Kiểm nghiệm và khảo nghiệm vacxin h5n1 của trung quốc trên vịt

Kiểm nghiệm và khảo nghiệm vacxin h5n1 của trung quốc trên vịt

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP I -------***------- VŨ THỊ MỸ HẠNH KIỂM NGHIỆM VÀ KHẢO NGHIỆM VACXIN H5N1 CỦA TRUNG QUỐC TRÊN VỊT LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: TS. TÔ LONG THÀNH HÀ NỘI - 2007 2 Lời cam đoan Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu và kết quả trình bày trong luận văn là trung thực và cha từng đợc ai công bố trong bất cứ công trình nào khác. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đ đợc cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đ đợc chỉ rõ. Tác giả Vũ Thị Mỹ Hạnh i 3 Lời cảm ơn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: - TS. Tô Long Thành, ngời hớng dẫn khoa học trực tiếp đ đóng góp nhiều ý kiến quan trọng từ những bớc nghiên cứu ban đầu đến quá trình thực hiện viết luận văn. - PGS.TS. Trơng Quang, các thầy cô trong bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm - Bệnh lý cùng toàn thể các thầy cô giáo Khoa Thú y và Khoa Sau Đại học, Trờng ĐHNNI Hà Nội đ tạo điều kiện và đóng góp nhiều ý kiến quý báu cho tôi hoàn thành luận văn này. - Ban lnh đạo Trung tâm Kiểm nghiệm Thuốc Thú y Trung ơng I và các bạn đồng nghiệp đ giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài. - Ban lnh đạo cùng tập thể cán bộ công nhân viên Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ơng đ tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian thực tập. - Cảm ơn các nhà khoa học trong ngành, các đồng nghiệp, bè bạn và ngời thân đ động viên giúp đỡ tôi trong quá trình công tác và học tập. Tác giả Vũ Thị Mỹ Hạnh ii 4 Mục lục Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình ix 1. Mở đầu 1 1.1 Đặt vấn đề 1 1.2 Mục tiêu đề tài 2 2. Tổng quan tài liệu 3 2.1 Giới thiệu chung về bệnh cúm gia cầm 3 2.1.1 Lịch sử bệnh cúm gia cầm 3 2.1.2 Bệnh cúm gia cầm trên thế giới và châu á 4 2.1.3 Tóm tắt tình hình bệnh cúm gia cầm ở Việt Nam 6 2.2 Virus học bệnh cúm gia cầm 7 2.2.1 Cấu trúc chung của virus 7 2.2.2 Quá trình nhân lên của virus 11 2.2.3 Tính đa dạng của kháng nguyên 12 2.2.4 Sức đề kháng của virus 14 2.2.5 Độc lực của virus 14 2.2.6 Nuôi cấy và lu giữ virus cúm gia cầm 15 2.3 Miễn dịch chống bệnh cúm gia cầm 15 2.3.1 Miễn dịch tự nhiên 16 2.3.2 Miễn dịch đặc hiệu 17 iii 5 2.4 Dịch tễ học của bệnh cúm gia cầm 21 2.4.1 Động vật cảm nhiễm 21 2.4.2 Động vật mang virus 22 2.4.3 Sự truyền lây 23 2.4.4 Mùa vụ phát bệnh 25 2.5 Triệu chứng 25 2.6 Bệnh tích 26 2.7 Chẩn đoán 26 2.8 Tình hình sử dụng vacxin trên thế giới và khuyến cáo của tổ chức dịch tễ thế giới 27 2.8.1 Vacxin truyền thống 28 2.8.2 Vacxin tái tổ hợp 30 2.8.3 Chiến lợc DIVA 31 2.8.4 Yêu cầu cần đạt đợc với vacxin phòng bệnh cúm gia cầm 31 2.8.5 Tình hình sử dụng vacxin cúm gia cầm trên thế giới 32 2.8.6 Khuyến cáo của OIE về việc sử dụng vacxin phòng chống cúm gia cầm 34 3. Nội dung, nguyên liệu và phơng pháp nghiên cứu 36 3.1 Nội dung nghiên cứu 36 3.1.1 Kiểm nghiệm vacxin cúm gia cầm H5N1 của Trung Quốc 36 3.1.2 Khảo nghiệm vacxin cúm gia cầm H5N1 của Trung Quốc ngoài thực địa 36 3.2 Nguyên liệu dùng trong nghiên cứu 36 3.2.1 Động vật thí nghiệm 36 3.2.2 Vacxin 36 3.2.3 Các trang thiết bị và cơ sở vật chất 36 iv 6 3.3 Phơng pháp nghiên cứu 36 3.4 Bố trí thí nghiệm 43 4. Kết quả và thảo luận 47 4.1 Kết quả kiểm nghiệm vacxin cúm H5n1 của Trung Quốc trong 2 năm 2006-2007 47 4.1.1 Kt qu kim tra vô trùng 47 4.1.2 Kết quả kiểm tra an toàn 48 4.1.3 Kết quả kiểm tra hiệu lực 50 4.2 Kết quả khảo nghiệm vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc trên vịt ngoài thực địa 52 4.2.1 Kết quả khảo nghiệm vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc trên vịt tại 2 trại thuộc tỉnh Bắc Ninh 53 4.2.2 Kết quả giám sát