Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)

Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu hoàn thiện quy trình ra ngôi cây dược liệu Ba kích tím Morinda officinalis How (Khóa luận tốt nghiệp)

I H C THÁI NGUYÊN I H C NÔNG LÂM =======o0o======= MUA A KHÁ tài: NGHIÊN C U HOÀN THI C LI U BA KÍCH TÍM (MORINDA OFFICINALIS HOW ) N SAU IN VITRO T H o: I H C NƠNG LÂM Chính quy Chun ngành : Nơng Lâm K t H p Khoa: Khoá h c: Lâm Nghi p 2011 2015 THÁI NGUYÊN 2015 I H C THÁI NGUYÊN I H C NÔNG LÂM =======o0o======= MUA A KHÁ tài: NGHIÊN C U HỒN THI C LI U BA KÍCH TÍM (MORINDA OFFICINALIS HOW ) N SAU IN VITRO T I H C NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN H o : Chính quy Chun ngành Khoa Khố h c Gi : Nông Lâm K t H p : Lâm Nghi p : 2011 - 2015 ng d n:PGS TS Tr n Th Thu Hà THÁI NGUYÊN 2015 i L ng k t qu s li u khóa lu n trung th c c cơng b c trích d n khóa lu rõ ngu n g c XÁC NH N C A GVHD ng ý cho b o v k t qu H I VI c ng khoa h c TS Tr n Th Thu Hà Mua A Khá XÁC NH N C A GI NG VIÊN PH N BI N (ký, h tên) u ii L U Hi n khoa h c k thu t ngày m t phát tri n, vi c c n v n d ng trình nghiên c u v khoa h c k thu t ngày nhi u V y m i sinh ot ng c n ph i n m rõ nh ng ki n th c lý thuy c h c l v n d ng vào th c t Trong trình th c t p t t nghi p m n quan tr ng cho m i sinh viên c n ph i tr i qua v n d ng nh ng ki n th c ho c làm quen v i nh ch áp d ng vào th c ti n s n xu t, t c nhi u kinh nghi m, b xung thêm nhi u ki n th c nâng cao chuyên môn cho b ph c v cho công vi c sau Xu t pháp t nh ng nguy n v ng c a b c s nh t trí c a Ban giám hi ng ban ch nhi m khoa Lâm nghi i h c Nông Lâm Thái Nguyên, ti n hành nghiên c Nghiên c u hoàn thi c li u Ba kích tím (Morinda officinalis How ) i Vi n nghiên c u phát tri n Lâm nghi p T i h c Nông Lâm Thái Nguyên c k t qu giám hi ng ban ch nhi m khoa Lâm nghi ih c om u ki th c hi tài c bi t xin g i l i c c nh t cô giáo TS Tr n Th Thu Hà v i s c a anh KS Nguy n Qu c ti ng d tơi su t q trình th c hi tài Trong trình th c t p m c dù b ts cc g kinh nghi b n thân h n ch Vì v tài không tránh kh i nh ng khuy m thi u sót Tơi r cs ki n s ch b o c a Th y cô b c hồn thi Tơi xin chân thành c Sinh viên Mua A Khá iii DANH M C CÁC B NG B ng 3.1 K t qu ng c a th i gian c m ng t i t l s ng c a sau 30 ngày 24 B ng 3.2 k t qu nghiên c u thành ph n giá th ru t b u ng t i t l s ng c a 25 B ng 3.3 k t qu nghiên c u ng c a thu c tr n m t i t l s ng 26 B ng 3.4 K t qu c u ng c a ch che ph nilon t i t l s ng c a 26 B ng 3.5 k t qu ng c a lo i phân bón t i s sinh tr ng phát tri n c a 27 B ng 4.1 K t qu ng c a th i gian c m ng t i t l s ng c a sau 30 ngày 29 B ng 4.2 k t qu nghiên c u thành ph n giá th ru t b u ng t i t l s ng c a 32 B ng 4.3 k t qu nghiên c u ng c a thu c tr n m t i t l s ng 35 B ng 4.4 K t qu c u ng c a ch che ph nilon t i t l s ng c a 38 B ng 4.5 k t qu ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun bón 41 iv DANH M C CÁC HÌNH Hình 4.1: Bi bi u di n ng c a th i gian c m ng t i t l s ng c a Ba kích 30 Hình 4.2: Hình nh công th c th i gian c m ng 31 Hình 4.3 Bi bi u di n m ng c a giá th nt l s ng Ba kích 33 Hình 4.4 ng c a giá th Hình 4.5 Bi th hi n n t l s ng Ba kích 34 ng c a thu c tr n m t i t l s