DSpace at VNU: Xác định Ochratoxin trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ( LC-MS MS)

Xác định Ochratoxin thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng khối phổ( LCMS/MS) Nguyễn Thị Hà Bình Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Luận văn ThS Chuyên ngành: Hóa phân tích; Mã số 60 44 01 18 Người hướng dẫn: TS Lê Thị Hồng Hảo; PGS.TS Nguyễn Xuân Trung Năm bảo vệ: 2013 Abstract Xây dựng phương pháp xác định hàm lượng Ochratoxin thực phẩm bao gồm: Khảo sát điều kiện máy sắc ký lỏng hai lần khối phổ; Khảo sát điều kiện xử lý mẫu; Thẩm định phương pháp xây dựng Áp dụng phương pháp xác định ochratoxin ngũ cốc, sản phẩm từ ngũ cốc, rượu lên men thị trường nước Keywords Hóa phân tích; Phương pháp sâu ký lóng; Thực phẩm Content MỞ ĐẦU Vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm ngày quan tâm liên quan trực tiếp tới sức khỏe tất người tiêu dùng Thời gian vừa qua nước liên tiếp phát vụ ngộ độc thực phẩm có vụ ngộ độc mycotoxin đặc biệt nghiêm trọng …đã gây tâm lý lo ngại cho người tiêu dùng lựa chọn thực phẩm sử dụng thực phẩm cách Theo thống kê Cục An toàn thực phẩm vụ ngộ độc thực phẩm năm gần nước: - Năm 2009: Toàn quốc xảy 147 vụ ngộ độc thực phẩm, có 5026 người mắc; 3958 người nhập viện; 33 người tử vong - Năm 2010: Tình hình NĐTP năm 2010 phức tạp Toàn quốc xảy 175 vụ ngộ độc có 34 vụ ngộ độc 30 người làm 5664 người mắc 42 trường hợp tử vong, so sánh với số liệu trung bình năm giai đoạn 2006-2009, số vụ ngộ độc giảm 9,1%; số mắc giảm 17,6% số tử vong giảm 19,2% - Năm 2011: 148 vụ, 4700 người mắc, 27 người tử vong - Năm 2012: 168 vụ, 5541 người mắc, 34 người tử vong Theo TS Trần Quang Trung, Cục trưởng Cục An toàn thực phẩm - Bộ Y tế, tháng năm 2013, nước có 108 vụ ngộ độc thực phẩm làm 2.800 người mắc, có 18 ca tử vong Trong 40 vụ ngộ độc thực phẩm thống kê quý III nguyên nhân vi sinh vật 23 vụ, độc tố tự nhiên vụ, hóa chất vụ 11 vụ chưa xác định nguyên nhân Các vụ ngộ độc xảy khắp nơi, từ gia đình riêng đến tập thể Ochratoxin loại độc tố sinh chủng nấm mốc thuộc giống Aspergilus ochraceus Penicillium verrucusum loại độc tố có tiềm gây ung thư viêm thận người động vật Độc tố phát nhiều nông sản khác bao gồm ngũ cốc sản phẩm chúng Điều đáng lo ngại ăn phải thức ăn bị nhiễm ochratoxin khơng gây ngộ độc cấp tính mà tích lũy dần thể - nguy tiềm ẩn đe dọa sức khỏe cho người Trong số 10.000 loại nấm mốc khác biết đến có khoảng 50 loại có hại gia súc gia cầm người Các loại nấm sản sinh độc tố gọi chung Mycotoxin Mycotoxin là ch ất độc sinh từ nấm mốc, hình thành nấm chuyển hóa chất dinh dưỡng có thức ăn nguyên liệu Theo tổ chức lương thực nông nghiệp Liên Hiệp Quốc (FAO), khoảng 25% số ngũ cốc giới có chứa hàm lượng mycotoxin mức độ Tùy vào địa lý, khả nhiễm mycotoxin lại khác Ở điều kiện nhiệt đới cận nhiệt đới, nguy nhiễm mycotoxin cao Đặc thù khí hâ ̣u sản xuất nơng nghiệp Việt Nam tình trạng nhiễm độc tố nấm mốc phổ biế n Sự hình thành nấm mốc độc tố chúng đồng, lúc thu hoạch, bảo quản trình chế biến thức ăn cho vật ni Như vậy, khơng nơi giới khỏi nấm mốc độc tố từ chúng, tác hại chúng vô to lớn suất vật nuôi sức khỏe người Để kiểm soát mức độ nhiễm ochratoxin thực phẩm, Việt Nam giới có nhiều phương pháp phân tích nghiên cứu ứng dụng Nhưng với đặc điểm ưu việt độ xác cao nên phương pháp phân tích sắc ký lỏng khối phổ coi phương pháp phân tích có giá trị pháp lý để phát định lượng nồng độ ochratoxin lượng vết hay siêu vết Xuất phát từ tính cấp thiết xã hội tính ưu việt phương pháp phân tích, chúng tơi xây dựng phương pháp nghiên cứu: "Xác định hàm lượng Ochratoxin thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng hai lần khối phổ (LC-MS/MS)” Mục tiêu thực đề tài nghiên