Nghiên cứu đặc tính hoá sinh dược của cây cam thảo đất (Scoparia dulcis L.)

Mụcđíchnghiêncứu Nghiêncứuđặctínhhóasinh,tácdụnghạđườnghuyếtcủamột sốphânđoạndịchchiếttừcâyCamt hảođấttrênmôh ìn h chuộtđáitháođườngtype2 thựcnghiệm... Tácdụngsinhh ọc củatanninlàchấtbảo

MỞĐẦU

1 Lýdochọnđềtài

Dosựpháttriểncủaxãhộihiệnnaykéotheonhịpsốngcôngnghiệphiệnđ ạ i củaconngười,sựkhôngphùhợpvềthayđổilốisống,các chếđộănuốngm ấtcânđốidinhdưỡnglànguyênnhândẫnđếnnhiềucănbệnhnguyhiểmnhư:bệnhđ á i t h á o đ ư ờ n g( D i a b e t e s mellitus),bệnhbéophì(Obesity),u n g t h ư,timm ạch.Trongđóđáitháođường(ĐTĐ)làcănbệnhpháttriểnnhanhnhấthiệnnaycủaxãhội

Đáit h á o đ ư ờ n g làmộtbệnhr ố i loạnchuyểnhóag â y tăngđườngh u y ế t m ã ntínhdothiếuinsulintươngđốihaytuyệtđốicủatuyếntụy,nếukhôngkiểms o á t t ốtsau

m ộ t t h ờ i g i a n tiếnt r i ể n kéod àicóthểgâyn h i ề u biếnchứngn g u y h i ểm.Bệnhcótínhchấtdântộc,chủngtộcđãvàđangtrởthànhvấnđềmangtínhxãhội,bởisựbùngphátnhanhchóng,mứcđộnguyhạiđếnsứckhỏe,tốnkémchongườibệnhvàkinhtếcộngđồng

TheoTổchứcYtếthếgiới(WHO):năm1994,thếgiớicó98.9triệungườim ắcbệnhđáitháođường,cuốinăm2002cókhoảng177triệungười,consốnàyđãtănglên300triệungườivàonăm2025.RiêngchâuÁ,sốliệucôngbốtạihộin g h ịđáitháođư ờn g quốctếtổchứ c vàot há ng 12năm19 97 tạ i Singapo:Năm1995châuÁcókhoảng62triệun

g ườ i m ắc bệnhĐ T Đ , c u ố i nă m 20 02 c o n sốnàylà89triệungười.TheođánhgiácủaHiệphộiĐTĐquốctế(IDF)năm2005sốngườimắcbệnhđáitháođườngtạichâuÁtănglên1.7lần.WHOđãcảnhbáocóthểxuấthiệnđạidịchĐTĐởchâuÁvàothếkỷ21[4],[2]

Việt

Nam,năm1990tỷlệmắcbệnhĐTĐởHàNộilà1.2%,Huếlà0.96%vàthànhphốHồChíMinhlà2.5%,năm2000ViệnNộitiếtTrungươngđiềutratạikhuv ự c nộithànhHàNộitỷlệĐTĐlà4%dân sốvà7%ở tuổi>35t uổ i CuộcđiềutradoViệnNộitiếttiếnhànhnăm2001tại4thànhphốHàNội,HảiPhòng,ĐàNẵngvàthànhphốHồCh íMinhđãchothấytỷlệĐTĐt r o n g độtuổi30-64tuổilà4.9%[4],[2]

SựgiatăngnhanhchóngtỷlệngườimắcbệnhlàmchoĐTĐtrởthànhmộtvấnđềlớnchosứckhỏevìbệnhcótỷlệmắc,chếttrầmtrọngtrongquátrìnhtrị

liệulâudài,đặcbiệtlàĐTĐtype2mộ ttrongnhữngbệnhphổbi ến nhấttrongbệnhĐTĐ.ĐTĐcóthểmangnhiềubiếnchứngnguyhiểmnhư:biếnchứngvõngmạc,suythận,biếnchứngmạchmáulớn,tổnthươngbànchândẫnđếncụt Vìvậyđạiđasốngườibệnhđềucónhucầuchữabệnhmộtcáchantoàn.Mỗinămn ư ớ c MỹđãphảichihàngtỉđôlachođiềutrịĐTĐbằngcácthuốcdotổchức

ant o à n thựcp h ẩ m vàdượcp hẩ m Mỹphêchuẩn(FoodandDrugA m i n i s t r a t i o n FDA)như:Metformin,Orlistat,Sibutramin,Ephedrin,Fenfluramin.Songhầuhếtc á cthuốcnàyđềucónguồngốct ổ n g hợp,thường cótác dụngph ụvàđắttiền.Trướctìnhhìnhđóủybanchuyêngiacủa(WHO)đãkhuyếnnghịnênsửdụngcácthuốccónguồngốcthảodượcsẵncó,giáthànhrẻvàítđộctính[4],[ 2 ] , [23],[39]

-Từthực tếđó,nhằm gópphầntìmki ếmvànghiêncứuthuốcđiềutrịđáit h á o đườ

ngvàthànhphầnhóahọccơbảncủacâyCamthảođất(Scopariadulcis

L.)trênch u ộtnhắtgâ y bệnhĐ T Đ bằngstreptozotocin(STZ),chúngt ô i q u y ế t đ ị

n h chọnđềtàinghiêncứu“Nghiêncứuđặctínhhóasinhdượccủacâycamt h ảođấ t(ScopariadulcisL.)”