ng Ba kích 36 Hình 4.6 ng c a thu c tr n m t i t l s ng Ba kích 37 Hình 4.7 Bi bi u di n ng c a ch che ph nilon t i t l s ng c a 39 Hình 4.8 ng c a ch che ph nilon t i t l s ng 40 Hình 4.9 Bi bi u di n ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun bón 42 Hình 4.10 ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun bón 43 v DANH M C CÁC T VI T T T CT: Công th c i ch ng TN: Thí nghi m UBND: y ban nhân dân NAA: Napahlene acetit acid IAA: Acid indol ãetic BIA: Indol -3- butyric acid HSNN: H s nhân nhanh BAP: Bezylamino purin vi M CL C L i L U ii DANH M C CÁC T VI T T T v DANH M C CÁC T VI T T T v Ph n M U 1.1 t v 1.2 M u 1.3 M c tiêu nghiên c u tài Ph n T NG QUAN NGHIÊN C U khoa h c 2.1.1 Nuôi c y mô - t bào th c v t in vitro n ni c y mô t bào th c v t n chu n b n kh trùng m u, c y kh ng n t o ch i nhân nhanh ch i n t o mơ hồn ch nh n chuy 2.1.3 Các y u t n k t qu nuôi c y u ki n vô trùng nuôi c y mô in vitro 2.1.5 Nh ng v nhân gi ng in vitro 10 2.2 Nghiên c u tr c 11 2.2.1 Nghiên c u th gi i 11 2.2.2 c 13 a Ba kích 15 2.4 Cơng d ng c a Ba kích 16 u ki n gây tr c li u Ba kích 18 2.6 T ng quan v khu v c nghiên c u 19 m th c hi tài 19 PH N NG, N U 22 vii m, th i gian ph m vi nghiên c u 22 ng nghiên c u 22 3.1.3 Th i gian ti n hành nghiên c u 22 3.2 N i dung nghiên c u 22 3.2.1 N i dung 22 3.2.2 N i dung 22 u 22 3.3.1 trí thí nghi m 22 27 lý s li u 28 Ph n K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N 29 4.1 K t qu ng c a th i gian c m ng t i t l s ng c a sau 30 ngày 29 4.2 k t qu nghiên c u thành ph n giá th ru t b u ng t i t l s ng c a 31 4.3 K t qu nghiên c u ng c a lo i thu c tr n m t i t l s ng c a 35 4.4 K t qu c u ng c a ch che ph nilon t i t l s ng c a 38 4.5 K t qu ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a 40 Ph n K T LU N VÀ KI N NGH 44 5.1 K t lu n 44 5.1.1 ng c a th i gian c m n t l s ng c a sau c 30 ngày 44 5.1.2 ng c a thành ph n giá th ru t b n t l s ng c a Ba kích 44 5.1.3 ng c a lo i thu c tr n m t i t l s ng c a 44 5.1.4 ng c a ch i t l s ng c a 44 5.1.5 ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun phân bón 45 5.2 Ki n ngh 45 TÀI LI U THAM KH O Ph n M 1.1 U tv Cây Ba Kích Tím (Morinda officianalis How) thu d ng r ng rãi y h c c truy phía B c tìm th y ng Ninh m t s thân th o, s cs m t s t nh vùng núi Ba kích ng thân qu n, t t c b ph n c a Ba c s d ng làm thu c ch a b nh: B th n âm, b th ng gân c t, kh phong th cd kháng, ch ng viêm D ch chi t c n t c Ba kích có tác d ng gi m huy t áp, tác d ng i v i ngon [2] Vì v y nh g us d c li u khai thác ki t qu M c khác, vùng phân b c a Ba kích b tàn phá nghiêm tr ng n lồi lâm vào tình tr ng g n t ch Vi cb ov Ngày v i s phát tri n c a khoa h c k thu t vi c ng d ng nuôi c y mô t bào nhân gi nên ph bi n Nuôi c y mô t bào s t o hàng lo t gi ng s ch b nh, ch s nhân l n gi ng t u cao, h c tính di truy n c a m Góp ph n b o v lo i quý hi ngu n gi ng cho th b o t n phát tri n gi ng quý hi m Trong nhân gi ng b y mơ t bào quy trình n sau in vitrro m n r t quan tr ng u ki n xu ng bên c y vào giá th V y mb c m ng v i môi t c m t quy trình k thu t phù h p cho ba kích cs ng ch ng t khâu t o gi n tr i trà 33 - Giá th t t ng B c ng 2% phân vi sinh (CT3): Giá th cho t