cứu là: Xây dựng phương pháp xác định hàm lượng Ochratoxin thực phẩm bao gồm: - Khảo sát điều kiện máy sắc ký lỏng hai lần khối phổ - Khảo sát điều kiện xử lý mẫu - Thẩm định phương pháp xây dựng Áp dụng phương pháp xác định ochratoxin ngũ cốc, sản phẩm từ ngũ cốc, rượu lên men thị trường nước Reference TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Cục Quản lý chất lượng nông lâm sản thủy sản, Báo cáo kết công tác tháng 3/2012 trọng tâm công tác tháng 4/2012 (ngày 4/4/2012) Báo cáo kết công tác tháng 4/2012 trọng tâm công tác tháng 5/2012 (ngày 14/5/2012) Trần Tứ Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn Văn Ri, Nguyễn Xn Trung (2007), Hóa học phân tích, phần 2: Các phương pháp phân tích cơng cụ, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Văn Ri (2009), Giáo trình Các phương pháp tách, khoa Hóa học trường Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội Nguyễn Đình Thành (2011), Cơ sở phương pháp phổ ứng dụng hóa học, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 5 Phạm Luận (1998), Cơ sở lý thuyết phân tích sắc ký lỏng hiệu cao, ĐH Quốc Gia Hà Nội Tạ Thị Thảo (2010), Giáo trình Thống kê Hóa học phân tích, khoa Hóa học trường Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội Mai Tất Tố, Nguyễn Thị Trâm (2007), Dược lý học tập 1, NXB Y học Mai Tất Tố, Nguyễn Thị Trâm (2007), Dược lý học tập 2, NXB Y học TCVN 9524:2012 Thực phẩm - Xác định hàm lượng ochratoxin A rượu vang bia - Phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC) có làm cột lực miễn nhiễm 10 TCVN 8426:2010 Cà phê nhân - Xác định ochratoxin A phương pháp sắc ký lỏng có làm cột lực miễn nhiễm 11 Trần Cao Sơn, Phạm Xuân Đà, Lê Thị Hồng Hảo, Nguyễn Thành Trung (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hóa học & vi sinh vật, Nxb Khoa Học Kỹ Thuật Tiếng Anh 12 Agnieszka Waskiewicz, Monika Beszterda, Jan Bocianowski, Piotr Golinski(2013), “Natural occurrence of fumonisins and ochratoxin A in some herbs and spices commercialized in Poland analyzed by UPLC – MS/MS method”, Food Microbiology, 36, pp 426-431 13 Angel Medina, Francisco M Valle-Algarra, Jos´ e V Gimeno-Adelantado, Rufino Mateo, Fernando Mateo, Misericordia Jim´ enez (2006), “New method for determination of ochratoxin A in beer using zinc acetate and solid-phase extraction silica cartridges”, Journal of Chromatography A, 1121, pp.178–183 14 Aihua Zhang, Yanna Ma, Lulu Feng, Ying Wang, Chenghua He, Xichun Wang (2011), “Development of a sensitive competitive indirect ELISA method for determination of ochratoxin A levels in cereals originating from Nanjing, China”, Food Control 22, 706, pp 269–277 15 Arnau Vidal, Sonia Marín, Antonio J Ramos, German Cano-Sancho, Vicente Sanchis (2013), “Determination of aflatoxins, deoxynivalenol, ochratoxin A and zearalenone in wheat and oat based bran supplements sold in the Spanish market”, Food and Chemiscal Toxicology, 53, pp 133-138 16 Bulent Kabak (2012), “Determination of aflatoxins and ochratoxin A in retail cereal products from Turkey by high performance liquid chromatography with fluorescence detection”, Food Control, 28, pp 1-6 17 Catherine Tessini, Claudia Mardones, Dietrich von Baer, Mario Vega, Erika Herlitz, Roberto Saelzer, Jorge Silva, Olga Torres (2010), “Alternatives for sample pre-treatment and HPLC determination of Ochratoxin A in red wine using fluorescence detection”, Analytica Chimica Acta, 660, pp 119-126 18 Joan M Sáez , Ángel Medina, José V Gimeno-Adelantado, Rufino Mateo, Misericordia Jiménez (2004), “Comparison of different sample treatments for the analysis of ochratoxin A in must, wine and beer by liquid chromatography”, Journal of Chromatography A, 1029, pp 125–133 19 Eduardo