Đang tải... (xem toàn văn)
Phong lan được biết đến là một loài hoa đẹp mang nhiều ý nghĩa, thường được dùng làm cảnh và trang trí, một số loài có tác dụng chữa bệnh. Lan Hoàng Thảo (Dendrobium) là một chi lớn trong họ Lan (Orchidaceae) có khoảng 1400 loài, ở Việt Nam có 107 loài, phân bố ở các vùng núi từ Bắc vào Nam và cả trên một số đảo ven biển Lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum), thuộc chi Hoàng Thảo, là loài lan rừng Việt Nam phân bố chủ yếu ở Tây Nguyên 5. Hoa có hình thái đẹp, hương thơm nhẹ nhàng, tươi mát, dễ chăm sóc, và là một trong số các loài lan Hoàng Thảo rất được ưa chuộng. Hiện nay loài lan này trong tự nhiên đang bị suy giảm nghiêm trọng do khai thác để trồng, bán làm cây cảnh, đôi khi làm thuốc và do chặt phá rừng gây hủy hoại nơi cư trú.
1 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT BAP CT KC Benzylaminopurine Công thức Môi trường Knudson C MS NAA NXB MT ½ MS Mơi trường Murashige and Skoog Naphthalene Acetic Acid Nhà xuất Mơi trường Mơi trường ½ Murashige & Skoog DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Trang Bảng 3.1 Bảng 3.2 Bảng 3.3 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Một số loại hóa chất thường dùng khử trùng bề mặt mẫu cấy Số lượng mẫu nhiễm công thức khử trùng Số lượng mẫu nhiễm công thức khử trùng Số lượng mẫu nhiễm công thức khử trùng Số lượng mẫu nhiễm cơng thức khử trùng Ảnh hưởng hóa chất khử trùng đến tỷ lệ sống Bảng 3.6 hạt lan Sơn Thủy Tiên sau tuần nuôi cấy Đặc điểm protocom lan Sơn Thủy Tiên công thức 29 Bảng 3.7 môi trường MT1 Đặc điểm protocom lan Sơn Thủy Tiên công thức 29 Bảng 3.8 môi trường MT2 Đặc điểm protocom lan Sơn Thủy Tiên công thức 30 Bảng 3.9 môi trường MT3 Đặc điểm protocom lan Sơn Thủy Tiên công thức 30 môi trường MT4 Bảng 3.10 Đặc điểm protocom lan Sơn Thủy Tiên công thức 31 môi trường MT5 Đặc điểm protocom lan Sơn Thủy Tiên công thức 31 Bảng 3.11 23 23 23 24 25 môi trường MT6 Bảng 3.12 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến tỷ lệ tạo 32 protocom Bảng 3.13 Đặc điểm chiều cao chồi lan Sơn Thủy Tiên môi 37 trường sau tuần cấy chuyển Bảng 3.14 Số lan Sơn Thủy Tiên môi trường sau tuần cấy 39 chuyển Bảng 3.15 Số rễ lan Sơn Thủy Tiên môi trường sau tuần cấy 40 chuyển DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1 Hình 2.2 Hình 3.1 Lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium Chrysotoxum) Qủa lan Sơn Thủy Tiên Biểu đồ ảnh hưởng hóa chất khử trùng đến tỷ lệ sống 17 17 25 Hình 3.2 Hình 3.3 Hình 3.4 hạt lan Sơn Thủy Tiên sau tuần nuôi cấy Mẫu tái sinh sau tuần nuôi cấy Mẫu nhiễm sau tuần nuôi cấy Biểu đồ ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến tỷ lệ tạo protocom 27 28 33 Hình 3.5 Hình thái protocom sau tuần ni cấy Hình 3.6a Hình thái protocom ni cấy MT1, MT2, MT3 sau 34 35 tuần soi kính hiển vi Hình 3.6b Hình thái protocom ni cấy