XÁC ĐỊNH THÔNG SỐ XỬ LÝ NHIỆT TRỪ RUỒI ĐỤC QUẢ PHƯƠNG ĐÔNG Bactrocera dorsalis Hendel (Diptera: Tephritidae) TRONG QUẢ XOÀI CÁT CHU BẰNG KỸ THUẬT XỬ LÝ HƠI NƯỚC NÓNG

Mục tiêu nghiên cứu: - Xác định khả năng kháng nhiệt trong quả xoài Cát Chu của Bactrocera dorsalis Hendel để tìm ra trong 5 giai đoạn trứng non - YE, trứng già - ME, sâu non tuổi 1 – L

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH

KHOA NÔNG HỌC

XÁC ĐỊNH THÔNG SỐ XỬ LÝ NHIỆT TRỪ RUỒI ĐỤC QUẢ PHƯƠNG

ĐÔNG Bactrocera dorsalis Hendel (Diptera: Tephritidae)

XÁC ĐỊNH THÔNG SỐ XỬ LÝ NHIỆT TRỪ RUỒI ĐỤC QUẢ PHƯƠNG

ĐÔNG Bactrocera dorsalis Hendel (Diptera: Tephritidae)

L ỜI CẢM ƠN

Trân trọng cảm ơn:

- Ban giám hiệu trường Đại Học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh

- Ban chủ nhiệm khoa Nông học cùng tất cả các thầy cô giảng viên khoa Nông

học đã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong suốt khóa học

- Ban giám đốc Trung tâm kiểm dịch thực vật sau nhập khẩu II

- Thầy Lê Cao Lượng – Bộ môn Bảo vệ thực vật – Khoa Nông học – Trường Đại

Học Nông Lâm đã tận tình hướng dẫn và truyền đạt kinh nghiệm quí báu

- TS.Nguyễn Hữu Đạt – Giám đốc Trung tâm kiểm dịch thực vật sau nhập khẩu

II đã truyền đạt nhiều kinh nghiệm, tận tình hường dẫn và tạo điều kiện thuận

lợi cho tôi thực hiện đề tài

- Th.S Nhan Minh Uyên, anh Chu Hồng Châu, chị Võ Thị Bảo Trang, và các anh chị trong Trung tâm kiểm dịch thực vật sau nhập khẩu II đã tận tình giúp đỡ

và hướng dẫn tôi trong quá trình thực hiện đề tài

- Tập thể lớp DH08BV luôn bên cạnh giúp đỡ và là nguồn động viên tinh thần tôi trong suốt 4 năm đại học

Sau cùng con xin thành kính khắc ghi công ơn của Cha mẹ đã nuôi dưỡng, dạy dỗ và luôn ở bên con động viên tinh thần và tạo điều kiện tốt nhất để con có được thành quả như ngày hôm nay

Tp.Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2012

HỒ THỊ BÍCH NGỌC

i

HỒ THỊ BÍCH NGỌC, Trường Đại Học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, tháng 08 năm

2012 Đề tài “Xác định thông số xử lý nhiệt trừ ruồi đục quả Phương Đông

Bactrocera dorsalis Hendel (Diptera: Tephritidae) trong quả xoài Cát Chu bằng

kỹ thuật xử lý hơi nước nóng” được thực hiện tại Trung Tâm Kiểm Dịch Thực Vật

Sau Nhập Khẩu II, từ tháng 02 đến tháng 06 năm 2012

Mục tiêu nghiên cứu:

- Xác định khả năng kháng nhiệt trong quả xoài Cát Chu của Bactrocera dorsalis

Hendel để tìm ra trong 5 giai đoạn (trứng non - YE, trứng già - ME, sâu non tuổi 1 – L1, sâu non tuổi 2 – L2, sâu non tuổi 3 – L3) thì giai đoạn nào kháng nhiệt nhất, đồng thời ước tính mức nhiệt độ tối ưu nhất

- Với mức nhiệt độ và giai đoạn vừa ước tính được, tiếp tục thực hiện thí nghiệm

tiên đoán thông số xử lý nhiệt sau cùng của Bactrocera dorsalis Hendel

- Cuối cùng, tiến hành thí nghiệm kiểm chứng với thông số được xác định ở thí nghiệm tiên đoán, thí nghiệm này được thực hiện trên 30.000 cá thể

Kết quả đạt được:

- Trong thí nghiệm đánh giá khả năng kháng nhiệt trong quả của RĐQ

Bactrocera dorsalis Hendel, thì giai đoạn L1 là giai đoạn kháng nhiệt cao nhất

so với 4 giai đoạn còn lại YE, ME, L2, L3 với độ tin cậy 95%

- Xác định được thông số xử lý nhiệt diệt trừ hoàn toàn ruồi đục quả B dorsalis

trong quả xoài Cát Chu là 46,50C với thời gian xử lý là 20 phút

ii

Trang

TÓM TẮT i

MỤC LỤC ii

DANH SÁCH BẢNG v

DANH SÁCH HÌNH vii

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ixx

Chương 1 GIỚI THIỆU 1

1.1Đặt vấn đề 1

1.2Mục đích 2

1.3Yêu cầu 2

1.4Giới hạn đề tài 3

Chương 2TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

2.1 Thành phần, phân bố và tác hại của ruồi đục quả xoài trên thế giới 4

2.2 Thành phần ruồi đục quả hại xoài ở Việt Nam 6

2.3 Tổng quan về ruồi đục quả Phương Đông Bactrocera dorsalis Hendel 8

2.4 Xoài Cát Chu ở Việt Nam 11

2.5 Các phương pháp xử lý sau thu hoạch 13

2.5.1 Biện pháp hóa học 13

iii

2.5.2 Biện pháp vật lý 14

2.5.2.1 Xử lý chiếu xạ 14

2.5.2.2 Xử lý nhiệt 14

2.6 Trình tự các bước nghiên cứu theo thủ tục kiểm dịch thực vật quốc tế cho một xử lý nhiệt nóng ruooig đục quả 16

Chương 3PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19

3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 19

3.2 Vật liệu nghiên cứu 19

3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 19

3.2.2 Quả xoài 19

3.2.3 Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm 21

3.3 Nội dung nghiên cứu 22

3.4 Phương pháp nghiên cứu 23

3.4.1 Phương pháp xác định khả năng kháng nhiệt trong quả của Bactrocera dorsalis Hendel 23

3.4.2 Phương pháp tiên đoán thông số xử lý nhiệt sau cùng của Bactrocera dorsalis Hendel 30

3.4.3 Phương pháp thực hiện thí nghiệm kiểm chứng 34

Chương 4KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37

4.1 Xác định khả năng kháng nhiệt trong quả của Bactrocera dorsalis Hendel 37

4.2 Tiên đoán thông số xử lý nhiệt sau cùng của Bactrocera dorsalis Hendel 40

iv

4.3 Thí nghiệm kiểm chứng 44

Chương 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 45

TÀI LIỆU THAM KHẢO 48

PHỤ LỤC 48

v

Bảng 2.1 Chế độ chiếu sáng trong Biotron nuôi ruồi 17Bảng 2.2 Công thức thức ăn nhân tạo nuôi các pha tiền hóa nhộng của ruồi đục quả.18

Bảng 3.1 Thời gian từ lúc đẻ trứng để đạt được các giai đoạn trong thí nghiệm của

RĐQ Phương Đông Bactrocera dorsalis Hendel 24

Bảng 3.2 Mức nhiệt độ - thời gian và số quả trong thí nghiệm thăm dò 31

Bảng 3.3 Mức nhiệt độ - thời gian và số quả trong thí nghiệm tiên đoán thông số xử lý nhiệt 33Bảng 3.4 Số quả và số lần lặp lại của thí nghiệm kiểm chứng ở 46,5 0

