THÍ NGHIỆM KIỂM CHỨNG HIỆU LỰC THANH TRÙNG CỦA CHẾ PHẨM FORMYCINE GOLD PREMIX TRÊN THỨC ĂN HỖN HỢP HEO CON TẬP ĂN VÀ THỨC ĂN HỖN HỢP HEO NÁI NUÔI CON

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP THÍ NGHIỆM KIỂM CHỨNG HIỆU LỰC THANH TRÙNG CỦA CHẾ PHẨM FORMYCINE GOLD PREMIX TRÊN THỨC ĂN HỖN HỢP HEO CON TẬP ĂN VÀ THỨC ĂN HỖN HỢP HEO NÁI NI CON Sinh viên thực hiện: HỒNG THÙY DƯƠNG Ngành : Thú Y Lớp : Thú Y 29 Niên khóa : 2003 - 2008 Tháng 09/2008 THÍ NGHIỆM KIỂM CHỨNG HIỆU LỰC THANH TRÙNG CỦA CHẾ PHẨM FORMYCINE GOLD PREMIX TRÊN THỨC ĂN HỖN HỢP HEO CON TẬP ĂN VÀ THỨC ĂN HỖN HỢP HEO NÁI NUÔI CON Tác giả HỒNG THÙY DƯƠNG Khố luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Bác sỹ ngành Thú y Giáo viên hướng dẫn: TS DƯƠNG DUY ĐỒNG Tháng 09/2008 i LỜI CẢM TẠ Con xin biết ơn sâu sắc đến công ơn sinh thành dưỡng dục bố mẹ, hy sinh suốt đời cho có ngày hôm Chân thành cảm tạ: TS Dương Duy Đồng hết lòng hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt thời gian học thực tập hoàn thành luận văn tốt nghiệp Xin chân thành cảm ơn: - Ban Giám Hiệu Trường Đại Học Nông Lâm TP HCM - Ban chủ nhiệm khoa Chăn Nuôi – Thú Y - Bộ mơn Dinh Dưỡng Gia Súc - Tồn thể q thầy cô trường Đại học Nông Lâm Đã truyền đạt kiến thức tạo điều kiện cho trình học thực tập tốt nghiệp - Cơng ty Berli Jucker Public Company - Ban giám đốc anh chị cơng ty thức ăn chăn ni Hồng Long - Th.S Nguyễn Thị Thu Năm, BSTY Nguyễn Thị Thanh Trúc, thầy cô anh chị Bệnh viện Thú y trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Đã tận tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình thực tập tốt nghiệp Cảm ơn bạn Nguyễn Thanh Tồn, bạn Tơ Thị Thùy Trang, bạn bè tập thể lớp Thú y khóa 29 chung sức giúp đỡ tơi suốt q trình học thực tập tốt nghiệp ii TĨM TẮT LUẬN VĂN Đề tài “Thí nghiệm kiểm chứng hiệu lực trùng chế phẩm Formycine Gold Premix thức ăn hỗn hợp heo tập ăn thức ăn hỗn hợp heo nái nuôi con” tiến hành từ 3/2008 đến 7/2008 nhà máy thức ăn chăn ni Bình Dương phòng vi sinh - Bệnh viện Thú y trường Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh Thí nghiệm thực loại thức ăn:  Thức ăn hỗn hợp dành cho heo tập ăn (dạng bột dạng viên)  Thức ăn hỗn hợp dành cho heo nái nuôi (dạng viên)  Mỗi loại thức ăn chia làm lô:  Lô đối chứng : không bổ sung chế phẩm Formycine Gold Premix (FGP)  Lô thí nghiệm : bổ sung 1kg FGP/tấn TĂ  Lơ thí nghiệm : bổ sung 2kg FGP/tấn TĂ Kết thí nghiệm cho thấy:  Số lượng vi khuẩn E coli (MPN/g) - Trên thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn (dạng bột dạng viên), lơ đối chứng lơ thí nghiệm khơng có vi khuẩn E coli - FGP liều kg FGP/tấn TĂ kg FGP/tấn TĂ hạn chế xâm nhiễm vi khuẩn E coli vào thức