Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và vitamin b1 trong thuốc pabemin, baby plex, paracetamol f b bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊNTRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HOÀNG THỊ NGỌC XUÂN ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, CLOPHENINAMIN MALEAT VÀ VITAMIN B1 TRONG THUỐC PABEMIN, BABY PLEX, PARACETAMOL F.B BẰNG

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

HOÀNG THỊ NGỌC XUÂN

ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI PARACETAMOL, CLOPHENINAMIN MALEAT VÀ VITAMIN B1 TRONG THUỐC PABEMIN, BABY PLEX, PARACETAMOL F.B BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU

NĂNG CAO VÀ QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ

Hóa phân tích

Mã ngành: 8 44 01 18

LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC

Hướng dẫn khoa học: PGS.TS Mai Xuân Trường

THÁI NGUYÊN - NĂM 2018

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận vănnày là trung thực và chưa hề được sử dụng trong bất cứ một công trình nào.Tôi xin cam đoan rằng, mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đãđược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõnguồn gốc

Thái Nguyên, tháng 04 năm 2018

Tác giả luận văn

Hoàng Thị Ngọc Xuân

Xác nhận của giáo viên hướng dẫn

PGS.TS Mai Xuân Trường

Xác nhận của trưởng khoa chuyên môn

PGS.TS Nguyễn Thị Hiền Lan

LỜI CẢM ƠN

Trong quá trình học tập và thực hiện luận văn tác giả đã nhận được rấtnhiều sự quan tâm, động viên và giúp đỡ của các thầy giáo, cô giáo, bạn bè vàgia đình

Tác giả bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: Khoa Hóa học, Phòng Đào tạo Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên, các thầy cô giáo tham giagiảng dạy đã cung cấp những kiến thức giúp tôi trong suốt quá trình học tập

-và nghiên cứu

Tác giả xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TS Mai XuânTrường người đã tận tình hướng dẫn chỉ bảo và giúp đỡ tôi trong suốt quátrình nghiên cứu, thực hiện và hoàn thành luận văn

Cuối cùng tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè vàđồng nghiệp những người đã luôn bên tôi, động viên và khuyến khích tôitrong quá trình thực hiện luận văn

Với khối lượng công việc lớn, thời gian nghiên cứu có hạn, khả năngnghiên cứu còn hạn chế, chắc chắn luận văn không thể tránh khỏi những thiếusót Tác giả rất mong nhận được các ý kiến đóng góp từ các thầy giáo, cô giáo

và bạn đọc

Xin chân thành cảm ơn!

Thái Nguyên, tháng 04 năm 2018

Tác giả

Hoàng Thị Ngọc Xuân

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN i

LỜI CẢM ƠN

ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU v DANH MỤC CÁC HÌNH .vi MỞ ĐẦU 1

Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1

1.1 Tổng quan về phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao 2

1.1.1 Khái niệm 2

1.1.2 Nguyên tắc 2

1.1.4 Một số đại lượng đặc trưng trong phân tích sắc ký 4

1.1.5 Hệ thống máy HPLC 8

1.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 8

1.2.1 Định luật Bughe – Lămbe – Bia 9

1.2.2 Các bước tiến hành phép đo UV-Vis 11

1.3 Phương pháp lọc Kalman 12

1.4 Tổng quan về các chất phân tích trong thuốc Pabemin, Baby Plex và Paracetamol F.B 13

1.4.1 Paracetamol 13

1.4.2 Clopheninamin maleat 15

1.4.3 Vitamin B1 17

1.5 Một số loại chế phẩm chứa paracetamol, clopheninamin maleat và vitamin B1 20

1.5.1 Thuốc Paracetamol F.B 20

1.5.2 Thuốc Babyplex 20

1.5.3 Thuốc Pabemin 21

1.6 Kết quả xác định một số chất theo phương pháp HPLC và theo

phương pháp UV- Vis……… 21

1.6.1 Một số kết quả xác định thành phần theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 21

1.6.2 Một số kết quả xác định thành phần theo phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao 25

Chương 2: THỰC NGHIỆM 32

2.1 Đối tượng nghiên cứu 32

2.2 Phương pháp nghiên cứu 32

2.2.1 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao 32

2.2.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 33

2.3 Phương pháp xử lý số liệu 33

2.3.1 Các phương pháp để xử lý kết quả phân tích .33

2.3.2 Các đại lượng đặc trưng để xử lý kết quả phân tích .34

2.4 Thiết bị, dụng cụ và hóa chất 35

2.4.1 Thiết bị 35

2.4.2 Dụng cụ 36

2.4.3 Hóa chất 36

2.5 Chuẩn bị các dung môi để hòa tan mẫu và thuốc 38

2.6 Chuẩn bị các dung dịch chuẩn cho phương pháp HPLC 38

2.7 Chuẩn bị dung dịch thuốc cho phương pháp HPLC 39

2.8 Chuẩn bị các dung dịch chuẩn cho phương pháp UV-Vis 40

2.9 Chuẩn bị các dung dịch thuốc cho phương pháp UV-Vis 40

Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 40

3.1 Phương pháp HPLC 43

3.1.1 Xây dựng các điều kiện để xác định đồng thời 3 chất PRC, CPM và vitamin B1 43

3.1.2 Đánh giá phương pháp định lượng 46

RC, B1 v

3.1.3 Khảo sát độ đúng của phép xác định PRC, CPM và B1 theo phương pháp thêm chuẩn 51 3.1.4 Xác định PRC, CPM và B1 trong thuốc Paracetamol F.B, Baby Plex, Pabemin 51

3.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 60

3.2.1 Khảo sát phổ hấp thụ phân tử của paracetamol, clopheninamin maleat và vitamin B1 61 3.2.2 Kiểm tra tính cộng tính độ hấp thụ quang của dung dịch hỗn hợp 62 3.2.3 Khảo sát khoảng tuyến tính tuân theo định luật Bughe – Lămbe – Bia của PRC, CPM và B1 và xác định chỉ số LOD và LOQ 65 3.2.4 Khảo sát và đánh giá độ tin cậy của phương pháp nghiên cứu trên các mẫu tự pha 71 3.2.6 Xác định hàm lượng P à CPM trong thuốc Baby Plex và đánh giá độ đúng của phép phân tích theo phương pháp thêm chuẩn 82 3.2.7 Xác định hàm lượng PRC, CPM và B1 trong thuốc Pabemin và đánh giá độ đúng của phép phân tích theo phương pháp thêm chuẩn 87

KẾT LUẬN 91TÀI LIỆU THAM KHẢO 93PHỤ LỤC 1: Độ hấp thụ quang của PRC, B1 và hỗn hợp ở một số bướcsóng 97PHỤ LỤC 2: Độ hấp thụ quang của PRC, CPM và hỗn hợp ở một số bướcsóng 98PHỤ LỤC 3: Độ hấp thụ quang của B1, CPM và hỗn hợp ở một số bước

sóng 99PHỤ LỤC 4: Độ hấp thụ quang của hỗn hợp PRC, B1 và CPM ở một số bước sóng 100

