Nghiên cứu thành phần hóa học và sắc ký dấu vân tay của thân rễ hai loài củ gấu (cyperus rotundus l ) và của gấu biển (cuperus stoloniferus retz )

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN MINH CHÂU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ SẮC KÝ DẤU VÂN TAY CỦA THÂN RỄ HAI LOÀI: CỦ GẤU (CYPERUS ROTUNDUS L.) VÀ CỦ GẤU BIỂN (CYPERUS STOLONIFERUS RETZ.) LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội – 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN MINH CHÂU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ SẮC KÝ DẤU VÂN TAY CỦA THÂN RỄ HAI LOÀI: CỦ GẤU (CYPERUS ROTUNDUS L.) VÀ CỦ GẤU BIỂN (CYPERUS STOLONIFERUS RETZ.) Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số: 62440114 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Trần Thượng Quảng TS Nguyễn Tiến Đạt Hà Nội – 2016 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Hà Nội, ngày Tập thể hướng dẫn TS Trần Thượng Quảng TS.Nguyễn Tiến Đạt tháng năm 2016 Nghiên cứu sinh Nguyễn Minh Châu ii LỜI CẢM ƠN Trước tiên, tơi xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới TS Trần Thượng Quảng TS Nguyễn Tiến Đạt, hai thầy hướng nghiên cứu, tận tình hướng dẫn, động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực công việc luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn thầy cô giáo, cán Bộ mơn Hóa Hữu - Viện Kỹ thuật Hóa học - Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, cán phòng Hoạt chất Sinh học - Viện Hóa Sinh Biển - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, ban lãnh đạo cán Cơng ty Cổ phần Thiết bị Sài Gòn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để hồn thành luận án Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè cổ vũ, động viên tơi hồn thành tốt luận án Xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng Tác giả Luận án Nguyễn Minh Châu năm 2016 iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ ix MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 Giới thiệu chi Cyperus L 1.1.1 Chi Cyperus L giới 1.1.2 Chi Cyperus L Việt Nam 1.2 Thành phần hóa học chi Cyperus L 1.2.1 Các hợp chất terpenoid 10 1.2.2 Các hợp chất flavonoid 13 1.2.3 Các hợp chất quinone 14 1.2.4 Thành phần tinh dầu 15 1.2.5 Các hợp chất khác 16 1.3 Nghiên cứu sắc ký dấu vân tay 16 1.4 Giới thiệu hai loài củ gấu củ gấu biển 21 1.4.1 Vài nét thực vật 21 1.4.2 Công dụng hoạt tính sinh học 23 1.4.