Ứng dụng của dược liệu chứa Anthranoid trong sản xuất dược phẩm

ThS.DS Huỳnh Anh Duy MỤC TIÊU HỌC TẬP TRÌNH BÀY ĐƢỢC Đặc điểm cấu trúc nhóm anthranoid (nhóm phẩm nhuộm, nhuận tẩy dimer) Các tính chất anthranoid Nguyên tắc chiết xuất anthranoid từ dƣợc liệu Các phƣơng pháp định tính, định lƣợng anthranoid dƣợc liệu Tác dụng sinh học – Công dụng anthranoid 08 dƣợc liệu chứa anthranoid (Cassia, Đại hồng, Lơ hội …) Khái niệm chung anthranoid - Thuộc nhóm lớn hydroxyquinon (các quinonoid) - Sắc tố vàng, vàng cam, đỏ - Tìm thấy Nấm, địa y, thực vật bậc cao, động vật PHÂN LOẠI QUINONOID benzoquinon naphthoquinon (chủ yếu : para-naphthoquinon) naphtacenquinon (hoặc anthracyclinon) phenanthraquinon anthranoid (1,2 di-OH) anthraquinon (1,8 di-OH) anthraquinon benzoquinon (ortho) O O O O O phenanthraquinon O O O anthraquinon O O p-naphthoquinon (para) ĐỊNH NGHĨA Anthranoid glycosid mà phần aglycon Δ’ 9,10 diceton-anthracen (= anthracenoid) peri  peri O     10   peri O  peri ANTHRAQUINON dạng oxy hóa O O anthraquinon O H H anthron OH H OH H H H anthranol dihydroanthranol dạng khử THUẬT NGỮ ANTHRANOID anthraglycosid (AG) dạng O-/C-glycosid anthraquinon (AQ) dạng aglycon anthraquinon dạng aglycon AQ oxy hóa anthron, anthranol dihydroanthranol AQ khử nhóm 1,8 di-OH AQ : C3, C6 thƣờng có nhóm CH3, CH3O, CH2OH, CHO, COOH, OH  gọi chung Oxy Methyl Anthraquinon (OMA) dạng oxy-hóa anthraquinon dạng khử anthron anthranol dihydroanthranol AQ ANTHRANOID + ose AG anthraquinon glycosid anthron glycosid anthranol glycosid dihydroanthranol glycosid PHÂN LOẠI ANTHRAQUINON OH O OH O 10 O O OH OH O O nhóm nhuận tẩy nhóm phẩm nhuộm 10 ĐỊNH LƢỢNG OMA 8.1 Phƣơng pháp cân (Deals Kroeber) Nguyên tắc - Thủy phân AG H2SO4 25% nóng - Tách riêng AQ (có sẵn + sinh) CHCl3 - Loại tạp (naphthoquinon ) với NaHSO3 thừa - Loại NaHSO3 thừa HCl loãng - Bốc dung môi CHCl3 đến cắn, sấy 60OC  80OC - Cân, tính hàm lƣợng % 58 ĐỊNH LƢỢNG OMA 8.2 Phƣơng pháp so màu (Auterhoff) Nguyên tắc - Vừa thủy phân (với AcOH băng) vừa chiết AQ (với Et2O) trực tiếp từ bột dƣợc liệu - Dịch Et2O đƣợc lắc với kiềm (NaOH + NH4OH) - Lớp kiềm (đỏ) chứa AQ đƣợc đo Abs ( = 540 nm) - So sánh với đƣờng cong chuẩn : * istizin hay chrysophanol / (NaOH + NH4OH) * CoCl2 6H2O / H2O - Suy hàm lƣợng AQ / mẫu 59 ĐỊNH LƢỢNG OMA Chú ý phƣơng pháp so màu (Auterhoff) • Các dẫn chất khử  vàng / môi trƣờng kiềm (cản trở đo màu)  cần Oxy hóa (BM 20’), để nguội đo quang • Hiệu kết trƣớc sau BM  [dẫn chất khử ] • muốn xác định hàm lƣợng aglycon có sẵn / dƣợc liệu  chiết dung môi hữu phân cực (không cần thủy phân AcOH băng) 60 ĐỊNH LƢỢNG OMA 8.3 Phƣơng pháp thể tích (Tschirch - Schmitz) AQ KOH 0,1 N thừa HCl 0,1 N Chú ý - thân AQ thị màu (đỏ / kiềm; vàng / acid) - sai số thừa polyphenol (chủ yếu Flavonoid) 61 ĐỊNH LƢỢNG OMA 8.4 Phƣơng pháp tạo phức màu, đo quang - chiết AG nƣớc nóng + NaHCO3 - oxy hóa + thủy phân (= FeCl3 + HCl) nóng  AQ - chiết AQ tự Et2O - cắn Et2O + Mg acetat 0,5% / MeOH  màu - đo quang 515 nm (mẫu trắng = MeOH) -  [anthranoid] / mẫu (thƣờng áp dụng / Đại hoàng, kết quy Rhein) 62 ĐỊNH LƢỢNG OMA 