Nghiên cứu xác định vết một số ma túy tổng hợp nhóm kích thích thần kinh loại amphetamin và ketamin trong tóc và nước tiểu bằng sắc ký khí khối phổ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM QUỐC CHINH NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH VẾT MỘT SỐ MA TÚY TỔNG HỢP NHÓM KÍCH THÍCH THẦN KINH LOẠI AMPHETAMIN VÀ KETAMIN TRONG TĨC VÀ NƢỚC TIỂU BẰNG SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM QUỐC CHINH NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH VẾT MỘT SỐ MA TÚY TỔNG HỢP NHĨM KÍCH THÍCH THẦN KINH LOẠI AMPHETAMIN VÀ KETAMIN TRONG TĨC VÀ NƢỚC TIỂU BẰNG SẮC KÝ KHÍ KHỐI PHỔ LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƢỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 62720410 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Việt Hùng PGS.TS Nguyễn Tiến Vững HÀ NỘI, NĂM 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi dƣới hƣớng dẫn PGS.TS Trần Việt Hùng PGS.TS Nguyễn Tiến Vững Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Phạm Quốc Chinh i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, tơi nhận đƣợc giúp đỡ tận tình quý báu thầy cô giáo, quan, đồng nghiệp, bạn bè gia đình Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: PGS.TS Trần Việt Hùng, Viện trƣởng Viện Kiểm nghiệm thuốc Thành phố Hồ Chí Minh PGS.TS Nguyễn Tiến Vững, ngun Phó Viện trƣởng Viện Pháp y Quốc gia, hai ngƣời thầy tận tình hƣớng dẫn, định hƣớng, giúp đỡ cho tơi kiến thức q báu để tơi hồn thành luận án Ban Lãnh đạo Viện Pháp y Quốc gia ủng hộ, tạo điều kiện thuận lợi cho tham gia học tập hoàn thành luận án Ban giám hiệu, Phịng Sau đại học, Bộ mơn Hố phân tích – Độc chất trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu Trƣờng GS.TS Thái Nguyễn Hùng Thu, nguyên Phó hiệu trƣởng Trƣờng ĐH Dƣợc Hà Nội PGS.TS Phạm Thanh Hà, Phó trƣởng Bộ mơn Hóa phân tích – Độc chất, Trƣờng ĐH Dƣợc Hà Nội, ngƣời thầy động viên đóng góp ý kiến, dẫn tơi hồn thiện luận án Các anh chị em Khoa Hóa pháp – Viện Pháp y Quốc gia động viên, giúp đỡ chia với khó khăn cơng việc Các bác sĩ, kỹ thuật viên Bệnh viện Tâm thần Hà Nội hỗ trợ lấy mẫu giám định Và cuối cùng, xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè quan tâm động viên tơi q trình học tập thực luận án ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU vi DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH x ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 SƠ LƢỢC VỀ MA TÚY 1.1.1 Khái niệm ma túy 1.1.2 Phân loại ma túy 1.1.3 Tình hình sử dụng ma túy 1.1.4 Nhóm ma túy đƣợc nghiên cứu luận án 12 1.2 THÀNH PHẦN CẤU TẠO VÀ LIÊN KẾT THUỐC TRONG TÓC 26 1.2.1 Giới thiệu chung 26 1.2.2 Giải phẫu chức sinh lý tóc 27 1.3 PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH MA TÚY NHĨM ATS VÀ KETAMIN 32 1.3.1 Phƣơng pháp xử lý mẫu tóc 32 1.3.2 Phƣơng pháp chiết xuất 33 1.3.3 Kỹ thuật