong phòng trừ sâu xanh da láng trên cây hành tại Đài Loan Theo Lê Thị Sen (1999), phun thuốc khi sâu ở tuổi còn nhỏ (tuổi 1 – 2), sâu càng lớn càng khó diệt, thường xuyên thay đổi thuốc bảo vệ thực vật để tránh hiện tượng kháng thuốc

S exigua là một loại sâu hại nghiêm trọng của các loại rau ở Trung Quốc, và

biện pháp phòng trừ phụ thuộc rất nhiều vào thuốc trừ sâu hóa học Tình trạng kháng hiện tại của chín loại thuốc trừ sâu đã được điều tra trong ở 7 tỉnh của Trung Quốc

trong thời gian 2009 – 2012 Quần thể S exigua đã phát triển và kháng đến tám trong

chín loại thuốc trừ sâu được thử nghiệm: benzoate emamectin (4 – 348 lần), indoxacarb (2 – 41 lần), spinosad (5 – 38 lần), chlorantraniliprole (2 – 44 lần), tebufenozide (2 – 87 lần), chlorfluazuron (3 – 31 lần), cypermethrin (79 – 1240 lần),

và chlorpyrifos (8 – 3080 lần (Đại học Nông nghiệp Nam Kinh, Trung Quốc)

Đứng trước tình hình này rất nhiều nổ lực tìm kiếm giải pháp giải quyết vấn đề trên Quan điểm IPM (Integrated Pest Management – quản lý dịch hại tổng hợp đã ra đời, trong đó đấu tranh sinh học dịch hại đóng vai trò quan trọng trong điều chỉnh sự cân bằng sinh học của quần thể đồng thời không gây ra hiện tượng kháng thuốc Virus gây bệnh côn trùng đã được các nhà khoa học trên thế giới phát hiện ra 1,540 loài, ngay từ đầu thập kỉ 80 của thế kỷ XX thuốc trừ sâu virus phát triển với nhịp độ rất

nhanh, có hơn 20 loài virus của các loài sâu hại đã được sản xuất theo phương pháp công nghiệp thành dạng thuốc trừ sâu thương mại và được bán trên thị trường để phòng trừ các loài sâu gậy hại cho cây trồng phổ biến như sâu ăn tạp, sâu khoang, sâu xanh da láng…(Kunimi, 2005; Hughes và Wood, 1981; Takatsuka, 2002; Phạm Thị Thùy, 2004)

Các nghiên cứu trong phòng cho kết quả về thời gian ủ bệnh NPV của sâu xanh

từ 3 – 5,5 ngày, tỉ lệ chết trong phòng thí nghiệm của sâu xanh tuổi 1 – 3 trên 90%, tuổi 4 – 6 từ 60 – 90 % Nghiên cứu ngoài đồng ruộng cũng cho kết quả tốt như: Mật

độ sâu xanh ở công thức phun NPV và thuốc hóa học luôn thấp hơn so với đối chứng (không phun thuốc) và hiệu lực của hai loại thuốc này gần tương đương nhau (NPV và Sherpa, 2003)

Theo Pourmirza (2000), virus NPV sau khi xâm nhập vào cơ thể côn trùng sẽ nhân lên ngay trong nhân hoặc trong nguyên sinh chất của tế bào phá hủy các mô và làm cho vật chủ chết Những côn trùng còn sống vẫn sẽ bị ảnh hưởng đến các giai đoạn sau như nhộng bị thối, ngài bị biến dạng, tuổi thọ trưởng thành giảm và khả năng

đẻ trứng thấp

Bên cạnh đó nguồn virus tồn tại trong tự nhiên dưới tác động của tự nhiên và quá trình canh tác tiếp tục xâm nhiễm ở những thế hệ tiếp theo Trên đồng ruộng NPV thường phát sinh gây chết sâu với tỷ lệ khá cao và luôn tồn tại dưới dạng thể vùi chờ điều kiện thuận lợi phát triển Hơn thế nữa các loài virus gây chết côn trùng có tính chuyên hóa cao do vậy mà NPV cũng được coi là một nhân tố quan trọng và ngày càng được chú ý nghiên cứu (Grzywacz, 1996)