sau tiêm phòng vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc trên vịt ở một số trại giống trung ơng và địa phơng 70 5. kết luận 81 Tài liệu tham khảo 83 v 7 Danh môc c¸c ch÷ viÕt t¾t AI Avian Influenza FAO Food and Agriculture Organization GMT Geometic Mean Title HA Haemagglutination Assay HI Haemagglutination Inhibition Assay HPAI Highly Pathogenic Avian Influenza KN Kh¸ng nguyªn KT Kh¸ng thÓ LPAI Lowly Pathogenic Avian Influenza OIE Office International edes Epizooties RNA Ribonucleic acid RT-PCR Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction vi 8 Danh mục bảng Bảng 4.1 Tổng hợp kết quả kiểm tra vô trùng vacxin H5N1 của Trung Quốc trong 2 năm 2006-2007 48 Bảng 4.2 Tổng hợp kết quả kiểm tra an toàn vacxin H5N1 của Trung Quốc trong 2 năm 2006-2007 49 Bảng 4.3 Tổng hợp kết quả kiểm tra hiệu lực vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc trong 2 năm 2006-2007 50 Bảng 4.4 Kết quả giám sát sự cảm nhiễm và sự lu hành của virus cúm H5N1 trên đàn vịt khảo nghiệm 55 Bảng 4.5 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 3 tuần sau tiêm vacxin lần thứ nhất 56 Bảng 4.6 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 5 tuần sau tiêm vacxin lần thứ nhất 59 Bảng 4.7 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 7 tuần sau tiêm vacxin lần thứ nhất 61 Bảng 4.8 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 9 tuần sau tiêm vacxin lần thứ nhất 64 Bảng 4.9 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 11 tuần sau tiêm vacxin lần thứ nhất 66 Bảng 4.10 Tổng hợp kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể trung bình trong huyết thanh vịt đợc tiêm vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc 68 vii 9 Bảng 4.11 Kết quả xác định sự có mặt của virus H5 trong dịch ngoáy ổ nhớp của vịt trớc và sau khi tiêm vacxin 71 Bảng 4.12 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 1-2 tháng sau tiêm vacxin năm 2006 73 Bảng 4.13 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 3-4 tháng sau tiêm vacxin năm 2006 75 Bảng 4.14 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 1-2 tháng sau tiêm vacxin năm 2007 77 Bảng 4.15 Tổng hợp kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh của vịt sau tiêm vacxin trong 2 năm 2006-2007 79 viii 10 Danh mục hình Hình 2.1 Cấu trúc virus cúm dới kính hiển vi điện tử 8 Hình 2.2 Cấu trúc virus H5N1 9 Hình 2.3 Các kiểu đột biến 13 Hình 2.4 Đờng truyền lây của virus cúm 24 Hình 4.1 Biến động hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của gà đợc tiêm vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc trong 2 năm 2006- 2007 52 Hình 4.2 Diễn biến hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 3 tuần sau tiêm vacxin mũi 1 57 Hình 4.3 Diễn biến hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 5 tuẫn sau tiêm vacxin mũi 1 58 Hình 4.4 Diễn biến hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 7 tuần sau tiêm vacxin mũi 1 62 Hình 4.5 Diễn biến hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 9 tuần sau tiêm vacxin mũi 1 63 Hình 4.6 Diễn biến hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của vịt tại thời điểm 11 tuần sau tiêm mũi 1 65 Hình 4.7 Biến động tỷ lệ bảo hộ của vịt tại các thời điểm sau tiêm vacxin H5N1 của Trung Quốc ở 2 trại tại tỉnh Bắc Ninh 69 Hình 4.8 Biến động hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của vịt ở thời điểm 1-2 tháng và 3-4 tháng sau tiêm vacxin H5N1 của Trung Quốc trong 2 năm 2006-2007 80 ix . khảo nghiệm vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc trên vịt tại 2 trại thuộc tỉnh Bắc Ninh 53 4.2.2 Kết quả giám sát sau tiêm phòng vacxin cúm H5N1 của Trung Quốc. GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP I -------***------- VŨ THỊ MỸ HẠNH KIỂM NGHIỆM VÀ KHẢO NGHIỆM VACXIN H5N1 CỦA TRUNG QUỐC TRÊN VỊT LUẬN VĂN