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học 24 1.4.4 Các nghiên cứu sắc ký dấu vân tay 34 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1 Mẫu thực vật 36 2.1.1 Mẫu nghiên cứu thành phần hóa học 36 2.1.2 Mẫu nghiên cứu dấu vân tay sắc ký 36 2.2 Phương pháp phân lập hợp chất 37 2.2.1 Phương pháp ngâm chiết 37 2.2.2 Sắc ký lớp mỏng (TLC) 37 2.2.3 Sắc ký cột (CC) 38 2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất 38 2.3.1 Điểm nóng chảy (Mp) 38 2.3.2 Độ quay cực ([α]D) 38 2.3.3 Phổ hồng ngoại (IR) 38 2.3.4 Phổ lưỡng sắc tròn (CD) 38 2.3.5 Phổ khối lượng (MS) 38 2.3.6 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 38 2.4 Phương pháp xây dựng dấu vân tay sắc ký 39 2.4.1 Phương pháp chuẩn bị mẫu 39 iv 2.4.2 Sắc ký lớp mỏng hiệu cao (HPTLC) 39 2.4.3 Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 39 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 40 3.1 Chiết phân lập hợp chất từ thân rễ củ gấu 40 3.1.1 Quy trình chiết phân lập 40 3.1.2 Thông số vật lý kiện phổ chất phân lập từ thân rễ củ gấu 43 3.2 Chiết phân lập hợp chất từ thân rễ củ gấu biển 49 3.2.1 Quy trình chiết phân lập 49 3.2.2 Thông số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập từ thân rễ củ gấu biển 52 3.3 Phân tích định tính sắc ký dấu vân tay HPTLC 55 3.3.1 Chuẩn bị mẫu phân tích HPTLC 55 3.3.2 Điều kiện sắc ký HPTLC 55 3.3.3 Kết 55 3.4 Nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC 55 3.4.1 Chuẩn bị mẫu phân tích HPLC 55 3.4.2 Điều kiện phân tích HPLC 55 3.4.3 Kết 56 3.5 Nghiên cứu định lượng số thành phần HPLC 56 3.5.1 Chuẩn bị mẫu phân tích định lượng HPLC 56 3.5.2 Phân tích định lượng HPLC 56 3.5.3 Kết 56 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 57 4.1 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất 57 4.1.1 Hợp chất CR1: ()-3,5,6,7,8,4-hexahydroxyflavane (Hợp chất mới) 57 4.1.2 Hợp chất CR2: (+)-catechin 60 4.1.3 Hợp chất CR3: eriodictyol 63 4.1.4 Hợp chất CR4: luteolin 67 4.1.5 Hợp chất CR5: 7,4'-dihydroxy-5,3'-dimethoxyflavone 70 4.1.6 Hợp chất CR6: hovetrichoside C 71 4.1.7 Hợp chất CR7: piceatannol 75 4.1.8 Hợp chất CR8: resveratrol 78 4.1.9 Hợp chất CR9: trans-scirpusin A 79 4.1.10 Hợp chất CR10: trans-scirpusin B 83 4.1.11 Hợp chất CR11: cassigarol E 84 4.1.12 Hợp chất CR12: 1,4-dihydroxyeudesm-11-ene 88 4.1.13 Hợp chất CR13: 1β,4β-dihydroxyeudesm-11-ene 90 4.1.14 Hợp chất CR14: 5,7-dihydroxychromone 91 4.1.15 Hợp chất CR15: (+)-lyoniresinol 3a-O--D-glucoside 94 4.1.16 Hợp chất CS1: (S)-5,5,7-trihydroxy-2,4-dimethoxy-6-methylflavanone (Hợp chất mới) 97 v 4.1.17 Hợp chất CS2: 3',4',6-trihydroxy-4-methoxyaurone 102 4.1.18 Hợp chất CS3: -mangostin 106 4.1.19 Các hợp chất khác 110 4.2 Nghiên cứu định tính dấu vân tay sắc ký HPTLC 113 4.3 Nghiên cứu định tính dấu vân tay sắc ký HPLC 115 4.3.1 Đánh giá độ lặp lại phân tích dấu vân tay sắc ký 115 4.3.2 Kết phân tích dấu vân tay sắc ký 116 4.4 Nghiên cứu định lượng số thành phần HPLC 125 4.4.1 Chuẩn bị chất thị thiết lập đường chuẩn định lượng 125 4.4.2 Đánh giá hàm lượng chất mẫu 127 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 130 TÀI LIỆU THAM KHẢO 132 