NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO Oligoβglucan BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾU XẠ KẾT HỢP XỬ LÝ HYDROGEN PEROXIDE

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO Oligo-β-glucan BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾU XẠ KẾT HỢP XỬ LÝ HYDROGEN PEROXIDE Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện: VÕ MINH KHOA Niên khóa: 2008 – 2012 Tháng 07/2012 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO Oligo-β-glucan BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾU XẠ KẾT HỢP XỬ LÝ HYDROGEN PEROXIDE Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực TS LÊ QUANG LUÂN VÕ MINH KHOA Tháng 07/2012 ii LỜI CẢM ƠN Trong tháng thực tập phòng Sinh học Trung tân Hạt nhân Tp HCM Em nhận thấy trưởng thành nhiều, tự tin với vốn kiến thức đạt kỹ thực hành, tự tin để giải vấn đề Khóa luận tốt nghiệp thành cơng em muốn gửi lờn cảm ơn đến Cha – mẹ người sinh thành dưỡng dục đến ngày hôm Gia đình ln nơi che chở cho lúc vấp ngã, giúp có thêm niềm tin để bước tiếp chặn đường phía trước, có thêm nghị lực để vượt qua khó khăn Em xin gửi lời cảm ơn đến Ban Giám hiệu Trường Đại Học Nông Lâm Tp HCM, Ban Chủ nhiệm Bộ môn Công Nghệ Sinh Học giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt trình học tập trường Em xin gửi lời tri ân đến thầy hết lòng dạy dỗ, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm hữu ích sống Đặc biệt em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Lê Quang Luân, thầy tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện, giúp đỡ truyền đạt kiến thức quý báu trình thực tập để em hồn thành tốt khóa luận Em chân thành cảm ơn Ban Giám đốc nhân viên Cơng ty Cổ phần Sài Gòn Thủy Canh tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian thực tập công ty Em xin gửi lời cảm ơn đến chị Uyên, chị Trang, anh Lợi anh Ân giúp đỡ chia kinh nghiệm trình thực tập Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 14 tháng 07 năm 2012 Võ Minh Khoa iii TÓM TẮT Từ năm 1970, hoạt tính sinh học β-glucan biết đến với nhiều ứng dụng lĩnh vực y học, dược phẩm, mỹ phẩm nơng nghiệp Trong βglucan có nhiều thành tế bào nấm men bã men bia nguồn nguyên liệu phong phú Việt Nam Những β-glucan có trọng lượng phân tử thấp thường có hoạt tính kích thích miễn dịch cảm ứng tế bào tốt Chính việc tạo oligo-β-glucan có trọng lượng phân tử thấp, hòa tan nước có hiệu ứng thúc đẩy tăng trưởng tốt thực vật cần thiết Khi xử lý β-glucan với H2O2 nồng độ 0,5, 1, 2, 10%, hàm lượng chất tan thu tăng từ 4,11 đến 13,52% đạt cao 13,52% nồng độ H2O2 10% Đã chế tạo oligo-β-glucan có trọng lượng phân tử thấp (Mw  12,193 – 2,69 kDa) có khả hòa tan nước từ β-glucan không tan phương pháp chiếu xạ Hỗn hợp β-glucan (nồng độ 15%) chiếu xạ liều: 50, 100, 150, 200, 250 kGy kết hợp xử lý H2O2 nồng độ: 0,5, 2% Chế phẩm oligo-β-glucan chế tạo với liều xạ 100 kGy kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 2% có trọng lượng phân tử khoảng 4,013 kDa, có hiệu ứng tăng trưởng tốt xà lách Nato thủy canh Cụ thể chế phẩm oligo-β-glucan làm gia tăng 36,21% sinh khối tươi, 18,24% chiều cao cây, 41,73% chiều dài rễ 6,24% hàm lượng chất khô so với lô đối chứng không bổ sung oligo-β-glucan Nồng độ oligo-βglucan xác định có hiệu ứng tăng trưởng tối ưu rau xà lách Nato 100 ppm iv SUMMARY Beta Glucan with low molecular weight often have immune stimulating activity and better cell induction Beta Glucan have large molecular weight