ăn heo nái nuôi thời gian bảo quản 35 ngày tốt so với lô đối chứng (2 x 104 MPN/g) - Khi bổ sung 106 vi khuẩn E coli/1 g thức ăn để kiểm tra khả trùng FGP thức ăn bị nhiễm khuẩn nồng độ cao chưa thấy rõ tác dụng diệt khuẩn FGP lô TN lô TN  Số lượng vi khuẩn Salmonella spp (tế bào/1 g TĂ) Cả lơ đối chứng lơ thí nghiệm khơng có Salmonella spp, chưa kết luận tác dụng tác dụng trùng FGP  Số lượng vi khuẩn Cl perfringens (tế bào/1 g TĂ) - Trên thức ăn heo tập ăn dạng viên, sau thời gian thí nghiệm 35 ngày, số lượng bào tử Cl perfringens lô TN (1 x 101 tế bào/g) thấp lô TN (2 x 101 tế bào/g) lô đối chứng (3 x 101 tế bào/g) iii - Trên thức ăn heo tập ăn dạng bột, số lượng vi khuẩn Cl perfringens lô TN (1 x 101 tế bào/g) lô TN (1 x 101 tế bào/g) thấp lô đối chứng (2 x 101 tế bào/g)  Số lượng nấm mốc (tế bào/1 g TĂ) - Trên thức ăn hỗn hợp dạng viên dành cho heo tập ăn, từ sản xuất đến 21 ngày bảo quản, FGP liều kg FGP/tấn TĂ kg FGP/tấn TĂ cho kết tốt lô đối chứng Sau 21 ngày, FGP không diệt hết nấm mốc bào tử nấm mốc Tuy nhiên, sau thời gian thí nghiệm 35 ngày, số lượng nấm mốc lô TN (10 tế bào/g) thấp lô TN (30 tế bào/g) lô đối chứng (30 tế bào/g) - Trên thức ăn hỗn hợp dạng viên dành cho heo tập ăn, số lượng nấm mốc lô TN (110 tế bào/g) lô TN (110 tế bào/g) thấp lô đối chứng (150 tế bào/g) - Trên thức ăn hỗn hợp dành cho heo nái nuôi con, bổ sung FGP liều có tác dụng hạn chế xâm nhiễm nấm mốc từ mơi trường ngồi vào thức ăn thời gian ngày sau sản xuất Sau thời gian thí nghiệm 35 ngày, FGP diệt nấm mốc bào tử nấm mốc thức ăn bị nhiễm với số lượng thấp Như vậy, việc bổ sung chế phẩm FGP vào thức ăn mang lại hiệu việc giảm số lượng hạn chế xâm nhiễm vi khuẩn E coli, Cl perfringens nấm mốc từ môi trường vào thức ăn Bổ sung FGP liều kg FGP/tấn TĂ có tác dụng tốt liều kg FGP/tấn TĂ iv MỤC LỤC Trang tựa… i Lời cảm tạ ii Tóm tắt luận văn iii Mục lục v Các từ viết tắt ix Danh sách bảng x Danh sách hình xi Danh sách sơ đồ xii Chương MỞ ĐẦU .1 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC ĐÍCH VÀ YÊU CẦU .1 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu .2 Chương TỔNG QUAN 2.1 SƠ LƯỢC VỀ CHẾ PHẨM FORMYCINE GOLD PREMIX (FGP) 2.1.1 Thành phần 2.1.1.1 Formaldehyde 2.1.1.2 Acid propionic 2.1.2 Công dụng Formycine Gold Premix (FGP) .6 2.1.3 Cơ chế tác động Formycine Gold Premix (FGP) 2.1.4 Đường cấp liều dùng .6 2.2 SƠ LƯỢC VỀ VI KHUẨN E COLI 2.2.1 Đại cương 2.2.2 Tính chất vi sinh vật học 2.2.2.1 Hình thái nhuộm màu .7 2.2.2.2 Đặc điểm nuôi cấy .7 2.2.2.3 Đặc tính sinh hóa .8 2.2.3 Sức đề kháng 2.2.4 Cấu trúc kháng nguyên độc tố .8 2.2.4.1 Cấu trúc kháng nguyên v 2.2.4.2 Độc tố .9 2.2.5 Tính chất gây bệnh 10 2.2.6 