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN 147 PHỤ LỤC 148 vi DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng Anh 13 Cacbon-13 Nuclear Resonance Spectroscopy C-NMR Tiếng Việt Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Cacbon 13 H-1H COSY H-1H Correlation Spectroscopy H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Spectroscopy proton Phổ tương tác proton-proton CC Column Chromatography Sắc ký cột CD Circular Dichroism spectroscopy Phổ lưỡng sắc tròn CE Capillary Electrophoresis Điện di mao quản Cơng thức phân tử CTPT Đầu dò mảng diốt DAD Diode Array Detector DEPT Distortionless Enhancement Polarization Transfer DMSO Dimethyl sulfoxide ESI-MS ElectroSpray Spectroscopy GC Gas Chromatography GC-MS Gas Chromatography spectroscopy Glu Glucose Glucozơ HMBC Heteronuclear Multiple Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết by Phổ DEPT (CH3)2SO Mass Phổ khối phun mù điện tử Ionization Sắc ký khí Mass Sắc ký khí khối phổ Bond Correlation spectroscopy Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC High Performance Chromatography HPTLC High Performance Chromatography HR-ESI-MS High Resolution ElectroSpray Phổ khối ion hóa phun mù điện Ionization Mass Spectroscopy tử phân giải cao HSQC Heteronuclear Single Coherence spectroscopy IR Infrared spectroscopy Phổ hồng ngoại J Coupling constant Hằng số tương tác KLPT Thin Layer Sắc ký lớp mỏng hiệu cao Quantum Phổ tương tác trực tiếp H-C Khối lượng phân tử vii Kí hiệu Tiếng Anh LC-MS Liquid Chromatography Spectroscopy MEEKC Microemulsion electrokinetic Tiếng Việt Mass Sắc ký lỏng khối phổ Sắc ký điện động vi nhũ tương chromatography MeOH Methanol Methanol Mp Melting point Điểm nóng chảy NMR Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân NOE Nuclear Overhauser Effect Hiệu ứng NOE NOESY Nuclear Overhauser Phổ hiệu ứng NOE Effect Spectroscopy ppm part per million Phần triệu QTOF Quadrupole Time Of Flight Tứ cực thời gian bay RT Retention time Thời gian lưu SPME Solid-phase microextraction Vi chiết pha rắn TLC, SKLM Thin Layer Chromatography Sắc ký lớp mỏng TMS Tetramethylsilane (CH3)4Si TOF-MS Time Of Flight Mass Spectroscopy Khối phổ thời gian bay UPLC Ultra performance chromatography UV Ultraviolet liquid Sắc ký lỏng siêu hiệu Tử ngoại VAST Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam YHCT Y học cổ truyền δC Độ chuyển dịch hóa học cacbon δH Độ chuyển dịch hóa học proton viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Danh sách loài thực vật thuộc chi Cyperus L Việt Nam Bảng 1.2 Danh sách chất phân lập từ loài chi Cyperus L Bảng 1.3 Thành phần tinh dầu có loài chi Cyperus L 15 Bảng 1.4 Một số cơng trình giới nghiên cứu dấu vân tay sắc ký 18 Bảng 1.5 Các loại dược liệu cơng trình [5] 20 Bảng 