Chính vì vậy, việc nhân nuôi lượng lớn sâu xanh da láng làm tiền đề cho nghiên cứu virus NPV rất quan trọng Hiện nay thức ăn tự nhiên cho tỷ lệ sống không cao cũng như không đáp ứng về mặt chất lượng Do đó nhân nuôi sâu xanh da láng trên thức ăn nhân tạo đã và đang được nghiên cứu mạnh mẽ

1.5 Một số nghiên cứu về thức ăn nhân tạo

Nuôi côn trùng với khối lượng lớn vẫn còn là một ngành khoa học trẻ Với sự giúp đỡ của các nhà di truyền học của côn trùng, dinh dưỡng của côn trùng, và nhà nghiên cứu hành vi côn trùng… Côn trùng được nuôi trong điều kiện đó sẽ làm cho côn trùng phát triển mạnh mẽ và thích nghi với môi trường hơn so với quần thể hoang

dã Những cải tiến này có thể xảy ra sau khi trải nghiệm thêm và nghiên cứu (Ef Knipling, 1979)

Theo Kogan (1980) việc tạo ra các loài côn trùng trong chế độ ăn nhân tạo là một bước đột phá trong chương trình quản lý dịch hại Nhưng chỉ gần đâychế độ ăn nhân tạo mới được quan tâm nhiều hơn đến các khía cạnh dinh dưỡng định lượng, bằng cách vượt qua những khó khăn về kỹ thuật trong việc đo lường và sử dụng thức

ăn Việc sử dụng thức ăn và cung cấp các điều kiện cơ bản cho sự tăng trưởng, phát triển và sinh sản của côn trùng, vì số lượng và chất lượng của thực phẩm được sử dụng trong các giai đoạn ấu trùng ảnh hưởng đến hiệu suất của con trưởng thành (Slansky, 1981; Parra, 1991)

Sự phát triển của chế độ ăn nhân tạo, đi tiên phong bởi Vanderzant (1962), tạo thuận lợi cho việc nhân nuôi một lượng lớn côn trùng của nhiều loài bộ Diptera, Lepidoptera và Coleoptera đã được nuôi thành công trong điều kiện phòng thí nghiệm (Bell, 1981; Burton và Perkins, 1972; Smith 1976; Singh và Moore, 1985; Chu và Wu, 1992; Blossey, 2000; Gupta, 2005)

Hầu hết các chế độ ăn phát triển để nuôi S exigua có tiềm năng tăng trưởng tốt,

nhưng một số chế độ ăn đã được loại trừ vì chi phí cho nhân nuôi đại trà khá cao (Shorey và Hale, 1965; Poitout và Bues, 1974; Singh và Moore, 1985) Một nỗ lực đáng kể đã được đầu tư vào sự phát triển của chế độ ăn nhân tạo hiệu quả về chi phí dựa trên việc sử dụng các nguyên liệu rẻ hơn, hoặc bằng cách giảm hoặc loại bỏ các thành phần không cần thiết và thử nghiệm tiềm năng thay thế bằng các thành phần khác (Bell, 1981; Fujita, 1998; Morimoto, 2004; Cappellozza, 2005)

Một so sánh về khả năng nhân nuôi sâu non S exigua trên thức ăn nhân tạo

(Công thức của Abdullah và ctv, 2007) và trên lá đậu nành trong điều kiện phòng thí nghiệm Thành phần của chế độ ăn nhân tạo gồm có: Đậu xanh, nấm men (baking yeast), methylparaben, acid sorbic, acid ascorbic, casein, choline chloride, agar, vitamin, formalin và nước cất Qua đó thấy rằng, sức sống của ấu trùng nuôi bằng thức

ăn nhân tạo (96,67% cao hơn so với ấu trùng nuôi trên lá đậu nành (63,64%) Trọng lượng của ấu trùng và nhộng nuôi theo chế độ ăn nhân tạo có ý nghĩa cao hơn so với

ấu trùng và nhộng khi nuôi bằng lá đậu nành Các giai đoạn ấu trùng và nhộng cho ăn với chế độ ăn nhân tạo là 15,7 ± 0,84 và 6,73 ± 0,51 ngày tương ứng, trong khi đó, khi nuôi bằng lá đậu nành là 18,65 ± 0,83 và 8,5 ± 0,52 ngày tương ứng Số lượng trung bình của trưởng thành cái ăn khi nuôi bằng chế độ ăn nhân tạo là 577,9 trứng ngược lại nuôi bằng lá đậu nành là 472,5 trứng (Abdullah và ctv, 2007)