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT

Clopheninamin maleat Chlorpheniramine maleate CPM

Phương pháp sắc kí lỏng

hiệu năng cao

High Performance LiquidChromatography

HPLC

iv

DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU

Bảng 3 1 Giá trị các đại lượng đặc trưng ……… 47

Bảng 3 2 Kết quả khảo sát thời gian lưu ……… 47

Bảng 3 3 Kết quả khảo sát diện tích pic 47

Bảng 3 4 Mối tương quan giữa nồng độ và diện tích pic của PRC, CPM và B1……… ……… ………46

Bảng 3 5 Kết quả khảo sát độ lặp lại 48

Bảng 3 6 Kết quả phân tích thuốc Paracetamol F.B……….……….49

Bảng 3 7 Kết quả phân tích thuốc Baby Plex………59

Bảng 3 8 Kết quả phân tích thuốc Pabemin……… 51

Bảng 3 9 Kết quả khảo sát độ đúng 53

Bảng 3 10 Kết quả khảo sát độ đúng………… ……… 55

Bảng 3 11 Kết quả khảo sát độ đúng……….56

Bảng 3 12 Độ hấp thụ quang của dung dịch PRC ở các giá trị nồng độ … 66

Bảng 3 13 Kết quả xác định LOD và LOQ của PRC 68

Bảng 3 14 Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của CPM theo nồng độ

69 Bảng 3 15 Kết quả tính LOD và LOQ của CPM 69

Bảng 3 16 Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang của B1 theo nồng độ

70 Bảng 3 17 Kết quả tính LOD và LOQ của B1 67

Bảng 3 18 Pha chế các dung dịch hỗn hợp PRC và CPM 68

Bảng 3 19 Kết quả tính nồng độ, sai số của PRC và CPM trong hỗn hợp……….…………69

Bảng 3 20 Pha chế các dung dịch hỗn hợp PRC và B1 70

Bảng 3 21 Kết quả tính nồng độ, sai số của PRC và B1 trong hỗn hợp……… 71

Bảng 3 22 Pha chế các dung dịch hỗn hợp CPM và B1 72

Bảng 3 23 Kết quả tính nồng độ, sai số của CPM và B1 trong hỗn hợp… 76

Bảng 3 22 Pha các dung dịch chuẩn PRC, B1, CPM và hỗn hợp………74

vBảng 3 25 Kết quả tính nồng độ, sai số của PRC, CPM và B1 77

Bảng 3 26 Kết quả tính nồng độ, sai số PRC, B1 và CPM trong mẫu thuốcParacetamol F.B 79Bảng 3 27 Thành phần các dung dịch chuẩn PRC, B1 và CPM thêm vàodung dịch mẫu thuốc Paracetamol F.B 78Bảng 3 28 Kết quả xác định độ thu hồi của PRC, CPM và B1 trong mẫuthuốc Paracetamol F.B……… 79Bảng 3 29 Kết quả tính nồng độ, sai số PRC, CPM và B1 trong mẫu thuốcBaby Plex 80Bảng 3 30 Thành phần các dung dịch chuẩn PRC, B1 và CPM thêm vàodung dịch mẫu thuốc Baby Plex……… …82

Bảng 3 31 Kết quả xác định độ thu hồi của PRC, CPM và B1 trong mẫuthuốc Baby Plex……….……… 83Bảng 3 32 Kết quả tính nồng độ, sai số PRC, B1 và CPM trong mẫu thuốcPabemin 84Bảng 3 33 Thành phần các dung dịch chuẩn PRC, B1 và CPM thêm vàodung dịch mẫu thuốc Pabemin 86Bảng 3 34 Kết quả xác định độ thu hồi của PRC, B1 và CPM trong mẫuthuốc Pabemin……….……….…… ……87

DANH MỤC CÁC HÌNH

Hình 1 1 Thời gian lưu của cấu tử phân tích 5

Hình 1 2 Hiệu quả tách của cột 6

Hình 1 3 Sơ đồ hệ thống HPLC 8

Hình 1 4 Máy quang phổ khả kiến (UV – Vis) ……… 9

Hình 1 5 Dạng bào chế của paracetamol 14

Hình 1 6 Các dạng bào chế của clopheninamin maleat 17

Hình 1 7 Các dạng bào chế của vitamin B1 19

Hình 3 1 Sắc kí đồ của hỗn hợp PRC, CPM và B1 với pha động tỉ lệ 7:93 (a) và 87:13 (b) 44

Hình 3 2 Sắc kí đồ của hỗn hợp PRC, CPM và B1 với bước sóng 216 nm và bước sóng 250 nm 44

Hình 3 3 Sắc ký đồ của hỗn hợp PRC, CPM và B1 với tốc độ dòng 1,2 mL/phút 45

Hình 3 4 Sắc kí đồ của PRC (400 µg/mL) (a) và CPM (10 µg/mL) (b)

46 Hình 3 5 Sắc kí đồ của B1 (100 µg/mL) (a) và của hỗn hợp B1, CPM và PRC (b) 46

Hình 3 6 Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ và diện tích pic của PRC (a), B1 (b), CPM (c)……….……….….47

Hình 3 7 Phổ hấp thụ quang của các dung dịch chuẩn PRC (1), B1 (2) và CPM (3)……… …… 57

Hình 3 8 Phổ hấp thụ quang của PRC ở các nồng độ 0,250,0 g/mL……… 62

Hình 3 9 Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn sự phụ thuộc của độ hấp thụ quang vào nồng độ của PRC (a), B1 (b), CPM (c)……… 63

Hình 3 10 Phổ hấp thụ quang của CPM ở các nồng độ 0,250,0 g/mL…

….64 Hình 3 11 Phổ hấp thụ quang của B1 ở các nồng độ 0,2 50,0 g/mL……… 66

MỞ ĐẦU

Trong ngành y dược cùng với sự phát triển mạnh mẽ của khoa học kĩthuật thì việc sử dụng các thuốc đa thành phần trở nên rất phổ biến Các nhàsản xuất thường phối hợp paracetamol, clopheninamin maleat và vitamin B1với nhiều dược chất trong một công thức bào chế, đặc biệt là trong các thuốc

hạ nhiệt, giảm đau, ho, sổ mũi, với mục đích phối hợp tác dụng dược lýcủa các dược chất để tăng hiệu quả điều trị đồng thời làm giảm tác dụng phụ

và tiện sử dụng cho bệnh nhân Việc định lượng paracetamol, clopheninaminmaleat và vitamin B1 trong các loại thuốc hỗn hợp theo tiêu chuẩn của nhàsản suất là rất quan trọng vì chỉ cần thay đổi một lượng nhỏ thành phần hoạttính của thuốc cũng có thể ảnh hưởng đến sức khỏe của hàng trăm, hàngnghìn người

Trên thế giới và ở Việt Nam hiện nay người ta thường sử dụng phươngpháp sắc lý lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụphân tử (UV-Vis) để định lượng các thuốc đa thành phần vì: các phương phápnày có độ nhạy tương đối cao, có khả năng định lượng tốt, tiết kiệm hóa chất,tốn ít thời gian, thích hợp cho việc tách các chất bay hơi hoặc dễ bị phân hủybởi nhiệt, cho kết quả nhanh và chính xác

Vì vậy chúng tôi lựa chọn đề tài: "Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và vitamin B1 trong thuốc Pabemin, Baby plex, Paracetamol F.B bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao và quang phổ hấp thụ phân tử” để tiến hành nghiên cứu.