The thesis entidled “Study on preparation of oligo-β-glucan by radiation method in combination with H2O2 treatment” was carried out for produce low molecular weight and water soluble oligo-β-glucan with a good growth promotion effect for safety vegetable production The produce low molecular weight and water soluble oligo-β-glucan (Mw  12.193 – 2.69 kDa) was sucessfully prepared from insoluble β-glucan by irradiating the mixture of 15% β-glucan at 50, 100, 150, 200, 250 kGy in combination with the treatments of H2O2 at concentrations of 0,5, 2% The oligo-β-glucan with molecular weight approximately 4.913 kDa prepared by irradiating mixture of 15% β-glucan at 100 kGy in combination with the treatments of 2% H2O2 displayed an high growth promotion effect on Nato lettuce growed in hydroponics system In particularly, the treatment of 4.913 kDa oligo-β-glucan increased the fresh biomass, plant heigth, root length and dried matter content of the mentioned lettuce in 36.21, 18.24, 41.73 and 6.24%, respectively The suitable concentration for treating of oligo-β-glucan were found at 100 ppm for Nato lettuce Keywords: oligo-β-glucan, β-glucan, irradiated, hidroponics, viscosity, extracted v hydrogen peroxide (H2O2), MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT iv SUMMARY v MỤC LỤC iv DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT viii DANH SÁCH CÁC BẢNG ix DANH SÁCH CÁC HÌNH x Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Nội dung thực Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan β-Glucan 2.1.1 Những nghiên cứu β-glucan có nguồn gốc từ nấm men 2.1.2 Công thức cấu tạo β-glucan 2.1.3 Tính chất β-glucan 2.1.4 Hoạt tính sinh học β-glucan 2.1.4.1 Tác động β-glucan người vật nuôi 2.1.4.2 Tác dụng β-glucan cá 2.1.4.3 Tác dụng β-glucan tôm 2.1.4.4 Tác động β-glucan thực vật 2.2 Hoạt tính sinh học oligo-β-glucan 10 2.2.1 Giới thiệu oligosaccharide 10 2.2.2 Giới thiệu oligo-β-glucan 10 2.3 Các phương pháp chế tạo oligo-β-glucan 11 2.3.1 Chế tạo phương pháp hóa học 11 2.3.2 Chế tạo phương pháp enzyme 11 2.3.3 Chế tạo phương pháp xạ 12 2.4 Công nghệ nuôi trồng thủy canh 15 vi 2.4.1 Khái niệm công nghệ nuôi trồng thủy canh 15 2.4.2 Lịch sử phát triển công nghệ thủy canh 15 2.4.3 Thủy canh dịch lỏng 16 2.4.3.1 Phương pháp thủy canh hồi lưu 16 2.4.3.2 Phương pháp không hồi lưu 17 2.4.3.3 Phương pháp khí canh 18 2.4.4 Thủy canh có sử dụng giá thể 18 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 20 3.1 Thời gian địa điểm thực tập 20 3.2 Vật liệu thí nghiệm 20 3.2.1 Giống giá thể trồng 20 3.2.2 Quy trình tách chiết β-glucan từ bã men bia 20 3.2.3 Dụng cụ hóa chất thí nghiệm 21 3.3 Phương pháp tiến hành thí nghiệm 22 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ H2O2 đến khả cắt mạch β-glucan 22 3.3.2 Khảo sát hiệu ứng cắt mạch β-glucan chiếu xạ kết hợp xử lý H2O2 22 3.3.3 Khảo sát hiệu ứng tăng trưởng oligo-β-glucan xà lách Nato 23 3.3.4 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ oligo-β-glucan đến khả tăng trưởng 24 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 4.1 Nghiên cứu cắt mạch β-glucan H2O2 26 4.2 Nghiên cứu cắt mạch β-glucan kỹ thuật xạ kết hợp xử lý H2O2 27 4.2.1 Xác định hàm lượng β-glucan tan 27 4.2.2 Xác định trọng lượng phân tử oligo-β-glucan 30 4.2.3 Đo phổ UV-vis mẫu oligo-β-glucan 32 4.3 Hiệu ứng tăng trưởng oligo-β-glucan lên xà lách Nato thủy canh 33 4.3 Ảnh hưởng nồng oligo-β-glucan đến hiệu ứng tăng trưởng 36 