Công thức đậu trắng (Trần Thị Thùy Dung, 2008) ghi nhận được khi nhân nuôi sâu ăn tạp trên thức ăn nhân tạo là 1 thành trùng cái cho tổng số trứng/ổ và số lượng trứng/con, có tỷ lệ trứng nở > 50 trứng chiếm khoảng 86,2% Tuổi thọ được rút ngắn trung bình 5,8 ngày Vòng đời trung bình 37 ngày Công thức này còn phụ thuộc vào nguồn nguyên liệu được cung cấp từ Nhật Bản đó là mầm lúa mì, nguyên liệu chính tác động lên sự sinh trưởng và phát trển của sâu

Một nghiên cứu khác của Sorour (2011) nghiên cứu được trọng lượng sâu non của 10 và 12 ngày tuổi trung bình là 249,16 ± 99,35 và 935,67 ± 283,51 mg Trọng lượng nhộng trung bình cao hơn các chế độ ăn uống được so sánh cụ thể là 366,41 ± 95,84 mg Khi nuôi trên chế độ ăn nhân tạo này cho thấy sự phát triển nhanh chóng của sâu non ước tính bằng 97,03 ± 2,53%, trung bình 13,78 ngày Hơn nữa, chi phí nguyên liệu giảm 45,6% cho mỗi một lít chế độ ăn này

Nhân nuôi một lượng lớn S exigua và nguồn sâu sạch không bị nhiễm bệnh là

một nhân tố quan trọng làm cơ sở cho thuốc trừ sâu sinh học (Shapiro 1982, 1986)

Nuôi S exigua hiệu quả trong phòng thí nghiệm là chìa khóa để đảm bảo một

nguồn cung cấp liên tục của một số lượng lớn các loài côn trùng cho sản xuất virus thương mại Nhiều kỹ thuật để nuôi côn trùng thuộc bộ Lepidoptera đã được phát triển

nhưng hầu hết trong số này là khả thi khi nuôi trong phòng thí nghiệm với quy mô nhỏ Đối với nhiều loài, các yêu cầu của về sức sống của ấu trùng, nhộng và trưởng thành là khá cao nên vẫn cần nghiên cứu đáng kể (Shieh, 1989; Szewczyk, 2006) Ở khía cạnh này, nghiên cứu nhằm phát triển chế độ ăn nhân tạo hiệu quả chi phí cho nuôi ấu trùng trong điều kiện môi trường có kiểm soát nắm giữ nhiều hứa hẹn (Szewczyk, 2006)

S exigua là một côn trùng gây hại quan trọng của nhiều loại rau và cây cảnh

trong vùng ôn đới và vùng cận nhiệt đới trên toàn thế giới SeMNPV, Baculoviridae là những tác nhân kiểm soát sinh học có hiệu quả cao trong công cuộc chống lại

S exigua, đặc biệt là trên các loại cây trồng nhà kính (Smits, 1987; Kolodny, 1997;

Lasa, 2007) Tuy nhiên, SeMNPV chỉ có thể được sản xuất trong quá trình sống của côn trùng khi nhiễm bệnh, sản xuất quy mô thương mại có thể tốn kém so với các hóa chất tổng hợp hoặc các hợp chất tự nhiên được sản xuất trong quá trình lên men (Blacket, 1997; Szewczyk, 2006) Cùng với chất lượng của kí chủ cũng được xem là một yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến chất lượng của chế phẩm virus (Shapiro 1982, 1986)

Nhân nuôi S exigua trong phòng thí nghiệm bằng thức ăn nhân tạo là chìa khóa

để đảm bảo cung cấp liên tục của một số lượng lớn côn trùng trong sản xuất virus thương mại Nhiều kỹ thuật nuôi Lepidoptera đã được phát triển (Baumhover, 1966; Dutky, 1962; và ctv , nhưng hầu hết những nghiên cứu này chỉ khả thi khi nhân nuôi trong phòng thí nghiệm quy mô nhỏ Đối với nhiều loài, yêu cầu các giai đoạn phát triển của côn trùng khá cao (Shieh, 1989; Szewczyketal, 2006)

