Tài liệu giới thiệu một số bài giảng trong chương trình môn học kỹ thuật xét nghiệm cơ bản trong y học. tài liệu có bổ xung nhiều hình ảnh minh họa cho các kỹ thuật xét nghiệm. Là tài liệu tham khảo trong kỹ thuật xét nghiệm cơ bản
Trang 1KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM CƠ BẢN
Biên soạn: CN Nguyễn Cao Cường.
Bộ môn: Y học cơ sở.
Email: cuongcdy@gmail.com
Trang 2Mục tiêu môn học:
1 Mô tả cấu tạo các trang thiết bị, máy móc sử
dụng trong phòng xét nghiệm
2 Sử dụng và bảo quản các trang thiết bị máy móc
thông dụng trong phòng xét nghiệm
3 Thực hiện được các kỹ thuật xét nghiệm cơ bản
trong phòng xét nghiệm
Trang 3STT TÊN BÀI HỌC SỐ TIẾT
4 Sử dụng và bảo quản kính hiển vi quang học 2 8
5 Sử dụng và bảo quản dụng cụ thuỷ tinh trong phòng
6 Sử dụng và bảo quản máy trong phòng xét nghiệm 4 4
7 Nước dùng trong phòng xét nghiệm 2
10 Pha thuốc nhuộm và một số phương pháp nhuộm 2 4
Trang 5MỤC TIÊU
1 Trình bày được cách thiết kế xây dựng phòng xét
nghiệm
2 Mô tả đúng cách bố trí, sắp xếp hợp lý phòng xét nghiệm
3 Liệt kê được các trang thiết bị và dụng cụ cần thiết cho cho một phòng xét nghiệm
4 Trình bày được công tác quản lý phòng xét
nghiệm
Trang 61.THIẾT KẾ XÂY DỰNG MỘT PHÒNG XÉT
NGHIỆM:
1.1 Hướng nhà:
Tốt nhất là hướng nam Trục của khu nhà theo
hướng đông tây, lưng nhà quay về hướng bắc Để tận dụng được ánh sáng mặt trời, mát về mùa hè, tránh gió rét về mùa đông
Trang 71.2 Nền nhà:
Để tránh ẩm thấp, nền nhà phải cao: 0,8 - 1m Lát gạch men chống trơn để thường xuyên cọ rửa, khử khuẩn
Trang 81.3 Tường nhà:
• Mặt trong tường nên lát một lớp gạch men cao: 0,7- 1m để tiện cho việc cọ rửa, khử khuẩn
Trang 91.4 Hệ thống ánh sáng:
• Tận dụng ánh sáng tự nhiên một cách tối đa
để tiết kiệm điện hoặc dùng ánh sáng đèn, tuỳ
điều kiện mỗi nơi song phải đảm bảo hệ thống
chiếu sáng là 1/4- 1/5 Nếu tận dụng ánh sáng tự nhiên nên chú ý tới tỷ lệ giữa diện tích các cửa sổ, cửa ra vào, lỗ thoáng với diện tích nền nhà bằng 1/4- 1/5
Trang 101.5 Hệ thống điện nước:
1.5.1 Hệ thống điện:
Tuỳ từng điều kiện cho phép song phải có ổn áp,
có công suất lớn riêng cho khu xét nghiệm để đảm bảo nguồn điện ổn định, nâng cao hiệu qủa của
máy móc xét nghiệm Phải mắc các ổ cắm điện
ngang tầm với chiều cao của bàn làm xét nghiệm
để tiện lợi cho việc sử dụng máy móc Các máy
thường có ổn áp , và lưu điện riêng
Trang 111.5.2 Hệ thống nước:
Phải được cung cấp đầy đủ nước cho khu xét
nghiệm, phải xây dựng hệ thống bể dự trữ nước
và đường ống dẫn vào các phòng Nếu không có nước máy phải xây dựng hệ thống bể lọc nước để đảm bảo nguồn nước trong, sạch rửa các dụng cụ thuỷ tinh
Trang 122.TỔ CHỨC -SẮP XẾP PHÒNG XẾT NGHIỆM:
2.1 Tổ chức, bố trí phòng làm việc:
Phòng hành chính: nên để đầu dãy nhà để cho tiện việc giao nhận, trả phiếu xét nghiệm, sinh hoạt khoa
Có 3 khoa riêng biệt: Vi khuẩn- ký sinh trùng, Huyết học, Hoá Sinh Nếu không có điều kiện có thể ghép huyết học và hoá sinh cùng một phòng hoặc một phòng xét nghiệm máu, phòng xét nghiệm phân
và nước tiểu, phòng rửa dụng cụ.v.v
Trang 132.2 Sắp xếp trong phòng:
ở giữa phòng để bàn làm xét nghiệm Bàn nên làm bằng sắt lát gạch men để dễ làm vệ sinh, khử khuẩn Trên bàn ở giữa có thể kê giá cao, thấp để hoá chất thuốc thử
Phía sát tường nên có một dãy tủ chiều cao khoảng 0,8 m để đựng dụng cụ hoá chất, giống như một kho nhỏ của phòng, mặt trên tủ có lát một lớp gạch men trắng để máy móc hoặc có thể dùng làm bàn xét nghiệm
Trang 14• Lavabô: để góc nhà.
