Nuôi cấy meristem, tạo cây sạch bệnh virus

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC TIỂU LUẬN Chuyên đề: “Nuôi cấy meristem, tạo bệnh virus” Giáo viên hướng dẫn: PGS TS Vũ Đình Hồ Học viên: Chu Thuỳ Dương Lớp: K20CNSHA HÀ NỘI, 3/2012 I ĐẶT VẤN ĐỀ Sự phát triển công nghệ nuôi cấy mô, tế bào thực vật mở nhiều hướng ứng dụng khác nhau: sản xuất sinh khối chất có hoạt tính sinh học quy mô lớn, nhân nhanh giống trồng phương pháp invitro, bảo tồn nguồn gen in vitro… Trong lĩnh vực bệnh cây, người ta ước tính có khoảng 1000 loại virus gây bệnh thực vật (trong số 4000 loài virus), gây tổn thất lớn cho thu hoạch Tạo trồng bệnh virus kỹ thuật nuôi cấy đỉnh sinh trưởng (meristem), ngày phát triển ứng dụng rộng rãi Một số thành tựu nuôi cấy mô, tế bào thực vật II NỘI DUNG Tác hại bệnh virus Cơ sở việc nuôi cấy meristem tạo bệnh virus Quy trình ni cấy invitro (meristem) Các kỹ thuật nuôi cấy meristem Nhân nhanh trì tình trạng bệnh virus 1.Tác hại bệnh virus  Virus tác nhân gây bệnh khơng có cấu tạo tế bào, kích thước nhỏ (nm), cấu tạo gồm hai thành phần acid nucleic (trong acid nucleic chủ yếu dạng ARN, số trường hợp ADN) bao bọc vỏ bên protein  Khi xâm nhiễm vào thể thực vật, việc tái - sử dụng vật liệu tế bào chủ để tăng lên số lượng, protein virus tương tác với chất chịu trách nhiệm chức sinh lý tế bào gây triệu chứng biểu bệnh virus Virus thực vật Potato virus Y (PVY) Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) Tobacco mosaic virus (TMV) Rice tungro bacilliform Cucumber mosaic virus (RTBV) virus (CMV) Một vài triệu chứng bệnh virus • Khảm (chỗ xanh chỗ vàng loang lổ xen kẽ nhau) Bean common mosaic virus (BCMV) Turnip mosaic virus (TuMV) (Đậu đũa) (Cải củ) Một vài triệu chứng bệnh virus Lùn Groundnut rosette virus (GRV) Shallot yellow stripe virus (SYSV) (Lạc) (Hành ) Một vài triệu chứng bệnh virus Xoăn, Các begomovirus Cà chua Một vài triệu chứng bệnh virus Biến vàng Clerodendrum golden mosaic virus (ClGMV) Erectites yellow mosaic virus (ErYMV) (Mò) (Rau tàu bay) 4.4 Vi ghép  Là kỹ thuật ghép mô phân sinh đỉnh lên gốc kháng bệnh điều kiện invitro để sản xuất virus  Kỹ thuật thường sử dụng với thân gỗ, đặc biệt họ cam, chanh meristem chúng sinh trưởng tái sinh chồi nuôi cấy trực tiếp môi trường nhân tạo Nhân nhanh trì tình trạng bệnh  Sau tẩy virus khỏi mẫu nhiễm virus việc nhân nhanh trì độ virus giống có ý nghĩa quan trọng định  Để ngăn chặn q trình tái lây nhiễm áp dụng bước sau đây: Cây trồng nên trồng nhà cách ly (nhà màn, nhà kính) khơng chứa nguồn bệnh vector truyền bệnh hay tự nhiên khơng có mang virus Cần loại trừ thường xuyên nguồn lây nhiễm, cần phòng trừ vật mang bệnh (cơn trùng, tuyến trùng…) Nhân nhanh trì tình trạng bệnh Phòng tránh lây nhiễm giới q trình chăm sóc trồng Thường xun chọn lọc, mắt qua phân tích chẩn đốn Để hồn tồn chắn, nên trì vật liệu bệnh invitro Quy trình sản xuất khoai lang bệnh virus     Một số giống khoai lang bị nhiễm bệnh virus trồng miền Bắc Việt Nam Giống Hoàng Long: 27.5% Khoai lang Lim: 25% Giống Chiêm Dâu: 30.4% Khoai lang Nghệ: 10% (Điều tra Gia Lâm - Hà Nội Dâu Keo - Bắc Ninh vụ hè thu 2002) Virus gây bệnh khảm khoai lang Năng suất khoai lang giảm từ 40-65% bị nhiễm virus chân chim (Sweet potato feather virus) Cây khoẻ sau lây nhiễm virus Kỹ thuật tách meristem chuẩn bị mẫu cấy Kỹ thuật tách meristem khử trùng mẫu cấy Kỹ thuật tách meristem - tách mẫu cấy Kỹ thuật tách meristem - cấy mẫu Sự hình thành chồi từ meristem Ảnh hưởng tổ hợp cytokinin auxin hình thành chồi từ meristem Kiểm tra test ELISA Ghép thị Lây nhiễm nhân tạo thị Cây bệnh virus trồng nhà lưới củ bệnh III KẾT LUẬN  Nuôi cấy meristem mở hướng việc tạo bệnh virus  Có nhiều ưu điểm so với phương pháp truyền thống: thời gian tạo giống nhanh, số lượng giống tạo nhiều (phục vụ cho sản xuất quy mơ lớn), sản phẩm tạo có suất, chất lượng cao (phục vụ cho công tác xuất khẩu)  Cùng với công nghệ gen, công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật hướng đầy triển vọng việc chọn tạo giống trồng đặc biệt giống trồng bệnh ... Một số thành tựu nuôi cấy mô, tế bào thực vật II NỘI DUNG Tác hại bệnh virus Cơ sở việc nuôi cấy meristem tạo bệnh virus Quy trình ni cấy invitro (meristem) Các kỹ thuật ni cấy meristem Nhân... bệnh virus Biểu gây bệnh Tobacco mosaic virus (TMV) Virus gây bệnh khảm thuốc TMV (Tobacco mosaic virus) tạo vết khảm lớn gây giảm chất lượng thuốc lá, có khơng cho thu hoạch Cây bệnh không virus. .. Trong lĩnh vực bệnh cây, người ta ước tính có khoảng 1000 loại virus gây bệnh thực vật (trong số 4000 loài virus) , gây tổn thất lớn cho thu hoạch Tạo trồng bệnh virus kỹ thuật nuôi cấy đỉnh sinh