1.6 Danh sách chất phân lập từ Cyperus rotundus L 25 Bảng 2.1 Địa điểm thu thập mẫu nghiên cứu 36 Bảng 3.1 Chương trình dung mơi sắc ký dấu vân tay HPLC 56 Bảng 3.2 Nồng độ chất thị (µg/ml) để xây dựng đường chuẩn 56 Bảng 4.1 Số liệu phổ NMR hợp chất CR1 chất tham khảo 60 Bảng 4.2 Số liệu phổ NMR hợp chất CR2 chất tham khảo 63 Bảng 4.3 Số liệu phổ NMR hợp chất CR3 chất tham khảo 67 Bảng 4.4 Số liệu phổ NMR hợp chất CR4 chất tham khảo 70 Bảng 4.5 Số liệu phổ 1H-NMR hợp chất CR5 chất tham khảo 71 Bảng 4.6 Số liệu phổ NMR hợp chất CR6 chất tham khảo 74 Bảng 4.7 Số liệu phổ NMR hợp chất CR7 chất tham khảo 78 Bảng 4.8 Số liệu phổ 1H-NMR hợp chất CR8 chất tham khảo 79 Bảng 4.9 Số liệu phổ NMR hợp chất CR9 chất tham khảo 82 Bảng 4.10 Số liệu phổ NMR hợp chất CR10 chất tham khảo 84 Bảng 4.11 Số liệu phổ NMR hợp chất CR11 chất tham khảo 87 Bảng 4.12 Số liệu phổ NMR hợp chất CR12 chất tham khảo 90 Bảng 4.13 Số liệu phổ NMR hợp chất CR13 chất tham khảo 91 Bảng 4.14 Số liệu phổ NMR hợp chất CR14 chất tham khảo 93 Bảng 4.15 Số liệu phổ NMR hợp chất CR15 chất tham khảo 96 Bảng 4.16 Số liệu phổ NMR hợp chất CS1 chất tham khảo 102 Bảng 4.17 Số liệu phổ NMR hợp chất CS2 chất tham khảo 106 Bảng 4.18 Số liệu phổ NMR hợp chất CS3 chất tham khảo 109 Bảng 4.19 Tổng hợp cấu trúc hợp chất phân lập từ thân rễ đối tượng nghiên cứu củ gấu (Cyperus rotundus L.) củ gấu biển (Cyperus stoloniferus Retz.) khuôn khổ luận án 110 Bảng 4.20 Giá trị Rf cường độ vết sắc ký đồ HPTLC quan sát ánh sáng UV 366 nm chưa phun thuốc thử 113 Bảng 4.21 Danh sách chất thị sử dụng nghiên cứu sắc ký dấu vân tay 119 Bảng 4.22 Hệ số tương đồng mẫu so với mẫu CGV1, CGB1 123 Bảng 4.23 Hệ số tương đồng mẫu so với mẫu CGV, CGB trung bình cộng 124 Bảng 4.24 Các thông số phân tích định lượng số chất HPLC 126 Bảng 4.25 Hàm lượng chất (µg/g) mẫu nghiên cứu 127 - 39- Phổ DEPT hợp chất CS2 Phổ HMBC hợp chất CS2 - 40- Phổ ESI-MS hợp chất CS2 - 41- Phụ lục 18 Phổ hợp chất CS3 Phổ 1H-NMR hợp chất CS3 Phổ 13C-NMR hợp chất CS3 - 42- Phổ DEPT hợp chất CS3 Phổ HMBC hợp chất CS3 - 43- Phổ ESI-MS hợp chất CS3 - 44- Phụ lục 19 Sắc ký đồ HPTLC Bản HPTLC quan sát ánh sáng UV 254 nm trước phun thuốc thử Bản HPTLC quan sát ánh sáng thường sau phun thuốc thử - 45- Phụ lục 20 Thời gian lưu pic sắc ký đồ HPLC mẫu nghiên cứu TT CGV1 CGV2 CGV3 1,44 1,39 1,40 10,08 10,05 10,08 10,55 10,52 10,54 12,04 12,04 12,67 12,63 12,65 14,06 14,10 14,71 15,10 15,06 15,09 10 15,90 15,87 15,89 11 18,21 18,18 18,19 12 18,89 18,84 18,88 13 19,89 19,84 19,88 14 20,13 20,09 20,13 15 20,42 20,38 20,42 16 20,85 17 21,51 21,46 21,50 18 21,79 21,83 19 20 22,82 22,76 22,81 21 23,11 22 24,27 24,21 24,24 23 27,12 27,09 27,12 24 27,91 27,87 27,90 25 29,55 29,46 29,49 26 31,32 31,28 31,31 27 31,53 31,49 31,52 28 32,52 32,49 32,51 29 32,91 32,87 32,89 30 33,33 33,31 33,33 31 34,53 34,55 32 - CGV4 CGV5 CGV6 CGB1 CGB2 1,40 1,40 1,40 1,44 1,39 8,98 8,97 9,03 8,95 10,09 10,09 10,09 10,55 10,55 10,55 10,55 10,56 12,06 12,04 12,03 12,03 12,03 12,73 12,67 12,67 12,66 12,66 14,10 14,11 13,95 14,11 14,68 14,76 15,10 15,11 15,10 15,10 15,11 15,94 15,91 15,92 15,93 18,01 18,22 18,22 18,20 18,22 18,85 18,89 18,89 18,89 18,90 19,89 19,88 19,88 19,89 20,12 20,14 20,14 20,14 20,15 20,44 20,43 20,43 20,79 20,75 20,75 21,50 21,51 21,50 21,52 21,52 21,97 21,95 21,94 22,00 22,00 22,61 22,62 22,62 22,62 22,62 22,81 22,81 23,16 23,16 23,15 23,17 23,18 24,30 24,26 24,27 24,28 24,29 27,12 27,11 27,12 27,12 27,11 27,90 27,90 27,90 27,85 27,90 29,55 29,53 29,53 29,55 29,55 31,31 31,31 31,31 31,31 31,32 31,53 31,53 31,52 31,53 31,54 32,51 32,51 32,51 32,53 32,52 32,92 32,92 32,91 32,92 32,92 33,33 33,33 33,33 33,33 33,33 34,50 34,54 34,66 34,83 - - 46- Phụ lục 20 Thời gian lưu pic sắc ký đồ HPLC mẫu nghiên cứu (tiếp theo) TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 CGB3 10,51 11,98 12,60 13,90 15,05 15,86 18,15 18,83 19,83 20,08 20,78 21,45 21,93 22,57 23,12 24,22 27,08 27,85 29,50 31,28 31,50 32,49 32,89 33,30 - CGB4 1,39 10,55 12,03 12,66 14,75 15,10 15,89 18,21 18,89 19,86 20,14 20,76 21,50 21,94 22,62 23,25 24,25 27,10 27,89 29,55 31,32 31,54 32,52 32,92 33,34 - CGB5 1,41 10,56 12,03 12,66 13,96 14,74 15,10 18,21 18,89 19,88 20,14 21,51 21,98 22,62 23,17 24,27 27,13 27,87 29,55 31,31 31,53 32,53 32,92 33,34 - CGB6 1,40 10,56 12,03 12,66 13,94 15,11 18,21 18,90 19,88 20,14 21,51 21,97 22,62 23,17 24,26 27,12 27,85 29,54 31,31 31,53 32,52 32,91 33,33 - HP1 1,43 8,94 10,56 12,02 12,65 14,10 14,76 15,09 15,91 18,33 18,88 19,83 20,13 20,70 21,44 21,99 22,60 23,15 24,30 27,10 27,86 29,53 31,30 31,52 32,51 32,91 33,32 - HP2 1,45 8,93 10,55 12,02 12,65 14,10 14,74 15,10 15,92 18,20 18,89 19,85 20,14 20,79 21,51 22,02 22,62 23,17 24,30 27,11 27,89 29,54 31,31 31,53 32,52 32,91 33,31 - HP3 1,43 8,94 10,56 12,03 12,66 14,11 14,75 15,11 15,94 18,21 18,90 19,88 20,17 20,88 21,52 22,02 22,62 23,17 24,31 27,11 27,89 29,55 31,31 31,54 32,52 32,92 33,33 - HP4 1,43 8,92 10,55 12,02 12,64 14,10 14,74 15,10 15,92 18,19 18,88 19,85 20,13 20,86 21,50 22,01 22,61 23,16 24,29 27,11 27,89 29,53 31,31 31,53 32,51 32,91 33,32 - - 47- Phụ lục 21 Diện tích pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT (phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 CGV1 CGV2 585,12 49,34 34,01 30,67 8,47 12,01 47,69 222,63 20,93 22,72 31,01 29,41 42,13 14,79 17,75 42,50 36,49 115,31 41,26 39,48 32,25 79,33 - 277,46 83,85 216,60 56,16 125,14 29,61 26,89 42,26 9,84 68,02 6,11 19,39 46,10 46,54 26,05 65,90 17,90 23,15 122,11 277,36 112,13 123,47 