l s ng 87,2%, t l ch t 12,8% - Giá th giá th t t ng B + 2% phân vi sinh + 10% tr u hun (CT4): công th c thí nghi m cho t l s giá th khác t l ch t m c cao nh t so v i khác c th là: t l s ng t 95,2%,t l ch t 4,8%,ch ng t r ng giá th cung c ng cho có kh ct cơng th c thí nghi m ta th y giá th thích h p nh ng phát tri n giá th ch t y qua cho ba kích công th c th so sánh ch tiêu v công th c giá th ng t i t l s ng Ba kích ta quan sát hình 4.3 Hình 4.3 Bi bi u di n m c ng c a giá th nt l s ng Ba kích Nhìn giá th bi ta th y Ba kích có t l s ng cao nh t giá th t t ng B + 2% phân vi sinh + 10% tr u hun, c th t t ng B + 2% phân lâm thao 37,4% t t ng B + 2% phân vi sinh 8, 34 th t t ng B 18,6% y giá th thích h p nh ng giá th công th c (giá th t t ng B + 2% phân vi sinh + 10% tr u hun) CT CT Hình 4.4 CT CT ng c a giá th n t l s ng Ba kích 35 4.3 K t qu nghiên c u nh ng c a lo i thu c tr n m t i t l s ng c a i v i lo i nói chung Ba kích nói riêng n r t d b lo i n m h c lo i thu c có kh c lo i n m h i r t c n thi bi t kh n mc a m t s lo i thu c chúng tơi ti n hành thí nghi m v i lo i thu c sau thu c k t qu b ng 4.3 B ng 4.3 k t qu nghiên c u ng c a thu c tr n m t i t l s ng T ng s CT Thu c tr n m m u ti n hành (m u) Không dùng thu c tr CT2 CT3 Dùng KMnO4 Dùng Ridomin Gorl T ng s m u s ng (m u) T l m u T l m u s ng (%) ch t (%) 500 287 57,4 42,6 500 403 80,6 19,4 500 469 93,8 6,2 K t qu cho ta th y gi a công th c có s khác v t l s ng t l ch t Nh ng cơng th c có s d ng lo i thu c khác s ng n t l s ng, t l ch t c a khác K t qu công th i ch ng 57,4% t l s ng, t l ch t 42,6%, cơng th c cho ta th y t l s công th c khác mà ch m c trung bình t m c cao so v i 36 Công th c có t l s ng 80,6 i ch ng 23,2% v t l s ng, t l ch t 19,4% th i công th i ch ng 23,2% Công th c s d ng thu c tr n m Ridomin cho k t qu : t l s ng 93,8 c 36,4%, t l ch t 6,2% th 36,4% c1 y nhìn qua cơng th c thí nghi m ta th y công th c dùng thu c tr n m Ridomin công th c t t nh t Hình 4.5 Bi th hi n ng c a thu c tr n m t i t l s ng Ba kích Bi cho th y k t qu s d ng không s d ng thu c tr n m cho t l s ng t l ch t khác c th công th c là: CT1 không dùng thu c tr n m cho k t qu v t l s ng 57,4%, t l ch t 42,6% Công th c dùng thu c tr n m KMnO4 cho t l s ng 80,6% t l ch t 19,4% Công th c dùng Rdomin Gorl v i t l s ng 93,8% t l ch t 6,2% 37 Qua k t qu s li c thí nghi m cho th y cơng th c công th c cho t l s ng cao nh t m ct Công th c công th c cho t l s ng trung bình Cơng th c công th c cho t l s ng cao tt im c CT CT CT Hình 4.6 nh h ng c a thu c tr n m t i t l s ng Ba kích 38 4.4 K t qu c u ng c a ch che ph nilon t i t l s ng c a M i m t lo u c n ph i có ch ng khác nhau, n ph sóc che ph phù h p c tác d ng c a vi c che ph không che ph t n hành thí nghi B ng 4.4 K t qu c u i s ng c a Ba kích c k t qu ng c a ch b ng s li u sau: che ph nilon t i t l s ng c a CT CT2 T ng s T ng s m u ti n m u s ng hành (m u) (m u) Không dùng 500 Ph nilon 500 th c che ph nilon K t qu thí nghi m cho th y ch T l m u T l m u s ng (%) ch t (%) 108 21,6 79,4 464 92,8 7,2 che ph không che ph nh ng khác t i Ba kích c th là: cơng th c khơng dùng nilon có k t qu v t l s ng 21,6%, t l ch t 79,4% Công th c dùng nilon che ph t t l s ng 92,8%, cao 