2 Mụcđíchnghiêncứu

Nghiêncứuđặctínhhóasinh,tácdụnghạđườnghuyếtcủamột sốphânđoạndịchchiếttừcâyCamt hảođấttrênmôh ìn h chuộtđáitháođườngtype2 thựcnghiệm

4cm,khôngcólákèm.Bìalácórăngở2/3phíatrên,răngcưatù,khôngđều,sâu1

-2 mm.Phiếnlákéodàimendọctheo-2 bêncuốnglá,mặttrêns ẫm,mặtdướinhạt.Khôngcólákèm.Gânláhìnhlôngchimlồiởmặtdưới;4-

5cặpgânp h

ụhơilồiởmặtdưới.Cuốngládài5-7mm.Cụmhoamọcriêngrẻhaythànhđ ô i ở n á c h lá.Hoag ầnđều,lưỡngtính,mẫu4 đ

ô i khig ặ p m ẫ u 5,m àutrắng.C u

ốnghoamảnh,dài4-6mm,màuxanh.Láđài4,rời,đôikhigặp5láđài,màux a n h , hìnhbầudục,dàikhoảng2,5mm,có3gânnổiởmặtngoài,mépcólông,t ồntạivàđ ồ n g t r ư ở n g vớiq u ả Cánhhoa4,d í n h n h a u ở dưới( đ ô i k h i g ặ p 5)t h à n h ốngrấtngắn,màutrắngphớttím;trênchiathành4phiếnhìnhbầudục,gầnnhưđềunhau,dàikhoảng2mm,uốncongngượcrabênngoàikhihoanở,nhiềul ô n g màutrắng,dạngsợi,dàigầnbằngnhịđínhởmiệngốngtràng.Tiềnkhai:1c á n h hoaởngoàicùng,1cánhởtrongcùng,2cánhhoacònlạixenkẽnhau.Nhị4,rời,đínhtrênmiệngốngtràng,xenkẽc á n h hoa;chỉnhịhìnhsợimàutrắng,đ ỉ n h hơitím,dàikhoảng1,5mm Baophấnhìnhmũitên,2ô,đínhgiữa,hướngtrong,khaidọc.Hạtphấnhìnhbầudục,córãnh.2lánoãnởvịtrítrước-

sau,dínhliềnthànhbầutrên2ô,mỗiôđựngnhiềunoãn,đínhnoãntrungtrụ.1vòinhụydàikhoảng1,5mmđínhởđỉnhbầu.Đầunhụymàuxanh,dànhđiểmcó2thùy,cóchấtdính.Quảnanghủyvách,hìnhcầu,trongchứanhiềuhạtnhỏmàuđen

HoathứcvàHoađồ:

Đặcđiểmgiảiphẫu:Rễbầngồm2-3lớptếbào,bịbong,nứtnhiều.Tếbàomômềmvỏhìnhtrònhaybầudục,xếptạonhữngkhuyếtrấtlớn.NộibìkhungC a s p a r y rõ.Trụbì1-

2lớp,mộtvàitếbàobịhóamôcứng.Libe2tếbàobịépdẹp,váchu ố n lượn.Gỗ2c hi ếm t

â m Môm ề m gỗv á c h rấtdày.M ạchgỗk í c h t h ư ớ c lớ n , phânbốđ ề u vàn h i ềuhơnở t

h â n

Tiatủy1-2dãytếbào.Thân:Viphẫugầnnhưvuông.Cácmôgồm:biểubìlà1lớptếbàoxếpđềuđặn,cutincórăngcưa,manglỗkhívàrảiráclôngtiếtchânđabàohayđơnbào,đầuđabào.Ởt h â

n

già,2-3lớpbầnxuấthiệnngaydướilớpbiểubì.Môdàygóctậptrungở4g ó c thân,ởcạnhrấtít,thỉnhthoảnggặpsợitrongmô

dày.Ởthângià,môdàyở4g ó c

bịhóamôcứng.Mômềmvỏlàmômềmkhuyết,3-6lớptếbàohìnhtrònhayb ầudục,kíchthướckhôngđều.NộibìkhungCasparyrõ.Trụbì1-2lớptếbào,h ó a môcứngriênglẻhaythànhđámnhỏ.Libe2-

gỗ2thànhvòngliêntục.Gỗ1phânbốđều.Mômềmgỗváchrấtdày.Tiatủy1-2dãytếbào,váchmỏnghơnmômềmgỗ.Mômềmtủyhìnhtròn,kíchthướckhôngđều.Lá:Gângiữa:Lồirõở mặtdưới,mặttrênphẳng.Biểubìtrênvàbiểubìdướitếbàoxếpkhôngđều,manglôngtiếtchânđabàovàđơnbào,đầuđabào.Biểubìdướimanglỗk hí Lớpcutincórăngcưa.Dướibiểubìlà1-

2lớpmôdàygóc.Mômềmtếbàohìnhc ầu,kíchthướckhôngđều,xếpchừanhữngkhuyếtnhỏ.Cácbólibe-

gỗxếpthànhhìnhvòngc u n g P h i ếnlá:biểubìtrêntếb àolớnhơnbiểubìd ưới,k í c h thước

khôngđều,nhiềutếbàonhôlênthànhđỉnhnhọntù.Lôngtiếtchânngắn,đầuđabàovàlỗkhíởcả2biểubì.Lớpcutincórăngcưacạn.Mômềmgiậugồm1lớptếb à o k í c h thướckhôngđ ề u Môm ề m k h u y ế t tếbàov á c h m ỏng,k í c h thướckhôngđều.

1.1.2 Phânloại,nguồngốcvàphânbốcâyCamthảođất

Phânbố,sinhhọcvàsinhthái:GốcởnhiệtđớiChâuMỹ,đượcthuầnhóatrongtấtcảcácvùngnhiệtđớicủathếgiới.Ởnướcta,câymọckhắpnơitừBắcvàoNam.T h ư ờ n g

g ặ p t r ê n đ ấ t h o a n g , dọcbờđ ư ờ n g , trênc á c dảic á t c ủ a cács ô n g vàtrongcácruộngkhô,ởvùngthấp

1.1.3 Thànhphầnhóahọc

Câychứamộtalcaloidvàmộtchấtđắng;còncónhiềuacidsilicicvàmộthoạtchấtgọilàa m e l l i n Phầnc â y t r ênm ặtđấtc h ứ a m ộ t c h ấ t d ầ u sềns ệ t , màt r o n g thànhphầncódulciol,scopariol,(+)manitol,glucose.Rễ

chứa(+)manitol,tanin,alcaloid,mộthợpchấttriterpen.Vỏrễchứahexcoxinol,-sitosterolvà(+)manitol

-1.1.4 MộtsốtácdụngSinh-DượcvàcôngdụngcủacâyCam thảođất

Thườngdùngtrị:cảmcúm,sốt,nóngnhiều,hokhan,hocóđàm.Lỵtrựctrùng.Têphù,phùthủng,giảmniệu.Dùngngoài,éplấydịchtừcâytươitrịmụnn h ọt,lởn g ứ a ,

e c z e m a Hoạtc h ấ t a m e l l i n t r o n g c a m t h ả o đ ấ t cót h ể làmg i ảmđ ư ờ n g máuvàc á c t r i ệuc h ứngc ủ a bệnhđáit h á o đ ư ờ n g type2,k h i ế n c h o q u á trìnhg i ảmn

