Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cây kinh giới ở Việt Nam

Header Page of 237 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI Bx TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Trần Phúc Đạt NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY KINH GIỚI Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – Năm 2016 Footer Page of 237 Header Page of 237 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Trần Phúc Đạt NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY KINH GIỚI Ở VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 60440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS ĐỖ THỊ VIỆT HƯƠNG Hà Nội – Năm 2016 Footer Page of 237 Header Page of 237 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới TS Đỗ Thị Việt Hương – giảng viên khoa Hóa học, trường Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQG Hà Nội, người thầy ln tận tình giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho em thực đề tài Em xin bày tỏ lòng biết ơn đến thầy thuộc mơn Hóa Dược, Khoa Hóa học, trường ĐHKHTN, thầy khoa Hóa học ln hỗ trợ em q trình tiến hành thực đề tài Xin chân thành cảm ơn anh chị, bạn bè làm việc phòng Hóa Dược, khoa Hóa học, trường ĐHKHTN, chú, anh chị làm việc phòng Hóa sinh ứng dụng thuộc Viện Hóa học, Viện Hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam ln tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành kết đề tài Hà Nội, ngày tháng năm Học viên Trần Phúc Đạt Footer Page of 237 Header Page of 237 MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH VẼ VÀ SƠ ĐỒ BẢNG KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT MỞ ĐẦU Chương 1- TỔNG QUAN 1.1 Khái quát kinh giới 1.1.1 Đặc điểm thực vật kinh giới, loài Elscholtzia ciliata, họ Lamiaceae 1.1.2 Vùng phân bố, thu hát chế biến 1.2 Nghiên cứu dược lý kinh giới 1.2.1 Tác dụng trị liệu theo kinh nghiệm dân gian 1.2.2 Những nghiên cứu khoa học 1.3 Thành phần hóa học kinh giới 1.3.1 Các hợp chất Flavonoid 10 1.3.2 Terpenoids steroids 11 1.3.3 Acid béo 14 1.3.4 Một số hợp chất có tinh dầu E ciliata 14 1.4 Hoạt tính sinh học 15 1.4.1 Khả chống oxy hóa 15 1.4.2 Hoạt tính ức chế enzym -glucosidase 17 Chương - THỰC NGHIỆM 18 VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.2 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3 Thực nghiệm 19 2.3.1 Chiết lớp chất từ mẫu kinh giới Footer Page of 237 19 Header Page of 237 2.3.2 Phân tách phần chiết n-hexan (EH) phần chiết etyl acetat (EE) phương pháp sắc ký cột (CC) 21 2.3.3 Khảo sát định tính nhóm phân đoạn hệ thống sắc ký khổi phổ GC/MS 24 2.3.4 Phương pháp khảo sát hoạt tính sinh học 26 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khảo sát định tính nhóm phân đoạn hệ thống GC/MS 28 28 3.1.1 Cặn chiết n-hexan 28 3.1.2 Cặn chiết etyl acetat 36 3.2 Khảo sát hoạt tính sinh học 43 3.2.1 Hoạt tính chống oxy hóa 