Xác định đồng thời amoxicilline và kali clavulanate trong dược phẩm bằng phương pháp trắc quang chemometrics (tt)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TRẦN THỊ MY XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI AMOXICILLINE VÀ KALI CLAVULANATE TRONG DƯỢC PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP TRẮC QUAN - CHEMOMETRICS Chun ngành: HĨA PHÂN TÍCH Demo Version - Mã Select.Pdf SDK số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS TS TRẦN THÚC BÌNH Huế, Năm 2014 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực, đồng tác giả cho phép sử dụng chưa công bố công trình khác Tác giả luận văn Trần Thị My Demo Version - Select.Pdf SDK ii Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Trần Thúc Bình tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cám ơn q thầy Khoa Hóa học hai trường Đại học Sư Phạm Đại học Khoa học Huế giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành tốt luận văn Demo Version - Select.Pdf SDK Ngoài xin cảm ơn giúp đỡ, động viên gia đình, bạn lớp Cao học Hóa phân tích K21 (2012-2014) trường Đại học Sư Phạm, bạn Cao học khóa trường Đại học Khoa học Huế thời gian thực luận văn Huế, tháng năm 2014 Tác giả luận văn Trần Thị My iii iii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa i Lời cam đoan ii Lời cảm ơn iii Mục lục Danh mục kí hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình vẽ, đồ thị MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Định luật Beer tính chất cộng tính độ hấp thụ 1.1.1 Định luật Beer 1.1.2 Tính chất cộng tính độ hấp thụ 1.2 Cơ sở lý thuyết số phương pháp trắc quang (UV-VIS) - chemometrics 10 1.2.1 Phương pháp lọc Kalman 10 Demo Version - Select.Pdf SDK 1.2.2 Phương pháp Vierordt 11 1.2.3 Phương pháp phổ đạo hàm 12 1.2.4 Phương pháp bình phương tối thiểu 13 1.2.5 Phương pháp bình phương tối thiểu phần 14 1.2.6 Phương pháp hồi quy cấu tử 15 1.2.7 Phương pháp phổ toàn phần (phương pháp bình phương tối thiểu hệ đa biến) 15 1.3 Tổng quan Amoxicilline Kali clavulanate 17 1.3.1 Tổng quan AT 17 1.3.1.1 Giới thiệu AT 17 1.3.1.2 Một số phương pháp xác định riêng lẻ AT 19 1.3.2 Tổng quan PC 20 1.3.2.1 Giới thiệu PC 20 1.3.2.2 Một số phương pháp xác định riêng lẻ PC 21 1.3.3 Một số phương pháp xác định đồng thời AT PC 22 1.3.4 Một số loại thuốc có chứa hai dược chất AT PC thị trường 23 1.3.4.1 Klamentin 23 1.3.4.2 Augmentin 23 1.3.4.3 AMK 1000 24 1.3.4.4 Curam 25 1.3.4.5 Bifoxit 25 1.3.4.6 Amonalic Duo Syrup 26 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Nội dung nghiên cứu 27 2.1.1 Tiến hành khảo sát lựa chọn điều kiện phân tích để áp dụng phương pháp trắc quang - chemometrics 27 2.1.2 Đề xuất quy trình xác định đồng thời AT PC dược phẩm phương pháp trắc quang - chemometrics 27 2.1.3 Áp dụng quy trình để xác định đồng thời AT PC dược phẩm thị trường 27 2.2 Phương pháp nghiên cứu 27 Demo Version - Select.Pdf SDK 2.2.1 Phương pháp trắc quang - chemometrics 27 2.2.2 Phương pháp khảo sát đơn biến 28 2.2.3 Phương pháp thống kê 28 2.2.3.1 Sai số tương đối 28 2.2.3.2 Độ lặp lại 28 2.2.3.3 Độ 29 2.2.2.4 So sánh kết phân tích phương pháp nghiên cứu với phương pháp đối chiếu (HPLC) 29 2.3 Dụng cụ hóa chất 30 2.3.1 Dụng cụ 30 2.3.2 Hóa chất 30 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Khảo sát đơn biến đặc tính AT, PC, dung dịch hỗn hợp AT, PC lựa chọn điều kiện phân tích theo phương pháp trắc quang - chemometrics 31 3.1.1 Khảo sát phổ hấp thụ phân tử hai dược chất 31 3.1.2 Khảo sát tính cộng tính phổ hấp thụ AT PC 33 3.1.3 Khảo sát ổn định độ hấp thụ dung dịch chuẩn AT, PC hỗn hợp hai dược chất theo thời gian 34 3.1.4 Khảo sát khả áp dụng phương pháp trắc quang - chemometrics với tỉ lệ nồng độ khác AT PC 37 3.1.5 Khảo sát khoảng nồng độ thích hợp AT PC theo tỉ lệ hàm lượng hai dược chất thuốc 39 3.1.6 Độ tin cậy phương pháp 41 3.2 Đề xuất quy trình xác định đồng thời AT PC dược phẩm phương pháp trắc quang - chemometrics 43 3.3 Áp dụng quy trình xác định đồng thời AT PC dược phẩm thị trường phương pháp trắc quang - chemometrics 44 3.4 Đánh giá độ tin cậy quy trình phân tích 46 3.4.1 Độ 46 3.4.2 Độ lặp lại 50 Version - Select.Pdf SDK KẾT LUẬNDemo 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Ký hiệu, viết tắt A AT HPLC Tiếng Anh Tiếng Việt Absorbance Độ hấp thụ Amoxicillin trihydrat - High performance liquid Sắc ký lỏng hiệu cao chromatography LC-MS Liquid chromatography - Mass Sắc ký lỏng khối phổ spectrometry PC Potassium clavulanate - PCR Principal component regression Hồi quy cấu tử PLS Partial least square Bình phương tối thiểu phần RE Relative error Sai số tương đối Rev Recovery Độ thu hồi 10 RP-HPLC Reversed-phase Demo Version - Select.Pdf SDK Sắc ký hấp thụ pha ngược chromatography 11 S Standard deviation Độ lệch chuẩn DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu bảng Tên bảng Trang 3.1 Giá trị nồng độ, sai số tương đối AT PC 32 dung dịch hỗn hợp 3.2 Thành phần hỗn hợp AT PC với tỉ lệ nồng độ khác 37 3.3 Nồng độ xác định được, sai số tương đối AT PC 38 dung dịch hỗn hợp với tỉ lệ thành phần khác 3.4 Thành phần hỗn hợp AT PC (tỉ lệ nồng độ (µg/mL) 39 6,7:1) 3.5 Sai số tương đối nồng độ xác định AT PC 40 dung dịch theo tỉ lệ nồng độ (µg/mL) AT:PC = 6,7:1 3.6 Sai số tương đối nồng độ xác định nồng độ 42 pha chế AT PC dung dịch hỗn hợp chứa Demo Version - Select.Pdf SDK AT PC 3.7 Đánh giá độ lặp lại kết phân tích nồng độ hai 42 cấu tử AT PC dung dịch hỗn hợp sau lần đo 3.8 Kết xác định hàm lượng Amoxicilline axit 45 clavulanic thuốc viên nén AMK 1000 phương pháp trắc quang – chemometrics 3.9 Khối lượng mẫu thuốc, lượng chất chuẩn thêm vào 47 3.10 Kết độ thu hồi AT PC mẫu thuốc 48 AMK 1000 thêm chuẩn 49 3.12 Hàm lượng AT PC thuốc xác định theo phương pháp nghiên cứu phương pháp HPLC Kết xác định nồng độ, RSD (%), RSDHorwitz AT PC 3.13 Kết tính tốn giá trị RSD (%) RSDHorwitz 52 3.11 AT PC 51 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Số hiệu hình vẽ Tên hình vẽ Trag 3.1 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn AT 15 µg/mL, PC 32 7,5 µg/mL dung dịch hỗn hợp chứa hai cấu tử AT PC 3.2 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn AT 15 µg/mL, PC 34 7,5 µg/mL, hỗn hợp AT µg/mL, PC µg/mL 3.3 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn AT 15 µg/mL 35 thời gian 60 phút 3.4 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩ PC 7,5 µg/mL 36 thời gian 60 phút 3.5 Phổ hấp thụ dung dịch hỗn hợp AT µg/mL 36 PC µg/mL thời gian 60 phút 3.6 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn AT, PC Demo Version - Select.Pdf SDK 38 hỗn hợp chúng 3.7 Phổ hấp thụ dung dịch hỗn hợp AT PC tỉ lệ 40 nồng độ (µg/mL) 6,7:1 tăng dần 3.8 Phổ hấp thụ dung dịch AT 15 µg/mL, PC 7.5 41 µg/mL mẫu thuốc AMK 1000 3.9 Phổ hấp thụ dung dịch AT 15 µg/mL, PC 7.5 45 µg/mL mẫu thuốc AMK 1000 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn AT 15 µg/mL, PC 3.10 47 7,5 µg/mL, dung dịch thuốc AMK 1000 dung dịch thuốc thêm chất chuẩn 3.11 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn AT 15 µg/ml , PC 7.5 µg/ml dung dịch hỗn hợp chứa AT µg/ml, PC µg/ml 51 MỞ ĐẦU Trong y học, để điều trị bệnh nhiễm khuẩn đường hô hấp liên cầu khuẩn, phế cầu khuẩn, tụ cầu khuẩn, viêm amidan, viêm xoang, viêm tai giữa, người ta thường sử dụng thuốc đa thành phần để tăng hiệu điều trị, bật kháng khuẩn Amoxicilline axit clavulanic Amoxicilline kháng sinh bán tổng hợp thuộc họ β - lactamin có phổ diệt khuẩn rộng đơi với nhiều vi khuẩn Gram dương Gram âm ức chế tổng hợp thành tế bào vi khuẩn Amoxicilline dễ bị phá hủy β - lactamase, khơng có tác dụng chủng vi khuẩn sản sinh enzym này.