108,13 17,74 179,54 38,11 - CGV3 630,83 123,41 180,72 31,05 155,33 47,12 8,62 53,19 20,22 230,29 638,84 27,65 59,49 101,04 12,23 108,34 57,13 87,82 3,59 32,15 16,86 130,60 235,60 136,30 127,97 126,26 25,66 223,14 57,45 - CGV4 164,14 14,41 40,80 106,13 14,77 110,07 21,70 34,99 32,20 9,76 25,02 33,83 51,22 23,23 28,16 10,22 166,82 138,90 67,58 95,81 420,26 45,44 184,25 186,79 214,05 740,53 161,37 5,07 11,42 CGV5 401,86 5,33 80,35 116,00 16,18 80,11 32,12 4,01 22,84 36,95 23,23 134,93 21,21 35,46 61,13 40,89 36,08 13,34 47,29 37,69 36,76 53,99 54,22 165,38 69,37 102,12 90,54 119,67 353,89 149,13 74,21 - CGV6 427,28 5,42 93,23 131,19 82,74 108,04 20,09 21,94 11,15 61,10 7,84 12,79 37,65 30,13 43,09 22,98 18,24 56,57 4,39 27,69 39,66 88,91 70,94 124,77 49,32 65,13 76,23 143,42 126,84 - - 48- Phụ lục 21 Diện tích pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC (tiếp theo) STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT (phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 CGB1 CGB2 CGB3 100,53 278,88 819,62 753,69 186,72 161,58 276,60 436,42 50,21 86,25 57,71 39,77 33,38 46,01 81,45 26,43 286,64 100,02 177,53 50,80 151,15 385,14 151,13 - 581,42 6,67 56,69 267,83 292,29 93,76 12,75 31,75 28,35 99,87 347,25 33,94 66,18 35,66 24,41 47,23 68,57 94,20 43,19 162,59 100,37 228,05 53,67 131,39 763,11 224,54 - 433,11 992,52 1015,80 67,44 122,05 13,86 56,93 154,22 25,43 62,22 34,35 56,35 7,92 48,35 82,28 76,73 20,92 227,53 97,36 259,06 76,83 227,60 629,36 188,57 - CGB4 11,49 126,94 362,48 349,04 16,01 46,74 13,65 38,84 140,10 13,69 39,94 3,82 21,20 6,05 11,08 25,71 52,80 27,25 56,38 17,97 60,36 15,47 34,37 289,11 79,91 - CGB5 155,57 262,65 612,83 633,98 73,06 16,96 131,85 193,14 417,67 28,92 104,26 57,84 32,46 28,07 39,43 110,08 24,16 227,93 83,93 179,01 45,21 130,14 321,70 128,19 - CGB6 220,16 549,50 1122,35 1053,46 39,11 141,28 204,51 418,91 40,01 87,00 68,97 29,89 30,46 43,45 106,22 13,17 234,86 79,69 149,84 42,92 124,48 328,40 129,11 - - 49- Phụ lục 21 Diện tích pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC (tiếp theo) STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT(phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 HP1 118,59 8,50 129,86 154,71 142,60 9,60 15,53 46,79 114,34 788,20 109,49 95,46 87,31 53,54 119,79 43,12 22,79 63,71 76,62 28,02 299,81 46,79 323,38 69,68 254,51 625,57 216,67 - HP2 42,31 272,68 35,93 161,27 244,23 114,61 18,17 29,50 75,45 206,94 626,64 83,71 197,62 33,83 35,41 72,50 94,15 59,80 290,32 38,79 167,05 85,08 224,43 35,62 129,83 657,76 295,89 - HP3 41,54 167,44 115,49 418,18 921,72 123,03 53,12 83,56 47,51 439,98 672,42 45,29 24,99 31,80 35,76 43,43 27,01 39,35 273,96 26,23 129,22 75,19 139,07 35,00 95,36 652,88 144,62 - HP4 230,86 7,88 86,25 