Phospho là nguồn thức ăn cần thiết và quan trọng cần thiết và quan trọng không thể thiếu được trong mỗi bữa ăn hàng ngày của một số loài động vật, là nguồn cung cấp khoáng chất, vi lượng, chất xơ,… cho động vật. Nguyên tố phospho tồn tại nhiều trong thực vật và động vật. Phương pháp trắc quang là một trong những phương pháp có độ chọn lọc và độ chính xác cao, phù hợp cho việc phân tích các nguyên tố trong thực phẩm. Vì vậy, em đã chọn đề tài : “ Xác định hàm lượng hàm lượng phospho trong thức ăn chăn nuôi bằng phương pháp trắc quang” để nghiên cứu, học hỏi và áp dụng những kiến thức em đã học được vào trong thực tế.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC - // - ĐỒ ÁN MÔN HỌC XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG PHOSPHO TRONG THỨC ĂN CHĂN NUÔI BẰNG PHƯƠNG PHÁP TRẮC QUANG CHUN NGÀNH: HỐ PHÂN TÍCH Tp Hồ Chí Minh, năm 2011 TRƯỜNG ĐH CƠNG NGHIỆP T/P HCM CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC - // - Độc lập – Tự - Hạnh phúc - // - NHIỆM VỤ ĐỒ ÁN CHUYÊN NGÀNH Tên đồ án chuyên ngành: Xác định hàm lượng phospho thức ăn chăn nuôi phương pháp trắc quang Nhiệm vụ: • Khái quát hàm lượng phospho thức ăn chăn ni • Tìm hiểu phương pháp lấy bảo quản mẫu • Phân tích hàm lượng phospho số mẫu thực nghiệm Ngày giao đồ án chuyên ngành: ngày tháng năm 2011 Ngày hoàn thành đồ án chuyên ngành: ngày 15 tháng năm 2011 Giáo viên hướng dẫn: T/p Hồ Chí Minh ngày tháng năm 2011 NHẬN XÉT CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2011 NGƯỜI HƯỚNG DẪN LỜI MỞ ĐẦU Phospho nguồn thức ăn cần thiết quan trọng cần thiết quan trọng thiếu bữa ăn hàng ngày số loài động vật, nguồn cung cấp khoáng chất, vi lượng, chất xơ,… cho động vật Nguyên tố phospho tồn nhiều thực vật động vật Phương pháp trắc quang phương pháp có độ chọn lọc độ xác cao, phù hợp cho việc phân tích nguyên tố thực phẩm Vì vậy, em chọn đề tài : “ Xác định hàm lượng hàm lượng phospho thức ăn chăn nuôi phương pháp trắc quang” để nghiên cứu, học hỏi áp dụng kiến thức em học vào thực tế LỜI CẢM ƠN Thời gian trôi thật nhanh để chúng em phải rời ghế nhà trường bước vào sống với đầy khó khăn thử thách Với lòng mong muốn cho chúng em ln thành cơng sống, q thầy hết lòng quan tâm dạy dỗ chúng em có hơm Xuất phát từ lòng biết ơn sâu sắc chúng em xin gửi tới q thầy lời cảm ơn lòng biết ơn chân thành Để hồn thành đồ án khơng nỗ lực thân chúng em mà quan tâm lo lắng, dạy dỗ nhiệt tình, động viên, ủng hộ tất thầy cô ban bè Chúng em xin chân thành cám ơn thầy Khoa Hóa giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi nhất, đặc biệt cô Trần Thị Mai Liên người trực tiếp hướng dẫn, quan tâm chúng em suốt q trình hồn thành đồ án MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU LỜI CẢM ƠN 1.1 Lịch sử hình thành 1.4 Các hợp chất photpho 12 1.5 Ứng dụng 15 1.7 Các phương pháp phân tích hàm lượng