MT4, MT5, MT6 sau tuần soi kính hiển vi Hình 3.7 Biểu đồ chiều cao trung bình chồi lan Sơn Thủy Tiên 36 38 Hình 3.8 môi trường sau tuần cấy chuyển Biểu đồ số trung bình lan Sơn Thủy Tiên 39 Hình 3.9 mơi trường sau tuần cấy chuyển Biểu đồ số rễ trung bình lan Sơn Thủy Tiên 41 môi trường sau tuần cấy chuyển Hình 3.10 Chồi lan Sơn Thủy Tiên sau tuần theo dõi 42 MỤC LỤC PHẦN 1:MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn .2 3.1 Ý nghĩa khoa học .2 3.2 Ý nghĩa thực tiễn .2 PHẦN 2: NỘI DUNG .3 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Đặc điểm sinh học sinh thái học loài lan Sơn Thủy Tiên 1.1.1 Nguồn gốc, vị trí phân loại 1.1.2 Đặc điểm sinh học sinh thái học 1.2 Kỹ thuật nhân giống nuôi cấy mô tế bào 1.2.1 Định nghĩa 1.2.2 Cơ sở lý luận nuôi cấy mô tế bào 1.2.3 Ưu điểm, nhược điểm phương pháp nhân giống in vitro 1.2.4 Quy trình nhân giống in vitro .7 1.3 Một số nghiên cứu nhân giống hoa lan giới Việt Nam 10 1.3.1 Trên giới .10 1.3.2 Ở Việt Nam 13 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 17 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.2 Phạm vi nghiên cứu 17 2.2 Nội dung nghiên cứu 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết .18 2.3.2 Phương pháp luận 18 2.3.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm 18 2.3.4 Phương pháp thu thập số liệu 20 2.3.5 Phương pháp phân tích xử lý số liệu .20 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất khử trùng tới tỷ lệ tạo mẫu in vitro .22 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả tạo protocom 28 3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng giai đoạn tạo chồi .37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .43 Kết luận .43 Kiến nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO .44 PHẦN 1: MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Phong lan biết đến loài hoa đẹp mang nhiều ý nghĩa, thường dùng làm cảnh trang trí, số lồi có tác dụng chữa bệnh Lan Hoàng Thảo (Dendrobium) chi lớn họ Lan (Orchidaceae) có khoảng 1400 lồi, Việt Nam có 107 lồi, phân bố vùng núi từ Bắc vào Nam số đảo ven biển [2] Lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum), thuộc chi Hoàng Thảo, loài lan rừng Việt Nam phân bố chủ yếu Tây Ngun [5] Hoa có hình thái đẹp, hương thơm nhẹ nhàng, tươi mát, dễ chăm sóc, số lồi lan Hồng Thảo ưa chuộng Hiện loài lan tự nhiên bị suy giảm nghiêm trọng khai thác để trồng, bán làm cảnh, làm thuốc chặt phá rừng gây hủy hoại nơi cư trú Để hạn chế việc khai thác mức lan Sơn Thủy Tiên tự nhiên để bảo tồn loài lan này, việc nhân giống công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật (in vitro) quan tâm Công nghệ nhân giống in vitro công cụ đắc lực việc bảo tồn phát triển loài lan quý Phương pháp mang lại nhiều ưu điểm hệ số nhân giống cao, tạo đồng mặt di truyền, bệnh, đồng thời có tiềm sinh học cao Nghiên cứu tạo vật liệu khởi