43 3.2.2 Hoạt tính ức chế enzym -glucosidase 45 KẾT LUẬN 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 PHỤ LỤC 53 Footer Page of 237 Header Page of 237 DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Thành phần hóa học nghiên cứu chi kinh giới 10 Bảng 1.2 Một số hợp chất phân lập từ loài E ciliata 10 Bảng 2.1 Hiệu suất phần chiết từ mẫu kinh giới 20 Bảng 3.1 Kết phân tách cặn chiết n-hexan sắc ký cột 28 Bảng 3.2 Thành phần hóa học dịch chiết n-hexan 29 Bảng 3.3 Các tín hiệu phổ H1 34 Bảng 3.4 Kết phân tách cặn chiết etyl acetat sắc ký cột 37 Bảng 3.5 Thành phần hóa học dịch chiết etyl acetat 38 Bảng 3.6 Kết độ hấp thụ quang 43 Bảng 3.7 Khả ức chế enzym 𝛼-glucosidase cặn chiết kinh giới .45 Footer Page of 237 Header Page of 237 DANH MỤC HÌNH VẼ VÀ SƠ ĐỒ Hình 1.1 Cây, hoa kinh giới Hình 1.2 Cấu trúc flavonoid phân lập từ lồi E ciliata .11 Hình 1.3 Cấu trúc daucosterol 14 Hình 2.1 Mẫu kinh giới thu mua 18 Hình 3.1 Sắc ký đồ GC-MS phân đoạn EH2 kinh giới .29 Hình 3.2 Các acid béo mạch dài dịch chiết kinh giới .31 Hình 3.3 Tecpenoid dịch chiết kinh giới 32 Hình 3.4 Flavonoid dịch chiết kinh giới 32 Hình 3.5 Phổ NMR hợp chất H1 .33 Hình 3.6 Cấu trúc H1 33 Hình 3.7 Sắc ký đồ H2 .35 Hình 3.8 Phổ khối H2 36 Hình 3.9 Sắc ký đồ GC-MS phân đoạn EE2 kinh giới .37 Hình 3.10 Cấu trúc E1 .39 Hình 3.11 Sắc ký đồ hợp chất E1 39 Hình 3.12 Phổ khối lượng E1 so sánh với thư viện MS 40 Hình 3.13 Cấu trúc E2 .41 Hình 3.14 Sắc ký đồ GC E2 41 Hình 3.15 Phổ khối E2 so sánh với thư viện MS 42 Hình 3.16 Đường chuẩn phenolic 43 Hình 3.17 Tổng phenolic dịch chiết từ kinh giới 44 Hình 3.18 Tổng lượng flavonoid dịch chiết kinh giới 45 Hình 3.19 Đồ thị khảo sát khả ức chế enzym 𝛼-glucosidase 46 Sơ đồ 2.1 Sơ đồ chiết từ mẫu khô 20 Sơ đồ 2.2 Phân tách phân đoạn dịch chiết n-hexan 22 Sơ đồ 2.3 Phân tách phân đoạn dịch chiết etyl acetat 23 Footer Page of 237 Header Page of 237 BẢNG KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ý nghĩa Chữ viết tắt Footer Page of 237 Abs Độ hấp thụ quang CC Sắc ký cột thường EH Cặn chiết n-hexan EE Cặn chiết etyl acetat E Elsholtzia FC sắc ký cột nhanh GC-MS Phương pháp phân tích sắc ký khí kết hợp khối phổ IC50 Nồng độ ức chế 50% đối tượng thử LD50 Liều gây chết 50% đối tượng thử MIC Nồng độ ức chế tối thiểu TLC Sắc ký mỏng TT Thứ tự Header Page of 237 MỞ ĐẦU Nước Việt Nam nằm vùng nhiệt đới điều kiện khí hậu nhiệt độ, lượng mưa, ánh sáng…và hết điều kiện thổ nhưỡng đặc trưng thích hợp cho nhiều lồi thực vật có giá trị tồn phát triển Đó nguồn tài nguyên sinh học quý giá, thuộc loại tài nguyên tái tạo Từ thời xa xưa xã hội loài người khai thác nguồn tài nguyên để làm thực phẩm, thuốc chữa bệnh, vật liệu nhiên liệu cho sống thường ngày Kinh giới, biết đến loại rau thơm, không dùng bữa ăn hàng ngày nhờ vị bạc hà đặc trưng, mà sử dụng lồi nước xơng chữa số bệnh ngồi da trẻ em Kinh giới