C – 20’ 35

Bảng 4.1 Tỉ lệ chết hiệu chỉnh trung bình (%) của trứng và sâu non B.dorsalis sau xử

lý hơi nước nóng 37

Bảng 4.2: Giá trị LT 50, LT 95, và LT 99,9968 ở 5 giai đoạn phát triển của Bactrocera

dorsalis Hendel (Đơn vị tính: 0

C) của LLL1 38Bảng 4.3: Giá trị LT 50, LT 95, và LT 99,9968 ở 5 giai đoạn phát triển của

Bactrocera dorsalis Hendel (Đơn vị tính: 0

C) của LLL2 38

Bảng 4.4: Giá trị LT 50, LT 95, và LT 99,9968 ở 5 giai đoạn phát triển của

Bactrocera dorsalis Hendel (đơn vị tính: 0C) của LLL3 39

Bảng 4.5 Tỷ lệ chết mong đợi của L1 B.dorsalis Hendel ở thí nghiệm thăm dò cho thí

nghiệm tiên đoán thông số xử lý nhiệt sau cùng 41Bảng 4.6 Tỉ lệ chết mong đợi của L1 Bactrocera dorsalis Hendel ở các mức nhiệt độ

và thời gian khác nhau để tiên đoán thông số xử lý nhiệt ở LLL1 42

vi

Bảng 4.7 Tỉ lệ chết mong đợi của L1 Bactrocera dorsalis Hendel ở các mức nhiệt độ

và thời gian khác nhau để tiên đoán thông số xử lý nhiệt ở LLL2 43

Bảng 4.8 Tỉ lệ chết mong đợi của L1 B.dorsalis ở mức nhiệt độ 46,5 0

C – 20’ trong thí nghiệm kiểm chứng 44

Bảng 4.10 Xử lý hơi nước nóng trừ RĐQ trên xoài 46

vii

DANH SÁCH HÌNH

Hình 3.1 Giai đoạn trứng của RĐQ B.dorsalis 19

Hình 3.2 Giai đoạn sâu non tuổi 1 của RĐQ B.dorsalis 19

Hình 3.3 Sâu non tuổi 2 của RĐQ B.dorsalis 20

Hình 3.4 Sâu non tuổi 3 của RĐQ B.dorsalis 20

Hình 3.5 Giống xoài Cát Chu a – xoài ở vườn, b – xoài sau khi thu mua 21

Hình 3.6 Dụng cụ thí nghiệm 22

Hình 3.7 Dụng cụ thí nghiệm 22

Hình 3.8 Sắp xếp quả của thí nghiệm xác định khả năng kháng nhiệttrong quả 25

Hình 3.9 Thăm dò sâu non để cấy nhiễm vào quả 26

Hình 3.10 Thu trứng để thăm dò cấy nhiễm vào quả 26

Hình 3.11 Cấy nhiễm trứng vào quả xoài Cát Chu 27

Hình 3.12 Cấy nhiễm sâu non vào quả xoài Cát Chu 27

Hình 3.13 Dùng băng keo vải dán quả sau khi cấy nhiễm 27

Hình 3.14 Cắm que cảm biến nhiệt vào quả Probe trước khi chạy máy xử lý để theo dõi nhiệt độ ở tâm quả xoài 28

Hình 3.15 Xếp quả vào buồng để chạy máy xử lý hơi nước nóng 28

Hình 3.16 Đặt quả vào hộp sau khi xử lý nhiệt 29

viii

Hình 3.17 Biotron trữ quả sau khi xử lý nhiệt ở thí nghiệm xác định khả năng kháng

nhiệt trong quả của B.dorsalis 29

Hình 3.18 Kiểm tra tỉ lệ chết sau thí nghiệm 30

Hình 3.19 Sắp xếp quả trong thí nghiệm thăm dò 32

Hình 3.20 Bảo quản quả sau khi cấy nhiễm ở thí nghiệm tiên đoán 34

Hình 3.21 Làm mát quả sau xử lý nhiệt 36

Biểu đồ 4.1 Hiệu quả xử lý đánh giá khả năng kháng nhiệt của RĐQ B.dorsalis trong quả xoài Cát Chu 40

ix

CABI Center for Agriculture and Bioscience International – Trung tâm

nghiên cứu Nông nghiệp và Khoa học Sinh học Quốc tế

CS Check stage – kiểm tra giai đoạn phát triển của RĐQ

L1 Larvae 1 – Sâu non tuổi 1

L2 Larvae 2 – Sâu non tuổi 2

L3 Larvae 3 – Sâu non tuổi 3

LT 50 Lethal time of temperature 50 – Mức nhiệt độ gây chết 50% số cá

ME Mature egg – trứng già

Probe Quả có trọng lượng trung bình dùng để cắm que cảm ứng biến nhiệt

YE Young egg – trứng non

VHT Vapor Heat Treament

1

Chương 1

1.1 Đặt vấn đề

Xoài (Mangifera indica L.) thu ộc họ Anacardiacecae là một trong những giống

cây ăn quả nhiệt đới được ưa chuộng nhất ở Việt Nam và được trồng nhiều ở Nam Bộ Trong số những giống xoài nổi tiếng trong nước thì giống xoài Cát Chu phù hợp với

thị hiếu của người tiêu dùng và có ưu thế lựa chọn để xuất khẩu do có nhiều đặc tính tốt như dễ trồng, dễ ra hoa, đậu quả, cho sản lượng cao và ổn định

Tuy nhiên, số lượng sâu bệnh gây hại ở các vùng trồng xoài trên thế giới được ghi nhận lên đến 260 loài côn trùng, nhện (Penã và ctv., 1998) và 25 loài nấm bệnh (CABI, 2007) Trong đó ruồi đục quả (RĐQ) là dịch hại quan trọng nhất, là đối tượng

kiểm dịch thực vật của tất cả các nước có nhu cầu nhập khẩu hoa quả tươi của Việt Nam như: Hàn Quốc, Nhật Bản, Mỹ, New Zealand, Úc (JICA-IPQTF Project, 2006) Theo kết quả thực hiện dự án quản lý ruồi hại quả ở Việt Nam (ICP/VIE/8823/1999 – 2000), đã phát hiện và giám định được 30 loài ruồi hại quả ở Việt Nam Trong số này,

ruồi đục quả Phương Đông Bactrocera dorsalis Hendel chiếm tỷ lệ cao nhất và phá hại

nghiêm trọng tại các vùng trồng cây ăn quả RĐQ Phương Đông còn là đối tượng kiểm

dịch thực vật của các thị trường khó tính như Mỹ, Nhật, Hàn Quốc, New Zealand, Úc, Chi Lê … ngoài ra ruồi đục quả Phương Đông Bactrocera dorsalis Hendel cũng là loài

có khả năng chống chịu nhiệt cao nhất trong bốn loài ruồi đục quả phổ biến ở Việt Nam, theo kết quả thí nghiệm đánh giá khả năng chống chịu nhiệt trần của bốn loài ruồi đục quả (Dương Hoài Ân, 2011)

Vì thế để xuất khẩu được trái cây tươi nói chung và xoài nói riêng sang các thị trường khó tính như: Úc, New ZeaLand, Mỹ, Hàn Quốc, Nhật Bản thì đòi hỏi chúng ta

2

phải tiêu diệt triệt để ruồi đục quả Có nhiều giải pháp xử lý RĐQ để xuất khẩu, trong

đó biện pháp xử lý diệt trừ RĐQ sau thu hoạch đã được đề xuất và một trong số những

biện pháp hiệu quả nhất đó là biện pháp xử lý hơi nước nóng Mặt khác, do khả năng chống chịu nhiệt trần của RĐQ và khả năng chống chịu nhiệt ở trong quả đôi khi có sự khác biệt Do đó các thí nghiệm về xử lý hơi nước nóng trừ RĐQ luôn phải được thực

hiện việc đánh giá khả năng chống chịu nhiệt của RĐQ ở điều kiện nhiệt trần (cá thể thí nghiệm tiếp xúc trực tiếp với nhiệt độ xử lý) và điều kiện trong quả

Kế thừa kết quả của thí nghiệm “Đánh giá khả năng chống chịu nhiệt trần của

bốn loài ruồi đục quả Bactrocera carambolae Drew và Hancock, Bactrocera correcta

Bezz, Bactrocera cucurbitae Coquillett Bactrocera dorsalis Hendel” đã được thực

hiện năm 2011 và để hoàn chỉnh trình tự xử lý ruồi đục quả bằng hơi nước nóng như

giải pháp kiểm dịch thực thực vật trừ ruồi đục quả phục vụ cho xuất khẩu, đề tài “Xác

định thông số xử lý nhiệt trừ ruồi đục quả Phương Đông Bactrocera dorsalis

Hendel (Diptera: Tephritidae) trong qu ả xoài Cát Chu bằng kỹ thuật xử lý hơi nước nóng” được thực hiện

1.2 Mục đích

Xác định thông số xử lý nhiệt trừ ruồi đục quả Phương Đông Bactrocera

dorsalis Hendel trong quả xoài Cát Chu để hoàn chỉnh trình tự xử lý nhiệt nóng nhằm

diệt trừ RĐQ và mở cửa cho việc xuất khẩu xoài Cát Chu đi các nước

1.3 Yêu cầu

Đầu tiên, xác định khả năng kháng nhiệt trong quả xoài Cát Chu của Bactrocera

dorsalis Hendel để xác định được mức nhiệt độ tối ưu nhất Với mức nhiệt độ vừa xác định, tiếp tục thực hiện thí nghiệm tiên đoán thông số xử lý nhiệt sau cùng của

Bactrocera dorsalis Hendel Cuối cùng, thực hiện thí nghiệm kiểm chứng với thông số được xác định ở thí nghiệm tiên đoán, thí nghiệm này được thực hiện trên 30.000 trường hợp

4

Chương 2

2.1 Thành ph ần, phân bố và tác hại của ruồi đục quả xoài trên thế giới

Thành ph ần, phân bố của ruồi đục quả xoài trên thế giới

Xoài là một trong những loại quả nhiệt đới được ưa chuộng nhất bởi màu sắc

hấp dẫn, vị thơm ngon, giá trị dinh dưỡng cao Vì thế, diện tích trồng và sản lượng xoài trên thế giới ngày một gia tăng, cùng với việc mở rộng sản xuất thì sâu bệnh hại xoài cũng gia tăng Thành phần gây hại được ghi nhận là 260 loài côn trùng, nhện (Penã và ctv., 1998) và 25 loài nấm bệnh (CABI, 2007), trong đó RĐQ là dịch hại quan trọng nhất và gây thiệt hại nặng cho tất cả các vùng trồng xoài

Hầu hết các nước sản xuất xoài đều bị RĐQ gây hại nặng, trong số 48 loài RĐQ

được ghi nhận trên xoài thì có 8 loài thuộc giống Anastrepha, 30 loài thuộc giống

Bactrocera, 7 loài thu ộc giống Ceratitis, 2 loài thuộc giống Dirioxa và 1 loài thuộc

giống Toxotrypana (White và Harris, 1992) Tất cả các loài thuộc giống Dacus gần đây được xếp vào giống Bactrocera Những loài thuộc giống Bactrocera đều là dịch

hại quan trọng ở các vùng trồng xoài thuộc Đông bán cầu (châu Á và Thái Bình

dương) như B tryoni, B zonata, B dorsalis, B neohumeralis, B jarvisi và B

frauenfeldi Trong khi nh ững loài thuộc giống Anastrepha lại tập trung gây hại xoài ở

Tây bán cầu (từ miền Nam nước Mỹ tới Bắc Achentiana, và các đảo vùng Caribe) Các loài thuộc giống Ceratitis như Ceratitis cosyra, C rosa, C capitata và C catoirii gây

hại nhiều trên xoài ở châu Phi (Penã và ctv., 1998)

Tại các nước trồng xoài ở khu vực Châu Á, các loài ruồi đục quả xoài đều thuộc

giống Bactrocera Thành phần ruồi đục quả xoài của Thái Lan là Bactrocera

carambolae (Drew and Hancook), B correcta (Bezzi), B cucurbitae, B dorsalis

Hendel, B papayae, B tuberculata và B Zonata, c ủa Ấn Độ là B carambolae, B

5

correcta, B cucurbitae, B dorsalis, B cacayae và B zonata và c ủa Malaysia là B

carambolae, B cucurbitae, B dorsalis, B papayae, B occipitalis (CABI, 2007)

Tác h ại của ruồi đục quả xoài trên thế giới

- Tại Jabalpur, Madhya Praesh (Ấn Độ) điều tra năm 2001 cho thấy mức độ gây

hại của loài ruồi Bactrocera cucurbitae trên các giống mướp đắng biến động từ

12,08% đến 41,49% tùy giống (Yadav và ctv., 2003) Ở Micronesia, chỉ một loài RĐQ

được ghi nhận là B frauenfeldi nhưng xuất hiện rất phổ biến và gây hại nghiêm trọng

đối với nhiều loại quả Tỷ lệ nhiễm RĐQ này trên ổi là 91%, bơ 57%, mận 51%, khế 18%, xoài 8%, cam 4 % (Leblanc, 1997) Ở Tonga ghi nhận có 6 loài RĐQ trong đó B

facialis là gây hại nghiêm trọng nhất, tỷ lệ nhiễm đối với ớt ngọt là 97 – 100%, ớt cay

là 89 – 97% Tỷ lệ nhiễm hai loài ruồi B facialis và B kirki trên ổi hơn 90% (Tupou

rất nghiêm ngặt đối với việc nhập khẩu trái cây từ các nước khác vào nước họ để tránh việc nhiễm dịch ruồi ảnh hưởng đến sản xuất nông nghiệp của nước họ (JICA – IPQTF project, 2006)

6

2.2 Thành phần ruồi đục quả hại xoài ở Việt Nam

Thành ph ần ruồi đục quả được phát hiện ở Việt Nam

Theo kết quả thực hiên dự án quản lý RĐQ ở Việt Nam của Viện Bảo vệ thực vật

(Drew và ctv., 1999-2000), tại Việt Nam có 30 loài RĐQ thuộc 2 giống Dacus và

Bactrocera , trong đó Bactrocera có 5 giống phụ là Asiadacus, Zeugodacus,

Gymodacus, Sinodacus và Bactrocera Gi ống Bactrocera có 27 loài thuộc và giống

Dacus v ới giống phụ Callantra có 3 loài

Khu vực miền Bắc Việt Nam có 22 loài (20 loài thuộc giống Bactrocera, trong

đó giống phụ Bactrocera có 14 loài, các giống phụ còn lại có 6 loài; 2 loài thuộc giống

Dacus và gi ống phụ Callantra) Khu vực miền Nam có 18 loài (có 16 loài của giống

Bactrocera , trong đó giống phụ Bactrocera có 10 loài, các giống phụ còn lại có 6 loài

và 2 loài của giống Dacus và giống phụ Callantra) Những loài chỉ có mặt ở miền Nam là: BactroceraAsiadacus apicalis, B carambolae, B melastomatos, B zonata, B

Gymodacus calophylli, B Sinodacus hochii, B.Zeugodacus isolata và Dacus Callantra tenebrosus