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 39 5.1 Kết luận 39 5.2 Đề nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 PHỤ LỤC vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ALFs Antilipopolysaccharide factors AMPs Antimicrobial peptides CNBX Công nghệ xạ Co-60 Cobalt- 60 ctv cộng tác viên ĐC Đối chứng g/c gam/cây GPx Glutathione peroxidase IFN Interferon NO Nitrogen oxide NT Nghiệm thức PO Prohenoloxidaza PVC Polyvinyl clorua SOD Superoxide dismutase SVĐC So với đối chứng w/v Trọng lượng thể tích viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1 Ảnh hưởng liều chiếu xạ đến hiệu ứng tăng trưởng oligo-βglucan lên rau xà lách Nato trồng thủy canh 24 Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ oligo-β-glucan đến hiệu ứng tăng trưởng rau xà lách Nato thủy canh 25 Bảng 4.1 Phân tích hiệu ứng synergic liều chiếu xạ 100 kGy kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 2% 29 Bảng 4.2 Hiệu ứng oligo-β-glucan lên rau xà lách Nato theo liều chiếu xạ 34 Bảng 4.3 Ảnh hưởng nồng độ oligo-β-glucan đến hiệu ứng tăng trưởng rau xà lách Nato thủy canh 36 ix DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 4.1 Ảnh hưởng nồng độ H2O2 đến khả tan β-glucan 26 Hình 4.2 Hàm lượng β-glucan tan chế tạo kỹ thuật xạ kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 0,5% 27 Hình 4.3 Hàm lượng β-glucan tan chế tạo kỹ thuật xạ kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 1% 28 Hình 4.4 Hàm lượng β-glucan tan chế tạo kỹ thuật xạ kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 2% 28 Hình 4.5 Ảnh hưởng liều xạ đến trọng lượng phân tử β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 0,5% 30 Hình 4.6 Ảnh hưởng liều xạ đến lượng phân tử β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 1% 31 Hình 4.7 Ảnh hưởng liều xạ đến lượng phân tử β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 2% 31 Hình 4.8 Phổ UV-vis oligo-β-glucan (a) mẫu chiếu xạ 50 kGy xử lý H2O2 nồng độ 2% ; (b) mẫu chiếu xạ 100 kGy xử lý H2O2 nồng độ 2%; (c) mẫu chiếu xạ 200 kGy xử lý H2O2 nồng độ 2% 32 Hình 4.9 Chế phẩm oligo-β-glucan.(a) H2O2 2% + 250 kGy,(b) H2O2 2% + 200 kGy,(c) H2O2 2% + 150 kGy,(d) H2O2 2% + 100 kGy,(e) H2O2 2% + 50 kGy 33 Hình 4.10 Hiệu ứng oligo-β-glucan chế tạo theo liều xạ khác lên sinh trưởng phát triển xà lách Nato (a) chiều cao cây; (b) chiều dài rễ; (c) sinh khối tươi; (d) hàm lượng chất khô 34 Hình 4.11 Xà lách Nato trồng 28 ngày phương pháp thủy canh (a) đối chứng không bổ sung oligo-β-glucan; (b) bổ sung 50 ppm oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 2% chiếu xạ liều 100 kGy; (c) bổ sung 50 ppm βglucan không chiếu xạ 35 Hình 4.12 Hiệu ứng oligo-β-glucan có Mw tối ưu lên sinh trưởng phát triển xà lách Nato thủy canh (a) chiều cao cây; (b) chiều dài rễ; (c) sinh khối tươi; (d) hàm lượng chất khô 37 Hình 4.13 Xà lách Nato trồng 21 ngày phương pháp thủy canh (a) đối chứng không bổ sung oligo-β-glucan; (b) bổ sung 100 ppm oligo-β-glucan có Mw  4,913 kDa 38 x 1.5 y = 4.832x + 0.875 R² = 0.999 sp/C (dl/g) 1.3 1.1 0.9 0.7 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 1% với liều xạ 50 kGy Bảng 11 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 1% chiếu xạ liều 100 kGy Nồng độ oligo-β-glucan, g ml-1 Thời gian, s 1,000 92,83 92,82 92,63 0,500 84,98 84,61 84,48 0,250 82,37 82,03 81,95 0,125 81,35 81,35 81,20 NaOH (0,01N) 80,75 80,79 80,43 1.5 y = 10.03x + 0.495 R² = 0.998 sp/C (dl/g) 1.3 1.1 0.9 0.7 0.5 