đầu (khử trùng) cảm ứng tạo protocom (mô sẹo) thông qua môi trường khác loài lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) cơng trình nghiên cứu [9;10] Tại Việt Nam chưa có đề tài nghiên cứu, so sánh tạo vật liệu khởi đầu cảm ứng tạo protocom thông qua mơi trường khác lồi lan Xuất phát từ lý trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu tạo vật liệu khởi đầu cảm ứng tạo protocom loài lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum)” Mục tiêu nghiên cứu - Xác định công thức khử trùng mẫu tối ưu cho lan Sơn Thủy Tiên giai đoạn tạo vật liệu khởi đầu - Xác định môi trường nuôi cấy phù hợp với đối tượng lan Sơn Thủy Tiên đến giai đoạn in vitro tạo protocom Ý nghĩa khoa học thực tiễn 3.1 Ý nghĩa khoa học Kết nghiên cứu đề tài cung cấp dẫn liệu khoa học giúp hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro giống lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) mở hướng nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân giống giống hoa lan khác nước ta 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết đề tài ứng dụng vào trình nhân giống in vitro giống lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) trường Đại học Hùng Vương PHẦN 2: NỘI DUNG CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Đặc điểm sinh học sinh thái học loài lan Sơn Thủy Tiên 1.1.1 Nguồn gốc, vị trí phân loại Cây lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) thuộc họ Orchidaceae Orchidales - phân lớp Ngọc lan Magnoliidae - lớp Ngọc lan Magnoliopsida Ngành hạt kín Magnoliophyta [1] 1.1.2 Đặc điểm sinh học sinh thái học Lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) loài lan rừng Việt Nam Chúng có giả hành hình dùi bắp, hẹp đáy, lớn mập thon lại, có nhiều sóng dọc thấp, màu vàng già, cao đến 30cm, mập ú to 3–5cm đường kính; mang 6-7 đỉnh, dài 8–15cm, rộng 2.5-3cm Chùm hoa mọc mạnh, nghiêng xéo cong xuống, dài đến 20cm với nhiều hoa thưa Hoa to cỡ 5cm, thơm, màu vàng đậm, ánh sáp, trung tâm môi vàng cam, có lơng rìa mép Lồi 10 có hoa khoảng tháng (âm lịch), tái sinh chồi hạt, mọc bám gỗ lớn rừng, độ cao 600-1200m Do có hoa đẹp nên dùng làm cảnh, ngồi có giá trị dược phẩm Trên giới, lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) có Ấn Độ, Trung Quốc, Mianma, Thái Lan, Lào Còn Việt Nam chúng phân bố chủ yếu Nghệ An (Vinh), Kontum (Đắklei, Đắk Uy), Gia Lai (Chư Pah), Đắk Lắk (Buôn Ma Thuột), Lâm Đồng (Đà Lạt) Lồi có khu phân bố nơi cư trú chia cắt Hiện bị suy giảm nghiêm trọng khai thác để trồng, bán chủ yếu làm cảnh, làm thuốc chặt phá rừng hủy hoại nơi cư trú [9] 1.2 Kỹ thuật nhân giống nuôi cấy mô tế bào 1.2.1 Định nghĩa Nhân giống kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào phương pháp nuôi cấy mô tế bào môi trường dinh dưỡng nhân tạo điều kiện vô trùng tái sinh chúng thành [14] Nhân giống kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào phương pháp bổ sung cho kỹ thuật nhân giống truyền thống nhiều kỹ thuật tiến bộ, khắc phục hạn chế phương pháp nhân giống truyền thống 1.2.2 Cơ sở lý luận nuôi cấy mô tế bào Cơ sở lý luận phương pháp nuôi cấy mô tế bào in vitro học thuyết tính tồn tế bào Theo Haberlandt G (1902), nhà thực vật học người Đức, tất tế bào mang tồn thơng tin di truyền thể, gặp điều kiện thích hợp, tế bào có khả tái sinh phát triển thành thể hoàn chỉnh Thực tế chứng minh khả tái sinh thể thực vật hoàn chỉnh từ tế bào riêng lẻ Hàng trăm loài trồng nhân giống quy mô thương mại cách nuôi cấy mơi trường 40 MT4 MT5 MT6 Hình 3.6b: Hình thái protocom ni cấy MT4, MT5, MT6 sau tuần soi kính hiển vi 41 3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng giai đoạn tạo chồi Sau giai đoạn tạo protocom giai đoạn tạo chồi Để thu in vitro hoàn chỉnh đồng thời cung cấp nguyên liệu cho trình nhân nhanh chồi trước hết thể chồi tạo cần chuyển sang môi trường tái sinh chồi nhằm kích thích tạo chồi từ protocom Qua tham khảo tài liệu chọn môi trường MS Trên sở để tìm ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng giai đoạn tạo chồi hạt lan Sơn Thủy Tiên tơi có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng BAP với nồng độ khác (1,5mg/l; 2mg/l 2,5mg/l) Bảng 3.13: Đặc điểm chiều cao chồi lan Sơn Thủy Tiên môi trường sau tuần cấy chuyển Chỉ tiêu Cơng thức Bình1 MTa Bình Bình Bình MTb Bình Bình Bình Bình MTc Bình Bình2 Bình3 Bình4 Chiều cao Trung bình chồi (mm) 7,56 6,23 8,43 8,65 6.69 9,49 10,41 9,82 10,3 7,32 6,68 9,04 7,72±0,95 9,1±1,43 8,34±1,43 42 9.5 9.1 8.5 8.34 Chiều cao trung bình (mm) 7.72 7.5 MTa MTb MTc Hình 3.7: Biểu đồ chiều cao trung bình chồi lan Sơn Thủy Tiên môi trường sau tuần cấy chuyển Qua bảng 3.13 biểu đồ 3.3 ta thấy công thức nuôi cấy chiều cao chồi có giao động tương đối lớn (từ 6,23mm đến 10,41mm) Ở cơng thức MTa chồi có chiều cao trung bình 7,72mm ±0,95, thấp cơng thức ni cấy Chiều cao trung bình chồi có giá trị cao công thức MTb (9,1mm ±1,43) Ở cơng thức MTc chiều cao trung bình chồi 8,34mm±1,43 43 Bảng 3.14: Số lan Sơn Thủy Tiên môi trường sau tuần cấy chuyển Chỉ tiêu Số lá/chồi Trung bình Cơng thức Bình MTa 2,5 Bình 2 Bình 3 Bình Bình MTb 3,25 Bình Bình Bình Bình MTc 2,75 Bình 2 Bình Bình (đơn vị: lá) 44 3.5 3.25 2.5 2.75 2.5 số (lá) 1.5 0.5 MTa MTb MTc Hì nh 3.8: Biểu đồ số trung bình lan Sơn Thủy Tiên mơi trường sau tuần cấy chuyển Từ bảng 3.14 biểu đồ 3.4 ta thấy chồi cơng thức MTb có số đồng nhiều nhất, số trung bình cơng thức 3,25 lá/chồi Ở cơng thức MTa, chồi có tương đối đồng số ít, trung bình có 2,5 lá/chồi Ở cơng thức MTc số trung bình có lớn cơng thức MTa (2,75 lá/chồi) số chồi lại không đồng Bảng 3.15: Số rễ lan Sơn Thủy Tiên môi trường sau tuần cấy chuyển Chỉ tiêu Cơng thức Bình MTa Bình Bình Số rễ/chồi Trung bình 4 4,25 45 Bình Bình MTb Bình Bình Bình Bình