1.1 Tổng quan về phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

1.1.1 Khái niệm

HPLC là chữ viết tắt 4 chữ cái đầu bằng tiếng Anh của phương pháp sắc

ký lỏng hiệu năng cao (High Performance Liquid Chromatography), trước đâygọi là phương pháp sắc ký lỏng cao áp (High Pressure LiquidChromatography) [1, 22]

là pha tĩnh) Tốc độ của từng thành phần phụ thuộc vào bản chất hoá học tựnhiên trên pha tĩnh và thành phần của pha động Thời gian mà một chất phântích rửa giải ra khỏi cột gọi là thời gian lưu Thời gian lưu được đo trongnhững điều kiện đặc trưng và được xem là đặc điểm nhận biết của chất đemphân tích [1, 18]

- Sắc ký ion.

- Sắc ký rây phân tử

Trong đó, sắc ký phân bố được ứng dụng nhiều nhất vì có thể phân tíchđược những hợp chất từ không phân cực đến những hợp chất rất phân cực,hợp chất ion có khối lượng phân tử không quá lớn (<3000) Sắc ký phân bốđược chia thành hai loại dựa trên độ phân cực tương đối giữa pha tĩnh và phađộng: sắc ký pha thường và sắc ký pha đảo Dung môi sử dụng trong sắc kýpha đảo là các dung môi phân cực, trong đó dung môi nước đóng vai trò quantrọng mà lại rẻ tiền Do đó, sắc ký pha đảo được ứng dụng nhiều và phổ biếnhơn sắc ký pha thường [18, 22]

1.1.3.1 Pha tĩnh trong sắc ký pha đảo

Trong sắc ký phân bố nói chung, pha tĩnh là những hợp chất hữu cơ đượcgắn lên chất mang rắn silica hoặc cấu thành từ silica theo hai kiểu:

- Pha tĩnh được giữ lại trên chất mang rắn bằng cơ chế hấp phụ vật lý

gọi là sắc ký lỏng-lỏng

- Pha tĩnh liên kết hóa học với chất nền gọi là sắc ký pha liên kết

Trong quá trình sử dụng, người ta nhận thấy sắc ký pha liên kết có nhiều

ưu điểm hơn sắc ký pha lỏng-lỏng vì một số nguyên nhân sau:

- Pha tĩnh trong hệ sắc ký lỏng-lỏng dễ bị hòa tan bởi pha động nên dễ

bị mất mát pha tĩnh trong thời gian sử dụng và gây nhiễm đối với hợp chấtphân tích

- Do pha tĩnh của sắc ký lỏng-lỏng dễ tan trong pha động nên người takhông thể ứng dụng phương pháp rửa giải gradient dung môi

Cột thường được nhồi đầy các hạt xốp, rỗng và được bao phủ một lớp cácchất có tương tác với mẫu được bơm vào Chất phân tích sẽ được các hạt nhồigiữ lại Có nhiều cách khác nhau để phân loại pha tĩnh tuy nhiên cách phânloại rộng rãi nhất được chấp nhận hiện nay là theo hệ thống USP “L” (Dượcđiển Hoa Kỳ) Theo tiêu chí này, có trên 60 loại cột dựa theo loại pha liên kết(C18, C8…), loại hạt nhồi và kích cỡ hạt Vì vậy, người ta thường chỉ quan

tâm đến loại sắc ký phân bố pha liên kết và phần lớn các loại cột sử dụng hiệnnay trong sắc ký phân bố đều có cấu trúc dạng này [22]

1.1.3.2 Pha động trong sắc ký pha đảo

Pha động trong sắc ký lỏng nói chung phải đạt những yêu cầu sau:

- Hòa tan mẫu phân tích.

- Phù hợp với đầu dò

- Không hòa tan hay làm mòn pha tĩnh

- Có độ nhớt thấp để tránh áp suất dội lại cao

- Tinh khiết dùng cho sắc ký

Trong sắc ký pha đảo, dung môi pha động có độ phân cực cao Trên lýthuyết chúng ta có thể sử dụng khá nhiều dung môi nhưng kinh nghiệm thực

tế cho thấy metanol (MeOH), axetonitril (ACN) và tetrahiđrofuran (THF) làđạt yêu cầu nhất Nước là một dung môi được cho vào các dung môi hữu cơ

để giảm khả năng rửa giải

Mỗi dung môi đều đặc trưng bởi các hằng số vật lý như chỉ số khúc xạ,độ nhớt, nhiệt độ sôi, độ phân cực, độ rửa giải…

Trong đó độ phân cực và độ rửa giải có tác động lớn lên khả năng phântách của các pic sắc ký [18,22]

1.1.4 Một số đại lượng đặc trưng trong phân tích sắc ký

1.1.4.1 Hệ số phân bố

Cân bằng của một cấu tử X trong hệ sắc ký có thể được mô tả bằngphương trình như sau: Xpha động Xpha tĩnh Hằng số cân bằng K cho cân bằngnày được gọi là tỉ lệ phân bố hay hằng số phân bố và được tính như sau:

K  Cs

Với Cs: nồng độ cấu tử trong pha tĩnh; CM: nồng độ cấu tử trong pha động

Hệ số K tùy thuộc vào bản chất pha tĩnh, pha động và chất phân tích

1.1.4.2 Thời gian lưu

t '  t - t R R 0 (1.2)

R ' ; 0 '

t R : thời gian lưu của một cấu tử từ khi vào cột đến khi tách ra khỏi cột

t0 : thời gian để cho chất nào đó không có ái lực với pha tĩnh đi qua cột; đócũng là thời gian pha động đi từ đầu cột đến cuối cột và còn gọi là thời gian

lưu chết ( t ' R : thời gian lưu thật của một cấu tử)

Hình 1 1 Thời gian lưu của cấu tử phân tích 1.1.4.3 Thể tích lưu trữ

Trong sắc ký lỏng, thay vì dùng thời gian lưu, đôi khi người ta sử dụngkhái niệm thể tích lưu VR

Tương tự ta cũng có các khái niệm thể tích không lưu giữ Vo và thể tíchlưu hiệu chỉnh V’R

Thể tích lưu và thời gian lưu quan hệ theo hệ thức sau:

1.1.4.4 Hệ số dung lượng

Hệ số dung lượng còn được gọi là hệ số lưu giữ được định nghĩa là tỉ sốgiữa thời gian lưu hiệu chỉnh và thời gian không lưu giữ thể hiện khả năng lưugiữ của cột đối với cấu tử và được tính theo công thức sau:

t ' t -t V' V -V k= R = R 0 ; k ' = R = R 0 (1.4)

t0 t0 V0 V0

k là tỉ lệ thời gian mẫu nằm trong pha tĩnh so với thời gian nằm trong

pha động Hay nói cách khác k là tỉ lệ giữa số mol chất tan trong pha tĩnh với

số mol chất tan trong pha động Hệ số dung lượng k càng lớn thì thời gian phân tích càng lâu, k = 5 ¸ 7 là lý tưởng nhất.