[6],[17] Axit clavulanic lên men Streptomyces clavuligerus, có cấu trúc β - lactam gần giống với penicillin, có khả ức chế β - lactamase phần lớn vi khuẩn Gram âm Staphylococcus sinh Ðặc biệt có tác dụng ức chế mạnh β - lactamase truyền qua plasmid gây kháng peniciline cephalosporin.[17] Sự phối hợp Amoxicilline, kháng sinh thuộc nhóm β - lactam, với axit clavulanic, chất ức chế không hồi phục β - lactamase, chế phẩm Demo Version - Select.Pdf SDK sử dụng rộng rãi để điều trị bệnh nhiễm trùng vi khuẩn sản sinh β - lactamase đề kháng Amoxicilline Axit clavulanic giúp cho Amoxiciline không bị β - lactamase phá hủy, đồng thời mở rộng thêm phổ kháng khuẩn amoxicilin cách hiệu nhiều vi khuẩn thông thường kháng lại Amoxiciline, kháng penicilin khác cephalosporin.[17] Để phân tích hai thành phần dược phẩm, người ta phát triển phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC)[19][22][24][25], phương pháp sắc kí lỏng pha ngược (RP-HPLC)[24], Các phương pháp có độ lặp, độ xác tính chọn lọc cao có nhiều hạn chế: hóa chất dung mơi phải có độ tinh khiết cao, yêu cầu phải làm mẫu trước phân tích, hệ thống thiết bị đắt tiền, đòi hỏi kỹ thuật phức tạp, gặp nhiều khó khăn việc xác định đồng thời nhiều hỗn hợp nhiều cấu tử có phổ hấp thụ quang phân tử xen phủ nhau, việc tách riêng cấu tử phải áp dụng biện pháp thêm chất che, loại trừ khả ảnh hưởng cấu tử, quy trình phức tạp nhiều thời gian dễ gây sai số trình thực Với mục đích phân tích, người ta kết hợp phương pháp trắc quang dùng toàn số liệu phổ kết hợp phương pháp chemometrics, có hỗ trợ máy tính nhằm nâng cao độ xác độ phương pháp phân tích Phương pháp tốn dung mơi, áp dụng thường xun phòng thí nghiệm trở thành cơng cụ phân tích hiệu thuận tiện Một mảng quan trọng Chemometrics nghiên cứu sử dụng hiệu kĩ thuật hồi quy đa biến - thuật toán xác định đồng thời nhiều cấu từ hỗn hợp mà không cần tách loại trước Đối với vấn đề xác định đồng thời Amoxicilline Kali clavulanate (dạng tồn hoạt chất Axit clavulanic) dược phẩm, chưa có nhiều cơng trình nghiên cứu theo hướng ưu điểm lớn so với hướng khác Vì vậy, chúng tơi lựa chọn đề tài: “Xác định đồng thời Amoxicilline Kali clavulanate dược phẩm phương pháp trắc quang- chemometrics” nhằm góp phần phát triển phương pháp xác định đồng thời Amoxicilline Kali clavulanate theo hướng ứng dụng Chemometrics xây dựng phương pháp quy trình phân tích xác định đồng thời hai chất loại thuốc lưu hành thị trường Demo Version - Select.Pdf SDK ... chọn đề tài: Xác định đồng thời Amoxicilline Kali clavulanate dược phẩm phương pháp trắc quang- chemometrics nhằm góp phần phát triển phương pháp xác định đồng thời Amoxicilline Kali clavulanate. .. trình xác định đồng thời AT PC dược phẩm phương pháp trắc quang - chemometrics 27 2.1.3 Áp dụng quy trình để xác định đồng thời AT PC dược phẩm thị trường 27 2.2 Phương pháp. .. tỉ lệ hàm lượng hai dược chất thuốc 39 3.1.6 Độ tin cậy phương pháp 41 3.2 Đề xuất quy trình xác định đồng thời AT PC dược phẩm phương pháp trắc quang - chemometrics 43