dẫn xuất hóa 37 1.3.4 Một số phƣơng pháp thƣờng dùng phân tích ma túy 38 1.3.5 Tình hình nghiên cứu phân tích ma túy Việt nam 44 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 46 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 46 iii 2.1.1 Ma túy nhóm ATS ketamin 46 2.1.2 Đối tƣợng phân tích 48 2.2 THIẾT BỊ, DUNG MƠI, HĨA CHẤT 48 2.2.1 Dung mơi, hóa chất 48 2.2.2 Chất chuẩn 48 2.2.3 Thiết bị, dụng cụ phân tích 50 2.3 NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 51 2.3.1 Nghiên cứu thiết lập chƣơng trình GC-MS điều kiện dẫn xuất 51 2.3.2 Nghiên cứu phƣơng pháp xử lý chiết xuất 53 2.3.3 Thẩm định phƣơng pháp GC-MS 57 2.3.4 Phân tích ATS ketamin tóc nƣớc tiểu ngƣời nghi ngờ sử dụng ma túy GC-MS 59 2.3.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 60 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 61 3.1 NGHIÊN CỨU PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐỒNG THỜI MA TÚY NHĨM ATS VÀ KETAMIN 61 3.1.1 Xây dựng điều kiện sắc ký khí khối phổ 61 3.1.2 Khảo sát phổ chất ma túy nhóm ATS ketamin 62 3.1.3 Tối ƣu hóa dẫn xuất 71 3.2 NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ, CHIẾT XUẤT CÁC CHẤT MA TÚY NHĨM ATS VÀ KETAMIN TỪ TÓC VÀ NƢỚC TIỂU 75 3.2.1 Nghiên cứu quy trình xử lý chiết mẫu 75 3.2.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng pH độ thu hồi ATS ketamin 82 3.2.3 Đánh giá độ thu hồi phƣơng pháp 85 3.2.4 Đánh giá ảnh hƣởng mẫu 88 3.2.5 Tổng hợp quy tình xử lý, chiết xuất phân tích chất ATS ketamin GC-MS 92 iv 3.3 THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP VÀ ỨNG DỤNG PHÂN TÍCH ATS VÀ KETAMIN TRONG TÓC VÀ NƢỚC TIỂU BẰNG GC-MS 96 3.3.1 Thẩm định phƣơng pháp GC-MS định lƣợng chất ma túy nhóm ATS ketamin tóc nƣớc tiểu 96 3.3.2 Áp dụng phân tích vết số ma túy nhóm ATS ketamin tóc nƣớc tiểu 109 Chƣơng BÀN LUẬN 122 4.1 MẪU NGHIÊN CỨU VÀ ĐIỀU KIỆN DẪN XUẤT 122 4.1.1 Lựa chọn đối tƣợng nghiên cứu 122 4.1.2 Về khảo sát dẫn xuất 124 4.2 PHƢƠNG PHÁP XỬ LÝ VÀ CHIẾT XUẤT MẪU 128 4.3 THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ATS VÀ KETAMIN TRONG TĨC VÀ NƢỚC TIỂU BẰNG GC-MS 135 4.4 PHÂN TÍCH ATS VÀ KETAMIN TRONG TÓC VÀ NƢỚC TIỂU140 4.5 ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI 144 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU Chữ viết tắt Giải thích AM Amphetamin ATS Các chất kích thích thần kinh (Amphetamine Type Stimulants) CDFA Chlorodifluoroacetic anhydride CE Điện di mao quản (Capillary electrophoresis) CV Hệ số biến thiên (Coefficient of Variation) DOB 4-Bromo-2,5-dimethoxy amphetamin EI Va chạm điện tử (Electron impact) EOF Dòng điện thẩm (Electroosmotic flow) EtOAc Ethyl acetat GC Sắc ký khí (Gas chromatography) GC-MS Sắc ký khí khối phổ (Gas chromatography - Mass spectrometry) HFBA Heptafluorobutyric anhydride HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liqid Chromatography) HQC