ồ n g độđườngmáuvàn ư ớ c tiểudiễnradầ n dần.Nócònlà mt ăngmứcdựtrữkiềmbịhạthấpởngườibệnhnhânvàgiảmhàmlượngcácchấttạocetontrongmáu

1.2 Giớithiệuvềmộtsốhợpchấttựnhiênởthựcvật

*Cácchấtthứsinhthựcvật(plantsecondarymetabolites)

Ởthựcvật,ngoàiprotein,saccarid,lipid,vitamin,còncónhữngchấtkháccóvaitròquantrọngtrongđổichấtcủacâyđượcgọilàcácchấtthựcvậtthứsinh( p l a n t secondarymetabolites).Căncứvàotínhchấthóahọc,các hợpchấ tthựcvậtthứsinhđượcc h

i a thànhmộtsốn h ó m c h í n h như:nhómp h e n o l i c , nhómt e r p e n vànhómalkaloid.Nhiềucôngtrìnhnghiêncứugầnđâyđãchoth ấycáchợpch ất polyphenol(thuộcnhómhợpchấ tphenolic)ngàycàngứngdụngrộngrãitrongđiềutrịmộtsốbệnhnanynhư:ungthư,béophì,tiểuđường…

a Cáchợpchấtphenolictừthựcvật

Hợpchấtphenoliclànhómcácchấtkhácnhaurấtphổbiếntrongthựcvật.Đặcđiểmchungcủachúnglàtrongphântửcóvòngthơm(benzene)mangmột,haihaybanhómhydroxyl(-

OH)gắntrựctiếpvàovòngbenzene.Dựavàothànhphầnvàcấutrúcngườitachiahợpchấtphenolicthành3nhómnhỏ[41]:

 Nhómhợpc h ấ t phenolicđ ơ n g i ả n :Trongphântửchỉcóm ộ t vòngb e n z e

n e vàmộtvàinhómhydroxyl.TùythuộcvàosốlượngnhómOHmàchúngđượcg ọ i l àcácmonophenol( p h e n o l ) , diphenol(pyrocatechin,h y d r o q u y n o n e ) , t r i p h e n

o l (pyrogalol,oxyhydroquynol…)

 Nhómhợpchấtphenolicphứctạp:Trongthànhphầncấutrúcphântửcủach

úngngoàivòngthơmbenzene(C6)chúngcòncódịvòng,mạchnhánh.Đạid i ệnnhómnàycóaxidcyamic,axidceramic

vàchutrìnhpentosephosphatequaa c i d sikimichaytheoconđườngacetatemanolatequaacetyl–

SCoA.Trongsốc á c chấtpolyphenoltựnhiên,flavonoid lànhómchấtquantrọngnh

ấtvìchúngphổbiếnởhầuhếtcácloàithựcvậtvàmangnhiềuhoạttínhsinhdượchọccógiátrị.

Flavan(2-phenylchroman)Tùytheomứcđộoxyhóavòngpyran,sựcómặthaykhôngcómặtcủanốiđ ô i giữa

C2vớiC3vàn h ó m cac bo ny l ởC4màcóthểphânbiệtflavonoidthànhc á c nhómphụsau:Flavonvàflavonol,flavanol(đihidroflavon),chalcol,aurol,l e u c o a n t o

x i a n i d i n , catechin,isoflavonoid,rotenoidvàneoflavonoid

• Hoạttínhsinhhọccủaflavonoid

*Tácdụngchốngoxyhóa(antioxidant)

Flavonoidcókhảnă n g kìmhãmcácquátrìnhoxyhóadâytruyềngâyrabởic á c gốctựdohoạtđ ộ n g T u y n h i ênhoạttínhn àymạnhhayy ế u c ònphụt h u ộcvàođặcđiểmcủatừngflavonoidcụthể

Gốctựdosinhratrongquátrìnhsinhlýbìnhthườngcủacơthểhaydotácđ ộ n g b ênngoàilànguyênnhâ ng ây pháhủyADN,protein,lipidlàmphátsinhnhiềubệnhtậtnguyh i ể m vàsựlãohóac h o cơt h ể F l a v o n o i d cób ả n c h ấ t p o l y p h e n o lnêndễdàngbiếnđổidướitácđộngcủacácenzymecótrongtếbàođ ộ n g ,thựcvật.Đặcbiệtflavonoidcónhómhyđroxylởvịtríorthodễdàngbịoxyh ó a bởixúct á c củae n z y

m e p o l y p h e n o l o x y d as e vàp e r o x y d a s e tạos e m i q u y n o l hoặcquynol[27].Đâylàcácgốctựdobềnvữngchúngcóthểnhậnđiệntửvàtrởt h à n h dạnghidroquynol.Bởivậycácchấtnàycókhảnăngphảnứngvớicácgốc

(Hiđroquynol) Peroxydas

e

(semiquynolhoặcquynol)

Ngoàiraflavonoidcòncótácdụngbảovệcáchệthốngsinhhọcnhờkhản ă n g tạophứcvớicáckimlo ại chuyểntiếpnhưFe+2,Cu+2…

hoạthóaenzymec h ốngoxyhóavàứcchếsựoxyhóa

* Tácdụngkhángkhuẩn

Nhiềucôngtrìnhnghiêncứutrongnướcvàthếgiớiđãchứngtỏtácdụngc h ốngviêmnhiễm( a n t i -inflamatory)chốngvik h u ẩ n (anti-bacterial)vàvirut(antiviral)[5],[12]

* Tácdụnglàmbềnthànhmạchmáu

Cácdẫnxuấtđườngc ủ a f l a v o n o i d cóhoạtt í n h củav i t a m i n P n h ư rutin,h e s

p e r i d i n …

cótácdụnglàmtăngsứcbềnvàtínhđànhồicủathànhmaomạch,g i ảmsứcthẩmthấucủahồngcầuquathànhmaomạch.Hoạttínhnàyđượcứngd ụngt r o n g chữatrịcácr ố i l o