MTc Bình Bình Bình (đơn vị: rễ) 5 4 4 4,5 4.6 4.5 4.5 4.4 4.3 4.25 4.2 số rễ (rễ) 4.1 4 3.9 3.8 3.7 MTa MTb MTc Hình 3.9: Biểu đồ số rễ trung bình lan Sơn Thủy Tiên môi trường sau tuần cấy chuyển 46 Nhìn vào biểu đồ 3.5 t thấy số rễ trung bình/chồi cơng thức có chênh lệch rõ ràng Cơng thức MTa có số rễ trung bình 4,25 rễ/chồi, số rễ chồi tương đối Công thức MTb có số rễ trung bình cao (4,5 rễ/chồi), cơng thức có số rễ chồi Ở công thức MTc, chồi sinh rễ khơng đồng đều, số rễ trung bình rễ/chồi Tiểu kết: Giai đoạn tạo chồi in vitro với công thức MTa bổ sung 2mg/l BAP cho tỉ lệ chồi tạo rễ, thân, cao với số lượng rễ trung bình 4,5 rễ, số lượng trung bình 3,25 chiều cao thân trung bình 9,1mm ±1,43 MTa MTb 47 MTc Hình 3.10: Chồi lan Sơn Thủy Tiên sau tuần theo dõi KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận - Tìm công thức khử trùng tạo vật liệu khởi đầu loài lan Sơn Thủy Tiên cho hiệu cao sử dụng hóa chất EtOH (70%) thời gian phút sau nhúng vào EtOH (96%) đốt lửa đèn cồn lần, tỷ lệ mẫu mẫu tái sinh đạt 83,33% - Môi trường tạo protocom phù hợp 1/2MS, tỷ lệ protocom đạt 83,33%, protocom phát triển đồng đều, tròn, to, bóng đẹp - Môi trường tạo chồi phù hợp MS, có bổ sung 2mg/l BAP Cho tỉ lệ chồi hình thành quan rễ, thân, cao với số lượng rễ trung bình 4,5 rễ, số lượng trung bình 3,25 chiều cao thân trung bình 9,1mm Kiến nghị Tiếp tục tiến hành nghiên cứu giai đoạn để hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro giống lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam ( ), NXB Trẻ Vũ Thị Huệ, Nhân giống số loài lan địa phương pháp nuôi cấy ống nghiệm (in vitro), luận văn thạc sĩ khoa học lâm nghiệp Nguyễn Như Khanh, Cao Phi Bằng (2009), Giáo trình sinh lý thực vật, NXB Giáo Dục Dương Công Kiên (2002), Nuôi cấy mô tế bào thực vật, NXB Đại học Quốc gia TP HCM Vũ Ngọc Lan, Nguyễn Thị Lý Anh (2013), Nhân giống in vitro lồi Lan địa Dendrobium nobile Lindl, Tạp chí Khoa học Phát triển, 11(7), tr 917-925 Nguyễn Văn Minh, Nguyễn Hữu Lễ (2007), “Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật lên phát sinh chồi rễ Phong lan Giả Hạc Dendrobium anosmum“, Tạp chí khoa học công nghệ, tập 47, số 5, 2009 Tr 99 - 10 Nguyễn Công Nghiệp (2000), Trồng hoa lan, NXB trẻ, trang 17 – 268 49 Dương Tấn Nhựt (2008), Ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật việc nhân nhanh lan Hài lan Hồ Điệp, Phân Viện sinh học Đà Lạt Sách đỏ Việt Nam (2007), phần thực vật, trang 423 10 Vũ Thanh Sắc, Nguyễn Thị Thu Huyền, Lê Thị Lý (2012) “Nghiên cứu nhân giống in vitro lan hoang thảo trầm trắng (Dendrobium anosmum var.alba)”, Tạp chí khoa học cơng nghệ, Đại học Thái Ngun, 93(05), tr131-135 11 Nguyễn Văn Song (2011), “Nhân nhanh in vitro lan Kim Điệp (Dendrobium Chrysotoxum) – loài lan rừng có nguy tuyệt chủng”, tạp chí khoa học, Đại học Huế, Số 64, 2011 12 Nguyễn Thị Sơn, Nguyễn Thị Lý