1.1.4.5 Hiệu quả tách của cột

Hiệu quả tách của cột hay còn gọi là hiệu năng, số đĩa lý thuyết N củacột đặc trưng cho khả năng tách pic sắc ký của các cấu tử trên cột Được tínhtheo công thức:

Hình 1 2 Hiệu quả tách của cột

Với: L : chiều dài của cột.

H : chiều cao của một đĩa lý thuyết.

H được tính theo phương trình VanDeemter: H  A  B  C.u

u Với: A: Mô tả ảnh hưởng của sự khuếch tán xoáy (eddy diffusion).

B : biểu thị sự khuếch tán dọc theo cột.

C : trở lực chuyển khối trong đó C  C m  C s

u : tốc độ dài của pha động (cm/phút).

Đường cong VanDeemter

Với tốc độ dòng gần với tốc độ tối ưu (được nghiên cứu kỹ với từngchất trên cột đặc trưng) thì: H  2,8.d p ( d p : kích thước hạt hấp phụ)

Tuy nhiên thực tế không phải chất nào cũng được nghiên cứu kỹ về tốcđộ dòng tối ưu nên thường tính số đĩa lý thuyết theo sắc ký đồ Số đĩa lýthuyết N được tính theo công thức sau:

N   t          wR   16  t  R 2 2 5, 54  t  R (1.6)

b   w h 

Trong đó: W h là chiều rộng mũi sắc ký ở vị trí ½ chiều cao pic (phút)

W b là chiều rộng mũi sắc ký ở vị trí đáy pic (phút)Trong thực tế N nằm trong khoảng 2500 đến 5500 là vừa đủ

Ý nghĩa của số đĩa lý thuyết N

là hệ số dung lượng của chất A và B

Độ chọn lọc  cho biết hiệu quả tách của hệ thống sắc ký,  càng khác

1 thì khả năng tách càng rõ

1.1.4.7 Độ phân giải

Đây là đại lượng biểu thị rõ cả ba khả năng của cột sắc ký: sự giảihấp, sự chọn lọc và hiệu quả tách Độ phân giải của hai pic cạnh tranh đượctính theo 1 trong 3 công thức sau:

R = 2 ´ (t RB - t RA ) = 1,18 ´ (t RB - t RA ) = a - 1

´ k ' B ´ N (1.8)

S

W + W W + W a 1+ k ' 4

Trong đó:

t RA ;t RB : Thời gian lưu tương ứng của chất A, chất B

1: Bình chứa pha động 2: Bộ phận khử khí

3: Bơm cao áp 4: Bộ phận tiêm mẫu

5: Cộ sắc ký (pha tĩnh) 6: Đầu dò

7: Hệ thống máy tính có phần mềm ghi nhận tín hiệu, xử lý dữ liệu và điềukhiển hệ thống

8: In dữ liệu [22]

1.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử

Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử hay phương pháp trắc quang làphương pháp phân tích định lượng dựa vào hiệu ứng hấp thụ xảy ra khi phân

tử tương tác với bức xạ điện từ Vùng bức xạ được sử dụng trong phương

pháp này là vùng tử ngoại gần hay khả kiến ứng với bước sóng khoảng từ

200÷900nm Hiện tượng hấp thụ bức xạ điện từ tuân theo định luật Bughe –Lămbe – Bia Ứng dụng phương pháp phổ đo quang, người ta có thể xác địnhnhiều hợp chất trong phạm vi nồng độ khá rộng nhờ các cải tiến quan trọngtrong thủ tục phân tích Đây là phương pháp phân tích được phát triển mạnh

vì nó đơn giản, đáng tin cậy và được sử dụng nhiều trong kiểm tra sản xuấthoá học, luyện kim và trong nghiên cứu hoá sinh, môi trường và nhiều lĩnhvực khác

Hình 1 4 Máy quang phổ khả kiến (UV – Vis) 1.2.1 Định luật Bughe – Lămbe – Bia

1.2.1.1 Định luật Bughe – Lămbe – Bia

Giả sử tồn tại một môi trường đồng nhất có chiều dày là b chứa chất màu

có khả năng hấp thụ ánh sáng Cho tia sáng đơn sắc có bước sóng λ và cườngđộ Io đi qua môi trường đó (tia sáng này không bị phản xạ, khúc xạ và tán xạ).Sau khi bị môi trường hấp thụ, dòng sáng yếu đi và chỉ còn cường độ I Quan

hệ giữa Io và I được xác định theo định luật Bughe – Lămbe – Bia:

I

I 0  10   .b.C (1.9)

Io: Cường độ tia sáng chiếu qua môi trường đồng nhất

I: Cường độ tia sáng đi ra khỏi môi trường đồng nhất

Gọi ε là hệ số hấp thụ nồng độ, hệ số này chỉ phụ thuộc vào bản chấtcủa chất màu và bước sóng ánh sáng hấp thụ, nếu nồng độ C được tính bằngmol/lít thì ε là hệ số hấp thụ phân tử gam và thường không lớn hơn 2.105; nếu

C tính bằng nồng độ % thì ε là hệ số hấp thụ %…, b là chiều dày của dung

dịch hấp thụ ánh sáng, đo bằng cm, C là nồng độ chất màu, có thể là nồng độ

M, %, mg/mL… Đặt A   lg I I và gọi là độ hấp thụ quang, thì A = εbC

0

Như vậy, định luật Bughe – Lămbe – Bia phát biểu như sau: độ hấp thụ quangcủa dung dịch hấp thụ màu tỉ lệ thuận với chiều dày của dung dịch hấp thụmàu và nồng độ chất màu có trong dung dịch đó Định luật Bughe – Lămbe –Bia còn được gọi là định luật cơ bản của độ hấp thụ quang A [9,14]

1.2.1.2 Tính chất quang học của chất hấp thụ ánh sáng

Tính chất quan trọng nhất đó là tính cộng tính Tính cộng tính này đượcthể hiện theo 3 nội dung sau:

- Tính cộng tính theo chiều dày của dung dịch hấp thụ màu

Nếu có thể chia dung dịch hấp thụ màu thành n phần nhỏ thì tổng độ hấpthụ quang của các tiểu phần là độ hấp thụ quang của toàn bộ dung dịch màu Ứng dụng tính chất này, có thể tăng độ hấp thụ quang của dung dịch màuloãng bằng việc sử dụng cuvet có kích thước hơn lớn hoặc giảm độ hấp thụquang của dung dịch màu có nồng độ lớn bằng việc sử dụng cuvet có kíchthước nhỏ hơn, để việc đo độ hấp thụ quang đạt độ chính xác cao Trong thực

tế, chỉ sản xuất các cuvet có độ dày từ 0,1 đến 10cm, thường là cuvet 1cm Không dùng các loại cuvet nhỏ hơn 0,1cm, vì lúc này rất khó rót dung dịchvào cuvet; không dùng các loại cuvet lớn hơn 10cm, vì lúc này sự khúc xạánh sáng quá lớn gây sai số phân tích