Ba loài B dorsalis, B correcta, B cucurbitea là ba loài ruồi gây hại chủ yếu ở

Việt Nam, chiếm trên 95% cá thể ruồi đực thu được ở 5 loại bẫy pheromon đặt ở tất cả các tỉnh, trong đó B dorsalis chiếm tỉ lệ vào bẫy cao nhất (> 40%) (Drew, 2000) Mức

độ thiệt hại của 3 loài ruồi này phụ thuộc vào thời gian gây hại chính của ruồi trên quả

và vào giống cây ăn quả

Theo Viện nghiên cứu cây ăn quả Miền Nam, thiệt hại do RĐQ gây ra đối với 7

loại quả ở Tiền Giang thì ổi có 94% số trái bị nhiễm; gioi (Eugenia javanica), 76,33%

số trái bị nhiễm; khổ qua, 30% số trái bị nhiễm (Huỳnh Trí Đức, 2001) Năm 1999, đào nhiễm ruồi ở Sapa tăng dần từ 6% (tháng 6) lên 65% (cuối vụ); năm 2000, số quả đào bị hại là 21% Trên cam, tỷ lệ quả bị hại thấp hơn, cao nhất là 6 % (tháng 8) (Drew, 2000)

7

Thành ph ần ruồi đục quả hại xoài ở Việt Nam

Theo điều tra của Drew và ctv (1999-2000), trên xoài ở miền Đông Nam Bộ và đồng bằng Sông Cửu Long chỉ phát hiện hai loài RĐQ là B dorsalis và B correcta trong đó loài B dorsalis chiếm ưu thế (do tỉ lệ ruồi vào bẫy cao hơn hẳn B correcta)

Thành phần RĐQ vào bẫy tại khu vực trồng xoài ở các tỉnh phía Nam có 5 loài:

B dorsalis Heldel, B correcta (Bezzi), B carambolae, B vesbascifoliae và B zonata

Tuy nhiên, chỉ có hai loài B dorsalis và B correcta là gây hại quả xoài (SOFRI, 2007; Nguyễn Hữu Đạt, 2008)

Theo đánh giá của các chuyên gia Nhật trong dự án JICA-IPQTF, quả xoài Việt Nam muốn xuất khẩu được phải nghiên cứu trừ diệt được 4 loài ruồi B dorsalis, B

correcta, B carambolae và B cucurbitae

K ết quả thí nghiệm khả năng chống chịu nhiệt trần của 4 loài ruồi đục quả

Bactrocera dorsalis Hendel, B correcta, B cucurbitae, B carambolae được thực

hi ện năm 2011 (Dương Hoài Ân)

Khi so sánh về mỗi giai đoạn của bốn loài RĐQ, thì hai loài RĐQ B dorsalis và

B correcta là hai loài có kh ả năng kháng nhiệt cao nhất Tiếp đến là loài B

carambolae ch ống chịu nhiệt kém hơn, và cuối cùng là loài B cucurbitae chống chịu

nhiệt kém nhất

Hai giai đoạn trứng già và sâu non tuổi 1 là hai giai đoạn tiền nhộng của ruồi đục quả

có khả năng chịu nhiệt cao nhất Sâu non tuổi 1 của B correcta có khả năng chịu nhiệt

cao nhất

Giai đoạn trứng già của B dorsalis có khả năng chống chịu nhiệt cao nhất khác

biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê so với giai đoạn L1 của B correcta Như vậy, giai đoạn trứng già của loài B dorsalis là giai đoạn chống chịu nhiệt nhất của loài

chống chịu nhiệt nhất

ngực giữa và 2 vây sườn hông màu vàng Lưng ngực có lông cứng ở trước cánh, 2 lông cứng trước mảnh thuẫn, mảnh thuẫn hình tam giác màu vàng Phần bụng hình bầu dục màu nâu sẫm với các đốt rõ rệt, mặt lưng đốt bụng III – V có vân đen tạo hình chữ

T Con cái có ống đẻ trứng dài 1,4 – 1,6 mm với đỉnh nhọn và có 4 cặp lông; 2 cặp dài,

2 cặp ngắn ở đỉnh của ống đẻ trứng

Tr ứng

Trứng hình hạt gạo với một đầu tròn và một đầu hơi nhọn, màu trắng kem Trong tự nhiên, trứng được đẻ thành ổ từ 5 – 10 trứng vào trong trái, một con cái có

thể đẻ từ 50 – 60 trứng, tối đa có thể đẻ đến 200 trứng (Nguyễn Thị Chắt, 2006)

- Trứng non: phôi phát triển đạt 10 – 30%

- Trứng già: phôi phát triển trên 70%

Sâu non

Sâu non của RĐQ là sâu non không chân dạng dòi, hình ống với đầu nhọn và phần đuôi tròn láng, sâu non có 3 tuổi Đầu sâu non nhỏ và có móc miệng, đây là cơ sở

để phân loại tuổi sâu non

- Sâu non tuổi 1: móc ở miệng mềm, chưa hóa sừng và có 3 gai mềm; chưa có lỗ thở trước, lỗ thở sau nhỏ chỉ mới có hai khe mở dạng tròn

- Sâu non tuổi 2: móc ở miệng cứng, đã hóa sừng đồng thòi 3 gai đã cứng; lỗ thở trước đã xuất hiện nhưng phần gốc còn hẹp, lỗ thở sau có 3 hạt mở dạng tròn

9

- Sâu non tuổi 3: móc ở miệng cứng, đã hóa sừng, chỉ còn lại 2 gai ngoài (đã mất

đi một gai nằm ở trong cùng) Lỗ thở trước có phần gốc rộng, lỗ thở sau có khe

hở hình hạt đậu dài

Hệ thống khí quản chạy từ đốt ngực thứ I đến đốt bụng cuối (đốt VIII); ở đốt

ngực thứ nhất có 2 vùng tập trung các lỗ thở ở 2 bên sườn đốt, mỗi vùng có 8 – 12 lỗ

thở; ở đốt bụng cuối chỉ có một vùng để tập trung các lỗ thở ở sát hậu môn; vùng này

có hai cụm nhỏ, mỗi cụm nhỏ có 3 lỗ thở hình hạt đậu và trên từng lỗ thở có môi đóng

mở tạo thành một khe hở Các cụm lông hướng về mặt bụng và mặt lưng có 17 – 20 lông

Nh ộng

Nhộng thuộc loại nhộng bọc, với hai đầu tròn màu nâu, có hình bầu dục dài 6 –

8 mm, rộng 2 – 3 mm Khi vũ hóa vỏ nhộng của RĐQ sẽ tách ngang tạo thành nắp ở phía trên đầu (Đặng Đăng Chương, 2003)

2.3.2 Đặc điểm sinh học

Giai đoạn trứng

Giai đoạn trứng được tính từ lúc bắt đầu thu trứng đến khi trứng bắt đầu nở,

hiểu cách khác là giai đoạn phôi phát triển Sự phát triển của phôi sẽ kết thúc khi sâu non hình thành và chiếm hết vị trí trong trứng, sau đó phôi sử dụng chất dinh dưỡng

cuối cùng chuẩn bị làm nứt vỏ để sâu non chui ra Thời điểm vỏ trứng chuẩn bị nứt để sâu non tuổi 1 chui ra gọi là giai đoạn phôi phát triển 100% (Corcoran và Heather, 1998) Theo Corcoran (Peterson, 2000b), cho biết trứng ruồi ở thời điểm đạt 60% - 80% giai đoạn phát triển của phôi trứng tương ứng với lúc trứng đã có lớp vỏ phôi,

vỏ phôi có cấu tạo tế bào bảo vệ phôi vì thế ở giai đoạn này trứng có khả năng chịu nhiệt cao hơn bình thường

