Ôn tập vi sinh Thú Y

Câu 1: Vẽ hình mơ tả sơ lược thành phần cấu tạo tế bào vi khuẩn Hầu hết bào quan diện tế bào chân hạch lại khơng có tế bào sơ hạch Tế bào khơng có màng nhân khơng có cấu trúc có màng khác mạng nội chất, hệ Golgi, tiêu thể, peroxisom ty thể (các chức ty thể thực mặt tế bào vi khuẩn) Ở vi khuẩn quang tổng hợp, có phiến hay túi chứa diệp lục tố mà khơng phải lạp có màng bao riêng biệt Từ lâu người ta nghĩ tế bào sơ hạch khơng có nhiễm sắc Hiện nay, với kính hiển vi điện tử người ta biết tế bào sơ hạch có phân tử AND to, khơng liên kết chặt chẽ với protein AND tế bào chân hạc, xem nhiểm sắc thể Tế bào vi khuẩn thường có AND nhỏ, độc lập gọi Plasmid Nhiễm sắc thể tế bào sơ hạch plasmid có kiến trúc vòng kín Như nhiễm sắc thể tế bào chân hạch, nhiễm sắc thể tế bào sơ hạch có amng gen kiểm sốt cá đặc điểm di truyền tế bào cá hoạt động thông thường Sự tổng hợp protein thực hiên ribô thể, bào quan quan trọng tế bào chất tế bào sơ hạch chân hạch Tuy nhiên ribô thể tế bào sơ hạch nhỏ tế bào chân hạch Một số tế bào vi khuẩn có tơ mà quen gọi chiên mao Những chiên mao khơng có vi ống cấu trúc cử động hoàn toàn khác chiên mao tế bào chân hạch Chiên mao vi khuẩn cấu tạo loại protein flagellin xếp theo đường xoắn Sự cử động vi khuẩn quay tròn cá sợi protein đẩy tế bào tới; đổi hướng di chuyển nhờ đảo ngược chiều quay cách tạm tời sợi protein chiên mao Vách tế bào hầu hết vi khẩn cấu tạo murein gồm đường đa liên kết với cá nhánh acid amin, tìm thấy tế bào vi khuẩn Câu 2: Thành phần cấu tạo thành tb vi khuẩn Gram dương vi khuẩn Gram âm Vi khuẩn Gram dương (Gr+) Vách tế bào vi khuẩn Gr+  Gồm nhiều lớp Peptidoglycan tạo thành mạng lưới chiều, liên kết rộng rãi vững  Acid Teichoic tập hợp lại nhờ glycerol gắn với D – Alanine Photphat  Lớp bao bên ngồi Polysaccharide Polypeptid Các lớp bên ngồi giữ vai trò kháng ngun thân đặc hiệu Vi khuẩn Gram âm (Gr-) Vách tế bào vi khuẩn Gr Chỉ gồm lớp Peptidoglycan nên mỏng dễ bị phá vỡ lực học  Bên ngồi lớp Lipoprotein, Pretein, Liposaccharid Các lớp nội độc tố vi khuẩn gây bệnh đồng thời kháng nguyên thân  Polysaccharide cùng: định tính kháng ngun thân  Polysaccharid ngồi cùng: định tính kháng nguyên  Protein: định tính miễn dịch  Lipid: độc tính nội độc tố Câu : Vai trò vách tế bào vi khuẩn phương pháp nhuộm Gram Việc phân biệt hai loại vi khuẩn Gram dương Gram âm nhà vi khuẩn học Christian Gram người Đan Mạch (1889) Muốn nhuộm Gram trước hết người ta nhuộm tiêu cố định Cristal Violet (tím tinh thể) sau xử lý dung dịch Lugol, sau tẩy màu cồn Aceton Cuối nhuộm lại Fuchsine hay Safranin Vi khuẩn gọi vi khuẩn Gr+ không bị tẩy màu xử lý cồn hay Acetone tức giữ màu tím Cristal Violet, vi khuẩn coi Gr- ngược lại bị màu tím thuốc nhuộm thứ sau bắt màu thuốc