thuộc chi Elsholtizia, họ Lamaecia phổ biến nước ta Do tính chất sử dụng rộng rãi, nên nhiều cơng trình khoa học nghiên cứu thực vật hóa học, nhằm lựa chọn nâng cao giá trị sử dụng loài Tuy nhiên nghiên cứu loài kinh giới thành phần hóa học, cơng dụng số lượng lồi kinh giới chưa đầy đủ khơng đồng số tài liệu Để góp phần vào việc nghiên cứu cách sâu rộng lồi riềng có nước, chúng tơi chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Kinh giới (Elsholtzia ciliata) Việt Nam” từ đưa hướng khai thác ứng dụng loài kinh giới đời sống Vì vậy, nhiệm vụ đặt cho chúng tơi là: Xây dựng quy trình chiết thích hợp để điều chế phần chiết từ kinh giới, từ định hướng khảo sát thành phần hóa học hợp chất có kinh giới Nhận dạng số hợp chất phân lập từ phân đoạn chiết kinh giới Khảo sát hoạt tính sinh học phần chiết kinh giới Footer Page of 237 Header Page 10 of 237 Chương 1- TỔNG QUAN 1.1 Khái quát kinh giới Chi kinh giới (Elsholtzia Willd) thuộc họ Lamiaceae, có khoảng 40 lồi kinh giới giới phân bố chủ yếu Đông Á, Châu Phi, Bắc Mỹ, số quốc gia Châu Âu [10, 33] Ở Việt Nam, có lồi thuộc chi kinh giới nghiên cứu ứng dụng làm thực phẩm dược phẩm 1.1.1 Đặc điểm thực vật kinh giới, loài Elscholtzia ciliata, họ Lamiaceae Tên khoa học: Elsholtzia ciliata (Thunb.) Hyland, họ Lamiaceae Tên thông thường: Kinh giới rìa, Kinh giới trồng [1] Tên đồng nghĩa: Sideritis ciliata Thunb., Elsholtzia cristata Will., Hyssopus ocymifolius Lamk., Mentha ovata Cav., Mentha patrini Lepech., Perilla polystachya D Don, Elsholtzia pattini (Lepech.) Garcke Một số tên khác: Khương giới [3], Giả tô, Nhả nát bom (Thái), Phjăc bom khao (Tày), Bài hương thảo Mô tả thực vật Kinh giới thảo sống năm có đặc điểm sau: Thân thuộc loại cỏ đứng, cao 0,6-0,8 m, tồn có lơng màu trắng, có mùi thơm [3] Thân non màu xanh, tiết diện vuông khuyết bốn cạnh Thân già màu nâu tía có bốn góc lồi tròn dọc thân Lá đơn, mọc đối chéo chữ thập Phiến màu xanh đậm mặt trên, hình trứng đinh nhọn, gốc hình nêm men phần dọc theo hai bên cuống lá, kích thước 3-7 x 2,5-5 cm, bìa cưa nhọn khơng 2/3 phía trên, mặt nhiều chấm nhỏ (lơng tiết) Gân hình lơng chim, rõ mặt dưới, 4-7 cặp gân phụ cong Cuống hình trụ phẳng mặt trên, gốc cuống lồi thành u nhỏ, mặt có lơng rậm màu trắng giữa, dài 2,5-4cm Footer Page 10 of 237 Header Page 11 of 237 Hoa mọc thành cụm xim co tạo thành gié giả dài 5-12 cm cành, tạt phía dày đặc hoa Một đến hai xim co nách bắc, xim có 3-5 hoa Lá bắc màu xanh hay xanh tím nhiều gân nổi, hình thoi rộng mũi nhọn, nhiều lơng mặt ngồi, kích thước 3-5 x 6-7 mm Cuống hoa màu xanh ngắn gần khơng có Lá đài màu xanh, gần đều, dính thành ống hình chng dài khoảng 1,5 mm, chia phiến tam giác nhọn khoảng x 0,5 mm, mặt ngồi đầy lơng tơ trắng, nhiều rìa Cánh hoa màu trắng hay tím nhạt đậm dần phía trên, mặt ngồi phủ đầy lơng dài màu trắng có nhiều điểm tuyến màu vàng, dính thành