Lượng chất dinh dưỡng cân bằng đóng vai trò rất quan trọng trong sự sinh trưởng phát triển và sinh sản của các loài côn trùng và cho phép nuôi liên tục qua một

nhiều thế hệ Hầu hết các chế độ ăn nhân tạo để nuôi S exigua hỗ trợ tăng trưởng côn

trùng tốt, nhưng đã được loại trừ như chế độ ăn tiềm năng cho nuôi đại trà vì giá thành cao (Shorey và Hale, 1965; Poitout và Bues, 1974; Singh và Moore, 1985) Một trong những nỗ lực đáng kể để triển khai hiệu quả nhân nuôi côn trùng trên chế độ ăn nhân tạo là sử dụng các nguyên liệu rẻ hơn, giảm hoặc loại bỏ các thành phần không cần

thiết và thử nghiệm tiềm năng của các thành phần thay thế (Bell, 1981; Morimoto, 2004; Cappellozza, 2005)

Các nghiên cứu hiện tại nhằm đánh giá những tác động của chế độ ăn nhân tạo

dựa trên sự tăng trưởng và sinh sản của S exigua được nuôi trong phòng thí nghiệm

Các chế độ này đã được phát triển bởi Hoffmann và Lawson (1964) cho nhân nuôi sâu

nhóm sâu rừng Tobacco Hornworm, Manduca sexta (L.) (Lepidoptera: sphingidae), đồng thời cũng được xem là chế độ ăn phát triển cho sâu bướm, lymantria dispar (L.) (Lepidotpera: Lymantriidae) (Theo Bell, 1991) Một nghiên cứu S exigua trong

phòng thí nghiệm ban đầu được cung cấp bởi Trung tâm Sinh thái và Thủy văn (CEH tại Oxford, Vương quốc Anh, đã duy trì liên tục ở nhiệt độ 25 2°C, độ ẩm 70 5% Sâu non được nuôi bằng một chế độ ăn uống nhân tạo chuyển thể từ Hoffman và Lawson (1964)

Sự tồn tại và phát triển của các giai đoạn của S exigua đã được nghiên cứu khi

sử dụng hai chế độ ăn là chế độ ăn nhân tạo và trên lá đậu tương Nhận thấy rằng, có sự

khác biệt đáng kể về tỷ lệ sống của S exigua nuôi trên thức ăn nhân tạo Cụ thể là chế

độ ăn nhân tạo cho tỷ lệ sống chiếm 96,67% và trên lá đậu tương là 63,64% Tỷ lệ nhộng khi nuôi trên chế độ ăn nhân tạo cũng cao hơn đáng kể chiếm 86,11% so với nuôi trên lá đậu tương 80% (Shorey và Hale, 1965

Sự tồn tại của S exigua từ trứng đến trưởng thành là 62% đã được tìm thấy là tốt

hơn chế độ ăn uống báo cáo của Shorey và Hale (1965 Trong trường hợp của lá đậu

tương, sự tồn tại của ấu trùng và nhộng của S exigua là 63,64% và 80% tương ứng

trong khi sự tồn tại của trứng đến trưởng thành là 24% là thấp hơn nhiều so với

S exigua nuôi theo chế độ ăn nhân tạo Sự khác biệt trong các giai đoạn phát triển các

giai đoạn khác nhau trên thức ăn nhân tạo và trên lá đậu tương là có ý nghĩa thống kê rất quan trọng Sự khác biệt trong giai đoạn sâu non đã được quan sát trên lá đậu tương (18,65 ± 0,83 ngày) và sử dụng chế độ ăn uống nhân tạo (15,70 ± 0,84 ngày) Các nhộng từ lá đậu tương cho thấy khoảng thời gian dài hơn (8,5 ± 0,52 ngày so với chế

độ ăn nhân tạo (6,73 ± 0,51 ngày Trưởng thành nuôi từ chế độ ăn nhân tạo có tuổi thọ lâu hơn (6,29 ± 1,42 ngày so với trưởng thành được nuôi bằng lá đậu tương (5,3 ± 0,66

ngày) Tổng thời gian từ trứng đến khi vũ hóa trên lá đậu nành và chế độ ăn nhân tạo lần

lượt là 30,15 ± 1,81 ngày và 25,43 ± 1,82 ngày Vòng đời của S exigua khoảng 36 ngày