nhuộm thứ hai tức màu hồng Fuchsine Safranin Giả thuyết hoá học: Cho cấu trúc hoá học tế bào vi khuẩn Gr+ có chất đặc biệt mà vi khuẩn Gr- khơng có có ít, Protein kiềm, muối Magie Acid Nucleic Khi nhỏ Cristal Violet xử lý Lugol, chất thấm vào tế bào tạo với chất đặc biệt có tế bào thành phức hợp tím tinh thể - iod (Protein Ribonucleat Magie Iod Pararosanillin) Chất cố định thuốc nhuộm tế bào, thuốc nhuộm bền vững không bị hồ tan cồn Acetone, tẩy màu, vi khuẩn Gram dương giữ màu tím Cristal Violet, cuối nhỏ Fuchsine, tế bào nhuộm màu tím nên khơng bắt màu hồng Fuchsine Trái lại, vi khuẩn Gr-, phức hợp khơng hình thành, khơng cố định thuốc nhuộm, bước tẩy màu làm vi khuẩn màu, nhỏ Fuchsine vào vi khuẩn bắt màu hồng Funshine Giả thuyết cấu trúc vách tế bào: Tính chất bắt màu Gram tính thấm vách tế bào định, tính thấm vi khuẩn Gram âm, cho phép cồn Acetone lơi kéo thuốc nhuộm tế bào Do khác thành phần vách tế bào vi khuẩn Gr+ vi khuẩn Gr-, nên kà nguyên mà tính chất nhuộm màu chúng khác Vách tế bào vi khuẩn Gr+ dày, gồm nhiều lớp Peptidoglycan vững vách tế bào vi khuẩn Gr- nên phức hợp tím tinh thể - Iod khơng bị thấm ngồi, không màu sau vi khuẩn bị tẩy màu cồn vi khuẩn Gr+ giữ màu tím, vi khuẩn Gr- màu tím sau tẩy cồn Câu 4: Vẽ hình mơ tả cấu tạo bào tử  Lỏi: chưa màng bào tử, bào tử chất, máy tổng hợp protein hệ thống tạo lượn… chứa Acid Dipicolinic, Ca, nước  Vách (wall): bao quanh lỏim chưa Peptidoglycan bất thường có nhiều sợ chéo, chìa khố nảy mầm, dễ bị Lysozym phá huỷ  Áo (Coat): cấu tạo bở Protein giống Karetin giúp chống lại tác nhân hoá học diệt khuẩn  Exosporium: lớp Liporotein chứa vài giọt đường Câu : Phân biệt vi sinh vật tự dưỡng dị tưởng nguồn thức ăn carbon Năng lượng cho tế bào Cấu tử tế bào VSV quang tự dưỡng Ánh sáng CO2 VSV quang dị dưỡng Ánh sáng CHC ≠ trồng VSV hoá tự dưỡng HC VC, H2, NH3, NO2-, Fe2+, CO2 ≠ động vật H2S VSV hoá dị dưỡng HCHC HCHC Câu : Đối tượng ngành vi sinh vật học Vi sinh vật học khoa học nghiên cứu đặc điểm sinh học cẩu cá vi sinh vật Đó sinh vật có kích thước hiển vi siêu hiển vi Các nhóm đối tượng vi sinh vật học chia làm cá nhóm sau :  Vi khuẩn (Bacteria): có kích thước nhỏ, đường kính khoảng 0,5 – µm, thuộc nhóm vi sinh vật sơ hạch Vi khuẩn phân bố khắp nơi, tìm thấy chúng sông hồ, biển sau, núi, khơng khí,…  Nấm (Fungi): có kích thước lớn vi khuẩn, thuộc nhóm vi sinh vật chân hạch Nấm hia thành hai nhóm nhỏ nấm men (yeast) nấm sợi (Filamentous Fungi)  Nấm men nấm đơn bào có hình bầu dục, đường kính – 10 µm, sinh sản cách nảy chồi  Nấm sợi nấm đa bào, sợi nấm có vách ngăn ngang khơng, sinh sản vơ tính bào tử  Xạ khuẩn (Antinomycestes): có kích thước lớn vi khuẩn nhỏ nấm Sợ xạ khuẩn phân nhánh phức tạp Khuẩn lac xạ khuẩn phát triển môi trường