Beltrán, María Ibáđez, Juan Vicente Sancho, Miguel Ángel Cortés, Vicent Yusà , Félix Hernández (2011), “Simultaneous determination of aflatoxin M, ochratoxin A, zearalenoneanda-zearalenol in milk by UHPLC–MS/MS”, Food Chemistry, 126, pp.737–744 20 Mario Vega, Katherine Muñoz, Carolina Sepúlveda, Mario Aranda, Victor Campos, Ricardo Villegas Orialis Villarroel (2009), “Solid-phase extraction and HPLC determination of Ochratoxin A in cereals products on Chilean market”, Food Control, 20, pp 631-634 21 Mohammad Hossein Mashhadizadeh Mitra Amoli-Diva, Kamyar Pourghazi (2013), “Magnetic Nanoparticles solid phase extraction for determination of ochratoxin A in cereals using high-performance liquid chromatography with fluorescence detection”, Journal Of Chromatography A, 1320, pp 17-25 N.A Al-Hazmi (2010), “Determination of Patulin and Ochratoxin A using HPLC in 22 apple juice samples in Saudi Arabia”, Saudi Journal of Biological Sciences, 17, pp 353-359 23 Natalia Arroyo-Manzanares, Laura Gámiz-Gracia, Ana M García-Campa (2012), “Determination of ochratoxin A in wines by capillary liquid chromatography with laser induced fluorescence detection using dispersive liquid– liquid microextraction”, Food Chemistry, 135, pp 368-372 24 L.C Huang, N Zheng, B.Q Zhen, F Wen, J.B Cheng, R.W Han, X.M Xu , S.L Li J.Q Wang (2013), “Simultaneous determination of aflatoxin M, ochratoxin A, zearalenoneanda-zearalenol in milk by UHPLC–MS/MS”, Food Chemistry, 146, pp 242-249 25 Lizhi Wang, Zhen Wang, Weiwei Gao, Juan Chen, Meihua Yang, Ying Kuang, Linfang Huang, Shilin Chen (2013), “Simultaneous determination of aflatoxin B and ochratoxin A in licorice roots and fritillary bulbs by solid-phase extraction coupled with high performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry”, Food Chemistry, 138, pp 1048-1054 R Ghali, K Hmaissia-khlifa, H Ghorbel, K Maaroufi A Hedili (2009), “HPLC 26 determination of ochratoxin A in high consumption Tunisian foods”, Food Control, 20, pp.716-720 R Vatinnoa, D Vuckovica, C.G Zamboninb, J Pawliszyna (2008), “Automated high- 27 throughput method using solid-phase microextraction–liquid chromatography–tandem mass spectrometry for the determination of ochratoxin A in human urine”, Journal of Chromatography A, 1201,pp 215–221 Vlastimil Dohnal, Vladimír Dvor, František Malír, Vladimír Ostry, Tomáš Roubal 28 (2013), “A comparison of ELISA and HPLC methods for determination of ochratoxin A in human blood serum in the Czech Republic, Food and Chemiscal Toxicology, 62, pp 427-431 Yuying Jiao*, Werner Blaas, Christian Riihl* and Rudolf Weber (1992), “Short 29 Communication identification of ochratoxin A in food samples by chemical derivatization and gas chromatography-mass spectrometry”, Journal of Chromatography, pp.364-367 30 Pedro Novoa, Géraud Moulasa, Duarte Miguel Franc¸ Prazeresb, Virginia Chua, Joao Pedro Conde (2013), “Detection of ochratoxin A in wine and beer by chemiluminescencebased ELISA in microfluidics with integrated photodiodes”, Sensors and Actuators B, pp.232240  ... định hàm lượng Ochratoxin thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng hai lần khối phổ (LC-MS/ MS) Mục tiêu thực đề tài nghiên cứu là: Xây dựng phương pháp xác định hàm lượng Ochratoxin thực phẩm bao gồm:... 9524:2012 Thực phẩm - Xác định hàm lượng ochratoxin A rượu vang bia - Phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC) có làm cột lực miễn nhiễm 10 TCVN 8426:2010 Cà phê nhân - Xác định ochratoxin A phương pháp. .. nhiễm ochratoxin thực phẩm, Việt Nam giới có nhiều phương pháp phân tích nghiên cứu ứng dụng Nhưng với đặc điểm ưu việt độ xác cao nên phương pháp phân tích sắc ký lỏng khối phổ coi phương pháp