ở 26,7°C, nhưng ngắn hơn trong mùa hè (24 ngày và trứng nở sau 2 – 5 ngày Sâu non trải qua 5 tuổi cần khoảng ba tuần để phát triển (Baldwin, 1994) Kết quả của cuộc điều

tra này tương tự như Shorey và Hale (1965 đã báo cáo rằng sự phát triển S exigua

hoàn thành vòng đời khoảng 26,8 ngày khi nuôi ở nhiệt độ là 27°C trên môi trường nhân tạo Boldt (1975) báo cáo rằng ấu trùng cần 18 ± 0,3 ngày đối với phát triển ở nhiệt độ là 25°C trên lá đậu tương điều kiện phòng thí nghiệm

Bhattacharya và Rathore (1980) báo cáo rằng giai đoạn ấu trùng bao gồm 5 – 7 tuổi trong 17 – 22 ngày, sau 6 – 8 ngày hóa nhộng trong đất, và chu kỳ sống là 20 – 35

ngày Fye và McAda (1972) cho rằng S exigua từ trứng đến trưởng thành mất khoảng

hai tuần ở 30°C mà khác với các nghiên cứu trên có thể là do nhiệt độ cao Các ảnh

hưởng của nhiệt độ trên S exigua nuôi trên một chế độ ăn nhân tạo trong phòng thí

nghiệm đã được điều tra bởi Lee (1991 đã chỉ ra rằng các giai đoan sâu non ở nhiệt độ

300C là 10,5 ngày; nhiệt độ 250C là 17,3 ngày và 20°C là 32,2 ngày Và cũng cho biết khi nhiệt độ cao làm giảm khả năng đẻ trứng và tăng tỷ lệ chết của trưởng thành cái Ngưỡng phát triển ước tính là giai đoạn trứng khoảng 13,20C; Sâu non là 15,40C và nhộng là 15,4°C (Lee, 1991; Chu, 1992)

Một số báo cáo cũng chỉ ra được là vòng đời của S exigua nuôi trên thức ăn nhân tạo là 15,4 – 17,5 ngày và trên lá đậu tương là 14,9 – 15 ngày Trứng của S exigua đã

được báo cáo là từ 50 – 150 trứng, phủ lông trắng ngà, số trứng trung bình khi nuôi theo chế độ ăn nhân tạo là 577,9 trứng và lá đậu tương là 472,5 trứng

Atkins (1960) báo cáo rằng S exigua đẻ trung bình 520 trứng Turnipseed (1973)

quan sát thấy một con cái đẻ trứng khoảng 80 trứng một ổ, tổng cộng 1300 – 1500 trứng

và sẽ nở trong 2 – 3 ngày Trong cuộc điều tra mới nhất gần đây, khi ấu trùng được nuôi theo chế độ ăn nhân tạo và lá đậu tương với tỷ lệ nở tương ứng là 53,18 và 32,42%

Chương 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

Đề tài được thực hiện từ tháng 10/2016 đến tháng 3/2017, tại phòng thí nghiệm côn trùng, bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, khoa Nông Học, trường Đại học Nông Lâm TP

Thức ăn cho sâu xanh da láng S exigua là lá cải xanh không sử dụng thuốc bảo

vệ thực vật, được trồng tại khu vực làm thí nghiệm

2.3 Nội dung nghiên cứu

Đánh giá khả năng nhân nuôi S exigua trên một số công thức thức ăn nhân tạo

Xác định ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi thọ của

ngài cái S exigua

Xác định ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của ngài cái

S exigua

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Thu thập và nhân nuôi S exigua

Tiến hành thu bắt sâu non sâu xanh da láng S exigua tại các ruộng trồng rau ở

Tân Uyên - Bình Dương Sau khi thu thập sâu non tiến hành đem về phòng thí nghiệm

và nhân nuôi với thức ăn là cây cải xanh trong hộp nhựa hình chữ nhật

Hình 2.1 Thu thập và nhân nguồn S exigua

a: thu thập nguồn S exigua; b: nhân nhuồn S exigua trong phòng thí nghiệm

Thay thức ăn 3 ngày/lần đối với sâu non từ tuổi 1 đến tuổi 2; 2 ngày/lần đối với sâu non tuổi 3; 1 ngày/lần đối với sâu non tuổi 4 và tuổi 5 Khi đẩy sức thì tách sâu để riêng vào hộp nhựa hình chữ nhật Sau khi sâu non hóa nhộng tiến hành thu nhộng và