0.02 0.04 0.06 Nồng độ mẫu, g 0.08 0.1 0.12 ml-1 Hình Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 1% với liều xạ 100 kGy Bảng 12 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 1% chiếu xạ liều 150 kGy Nồng độ oligo-β-glucan, g ml-1 Thời gian, s 1,000 82,89 83,08 83,08 0,500 80,56 80,41 80,38 0,250 79,54 79,35 79,42 0,125 79,04 79,15 78,97 NaOH (0,01N) 78,80 78,83 78,78 0.6 y = 2.77x + 0.263 R² = 0.981 sp/C (dl/g) 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 1% với liều xạ 150 kGy Bảng 13 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 1% chiếu xạ liều 200 kGy Nồng độ dung môi, g ml-1 Thời gian, s 1,000 88,67 88,97 88,81 0,500 82,04 82,22 82,13 0,250 80,07 79,88 79,78 0,125 79,28 79,15 79,66 NaOH (0,01N) 79,25 78,99 78,92 1.6 y = 10.58x + 0.175 R² = 0.999 sp/C (dl/g) 1.2 0.8 0.4 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 1% với liều xạ 200 kGy Bảng 14 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 1% chiếu xạ liều 250 kGy Nồng độ dung môi, g ml-1 Thời gian, s 1,000 84,49 84,18 84,08 0,500 80,56 80,51 80,68 0,250 79,24 79,25 79,52 0,125 79,02 78,93 78,97 NaOH (0,01N) 78,80 78,83 78,78 0.8 y = 5.849x + 0.122 R² = 0.986 sp/C (dl/g) 0.6 0.4 0.2 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình 10 Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 1% với liều xạ 250 kGy Bảng 15 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 2% chiếu xạ liều 50 kGy Nồng độ dung môi, g ml-1 Thời gian, s 1,000 89,98 89,63 89,74 0,500 85,70 85,07 86,15 0,250 84,05 84,03 84,15 0,125 83,15 83,55 83,71 NaOH (0,01N) 83,03 82,91 83,05 0.9 y = 3.913x + 0.430 R² = 0.995 sp/C (dl/g) 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình 11 Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 2% với liều xạ 50 kGy Bảng 16 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 2% chiếu xạ liều 100 kGy Nồng độ dung môi, g ml-1 Thời gian, s 1,000 90,13 90,58 90,42 0,500 86,89 86,65 86,98 0,250 85,42 85,65 85,71 0,125 85,26 85,13 85,15 NaOH (0,01N) 84,69 84,98 84,96 0.7 y = 4.075x + 0.245 R² = 0.993 sp/C (dl/g) 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình 12 Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 2% với liều xạ 100 kGy Bảng 17 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 2% chiếu xạ liều 150 kGy Nồng độ dung môi, g ml-1 Thời gian, s 1,000 88,42 88,14 88,64 0,500 82,62 82,69 82,58 0,250 81,00 80,92 80,93 0,125 80,42 80,67 80,44 NaOH (0,01N) 80,34 79,98 80,42 1.2 y = 8.602x + 0.158 R² = 0.999 sp/C (dl/g) 0.9 0.6 0.3 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình 13 Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 2% với liều xạ 150 kGy Bảng 18 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 2% chiếu xạ liều 200 kGy Nồng độ dung môi, g ml-1 Thời gian, s 1,000 88.95 88.59 88.85 0,500 84.67 84.55 84.41 0,250 83.26 83.33 83.36 0,125 83.01 82.94 82.98 NaOH (0,01N) 82.88 82.81 82.71 0.8 y = 6.336x + 0.094 R² = 0.999 sp/C (dl/g) 0.6 0.4 0.2 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình 14 Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 2% với liều xạ 200 kGy Bảng 19 Kết đo độ nhớt dung dịch oligo-β-glucan xử lý với H2O2 nồng độ 2% chiếu xạ liều 250 kGy Nồng độ dung môi, g ml-1 Thời gian, s 1,000 89,92 89,78 89,91 0,500 84,01 83,91 83,98 0,250 82,22 82,52 82,30 0,125 81,93 81,91 81,73 NaOH (0,01N) 81,50 82,08 81,55 1.2 y = 9.126x + 0.088 R² = 0.999 sp/C (dl/g) 0.9 0.6 0.3 