ống thắt gần đáy, dài khoảng 2-3 mm, chia môi 2/3: môi xẻ cạn làm thùy giống nhau, hình tròn, kích thước nhỏ, khoảng 0,5 x 0,5 mm; mơi chia thùy không đều, hai thùy bên giống hình cung to thùy mơi trên, thùy to khum hình gần tròn, rìa lượn, kích thước khoảng 1,5 x 1,5 mm Nhị kiểu trội, nhị dạng sợi mảnh màu trắng hay tím nhạt, nhẵn, đính khoảng ống tràng xen kẽ với cánh hoa, nhị trước dài khoảng 0,6-0,7 cm, nhị sau dài 0,3-0,4 cm Bao phần màu đỏ tím, hai buồng xếp thành hình số tám dọc, nút dọc, hướng trong, đính giữa, chung đới dạng đòn cân mặt ngồi Hạt phấn rời màu trắng sữa, hình bầu dục có rãnh, mặt ngồi có nhiều vân, kích thước 37,5-45 x 30-32,5 μm Lá nỗn phần bầy hình cầu hai ô, có vách giả chia làm bốn ô rời, nỗn đính đáy Một vòi nhụy màu trắng mờ, nhẵn, dạng sợi đính đáy bầu ô, dài 0,7-0,8 cm, tận hai nhánh đầu nhụy màu tím nhật dài khoảng mm chỗi hướng trước sau Đĩa mật gốc bầu dạng bồ gờ nạc Quả bế hình bầu dục có cạnh, màu nâu, dài khoảng 0,5 mm, rốn hẹp đáy, mang đài tồn khô xác màu nâu Footer Page 11 of 237 Header Page 12 of 237 Hình 1.1 Cây, hoa kinh giới Đặc điểm vi mẫu (giải phẫu) Thân vi phẫu hình vng lõm bốn cạnh Các mơ gồm: Biểu bì lớp tế bào hình chữ nhật hay đa giác gần tròn kích thước nhỏ, gần đều, lớp cutin mỏng cưa Trên biểu bì rải rác có lỗ khí, lơng tiết đa bào, lông che chở đa bào Lông tiết ngắn với đầu hình tròn hay lõm gồm một, hai bốn tế bào Lông che chở đa bào kích thước to, phía dãy 4-5 tế bào, phía mức cao mức biểu bì gồm vài tế bào Mơ dày góc 1-5 lớp tế bào đa giác hay gần tròn, kích thước khơng lớn tế bào biểu bì, tập trung nhiều bốn góc lồi Mơ mềm vỏ khuyết 2-4 lớp tế bào hình bầu dục nằm ngang hay gần tròn, to, khơng đều, thường bị ép dẹp Ở thân già tần bì sinh xuất lớp mơ mềm vỏ sinh bần ngồi lục bì trong, tế bào hình chữ nhật vách lượn xếp xun tâm Nội bì khung Caspary Trụ bì tế bào hóa mơ cứng nằm rải rác thường có đám libe gỗ Libe ít, tế bào hình đa giác, kích thước nhỏ, vách uốn lượn xếp lộn xộn Libe tế bào hình chữ nhật vách lượn xếp xuyên tâm với tế bào gỗ Gỗ nhiều, mạch gỗ hình đa giác hay gần tròn, kích thước lớn khơng đều, xếp lộn xộn, mô mềm gỗ bao quanh mạch, tế bào hình đa giác kích thước nhỏ, khơng đều, tẩm chất gỗ, số vách cellulose Mô mềm gỗ tạo thành cụm nằm lớp gỗ, cụm góc thường có 15-20 bó, cụm cạnh thường 1-3 bó, bó 3-5 mách Mơ mềm gỗ gồm tế bào hình đa giác, vách tẩm cellulose tẩm chất gỗ Tia tủy hẹp 1-2 dãy tế bào nhiều bốn cạnh tạo khoảng giang bó, gồm nhiều dãy tế bào hình chữ nhật đa giác, Footer Page 12 of 237 Header Page 13 of 237 kích thước lớn dần từ ngồi Mơ mềm tủy đạo, tế bào kích thước lớn, khơng đều, hình gần tròn đơi có vài tế bào hình đa giác dẹp xếp khít Tinh bột nhiều mơ mềm vỏ, nội bì, tia tủy, libe mơ mềm quanh vùng tủy Hạt tinh bột nhỏ, hình tròn dẹp, tụ thành đám Lá: Cuống lá: mặt lõm, mặt lồi, hai bên có tai Tế bào biểu