để vào đĩa petri có giấy ẩm để giữ cho nhộng đủ ẩm

Hình 2.2 Nhộng sâu xanh da láng S exigua

Khi nhộng vũ hóa, tiến hành thu ngài cho bắt cặp giao phối trong lồng lưới (30

x 25 x 20 cm , bên trong lồng lưới có một đĩa nhựa đựng giấy thấm mật ong 10% cho ngài ăn thêm và cải cho ngài đẻ trứng Sau 24h tiến hành thay mật ong, cải mới cho ngài đồng thời thu trứng để riêng vào lồng lưới (30 x 25 x 20 cm)

Hình 2.3 Lồng nhân nguồn ngài S exigua

Sau khi sâu nở thì tiến hành tách sâu vào hộp nhựa và nuôi trên cải xanh Tiếp

tục nhân nuôi S exigua đến khi đủ mật số làm thí nghiệm

2.4.2 Thí nghiệm đánh giá khả năng nhân nuôi S exigua trên một số công thức

thức ăn nhân tạo

Bố trí thí nghiệm:

Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố với 4 nghiệm thức và 10 lần lặp lại

Nghiệm thức 1: Công thức đậu trắng (D1 (Trần Thị Thùy Dung, 2008)

Nghiệm thức 2: Công thức bột đậu nành (D2 (Công thức đề xuất)

Nghiệm thức 3: Công thức đậu nành (D3 (Li Guanghong và ctv, 1996)

Nghiệm thức 4: Nuôi bằng lá cải xanh (Đối chứng

Chuẩn bị thức ăn cho sâu non S exigua:

+ Công thức D1; D2; D3; được chuẩn bị như sau:

Bước 1: Đối với các loại đậu phải ngâm trước khi nấu 4 - 6h cho đậu mềm sau

đó đem nghiền nhỏ bằng máy xay sinh tố

Bước 2: Lấy ½ lượng nước cất trộn đều với các thành phần (trừ agar trong mỗi công thức bằng máy xay sinh tố trong thời gian 3 phút (hỗn hợp j1 Lấy ½ lượng nước cất còn lại pha đều với agar và đun sôi trên bếp (hỗn hợp j2 Sau đó trộn đều hỗn hợp j1 và j2 bằng máy xay sinh tố trong thời gian 1 phút (hỗn hợp j3

Bước 3: Hấp khử trùng hỗn hợp j3 trong thời gian 10 phút tại 120oC và 1,2 atm Sau đó để j3 nguội và bảo quản trong tủ lạnh tại điều kiện 4 – 50C Cắt hỗn hợp J3 thành từng phần nhỏ cho vào hộp nuôi sâu Mỗi hộp 1 phần

+ Lá cải xanh được chuẩn bị như sau:

Trồng cải xanh hoàn toàn không sử dụng thuốc trừ sâu Trước khi cho sâu ăn tiến hành dùng cồn 70o sát khuẩn cho lá

Hình 2.4 Thức ăn dùng bố trí thí nghiệm

a: công thức đậu trắng (D1 ; b: công thức bột đậu nành (D2 ; công thức đậu nành

(D3 ; d: cải xanh (đối chứng

Phương pháp tiến hành:

Chẩn bị thức ăn tương ứng với từng nghiệm thức trong hộp nhựa trụ hình tròn (đường kính 11cm, chiều cao 7cm , nắp hộp làm bằng lưới để tạo thông thoáng Thả

20 sâu non tuổi 1 hai ngày tuổi vào từng nghiệm thức

Hình 2.5 Bố trí thí nghiệm đánh giá khả năng nhân nuôi S exigua trên một số công

thức thức ăn nhân tạo Thay thức ăn 3 ngày/lần đối với sâu non từ tuổi 1, tuổi 2 và sâu non tuổi 3 ; 2 ngày/lần đối với sâu non tuổi 4 và tuổi 5 Khi sâu non chuẩn bị đẩy sức hóa nhộng thì không thay thức ăn