- Tính cộng tính theo nồng độ chất hấp thụ màu

Nếu có thể chia nồng độ chất hấp thụ màu thành n phần nhỏ thì tổng độhấp thụ quang của các tiểu phần là độ hấp thụ quang của toàn bộ dung dịchmàu Ứng dụng tính chất này, có thể tăng độ hấp thụ quang của dung dịchmàu loãng bằng việc cách cho thêm chất màu hoặc giảm độ hấp thụ quangcủa dung dịch màu có nồng độ lớn bằng cách pha loãng dung dịch màu haylấy lượng chất màu ít hơn để phân tích

- Tính cộng tính theo thành phần các chất hấp thụ màu

Nếu trong dung dịch có n chất hấp thụ màu và mỗi chất màu đều tuân thủđịnh luật Bughe – Lămbe – Bia thì tổng độ hấp thụ quang của các chất màu làđộ hấp thụ quang của toàn bộ dung dịch Ứng dụng tính chất này có thể có thểgiải bài toán phân tích nhiều chất màu trong dung dịch phân tích Dùng máy

đo để xác định độ hấp thụ quang Ngoài việc đo A, còn có thể đo độ truyềnquang T%: T %  I .100 Tuy nhiên, phép đo này ít được sử dụng trong

phân

I0

tích định lượng, vì hàm số T% = f(C) không tuyến tính như hàm số A = f(C).Thường chỉ dùng đo T% khi căn chỉnh máy đo Lưu ý: T% = 100 thì A = 0[1, 9, 14, 24]

1.2.2 Các bước tiến hành phép đo UV-Vis

Bản chất của phổ hấp thụ phân tử UV-Vis:

Khi chiếu một chùm sáng có bước sóng phù hợp đi qua một dung dịchchất màu, các phân tử sẽ hấp thụ một phần năng lượng chùm sáng, một phầnánh sáng truyền qua dung dịch Xác định cường độ chùm ánh sáng truyền qua

đó ta có thể xác định được nồng độ của dung dịch Sự hấp thụ ánh sáng củadung dịch tuân theo định luật Bughe – Lămbert – Bia:

( T: Độ truyền qua)

ε –  ) Đồ thị này có dạng đường cong Gauss Cực đại Amax (εmax) ứng vớigiá trị λmax gọi là cực đại hấp thụ Khi tiến hành phân tích theo quang phổ đoquang chọn đo độ hấp thụ quang A của dung dịch nghiên cứu tại λmax Bởi vìvới việc đo A ở λmax cho kết quả phân tích có độ nhạy và độ chính xác tốt nhất

Bước 2 Chuẩn bị mẫu phân tích

Mẫu phân tích có thể ở dạng rắn, lỏng nhưng thông thường người tahay chuẩn bị mẫu phân tích là những chất lỏng hoặc ở dạng dung dịch Nếuchất nghiên cứu là những chất rắn không tan, người ta có thể tìm cách hoà tanchúng bằng các dung môi và các biện pháp thích hợp Sau đó nếu chất nghiêncứu là hợp chất không có hiệu ứng phổ hấp thụ, thì phải chế hoá dung dịchbằng các biện pháp như phản ứng oxy hoá khử, phản ứng tạo phức chất sau

đó đem nghiên cứu Nếu chất nghiên cứu là những chất khí thì sẽ được nghiêncứu trong các cuvet đặc biệt

- Trang thiết bị phương pháp UV-Vis

Theo những nguyên lý cơ bản đã xét trong thực tế ta phải đo độ hấp thụ quangbằng cách đo cường độ bức xạ truyền đi từ nguồn sáng qua mẫu trắng tớidetectơ và cường độ bức xạ từ nguồn qua chất nghiên cứu đến detectơ Nhưvậy ta có thể hình dung một cách khái quát thiết bị đo độ hấp thụ quang nhưsau:

- Nguồn phát tia bức xạ - Bộ lọc sáng

- Cuvet - Detector [9, 14, 18, 33]

1.3 Phương pháp lọc Kalman

Thuật toán lọc Kalman hoạt động trên cơ sở các file dữ liệu phổ đã ghiđược của từng cấu tử riêng rẽ và của hỗn hợp các cấu tử Khi chương trìnhchạy cứ sau mỗi giá trị độ hấp thụ quang là một lần nồng độ của cấu tử tiếngần đến nồng độ thực của nó Việc tính toán sẽ được thực hiện trên toàn bộkhoảng bước sóng được chọn Khi độ lệch chuẩn tương đối của giá trị nồng độ

các cấu

tử trong hỗn hợp lớn hơn giá trị sai số cho phép thì sẽ phải xác định lại nồngđộ của cấu tử đó Trong trường hợp này cần tăng giá trị sai số mặc định hoặcgiảm số giá trị nồng độ mặc định để tính giá trị trung bình [23,25].

1.4 Tổng quan về các chất phân tích trong thuốc Pabemin, Baby Plex và Paracetamol F.B

1.4.1 Paracetamol

1.4.1.1 Giới thiệu chung

- Công thức phân tử: C8H9O2N Khối lượng mol phân tử: 151,17 (g/mol)

- Tên quốc tế: Paracetamol (tên khác: Acetaminophen)

- Công thức cấu tạo:

- Tên IUPAC: N-(4-hydroxyphenyl) acetamit hoặc p-hydroxy acetanilit hoặc4-hydroxy acetanilit

Paracetamol là chất bột kết tinh màu trắng, không mùi, vị đắng nhẹ.Khối lượng riêng: 1,263 g/cm 3

và nhiệt độ nóng chảy: 169 0

C Độ tantrong nước: 0,1÷0,5g/100mL nước tại 22 0

C Ngoài ra PRC còn có khảnăng tan trong etanol, dung dịch kiềm, dung dịch axit Trong môi trườngaxit, paracetamol có cực đại hấp thụ tại 245nm, trong môi trường kiềm,paracetamol có cực đại hấp thụ tại 257nm

Paracetamol có nhóm -OH, nhóm chức axetamit và nhân thơm quyếtđịnh tính chất Sự có mặt của 2 nhóm hydroxyl và axetamit làm cho nhânbenzen được hoạt hóa có thể phản ứng được với các hợp chất thơm có ái lựcelectron Sự liên kết giữa nhóm axetamit, hydroxyl với vòng benzen làm giảm