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 Nồng độ mẫu, g ml-1 Hình 15 Kết đo độ nhớt nghiệm thức nồng độ H2O2 2% với liều xạ 200 kGy Bảng 20 Mw β-glucan chiếu xạ kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 0,5% Liều xạ (kGy) 50 100 150 200 250 Mw (kDa) 12,193 8,909 7,162 6,526 5,064 Bảng 21 Mw β-glucan chiếu xạ kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 1% Liều xạ (kGy) 50 100 150 200 250 Mw (kDa) 10,387 7,430 4,806 4,030 3,260 Bảng 22 Mw β-glucan chiếu xạ kết hợp xử lý H2O2 nồng độ 2% Liều xạ (kGy) 50 100 150 200 250 Mw (kDa) 6.839 4.913 3.795 2.796 2.69 Bảng 23 Ảnh hưởng oligo-β-glucan lên sinh khối tươi xà lách Nato trồng thủy canh Sinh khối tươi, g/c Liều xạ, kGy Trung bình ĐC Cây 39.77 Cây 43.65 Cây 41.21 41.54 46.16 47.12 44.80 46.03 50 49.47 46.48 51.70 49.22 100 59.26 53.76 56.73 56.58 150 50.16 52.31 50.64 51.04 200 52.25 49.50 52.18 51.31 250 48.98 51.75 47.38 49.37 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S Degrees of Freedom Between Within 14 Total 20 O F V A R I A N C E Sum of Mean Squares Square 392.986 65.498 56.530 4.038 449.516 T A B L E F-value 16.221 Prob 0.0000 Coefficient of Variation = 4.08% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 124.630 41.543 1.96 1.16 3.00 138.080 46.027 1.17 1.16 3.00 147.650 49.217 2.62 1.16 3.00 169.750 56.583 2.75 1.16 3.00 153.110 51.037 1.13 1.16 3.00 153.930 51.310 1.57 1.16 3.00 148.110 49.370 2.21 1.16 -Total 21.00 1035.260 49.298 4.74 1.03 Within 2.01 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 4.038 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 4.884 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 41.54 46.03 49.22 56.58 51.04 51.31 49.37 D CD BC A B B BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 56.58 51.31 51.04 49.37 49.22 46.03 41.54 A B B BC BC CD D Bảng 24 Ảnh hưởng oligo-β-glucan lên chiều cao xà lách Nato trồng thủy canh Chiều cao cây, cm Liều xạ, kGy Trung bình Cây Cây Cây ĐC 21,00 21,50 20,50 21.00 21,50 22,00 22,50 22.00 50 22,50 23,50 22,00 22.67 100 25,50 25,00 24,00 24.83 150 24,00 23,50 23,00 23.5 200 23,00 24,00 22,50 23.17 250 23,50 23,00 22,00 22.83 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 25.905 4.317 9.802 0.0002 Within 14 6.167 0.440 Total 20 32.071 Coefficient of Variation = 2.90% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 63.000 21.000 0.50 0.38 3.00 66.000 22.000 0.50 0.38 3.00 68.000 22.667 0.76 0.38 3.00 74.500 24.833 0.76 0.38 3.00 70.500 23.500 0.50 0.38 3.00 69.500 23.167 0.76 0.38 3.00 68.500 22.833 0.76 0.38 -Total 21.00 480.000 22.857 1.27 0.28 Within 0.66 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 0.4400 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.612 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 21.00 22.00 22.67 24.83 23.50 23.17 22.83 C BC B A AB B B Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 24.83 23.50 23.17 22.83 22.67 22.00 21.00 A AB B B B BC C Bảng 25 Ảnh hưởng oligo-β-glucan lên chiều dài rễ xà lách Nato trồng thủy canh Chiều dài rễ, cm Liều xạ, kGy Trung bình Cây Cây Cây ĐC 16,00 15,00 14,50 15,17 16,00 17,50 16,50 16,67 50 100 18,50 21,50 17,50 22,50 17,00 20,50 17,67 21,50 150 19,00 19,50 21,00 19,83 200 19,00 19,50 18,00 18,83 250 17,50 19,00 18,00 18,17 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 77.310 12.885 18.039 0.0000 Within 14 10.000 0.714 Total 20 87.310 Coefficient of Variation = 4.63% Number Sum Average SD SE -1 