• Bàn nhuộm tiêu bản để cạnh Lavabô.
• Bàn để máy ly tâm riêng.
• Bàn để cân phân tích hoặc cân điện riêng.
• Bàn để kính hiển vi nên đặt sát cửa sổ để tận dụng ánh
Trang 153 TRANG THIẾT BỊ CẦN THIẾT:
3.1 Dụng cụ dân dụng:
Nên dùng ghế sắt quay không gỉ, các đồ gỗ (tủ làm việc, tủ đựng hoá chất, giá để hoá chất )
Trang 163.2 Những máy móc cần thiết :
• - Kính hiển vi. - Cân phân tích.- Cân điện.-
Tủ lạnh.- ổn áp riêng cho máy đo quang.- Máy ly tâm.- Nồi cách thuỷ.- Máy đo quang.- Tủ ấm.- Nồi hấp.- Máy cất nước.- Tủ sấy.- Tủ cấy.- Máy điện
di.- Máy điện giải.- Máy đếm tế bào.- Máy đo tốc
độ máu lắng
• Tuỳ theo điều kiện kinh phí , máy móc tối thiểu cần cho một phòng xét nghiệm là: kính hiển vi, cân, tủ lạnh, tủ sấy, máy cất nước, máy ly tâm, máy đo
quang
Trang 173.3 Dụng cụ thuỷ tinh (xem bài dụng cụ
thuỷ tinh)
Trang 18500 ml để lấy nước tiểu 24h.
• Dụng cụ lấy đờm: hộp nhựa có nắp, lọ thuỷ tinh có nút
xoáy
Trang 19• Dụng cụ dùng riêng cho hoá sinh: ống nghiệm các loại, pipet các loại, giá ống nghiệm giá pipet gỗ, pipet tự động , cân đĩa , cân phân tích, máy đo quang, tỉ niệu kế
• Dụng cụ dùng riêng cho huyết học: ống hút Sahli, ống hút bạch cầu, hồng cầu, buồng đếm, máy đếm, huyết sắc kế Sahli, ống
Wesstergreen đo tốc độ máu lắng, máy đếm tế bào
• Dụng cụ dùng riêng cho vi khuẩn: tủ cấy, nồi cách thuỷ, que cấy, lưới amiăng, đèn cồn
• Các dụng cụ chung khác: pipet, ống đong (thuỷ tinh, nhựa), ống
nghiệm, lam kính, lamen, bình đựng nước, bình hút ẩm, đồng hồ bấm giây, thùng tôn, chậu nhựa, vòi hút chân không, nhiệt kế, chổi lông, quả bóp cao su, bút chì kính, nhãn dán, gạc, giấy lọc, giấy đo PH, tủ thuốc sơ cứu tai nạn
Trang 203.5 Hoá chất- thuốc thử:
• Acid: các acid hay dùng như acid acetic, acid
clohydric, acid sulfuric, acid Tricloacetic, acid
phosphoric
• Kiềm: Natrihydroxyt, Kalihydroxyt, amoniac
• Muối:KaliIodua, đồng sulfat, natricitrat, natriclorua, natrisulfat, natriacetat
• Dung môi: aceton, cồn 950, ether, xylen
Trang 21• Các chất khác: cresol đặc, nước oxy già, formol, phenol, vaselin, dầu cede, bột lưu huỳnh,
Trang 224 QUẢN LÝ PHÒNG XẾT NGHIỆM:
4.1 Quản lý trang thiết bị dụng cụ hoá chất:
Mỗi trang thiết bị máy móc trong phòng xét nghiệm phải có:
+ Lý lịch máy
+ Nội qui sử dụng máy
+ Người sử dụng bảo quản
Trang 23hơi ra ngoài.