ạ nchứcnăngtĩnhmạch,g i ãnhaysuyy ếut ĩ n h m ạch,trĩ,rốiloạntuầnhoàntĩnhmạch[21]

* Tácdụnggiảmbéophìvàlipidmáu

Theok ếtq uả n g h i ênc ứuc ủ ac á c nhàk h o a h ọcNhậtch o t h ấ y khichuộtbéop

hìđượcđiềutrịbằngdịchc h i ế t g i àuf l a v o n o i d từláB ằngl ă n g ( Lagerstroemias

ượngcaotrênhọcamc h a n h ( R u t a c e a e ) đãđ ư ợ c n h i ề u nhànghiênc ứuc h i ế t xuấtvàthửt á c

Tácdụngsinhh ọc củatanninlàchấtbảovệcâytrồngtrướcsựtấncôngcủavisinhvậtgâybệnhvàcôntrùngănlá[42],

[50].Trongyhọc,tanninđượcsửdụnglàmthuốccầm máu,chữađingoài,ngộđộckimloạinặng,chữatrĩ,viêmm i ệng,viêmxoang,điềutrịcaohuyếtápvàđộtquỵ[1]

8 0 0 loàithựcvật.Tac ũ n g dễdàngtìmt h ấyc o u m a r i n trongtấtcảcácbộphậnkhácnhaucủacâynhư:áohạt,quả,hoa,rễ,lá,thân…

Coumarincũngcóvaitròlàmộtnhómchấtphòngthủhóahọchữuhiệuchốnglạivikhuẩnvàtácnhâncóhạicủamôitrường.Tuynhiênchotớinayconđườngtổnghợpcoumarinvẫnchưahoàntoànsángtỏ[40]

CoumarinCoumarinsửdụngtrongđờis ố n g h à n g ngàyn h ư l à m n ư ớ c hoa,h ư ơ n g l i ệu,làmchấtchốngđôngmáuvàchấtdiệt

loàigặmnhấm.Trongyhọcdẫnxuấtcủac o u m a r i n cótácdụngc h ố n g cothắt,giãnnởđộngmạchv ành,l à m bềnvàbảovệt h ànhm ạch,n g ă n c ả n đ ộ t quỵ[ 4 0].Mộtsốc o u m a

r i n k há c cót á c dụngk h á n g khuẩn,khángnấm,khángkhốiu,trừ giunsánvàgiảmđau

N N

e Alkaloidthựcvật

Alkaloidlàhợpchấtchứan i t ơ , đasốcón h â n dịvòngvàcótínhk i ềm,t h ư ờ n g gặpởthựcvậtvàđộngvật.Đasốcácalkaloidthànhphầnchứaoxyởthểrắn( c a f e i n ) , k

h ô n g cóoxyt h ư ờ n g ở thểlỏngdễb a y hơi( n i c o t i n ) A lkaloidt h ư ờ n g khôngcómàu,khôngmùivàvịđắng.Mộtsốalkaloidcómàuvàngnhưb e r b e r i n , palmitin.Cácalkaloidởdạngbasethườngkhôngtantrongnước[40]

N

N

H3C

CH3N

N O

CH3

Alkaloidcótínhk i ềmy ế u , doc á c mạchcacbonchứanitơquyếtđ ị n h C h ú n

g cóthểliênkếtvớikimloạinặngtạophứcvàphảnứngvớimộtsốthuốcthửđặctrưngnhư:Bouchardat(kếttủamàunâusẫm),Vans-

Mayer(kếttủatrắngánhvàng)hayDragendroff(màudacam,nâuđỏ)

Loàingườicólịchsửhơn2000nămnghiêncứuvàsửdụngalkaloid.Chotớinaycóhơn12000alkaloidkhácnhauđượcphânlập.Chúngkhôngphổbiếnt r o n g tựnhiênmàchỉtậptrungởmộtsốloàithựcvậtcóhoa(khoảng20%loàithựcvậtcóhoacókhảnăngsinhalkaloid).Vớicâytrồngalkaloidlàchấthóahọcbảovệcâytrồngtrướccôntrùngvàsâubọănlá[40].Trongyhọcnhiềuthuốcchữabệnhcóthànhphầnalkaloidnhưthuốcgâykíchthíchhoặcứcchếhệthầnkinht r u n g ư ơ n g , thuốcđiềuh ò a h u y ếtáp,chữar ố i loạnnhịpt i m … Mộtsốnghiêncứugầnđâychothấycácalkaloidchiế

ttừthựcvậtcũngcótácdụnghạg l u c o s e huyếtnhư:Berberin(Tinosporacordifoli

a,Coptissinensis),Casuarine6-O-α-glucoside(Syzygiummalaccense).

f Terpenthựcvật

Terpenlànhómh y d r o c a c b o n thựcv ậ t l ớ n vàđadạngn h ấ t , đ ư ợ c h ìnhthànhtừquátrìnhpolymehoácáctiểuđơnvịisopren5-

carbon(C5H8),cócôngthứccấ u t ạ o c h u n g là(C5H8)n.T r o n g t h ựcvậ t t e r p e n đ ư ợ ctổnghợpt h ô n g qua

Người trưởng thành châu Âu

< 18.518.5 - 24.9

chungmộtnhómlớncáchợpch ất baogồ mcảterpenvàt e r p e n o i d T e r p e n làt

h à n h phầnc h í n h củac á c l o ạ i t i n h d ầ u , đượcd ùngt r o n g côngnghệhươngmỹp

1.3.2 ThựctrạngbéophìtrênthếgiớivàViệtNam

Theotổchứcytếthếgiới(WHO)hiệnnaysốngườibéophìđãlêntới1,7tỉngười[2],khôngchỉgặpnhiềuởcácquốcgiapháttriểnmàcòngặpcảởcácq u ốcg i a đangp h á t triển.Mỹlàn ư ớ c cósốdânm ắ c bệnhc a o n h ấ t thếgiới,k h o ảng60triệungười(chiếm3