bì hình tròn hay đa giác, kích thước nhỏ, khơng lớp cutin mỏng cưa Trên biểu bì rải rác có lỗ khí, lơng che chở nhiều mặt lông tiết đa bào giống thân Mơ dày góc 3-5 lớp biểu bì trên, 1-3 lớp biểu bì dưới, thường bị gián đoạn mơ mềm khuyết có lục lạp hai bên eo phía tai, tế bào đa giác gần tròn, kích thước lớn khơng đều, đơi bị tách lớp Mơ mềm đạo tế bào tròn hay đa giác gần tròn, kích thước lớn, khơng Mơ dẫn với gỗ trên, libe dưới, xếp thành hình cung 2-4 bó nhỏ hai bên phia hai tai Ở bó chính, mạch gỗ hình tròn đa giác xếp thành 15-22 dãy, dạy có 1-6 mạch khơng đều, xen kẽ với mơ mềm gồm 1-4 dãy tế bào hình chữ nhật hay đa giác vách cellulose Libe tế bào hình đa giác nhỏ, không đều, xếp lộn xộn thành nhiều đám không liên tục xen kẽ với mô mềm vách dày cellulose Mô mềm vách dày cellulose 2-4 lớp tế bào đa giác nhỏ, khơng đều, bao bên ngồi cung libe gỗ Tinh bột nằm rải rác vài tế bào mô mềm đạo vùng libe Hạt tinh bột nhỏ, hình tròn dẹp Gân giữa: Mặt lồi, mặt lồi nhiều uốn lượn khơng Biểu bì bong tróc khỏi mơ dày, tế bào hình tròn hay đa giác, kích thước nhỏ, khơng đều, gần giống hai mặt, lớp cutin mỏng có cưa cạn tách khỏi lớp biểu bì Cả hai lớp biểu bì có lỗ khí, lơng che chở đa bào lông tiết đa bào giống thân Lông che chở đa bào nhiều mặt trên, rải rác mặt Mơ dày góc 1-5 lớp biểu bì trên, 1-2 lớp biểu bì dưới, tế bào hình tròn hay đa giác, kích thước lớn tế bào biểu bì, khơng đều, thường bị tách tạo khuyết Mơ mềm đạo tế bào tròn hay đa giác gần tròn, to, khơng Mơ dẫn với gỗ libe xếp hình cung 1-3 bó nhỏ hai bên phía bó Ở bó chính, mạch chỗ hình tròn đa giác gần tròn xếp thành 15-20 dãy, dãy có 1-6 mạch không đều, xen kẽ với 1-3 dãy mô mềm tế bào đa giác vách cellulose Libe ít, tế bào nhỏ, hình đa Footer Page 13 of 237 Header Page 14 of 237 giác, xếp lộn xộn thành nhiều đám không liên tục xen kẽ với mô mềm Bao bên ngồi cung libe gỗ có 2-4 lớp tế bào mơ mềm hình đa giác, khơng đều, xếp khít Tinh bột rải rác vài tế bào mơ mềm đạo Phiến lá: tế bào biểu bì hình bầu dục đa giác dài, kích thước khơng Tế bào biểu bì nhỏ biểu bì Cả hai biểu bì rải rác có lơng tiết đa bào giống thân, lông che chwor đa bào thường có vùng gân phụ, lỗ khí nhiều mặt Nhiều chỗ biểu bì lõm xuống dính lơng tiết Mơ mềm giậu lớp tế bào hình chữ nhật, 2-4 tế bào thẳng góc tế bào biểu bì Mơ mềm khuyết nối từ mơ mềm giậu đến biểu bì dưới, gồm 4-6 lớp tế bào đa giác vách lượn, kích thước khơng đều, chứa lục lạp, xếp chừa khuyết to không Nhiều bó gân phụ gỗ trên, libe rải rác thịt [2] 1.1.2 Vùng phân bố, thu hát chế biến 1.1.2.1 Vùng phân bố Elsholtzia ciliata (Kinh giới) phân bố rộng rãi Đông Nam Á Lào, Campuchia, Châu Phi, Châu Á Ấn Độ, Nêpal, Mianma, Trung Quốc, Nhật Bản, Triều Tiên, Bắc Mỹ số quốc gia châu Âu Nga Chủ yếu kinh giới mọc nhiều nơi có độ ẩm nhiều ánh sáng, độ cao 600 m [1] Ở Việt Nam, Elsholtzia ciliata trồng chủ yếu tỉnh