Theo nghiên cứu của Nguyễn Hữu Đạt (2007) khi nhân nuôi RĐQ Bactrocera

dorsalis Hendel trong điều kiện hệ thống nhân nuôi tự động ở 280C ẩm độ 70% R.H thì thời gian phôi phát triển đầy đủ 100% là 36 giờ ± 19 phút, 80% giai đoạn phát triển

của phôi trứng là 26 giờ ± 12 phút, 60% giai đoạn phát triển của phôi trứng là 22 giờ

10

± 9 phút và thời gian trứng bắt đầu nở (10% số trứng nở trong tổng số trứng thực nở)

là 29 giờ, thời gian 50% số trứng nở trong tổng số trứng thực nở là 32 giờ

Giai đoạn sâu non

Sâu non màu trắng, không có chân dạng dòi, có miệng nằm ở phía đầu nhọn, sâu non có 3 tuổi Sau một thời gian phát triển, cơ thể sâu non phát triển đến một mức

độ nhất định và bị hạn chế bởi lớp da cuticula Để trưởng thành về kích thước sâu non cần phải lột bỏ lớp xương ngoài này và thay vòa nó bằng một lớp xương khác Ngay sau khi lột xác, lớp biểu bì mới của cơ thể côn trùng chưa bị xương hóa, cơ thể có thể

co giãn được và tăng trưởng về kích thước Ngay khi lột xác tuyến da tiết men có tác dụng bảo vệ lớp sáp của biểu bì và lớp biểu bì mới hoàn toàn không có khả năng thẩm

thấu với nhiều chất lỏng nhất là nước và đây là khoảng thời gian một tuổi sâu non có

thời gian chịu nhiệt cao hơn bình thường (Nguyễn Thị Chắt, 2000)

Theo Nguyễn Hữu Đạt (2007) giai đoạn sâu non của RĐQ Bactrocera dorsalis Hendel trong điều kiện nhân nuôi tự động 280

C kéo dài 130 giờ và kết thúc sau 178 giờ Thời gian xuất hiện các tuổi sâu non được tính từ lúc thu trứng như sau:

- Sâu non tuổi 1 (L1) là 33 giờ ± 2 giờ

- Sâu non tuổi 2 (L2) là 67 giờ ± 2 giờ

- Sâu non tuổi 3 (L3) là 91 giờ ± 2 giờ

Giai đoạn trưởng thành

Theo Đặng Đăng Chương (2003), RĐQ Phương Đông Bactrocera dorsalis

Hendel thường vũ hóa từ 7 giờ sáng cho đến 17 giờ chiều và tập trung vũ hóa từ 9 giờ cho đến 11 giờ sáng

tuổi thọ con trưởng thành kéo dài từ 1 - 3 tháng, tùy điều kiện sinh thái

Vòng đời Bactrocera dorsalis Hendel (56-104 ngày):

- Giai đoạn ủ trứng kéo dài 1 - 2 ngày

- Giai đoạn sâu non kéo dài 6 - 8 ngày

- Giai đoạn nhộng kéo dài 8 - 10 ngày

Vòng đời Bactrocera dorsalis Hendel trong quả xoài cát chu:

Trong trường hợp cấy trứng là 23,08 ngày ± 0,04 ngày, thời gian từ trứng đến sâu non tuổi 1 là 34 giờ ± 1 giờ, thời gian từ trứng đến sâu non tuổi 2 là 53,33 giờ ± 1,53 giờ, thời gian từ trứng đến sâu non tuổi 3 là 93,33 giờ ± 1,53 giờ(thời gian sâu non là 94,83 giờ), thời gian từ trứng đến nhộng là 134,67 giờ ± 0,58 giờ, thời gian tiền

đẻ trứng là 9,67 ngày ± 0,58 ngày (Lê Nguyễn, 2011)

2.4 Cây xoài ở Việt Nam

2.4.1 Gi ới thiệu chung

Cây xoài thuộc họ đào lộn hột Anacaridaceae, có nguồn gốc ở Đông Bắc Ấn

Độ, Bắc Myanmar, ở vùng đồi núi chân dãy Hymalaya, sau đó lan sang Nam Trung

Quốc và các nước Đông Nam Á Họ này gồm 62 chi, phần lớn cây ở dạng thân gỗ hoặc bụi có quả là hạt hạch, trong đó có chi Mangifera L với 62 loài, loài Mangifera

indica L là một trong số đó và tất cả các giống xoài được trồng trên thế giới đều thuộc loài này Hiện nay cây xoài được xem là một trong những cây ăn quả quan trọng trong nghề trồng cây ăn quả trên thế giới, thị trường xoài trên thế giới ngày càng phát triển,

vì vậy sản xuất xoài thương mại phục vụ cho xuất khẩu đang được nhiều nước quan tâm Ở Việt Nam, mặc dù xoài được trồng khắp nơi trên cả nước nhưng vùng sản xuất xoài chủ yếu tập trung ở các tỉnh từ Bình Định trở vào các tỉnh phía Nam Tập trung nhiều vào các tỉnh Tiền Giang, Vĩnh Long, Đồng Tháp, Cần Thơ, Bến Tre, Hậu Giang,

Giống xoài Cát Chu dễ xử lý ra hoa và cũng dễ đậu trái, đồng thời giống xoài này có thịt dày, hạt nhỏ, không xơ, vị ngọt, hương thơm được người tiêu dùng ưa chuộng Tuy không phải là cây họ đậu nhưng số lượng acid min cần thiết có rất nhiều, giống xoài này được trồng nhiều ở thị xã Cao Lãnh, tỉnh Đồng Tháp Cây cho trái tự nhiên vào khoảng tháng 12 dương lịch, nhưng các nhà vườn thường xiết nước cho cây

ra hoa sớm hơn, ra hoa trước tết 3 – 4 tháng, tết vừa đến thì trái xoài vừa chín, mang lại hiệu quả kinh tế cao Xoài Cát Chu có năng suất rất cao, thích hợp với nhiều loại đất: đất phù sa ven sông Cửu Long, đất phèn ở miền Tây Nam Bộ hay đất cát gò ở

miền Đông cây vẫn cho trái tốt

2.4.2 Đặc điểm sinh trưởng, phát triển của cây xoài

2.4.2.1 R ễ

Cây xoài có bộ rễ ăn rất sâu và khỏe, nhất là hệ thống rễ cọc, rễ có thể mọc sâu

5 – 6 m nhưng phần lớn tập trung ở tầng đất 0 – 50 cm Nhờ có bộ rễ ăn sâu và phân

bố rộng mà cây xoài được coi là cây có khả năng chịu hạn rất tốt, ở nhiều vùng có thời gian hạn dài tới 4 – 5 tháng nhưng cây xoài vẫn phát triển tốt

2.4.2.2 Thân và tán cây

Cây xoài thuộc loại đại mộc, sinh trưởng khỏe nên cây to và tán lớn, xanh quanh năm; tán có hình bầu dục, hình tháp hoặc hình cầu tùy theo giống Thông thường cây cao 10 – 15 m với độ lớn tán tương tự, những cây xoài ghép thường có chiều cao thấp hơn và tán rộng hơn so với những cây nhân giống bằng hạt