Những bệnh vi khuẩn E coli gây heo 10 2.2.6.1 Bệnh phân trắng heo 10 2.2.6.2 Bệnh tiêu chảy heo E coli 11 2.2.6.3 Bệnh phù đầu heo 11 2.3 SƠ LƯỢC VỀ VI KHUẨN SALMONELLA 12 2.3.1 Đại cương 12 2.3.2 Tính chất vi sinh vật học 12 2.3.2.1 Hình thái nhuộm màu 12 2.3.2.2 Đặc điểm nuôi cấy 12 2.3.2.3 Đặc tính sinh hóa .13 2.3.3 Sức đề kháng 13 2.3.4 Cấu trúc kháng nguyên độc tố .13 2.3.4.1 Cấu trúc kháng nguyên 13 2.3.4.2 Độc tố .14 2.3.5 Tính chất gây bệnh 14 2.3.6 Bệnh Salmonella spp gây heo 14 2.4 SƠ LƯỢC VỀ VI KHUẨN CLOSTRIDIUM PERFRINGENS 15 2.4.1 Đại cương 15 2.4.2 Tính chất vi sinh vật học 15 2.4.2.1 Hình dạng nhuộm màu 15 2.4.2.2 Đặc điểm nuôi cấy 16 2.4.2.3 Đặc tính sinh hóa .16 2.4.3 Sức đề kháng 16 2.4.4 Độc tố .16 2.4.5 Các bệnh Clostridium perfringens gây heo .17 2.5 NẤM MỐC .17 2.5.1 Đại cương 17 2.5.2 Hình thái 18 2.5.3 Cấu tạo 18 vi 2.5.4 Dinh dưỡng tăng trưởng nấm mốc 18 2.5.5 Hình thức sinh sản nấm mốc 19 2.5.6 Nấm mốc mycotoxin 19 2.5.6.1 Một số loại nấm mốc sinh mycotoxin 19 2.5.6.2 Tác hại mycotoxin 21 2.5.6.3 Giới hạn mycotoxin cho loài .22 2.5.6.4 Tình hình nhiễm độc tố nấm mốc thức ăn nguyên liệu .22 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH .23 3.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM THỰC HIỆN 23 3.1.1 Thời gian 23 3.1.2 Địa điểm 23 3.2 PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 23 3.2.1 Dụng cụ vật liệu để tiến hành thí nghiệm 23 3.2.2 Đối tượng thí nghiệm .24 3.2.3 Bố trí thí nghiệm .24 3.2.4 Cách thức bổ sung chế phẩm FGP vào thức ăn 25 3.2.5 Điều kiện thí nghiệm 26 3.2.6 Phương pháp lấy mẫu .28 3.3 CÁC CHỈ TIÊU KHẢO SÁT 28 3.3.1 Số lượng vi khuẩn E coli g thức ăn lô đối chứng lô thí nghiệm .29 3.3.2 Số lượng vi khuẩn Salmonella spp g thức ăn lô đối chứng lơ thí nghiệm 32 3.3.3 Số lượng vi khuẩn Clostridium perfringens g thức ăn lơ đối chứng lơ thí nghiệm 33 3.3.4 Số lượng nấm mốc g thức ăn lô đối chứng lơ thí nghiệm 35 3.3.5 Số lượng vi khuẩn E coli g thức ăn lơ đối chứng lơ thí nghiệm sau gây nhiễm vi khuẩn E coli 37 3.4 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU .37 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 4.1 SỐ LƯỢNG VI KHUẨN E COLI 38 vii 4.1.1 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn 38 4.1.2 Thức ăn hỗn hợp cho heo nái nuôi 39 4.1.3 Số lượng vi khuẩn E coli thức ăn sau gây nhiễm thực nghiệm40 4.2 SỐ LƯỢNG VI KHUẨN SALMONELLA SPP 42 4.3 SỐ LƯỢNG VI KHUẨN CLOSTRIDIUM PERFRINGENS 43 4.3.1 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng viên .43 4.3.2 Thức ăn hỗn hợp cho heo nái nuôi 44 4.4 SỐ LƯỢNG NẤM MỐC 46 4.4.1 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng viên .46 4.4.2 