Sau khi sâu non hóa nhộng tiến hành thu nhộng và để vào đĩa petri, dưới đáy hộp có giấy ẩm để giữ cho nhộng đủ ẩm và để vào lồng lưới (30 x 25 x 20 cm) Khi nhộng vũ hóa, tiến hành thu ngài cho bắt cặp giao phối trong lồng hình trụ (đường kính 7 cm, chiều cao 20 cm), bên trong lồng có giấy thấm mật ong 10% cho ngài ăn thêm và cải cho ngài đẻ trứng Sau 24h tiến hành thay mật ong, cải mới cho ngài đồng thời thu trứng để riêng vào lồng lưới (30 x 25 x 20 cm)

Chỉ tiêu theo dõi:

Thời gian các pha phát dục và hoàn thành vòng đời (ngày

Tỷ lệ sâu chết (% = (Tổng số sâu chết /(Tổng số sâu bố trí thí nghiệm)

Tỷ lệ hóa nhộng (%) = (Tổng số nhộng /(Tổng số sâu bố trí thí nghiệm) Chiều dài sâu non tuổi 5 (mm

Trọng lượng nhộng (mg

Tỷ lệ vũ hóa (% = (Tổng số con vũ hóa /(Tổng số sâu hóa nhộng)

Tỷ lệ con cái (% = (Số con cái vũ hóa đẻ trứng được /(Tổng số ngài vũ hóa Khả năng đẻ trứng/ngài cái: Số trứng đẻ của ngài cái (trứng

Tỷ lệ trứng nở (% = (Tổng số trứng nở /(Tổng số trứng đẻ

Bảng 2.1 Thành phần thức ăn nhân tạo (1kg)

2.4.3 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và

tuổi thọ của ngài cái S exigua

Hình 2.6 Các nồng độ mật ong dùng trong thí nghiệm ảnh hửng của thức ăn thêm đến

khả năng đẻ trứng và tuổi thọ của ngài cái S exigua

a: mật ong 0% (nước cất); b: mật ong 10%; c: mật ong 20%; d: mật ong 30%;

e: mật ong 40%

Phương pháp tiến hành:

Cho 1 cặp ngài (đực – cái) mới vũ hóa 1 ngày tuổi ăn thêm và bắt cặp trong 1 lồng hình trụ (đường kính 7 cm, chiều cao 20 cm) Bên trong lồng có giấy thấm mật ong tương ứng với các nghiệm thức và cây cải (vị trí cho ngài cái đẻ trứng) Mỗi ngày tiến hành thu trứng và thay thức ăn thêm cho ngài cái Tiếp tục tiến hành như thế cho đến khi ngài cái chết Khi ngài cái chết giải phẫu bộ phận đẻ trứng để xác định số trứng chưa đẻ

Hình 2.7 Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng của thức ăn thêm đến khả năng đẻ trứng và tuổi

thọ của ngài cái S exigua

Chỉ tiêu theo dõi:

2.4.4 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của

ngài cái S exigua

C dùng làm thí nghiệm

Hình 2.8 Chuẩn bị mùi kí chủ tương ứng trước khi bố trí thí nghiệm

a: không mùi; b: cải xanh; c: hành lá; d: đậu nành; a1: giấy A4 không mùi; b1: giấy A4

mùi cải xanh; c1: giấy A4 mùi hành lá; d1: giấy A4 mùi đậu nành

Phương pháp tiến hành:

Thả 1 cặp ngài (đực – cái) S exigua mới vũ hóa 1 ngày tuổi ăn thêm mật ong

a% (a là nồng độ mật ong tốt nhất ở thí nghiệm 2 trong lồng hình trụ (đường kính 7

cm, chiều cao 20 cm)tương ứng với từng nghiệm thức Phía trong lồng lưới có giấy A4

có mùi kí chủ tương ứng với từng nghiệm thức Sau 24h thay thức ăn và giấy A4 có mùi kí chủ mới đồng thời kiểm tra giấy A4 có mùi kí chủ cũ để xác định số trứng đẻ theo từng ngày Tiếp tục tiến hành cho đến khi ngài cái chết Khi ngài cái chết giải phẫu bộ phận đẻ trứng để xác định số trứng chưa đẻ

Hình 2.9 Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng của mùi kí chủ đến khả năng đẻ trứng của

2.5 Phương pháp xử lý số liệu

Số liệu được nhập, xử lý và vẽ đồ thị dựa vào phần mềm Excel (2010)

Số liệu được xử lý thống kê Anova bằng phần mềm SAS 9.1