phía bắc Lào Cai (Sa Pa), Cao Bằng (Bảo Lạc, Trà Lĩnh), Lạng Sơn (Bắc Sơn), Phú Thọ (Thanh Sơn, Phù Ninh), Vĩnh Phúc (Vĩnh Yên), Hà Tây (Bà Vì), Hòa Bình (Mai Châu), Hà Nội (Từ Liêm), Ninh Bình [1] số phía nam Lâm Đồng, thành phố Hồ Chí Minh [2] Một số loài Elsholtzia khác phân bố sau: Elscholtzia blanda (E blanda), Kinh giới rừng, phân bố nhiều Ấn Độ, Nêpal, Trung Quốc, Mianma, Lào, Malayxia, Indônêxia Ở Việt Nam, kinh giới rừng mọc nhiều số tỉnh Tây Bắc Lai Châu, Lào Cai, Sơn La (Mộc Châu), số tỉnh Tây Nguyên Lâm Đồng (Đà Lạt), Khánh Hòa (Nha Trang) [1] Footer Page 14 of 237 Header Page 15 of 237 Elsholtzia communis (E communis), Kinh giới hoa Elsholtzia penduliflora, Kinh giới rủ có nhiều tỉnh Vân Nam (Trung Quốc) số vùng núi phía Bắc Việt Nam Sa Pa (Lào Cai), Yên Minh (Hà Giang) [1] Elsholtzia penduliflora (E penduliflora) phân bố nơi có độ cao 800-1100 m số vùng Chiang Mai, Phitsanulok (Thái Lan), Trung Quốc, Việt Nam [10] Elsholzia pilosa (E pilosa), Kinh giới lông xuất nhiều nơi có bãi cỏ hoang, ven rừng, ven đường Lào Cai (Việt Nam), Ấn Độ, Nêpal, Trung Quốc Elsholzia rugulosa (E rugulosa), Kinh giới sần tìm thấy độ cao 800 m vùng Phó Bảng (Hà Giang) Trung Quốc Elsholtzia winitiana (E winitiana), Kinh giới đất, mọc độ cao 600 m, phân bố cá tỉnh Kon Tum (Đác Glaay, Kon Plông), Gia Lai (Plêiku, An Khê), Lâm Đồng (Đà Lạt), Thái Lan Trung Quốc [1] Ít 33 lồi Elsholtzia tìm thấy Việt Nam Trung Quốc dùng nhiều để chữa bệnh cảm cúm, nhức đầu [33] 1.1.2.2 Thu hái chế biến Ở Việt Nam, kinh giới Elsholtzia ciliata dùng khả phổ biến để ăn làm thuốc Vào mùa thu nhổ phơi sấy khô gọi tồn kinh giới, có nơi cắt hoa cành, xát hoa phơi khô gọi kinh giới tuệ, hái toàn trừ bỏ phần rễ gọi kinh giới [3] 1.2 Nghiên cứu dược lý kinh giới 1.2.1 Tác dụng trị liệu theo kinh nghiệm dân gian Loài E ciliata dùng để chữa cảm cúm, nhức đầu, viêm dày, viêm ruột cấp tính, bại liệt, phong thấp, rong kinh, băng huyết Dùng ngồi trị mụn nhọt, viêm da có mủ [3] Trong dân gian, số đơn thuốc sử dụng kinh giới chữa bệnh cảm nóng, cảm ngất dùng nắm kinh giới tươi, chừng 50 g giã nhỏ, thêm vài miếng gừng Footer Page 15 of 237 Header Page 16 of 237 tươi, vắt lấy nước cho uống, bã lại dùng để dính dọc sống lưng Cách khác, dùng 20 g kinh giới phơi khơ vàng, thêm 200 mL nước sắc 100 mL uống lúc nóng Đắp chăn cho mồ hôi [3] Kinh giới tuệ đen 15 g, nước 200 mL sắc 100 mL cho uống làm 2-3 lần dùng chữa chứng băng huyết phụ nữ, bị cháy máu cam trẻ người lớn Hoa kinh giới, tía tơ, hương nhu, ngải cứu, hoắc hương, vị nhau, dùng nước sắc nhiều lần, hợp nước sắc lại, có đặc thành viên hạt ngô Khi bị cảm uống chừng 7-8 viên thuốc Dùng nước tre uống kèm thuốc Trẻ dùng đến viên Viên thuốc dùng chữa lỵ (dùng uống kèm với nước sắc mơ lông) Kinh giới tán, Kinh giới tuệ vàng tán nhỏ dùng để chữa cảm cúm dùng 6-8 g bột [3] 1.2.2 Những nghiên cứu khoa học