62,09 54,73 27,67 13,33 65,72 195,73 524,21 100,21 133,11 32,69 51,67 69,29 36,05 18,35 133,69 43,04 171,63 75,97 235,91 45,93 174,20 415,78 194,08 - - 50- Phụ lục 22 Tín hiệu phổ khối m/z cường độ (%) pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC-MS STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT (phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 MS Positive m/z (%) 203,1 (60) 268,0 (100) 579,0 (100) 563,2 (100) 291,0 (100) 291,0 (80) 275,1 (100) 393,2 (60) 362,2 (100) 245,1 (100) 487,1 (100) 291,1 (100) 471,1 (100) 271,1 (70) 291,1 (100) 291,1 (100) 289,1 (100) 253,1 (100) 301,1 (100) 315,1 (100) 287,0 (100) 347,2 (100) 257,2 (60) 259,2 (100) 219,2 (100) 219,1 (100) 289,1 (100) 219,1 (100) 216,2 (100) 218,2 (80) 411,2 (100) 219,1 (100) 321,1 (50) 311,1 (50) 273.0 (20) 307,0 (50) 257,0 (20) 297,2 (90) 475,3 (40) 265,1 (40) 588,5 (15) 229,1 (85) 291,1 (100) 307,1 (40) 235,1 (70) 323,1 (30) 253,2 (100) 275,1 (100) 234,2 (100) 275,1 (100) 563,3 (30) 525,3 (40) 241,2 (40) 214,2 (50) 525,3 (40) 507,3 (80) 577,5 (30) 235,1 (35) 325,1 (40) 307,0 (60) 437,2 (20) 307,0 (70) 588,5 (60) 273,2 (100) 337,2 (10) 409,2 (10) 525,3 (100) 509,2 (40) MS Negative m/z (%) 268,8 (100) 295,1 (100) 302,2 (100) 577,2 (100) 561,2 (100) 289,1 (100) 289,0 (100) 449,1 (100) 289,0 (100) 281,2 (100) 243,1 (100) 243,1 (100) 521,0 (100) 505,1 (100) 249,2 (100) 285,1 (100) 303,1 (100) 287,1 (100) 301,0 (95) 299,1 (100) 305,2 (100) 285,0 (100) 345,1 (100) 571,3 (80) 311,2 (100) 339,2 (100) 339,2 (100) 409,1 (100) 353,0 (70) 489,2 (40) 597,2 (45) 325,1 (55) 325,1 (75) 304,9 (15) 561,1 (50) 319,1 (60) 568,6 (20) 597,1 (60) 485,2 (5) 303,1 (75) 469,1 (45) 285,1 (80) 577,1 (60) 323,2 (60) 323,1 (20) 521,1 (100) 599,2 (15) 521,1 (10) 299,1 (5) 249,0 (35) 569,2 (60) 285.1 (20) - 51- Phụ lục 23 Phổ UV chất phân tích định lượng Phổ UV hợp chất CR2-CS5 Phổ UV hợp chất CR1-CS4 Phổ UV hợp chất CR15 - 52- Phụ lục 23 Phổ UV chất phân tích định lượng (tiếp theo) Phổ UV hợp chất CR7-CS8 Phổ UV hợp chất CR10-CS11 - 53- Phụ lục 23 Phổ UV chất phân tích định lượng (tiếp theo) Phổ UV hợp chất CR3-CS6 Phổ UV hợp chất CS1 ... VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN MINH CHÂU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ SẮC KÝ DẤU VÂN TAY CỦA THÂN RỄ HAI LOÀI: CỦ GẤU (CYPERUS ROTUNDUS L. ) VÀ CỦ GẤU BIỂN (CYPERUS STOLONIFERUS. .. tác giả l a chọn nội dung nghiên cứu luận án: Nghiên cứu thành phần hóa học sắc ký dấu vân tay thân rễ hai loài: củ gấu (Cyperus rotundus L. ) củ gấu biển (Cyperus stoloniferus Retz .) - 2-... vi nghiên cứu Mục đích luận án l m rõ thành phần hóa học, so sánh khác biệt thành phần hóa học hai l i củ gấu củ gấu biển Nghiên cứu góp phần xây dựng liệu sắc ký dấu vân tay cho hai loài củ gấu