thạch theo vân sậm nhạt xen kẻ đặc sắc Xạ khuẩn sinh sản bào tử, có nhiều loài xạ khuẩn sản xuất kháng sinh  Rong (Tảo, Algae): Có kích thước tương đương với nấm, rong đơn bào sống riêng lẻ sơgs thành tộc đồn, thể đa bào hình sợ Đa số tảo thuộc nhóm vi sinh vật chân hạch, ngoại trừ tảo (Cyanophyla) thuộc nhóm sơ hạch Rong sinh sản cách phân đốt  Nguyên sinh động vật (Protozoa): đa dạng, kích cỡ thay đổi từ 20 – 200 µm đường kính, vi sinh vật chân hạch đơn bào, thể sống thành tộc đoàn, thí dụ cỏ lồi nhai lại Nguyên sinh đọng vật phong phú chủng loại Rickettsia, Chlamydia Mycoplasma vi khuẩn ký sinh nội bào bắt bào  Rickttsia vi sinh vật nhỏ vi khuẩn lớn hnư virus, chúng ký sinh bắt buộc giống virus có nhiều đặc điểm virus (có cấu trúc tế bào thiếu số enzyme hô hấp lượn) quan sát kính hiển vi quang học, kích thước 0,25 – µm Là tác nhân gây bệnh quan gia súc, gia cầm  Mycoplasma có đặc điểm Rickettsia bé (khoảng 150 nm) tác nhân gây bệnh quan trọng  Virus: có kích thước nhỏ nhất, chui lọt qua màng lọc vi khuẩn (2 – 20 µm), nhìn thấy kính hiển vi điện tử, virus tiến hoa kém, không xem vi sinh vật – khơng có khả tự sinh sản dinh dưỡng độc lập (ký sinh bắt buộc) – số virus kết tinh giống hố chất (kết tính thành tinh thể thẩm thấu qua lớp agar) Câu 7: Đặc tính hình thể tế bào vi khuẩn Vi khuẩn (Bacteria) sinh vật đơn bào, hạ đẳng, khơng có màng nhân (Prokaryote), chúng có cấu trúc hoạt động đơn giản hơ nhiều so với tế bào có màng nhân (Eukaryote) Tuy nhiên có số chức vách tế bào vận chuyển di truyền vi khuẩn phức tạp không sinh vật phát triển Vi khuẩn có kích thước thay đổi tuỳ lồi, kích thước vi khuẩn tính micromet Bằng phương pháp nhuộm soi kính hiển vi, xác định hình thái kích thước vi khuẩn Vi khuẩn có hình thái riêng, đặc tính sinh vật riêng biệt, chúng có khả gây bệnh cho người, động vật thực vật, số có khả tiết chất kháng sinh (Bacillus subtilis) Đa số vi khuẩn sống hoại sinh tự nhiên Câu 8: Thành phần vo hữu tế bào vi khuẩn Nước muối khoáng  Nước chiểm khoảng 70 – 90% khối lượng thể vi sinh vật  Nước tự do: phần nước tham gia vào trình trao đổi chất vi sinh vật Phần chiếm đa phần  Nước kết hợp: phần nước kết hợp với hợp chất hữu khác (protein, lipid, carbohydrate)  Muối khoáng chiểm -5 % khối lượng khô tế bào Thường tồn dạng Sulphate, Photphate, Carbonate, Clorua,… Trong tế bào chúng dạng ion như: Mg++, Ca++, K+, Na+,… HSO4-, SO4-, HCO3-, Cl-,…  Sự diện ion nhằm trì độ pH áp suất thẩm thấu thích hợp cho vi sinh vật Chất hữu cỡ Chất hữu tế bào vi sinh vật chủ yếu cấu tạo bở nguyên tố C, H, O, N, P, S, … riêng bốn nguyên tố CHON chiếm đến 90 – 97% chết khơ tế bào Đó ngun tố chủ chốt tạo nên protein, acid nucleic, lipid, carbohydrate Protein cấu tạo ngun tố : CHONS Ngồi có P, Fe, Zn, Cu, Mn, Ca,… Protein