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng bột .47 4.4.3 Thức ăn hỗn hợp cho heo nái nuôi 48 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50 5.1 KẾT LUẬN 50 5.2 ĐỀ NGHỊ 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO .52 PHỤ LỤC 54 viii CÁC TỪ VIẾT TẮT  FGP : Formycine Gold Premix  TĂ : thức ăn  ctv : cộng tác viên  ppm : part per million  ppb : part per billion  h :  dd : dung dịch  NA : Nutrition Agar  BGA : Brilliant Green Agar  LTB : Lauryl Tryptose Broth  EC : Enrichment coli  EMB : Eosin Methyl Blue  TSC : Tryptose Sulfit Cycloseryl Agar  PDA : Potato Dextrose Agar  TSI : Triple Sugar Iron  LDC : Lysinedecarboxylase  SLT : Shiga like toxin  MPN : Most Probable Number  TN1 : Thí nghiệm  TN2 : Thí nghiệm ix 4.4 SỐ LƯỢNG NẤM MỐC 4.4.1 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng viên Bảng 4.8 Số lượng nấm mốc g thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng viên Ngày lấy mẫu (sau Số lượng nấm mốc (tế bào/g) Số lượng mẫu Lô đối chứng 0 0 14 20 0 21 40 0 28 40 40 10 35 30 30 10 sản xuất) Lô TN Lô TN Qua bảng 4.8 nhận thấy:  Ở thời điểm sau sản xuất ngày sau sản xuất, thức ăn bảo quản nhà máy, lơ đối chứng lơ thí nghiệm khơng có nấm mốc, nhiệt độ cao (65 – 85oC) trình ép viên độ ẩm thức ăn sau ép viên ≤ 14% điều kiện thuận lợi cho nấm mốc phát triển  Ở thời điểm 14, 21 ngày sau sản xuất, thức ăn bảo quản trại heo, lô đối chứng có xuất nấm mốc, lơ thí nghiệm chưa nhiễm nấm mốc Kết vị trí bảo quản thức ăn trại heo có độ ẩm cao, thức ăn chứa nguyên liệu tấm, bắp, đậu nành mơi trường thuận lợi cho nấm mốc phát triển.Vì vậy, thức ăn lô đối chứng bị nhiễm nấm mốc từ mơi trường vào thức ăn lơ thí nghiệm có bổ sung FGP nên không bị nhiễm nấm mốc  Ở thời điểm 28, 35 ngày sau sản xuất, thức ăn lô bị nhiễm nấm mốc Kết cho thấy FGP có tác dụng thời gian bảo quản khoảng 21 ngày Sau thời gian này, thức ăn bắt đầu nhiễm nấm mốc, heo ăn thức ăn vào dễ bị bệnh Số lượng nấm mốc lơ thí nghiệm có bổ sung kg FGP/tấn TĂ (40; 30 tế bào/g) cao lô thí nghiệm có bổ sung kg FGP/tấn TĂ (10; 10 tế bào/g) 46 Như sử dụng FGP liều kg/tấn TĂ cho kết tốt trình bảo quản thức ăn 4.4.2 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng bột Bảng 4.9 Số lượng nấm mốc g thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng bột Ngày lấy mẫu (sau sản xuất) Số lượng nấm mốc (tế bào/g) Số lượng mẫu Lô đối chứng Lô TN Lô TN 150 110 110 28 Qua bảng 4.9, nhận thấy: Ở thức ăn dạng bột, số lượng nấm mốc lô đối chứng 150 tế bào/g, lơ thí nghiệm 110 tế bào/g, lơ thí nghiệm 110 tế bào/g cao so với số lượng nấm mốc thức ăn dạng viên Kết thức ăn dạng bột khơng qua q trình ép viên nên khơng xử lý nhiệt độ ẩm cao thức ăn