7,2% th % có t l ch t c 72,2% V y qua thí nghi m t công th c cho ta th y công th c th công th c t t nh t nên s d ng nilon che ph so sánh k t qu s d ng thu c không s d ng thu c tr n m ta quan sát hình 4.7 39 600 500 400 300 200 100 CT1 Hình 4.7 Bi CT2 bi u di n ng c a ch che ph nilon t i t l s ng c a Nhìn vào bi y rõ công th c công th c t công th c 1.Công th c cho t l s t l ch t th t t th c ti n s n xu t i c 71,2%, có c 72,2% V y công th c công th c 40 Ph nilon Hình 4.8 T l s ng c a ng c a ch 4.5 K t qu che ph nilon t i t l s ng ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a Phân bón th a t t c lo c bi m i m t lo i c n m t lo i v i tr ng, ng khác nhau, Cây y bi c k t qu bón t i t l s ng c a Ba kích c k t qu b ng 4.5 s ng c a lo i phân ti n hành làm thí nghi m 41 B ng 4.5 k t qu ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun bón T ng CT s m u Lo i phân bón ti n hành (m u) Khơng dùng CT2 Phân vi sinh AT Chi u cao c phun phân bón (cm) Chi u cao TB sau bón Phát sinh Màu s c m i (cm) 500 5,16 6,33 500 5,23 8,33 Phân h u CT3 5,01 9,69 POMIOR CT4 nh t Xanh m Xanh 500 Phân h u Xanh m, kh e Xanh 500 5,29 9,21 m,cây kh e Qua b ng k t qu bón t i s y ng c a lo i phân ng c a Ba kích rõ r t, nh ng thu c công th c bón phân có s ng t n v i nh ng thu c công th c không ng th h y nh ng cơng th c bón phân ng t t nh t công th c Công th c công th c t t nh t cho k t qu bình 5,01cm, xu t hi n thêm m i t chi u cao trung bình th u cao trung t t i 9,69cm, u s d ng phân bón th gi a CT2 CT4 là: công 42 th u cao 5,23cm, sau s d ng phân bón chi u cao lên t n 8,33cm cơng th dùng phân có chi bón h HVP vào chi u cao lên t n 9,21cm Cơng th i ch ng công th c không s d ng phân bón chi u cao trung bình Ba kích lên r t th p c th t m i nh n 6,33cm không th y xu t hi n c p y k t qu cho ta th y r ng CT3 công th c h p lý s d ng s ng v chi u cao ng v chi phân bón ta quan sát hình 4.9 Hình 4.9 Bi u bi u di n ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun bón Nhìn vào bi ng t i s bi u di n ng c a lo i phân bón có nh ng phát tri n c a Nh ng công th c có s 43 d u cho ta th y k t qu i ch ng, a vi c s d ng lo t qu khác Xét t cơng th c thí nghi n ta th y công th c công th c s d ng phân h c k t qu cao nh t CT CT CT CT ng c a lo i phân bón t i s Hình 4.10 phát tri n c a sau 20 ngày phun bón ng 44 Ph n K T LU N VÀ KI N NGH 5.1 K t lu n Qua k t qu nghiên c c trình bày trên,tơ cm ts k t lu n sau: 5.1.1 ng c a th i gian c m n t l s ng c a sau c 30 ngày - Trong nghiên c u v th i gian c m ng c a Ba kích ta th y th i gian c m ng ánh sáng ngồi lâu s có k t qu s ng nhi u K t qu c th thí nghi m c m l s ng y th i gian c m ng r t c n thi th c ti n s n xu t 5.1.2 ng c a thành ph n giá th ru t b n t l s ng c a Ba kích Giá th t t nh t giá th t t ng B + 2% phân vi sinh + 10% tr u hun, t l s ng 95,3%, giá th giá th t c uv s ch,thống khí, gi c u c t t, cung c v ch t ng cho 5.1.3 ng c a lo i thu c tr n m t i t l s ng c a Các lo i thu c có tên g i khác s n t l s ng khác i v i Ba kích K t qu thí nghi m dùng thu c tr n m Ridomin Gorl có t l s ng 93,91% c dùng thu c tr n m KmnO4 i ch ng 36,56%, v y vi c s d ng Ridomin i hi u qu nh t so v i công th c khác 5.1.4 ng c a ch i t l s ng c a T l