Trang 24Tất cả các máy móc, dụng cụ, hoá chất đều được
quản lý bằng thẻ kho sau:
Tên Nguồn gốc
Còn lại Ngày lượng NgàySố lượnSố
g
Ngà y
Số lượn g
Trang 254.2 Quản lý chuyên môn:
• Quản lý theo chức trách của từng đối tượng cán bộ
Trang 264.3 Nội qui làm việc:
Qui định thời gian lấy bệnh phẩm: tuỳ theo xét
nghiệm đa số lấy bệnh phẩm vào sáng sớm Trường hợp đặc biệt phải lấy bệnh phẩm tại giường
Qui định đối với bệnh phẩm:
+ Mỗi lọ bệnh phẩm phải có nhãn ghi rõ họ, tên bệnh nhân, khoa phòng điều trị, số giường, số
buồng
+ Những xét nghiệm cấp cứu phải ghi chữ '' cấp
cứu'' để ưu tiên làm trước, trả kết quả ngay.
Trang 27Qui định đối với kỹ thuật viên:
+ Căn cứ yêu cầu xét nghiệm sắp xếp công việc hợp lý
+ Đánh số thứ tự bệnh phẩm phù hợp với phiếu xét nghiệm
+ Những xét nghiệm yêu cầu cần phải làm ngay.+ Những kết quả xét nghiệm cần được ghi vào sổ sách cụ thể
+ Những kết quả cho kết quả nghi ngờ phải yêu cầu làm lại và báo cáo trưởng khoa xem xét
Trang 28+ Những xét nghiệm bệnh phẩm dễ lây lan phải thao tác đúng qui tắc phòng dịch.
+ Những xét nghiệm với khí độc phải làm trong tủ có hệ thống thông hơi.
+ Phải tổ chức cấp cứu phòng độc, phòng tai nạn có thể xảy ra.
+ Tổ chức vệ sinh sau giờ làm việc.
+ Tổ chức thường trực để thường trực cấp cứu bệnh
nhân.
+ Quản lý chặt chẽ thuốc độc và chất dễ cháy, nổ, các chủng vi khuẩn có tính chất lây lan mạnh.
Trang 29TAI NẠN THƯỜNG GẶP TRONG
Trang 30MỤC TIÊU :
1 Kể tên được các tai nạn thường gặp trong phòng xét nghiệm
2 Liệt kê được các phương tiện cần thiết để có thể
sơ cứu tai nạn xảy ra
3 Trình bày đúng các biện pháp sơ cứu tai nạn
4 Trình bày đúng các biện pháp phòng ngừa tai nạn trong phòng xét nghiệm
Trang 311 CÁC TAI NẠN THƯỜNG GẶP:
1.1 Cháy bỏng do acid: hút phải acid, vẩy pipet có acid, dụng
cụ có dính acid, đỗ vỡ lọ acid.
1.2 Cháy bỏng do kiềm: nguyên nhân tương tự như trên.
1.3 Các chất độc hại: khi tiếp xúc lâu gây nhiễm độc.
1.4 Bỏng do hơi nước, lửa, nước sôi ở nồi cách thuỷ, bỏng đèn cồn, đun các môi trường, nồi hấp
1.5 Vết thương do mảnh vỡ: mảnh các dụng cụ thuỷ tinh vỡ Chân, tay chạm phải nó.
1.6 Cháy nổ: Do các chất lỏng dễ cháy nổ tiếp xúc với lửa như : ête, cồn, bình ga của máy điện giải đồ.
1.7 Điện giật: do sơ suất không tuân theo qui tắc như sử
dụng điện.