0 % dânsố),tănggấp3 lầnsovớiđiềutranăm1991.ỞchâuÂu,Anhlàquốcgiađứngđầubảngvới23%dânsố.TạichâuÁtỉlệt h ừ a c â n béop h ìở m ộ t sốnướcnhưsau:T h á i L a

n 3,5%,Philipin4,27%,Ma l a ys i a 3,01%,Nhật3%,TrungQuốc2%,HồngKông3%

TạiViệtNam,theoti êuchuẩnchon gư ời châuÁ,sốn gư ời thừacânbéop h ì cũngtăngtheothờigian.Năm1991theođiềutracủaLêHuyLiệuvàcộngsựthìtỉlệthừacânmắcbệnhbéophìnóichungtạiHàNộilà1,1%.Đếnnăm2000c o n sốnàyđãlà2,62%tănggần2,5lầntrongvòng10năm(điềutracủaLêVănHải)[2]

Năm2007,Việndinhdưỡng

Quốcgiađiềutratrênđốitượngngườitrưởngt h à n h

25-64tuổichothấytỉlệthừacânbéophìlà16,8%vàcòncóxuhướngt ă n g lên.TheoViệntrưởngTS.NguyễnCôngKhẩnthìtỉlệnàyởthànhthịlớnhơnnôngt h ô n , ở nữgiớicaohơnn a m g i ớ i TrẻemViệtNamc ũ n g có16,3%m ắcthừacânbéophì.HàNộicó4,9%trẻ4-

6tuổimắcbệnh,ThànhphốHồChíM i n h 6%trẻdưới5tuổivà22,7%họcsinhtiểuhọccũngrơivàotìnhtrạngnày[ 5 1 ].TrướctìnhhìnhđóBộytếđãkíquyếtđịnhthànhlập“Trungtâmphụchồid i n h dưỡngvàkiểmsoátbéophì”trựcthuộcViệndinhdưỡng,chínhthứctuyênc h i ếnvới bệnhbéophì

1.3.3 Táchạivànguy cơcủabệnhbéophì

Chứngt h ừ a c â n vàbệnhbéop h ìg â y n h i ềut á c hạic h o cuộcs ố n g conngườinhưmấtthoảimáitrongsinhhoạt,giảmhiệusuấtlaođộng,khốilượngcơthểnặngnềkémlanhlợi

Ngườibéophìcónguycơbệnhtậtcaohơnsovớingườithườngdonhiễmđ ộ c mỡmáu,tiêubiểunhư:

 Bệnhtimm ạ c h : Domỡt ạ n g làmtimkhócob óp vàmỡmáulàmxơ

cứng mạchvànhvàcácmạchmáukhácgâynhồimáucơtimtănghuyếtáp

 Rốiloạnlipidmáu:Tìnhtrạngnàyrấthaygặpởngườibéobụngvàcóbiểuhiệnđặctrưnglàtăngtriglyceridvàlipidcóhại(LDL-c),giảmlipidcólợi( H D L - c )

 Tiểuđường:BéophìtoànthâncónguycơmắcĐTĐtype2

 Độtquỵ:NhữngngườicóBMI>30dễbịtửvongdobệnhliênquan

đếnmạchmáunão

 Ngoàirabéophìcònlàmgiatăngnguycơcủanhiềubệnhkhác:xấuđitìnhtrạngrốiloạntiềnmãnkinhởphụnữ,suygiảmchứcnănghôhấp,rốiloạnhoạtđộngcơxương,ungthư,sỏimậtvàc ác vấnđềbệnhlýtâmthầnkhác[1],[ 3 8 ]

1.3.4 Nguyênnhânvàgiảiphápphòng,điềutrịbéophì

Nguyênnhânchínhdẫnđếnthừacânbéophìlàdokhẩuphầnvàthóiquend i n h dưỡngkhônghợplý,hoạtđộngthểlựckémdẫnđếnnănglượnghấpthụvàocơthểvượtquámứccầnthiếtvàtíchlũydướidạngmỡ.Ngoàiramộtsốbệnhlýnộitiếtnhư:HộichứngCushing(dohormonecortisosteroidtrongcơthểtăngquácao),bệnhsuytuyếngiáptrạng,bệnhtrứngđananghoặccóchứagenbéophìditruyền

Đểphòngbệnhbéophìcóhiệuquả,mỗicánhâncầnnângcaonhậnthứcvềdinhdưỡngvàhoạtđộngthểlực.Trênphạmvixãhội,việcphòngbệnhcầntậptrungvàonhómcónguycơcaomắcbệnhnày

Điềutrịthừacânbéophìdựatrênnguyêntắckếthợpgiữachếđộănuống,luyệntậpvàdùngthuốc.Trongđóthuốcvàphẫuthuậtchỉdùngtrongtrườnghợpb ắtbuộc.Thuốcchốngbéophìđượcchialàmhainhómlớn

 Nhómcótácdụnglênhệthầnkinhtrungương

 Nhómtácdụnglênhệtiêuhóa

ThuốcđiềutrịbéophìphổbiếnhiệnnaylàMetforminthuộcnhómhaivớitácdụngchủyếulàứcchếphângiảiglycogenthànhglucoseởgan,làmtăngtínhn h ạycảmcủainsulinngoạivi,tác độnghạglucosetrongkhoảng2 -4mmol/

l,g i ảmHbA1Cđến2%.Vìthế,Metforminđượcdùngchocảbệnhnhânbéophìvàtiểuđường.Tuynhiênt h u ốcc ũ n g cóm ộ t sốtácdụngphụvớiđườngt iêuh óa ,

u ngaytừkhitỉlệthànhphầncủalipidm á u cósựthayđổi.Kháiniệmnàychỉrõrốiloạnlipidmáucóthểxảyratừrấts ớm,ngaycảkhichưacótăngcácgiátrịtuyệtđốinồngđộcủacácthànhphầnt r o n g máu[4].Rốiloạnnàycóthểtiênphátdoditruyềnhoặcthứphátsaucácbệnhkhácnhư:béophì,đáitháođường,nghiệnrượu,suygiáptrạng.Fredricksonc ă ncứvàokĩthuậtđiện

divàsiêulytâmvớicácthànhphầnhuyếtthanhđãphânl o ạic h ứ n g tănglipidmáuthành

5 t y p e dựat r ênn h ữngt h a y đổit h ànhphầnl i p o p r o t e i n CáchphânloạinàyđãđượcWHOchínhthứcsửdụngvàonăm1970[ 2 5 ] Nhiềunghiêncứuđãchứngminhngườimắcbệnhbéophìcónguycơcao

mắccácbệnhrốiloạnlipidmáudẫnđếnxơvữađộngmạch(liênquanchủyếuđ ế n cáclipoprotein)hoặchiệntượng“nhiễmđộcmỡtếbào”[21],[25].