3.00 45.500 15.167 0.76 0.49 3.00 50.000 16.667 0.76 0.49 3.00 53.000 17.667 0.76 0.49 3.00 64.500 21.500 1.00 0.49 3.00 59.500 19.833 1.04 0.49 3.00 56.500 18.833 0.76 0.49 3.00 54.500 18.167 0.76 0.49 -Total 21.00 383.500 18.262 2.09 0.46 Within 0.85 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 0.7140 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 2.054 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 15.17 16.67 17.67 21.50 19.83 18.83 18.17 E DE CD A AB BC BCD Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 21.50 19.83 18.83 18.17 17.67 16.67 15.17 A AB BC BCD CD DE E Bảng 26 Ảnh hưởng oligo-β-glucan lên hàm lượng chất khô xà lách thủy canh Hàm lượng chất khô, % Liều xạ, kGy Trung bình Cây Cây Cây ĐC 4,71 4,87 4,85 4,81 50 100 150 200 250 4,75 5,04 5,14 5,11 5,15 4,89 4,95 5,03 5,06 5,13 5,07 4,73 4,73 4,87 5,13 5,05 5,08 4,91 4,81 4,98 5,11 5,10 5,10 4,84 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.359 0.060 8.955 0.0004 Within 14 0.094 0.007 Total 20 0.453 Coefficient of Variation = 1.65% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 14.430 4.810 0.09 0.05 3.00 14.430 4.810 0.12 0.05 3.00 14.940 4.980 0.10 0.05 3.00 15.330 5.110 0.04 0.05 3.00 15.290 5.097 0.04 0.05 3.00 15.300 5.100 0.04 0.05 3.00 14.530 4.843 0.10 0.05 -Total 21.00 104.250 4.964 0.15 0.03 Within 0.08 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 0.007000 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.2034 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 4.810 4.810 4.980 5.110 5.100 5.100 4.840 B B AB A A A B Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 5.110 5.100 5.100 4.980 4.840 4.810 4.810 A A A AB B B B Bảng 27 Ảnh hưởng nồng độ oligo-β-glucan lên sinh khối tươi xà lách thủy canh Sinh khối tươi, g/c Nồng độ, Trung bình ppm Cây Cây Cây ĐC 25,65 30,80 27,01 27,82 25 50 75 100 150 200 28,86 34,20 44,47 42,49 36,33 38,51 35,97 42,78 42,59 48,08 35,75 30,44 28,99 39,72 40,10 45,74 41,87 32,90 31,27 38,90 42,39 45,44 37,98 33,95 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 692.751 115.458 9.646 0.0003 Within 14 167.575 11.970 Total 20 860.326 Coefficient of Variation = 9.40% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 83.460 27.820 2.67 2.00 3.00 93.820 31.273 4.07 2.00 3.00 116.700 38.900 4.35 2.00 3.00 127.160 42.387 2.19 2.00 3.00 136.310 45.437 2.81 2.00 3.00 113.950 37.983 3.38 2.00 3.00 101.850 33.950 4.14 2.00 -Total 21.00 773.250 36.821 6.56 1.43 Within 3.46 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 11.97 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 8.409 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 27.82 31.27 38.90 42.39 45.44 37.98 33.95 C BC AB A A AB BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 45.44 42.39 38.90 37.98 33.95 31.27 27.82 A A AB AB BC BC C Bảng 28 Ảnh hưởng nồng độ oligo-β-glucan lên chiều cao xà lách thủy canh Chiều cao cây, cm Nồng độ, Trung bình ppm Cây Cây Cây ĐC 17,0 18,5 18,0 17,83 25 50 75 100 150 200 19,2 20,5 21,5 22,5 21,5 21,5 17,5 19,0 20,5 21,0 20,5 19,0 19,5 19,6 20,5 23,0 19,5 19,5 18,73 19,70 20,83 22,17 20,50 20,00 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 36.060 6.010 6.489 0.0019 Within 14 12.967 0.926 Total 20 49.027 Coefficient of Variation = 4.82% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 53.500 17.833 0.76 0.56 3.00 56.200 18.733 1.08 0.56 3.00 59.100 19.700 0.75 0.56 3.00 62.500 20.833 0.58 0.56 3.00 