Trang 323 BIỆN PHÁP SƠ CỨU TAI NẠN:
3.1 BỎNG ACID:
3.1.1 Bỏng da:
1 Rửa ngay bằng nước sạch liên tục dưới vòi nước.
2 Dùng bông thấm dung dịch Natribi Carbonat 5%đắp lên chỗ da bị hỏng.
3.1.2 Bỏng mắt:
1 Ngay lập tức dùng bình phun nước vào mắt hoặc
cho vòi nước chảy qua.
2 Nhỏ vào mắt 4 giọt Natribi Carbonat 2%.
3 Đưa nạn nhân tới bệnh viện ( trên đường đi tiếp tục nhỏ Natri Carbonat 2%)
Trang 333.1.3 Bỏng niêm mạc miệng:
1 Xúc miệng bằng nước xà phòng 5g‰
2.Uống 3- 4 cốc nước thường
3 Bôi miệng, lưỡi bằng dung dịch Natribi Carbonat 2%
Trang 343.1.4 Bỏng niêm mạc dạ dày ( do hút
phải acid):
1 Cho uống ngay nước xà phòng 5g‰ hoặc tốt
nhất là uống 2 lòng trắng trứng hoà với 500ml nước hoặc uống 1 cốc sữa Nếu không có cho uống nước thường
2 Đưa bệnh nhân tới bệnh viện ngay
Trang 351 Rửa nước ngay ( như bỏng mắt do acid)
2 Nhỏ acid boric bão hoà vào mắt nhiều lần
3 Đưa nạn nhân đi bệnh viện ngay
Trang 363.2.3 Bỏng niêm mạc miệng ( do hút phải
kiềm):
1 Xúc miệng bằng acid acetic 5%
2 Uống 3- 4 cốc nước thường
3 Bôi miệng, lưỡi bằng dung dịch acetic 5%
Trang 373.2.4 Bỏng niêm mạc dạ dày ( do hút
phải kiềm):
1 Cho uống ngay acid acêtic 5 % nếu không cho
uống nước chanh hoặc dấm pha loãng 1/4
2 Đưa nạn nhân đến bệnh viện ngay
Trang 383.3 BỎNG DO NHIỆT:
3.3.1 Bỏng nặng: thường do cháy hoặc do hơi
nước, nước sôi nếu bỏng trên một diện tích da rộng, ta phải:
1 Đưa ngay nạn nhân tới bệnh viện
2 Không áp dụng bất cứ cách điều trị nào trên các vết bỏng
3.3.2 Bỏng nhẹ:
1 Ngâm chỗ da bị bỏng vào nước hay nước đá
2 Băng vết bỏng bằng gạc khô sau khi bôi thuốc bỏng panthenol hoặc thuốc bỏng đông y
Trang 393.4 SƠ CỨU NHỮNG VẾT THƯƠNG DO
MẢNH VỠ:
3.4.1 Mảnh thuỷ tinh sạch:
1 Sát khuẩn da bằng nước oxy già 10 V
2 Băng vết thương lại ( nếu chảy máu nhiều cần phải băng chặt cầm máu, nếu vết thương rộng phải đưa đi bệnh viện để khâu cầm máu)
Trang 403.4.3 Mảnh thuỷ tinh bẩn:
1 Xem vết thương có chảy máu nhiều không,
nếu chảy máu ít bóp mạnh để chảy thêm vài giọt
máu ra
2 Rửa vết thương bằng oxy già hoạc cồn Iod
3 Băng vết thương lại ( nếu vết thương rộng
phải đưa đi bệnh viện: cắt lọc, khâu cầm máu, có thể tiêm SAT phòng uốn ván)
Trang 413.5 ĐIỆN GIẬT:
1 Ngắt ngay nguồn điện
2 Đưa nạn nhân ra chỗ thóang mát
3 Làm hô hấp nhân tạo và xoa bóp tim mgoài
lồng ngực tích cực, đồng thời gọi xe cấp cứu đưa
nạn nhân đi bệnh viện ( trong quá trình vận chuyển vẫn phải liên tục làm hô hấp nhân tạo và xoa bóp tim ngoài lồng ngực)
Trang 423.6 NHIỄM CÁC CHẤT ĐỘC HẠI:
1 Đưa nạn nhân ra chỗ thóang mát
2 Kịp thời đưa nạn nhân đến bệnh viện
3 Tìm hiểu chất gây nhiễm độc
Trang 434 BIỆN PHÁP PHÒNG NGỪA TAI NẠN:
4.1 ĐỐI VỚI LỌ ĐỰNG THUỐC THỬ:
- Lọ phải có nhãn ghi rõ ràng.