phospho 17 1.7.1 Phương pháp khối lượng 17 1.7.2 Phương pháp thể tích .18 (NH4)3[P(Mo3O10)4] + 23NaOH = NaNH4HPO4 + (NH4)MoO4 + 11Na2MoO4 + 11H2O 18 NaOH + HCl =NaCl +H2O 19 NH4+ + OH- = NH3 + H2O 19 (CH2)6N4.4(NH4)3[P(Mo3O10)4] +104NaOH + 18HCHO = 4Na2HPO4 + 48Na2MoO4 + 3(CH2)6N4 + 74H2O .19 1.7.3 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử xác định PO43- 19 Hình 3.1: Đồ thị đường chuẩn hàm lượng phospho 36 Nhận xét: Kết xây dựng đường chuẩn cho thấy, đường chuẩn P tuyến tính tối ưu với khoảng nồng độ – 40 mg/L 36 CHƯƠNG TỔNG QUAN VỀ CHỈ TIÊU 1.1 Lịch sử hình thành Phốtpho (từ tiếng Hy Lạp phosphoros, có nghĩa "vật mang ánh sáng" tên gọi cổ đại Sao Kim) nhà giả kim thuật người Đức Hennig Brand phát năm 1669 thông qua việc điều chế nước tiểu Làm việc Hamburg, Brand cố gắng chưng cất muối cách cho bay nước tiểu, q trình ơng thu khống chất màu trắng phát sáng bóng đêm cháy sáng rực rỡ Kể từ đó, chữ lân quang, liên quan đến ánh sáng lân tinh phốtpho, sử dụng để miêu tả chất phát sáng bóng tối mà khơng cần cháy Tuy nhiên chất vật lý tượng lân quang không trùng với chế phát sáng phốtpho: Brand không nhận thực tế phốtpho cháy âm ỉ phát sáng Là nguyên tố hóa học bảng hệ thống tuần hồn có ký hiệu P số nguyên tử 15 Là phi kim đa hóa trị nhóm nitơ, photpho chủ yếu tìm thấy câc loại đá photphat vô thể sống Do độ hoạt động hóa học cao, khơng người ta tìm thấy dạng đơn chất tự nhiên Nó nguyên tố thiết yếu cho thể sống, Sử dụng rộng rãi vật liệu cháy nổ, diêm, pháo hoa, thuốc trừ sâu, thuốc đánh chất tẩy rửa Hình 1.1: Bảng hệ thống tuần hoàn 1.2 Đồng vị Các đồng vị phóng xạ phốtpho bao gồm: P32: chất tạo xạ beta (1,71 MeV) với chu kỳ bán rã 14,3 ngày Nó dùng phòng thí nghiệm khoa học nghiên cứu sống, chủ yếu để tạo mẫu ADN ARN đánh dấu phóng xạ Ví dụ để sử dụng phương pháp đánh dấu Northern hay đánh dấu Southem Do hạt bêta cao lượng tạo thâm nhập qua da giác mạc, lượng P 32 vào thể theo đường tiêu hóa, hơ hấp hay hấp thụ qua đường khác hấp thụ lại xương acid nucleic, yêu cầu người làm việc với P32 bắt buộc phải dùng quần áo bảo hộ, găng tay kính bảo hộ, phải tránh tiến hành công việc thùng chứa hở để bảo vệ mắt P33: chất tạo xạ beta (0,25 MeV) với chu kỳ bán rã 25,4 ngày Nó dùng phòng thí nghiệm khoa học sống ứng dụng mà xạ bêta thấp lượng ưu hơn, ví dụ xếp chuỗi ADN 1.3Tính chất phospho 1.3.1 Tính chất vật lý Photpho có dạng thù hình xác định, photpho trắng, photpho tím hay gọi photpho đỏ photpho đen Các dạng thù hình khác tồn Phổ biến photpho trắng photpho đỏ, hai chứa mạng gồm nhóm phân bố kiểu tứ diện gồm nguyên tử photpho Các tứ diện photpho trắng tạo thành nhóm riêng, tứ diện photpho đỏ liên kết với thành chuỗi Photpho trắng cháy tiếp xúc với khơng khí hay bị tiếp xúc với nguồn nhiệt ánh sáng Photpho tồn dạng ưa thích mặt động học nhiệt động lực học Chúng tách nhiệt độ chuyển tiếp – 3,80C Một dạng gọi dạng “ alpha”, dạng gọi “ beta” Photpho đỏ tương đối ổn định thăng hoa áp suất atm 170 0C cháy va chạm hay nhiệt ma sát Thù hình photpho đen tồn có cấu trúc tương tự graphit, nguyên tố xếp lớp theo lục giác có tính dẫn điện 1.3.2 Tính chất hóa học Photpho trắng Photpho có khả phản ứng mạnh Ở trạng thái phân bố nhỏ, photpho trắng có khả bốc cháy nhiệt độ thường Dạng khối lớn hoạt động hơn, 323K tự bốc cháy với lửa sáng trắng phát nhiệt mạnh tạo thành diphotpho pentoxit 2P + 5/2O2 P2O5 ; Ho = -1512kJ/mol Photpho trắng chất khử mạnh Acid sunfuric đặc đun với photpho trắng bị khử xuống sunfua đioxit Acid nitric tác dụng photpho trắng bị khử xuống nitơ oxit Các dung dịch muối dễ bị khử muối kim loại quý bị khử thành kim lọai đun nóng với photpho Photpho trắng phản ứng với halogen lưu hùynh mạnh Photpho trắng tự oxi hóa khử dung dịch kiềm nóng tạo thành hidro photphua muối hipophotphit 4P + 3OH- + 3H2O PH3 + 3H2PO2 Photpho trắng độc: 0,1 gam photpho trắng lọt vào dày làm chết người Bởi việc chứng minh photpho trắng kỹ thuật hình quan trọng 10 3.2.1 Lấy mẫu Lấy mẫu đại diện: Mục đích lấy mẫu đại diện để thu phần nhỏ từ lô hàng cho việc xác định đặc tính phần nhỏ đại diện cho giá trị trung bình đặc trưng cho lô hàng Từ lô hàng cần lấy mẫu, lấy lặp lại mẫu ban đầu vi trí tiêng lẻ khác lơ hàng Các mẫu ban đầu gộp lại cách trộn để tạo thành mẫu chung mà từ mẫu phòng thử nghiệm đại diện lấy cách chia nhỏ Lấy mẫu chọn lọc: Nếu phần vật liệu phải lấy mẫu cho thấy khác biệt rõ chất lượng so với phần vật liệu lại, phần phải tách riêng xử lý lô hàng riêng biệt Trong trường hợp phải nêu thực tế báo cáo lấy mẫu Nếu chia nhỏ vật liệu thử thành lơ hàng riêng biệt, vật liệu coi lô hàng để lấy mẫu, thực tế phải nêu rõ báo cáo lấy mẫu Phải đưa tỷ lệ sản phẩm bị nghi ngờ khác Người lấy mẫu: Người lấy mẫu phải đào tạo có kinh nghiệm thích hợp việc lấy mẫu thức ăn chăn ni phải có kiến thức rủi ro, nguy mà sản phẩm trình lấy mẫu gặp lại Nhận dạng kiểm tra khái quát lô hàng trước lấy mẫu: Trước lấy mẫu nào, cần phải nhận dạng xác lơ hàng thích hợp, so sánh số lượng đơn vị có lơ hàng, khối lượng lô thể tich lô hàng, việc ghi vật liệu chứa nhãn với mục ghi tài liệu có liên quan 25 Trong phần báo cáo lấy mẫu, ghi lại đặc trưng liên quan đến việc lấy mẫu đại diện, điều kiện lô hàng môi trường xung quanh.Tách riêng phần lô hàng bị hư hỏng lô hàng khơng đồng q mức, chia lơ hàng thành phần có đặc tính giống Coi phần lô hàng riêng biệt Dụng cụ lấy mẫu: Dụng cụ lấy mẫu thủ công, dụng cụ lấy mẫu máy Khi lấy mẫu, chia mẫu, bảo quản vận chuyển mẫu, cần ý để đảm bảo đặc tính mẫu lô hàng lấy mẫu không bị ảnh hưởng Dụng cụ lấy mẫu phải sạch, khô mùi lạ Vật liệu dụng cụ lấy mẫu không bị ảnh hưởng đến chất lượng lấy mẫu Dụng cụ sau lần lấy mẫu phải làm Điều quan trọng lấy mẫu thức ăn chăn