Anh, Vũ Ngọc Lan, Trần Thế Mai (2012), “Nhân giống in vitro loài lan Hoàng thảo long nhãn (Dendrobium fimbriatum hook)” Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Tạp chí Khoa học Phát triển: Tập 10, số 2: 263 – 271 13 Nguyễn Quang Thạch (1995), Công nghệ sinh hóa thực vật, NXB Nơng nghiệp 14 Nguyễn Thiện Tịch, Nguyễn Thị Hoa, Trần Sĩ Dũng, Huỳnh Thị Ngọc Dung (1996), Kĩ thuật nuôi trồng hoa lan, NXB Nông nghiệp Hà Nội 15 Nguyễn Văn Uyển (1993), Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống trồng, NXB Nông nghiệp Hà Nội 16 Jaime A Teixeira da Silva, Elena A Tsavkelova (2015) Asymbiotic in vitro seed propagation of Dendrobium Plant Cell Rep 34:1685–1706 17 Jonojit Roy, Soumi Naha,Madhumita Majumdar (2007) Direct and callusmediated protocorm-like body induction from shoot-tips of Dendrobium chrysotoxum Lindl (Orchidaceae) Plant Cell, Tissue and Organ Culture Volume 90, pp 31–39 18 Potshangbam Nongdam, Leimapokpam Tikendra (2014) Establishment of an Efficient In Vitro Regeneration Protocol for Rapid and Mass 50 Propagation of Dendrobium chrysotoxum Lindl Using Seed Culture Scientific World Journal Volume 2014; 740-150 19 (, xem ngày 2/5/2017) PHỤ LỤC ẢNH Kính hiển vi soi Tách mẫu Thước đo điện tử Phòng bảo quản mẫu Quả lan Sơn Thủy Tiên PHỤ BIỂU Phụ biểu 1: Môi trường MS (Murashige & Skoog) Dung dịch Hóa chất mẹ NH4NO3 MS1 MS2 MS3 MS4 MS5 MS6 Nồng độ pha lượng lấy cho 500 ml môi trường (mg/l) 1650 dung dịch mẹ 41,25 (ml/l) 370,6 9,265 KNO3 1900 47,5 CaCl2 439,8 10,99 KH2PO4 170 4,25 NaH2PO4 ZnSO4.7H2O 85 8,6 2,125 0,43 H3BO3 6,2 0,31 MnSO4.2H2O Na2MoO4.2H2O 22,3 0,25 1,115 0,125 CuSO4.5H2O 0,025 0,0125 CoCl2.2H2O 0,025 0,0125 KI FeSO4.7H2O 0,83 27,8 0,415 1,39 Na2EDTA 37,26 0,5 1,863 0,025 Pyridoxine (B6) 0,5 0,025 Thiamin- HCl (B1) 0,1 0,005 0,1 100 Glycine MS8 Khối lượng cần MgSO4.7H2O Nicotinic acid MS7 Hàm Myo-inositol Phụ biểu 2: Môi trường KC (KnudsonC) 20 20 20 10 10 10 10 10 Dung dịch mẹ K1 K2 K3 K4 (MS6) K5 (MS8) Hóa chất Hàm lượng (mg/l) NH4NO3 600 KNO3 1900 MgSO4.7H2O 146,5 KH2PO4 170 KCl 300 CaCl2.2H2O 453 KI 0,75 H3BO3 MnSO4.4H2O 10 ZnSO4.7H2O Na2H2O 0,25 CuSO4.5H2O 0,025 CoCl2.6H2O FeSO4.7H2O 0,025 27,8 Na2EDTA 37,26 Myo-inositol 100 ... khác loài lan Xuất phát từ lý trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu tạo vật liệu khởi đầu cảm ứng tạo protocom loài lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) 8 Mục tiêu nghiên cứu. .. môi trường khác loài lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) cơng trình nghiên cứu [9;10] Tại Việt Nam chưa có đề tài nghiên cứu, so sánh tạo vật liệu khởi đầu cảm ứng tạo protocom thông qua... nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu - Giống lan Sơn Thủy Tiên (Dendrobium chrysotoxum) thu hái từ tự nhiên - Vật liệu vào mẫu: Qủa lan 22 Hình 2.1: Cây lan Sơn Thủy Tiên Hình 2.2: Quả lan Sơn