s ng cao hay th p K t qu cho th y ch thí nghi m thu c vào ch che ph nilon cho t l s không 45 ph nilon 71,1% V y ch che ph y u t c n thi t vi sóc Ba kích 5.1.5 ng c a lo i phân bón t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun phân bón Vi c s d ng lo i phân bon ng ro r t t i s ng phát tri n c a sau 20 ngày phun K t qu cho th y lo i phân bón h t qu t t h i lo i phân bón khác, c th cơng th c bón phân POMIOR có chi u cao trung bình 9,69 cơng th c dùng phân bón vi sinh AT 1,36 cm, c dùng i ch ng 3,36 t hi n m ng th i i công th c khác 5.2 Ki n ngh - C n nghiên c u thêm v i nhi u cơng th c thí nghi m c m ng - Nghiên c u thêm nhi u công th c giá th tt l s ng cao - C n làm nhi u thí nghi nhi u lo i thu c tr n m khác - C n s d ng nhi u lo i phân bón khác th th c dùng m sinh c lo i phân phù h p nh t lo i 46 TÀI LI U THAM KH O I TÀI LI U TIÊNG VI T Tri thu t tr ng m t s th c ph c li u, Nxb Nông nghi p, Hà N i T t L i (1996), Nh ng thu c v thu c Vi t nam, Nxb khoa h c k thu t Nguy ng (2001), Lâm nghi p Vi t Nam, Nxb Nông nghi p Nguy n th Y n (2012), Nghiên c u m t s bi n pháp nhân gi ng Ba kích tím b nghiên c u s n xu t kinh doanh gi ng Lâm nghi nh hóa Khóa lu n t t nghi p c a sinh viên khoa Lâm nghi p Ph n, Ph c tu n, Ph m Xuân Hoàn (2009), Phát tri n lâm s n ngồi g , Nxb Nơng nghi p, Hà N i 6.Nguy n Chi u, (2002) Nghiêm c u tr ng Ba kích n trang tr i, T c h c s 10/2002, trang 8-10 Nguy n Chi u, Nguy n T p (2007), Ba kích, D án h tr chuyên ngành Lâm s n g Vi ng Nguy n Chi u (1999), nghiên c u s n xu t gi ng Ba kích t h t, T p c h c s 7/1999, trang 18-19 h c ng s (2003), ch n t o nhân gi ng cho m t s loài tr ng r ng ch y u ng H vi t Nam,NXB, nông nghi p Hà N i (2003), Gi ng r ng NXB, Nông nghi p Hà N i 11 Lê Tr n Bình, H H u Ngh , Lê Th Mu i (1997), Công ngh sinh h c th c v t c i ti n gi ng tr ng, Nxb Nông nghi p, Hà N i 47 12 Nguy c Thành (2000), Nuôi c y mô t bào th c v t - Nghiên c u ng d ng, Nxb Nông nghi p, Hà N i II TÀI LI U TI NG ANH 13.Turesskaia(1993), nhân t n i sinh c a hình thành r th c v t (Endogenye factory corneobrazovania rastenii) Biologia razvitia rasstenii 14 Yoshikawa M, Yamaguchi S, Nishisaka H, Yamahara J, Murakami N, (1995) Chemical constituents of Chinese natural medicine, morindae radix, the dried roots of Morinda officinalis How: structures of morindolide and morofficinaloside Chem PHarm Bull (Tokyo), 43(9): 1462-5 15 Li YF, Gong DH, Yang M, Zhao YM, Luo ZP (2003) Inhibition of the oligosaccharidesextracted from Morinda officinalis, a Chinese traditional herbal medicine, on the corticosteron induced apoptosis in PC12 cells Life Sci., 72(8): 933-42 ... s n xu t Ba kích tím, vi c th c hi n Nghiên c u hoàn thi (Morinda officinalis How) 1.2 M c li u Ba kích tím n sau in vitro c n thi t u Nghiên c u y u t ng t n sau in vitro t o Ba Kích tím hồn... xu t gi ng tr ng Ba kích t i huy n mi n núi Tây Giang, t nh Qu ng phát tri n vi c tr ng Ba kích t i Qu ng Nam 2.3 a Ba kích Cây Ba Kích Tím có tên khoa h c Morinda officianalis How, thu c h cà... s nh t trí c a Ban giám hi ng ban ch nhi m khoa Lâm nghi i h c Nông Lâm Thái Nguyên, ti n hành nghiên c Nghiên c u hồn thi c li u Ba kích tím (Morinda officinalis How ) i Vi n nghiên c u phát