nuôi chứa hàm lượng đầu cao Người lấy mẫu phải mang găng tay sử dụng lần thải sau lần lấy mẫu cho tránh làm nhiễm bẩn mẫu Vật chứa mẫu sản phẩm dạng rắn: Vật chứa mẫu sản phẩm dạng rắn nắp đậy phải làm từ vật liệu không thấm nước không thấm mỡ ( ví dụ thủy tinh, thép khơng gỉ, thiếc vật liệu chất dẻo thích hợp), phải có miệng rộng tốt dạng hình trụ phải có dung tích thích hợp với mẫu cần lấy Các túi chất dẻo phù hợp sử dụng Các vật liệu chứa phải có khả bảo đảm độ kín khơng thấm nước Vật chứa mẫu sản phẩm dạng lỏng bán lỏng: Các vật liệu phải làm vật liệu thích hợp ( tốt vật liệu thủy tinh chất dẻo), có dung tích thích hợp, kín khí tốt tối màu Vị trí lấy mẫu:Nếu tiến hành lấy mẫu vị trí bảo vệ khỏi nhiễm bẩnnhư khơng khí ẩm ướt bụi Nếu việc lấy mẫu tiến hành vật liệu chạy dây chuyền, lơ hàng cần lấy mẫu phải 26 xếp cho tạo phần mà sử dụng để thu mẫu phong thử nghiệm đại diện Phân loại sản phẩm mục đích lấy mẫu: Các loại thức ăn chăn ni phân loại sau: • Thức ăn chăn ni dạng rắn: hạt ngũ cốc, hạt có dầu,đậu đỗ viên • Thức ăn chăn nuôi dạng rắn: bột xay thô bột • Thức ăn thơ • Thức ăn chăn ni dạng mảnh tảng • Thức ăn chăn ni dạng lỏng bán lỏng Cỡ mẫu: Cần phải lấy lượng đủ mẫu ban đầu để thu mẫu đại diện lô hàng Số lượng mẫu ban đầu cỡ mẫu xác định theo phươnng pháp lấy mẫu, theo cỡ lô thực tế lấy mẫu Cỡ lô hàng cụ thể phụ thuộc vào số lượng yếu tố, Tiêu chuẩn quy định theo cỡ mẫu tối đa 500 3.2.1.1 Lấy mẫu hạt ngũ cốc, hạt có dầu, đậu đỗ viên: Các ví dụ sản phẩm: Ngũ cốc : ngơ, lúa mì, lúa mạch, yến mạch, gạo, miến Hạt có dầu: hạt hoa hướng dương, hạt lạc, hạt cải, đậu tương, hạt lanh Đậu đỗ: hạt đỗ Viên: Thức ăn chăn nuôi dạng viên Lấy mẫu để rời: Khi lấy mẫu để rời, ví dụ thành đống xác định số lượng mẫu ban đầu cần lấy, có tính đến số lượng mẫu ban đầu tối thiểu Lựa chọn vị trí lấy ngẫu nhiên mẫu ban đầu, việc chọn mẫu vị trí phải quan tâm đến vùng bề mặt độ sâu cho tất phần lơ hàng có hội chiọn Khi lấy mẫu sản phẩm chuyển động, lấy thủ công máy mẫu ban đầu toàn mặt cắt dòng chảy, với khoảng thời gian 27 phụ thuộc vào tốc độ dòng chảy sau: Sử dụng tốc độ dòng chảy cỡ lơ để xác định thời gian lô hàng qua điểm lấy mẫu Tại thời gian lấy mẫu ngẫu nhiên mẫu ban đầu Lấy mẫu từ bao gói: Từ lơ hàng chọn ngẫu nhiên số lượng bao gói để lấy mẫu ban đầu, có tính đến số lượng mẫu ban đầu tối thiểu Mở bao gói dùng dụng cụ để lấy mẫu ban đầu Nếu mẫu ban đầu phải lấy từ bao gói kín, sử dụng ống xiên dạng túi que thâm mẫu Ống xiên dạng túi dùng lấy mẫu theo phương nằm ngang phương thẳng đứng phải lấy theo đường chéo bao gói Các mẫu ban đầu từ bao gói bề mặt sạch, khô, trộn kỹ lấy xẻng đầy làm mẫu ban đầu Chuẩn bị mẫu thử phòng thử nghiệm: Để tránh làm thay đổi chất lượng tránh làm bẩn nhiễm mẫu, lấy chuẩn bị tất mẫu nhanh tốt Gộp mẫu ban đầu lại trộn kỹ để tạo thành mẫu chung Mẫu chung cho