Nghiên cứu dược lý phần chiết hợp chất tinh khiết chi Elsholtzia bao gồm có hoạt tính chống virut, chống khuẩn, chống viêm, chống oxy hóa, bảo vệ thiếu máu tim, số hoạt tính khác Các nhà nghiên cứu ngày quan tâm nhiều đến hoạt tính sinh học chi [3] Tinh dầu lồi thuộc chi Elsholtzia có hoạt tính sinh học tốt chống lại số vi khuẩn thông thường chống gây bệnh cảm cúm Staphylococcus aureus, Bacillus typhi, Aeruginosus bacillus, Diplococcus intracellularis Ngoài ra, tinh dầu nước sắc thuốc từ số loài thuộc chi Elsholtzia có khả chống số lồi vi khuẩn Escherichia coli, Shigella flexneri, Staphylococcus epidermidis, beta streptococcus, Bacterium paratyphosum B, Bacillus typhi murium, Bacillus dysenteriae, Bacillus diphtheriae, Bacillus meningitidis purulentae, Bacillus proteus, anthrax Bacillus, Neisseria intracellularis [6] Footer Page 16 of 237 Header Page 17 of 237 1.2.2.1 Chống viêm, kháng sinh khả khỏi ốm Tinh dầu chiết từ E ciliata khả chống viêm với sưng tấy bàn chân chuột gây 5-HT carrageenan, chống viêm khớp kinh niên gây formaldehyde Nghiên cứu E ciliata: khả chống khuẩn tinh dầu E ciliata Kết nghiên cứu tác động phận loài E ciliata (lá, hoa hạt) tới chủng vi khuẩn đường ruột chủng men Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) tốt dịch chiết thành phần với chủng vi khuẩn B subtibillis, E coli, S enteritidis, S flexneri, S typhi, S aureus, C albicans Điều giúp kinh giới có khả điều trị số bệnh đường ruột [27] Tinh dầu E ciliata nghiên cứu có khả kháng sinh gây đột biến phép phân tích ung thư Ames có ảnh hưởng kéo dài ngoại độc tố khí quản chuột 1.2.2.2 Khả giảm đau an thần Tinh dầu chiết từ loài E ciliata khả giảm đau đưa vào thành phần áp dụng phương pháp đĩa nóng Bên cạnh đó, có khả tăng hiệu suất ngủ natri pentobarbital Hiện tượng đề xuất sở hữu hiệu ứng an thần 1.2.2.3 Độc tính Không cho thấy thay đổi bệnh lý tế bào động vật quan sát vĩ mô Giá trị LD50 tinh dầu loài E ciliata 4.497±0.368 mL/kg [6] 1.3 Thành phần hóa học kinh giới Theo cơng trình nghiên cứu nhà hóa học giới, thân loài Kinh giới có chứa số hợp chất sau Footer Page 17 of 237 Header Page 18 of 237 Bảng 1.1 Thành phần hóa học nghiên cứu chi kinh giới Lồi E ciliata Thành phần hóa học 5-hydroxy-6,7-dimethoxyflavone; luteolin; luteolin-5-O𝛽-D-glucopyranoside; 5-hydroxy-7,8-dimethoxyflavone; luteolin-7-O-beta-D-glucopyranoside 5-hydroxy-6,7-dimethoxyflavone; negletein; acacetin; acacetin7-O-β-D-glucopyranoside; limonene; aromadendren; d-carvone E communis neral; genarial; carvol; 𝛽-pinene E blanda E penduliflora E pilosa E rugulosa E winitiana 7-methoxylchrysin,5,7,8-trimethoxyflavanone; acid ferulic; acid betulinic; luteolin; acid caffeic; acid 3β-O-acetyl ursolic; acid hyptadienic acid euscaphic 1,8-cineole; 𝛾-terpinene; 𝛼-terpinyl acetate; 𝛽-pinene; (E)ocimene; pinocarvone; myrcenol; thymol thymol; carvacrol; 