66.500 22.167 1.04 0.56 3.00 61.500 20.500 1.00 0.56 3.00 60.000 20.000 1.32 0.56 -Total 21.00 419.300 19.967 1.57 0.34 Within 0.96 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 0.9260 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.685 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 17.83 18.73 19.70 20.83 22.17 20.50 20.00 D CD BC AB A AB BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 22.17 20.83 20.50 20.00 19.70 18.73 17.83 A AB AB BC BC CD D Bảng 29 Ảnh hưởng nồng độ oligo-β-glucan lên chiều dài rễ xà lách thủy canh Chiều dài rễ, cm Nồng độ, Trung bình ppm Cây Cây Cây ĐC 14,0 14,2 12,5 13,57 25 50 75 100 150 200 16,0 17,5 18,5 19,5 19,5 16,5 13,5 17,5 17,5 21,5 16,5 18,0 15,0 15,5 19,2 20,8 18,0 17,5 14,83 16,83 18,40 20,60 18,00 17,33 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 97.486 16.248 13.583 0.0000 Within 14 16.747 1.196 Total 20 114.232 Coefficient of Variation = 6.40% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 40.700 13.567 0.93 0.63 3.00 44.500 14.833 1.26 0.63 3.00 50.500 16.833 1.15 0.63 3.00 55.200 18.400 0.85 0.63 3.00 61.800 20.600 1.01 0.63 3.00 54.000 18.000 1.50 0.63 3.00 52.000 17.333 0.76 0.63 -Total 21.00 358.700 17.081 2.39 0.52 Within 1.09 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 1.196 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 2.658 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 13.57 14.83 16.83 18.40 20.60 18.00 17.33 D CD BC AB A AB BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 20.60 18.40 18.00 17.33 16.83 14.83 13.57 A AB AB BC BC CD D Bảng 30 Ảnh hưởng nồng độ oligo-β-glucan lên hàm lượng chất khô xà lách thủy canh Nồng độ, ppm Cây 4,95 5,65 5,99 6,34 6,57 5,97 5,12 ĐC 25 50 75 100 150 200 Hàm lượng chất khô, % Cây 4,71 5,39 5,77 6,15 6,82 5,82 6,31 Cây 6,03 5,42 5,72 6,61 6,69 6,07 6,66 Trung bình 5,23 5,49 5,83 6,37 6,69 5,95 6,03 Kết phân tích ANOVA A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 692.751 115.458 9.646 0.0003 Within 14 167.575 11.970 Total 20 860.326 Coefficient of Variation = 9.40% Var V A R I A B L E No Number Sum Average SD SE -1 3.00 83.460 27.820 2.67 2.00 3.00 93.820 31.273 4.07 2.00 3.00 116.700 38.900 4.35 2.00 3.00 127.160 42.387 2.19 2.00 3.00 136.310 45.437 2.81 2.00 3.00 113.950 37.983 3.38 2.00 3.00 101.850 33.950 4.14 2.00 -Total 21.00 773.250 36.821 6.56 1.43 Within 3.46 Kết trắc nghiệm phân hạng Error Mean Square = 0.1820 Error Degrees of Freedom = 14 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.7471 at alpha = 0.050 Original Order Ranked Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 5.230 5.490 5.830 6.370 6.690 5.950 6.030 D CD BCD AB A ABCD ABC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = = = 6.690 6.370 6.030 5.950 5.830 5.490 5.230 A AB ABC ABCD BCD CD D ... Trang, anh Lợi anh Ân giúp đỡ chia kinh nghiệm q trình thực tập Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 14 tháng 07 năm 2012 Võ Minh Khoa iii TĨM TẮT Từ năm 1970, hoạt tính sinh học β-glucan biết đến với nhiều... CHIẾU XẠ KẾT HỢP XỬ LÝ HYDROGEN PEROXIDE Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực TS LÊ QUANG LUÂN VÕ MINH KHOA Tháng 07/2012 ii LỜI CẢM ƠN Trong tháng thực tập phòng Sinh học Trung tân Hạt nhân Tp HCM... LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO Oligo-β-glucan BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾU XẠ KẾT HỢP XỬ LÝ HYDROGEN PEROXIDE Hướng dẫn khoa học Sinh viên