1.4.1.2 Dược lí và cơ chế tác dụng

Paracetamol là thuốc giảm đau, hạ sốt đựợc sử dụng rộng rãi không cầnđon do vạy tỉ lẹ ngộ độc paracetamol có xu hướng tăng nhanh Khi dùng quáliều, phần lớn thuốc được hấp thu trong vòng 2 giờ, nồng độ đỉnh đạt đượcsau uống là 4 giờ 90% paracetamol được chuyển hoá ở gan theo con đườngsunfat hoá và glucuronid hoá, phần còn lại được hệ enzym cytochrome P-450chuyển hoá (hệ này chủ yếu ở gan) thành N-acetyl-p-benzoquinoneimin(NAPQI) Khi uống quá liều paracetamol thì quá trình sunfat hóa bị bão hòalàm lượng NAPQI tang lên gây độc với gan Paracetamol không độc với liềuđiều trị, đôi khi gặp phải những phản ứng da gồm ban dát, mẩn ngứa và màyđay, những phản ứng mẫn cảm khác gồm phù thanh quản, phù mạch và nhữngphản ứng kiểu phản ứng phản vệ có thể ít xảy ra Tuy nhiên, không nên dùngliều cao (>4g/ngày) nếu dùng liều quá cao sau 24 giờ sẽ gây tử vong, xuấthiện hoại tử tế bào gan có thể gây tử vong sau 5  6 ngày [4]

đau và hạ sốt Ngoài ra có thể dùng viên nén paracetamol 650mg tác dụng kéodài liều 1,3g/lần cách nhau 8h khi cần thiết, không quá 3,9g/ngày, uốngnguyên viên không được nhai hoặc hoà tan trong chất lỏng Liều độc ở ngườilớn và trẻ trên 12 tuổi được tính thành hai trường hợp:

- Trên 140mg/kg ở người nghiện rượu, suy dinh dưỡng, xơ gan hoặcđang dùng các thuốc độc gan thận thì có thể liều độc còn thấp hơn

- Trẻ em dưới 12 tuổi: liều uống hoặc đặt trực tràng có thể dao động từ10-15mg/kg/lần cách nhau 4-6h, tối đa 60mg/ngày Liều độc paracetamol trẻ

em là 150mg/kg/ngày [3,11]

1.4.2 Clopheninamin maleat

1.4.2.1 Giới thiệu chung

- Công thức phân tử là: C16H19ClN2.C4H4O4

- Khối lượng mol phân tử: 390,87 (g/mol)

- Công thức cấu tạo

- Tên IUPAC: 3-(4-clorophenyl)-N, N– dimethyl- 3 - (4-clorophenyl)

- N, N - dimethyl -3- pyridin-2-yl-propan-1-amine

3-pyridin-2-YL-

propan-1-amin

- Tên gọi khác: 3-(4-clorophenyl)-3-(2-pyridyl) propyldimethylamim hydromaleat, clopheninamin hydrogen maleat; 1-p-Clorophenyl-1-(2pyridyl)-3-dimethylaminopropanmaleat;1-(N,N-Dimethylamino)-(pchlorophenyl)-3- (alpha-pyridyl) propan maleat Clopheninamin hydro 1-p-Cloophenyl–1–(2– pyridyl)–3–dimethylaminopropan maleat; 1-(N,N-Dimethylamino) -

3 - (p-clorophenyl) -3- (alpha-pyridyl) propan maleat

Clophenylamin maleat là bột tinh thể trắng, không mùi Tan trong nước(pH = 4-5); etanol 96 %, clorofom; ít tan trong ete, benzen Nhiệt độ nóng

16chảy là 132-1350C và độ tan trong nước: 0,55 g/100 mL ở 200C.

Clopheninamin maleat chuyển hóa nhanh và nhiều Các chất chuyển hóagồm có desmethyl - didesmethyl- clopheninamin và một số chất chưa đượcxác định, một hoặc nhiều chất trong số đó có hoạt tính [4, 5].

1.4.2.2 Dược lí và cơ chế tác dụng

Clopheninamin maleat thường được phối hợp trong một số chế phẩm bántrên thị trường để điều trị triệu chứng ho và cảm lạnh Tuy nhiên, thuốc không

có tác dụng trong điều trị triệu chứng nhiễm virus

Thuốc được bài tiết chủ yếu qua nước tiểu dưới dạng không đổi hoặcchuyển hóa, sự bài tiết phụ thuộc vào pH và lưu lượng nước tiểu Chỉ mộtlượng nhỏ được thấy trong phân Thời gian bán thải là 12 - 15 giờ và ở ngườibệnh suy thận mạn, kéo dài tới 280 - 330 giờ

Clopheninamin maleat có thể làm tăng nguy cơ bí tiểu tiện do tác dụngphụ chống tiết axetylcholin của thuốc, đặc biệt ở người bị phì đại tuyến tiềnliệt, tắc đường niệu, tắc môn vị tá tràng Tác dụng an thần của clopheninaminmaleat tăng lên khi uống rượu và khi dùng đồng thời với các thuốc an thầnkhác Phải thận trọng khi dùng cho những người có bệnh phổi mạn tính, hoặckhó thở Có nguy cơ bị sâu răng ở những người bệnh điều trị thời gian dài, dotác dụng chống tiết axetylcholin, gây khô miệng Dùng thuốc thận trọng vớingười cao tuổi (>60 tuổi) vì những người này thường tăng nhạy cảm với tácdụng chống tiết axetylcholin Dùng thuốc trong 3 tháng cuối của thai kỳ cóthể dẫn đến những phản ứng nghiêm trọng (như cơn động kinh) ở trẻ sơ sinh.Thời kỳ cho con bú clopheninamin maleat có thể được tiết qua sữa mẹ [4, 11]

– Người cao tuổi: dùng 4mg, chia 2 lần/ngày, thời gian tác dụng có thể tới

36 giờ hoặc hơn, thậm chí cả khi nồng độ thuốc trong huyết thanh thấp[4, 11]

1.4.3 Vitamin B1

1.4.3.1 Giới thiệu chung

- Tên thông thường: vitamin B1 hay thiamin

- Tên IUPAC: 2–[3–[(4–amino–2–metyl–pyrimidin–5–yl) metyl]–4– metyl–thiazol–5–yl] etanol

Công thức phân tử: C12H17N5O4S

Khối lượng mol phân tử: 265,35g/mol

Công thức cấu tạo của vitamin B1 cho thấy nó là một dẫn xuất pyrimidingắn với dẫn xuất thiazol qua nhóm metylen.