tạo thành từ acid amin Acid nucleic (ADN&ARN) cấu tạo N (1 – 6%), P (9 – 10%), phần lại CHO Câu 10: Nguồn thức ăn đạm khoáng cho vi khuẩn Nguồn thức ăn nitơ vi sinh vật  Nguồn nitơ dễ hấo thu NH3, NH4+  Muối nitrat nguồn nitơ cho tảo, nấm sợi  Nitơ tự khơng khí chuyển hoá thành NH3 nhờ enzyme nitrogenase vi sinh vật cố định N  Vi sinh vật đồng hoá N thức ăn hữu cơ: Nguồn N hữu thường sử dụng nuối cấy vi sinh vật peptone Nguồn acid amin có nhóm vi sinh vật:  Nhóm tự dưỡng acid amin: tổng hợp acid amin từ NH4, không cần cung cấp loại acid amin  Nhóm dị dưỡng acid amin: phải cung cấp nhiều acid amin mà chúng cần Chúng không tổng hợp đực acid amin  Nhóm vi sinh vạt khơng có acid amin phát triển được, có phát triển tốt  Acid amin không thay acid amin mà vi sinh vật không tổng hợp được, phải cung cấp để chúng phát triển  Đa số môi trường ni cấy vi khuẩn có thành phần: (pepton: 5g, cao thịt: 3g, NaCl: 8g) lít nước  Các acid amin dãy D, vi sinh vật không hấp thu Nguồn thức ăn khoáng vi sinh vật Các chất khống cần có mặt mơi trường ni cấy vi sinh vật là: P, S, Mg, Ca, Na, K, Cl P thường chiếm tỉ lệ cao số nguyên tố khoáng tế bào vi sinh vật (đến 50% tổng số khống chất), P có mặt cấu tạo nhiều thành phần quan trọng tế bào acid nucleic, phosphoprotein, phospholipids, nhiều coenzyme quan trọng ADP, ATP, NAD, NADP, flavin,… ) Người ta thường sử dụng nguồn phosphate vô KH2PO4, K2HPO4,… để bổ sung vào môi tường nuôi cấy Câu 11: Sơ lược yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng vi khuẩn Độ pH môi trường  Vi khuẩn ưa acid : pH 0,1 – 5,4  Vi khuẩn ưa trung tính : pH 5,4 – 8,5  Vi khuẩn ưa kiềm: pH 8,5 – 11,5  Thay đổi pH làm biến tính enzyme cá protein khác ảnh hưởng đến hoạt động trao đổi ion màng tế bào  Nhiều vi khuẩn sản xuất acid chất trung gian tác động vào tăng trưởng chúng Nhiệt độ  Vi khuẩn ưa lạnh: 15 -20 độ C Ở đât, nước lạnh, nước biển, khơng có thể người  Vi khuẩn ưa ấm: 25 – 40 độ C Đa số gây bệnh người động vật Vi khuẩn hoại sinh  Vi khuẩn ưa nóng: 50 – 60 độ C Vi khuẩn suối nước nóng, phân ủ Oxy  Vi khuẩn thiếu khí: cần O2 để tăng trưởng  Vi khuẩn vi hiếu khí  Vi khuẩn kỵ khí tuỳ nghi  Vi khuẩn ky khí dung nạp O2, cần O2 để sống không dùng đến biến dưỡng  Vi khuẩn kỵ khí: sống điều kiện khơng có O 2, có O2, vi khuẩn chết tác dụng độc của:  Superoxide (O2): dạng hoạt động độc O2  O2- (- - (superoixide dismutase) - ->) O2 H2O2  Hydrogen peroxide (H2O2) (- - (catalase) - ->) H2O O2  Vi khuẩn kỵ khí khơng có enzyme nên bị ngộ độc Độ ẩm  Nước cần cho hoạt động biến dưỡng tế bào  Thiếu thước => loại nước khỏi tế bào: trao đổi chất giảm làm cho tế bào chết  Cầu khuẩn Gr- chết môi trường thiếu nước vài Steptococus chịu hàng tuần  Nha bào chịu đựng khô hạn tốt tế bào sinh