viên điều kiện thuận lợi cho nấm mốc phát triển nhiều Tuy nhiên, số lượng nấm mốc lơ thức ăn có bổ sung FGP thấp lô đối chứng, điều cho thấy môi trường thức ăn bị nhiễm nấm mốc với số lượng lớn, FGP có tác dụng hạn chế phát triển nấm mốc 47 4.4.3 Thức ăn hỗn hợp cho heo nái nuôi Bảng 4.10 Số lượng nấm mốc 1g thức ăn hỗn hợp cho heo nái nuôi dạng viên Số lượng nấm mốc (tế bào/g) Ngày lấy mẫu Số lượng (sau sản xuất) mẫu Lô đối chứng Lô TN 1 0 1 0 0 10 21 0 10 28 10 10 35 0 Lô TN Qua bảng 4.10, nhận thấy :  Ở thời điểm 0, 1, ngày sau sản xuất, thức ăn không bị nhiễm nấm mốc  Thời điểm 3, 21, 28 ngày sau sản xuất, lơ thí nghiệm bắt đầu nhiễm nấm mốc Tuy nhiên, thời điểm 35 ngày sau sản xuất, thức ăn lơ thí nghiệm khơng có nấm mốc Kết cho thấy thời gian bảo quản 35 ngày, FGP có khả diệt bào tử nấm mốc, nấm mốc thức ăn thức ăn bị nhiễm nấm mốc với số lượng thấp 48 Hình 4.5 Nấm mốc mọc mơi trường PDA Hình 4.6 Sợi nấm nhuộm lactophenol kính hiển vi (độ phóng đại 1000 lần) 49 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Qua thời gian thí nghiệm kết thu từ tiêu theo dõi, rút kết luận sau:  Số lượng vi khuẩn E coli (MPN/g) - Trên thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn (dạng bột dạng viên), lơ đối chứng lơ thí nghiệm khơng có vi khuẩn E coli - FGP liều kg FGP/tấn TĂ kg FGP/tấn TĂ hạn chế xâm nhiễm vi khuẩn E coli vào thức ăn heo nái nuôi thời gian bảo quản 35 ngày tốt so với lô đối chứng (2 x 104 MPN/g) - Khi bổ sung 106 vi khuẩn E coli/1 g thức ăn để kiểm tra khả trùng FGP thức ăn bị nhiễm khuẩn nồng độ cao chưa thấy rõ tác dụng diệt khuẩn FGP lô TN lô TN  Số lượng vi khuẩn Salmonella spp (tế bào/1 g TĂ) Cả lơ đối chứng lơ thí nghiệm khơng có Salmonella spp, chưa kết luận tác dụng tác dụng trùng FGP  Số lượng vi khuẩn Cl perfringens (tế bào/1 g TĂ) - Trên thức ăn heo tập ăn dạng viên, sau thời gian thí nghiệm 35 ngày, số lượng bào tử Cl perfringens lô TN (1 x 101 tế bào/g) thấp lô TN (2 x 101 tế bào/g) lô đối chứng (3 x 101 tế bào/g) - Trên thức ăn heo tập ăn dạng bột, số lượng vi khuẩn Cl perfringens lô TN (1 x 101 tế bào/g) lô TN (1 x 101 tế bào/g) thấp lô đối chứng (2 x 101 tế bào/g)  Số lượng nấm mốc (tế bào/1 g TĂ) - Trên thức ăn hỗn hợp dạng viên dành cho heo tập ăn, từ sản xuất đến 21 ngày bảo quản, FGP liều kg FGP/tấn TĂ kg FGP/tấn TĂ cho kết tốt lô đối chứng Sau 21 ngày, FGP không diệt hết nấm mốc bào tử nấm 50 mốc Tuy nhiên, sau thời gian thí nghiệm 35 ngày, số lượng nấm mốc lô TN (10 tế bào/g) thấp lô TN (30 tế bào/g) lô đối chứng (30 tế bào/g) - Trên thức ăn hỗn hợp dạng viên dành cho heo tập ăn, số lượng nấm mốc lô TN (110 tế bào/g) lô TN (110 tế bào/g) thấp lô đối chứng (150 tế