- Để nơi dễ thấy, dễ lấy.
- Khi tay ướt không được cầm vào lọ acid hay kiềm.
- Khi nhấc lọ lên phải cầm thẳng đứng.
- Lọ đựng acid hay kiềm không được đậy bằng nút
thuỷ tinh, chỉ dùng nút nhựa xoáy
- Khi pha loãng acid hay kiềm phải đổ từ từ vào nước.
- Khi lấy acid hay kiềm tốt nhất là dùng ống đong nhỏ, nếu dùng pipet phải có quả bóp hút
Trang 444.2 KHÍ ĐỐT:
- Khi dùng xong phải đóng kín các bình khí đốt
- Khi sử dụng đèn cồn phải sử dụng chụp thuỷ tinh
để tắt đèn ( không được dùng miệng để thổi tắt đèn )
Trang 454.3 CÁC CHẤT DỄ CHÁY:
Ête, cồn chỉ để một ít trong phòng
4.4 CÁC MÁY SỬ DỤNG ĐIỆN, BẾP ĐIỆN:
Phải tuân theo qui tắc sử dụng điện, khi vận hành máy móc tay phải khô, không được đi chân đất
Trang 46- Khi dùng pipet không được vẩy.
- Không bao giờ dược hút pipet bằng miệng.
- Khi có mảnh thuỷ tinh rơi ra phải được nhặt sạch ngay.
Trang 48CÂN DÙNG TRONG PHÒNG XÉT NGHIỆM
Biên soạn: CN Nguyễn Cao Cường.
Bộ môn: Y học cơ sở.
Email: cuongcdy@gmail.com
Trang 49MỤC TIÊU
1 Trình bày các đơn vị cân theo quy ước quốc tế
2 Mô tả đúng các loại quả cân
3 Mô tả đúng các loại cân dùng trong phòng xét nghiệm
4 Trình bày các phép cân Quy trình sử dụng cân phân tích
5 Nêu điều kiện một cân tốt và cách bảo quản cân
6 Chỉ đúng các bộ phận của cân phân tích Tiến hành cân theo đúng quy trình
Trang 50GIỚI THIỆU VỀ CÂN
Cân : là phương tiện đo dùng để xác định
khối lượng của vật thể thông qua tác động
của trọng trường lên vật thể đó
Trang 51Các thông số kỹ thuật của cân:
• Mức cân lớn nhất (Max capacity) : là mức cân lớn
nhất có thể cân được không tính đến khả năng bù bì
của cân.
• Mức cân nhỏ nhất (Min capacity) : là giá trị của tải mà
nếu cân nhỏ hơn giá trị này thì kết quả cân có thể mắc sai số lớn hơn sai số cho phép.
• Phạm vi cân : là phạm vi giữa mức cân nhỏ nhất và
mức cân lớn nhất.
• Mức tải an toàn lớn nhất (Limit) : là mức tải có thể
cân mà không làm thay đổi chất lượng về mặt đo lường của cân.
• Giá trị độ chia nhỏ nhất (d) là :
- Hiệu số giữa hai giá trị tương ứng hai vạch chia liên tiếp
ở cân cơ có cơ cấu chỉ thị tương tự
- Hiệu số giữa hai giá trị chỉ thị liên tục ở chỉ thị hiện số.
Trang 52Các thông số kỹ thuật của cân:
• Giá trị độ chia kiểm (e) là giá trị thể hiện bằng đơn vị
khối lượng được dùng để phân cấp và kiểm định cân.