vào vật chứa bao gói mà khơng làm ảnh hưởng đến chất lượng mẫu Rút gọn mẫu chung thủ công Lập lại quy trình này, trộn sau lần chia để có mẫu rút gọn có cỡ mẫu phù hợp, không kg Trộn mẫu rút gọn chia thành ba bốn mẫu thủ nghiệm cóa cỡ Cho mẫu phòng thủ nghiệm vào vật chứa thích hợp 3.2.1.2 Lấy mẫu sản phẩm dạng bột thơ bột Lấy mẫu ngồi đồng: Qui trình thích hợp để lấy mẫu từi sản phẩm chưa thu hoạch sản phẩm thu hoạch ngồi ruộng xem ISO 10381-6 liên quan đến chất lượng Lấy mẫu từ đống sản phẩm: Khi lấy mẫu từ đống sản phẩm, từ xilo hầm ủ, cần xác định số lượng mẫu ban đầu cần lấy có tính đến số lượng mẫu ban đầu Lấy mẫu ban đầu ngẫu nhiên từ đầu đến cuối nơi chứa đảm bảo 28 tất lớp co mẫu đại diện Khi lấy mẫu từ tháp xilô phải ý cẩn thận Khi có điều kiện cho phép tiến hành lấy mẫu sản phẩm chuyển động Lấy mẫu từ kiện sản phẩm: Khi lấy mẫu sản phẩm chứa kiện, chọn ngẫu nhiên số lượng tối thiểu yêu cầu từ kiện từ kiện lấy mẫu ban đầu toàn mặt cách ngang lơ sản phẩm Chuẩn bị mẫu phòng thí nghiệm: Việc chuẩn bị mẫu phòng thí nghiệm phải tiến hành nhanh tốt để tránh làm mẫu bị hư hỏng Sau gộp mẫu ban đầu lại với nhau, trộn kỹ mẫu chung.Đối với thư ăn dạng thơ, cần phải cắt nhỏ mẫu thành đoạn nhỏ Rút gọn từ từ mẫu chung dạng thô tươi dạng thô khô cách chia thành bốn phần mẫu rút gọn có cỡ phù hợp, mẫu rút gọn không đươc nhỏ 4kg Đối với sản phẩm có đoạn lớn rút gọn mẫu chung cách chia đôi số lượng đoạn mẫu chung, chia chọn ngẫu nhiên đoạn Trừ trường hợp bắt buộc, tránh bẻ gãy đoạn mẫu chunng trình rút gọn mẫu Trộn mẫu rút gọn kỹ tốt tùy theo mẫu yêu cầu, chia mẫu thành ba bốn mẫu phòng thử nghiệm, mẫu gần (tối thiểu 0.5 kg) Cho mẩu thử vào vật chứa thích hợp 3.2.1.3 Lấy mẫu sản phẩm dạng miếng liếm tảng Nếu mảnh sản phẩm mẫu lớn nguyên mảnh tảng lấy mẫu ban đầu đập chúng vơ nhỏ Gộp mẫu ban đầu với để mẫu chung,trộn kỹ mẫu chung sau rút gọn mẫu để mẫu rút gọn có cỡ mẫu phù hợp, mẫu rút gọn khơng 2kg 29 Trộn kỹ mẫu rút gọn va tùy theo yêu cầu, chia mẫu thành ba bốn mẫu phòng thử nghiệm, cỡ mẫu gần (tối thiểu 0.5kg) Cho mẫu phòng thử nghiệm vào vật chứa thích hợp 3.2.1.4 Lấy mẫu sản phẩm dạng lỏng Lấy mẫu từ bể chứa : Nếu sản phẩm bể chứa lắng xuống khơng đồng khuấy để trộn dùng dụng cụ thích hợp, lấy mẫu ban đầu từ lô trộn Nếu trước lấy mẫu mà khơng thể trộn lấy mẫu ban đầu rót sản phẩm dạng lỏng dạng bể chứa rót sản phẩm dạng lỏng khỏi bể chứa.Trong trường hợp đó, khơng thể lấy mẫu lơ hàng chuyển động lấy số mẫu ban đầu vị trí khác lơ hàng để đảm bảo thu mẫu phòng thí nghiệm đại diện Trong trường hợp định,với điều kiện chất sẩn phẩm cho phép đun nóng thùng lên nhằm nâng cao độ đồng sản phẩm trước lấy mẫu Lấy mẫu từ thùng: Trước lấy mẫu ban đầu, trộn lượng chứa thùng chọn cách ngẫu nhiên để lấy mẫu Có thể trộn cách lắc dọc,lắc ngang khuấy Lấy mẫu ban đàu từ sản phẩm trộn Nếu khơng thể