1.4 Bệnhđáitháođường(Diabetesmellitus)

1.4.1 Kháiniệmvàphânloại

Danhtừđáitháođường(Diabetesmellitus)cónguồngốctừtiếngHyLạp( D i a

b e t e s : n ư ớ c chảyt r o n g ố n g s y p h o n ) vàt i ếngL a t i n h ( m e l l i t u s : n g ọ t )[ 65].K h o ảng1550nămtrướccôngnguyêncácthầythuốcHyLạpđãmôtảbệnhnàyvớicáctriệuchứngănnhiều,uốngnhiều,tiểunhiều,nướctiểucóđườngvàsútc â n nhanh[4].PGS.TSTạVănBìnhđịnhnghĩađáitháođườnglàmộthộichứngcóđặctínhbiểuhiệnbằngtăngđườngmáu,dohậuquảcủaviệcmấthoàntoàninsulinhoặclàdocóliênquanđếnsựsuyyếu trongbàitiếtvàh o ạtđộngcủ a insulin.BệnhĐTĐđượcxácđịnhdựavàonhữngtiêuchítrongbảng1.2[4]

Bảng1.2.Cáctiêuchíđểchuẩn đoán ĐTĐtheoWHO

Kếtluận

Đườnghuyết lúcđói(mm ol/l)

Đườnghuyết2giờsa

u khilàmnghiệmphá ptăngđườnghuyết(

mmol/l)

Đườnghuyếttạit hờiđiểm bấtkì(mmol/l)

kèmtriệuchứnguốngnhiều,đáinh iềuvàgầysút



ĐTĐtype2:Chiếm80%-90%bệnhnhân,cót ín h quytụgiađ ìnhvàhaygặpở n h ữ n g n g ư ờ i t r ên30t u ổi.Haiyếutốch ín h đóngva i tròquant r ọngt r o n g cơchếsinhĐTĐtype2làkhiếmkhuyếtchứcnăngtếbàoβtuyếntụyvàtìnhtrạngk h á n g i n s u l i n [ 4],

[38].Haiyếutốn à y l u ô n cót á c độngq ua l ạ i vớin h a u vàkhôngthểkếtluậnyếutốnàoxuấthiệntrước.Khánginsulincóthểdob ấtthườngởhậuthụthểinsulin,bấtthườngvềsốlượngreceptorinsulinhoặcáil ựcgắnhormoncủainsulinvàcũngcóthểdoacidbéotựdotăngcaogiántiếplàmả n h h ư ở n g quát r ìnhtruyềntinnộibàocủainsulinở tếbàođích.Bởivậy,bệnhbéobệulàmộttrongnhữngnguyênnhânmôitrườngđượcđềcậpđếnnhiề

- Giaiđoạn3:Khánginsulinkhôngđổinhưngbàitiếtinsulinsuygiảmgâyt ă n g glucosehuyếtlúcđói,bệnhĐTĐbiểuhiệnrabênngoài

 NgoàiracòncóĐTĐthainghénvàmộtsốtypeĐTĐđặcbiệtkhácnhưt h i ếuhụtchứcnăngtếbàoβ,thiếuhụtditruyềnvềtácđộngcủainsulin,bệnh tụyngoạitiết,

1.4.2 ThựctrạngđáitháođườngtrênthếgiớivàViệtNam

Cùngvớicácbệnhk h ô n g l â y n h iễ m k hác bệnhĐTĐđangpháttriểnvớitốcđộnhanhchóngcùngsựpháttriểncủanềnkinhtếxãhội.Năm1994,toànthếgiớicó98,9triệungườimắcĐTĐ.Năm1995đãtănglên135triệungườichiếm4%dânsốthếgiới,cuốinăm2002cókhoảng177triệungười[2].Dựđoánđếnnăm2010cókhoảng222triệuvànăm2025cókhảng300triệubệnhnhânchiếm5,4%dânsốthếg i ớ i [2].Đặcbiệtn g àynaytỉlệngườimắcbệnhởc h â u Áđãv ư ợ t xachâuÂu-

nơivẫnđượcxemlàổbệnh[1].TạiTâyTháiBìnhDươngcó12quốcgiacótỉlệĐTĐtype2trên8%,cábiệtcóquốcđảocótỉlệbệnhvượt4 0 %

ViệtNamhiệnnayĐTĐđanggiatăngrấtnhanh.Năm1990,HàNộicótỉlệmắcbệnhlà1,2%,Huế0,96%,ThànhphốHồChíMinhlà2,52%.Theođiềutraquốcgianăm2002chot hấ ytỉlện g ư ờ i m ắ c bệnhĐTĐl ứ a tuổitừ30- 64t r o n g toànquốclà2,7%

(khuvựcđôthịvàkhucôngnghiệptỉlệtới4,4%).Đặcb i ệtbệnhnàytrongnhómngườicóyếutốnguycơlàrấtcao(10,3%).Hiệnnay,cók h o ảnghaitriệun g ư ờ i m ắc bệnhĐT

Đn h ư n g cótới65%sốđók h ô n g biếtm ì n h đãm ắcb ệ n h TheoPGS.TSTạVănBình:

Đ TĐ t y p e 2 ở l ứ a tuổit h a n h t h i ếuniênngàymộttăngnhanh,đâylàmộtvấnđềrấtđánglưutâm[2]

1.4.3 Táchạivàbiếnchứng

ĐTĐảnhhưởngtrựctiếpđếnsứckhỏevàkhảnănglàmviệccủangườilaođ ộ n g , nhưnghơncảlànguycơbiếnchứngcủabệnhnhânthườngrấtcao[4]

- Biếnc h ứ n g mắtnhư:bệnhlývõngmạc( 2 7 , 8 % ) , đ ụ c t h ủ y t i n h thể( 6, 1 % ) tăngsinhgâymùlòa(1,1%) Bệnhvềvõngmạctăngdầntheothờigianpháthiệnbệnh

- Biếnchứngthận như:microalbuminniệu( 1 1 , 6 % ) , m a c r o a l b u m i n(3%),suythậntừđộ1đếnđộ4(3,5%)…

+Insulinvàcácthuốck í c h thíchb àit i ếtinsulinnhư S u l f o n f l u r e a ,

Nateglinid(Starlix)…

+T h u ốcl à m t ă n g tínhn h ạ y c ả m c ủ a thụthểvớii n s u l i n n h ư : B i g u a n i d ,nhómthiazolidinedion…

ănkhôngđủ,cơthểsẽhuyđộngnguồnglucosethứhainhờsựthoáihóaglycogenởgan,cơ.Ngoàirag l u c o s e còncóđượcnhờquátrìnhtântạoglucosenhờhệthốngenzymeđặchiệuriêngbiệt(xảyraởgan,thận,ruột)từpyruvat,lactathaycácsảnphẩmtrunggiancủachutrìnhKrebs.