Vitamin B1 là những tinh thể trắng nhỏ hay bột kết tinh, có mùi đặctrưng Khi tiếp xúc với không khí, chế phẩm khan nhanh chóng hút ẩm(khoảng 4% nước) Dung dịch trong nước có môi trường axit, nóng chảy ở

2480C và phân hủy Dễ tan trong nước và axit axetic nhưng khó tan trongetanol 96% và metanol, không tan trong ete, benzen hay clorofom và chịunhiệt khá nên không bị phân huỷ khi nấu nướng

Vitamin B1 không ổn định với ánh sáng và độ ẩm Mất hoạt tính trongmôi trường trung tính và bazơ Ổn định tính chất ở pH = 4 Dạng chế phẩmcủa vitamin B1 có thể tồn tại ở dạng thiamin monohydroclorua, thiaminmononitrat

Vitamin B1 là dẫn xuất pyrimidin gắn với dẫn xuất thiazol qua nhómmetylen Do nguyên tử N bậc 4 nên vòng thiazol trong thiamin kém vững bềnđặc biệt trong môi trường kiềm Trong môi trường này vòng bị mở và lúc đó

dễ bị oxi hóa thành các sản phẩm không có hoạt tính vitamin Do vậy khi phachế dung dịch thiamin phải đựng trong cốc thủy tinh trung tính, pH của dungdịch phải axit Vitamin B1 bị oxy hóa bởi K3[Fe(CN)6] trong môi trường kiềmtạo thành thiocrom màu vàng phát huỳnh quang màu xanh da trời Phản ứngnày được dùng để định tính vitamin B1 và định lượng vitamin B1 bằngphương pháp đo huỳnh quang [11,15]

1.4.3.2 Dược lí và cơ chế tác dụng

Vitamin B1 là thành phần của men thiamin pyrophotphat có vai trò rấtquan trọng trong chuyển hoá chất bột, đường (gluxit) Vitamin B1 còn thamgia vào quá trình sản xuất và giải phóng chất dẫn truyền thần kinh axetylcolin,chuyển hoá một số axit amin cần thiết như leucin, isoleucin và valin (các axit

19amin này có nhiều vai trò rất quan trọng trong cơ thể) Thiếu vitamin B1 kéo

dài sẽ mắc bệnh beriberi Bệnh nhân mắc bệnh này thường biểu hiện: ănkhông ngon miệng, tê bì ở ngoài da, giảm sút trí nhớ, nặng hơn là phù chân,teo cơ, rối loạn thần kinh, suy tim và tử vong Nhu cầu vitamin B1 của cơ thểmỗi ngày tính theo năng lượng, một người trưởng thành một ngày cần1- 1,2 mg vitamin B1.

Tác dụng không mong muốn dễ gặp khi dùng vitamin B1 là gây dịứng, nguy hiểm nhất là sốc khi tiêm tĩnh mạch Về độc tính: Cho tới nay chưa

có một báo cáo khoa học nào về tính độc từ thức ăn hoặc sản phẩm có chứavitamin B1 Có thể dùng lượng đến 500 mg vitamin B1 mỗi ngày [4, 5]

1.4.3.3 Liều dùng

Đóng gói

- Hộp 10 vỉ x 10 viên nang

- Chai 100 viên nang

Với nồng độ cao vitamin B1 được hấp thụ bằng cơ chế thụ động nhưng ởnồng độ thấp nó được hấp thụ bằng hệ thống vận chuyển chủ động qua trunggian một số chất mang và bị photphonyl hóa Vitamin B1 sau khi được hấpthụ trong ruột non và tá tràng, nó chuyển vào gan liên kết với photpho thànhdạng hoạt động, rồi vào máu để phân bố đi khắp cơ thể Trong máu, vitaminB1 gắn với protein huyết tương mà chủ yếu là albumin và hồng cầu Các cơquan dự trữ vitamin B1 bao gồm cơ, tim, gan, thận và não, trong đó cơ là nơi

dự trữ chính Hàm lượng vitamin B1 trong các mô là rất ít, vì thế hàm lượngvitamin B1 trong cơ thể phụ thuộc vào lượng đưa vào qua thức ăn

Lượng vitamin B1 cần cung cấp hằng ngày cho cơ thể: trẻ em 1 – 12 tuổi0,7 – 1,2mg; trẻ trên 12 tuổi là 1,3 – 1,5mg; người lớn nam là 1,5mg và nữ là1,3mg; phụ nữ mang thai và nuôi con bú là 1,8mg [4,11,15]

1.5 Một số loại chế phẩm chứa paracetamol, clopheninamin maleat và vitamin B1

1.5.1 Thuốc Paracetamol F.B

SĐK: VD-9736-09

Ngày sản xuất: 14/01/2017

Hạn sử dụng: 14/01/2020

Dạng thuốc: Viên nang

Đóng gói: Hộp 20 vỉ bấm x 10 viên

Nhà sản xuất: Công ty cổ phần xuất nhập khẩu y tế DOMESCO

Thành phần: Paracetamol: 400mg , clopheninamin maleat: 2mg, vitamin B1:

Nhà sản xuất: Công ty cổ phần dược – trang thiết bị y tế BÌNH ĐỊNH

Thành phần: Paracetamol: 325mg, clopheninamin maleat: 2mg, vitamin B1:

Dạng thuốc: thuốc bột

Đóng gói: Hộp 100 gói x 2,5 g

Nhà sản xuất: Công ty cổ phần dược phẩm Cửu Long

Thành phần: Paracetamol: 325mg, clopheninamin maleat: 2mg, vitamin B1:

vô cơ, hữu cơ Các kết quả đều cho thấy phương pháp có độ tin cậy cao

1.6.1 Một số kết quả xác định thành phần theo phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử

Năm 2005, Thái Duy Thìn và cộng sự đã định lượng đồng thờiparacetamol và ibuprofen trong viên nén Dibulaxan bằng phương pháp quangphổ hấp thụ phân tử (UV-Vis) trong dung dịch đệm photphat có pH= 7,khoảng bước sóng quét phổ từ 200 – 300 nm Ibuprofen hấp thụ cực đại ởbước sóng 222nm với độ hấp thụ quang cực đại paracetamol tại λmax=243 nm.Độ thu hồi của ibuprofen từ 97,2% đến 99,2% và paracetamol từ 100,1% đến101,2 % [19]

Năm 2011, tác giả Lê Ngọc Anh đã xác định thành công paracetamol,loratadin và dextromethophan HBr trong thuốc viên nén hapacol-CF bằng

phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử Điều kiện tối ưu để xác định đồngthời paracetamol, loratadin và detromethophan HBr trong hỗn hợp: Khoảngbước sóng thích hợp để quét phổ từ 210-285 nm, bước sóng ứng với độ hấpthụ quang cực đại của dung dịch paracetamol λmax=244 nm, loratadin

λmax=273 nm và dextromethophan HBr λmax=278nm; trong môi trường axitHCl 0,1M độ hấp thụ quang của paracetamol, loratadin và dextromethophanHBr ổn định và đạt cực đại; khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm là

30 đến 60 phút sau khi pha và tại nhiệt độ 250C Kết quả: xác định được LOD,LOQ và khoảng tuyến tính của paracetamol: 1,3÷25 μg/mL, loratadin:1,3÷80 μg/mL, dextromethophan HBr: 0,6÷100 μg/mL Độ thu hồi củaparacetamol từ 101,08% đến 102,08%, loratadin từ 92,9% đến 99,45%,dextromethophan HBr từ 99,78% đến 102,24% [2]