trộn trước lấy hai mẫu ban đầu từ thùng theo hướng khác từ hai vùng khác (trên mặt đáy) Lấy mẫu từ vật chứa nhỏ: Chọn vật cách ngẫu nhiên Lấy mẫu ban đầu sau trộn lượng chứa vật chứa chọn Nếu vật chứa nhỏ lấy toàn lượng chứa làm mẫu ban đầu Chuẩn bị mẫu phòng thí nghiệm 30 Thu thập mẫu ban đầu vào vật chứa thích hợp để thu mẫu chung Trộn kỹ mẫu chung loại bỏ lượng vật liệu đươc yêu cầu để tạo thành mẫu rút gọn cỡ mẫu phù hợp, mẫu rút gọn khơng 2kg lít Đối với sản phẩm khó trộn dùng quy trình rút gọn sau đây: Chia mẫu chung thành hai nửa Ký hiệu phần A nửa lại phần B Lấy phần A chia đôi thành hai nửa Ký hiệu nửa phần C nửa lại phần D Chia đơi tiếp B, ký hiệu phần E nửa lại phần F Bằng phương pháp ngẫu nhiên, chọn phần E phần F Gộp phần chọn với nhau.Trộn thật kỹ, lặp lại qui trình cần thiết để có mẫu rút gọn từ 2kg đến 4kg ( từ lít đến lít) Trộn thật kỹ mẫu rút gọn chia thành ba bốn mẫu phòng thử nghiệm theo yêu cầu, với kích cỡ gần bừng (tối thiểu 0.5kg 0.5 lít) 3.2.2 Chuẩn bị mẫu thử theo TCVN 6952 : 2001 Nguyên tắc: Đối với mẫu dạng rắn, trộn mẫu phòng thí nghiệm chia theo qui trình qui định thu mẫu thử, có cỡ mẫu thích hợp Thực q trình tán nhỏ, nghiền, xay đồng nhất, để đảm bảo mâu thử, đại diện trung thực cho mẫu phòng thí nghiệm, thấy cần thiết Trường hợp thức ăn chăn nuôi dạng lỏng, mẫu phòng thí nghiệm trộn máy lấy mẫu thử dịch lỏng khuấy trộn Cách tiến hành: Nghiền: Khi nghiền mẫu dân đến làm giảm tăng độ ẩm thấy cần thiết Nghiền nhanh tốt giảm tố đa tiếp xúc mẫu với khơng khí Nếu cần thiết, đập vỡ tán nhỏ mẫu trước nghiền Điều quan trọng phải trộn mẫu trước cơng đoan 31 Mẫu mịn: Nếu mẫu phòng thí nghiệm lọt hồn tồn qua sàng có kích thước lỗ sàng 1.00 mm, trộn mẫu Chia hỗn hợp mẫu thiết bị chia đôi đến thu mẫu có lượng phù hợp Mẫu có kích thước hạt vừa: Nếu mẫu phòng thí nghiệm khơng lọt hết qua sàng có kích thước lỗ sàng 1.00 mm, lọt hồn tồn qua sàng có kích thước lỗ sàng 2.80 mm, trộn mẫu chuẩn bị mẫu có lượng phù hợp Mẫu có kích thước hạt to: Nếu mẫu phòng thí nghiệm khơng lọt hết qua sàng có kích thước lỗ sàng 2.80 mm Cẩn thận nghiền mẫu máy nghiền làm mẫu lọt hoàn tồn qua sàng có kích thước lỗ sàng 2.80 mm, trộn mẫu Chia mẫu phòng thí nghiệm thiết bị chia mẫu đến mẫu thử có lượng phù hợp với yêu cầu xác định Nghiền mẫu máy nghiền làm mẫu lọt hồn tồn qua sàng có kích thước lỗ sàng 1.00 mm Thức ăn chăn ni có độ ẩm cao đồ hộp thức ăn cho thú cảnh: Trộn mẫu phòng thí nghiệm (có thể tồn hộp túi) máy khuấy máy làm đồng Trộn mẫu đồng Chuyển toàn vào hộp đựng mẫu sạch, khô đậy nắp thật chặt Lấy phần mẫu thử nhanh tốt, tốt lấy sau trộn Cách khác để bảo quản mâu thử để mẫu nhiệt độ từ 00C đến 40C Thức ăn chăn nuôi đông lạnh: Cắt bẻ mẫu phòng thí nghiệm thành miếng nhỏ thích hợp, cho miếng vào máy cắt Trộn đếu mẫu cắt đến phần chất lỏng nằm mẫu khuếch tán vào mẫu Chuyển