• Số lượng độ chia kiểm (n) là tỉ số Mức cân lớn nhất/e
• Độ động là khả năng phản ứng của cân đối với những
biến động nhỏ của tải trọng.
• Độ lặp lại là độ lệch giữa các kết quả của nhiều lần
cân cùng một tải trọng, không được vượt quá giá trị
tuyệt đối của sai số cho phép lớn nhất của cân tại mức tải đó.
• Độ lệch tâm Khi tải trọng được đặt tại các vị trí khác
nhau trên bàn cân thì số chỉ thị giữa các lần cân không được sai biệt vượt quá sai số cho phép lớn nhất tại
mức tải đó.
Trang 53Cấp chính xác của cân:
• Theo Tổ chức đo lường hợp pháp quốc tế OIML R76-1, cân không tự động được phân làm 4 cấp chính xác:
- Cấp chính xác đặc biệt (special accuracy): I
- Cấp chính xác cao (high accuracy) : II
- Cấp chính xác trung bình (medium accuracy): III
- Cấp chính xác thường (ordinary accuracy) : IIII
Trang 54Cấp chính
xác Giá trị phân độ chia kiểm
e
Số lượng độ chia kiểm n Giá trị cân nhỏ nhất
xác IIII 5 g e 100 – 1 000 10 d
Trang 55Vị trớ đặt cõn:
• Luồng gió : Phải đặt cân ở vị trí tránh cửa sổ, cửa
va vào, ng ời qua lại và gần các thiết bị công tác khác
nh quạt, máy điều hoà
• Rung động : Tất cả các loại cân, kể cả cân điện tử
đều chịu ảnh h ởng của rung động Để phép đo đạt
đến 0,01 g hoặc nhỏ hơn thì cần đặt cân trên
bàn cách ly rung động
• Loại bàn vững chãi này th ờng có mặt bàn làm bằng
bê tông hoặc đá có chiều dầy tối thiểu 400 mm
đặt độc lập, tách biệt khỏi t ờng nhà và những thiết
Trang 56• Nivô thăng bằng : Mặt bàn đặt cân phải
đ ợc nivô thăng bằng và chân cân cần
phải điều chỉnh đ ợc đến khi bọt n ớc nivô nằm trong vòng tròn giới hạn
• Bụi : Cân phải đ ợc đặt ở nơi sạch sẽ,
không có bụi, n ớc và những hoá chất, chất
ăn mòn, xăng dầu, chất hữu cơ khác
• Nhiệt độ : Điều kiện lý t ởng là có đ ợc môi
tr ờng ổn định nhiệt độ trong phạm vi
3oC
• Độ ẩm : Độ ẩm cao dẫn đến ng ng tự hơi n
ớc làm ảnh h ởng đến hoạt động của các
chi tiết đặc biệt của các mạch điện tử,
dẫn đến cân hoạt động kém tin cậy
• Can nhiễu điện từ tr ờng : Cân điện tử là
đối l ợng chịu can nhiễu của điện từ tr ờng
Trang 572 Kiểm tra cân:
• Kiểm tra điểm 0: Hàng ngày, hoặc trước mỗi lần cân
• Kiểm tra một điểm nhất định: thường kiểm tra
điểm thường sử dụng (dùng vật chuẩn biết
trước khối lượng, hoặc quả cân chuẩn): kiểm tra hàng ngày
• Kiểm tra độ lặp lại tại dãi đo thường sử dụng: 6 tháng/lần
• Hiệu chuẩn chu kỳ: 1 năm hoặc 3 năm/lần, tùy chu kỳ kiểm tra
Trang 581.ĐƠN VỊ CÂN:
Các đơn vị cân thường dùng trong xét nghiệm :
- Gam (g) = 1/1000 kg = 10-3 kg = 0,001 kg = 1000 mg
- Decigam (dg) = 1/10 g = 10-1g = 0,1g = 100 mg
- Centigam (cg) = 1/100g = 10-2g = 0,01g = 10 mg
- Miligam (mg) = 1/1000 g = 10-3g = 0,001g = 1mg