Glucosesaukhiđượchấpthuhoặctạothànhtrongcơthểsẽtantrongmáuvàđượcvậ

nc h u y ể n vàot r o n g tếbàonhờc á c p r o t e i n v ậ n c h u y ể n Cuốicùngg l u c o s e sẽthoáihóa đểtạonă ng lượnghaycácsảnphẩmtrunggianthôngqua q u á trìnhđườngphân,chutrìnhpentosep h os p h a t hayconđườngtạou ro ni c vàa s c o r b i c G l u

c o s e dưthừak h i n h u cầunănglượngc ủ a cơthểthấplạiđ ư ợ c chuyểnthànhdạnggluciddựtrữlàglycogenởgan[29]

Đểduytrìnồngđộglucoseổnđịnhtrongmáucơthểphảihuyđộngnhiềucơc h ế, cósựxúctácc ủ a n h i ề u loạienzymek h á c n h a u nhằmc â n bằngg i ữ a l ư ợ n g glucoseđivàomáuvàlượngglucoseđượcthunạpbởicáctổchức.Trongđóquantrọngnhấtlàviệcđiềuhòaquátrìnhtântạoglucosevàquátrìnhthoáih ó a g l u c o se cósựthamgiacủan h i ề u proteinvậ nc h u y ể n g l uc o s e q ua màngtếbào[19]

Glucosetrongcơthểđượcđiềuhòaổnđịnhbởicáchormonmàchủyếulàc á c hormontuyếntụynộitiết.InsulinlàhormontiếtbởicáctếbàoβcủađảotụyL a n g e r h a n s cótácdụnglàmg i ảmg l u c o s e máudolàmtăngdựtrữg l y c o g e n ở g a n , cơ,ứcchếquátrìnhtântạođườngmới.Glucagonlàhormontiếtbởitếbàoαđảotụy,cótácdụngngượcvớiinsulin,nghĩalàlàmtăngsựphângiảiglycogenvàtăngtântạođườngmớidođógiảmglucosehuyết

1.5 Mốiquanhệgiữabéophìvàđáitháođường

BéophìvàĐTĐlàhaibệnhkhôngtruyềnnhiễmnguyhiểmnhấtcủathếkỉ

21.Haic ă n bệnhn àycómốil i ênquanc h ặtchẽvớinhaut h ể h i ệ n ở c h ỗ tỉlệ

ngườibéophìluôntăngtươngđươngvớisốbệnhnhânbịĐTĐ.MộtcuộckhảosátcủaMỹgầnđâyđãchỉrarằngcótới58%sốngườibịĐTĐtype2đượcquycholàdob é o p h ì Béophìl i ê n q u a n t ớiĐ T Đ type2 thôngquasựđềk h á n g insulin.Nồngđộacidbé otựdoc

ứt ă n g 100µMth ìmứcđềk h á n g insulintăngk h o

ảng5-10%[4].Thiếuinsulindẫnđếnsựtăngtrọnglượngcơthể,tăngđườngmáu,cuốicùngdẫnđếnbệnhĐTĐtype2

Cónh iềunhântốảnhhưởngtớimốiquanhệgiữabéophìvàbệnhĐTĐt y p e 2baogồm:chỉsốkhốicơthể,thờigianbéophì,chếđộdinhdưỡng,sựvậnđ ộ n g thânthể.Mộtthốngkêđãchỉrarằngnhữngngườicóchỉsốkhốicơthểlớnhơn30kg/m2trong10nămcónguycơmắcbệnhĐTĐt y p e 2caogấphail ầ n ngườibịbéophìdưới5nămvànếutrọnglượngcơthểtăngmộtkilogamthìrủirovềbệnhĐTĐtype2tăng4,5%[38].ĐâychínhlàcơsởđểReedvàcộngsựđưaraphươngphápgâymôhìnhĐTĐthựcnghiệmởđộngvậtbằngcáchtiêmS T Z l iềuđơnc h o c h u ộ t đãđ ư ợ c vỗbéon h i ề u n g ày[ 6 0 ] ,

[ 6 3 ] TạiViệtNam,TrầnThịChiMaiđãápdụngphươngphápnàyvàđạthiệuquả90%chuộtxuấth i ệnĐTĐvớinồngđộglucosemáu≥10mmol/l[24]

KếtquảcủanhiềunghiêncứuchothấyacidbéotựdocóvaitròtrongbệnhsinhĐTĐtype2.Phầnlớnngườibéophìcónồngđộacidbéotronghuyếttươngt ă n g cao.Sựtăngnàyứcchếquátrìnhhấpthuglucosengoạividướitácdụngcủainsulin,ứcc h ế sửd ụ n g g l u c

o s e c ủ a toàncơt h ể , ứcchếo x y h ó a glucoseở cơ[ 3 9 ]

ĐTĐđặctrưngbởisựr ố i l oạnc h u y ể n hóag l u c i d , sựr ố i loạnnàyả n h h ư ở

n g đế nmôitrườngnộimôidođókéotheohoặclàmchoquátrìnhrốiloạnchuyểnhóalipidởmỗiloạiĐTĐmangnhữngđặctrưngriêng.Đặctrưngchungcủar ố i loạnchuyểnhóalipidt ro ng ĐTĐlàsựtăngtriglycerid,giảmHDL-cvàLDL-

cvẫnnằmtronggiớihạnbìnhthường.TuynhiênởĐTĐtype1rốiloạntăngtriglyceridsẽmấtđikhikiểmsoátđượcglucosemáukhácvớitype2,rốiloạnnàycóthểvẫnkéodàimặcdùcósựđiềutrịgiảmglucosemáuthíchhợp.LDL-

ccủatype2 cũngcóthểtăngnhẹvàxuấthiệnnhiềuLDL-cvới

STZtạoranitricoxide(NO)làmtổnthươngADNcủatếbàoβ.Mặtkhác,

hoạtđộngcủaNOlàmứcchếchutrìnhKrebs,giảmtiêuthụoxytrongtythểtừ

Hình 1.1 Cơ chế gây độc của STZ lên tế bào β của tụy đảo chuột

(MIT – Ty thể, XOD – xanthine oxidase) [47]