13

2.4.2.3 Lá và cành

Lá đơn, mọc vòng có cuống và luôn phình to ở đáy, lá có nhiều hình dạng khác nhau tùy theo giống: dài, thon dài, bầu Mỗi đợt lộc kéo dài từ 3 – 4 tuần tùy vào tuổi cây, điều kiện khí hậu, chế độ dinh dưỡng, cây có thể ra từ 1 – 5 đợt lộc trong một năm Lá non ra trên các chồi mới, mọc theo chùm, mỗi chùm có từ 7 – 12 lá Màu sắc

lá non là một đặc điểm đặc trưng cho giống, có thể là màu tím đỏ, tím, màu hồng phơn phớt nâu Lá non đạt kích thước ổn định 2 tuần sau khi mọc lá và chuyển lục hoàn toàn sau 35 ngày (Trần Thế Tục, 1998)

2.4.2.5 Chùm hoa và hoa

Hoa xoài mọc thành chùm ở ngọn cành, chùm hoa to và dài 20 – 40 cm Cũng

có thể gặp một chùm hoa hỗn hợp vừa có hoa vừa có lá nhỏ hơn bình thường Trên

một chùm hoa thường có hoa đực và hoa lưỡng tính, hoa lưỡng tính thường có một nhụy và một nhị hữu dục, đôi khi cũng gặp hoa có hai nhị hữu dục ; còn hoa đực chỉ

có một nhị hữu dục, bầu nhụy bị thoái hóa

Tỷ lệ hoa lưỡng tính là một chỉ tiêu quan trọng ảnh hưởng đến khả năng đậu quả ban đầu của giống và cũng là đặc điểm đặc trưng cho giống Tỷ lệ hoa lưỡng tính

của một giống liên quan trực tiếp đến tỷ lệ đậu quả ban đầu, nhưng có ý nghĩa đối với

tỷ lệ đậu quả hữu hiệu vì cây xoài rụng quả rất nhiều trong suốt quá trình sinh trưởng

của quả và đây là điểm đặc trưng cho giống Ví dụ, giống Langra có tỷ lệ hoa lưỡng tính rất cao nhưng giống Dashehari lại có tỷ lệ đậu quả cuối cùng cao hơn mặc dù tỷ lệ hoa lưỡng tính ở giống này chỉ bằng một nữa ở Langra Một đặc điểm nữa là trong số các hoa lưỡng tính ở xoài chỉ có 5 – 10 % hoa được coi là hoàn hảo, nghĩa là hoa có

bầu nhụy phát triển bình thường và đây có thể là một nguyện nhân đậu quả thấp ở cây xoài

2.5 Các phương pháp xử lý sau thu hoạch

2.5.1 Biện pháp hóa học

Biện pháp dùng thuốc trừ sâu như fenthion và dimethoat để xử lý trái cây sau thu

hoạch đã được sử dụng tại Úc để trừ ruồi Queensland và Bactrocera musae (Heither,

2.5.2 Biện pháp vật lý

2.5.2.1 Xử lý chiếu xạ

Chiếu xạ là một quá trình xử lý hàng hóa bằng năng lượng ion và bao gồm cả sóng radio, radar, vi sóng, tia hồng ngoại, tia cực tím, tia X và tia gramma Khi giai đoạn trứng hoặc sâu non bị chiếu sạ tùy theo liều lượng, RĐQ không thể vũ hóa được

hoặc sự vũ hóa không được bình thường hoặc trưởng thành sau đó không thể sinh sản được (bất dục) (Arthor và Burditt, 1994)

Năm 2006, Bộ nông nghiệp – Cục kiểm dịch thực động vật Mỹ công bố một quy định mang tính bước ngoặt đó là quy định liều bức xạ để xử lý hàng nông sản nhập vào Mỹ với liều lượng chiếu xạ tối thiểu đạt được theo quy định Mức 150 Gy áp dụng chung cho tất cả các loại hàng hóa là trái cây và rau ăn trái tươi khi xử lý tiêu diệt các loài thuộc họ Tephrididae và 400 Gy cho tất cả các loài côn trùng khác, ngoại trừ

nhộng và giai đoạn trưởng thành của Lepidoptera Liều lượng này được tính toán, đảm

bảo ngăn chặn trưởng thành RĐQ có thể vũ hóa từ trứng hoặc sâu non đã xử lý đạt mức 99,9968 % tuy nhiên phương pháp này cũng có một số mặt hạn chế như: giá thành thiết bị và chi phí cao, không phù hợp thị hiếu người tiêu dùng tại một số nước như: Nhật, Úc, New Zealand và các nước Châu Âu Gây một số hiệu ứng phụ làm giảm chất lượng thực phẩm, ảnh hưởng đến dinh dưỡng và hàm lượng vitamine, có

khả năng gây xuất huyết trong cơ thể, gây biến đổi gen

2.5.2.2 Xử lý nhiệt

Theo Vargas và ctv - 174, 1984, nhiệt độ cao hoặc thấp đều có ảnh hưởng rất lớn đến sự tồn tại của RĐQ Cụ thể với mức nhiệt độ dưới 200C thường làm giảm tốc độ

15

tăng trưởng của quần thể và có thể sẽ làm giảm khả năng gây hại của RĐQ, nhìn chung việc kéo dài mức nhiệt độ quá thấp qua các giai đoạn của RĐQ sẽ loại bỏ được nhiều loài RĐQ Nhiệt độ tăng cao đột ngột sẽ giết chết hầu hết các loài RĐQ gây hại, chỉ có rất ít loài có thể chịu đựng được mức nhiệt độ 460

C trong vòng 30 phút (Peterson, 142, 2000; JICA, 114, 1996)

Phương pháp xử lý nhiệt lạnh

Phương pháp này yêu cầu giữ trái cây ở nhiệt độ thấp từ 0 – 30C trong khoảng

thời gian dài (2 – 3 tuần) được xem là phương pháp xử lý nhằm trừ RĐQ đạt hiệu quả cao và không để lại dư lượng (Walter, 1984) Tiêu chuẩn xử lý nhiệt lạnh được Mỹ áp dụng để diệt B dorsalis nhiểm trên trái cây nhập vào Mỹ là 0,990C trong 15 ngày hoặc 1,38 0C trong 18 ngày (PPQ – USDA APHIS, 2007) Biện pháp này thường được dùng cho trái cây ôn đới và được kết hợp trong quá trình vận chuyển, khi đó phải có container chuyên dùng với thiết bị tạo, giữ và kiểm soát được nhiệt độ và độ ẩm Riêng đối với các loại rau trái vùng nhiệt đới thì biện pháp xử lý này không thể sử dụng được

vì gây tổn thương trái do lạnh, chất lượng không đảm bảo do nhiệt độ bảo quản trái cây nhiệt đới thường là từ 7 – 130

C

Phương pháp xử lý nhiệt nóng

Phương pháp này được xem là một cách xử lý tốt cho nhiều loại trái cây và rau

ăn trái vì không để lại dư lượng hóa chất độc hại (Peterson, 2001; Heither, 2001) Biện pháp này được đề ra và phát triển rộng cho xoài từ đầu thập niên 1980, nhằm thay thế thuốc khử trùng xông hơi Ethylene dibromide và CH3Br (Heither, 2001) Với giá thành rẻ hơn so với xử lý bằng phóng xạ Tuy nhiên, đây không phải là biện pháp có ý nghĩa trừ diệt dịch hại, mà chỉ là cách bảo đảm về phương diện kiểm dịch Có nhiều phương cách để xử lý nhiệt nóng cho trái cây: dùng khí nóng, biện pháp nước nóng,

biện pháp hơi nước nóng Đây là biện pháp được xử dụng cho trái cây và rau ăn trái tươi vùng nhiệt đới