bào/g) - Trên thức ăn hỗn hợp dành cho heo nái nuôi con, bổ sung FGP liều có tác dụng hạn chế xâm nhiễm nấm mốc từ mơi trường ngồi vào thức ăn thời gian ngày sau sản xuất Sau thời gian thí nghiệm 35 ngày, FGP diệt nấm mốc bào tử nấm mốc thức ăn bị nhiễm với số lượng thấp Như vậy, việc bổ sung chế phẩm FGP vào thức ăn mang lại hiệu việc giảm số lượng hạn chế xâm nhiễm vi khuẩn E coli, Cl perfringens nấm mốc từ môi trường vào thức ăn Bổ sung FGP liều kg FGP/tấn TĂ có tác dụng tốt liều kg FGP/tấn TĂ 5.2 ĐỀ NGHỊ Thí nghiệm tiến hành thức ăn hỗn hợp có bổ sung kháng sinh, chất chống mốc,… hiệu diệt khuẩn chế phẩm FGP chưa rõ, nên lập lại thí nghiệm trên thức ăn hỗn hợp hồn tồn khơng có chất diệt khuẩn để thấy rõ tác dụng FGP 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tiếng Việt Tô Minh Châu, Trần Thị Bích Liên, 1999 Giáo trình vi khuẩn nấm gây bệnh Thú y Khoa Chăn Nuôi - Thú Y Tủ sách trường Đại Học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Tơ Minh Châu, 2005 Giáo trình kiểm tra vệ sinh chất lượng sản phẩm Tủ sách trường Đại học mở bán cơng TP Hồ Chí Minh Bùi Xuân Đồng, 2004 Nguyên lý phòng chống nấm mốc mycotoxin, Trang 5-40 Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội Dương Thanh Liêm, Bùi Huy Như Phúc Dương Duy Đồng, 2002 Thức ăn dinh dưỡng động vật Nhà xuất nông nghiệp Nguyễn Như Pho, 2007 Một số bệnh thường gặp heo Nhà xuất nông nghiệp Nguyễn Trần Phương Quyên, 2007 Đánh giá hiệu số chất hấp phụ độc tố nấm mốc thức ăn hỗn hợp cho heo thịt Luận văn tốt nghiệp Khoa Chăn Nuôi - Thú Y Tủ sách trường Đại Học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Phạm Thế Sơn, Phạm Khắc Hiếu, 2008 Tác dụng kháng khuẩn chế phẩm EMTK21 với vi khuẩn E coli, Salmonella, Clostridium perfringens (in vitro) khả phòng trị tiêu chảy EM - TK21 heo – 90 ngày tuổi Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y - tập XV - Số 1-2008 Lê Văn Tạo, 2006 Bệnh vi khuẩn gây heo Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y - tập XIII - Số 3-2006 Nguyễn Ngọc Tuân, 2002 Vệ sinh thịt, Trang 139 Nhà xuất nông nghiệp 10 Tiêu chuẩn, quy trình ngành thú y, 2006, Trang 371- 404 Nhà xuất nơng nghiệp Tập  Tiếng nước ngồi Chris Kamel, 2007 The role of feed additives in biosecurity Feed business Asia/ Nov/Dec 2007 Tài liệu Formycine Gold Premix (do Berli Jucker Public Company cung cấp) 52  Trang web http://vi.wikipedia.org/wiki/Formaldehyde Truy cập ngày 15-07-2008 http://greenvietnam.wordpress.com/2008/05/03/formaldehyde/, Truy cập ngày 1507-2008 http://vi.wikipedia.org/wiki/Ax%C3%ADt_pr%C3%B4pionic Truy cập ngày 1507-2008 http://www.foodpoisonblog.com/2007/05/articles/food-poisoning-watch/e-coliissues/ Truy