BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU CHIẾT XUẤT TỪ CÂY TÔ MỘC (CAESALPINIA SAPPAN L) TRÊN VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM KHOA CHĂN NI THÚ Y **************** KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU CHIẾT XUẤT TỪ CÂY TÔ MỘC (CAESALPINIA SAPPAN L) TRÊN VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI Sinh viên thực : NGUYỄN HỮU PHÚ Lớp : DH06TY Ngành : Thú Y Niên khóa : 2006 – 2011 Tháng 08/2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM KHOA CHĂN NUÔI THÚ Y **************** NGUYỄN HỮU PHÚ BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU CHIẾT XUẤT TỪ CÂY TÔ MỘC (CAESALPINIA SAPPAN L) TRÊN VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Bác sỹ thú y Giáo viên hướng dẫn PGS.TS LÂM THỊ THU HƯƠNG BSTY NGUYỄN TUẤN ĐẠT Tháng 08/2011 XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên thực tập: Nguyễn Hữu Phú Tên luận văn: BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU CHIẾT XUẤT TỪ CÂY TÔ MỘC (CAESALPINIA SAPPAN L) TRÊN VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI Đã hoàn thành luận văn theo yêu cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến nhận xét hội đồng chấm thi tốt nghiệp khóa …………ngày……… GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN PGS.TS LÂM THỊ THU HƯƠNG i LỜI CẢM TẠ Thành kính ghi ơn ba mẹ đã sinh thành , nuôi dưỡng và dạy dỗ cho con, niềm thương yêu và lòng biết ơn vô hạn trước những khó khăn vất vả mà ba mẹ đã hy sinh để cho có được ngày hôm Xin cám ơn anh Hai em út động viên tạo điều kiện nhiều sống học tập Xin trân trọng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Lâm Thị Thu Hương, BSTY Lê Thị Hà , BSTY Nguyễn Tuấn Đạt tận tình hướng dẫn giúp đỡ truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm quý báu, tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành luận văn Chân thành biết ơn: Ban Giám Hiệu trường Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh, Ban Chủ Nhiệm Khoa Cơ Bản Khoa Chăn Nuôi Thú Y phòng ban trường Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện cho suốt thời gian học tập Ths Nguyễn Thanh Tùng, BSTY Trần Thế Sơn, BSTY Lê Tri Thức, KSCN Nguyễn Vũ Bằng, bạn: Thanh Phong, Tấn, Thành, Hưng, Nhung, anh chị em bạn thú y 32 tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình thực hoàn thành luận văn tốt nghiệp ii TÓM TẮT LUẬN VĂN Đề tài nghiên cứu “BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU CHIẾT XUẤT TỪ CÂY TÔ MỘC (CAESALPINIA SAPPAN L) TRÊN VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI” tiến hành thời gian từ ngày 15/01/2011 đến hết ngày 15/06/2011 Kết kháng sinh đồ tinh dầu chiết xuất từ Tô mộc loại vi khuẩn E coli có đường kính từ 7mm đến 12mm, cho thấy tinh dầu chiết xuất từ Tơ mộc có khả ức chế phát triển vi khuẩn E coli Sau kết thúc thí nghiệm chúng tơi ghi nhận tỷ lệ gà bệnh lơ thí nghiệm I, lơ thí nghiệm II 23,33%, tỷ lệ bệnh lô đối chứng dương 73,33% Tỷ lệ bệnh E coli đợt lơ thí nghiệm I, lơ thí nghiệm II lơ đối chứng dương 23,33%, 20% 66,66% Tỷ lệ gà chết lơ thí nghiệm I, lơ thí nghiệm II 20%, tỷ lệ chết chung lô đối chứng dương 46,66% Tỷ lệ chết E coli đợt lơ thí nghiệm I, lơ thí nghiệm II lơ đối chứng dương 16,66%, 20% 46,66% Qua kết nhận thấy tinh dầu chiết xuất từ Tơ mộc có khả phòng bệnh vi khuẩn E coli iii MỤC LỤC Trang XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN i LỜI CẢM TẠ ii TÓM TẮT LUẬN VĂN iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH SÁCH CÁC BẢNG viii DANH SÁCH CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ ix Chương ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu 1.3 Yêu cầu Chương TỔNG QUAN 2.1 Tô Mộc 2.1.1 Mô tả 2.1.2 Mô tả dược liệu 2.1.3 Phân bố, thu hái chế biến 2.1.4 Thành phần hóa học 2.1.5 Tác dụng dược lý 2.1.6 Công dụng 2.2 Sơ lược vi khuẩn E.coli 2.2.1 Đại cương 2.2.2 Đặc điểm sinh học 2.2.2.1 Đặc điểm hình dạng nhuộm màu 2.2.2.2 Đặc điểm nuôi cấy iv 2.2.2.3 Đặc tính sinh hoá 2.2.2.4 Sức đề kháng 10 2.2.3 Cấu trúc kháng nguyên và độc tố 10 2.2.3.1 Cấu trúc kháng nguyên 10 2.2.3.2 Độc tố 11 2.2.3.3 Tính chất gây bệnh 11 2.2.4 Truyền nhiễm học 12 2.2.4.1 Động vật cảm thụ 12 2.2.4.2 Chất chứa bệnh 13 2.2.4.3 Phương thức truyền lây 13 2.2.4.4 Đường xâm nhập 13 2.2.5 Cơ chế sinh bệnh 14 2.2.6 Triệu chứng bệnh tích 14 2.2.6.1 Triệu chứng 14 2.2.6.2 Bệnh tích 15 2.2.7 Chẩn đoán 15 2.2.8 Phòng trị bệnh 15 2.3 Các phương pháp chiết xuất dược liệu 16 2.4 Một số phương pháp đánh giá kháng sinh thảo dược 17 2.4.1 Phương pháp thử vi sinh vật 17 2.4.1.1 Phương pháp khuyếch tán dùng môi trường thạch 17 2.4.1.2 Phương pháp đo độ đục dùng môi trường lỏng 19 2.4.2 Phương pháp thử động vật 20 2.5 Một số cơng trình nghiên cứu có liên quan 21 2.5.1 Cơng trình nghiên cứu nước 21 2.5.2 Cơng trình nghiên cứu nước 21 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 3.1 Thời gian địa điểm 22 3.1.1 Thời gian 22 v 3.1.2 Địa điểm 22 3.2 Vật liệu thí nghiệm 22 3.3 Nội dung nghiên cứu 23 3.3.1 Nội dung 23 3.3.1.1 Chỉ tiêu theo dõi 23 3.3.1.2 Đối tượng nghiên cứu 23 3.3.1.3 Phương pháp tiến hành 23 3.3.1.4 Thử kháng sinh đồ 24 3.3.2 Nội dung 25 3.3.2.1 Chỉ tiêu theo dõi 25 3.3.2.2 Phương pháp tiến hành 25 3.3.2.3 Bố trí thí nghiệm 26 3.3.2.4 Cách tính tiêu 28 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 Kết kháng sinh đồ tinh dầu chiết xuất từ Tô mộc 29 4.2 Tỷ lệ gà bệnh tỷ lệ gà bệnh vi khuẩn E coli 34 4.3 Tỷ lệ gà chết tỷ lệ gà chết vi khuẩn E coli 38 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 44 5.1 Kết luận 44 5.2 Đề nghị 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC 47 vi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT E coli : Escherichia coli IB : Infectious Bronchitis MHA : Mueller – Hinton Agar EMB : Eosin Methylen Blue MCK : MacConkey KIA : Kligler Iron Agar ATCC : American Type Culture Collection vii DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 3.1 Quy trình chủng ngừa phòng bệnh gà 23 Bảng 3.2 Sơ đồ thử kháng sinh đồ 24 Bảng 3.3 Đường kính vòng vơ khuẩn chuẩn loại kháng sinh 25 Bảng 3.4 Bố trí phòng bệnh tinh dầu gà 26 Bảng 3.5 Sơ đồ phân lập vi khuẩn E coli 27 Bảng 4.1 Đường kính vòng vơ khuẩn tinh dầu với đường kính vòng vơ khuẩn kháng sinh vi khuẩn E coli chuẩn (ATCC 25922) 30 Bảng 4.2 Đường kính vòng vơ khuẩn tinh dầu với đường kính vòng vơ khuẩn kháng sinh vi khuẩn E coli phân lập từ gà bệnh 32 Bảng 4.3 Đường kính trung bình vòng vơ khuẩn tinh dầu tơ mộc với đường kính trung bình vòng vơ khuẩn kháng sinh loại vi khuẩn E coli33 Bảng 4.4 Tỷ lệ gà bệnh sau ngày gây bệnh 35 Bảng 4.5 Tỷ lệ gà bệnh E coli sau ngày gây bệnh 37 Bảng 4.6 Tỷ lệ gà chết sau ngày gây bệnh 39 Bảng 4.7 Tỷ lệ gà chết E coli sau ngày gây bệnh 42 viii Bảng 4.5: Tỷ lệ gà bệnh E coli sau ngày gây bệnh Lơ thí nghiệm I Số đợt thí nghiệ m Số gà thí nghiệ m (con) Số gà bện h Số gà bệnh E coli Tỷ lệ gà bệnh E coli Lô đối chứng dương Lơ thí nghiệm II Số gà bện h Số gà Số gà bệnh E coli Tỷ lệ gà bệnh E coli bện h Số gà bệnh E coli Tỷ lệ gà bệnh E coli Lô đối chứng âm bện h Số gà bệnh E coli Tỷ lệ gà bệnh E coli Số gà Đợt I 10 4 40,00 30,00 60,00 0 00,00 Đợt II 10 2 20,00 1 10,00 7 70,00 0 00,00 Đợt III 10 1 10,00 2 20,00 7 70,00 0 00,00 Tổng 30 7 23,33 20,00 22 20 66,66 0 00,00 37 P P