Năm 2012, Siladitya Behera và các cộng sự xác định thành côngparacetamol trong thuốc viên nén sử dụng phương pháp quang phổ hấp thụphân tử UV-Vis Điều kiện tối ưu để xác định paracetamol: Khoảng bướcsóng thích hợp để quét phổ từ 200-400 nm, bước sóng ứng với độ hấp thụquang cực đại của dung dịch paracetamol λmax = 243 nm Khoảng thời gian tối

ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là trong khoảng 8 giờ ở nhiệt độ phòng.Kết quả thu được: khoảng tuyến tính độ hấp thụ quang của paracetamol là0,0 đến 150,0 μg/mL, độ thu hồi của paracetamol từ 98,54% đến 99,13% [32].Năm 2013, tác giả Mai Xuân Trường đã xác định thành côngdextromethophan HBr, clopheninamin maleat và guaifenesin trong thuốc viênmethophan bằng phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử Điều kiện tối ưu đểxác định đồng thời dextromethophan HBr, clopheninamin maleat vàguaifenesin trong hỗn hợp là khoảng bước sóng từ 210 - 285 nm, bước sóngứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịch dextromethophan HBr

λmax = 278nm, clopheninamin maleat λmax = 264nm và guaifenesin

λmax = 273nm; trong môi trường axit HCl 0,1M độ hấp thụ quang củadextromethophan HBr, clopheninamin maleat và guaifenesin có sự ổn định và

đạt cực đại; khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là

30 đến 60 phút sau khi pha và đo tại nhiệt độ phòng Kết quả thu được: xácđịnh được LOD, LOQ và khoảng tuyến tính của dextromethophan HBr:0,5÷100μg/mL, clopheninamin maleat: 0,2÷50μg/mL, guaifenesin:0,1÷50μg/mL độ thu hồi của dextromethophan HBr từ 96,60% đến 101,08%,clopheninamin maleat từ 98,70% đến 102,03%, guaifenesin từ 99,01% đến103,00% [25]

Năm 2014, tác giả Vũ Duy Long xác định thành công đồng thờiparacetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốcTIFFY Điều kiện tối ưu để xác định đồng thời paracetamol, clopheninaminmaleat và phenylephin hydroclorit trong hỗn hợp là khoảng bước sóng từ210-290 nm, bước sóng ứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịchparacetamol λmax = 244 nm, clopheninamin maleat λmax = 264 nm vàphenylephin hydroclorit λmax = 273 nm trong môi trường axit HCl 0,1M.Khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm đo quang là từ 20 đến

90 phút sau khi pha và có thể tiến hành thí nghiệm ở nhiệt độ phòng Kết quảthu được: khoảng tuyến tính độ hấp thụ quang của paracetamol là 0,2 đến30,0 μg/mL, clopheninamin maleat là từ 0,2 đến 40,0 μg/mL và phenylephinhydroclorit là từ 1,0 đến 40,0 μg/mL, độ thu hồi của paracetamol từ99,8% đến 100,2%, của phenylephin hydroclorit là từ 99,1% đến 99,6% vàcủa clopheninamin maleat là từ 98,1% đến 100,7% [12]

Năm 2015, tác giả Nguyễn Thị Thuỳ Thương đã xác định thành côngđồng thời paracetamol, clopheninamin maleat trong thuốc Coldamin vàPacemin Điều kiện tối ưu để xác định đồng thời paracetamol, clopheninaminmaleat trong hỗn hợp: Khoảng bước sóng thích hợp để quét phổ từ210-290 nm, bước sóng ứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịchparacetamol λmax = 243 nm, clopheninamin maleat λmax = 273 nm trong môitrường axit HCl 0,1M Khoảng thời gian tối ưu để tiến hành thí nghiệm đoquang là từ 30 đến 40 phút sau khi pha và có thể tiến hành thí nghiệm ở nhiệt

độ phòng Kết quả thu được: khoảng tuyến tính độ hấp thụ quang củaparacetamol là 0,2 đến 30,0 μg/mL, cafein 0,2 đến 30,0 μg/mL, độ thu hồi củaparacetamol từ 96,3% đến 99,1%, của clopheninamin maleat là từ 95,5% đến98,3% [20]

Năm 2015, tác giả Trần Quốc Chính đã xác định thành công đồng thờiparacetamol, codein phot phat trong thuốc Actadol codein Điều kiện tối ưu

để xác định đồng thời paracetamol, codein phot phat trong hỗn hợp: Khoảngbước sóng thích hợp để quét phổ từ 210-290 nm, bước sóng ứng với độ hấpthụ quang cực đại của dung dịch paracetamol λmax = 243 nm, codein

λmax = 210 nm trong môi trường axit HCl 0,1M Khoảng thời gian tối ưu đểtiến hành thí nghiệm đo quang là từ 30 đến 40 phút sau khi pha và có thể tiếnhành thí nghiệm ở nhiệt độ phòng Kết quả thu được: khoảng tuyến tính độhấp thụ quang của paracetamol là 0,2 đến 30,0 μg/mL, cafein 0,2 đến30,0 μg/mL, độ thu hồi của paracetamol từ 99,3% đến 101,1%, của codein là

thời paracetamol, loratadin và dextromethophan trong hỗn hợp 2 và 3 cấu tử

cho thấy: có thể xác định được paracetamol trong hỗn hợp tương đối chínhxác, phải sử dụng phương pháp thêm chuẩn để xác định hàm lượng loratadin

và dextromethophan trong mẫu thuốc Rhumenol Flu 500 Sử dụng phương

pháp thêm chuẩn xác định paracetamol, loratadin và dextromethophan trong

mẫu thuốc Rhumenol Flu 500 với độ thu hồi của paracetamol từ 99,6% đến100,5%, của loratadin là từ 99,98% đến 100,01% và của dextromethophan là

Nghiên cứu định lượng paracetamol, ibuprofen bằng phương phápHPLC với điều kiện: Cột Richrosorb RP18(10μm, 250mm x 4mm), pha động

là hỗn hợp axetonitril và dung dịch axit photphoric 0,1% (tỉ lệ 60: 40 về thểtích), tốc độ dòng là 1 mL/phút, detector UV đặt ở bước sóng 214 nm, thể tíchtiêm mẫu 20 μL Kết quả thu được: sai số tương đối của ibuprofen vàparacetamol là 0,81% và 1,03%; độ thu hồi của ibuprofen và paracetamol là98,4% và 98%

Định lượng paracetamol, phenylpropanlamin HCl, clorphenylaminmaleat bằng phương pháp HPLC với điều kiện: Cột C18 (5μm,250mm x 4,6mm) Pha động là hỗn hợp nước- axetonitril- trietylamin (tỉ lệ968:30:2 về thể tích) Tốc độ dòng là 1,2 mL/phút Detector UV đặt ở bướcsóng 216 nm đo phenylpropanlamin HCl và clophenylamin maleat 244 nm đoacetaminophen Thể tích tiêm mẫu 20 μL Nhiệt độ cột ở nhiệt độ phòng Kếtquả thu được: sai số tương đối của paracetamol, phenylpropanlamin HCl,