1,8-cineole; linalool; isopinocamphone; camphor; prunasin; amygdalin; stigmasteol rosefuran; dehydroelsholtzia ketone; cinol; cineole; camphor 1.3.1 Các hợp chất Flavonoid Flavonoid hợp chất thuộc nhóm hợp chất phenolic đa vòng, có cấu trúc vòng benzene, mang nhiều nhóm hydroxyl gắn trực tiếp vào vòng thơm 5-hydroxy-6, 7-dimethoxyflavone, 5-hydroxy-7, 8-dimethoxyflavone, negletein, acacetin, acacetin 7-O-β-D-glucopyranoside, apigenin, luteolin, 5-hydroxy-7, 4'dimethoxyflavanonol, (+) –catechin Các flavonoid hợp chất có hoạt tính sinh học Có 30 hợp chất flavonoids phân lập từ chi Kinh giới [27] Trong chất phân lập từ lồi E ciliata trình bày bảng 1.2 hình 1.2 Bảng 1.2 Một số hợp chất phân lập từ loài E ciliata TT Tên hợp chất Công thức phân tử 5-hydroxyl-6,7-dimethyl flavone C17H14O5 5-hydroxyl-7,8-dimethyl flavone C17H14O5 5,7-dimethoxyl-4’-hydroxyl flavone C17H14O5 5-hydroxyl-7,4’-dimethoxyl flavanovol C17H16O6 Footer Page 18 of 237 10 Header Page 19 of 237 C22H24O9 5-hydroxyl-6-methyl-7-O-𝛼-D-galactosyl-dihydroflavonoid glycoside C22H22O10 Acacetin-7-O-𝛽-D-glucoside OH O O O O O O O O OH O OH O O OH OH O O O HO O OH O O OH OH O O H3C OH O OH OCH O HO O HO O OH OH O Hình 1.2 Cấu trúc flavonoid phân lập từ loài E ciliata 1.3.2 Terpenoids steroids Triterpenoids thành phần chi Elsholtzia Các loại triterpen oleanane phân lập chủ yếu từ thân loài E bodinieri Nhóm glycosyl nằm vị trí C-28 (-COO-) acid 23-hydroxyechinocystic liên kết este hợp chất 7-9 Tại vị trí C-3 đính cafeoyl phân tử 7, liên kết với nhóm arabinosyl phân tử Footer Page 19 of 237 11 Header Page 20 of 237 TT R1 OH R2 C R3 OH H O-α-L-ara H H O-α-L-ara H R4 O--D-glc (6-1) -D-glc (4-1) α-Lrha O--D-glc (6-1) -D-glc (4-1) α-Lrha O--D-glc (6-1) -D-glc R5 CH3 R6 CH2OH CH3 CH2OH CH3 CH3 Ba triterpene loại ursane bao gồm acid ursolic (10), acid corosolic (11) acid 2α,3β,19α-tri-hydroxyurs-12-en-28-oic (12), thu từ E rugulosa, E ciliata E bodinieri 13 14 TT 10 11 12 R1 H OH OH R2 H H OH Hai hợp chất không phổ biến 18,19-secoursane glycopyranosides, bodiniosides A (13) B (14), phân lập từ loài E bodinier Ngoài ra, acid 2,3,19-trihydroxyurs-12-en-28-oic (12) acid hypadienic (15) đồng thời thu từ E bodiner Các phân tử 13-15 thu từ hợp chất 12 đường sinh học Footer Page 20 of 237 12 ... ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Trần Phúc Đạt NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY KINH GIỚI Ở VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa. .. 1.3 Thành phần hóa học kinh giới Theo cơng trình nghiên cứu nhà hóa học giới, thân lồi Kinh giới có chứa số hợp chất sau Footer Page 17 of 237 Header Page 18 of 237 Bảng 1.1 Thành phần hóa học nghiên. .. chế phần chiết từ kinh giới, từ định hướng khảo sát thành phần hóa học hợp chất có kinh giới Nhận dạng số hợp chất phân lập từ phân đoạn chiết kinh giới Khảo sát hoạt tính sinh học phần chiết kinh