đólàmgiảmmạnhsựsảnxuấtATPvàtổnhạiđếncácnucleotitcủatếbào.Đồngthờiphântửnàycònứcchếhoạttínhenzymeaconitase.Mặtkhác,sựtăngcườngl o ạibỏgốcphosphatecủaATPsẽbổsungcơchấtchoxanthineoxidasevàtăngc ư ờ n g sảnxuấtacidu r i c Sauđó,xanthine o x i d a se x ú c tácphảnứ n g tạothànhanionsuperoxyde (O2-).Cuốicùnganionsuperoxyde sinhrah y d r o g e n peroxide

(H2O2)vàgốchydroxyl(OH-).Các dạngoxyphảnứngnàycũngtậptrungphá

hủyADNvàgâyranhữngthayđổibấtlợichotếbào.NOvàcácdạngoxyhoạtđ ộ n g c òncóthểtạot h à n h per ox yn it ra te (ONOO)cóđ ộ c tínhc a o Tổnt h ư ơ n g A D N gâyrabởiSTZlàmt ă n g c ư ờ n g q u á trìnht r ù n g hợpA D P (PolyADP-

r i b o s y l a t i o n ) dẫnđếnlàmmấtNAD+,xahơnnópháhủyATPdựtrữvàsauđóứcchếsựtổnghợpvàtiếtinsulincủatếbàoβ,[47]

OH - ONOO NO Poly(ADP-ribosylation)

NDAdamage

2.1.2 Mẫuđộngvật

Chuộtn h ắ t t r ắ n g (Musm u s c u l u s )c h ủngSwiss4 t u ầ n tuổi( 1 4

-17g)doViệnVệsinhDịchtễTrungư ơ n g c u n g cấp.C h u ộ t đượcn u ô i trongđiềuk i ệ nnhiệtđộphòng22-

25°Cvớichukỳsáng12hvàtối12h,đượcchoănvàuốngn ư ớ c theochếđộănthườngvàănbéo

Hình2.2.TủsấythứcănchochuộtTN ovà chuộtnuôi(béophì,chuẩn)TN o

- Phễuchiết,phễulọc,giấylọc….

hexan,chloroform,ethylacetate cấtdungmôidướiápsuấtgiảmthuđượccáccaophânđoạndịchchiếttươngứng.

Flavonoid Shinoda Mg/HCl Màuđ ỏ, h ồ n g , dacamxuấth i ệ nc h ứ n g tỏ

sựcómặtc ủ a f l a v o n, f l a v o n o l vàc ác dẫn

Diazohoá Diazo Phảnứngchomàudacamlàdươngtính.

Dungdịchkiềm

NaOH 10%

Phảnứ n g cókếtq u ả d ư ơ n g tínhk h i xuấthiệnmàuvàngcam

Acidsulfuric

H2SO410

%

Phảnứngchomầuv à n g đậmc h o t h ấ y sựcómặtcủafavonvàflavonol,mầuđỏha ynâuchothấysựcómặtcủachalconvàauron

Vanilin/HCl Màuđỏs o n xuấthiệnch ứn g tỏsựcómặt

Phảnứngdươngtínhnếucómàuđỏthẫm

VansMayer

HỗnhợpHgCl2+KI Phảnứ n g d ư ơ n g tínhn ế u cókếttủamàutrắng

Chovàomỗicuvert20µlmẫuthử(dungdịchgallicchuẩnởcácnồngđộhoặcdịchchiếtcácphânđoạn)+1,58mlH2O+100µlthuốcthửFolin-

C iocalteaus a u 30giâyđ ế n 8 phútch o t h êm3 0 0 µ l N a2CO3.Đểh ỗ n hợpdungd ịchp

hả nứngtrong2giờở 20oCrồixácđịnhở bướcsóng765nm.Tiếnh ànhđ ị n h lượngacidgallicđểdựngđườngchuẩn

*Địnhlượngphenoliccủamẫunghiêncứubằng

cáchlấy20µl(0,02ml)đểđ ị n h lượngtươngtựnhưđãlàmvớimẫuchuẩnacidgallic

2.2.2.3 Phươngphápsắckílớpmỏng(TLC)

Sắckílớpmỏng(TLC-thinlayerchromatography)làkĩthuậtsắckíkhánhanhgọnvàtiệnlợi.Nógiúpnhậnbiếtcácnhómchấtcótrongmẫunghiêncứu.Phươngphápsắckílớpmỏng,thànhphầntronghỗnhợpđượcxácđịnhnhờsos á c h hệsốlưucủahỗnhợp(Rf)vàhệsốlưucủamộtsốchấtđãbiết[5]

b.Trongđóalàkhoảngdichuyểncủac h ấtnghiêncứu,blàkhoảngdichuyểncủadungmôi

kg(thểtíchvàkhốilượngtốiđachophép).Theodõibiểuhiệnvàsốchuộtchếttrong72hđểđánhgiámứcđộđ ộ c củadịchchiếtcâyCamthảođất

Nhóm2-Nhómnuôibéo:Cácconchuộtđượcchămsócbằngchếđộthứcăng i àul i p i d vàcholes

teroldochúngt ô i p h ốit r ộ n c á c thựcphẩmdinhd ư ỡ n g đượctínhtoánvớithànhphầnnhưbảng2.2

Cácnhómchuộtđượctheodõitrongvòng8tuần,trọnglượngcủacácconc h u ộtđượckiểmtrahàngtuần.Vàotuầncuốicùngthờigianthínghiệm,saukhix á c địnhtrọnglượng,chúngtôitiếnhànhlựa

chọnngẫunhiêntừmỗinhómra10c o n chuột,lấymáutổngsốvàphântíchmộtsốchỉsốlipidmáu.Cácsốliệuđượcthuthậpvàtiếnhànhxửlýthốngkê