trưởng  Đông khô tế bào giữ thời gian dài (hàm lượng nước tế bào < 14%) Bức xạ  Ánh sáng - -> biến đổi hoá học - -> tổn thương sinh học cho tế bào  Mức gây hại tuỳ thuộc mức lượng lượng tử ánh sáng hấp thu  Mức lượn lượng tử lệ thuộc gián tiếp vào chiều dài bước sóng  Các tia có bước sóng khác 1000 nm: Ánh sáng mặt trời, tia UV, tia X, tia rama, tia vũ trụ gây biến đổi lớn  Các tia có bước sóng lớn khơng ảnh hưởng Câu 12: Vẽ hình giải thích đường cong tăng trưởng vi sinh vật Sự tăng trưởng mật số vi sinh vật theo thời gian biểu diễn đồ thị với trục tung log số mật số vi sinh vật/1ml mơi trường trục hồnh thời gian ni cấy (h) Đồ thị dạng hình chữ S gọi đường cong tăng trưởng vi sinh vật Có thể chia đường cong tăng trưởng làm giai đoạn: Giai đoạn chậm (lag phase): gia đoạn vi khuẩn sống điều kiện không hồn hảo mơi trường cũ ni cấy song mơi trường Vi khuẩn thích ứng dần với mơi trường thành lập enzyme cần cho biến dưỡng, tổng hợp nguyên sinh chất, tích luỹ chất cần cho tế bào Đây thời kỳ hoạt động mạnh vi khuẩn dẫn số (mật độ) không gia tăng Giai đoạn dài hay ngắn tuỳ theo trạng thái vi khuẩn Nếu vi khuẩn thiếu dinh dưỡng mơi trường cũ gia đoạn dài Nếu vi khuẩn sẵn sàng sinh sản mơi trường cũ giai đoạn ngắn Giai đoạn lũ thừa (exponential phase) Vật liệu cần cho tế bào tổng hợp, tế bào bắt đầu phân chia với tốc độ mạnh, mật độ tế bào tăng theo cấp số nhân (thải môi trường cồn, CO2, acid hữu - -> ảnh hưởng đến phát triển chúng) Mật số vi khuẩn gia tăng dưỡng chất môi trường cạn kiệt độc tố tích tụ mơi trường cao phản ứng biến dưỡng thải Giai đoạn ổn định (stationary phase): chất dinh dưỡng cạn, chất đọc tố tích tụ cao, pH thay đổ làm tỉ suất tăng trưởng giảm Số lượng vi khuẩn chết tương đương với số sinh sản Giai đoạn chết (death phase): sau thời kỳ ổn định, thời gian thay đổi tuỳ thuộc vi khuẩn điều kiện môi trường, tỉ suất chết tăng dần đến mức độ cố định (Nếu tiếp tục theo dõi giai đoạn: giai đoạn chậm - -> giai đoạn luỹ thừa - -> giai đoạn ổn định - -> giai đoạn tử vong có tình xảy ra) Thơng thường số tế bào chết, tỉ số chết giảm rõ rêt số tế bào sống sót tồn thời gian với chất dinh dưỡng tế bào chết thoái hoá thải  ... Đối tượng ngành vi sinh vật học Vi sinh vật học khoa học nghiên cứu đặc điểm sinh học cẩu cá vi sinh vật Đó sinh vật có kích thước hiển vi siêu hiển vi Các nhóm đối tượng vi sinh vật học chia... Nguyên sinh đọng vật phong phú chủng loại Rickettsia, Chlamydia Mycoplasma vi khuẩn ký sinh nội bào bắt bào  Rickttsia vi sinh vật nhỏ vi khuẩn lớn hnư virus, chúng ký sinh bắt buộc giống virus... quan trọng  Virus: có kích thước nhỏ nhất, chui lọt qua màng lọc vi khuẩn (2 – 20 µm), nhìn thấy kính hiển vi điện tử, virus tiến hoa kém, không xem vi sinh vật – khơng có khả tự sinh sản dinh