8.5 Phƣơng pháp SKLM Mục đích : Bán định lƣợng // chuẩn Nguyên tắc : mỏng, chấm đồng thể tích chuẩn (C) // thử (T) So sánh (C) (T) - diện tích vết, - cƣờng độ màu (có / khơng th’ thử) Suy [C] có mẫu thử C T 63 ĐỊNH LƢỢNG OMA 8.6 Phƣơng pháp HPLC Tin cậy, thông dụng Nguyên tắc : Trong điều kiện, chuẩn (X) (X/mẫu)  peak có thời gian lƣu [X] tỷ lệ thuận với S (diện tích peak) biết nồng độ chuẩn, từ S đo đƣợc (X) (X/mẫu)  [X]% M 64 ĐỊNH LƢỢNG OMA Phƣơng pháp HPLC XT mẫu thử M (chứa X) ST ST SC XT = XC tR phút SC chuẩn X XC 65 ĐỊNH LƢỢNG OMA 8.7 Phƣơng pháp sinh vật - Dựa tác động làm tăng nhu động ruột  làm tăng tốc độ xuất phân - Thực chuột / nhuyễn thể - Làm song song với lô chứng, lô trắng Lƣu ý :  Sự đáp ứng chuột khác (Sennosid / Phan tả diệp >> Aloin / Lơ hội)  Thực tế sử dụng 66 TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA OMA 9.1 Của nhóm 1,2 di-OH AQ Chủ yếu : chất nhuộm màu Các chất thông dụng : alizarin *, purpurin *, acid carminic, đỏ carmin acid kermesic, acid laccaic A, B, C, D acid ruberythric số : Kháng khối u (antitumor) Damnacanthal, nor-damnacanthal Morinda 67 TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA OMA 9.2 nhóm 1,8 di-OH AQ dạng AG (chủ yếu -glucosid) - không bị chuyển hóa ruột non - ruột già : bị thủy phân  AQ (dạng oxy-hóa) - tiếp tục bị khử  anthron, anthranol (có hoạt tính) - làm tăng nhu động trơn  nhuận tẩy dạng AQ : bị hấp thu ruột non  không nhuận tẩy 68 TÁC DỤNG DƢỢC LỰC CỦA OMA AQ gây kích ứng ! AQ bị hấp thu ! tính nhuận tẩy AG  AQ   dạng khử NHUẬN TẨY TÁC DỤNG CỦA OMA  nhu động trơn (ruột, bàng quang, tử cung ) tác dụng chậm (uống : sau – 10 h) : nhuận xổ tẩy phụ trợ điều trị sỏi thận (liều trung bình !) tiết qua phân, nƣớc tiểu, sữa, mồ hôi (nhuộm màu) tránh dùng lâu dài (lệ thuộc thuốc, giảm Kali-huyết) khơng dùng cho phụ nữ có thai, cho bú không dùng liều cao ngƣời có sỏi (gan mật, niệu) thận trọng : ngƣời già, trẻ nhỏ, bệnh trĩ số có tác dụng kháng nấm da (hắc lào), thông mật số có tác dụng điều hòa / kích thích miễn dịch (aK) 70 PHÂN BỐ TRONG TỰ NHIÊN a Trong côn trùng, thực vật bậc thấp : Ít b Trong thực vật bậc cao : chiếm đại đa số b1 Lớp mầm : Asphodelaceae (chi Aloe) b2 Lớp mầm : hẹp, chủ yếu : - Rubiaceae (Rubia, Morinda, Cinchona) - Fabaceae (chi Cassia) - Polygonaceae (chi Rheum, Rumex) - Rhamnaceae (chi Rhamnus) 71 CÁC DƢỢC LIỆU ĐÁNG CHÚ Ý Họ Fabaceae Họ Polygonaceae Phan tả diệp Đại hoàng Thảo minh Hà thủ ô đỏ Muồng trâu Họ Liliaceae Lơ hội Họ Rubiaceae Ba kích Nhàu 72 ... nhóm anthranoid (nhóm phẩm nhuộm, nhuận tẩy dimer) Các tính chất anthranoid Nguyên tắc chiết xuất anthranoid từ dƣợc liệu Các phƣơng pháp định tính, định lƣợng anthranoid dƣợc liệu Tác dụng sinh... lƣợng anthranoid dƣợc liệu Tác dụng sinh học – Công dụng anthranoid 08 dƣợc liệu chứa anthranoid (Cassia, Đại hồng, Lơ hội …) Khái niệm chung anthranoid - Thuộc nhóm lớn hydroxyquinon (các quinonoid)... 5.3 Thử nghiệm vi thăng hoa làm trực tiếp với bột dƣợc liệu chứa AQ tự tinh thể AQ bột dƣợc liệu R 22 TÍNH CHẤT – ĐỊNH TÍNH (OMA) 5.4 Phản ứng Bornträeger mẫu thử NaOH hay KOH loãng màu đỏ* (1,8