mẫu trộn vào hộp đựng mẫu khô đậy nắp thật chặt Lấy phần mẫu thử nhanh tốt, tốt lấy sau trộn Cách khác để bảo quản mâu thử để mẫu nhiệt độ từ 00C đến 40C 32 Thức ăn chăn ni có độ ẩm trung bình: Cho từ từ mẫu phòng thí nghiệm qua máy cắt Trộn mẫu cắt nhỏ cho qua sàng có kích thước lỗ sàng 4.00 mm Chuyển tồn vào hộp đựng mẫu khô đậy nắp thật chặt Nếu mẫu phòng thí nghiệm khơng thể cắt nhỏ trộn nghiền tay Mẫu dạng lỏng bao gồm cá ủ ướp: Trộn mẫu phòng thí nghiệm máy khuấy máy làm đồng để phần tử tách rời (xương, dầu,…) phân tán hoàn toàn mẫu Trong q trình trộn dùng mi rót, cốc mỏ pipet rộng lấy 50ml đến 100ml mẫu cho vào hộp dựng mẫu 3.2.3 Bảo quản mẫu thử: Chuẩn bị lượng mẫu thử đủ cho yêu cầu tất phép xác định lượng mẫu thử không 100g Cho toàn mẫu thử vào hộp đựng mẫu đậy cẩn thận Bảo quản mẫu thử điều kiện cho giảm tối thiểu biến đổi thành phần mẫu, đặc biệt ý tránh tiếp xúc với ánh sáng tác động nhiệt độ Các mẫu phòng thử nghiệm phỉa bảo quản cho tránh thay đổi thành phần mẫu Mẫu chưa gửi đến phòng thử nghiệm phải bảo quản khoảng thòi gian thỏa thuận, thường tháng kể từ ngày lấy mẫu 3.3 Cách tiến hành: Cân khoảng 2.5g mẫu thử chuẩn bị, với độ xác 1mg cho vào chén nung trộn mẫu thử với 1g canxi carbonat Tro hóa lò nung nhiệt độ 5500C đến thu tro có màu trắng xám ( lượng nhỏ cacbon khơng ảnh hưởng đến q trình này) 33 Chuyển tồn tro vào bercher 250ml 20 – 50 ml nước cất Thêm acid HCl 6M đến hết sủi bọt thêm tiếp khoảng 10ml HCl 6M Đun nhẹ cho bay để tạo lớp oxit silic khơng hòa tan, làm nguội, thêm 10ml HNO3 1M đun sôi phút, không làm bay khô Để lắng gạn phần chất lỏng vào bình định mức 500ml (V đm), tráng rửa bercher nước cất nóng, Để nguội, định mức, lắc Tiến hành đo độ hấp thu: Pha loãng phần dịch lọc thu nước cất để có hàm lượng phospho khơng vượt q 40mg/L Dùng pipet hút 10ml dung dịch dùng pipet khác hút 10ml dung dịch thuốc thử molypdovanadat cho vào ống nghiệm, lắc để yên 10 phút Lắc để yên 10 phút 20oC Chuyển hỗn hợp thu vào cuvet đo độ hấp thu bước sóng 430nm Lập đường cong hiệu chuẩn : Dùng pipet chia vạch hút dung dịch phospho tiêu chuẩn để có dung dịch chuẩn có hàm lượng phospho 5mg/L, 10mg/L, 20mg/L, 30mg/L, 40mg/L Từ dung dịch tiêu chuẩn trên, dùng pipet hút dung dịch 10ml cho vào ống nghiệm Dùng pipet khác thêm vào ống nghiệm 10ml thuốc thử molybdovanadat Lắc để yên 10 phút 200C Đo độ hấp thu dung dịch bước sóng 430nm Vẽ đường cong hiệu chuẩn tọa độ hấp thu dựa theo hàm lượng phospho tương ứng dung dịch phospho tiêu chuẩn mg/L Đường cong tuyến tính với hàm lượng phospho từ – 40 mg/L quy trình lượng thuốc thử khác mẫu trắng không chứa phần mẫu thử Tiến hành thử mẫu trắng song song với việc xác định, sử dụng 3.4 Tính tốn kết 34 Hàm lượng phospho có mẫu P ( g / kg ) = C đc xVxVđm x10 −3 xF mxVm Cđc(mg/L): hàm lượng phospho tính từ đường chuẩn Vđm(mL): thể tích định