Mẫu kiểm tra hàm lƣợng cao (High Quality Control) IS Chuẩn nội (Internal Standard) KET Ketamin KET – d4 Ketamin – d4 LC-MS Sắc ký lỏng khối phổ (Liquid Chromatography -Mass spectrometry) LD50 Liều gây chết 50% động vật thí nghiệm (Lethal Dose) vi dạng amphetamin LLE Chiết lỏng lỏng (Liquid–liquid extraction) LOD Giới hạn phát (Limit of detection) LOQ Giới hạn định lƣợng (Limit of quantification) LQC Mẫu kiểm tra hàm lƣợng thấp (Low Quality Control) MA Methamphetamin MA-d5 Methamphetamin – d5 MBTFA n-methylbistrifluoroacetamid MDA 3,4-methylendioxyamphetamin MDEA 3,4- methylendioxyethylamphetamin MDMA 3,4-methylendioxymethamphetamin MeOH Methanol MQC Mẫu kiểm tra hàm lƣợng trung bình (Medium quality control) MS Khối phổ (Mass Spectrometry) NKT Norketamin PFB Pentafluorobenzyl PFPA Pentafluoropropionic anhydrid PFPA/PFPOH Pentafluoropropionic anhydrid/pentafluoropropanol PMA Para - Methoxy amphetamin RSD Độ lệch chuẩn tƣơng đối (Relative Standard Deviation) SPE Chiết pha rắn (solid phase extraction) TFAA Trifluoroacetic anhydrid UNODC Cơ quan phòng chống ma túy tội phạm Liên Hiệp Quốc (United Nations Office on Drugs and Crime) vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Công thức số ATS 13 Bảng 1.2 Một số ứng dụng kỹ thuật phân tích ATS ketamin GC-MS 43 Bảng 2.1 Các chất ma túy dùng nghiên cứu 46 Bảng 2.2 Thông tin chất chuẩn sử dụng nghiên cứu 49 Bảng 3.1 Mảnh ion mẹ ion thành phần chất nghiên cứu 67 Bảng 3.2 Khảo sát chƣơng trình nhiệt độ 69 Bảng 3.3 Diện tích píc chất phân tích với tỉ lệ HFBA/EtOAc 72 Bảng 3.4 Thời gian tạo dẫn xuất ATS ketamin với HFBA 74 Bảng 3.5 Độ thu hồi chất phân tích tóc xử lý kiềm chiết phƣơng pháp 77 Bảng 3.6 Độ thu hồi chất phân tích tóc xử lý acid chiết phƣơng pháp 78 Bảng 3.7 Độ thu hồi chất phân tích tóc xử lý MeOH chứa 1% HCl chiết phƣơng pháp 79 Bảng 3.8 Độ thu hồi chất phân tích nƣớc tiểu chiết phƣơng pháp 80 Bảng 3.9 Độ thu hồi chất phân tích tóc pH khác 83 Bảng 3.10 Độ thu hồi chất phân tích nƣớc tiểu pH khác 84 Bảng 3.11 Độ thu hồi chất phân tích tóc 86 Bảng 3.12 Độ thu hồi chất phân tích nƣớc tiểu 87 Bảng 3.13 Ảnh hƣởng mẫu tóc đến chất ATS Ketamin 89 Bảng 3.14 Ảnh hƣởng mẫu nƣớc tiểu đến chất ATS Ketamin 90 viii ... Control) MA Methamphetamin MA- d5 Methamphetamin – d5 MBTFA n-methylbistrifluoroacetamid MDA 3,4-methylendioxyamphetamin MDEA 3,4- methylendioxyethylamphetamin MDMA 3,4-methylendioxymethamphetamin... nhóm ATS ketamin tóc nước tiểu số người nghi ngờ sử dụng ma túy Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 SƠ LƢỢC VỀ MA TÚY 1.1.1 Khái niệm ma túy Cho đến nay, giới chƣa có khái niệm thống ? ?ma túy‖ hay ―chất ma túy‖... Standard) KET Ketamin KET – d4 Ketamin – d4 LC-MS Sắc ký lỏng khối phổ (Liquid Chromatography -Mass spectrometry) LD50 Liều gây chết 50% động vật thí nghiệm (Lethal Dose) vi dạng amphetamin LLE