16

o Dùng khí nóng

Sử dụng không khí nóng khô (ẩm độ khoảng 50 %) để làm nóng quả đến nhiệt độ

xử lý Biện pháp này được phát triển ở Hawaii để xử lý xoài trước khi xuất vào lục địa Tuy nhiên, có nhược điểm là có thể gây bỏng vỏ ở một số loại trái có vỏ mỏng, mọng nước như cà chua, nho Biện pháp này cũng đã được New Zealand chấp thuận để

nhập trái cây từ Thái Bình Dương

o Biện pháp ngâm nước nóng

Ngâm trái cây trong nước nóng 300

C trong 2 – 3 giờ để nhiệt độ tâm trái tới nhiệt

độ xử lý Giữ nhiệt độ trên khoảng 10 phút để nấm bệnh và RĐQ chết hết Tuy nhiên, cách này thường làm giảm chất lượng trái và giảm thời gian bảo quản vì quả bị ngâm lâu trong nước

o Biện pháp hơi nước nóng

- Là quá trình gia nhiệt trái cây bằng khí nóng khoảng 500C có ẩm độ cao 70 – 90%, tâm quả khi đó có nhiệt độ khoảng 46 – 470C và được giữ thêm trong một thời gian từ 10 – 20 phút Một điều bất lợi được ghi nhận trong biện pháp này là điều kiện trên không đủ để diệt trừ nấm bệnh ký sinh và hoại sinh Do vậy, cần bổ sung biện pháp trừ nấm bệnh trong từng trường hợp cụ thể

- Xử lý trái cây bằng hơi nước nóng được ứng dụng đầu tiên ở Florida năm 1992

để trừ RĐQ Địa trung hải trên quả cam Từ đó được phát triển rộng ra trên đu đủ ở Hawaii, ớt xanh ở Nhật, xoài ở Úc, Mexico, Philippine và Thái Lan Năm 1994, hai nhà máy xử lý hơi nóng được lắp đặt ở Bắc Anh để xử lý xoài xuất đi Nhật, trong năm đầu xử lý được 300 tấn xoài Kensington

2.6 Trình tự các bước nghiên cứu theo thủ tục kiểm dịch thực vật quốc tế cho một

xử lý nhiệt nóng ruồi đục quả

- Bước 1: Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái của các loài ruồi đục quả là dịch hại kiểm dịch thực vật hoặc là dịch hại qui định của các nước nhập khẩu

- Bước 2: Nhân nuôi các loài ruồi đục quả này bằng thức ăn nhân tạo (lúa mì), với

số lượng lớn trong phòng thí nghiệm

17

- Bước 3: Nghiên cứu khả năng chống chịu nhiệt của từng loài ruồi cũng như từng giai đoạn phát triển của chúng Xác định loài và giai đoạn phát triển có khả năng

chống chịu nhiệt cao nhất

- Bước 4: Xác định thông số xử lý nhiệt để diệt trừ hoàn toàn giai đoạn kháng nhiệt nhất của loài ruồi kháng nhiệt nhất, đánh giá khả năng chống chịu nhiệt trong quả

- Bước 5: Thí nghiệm diệt trừ ruồi ở quy mô lớn, để xác nhận ở thông số xử lý nhiệt nóng (đã tìm ra ở bước 4) không một cá thể nào sống sót trên 30.000 cá thể

ruồi được xử lý

- Bước 6: Thí nghiệm về phẩm chất quả sau xử lý nhiệt trừ ruồi ở quy mô lớn, để

chứng minh quả sau xử lý không bị ảnh hưởng về chất lượng và cảm quan

Trình tự xử lý nhiệt nóng trừ RĐQ gồm có 6 bước Bước 1 và bước 2 đã được Trung tâm kiểm dịch thực vật sau nhập khẩu II nghiên cứu và thực hiện trong những năm trước, năm 2011 bước 3 cũng được nghiên cứu trong một khóa luận tốt nghiệp (Dương Hoài Ân, 2011) Và năm nay trong khóa luận này tôi tiếp tục thực hiện bước

4 và bước 5, còn bước 6 sẽ được trung tâm thực hiện trong thời gian tới để hoàn chỉnh trình tự xử lý nhiệt nóng

Ch ế độ ánh sáng và thức ăn của quần thể ruồi làm thí nghiệm trong điều kiện tự động

Thời gian chiếu sáng trong ngày của Biotron tự động được thiết kế gồm 2 giờ bình minh, 10 giờ ban ngày, 2 giờ hoàng hôn và 10 giờ ban đêm

Bảng 2.1 Chế độ chiếu sáng trong Biotron nuôi ruồi

Cường độ sáng Thời gian sáng Tổng số giờ

18

Thức ăn được pha trộn với công thức sau (JICA, 2008)

Bảng 2.2 Công thức thức ăn nhân tạo nuôi các pha tiền hóa nhộng của ruồi đục quả

Sodium benzoate (Chất chống nấm) 0,75 g

19

Chương 3

3.1 Th ời gian và địa điểm nghiên cứu

- Thời gian thực hiện: Đề tài được thực hiện từ 02/2012 đến 06/2012

- Địa điểm thực hiện: Đề tài được tiến hành tại Trung tâm kiểm dịch thực vật sau

nhập khẩu II (28 Mạc Đỉnh Chi – Quận 1 – TP.HCM)

3.2 Vật liệu nghiên cứu

3.2.1 Đối tượng nghiên cứu

Năm giai đoạn phát triển của RĐQ Phương Đông Bactrocera dorsalis Hendel:

trứng non, trứng già, sâu non tuổi 1, sâu non tuổi 2, sâu non tuổi 3

Hình 3.1 Giai đoạn trứng của RĐQ B.dorsalis.a – trứng non, b – trứng già

Hình 3.2 Giai đoạn sâu non tuổi 1 của RĐQ B.dorsalis.(nguồn Trần Quang Đại, 2011)

a – sâu non tuổi 1, b – móc miệng sâu non tuổi 1, c – móc miệng sâu non tuổi 1 trễ

20

Hình 3.3 Sâu non tuổi 2 của RĐQ B.dorsalis.(nguồn Trần Quang Đại, 2011)

a – sâu non tuổi 2,

b – móc miệng sâu non tuổi 2

c – móc miệng sâu non tuổi 2 trễ

Hình 3.4 Sâu non tuổi 3 của RĐQ B.dorsalis.(nguồn Trần Quang Đại, 2011)

a – sâu non tuổi 3,

b – móc miệng sâu non tuổi 3

c – sâu non tuổi 3 trễ

Bảng 3.1 Quần thể RĐQ B.dorsalis được nhân nuôi trong điều kiện tự động

Thế hệ Thu trứng Lượng trứng Tỉ lệ nở

(%)

Ngày thu nhộng Ngày vũ hóa

F100 05/07/12 08:30 3,5 ml 84,25 18/05/12 19/05/12 F101 21/06/12 14:00 3,8 ml 89,75 03/07/12 04/07/12

- Máy xử lý nhiệt VHT hiệu EHK của hãng Sanshu – Nhật Bản

- Tủ nuôi ruồi (Biotron): Sử dụng tủ nuôi ruồi tự động có thể điều chỉnh nhiệt độ

ổn định với độ sai lệch nhiệt độ ± 0,50C, ẩm độ 70 – 80% RH, ánh sáng 12:12

- Tủ trữ quả nhiễm (Biotron): Nhiệt độ được điều chỉnh ở 280

C ± 0,5 do hãng Sanshu của Nhật Bản cung cấp

- Hộp nhựa nhỏ để quả nhiễm: nắp hộp được cắt đi một phần để lót vải, quả xoài được đặt lên trên

- Hộp nhựa lớn: Dùng để đặt quả xoài và hộp nhựa nhỏ vào, dùng vải để bịt miệng nắp lại