mức ban đầu (500mL) V=Vm(mL): thể tích hút mẫu đo Abs F : hệ số pha loãng thuận nghịch mẫu thử m(g): khối lượng mẫu thử 3.5 Kết thực nghiệm: Ta Xây dựng đường chuẩn kết theo bảng sau: C(mg/L) Abs 0.0000 0.0440 10 0.0870 20 0.2171 30 0.4304 40 0.6448 Phương trình hồi quy tuyến tính 35 Hình 3.1: Đồ thị đường chuẩn hàm lượng phospho Nhận xét: Kết xây dựng đường chuẩn cho thấy, đường chuẩn P tuyến tính tối ưu với khoảng nồng độ – 40 mg/L Kết thực nghiệm thức ăn chăn nuôi: Bột cá STT m Vđm V Abs C(mg/L) F P(g/kg) 10 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 0.102 0.102 0.102 0.102 0.102 0.102 0.103 0.103 0.102 0.103 2.3639 2.3497 2.3611 2.3590 2.3473 2.3566 2.3683 2.3753 2.3590 2.3800 4.736 4.699 4.702 4.742 4.688 4.695 4.736 4.742 4.735 4.753 2.4954 2.5002 2.5110 2.4875 2.5038 2.5095 2.5001 2.5044 2.4911 2.5038 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 36 Kết thực nghiệm thức ăn chăn nuôi: Ngũ cốc STT m Vđm V Abs C(mg/L) F P(g/kg) 10 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 0.165 0.165 0.166 0.166 0.166 0.167 0.166 0.165 0.166 0.166 3.8159 3.8252 3.8415 3.8368 3.8485 3.8718 3.8462 3.8322 3.8438 3.8578 7.601 7.642 7.650 7.672 7.694 7.713 7.691 7.639 7.664 7.697 2.5102 2.5027 2.5109 2.5007 2.5011 2.5100 2.5005 2.5084 2.5076 2.5062 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 Với đề tài nguyên cứu “Xác định định hàm lượng phospho thức ăn chăn nuôi phương pháp trắc quang”, đề tài đạt kết sau: Đưa nhìn tổng quan nguyên tố phospho hợp chất nó: tính chất vật lý, tính chất hóa học, dạng tồn phospho tự nhiên, đưa số ứng dụng hàm lượng phospho tự nhiên Phân tích số mẫu thí nghiệm để xác hàm lượng phospho thức ăn chăn nuôi Từ kết đề tài, em xin có ý kiến đề xuất cho nghiên cứu tiếp theo: Tiếp tục nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng khác ảnh hướng tới hàm lượng phospho thức ăn chân nuôi.Khi ta ta có điều kiện tối ưu để qui trình sản xuất tốt đảm bảo hàm lượng phospho thức ăn chăn nuôi TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 [1] Bùi Thị Thuận, Nguyễn Phùng Tiến, Bùi Minh Đức ( 1991), Kiểm nghiệm chất lượng tra vệ sinh an toàn thực phẩm, Nhà xuất y học [2] Tailieu.vn [3] TCVN 6952 : 2001 TCVN 1525-2001 ISO 6497 39 ... 1.3Tính chất phospho 1.3.1 Tính chất vật lý Photpho có dạng thù hình xác định, photpho trắng, photpho tím hay gọi photpho đỏ photpho đen Các dạng thù hình khác tồn Phổ biến photpho trắng photpho đỏ,... tiếp xúc với photpho 11 1.4 Các hợp chất photpho Photpho hình thành hai hợp chất với hidro: photphin (PH 3) diphotphin (P2H4) Photpho hình thành ba oxit: điphotpho trioxit (P2O3), điphotpho tetraoxit... tan Axit photphorơ có tính khử mạnh chuyển thành axit photphoric Axit photphorơ tự oxi hóa khử trạng thái khan nung nóng tạo thành photphin axit photphoric H3PO3 + 3H3PO3 PH3 + 3H3PO4 Axit photphorơ