cập ngày 12/8/2008 http://homepages.uel.ac.uk/u0220158/ Truy cập ngày 20-7-2008 http://www.martinrotker.com/bacteria.htm Truy cập ngày 29-7-2008 http://oregonstate.edu/research/1old/News/04maynews.html Truy cập ngày 29-72008 http://www.fimm.nl/lef.htm Truy cập ngày 31-7-2008 http://www.britsattheirbest.com/ingenious/ii_penicillin_miracle.htm ngày 31-7-2008 Truy cập 10 http://www.botany.utoronto.ca/researchlabs/mallochlab/Malloch/Moulds/Fusarium html Truy cập ngày 31-7-2008 53 PHỤ LỤC Thành phần thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn Nguyên liệu Tỉ lệ (%) Tấm 9,5 Bắp 35,1 Đậu nành 24,1 Bột cá 60% 5,0 Bột huyết 1,0 Bột sữa 10,0 Muối 0,3 Bột đá 2,0 DCP 1,0 Các chất bổ sung khác 2,0 Thức ăn hỗn hợp cho heo nái ni Ngun liệu Tỉ lệ (%) Bắp 11,50 Mì lát 19,50 Cám gạo 19,50 Cám trích ly 8,45 Cám nghiền mịn 3,55 Cám mì 11,30 Bã cải 4,46 Bã cọ 4,97 Cám dừa 4,85 Bột thịt 2,58 Đầu cá xay nhuyễn 2,29 Bột đá 2,48 Các chất bổ sung khác 4,57 54 Các tiêu đánh giá mức độ vệ sinh độc hại thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn sau cai sữa đến 15 kg STT Các tiêu Sâu, mọt, bọ (số con) Vi khuẩn, nấm men, nấm mốc u cầu Khơng có 1kg - Tổng số vi khuẩn (không lớn hơn) 105 khuẩn lạc/g - Tổng số nấm mốc (không lớn hơn) 104 khuẩn lạc/g - E coli Khơng có 1g thức ăn - Salmonella Khơng có 1g thức ăn Hàm lượng aflatoxin tổng số (ppb) (không lớn 30 hơn) Hormon chất tổng hợp hố học khác có Khơng phép hoạt tính tương tự hormon Các kim loại nặng (không lớn hơn) - Thuỷ ngân (mg/kg) (không lớn hơn) 0,1 - Acsen (mg/kg) (không lớn hơn) 2,0 - Cadimi (mg/kg) (khơng lớn hơn) 0,5 - Chì (mg/kg) (khơng lớn hơn) 5,0 Các chất độc hại khác Không phép Kháng sinh Theo quy định hành (Nguồn: Tiêu chuẩn quy trình ngành thú y, 2006) 55 Các tiêu vệ sinh thức ăn hỗn hợp hoàn chỉnh cho heo heo đực hậu bị, heo nái chửa, nái nuôi STT Các tiêu Yêu cầu Sâu, mọt, bọ (số con) Khơng có 1kg Tổng số vi khuẩn hiếu khí Theo quy định hành - E coli Khơng có 1g thức ăn - Salmonella Khơng có 25g thức ăn Hàm lượng aflatoxin tổng số (ppb) (không lớn 100 hơn) Hormon chất tổng hợp hoá học khác có Khơng phép hoạt tính tương tự hormon Các kim loại nặng (không lớn hơn) - Thuỷ ngân (mg/kg) (không lớn hơn) 0,1 - Acsen (mg/kg) (không lớn hơn) 2,0 - Cadimi (mg/kg) (không lớn hơn) 0,5 - Chì (mg/kg) (khơng lớn hơn) 5,0 Các chất độc hại khác Theo quy định hành Kháng sinh Theo quy định hành (Nguồn: Tiêu chuẩn quy trình ngành thú y, 2006) 56 MƠI TRƯỜNG DÙNG TRONG KIỂM NGHIỆM VI SINH VẬT  Nutrient Agar (NA) Cao thịt :5g Pepton bột : 10 g NaCl tinh :5g Nước cất : lít Agar : 15 - 20 g pH : 7,4 - 7,6 Hấp diệt khuẩn 115oC/15-20 phút  Lauryl Tryptose Broth (LTB) Tryptose : 20 g Lactose :5g K2HPO4 : 2,75 g KH2PO4 : 2,75 g NaCl tinh :5g Sodium lauryl sulfate : 0,1 g Nước cất : lít pH : 6,8 ±0,2 Hấp diệt khuẩn 115oC/15-20 phút  Enrichment coli broth (EC) Tryptose :2g Bile salt : 1,5 g K2HPO4 :4g KH2PO4 : 1,5g NaCl tinh :5g Sodium lauryl sulfate : 0,1 g Nước cất : lít pH : 6,9 ± 0,2 Hấp diệt khuẩn 115oC/15-20 phút 57  Eosine Methyl Blue agar (EMB) Peptone : 10 g Lactose : 10 g Eosine Y : 0,4 g Methyl blue : 0,065 g Nước cất : lít Agar : 15g pH : 7,1 ± 0,2 Hấp diệt khuẩn 115oC/15-20 phút  Kligler Iron Agar (KIA) Peptone : 20 g Lactose : 20 g Dextrose : 10 g NaCl tinh :5g Ferric ammonium citrate : 0,5 g Sodium thiosulfate : 0,5 g Phenol red : 0,025 g Nước cất : lít pH : 7,4 ± 0,2 Hấp diệt khuẩn 115oC/15-20 phút  Brillian Green Agar (BGA) Chiết nấm men :3g Casein :5g Pepton động vật :5g Lactose : 10 g Nước cất : lít Agar : 15g Saccharose : 10 g Phenol red : 0,08 g NaCl :5g 58 Brillian Green : 12,5 g pH : 6,9 ± 0,2 Hấp diệt khuẩn 115oC/15 - 20 phút  Macconkey agar (MC) Pepton : 20 g Lactose :2g Đỏ trung tính : 0,03g Crystal violet : 0,001 g Muối mật : 1,5 g NaCl :5g Agar : 13,5 g Nước cất : lít pH : 7,1 ± 0,2 Hấp diệt khuẩn 115oC/15 - 20 phút  Tryptose Sulfite Cycloserin agar (TSC) Tryptose : 15 g Sytone :5g Sodium metabisulfit :1g Nước cất : lít Chiết nấm men :5g Ferric ammonium citrate :1g Agar : 15 g pH : 7,6 ± 0,2 Hấp diệt khuẩn 115oC/15 - 20 phút (Tô Minh Châu, 2005)  Phương pháp MPN (Most Probable Number) Là phương pháp pha loãng tới hạn hay phương pháp chuẩn độ Đây phương pháp dùng để đánh giá số lượng vi sinh vật theo số lượng vi sinh vật có xác suất lớn diện đơn vị thể tích mẫu Phương pháp định lượng dựa kết định tính loạt thí nghiệm lặp lại số nồng độ pha loãng khác 59 Bảng Mac Crady NC 0 0 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 Ống số dương tính 1/10 1/100 0 1 1 0 0 1 2 0 0 1 1 2 2 2 3 3 0 1 1 2 2 3 3 3 (Tô Minh Châu, 2005) 60 MPN/ml (g) < 0,3 0,3 0,3 0,6 0,6 0,7 0,7 1,1 0,7 1,1 1,1 1,5 1,6 0,9 1,4 2,0 1,5 2,2 3,0 2,0 3,0 3,5 4,0 3,0 2,5 4,0 2,5 4,0 6,5 4,6 7,5 11,5 16,5 9,5 15,0 20,0 30,0 25,0 45,0 110,0 140,0 ... tập ăn thức ăn hỗn hợp heo nái ni con 1.2 MỤC ĐÍCH VÀ U CẦU 1.2.1 Mục đích Kiểm chứng hiệu lực trùng thức ăn chế phẩm Formycine Gold Premix sau bổ sung chế phẩm vào thức ăn hỗn hợp heo tập ăn. ..THÍ NGHIỆM KIỂM CHỨNG HIỆU LỰC THANH TRÙNG CỦA CHẾ PHẨM FORMYCINE GOLD PREMIX TRÊN THỨC ĂN HỖN HỢP HEO CON TẬP ĂN VÀ THỨC ĂN HỖN HỢP HEO NÁI NI CON Tác giả HỒNG THÙY DƯƠNG... .43 4.3.2 Thức ăn hỗn hợp cho heo nái nuôi 44 4.4 SỐ LƯỢNG NẤM MỐC 46 4.4.1 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng viên .46 4.4.2 Thức ăn hỗn hợp cho heo tập ăn dạng bột