22

Hình 3.6 Dụng cụ thí nghiệm

a – Máy xử lý hơi nước nóng (VHT), b – Tủ nuôi ruồi, c – Hộp nhựa trữ quả

- Kính hiển vi soi nổi, máy đếm, giấy thấm, cân điện tử, lưới đen, khay nhựa, cốc

thủy tinh, pipette, bình xịt, cọ, dao mổ, băng keo, bút lông, dụng cụ thu trứng,

thức ăn nuôi ruồi, thức ăn nuôi sâu

23

3.3 Nội dung nghiên cứu

- Đánh giá khả năng kháng nhiệt trong quả của Bactrocera dorsalis Hendel

- Tiên đoán thông số xử lý nhiệt sau cùng của Bactrocera dorsalis Hendel

- Thí nghiệm kiểm chứng, thực hiện trên 30.000 cá thể

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Phương pháp xác định khả năng kháng nhiệt trong quả xoài Cát Chu của

Bactrocera dorsalis Hendel

Kết quả của thí nghiệm xác định khả năng kháng nhiệt trong quả xoài Cát Chu của

RĐQ B dorsalis là kết quả quyết định trong việc chọn giai đoạn kháng nhiệt cao nhất

để tiếp tục thực hiện trong thí nghiệm tiên đoán và thí nghiệm kiểm chứng

3.4.1.1 B ố trí thí nghiệm

Nghiệm thức được bố trí theo phương pháp của Peterson (2001a), nguồn ruồi sử dụng trong thí nghệm được nuôi trên thức ăn cám mì ở điều kiện nuôi tự động (2 giờ bình minh,10 giờ ban ngày, 2 giờ hoàng hôn và 10 giờ ban đêm)

Thí nghiệm gồm 3 đợt lặp lại (ĐLL), mỗi ĐLL là 30 nghiệm thức, bố trí các nghiệm thức theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên Với các giai đoạn phát triển: YE, ME, L1, L2, L3; ở các mức nhiệt độ: 44,00

C ; 45,00C; 45,50C; 46,00C; 46,50C và đối chứng được đặt ở nhiệt độ phòng (28 0C ± 0,5) Mỗi giai đoạn phát triển xử lý 4 quả, mỗi quả

cấy 150 cá thể, tổng số quả xử lý cho một ĐLL là 150 quả

Mỗi khay bố trí hai quả của mỗi nghiệm thức nhiệt độ, dành riêng cho một giai

đoạn phát triển của RĐQ B.dorsalis (Hình 1.1, phụ lục 1) Khi nhiệt độ ở tâm quả có

cắm cảm biến nhiệt đạt tới mỗi mức nhiệt độ yêu cầu thì ta tiến hành lấy quả xoài ra,

quả xoài được lấy tương ứng theo mỗi mức nhiệt độ (xem phần xử lý VHT)

3.4.1.2 Phương pháp tiến hành

Phương pháp bố trí quả cho thí nghiệm

Đầu tiên chuẩn bị xoài Cát Chu và cân trọng lượng từng quả, đồng thời loại bỏ

những quả bị hư, quả còn xanh hay những quả quá chín Sau đó ta sắp xếp quả theo

24

trọng lượng giảm dần, xếp thành 20 hàng x 10 quả/hàng (Hình 3.8a) Lấy 7 quả có trọng lượng trung bình làm quả cắm cảm biến nhiệt (Hình 3.8b) để thăm dò nhiệt độ ở tâm quả (Hình 3.14) Tiếp tục loại bỏ 22 quả có trọng lượng nặng nhất và 21 quả có trọng lượng nhẹ nhất (Hình 3.8b), còn lại 150 quả xếp thành 15 hàng x 10 quả/hàng theo trọng lượng quả giảm dần (Hình 3.8c) Lấy ngẫu nhiên 30 quả (2 quả ở mỗi hàng), cứ 30 quả đặt vào trong thùng giấy, sau đó đưa vào phòng trữ quả để bảo quản (Hình 2.1, phụ lục 2)

Trước xử lý một ngày, lấy quả ra cấy nhiễm (Hình 3.9, hình 3.11, hình 3.12, hình 3.13) rồi bảo quản ở Biontron để hôm sau xếp quả vào buồng (bên trong máy xử lý nhiệt có các khay, ta đưa quả vào đó) xử lý hơi nước nóng (Hình 3.15)

Phương pháp tạo quả nhiễm RĐQ

Bảng 3.1 Thời gian từ lúc đẻ trứng để đạt được các giai đoạn trong thí nghiệm của

RĐQ Phương Đông Bactrocera dorsalis Hendel

Giai đoạn phát triển Thời gian (giờ)

Cắt 2 nắp hình cửa sổ ở cùng một phía trên quả xoài đồng thời đục một lỗ ở

giữa mỗi nắp để thông gió (Hình 3.11a), cấy vào mỗi nắp là 75 cá thể (Hình 3.11b, hình 3.11c, hình 3.12) có nghĩa là 150 cá thể/quả, sau đó dùng băng keo vải y tế để dán các khe hở và lỗ thông gió lại, phòng trường hợp sâu non di chuyển ra khỏi quả (Hình 3.13)

25

X ử lý VHT

Kiểm tra giai đoạn phát triển trong quả CS trước khi tiến hành chạy máy xử lý hơi nước nóng Vận hành máy xử lý nhiệt VHT theo chương trình chạy máy, nhiệt độ trong buồng xử lý tăng từ 300

C – 47,50C trong vòng 1 giờ và giữ nhiệt độ trong buồng

xử lý ở mức 47,50

C, ẩm độ trong buồng xử lý 95% R.H Theo dõi nhiệt độ trong tâm

quả thông qua 5 quả có cắm que cảm biến nhiệt đặt trong buồng xử lý Khi 3 quả trong

số 5 quả có cắm que cảm biến nhiệt đạt mức nhiệt độ: 44,00

C ; 45,00C; 45,50C; 46,00C; 46,50C thì quả ở nghiệm thức ứng với mức nhiệt độ yêu cầu, sẽ được lấy ra khỏi buồng

xử lý và tiến hành làm mát ngay dưới vòi nước lạnh ở nhiệt độ phòng bình thường

26

Hình 3.9 Chuẩn bị sâu non để cấy nhiễm vào quả; a – L2, L3 sau khi đếm xong đặt vào cốc thủy tinh; b – lọc L2, L3 qua rây để chuẩn bị cấy; c – sâu thu được sau khi lọc

Hình 3.10 Thu trứng để chuẩn bị cấy nhiễm vào quả

a – ruồi đang đẻ trứng vào ly, b – trứng thu được sau 1 h

c – dùng nước phun vào ly để thu trứng, d – 75 cá thể được đếm trên lưới đen

27

Hình 3.11 Cấy nhiễm trứng vào quả xoài Cát Chu

a – mở nắp quả xoài lên để cấy, b – cấy trứng vào quả

c – lấy lưới ra sau khi cấy xong

Hình 3.12 Cấy nhiễm sâu non vào quả xoài Cát Chu

a – cấy sâu non vào quả

c – quả sau khi cấy

c – dùng cọ để quét sâu vào gọn trong trái

Hình 3.13 Dùng băng keo vải dán quả sau khi cấy nhiễm

a – quả đang được dán băng keo; b – quả sau khi dan băng keo xong

28

Hình 3.14 Cắm que cảm biến nhiệt vào quả Probe trước khi chạy máy xử lý để theo dõi nhiệt độ ở tâm quả xoài

a –đo chiều dài que cảm biến ứng với tâm quả; b – chuẩn bị cắm que cảm biến nhiệt;

c – cắm que cảm biến nhiệt vào quả; d – quả cắt ra sau khi cắm que cảm biến nhiệt

Hình 3.15 Xếp quả vào buồng để chạy máy xử lý hơi nước nóng

a – xếp quả vào buồng xử lý, b – quả trong buồng sau khi xếp