GIỚI THIỆU 1.1 Giới thiệu Vi nấm là một trong những tác nhân gây bệnh ở động vật thủy sản và bệnh do vi nấm đã và đang gây thiệt hại cho nghề nuôi thủy sản ở nhiều quốc gia trên thế giới. Vi nấm bậc thấp với đa dạng thành phần loài gây bệnh và nhiễm ở các giai đoạn khác nhau trên động vật thủy sản, trong đó đặc biệt là Achlya và Saprolegnia là các giống vi nấm thường gây bệnh trên các loài cá nước ngọt với các sợi nấm phát triển nhanh và tạo thành búi màu trắng như bông gòn (Bruno and Woo, 1994; Yanong, 2003). Vi nấm nhiễm trên động vật thủy sản thông thường là bệnh mãn tính, tuy nhiên cũng gây thiệt hại kinh tế cho nghề nuôi thủy sản. Điển hình như nghiên cứu về các giai đoạn phát triển của cá chình (Anguilla Anguilla), cá hồi bạc (Oncorhynchus kisutch) nuôi ở Nhật Bản cho thấy tỉ lệ cá chết hằng năm do nhiễm vi nấm rất cao, khoảng 50% (Bruno and Woo, 1994; Hatai and Hoshiai, 1994). Tỉ lệ cá chết ở 5 loài cá hồi nuôi ở Nhật Bản lên đến 100% khi bị nhiễm vi nấm S. parasitica (Hussein and Hatai, 2002). Vi nấm Saprolegnia sp. gây cảm nhiễm trên cá nheo (Ictalurus punctatus) cho thấy 92% cá nheo bị bệnh có dấu hiệu tổn thương trên da và tỉ lệ chết lên đến 67% sau 21 ngày (Bly et al., 1992). Bên cạnh đó, vi nấm bậc cao bao gồm là Fusarium moniliforme và F. udum được phát hiện gây bệnh phổ biến trên một số loài cá nuôi nước ngọt ở Ấn Độ như cá chành dục (Channa punctatus), cá chốt giấy (Mystus tengra), cá leo (Wallago attu), cá trôi Ấn Độ (Labeo rohita), cá chạch bông (Mastaceamblus armatus), cá đòng đong (Puntius sophore) và cá ngạnh (Barbus rana) (Deepa et al., 2000). Ở Ai Cập, nghiên cứu đã phát hiện cá dĩa (Symphysodon) bị nhiễm vi nấm F. solani, F. oxysporum và F. moniliform với tỉ lệ lần lượt là 50; 33,3 và 16,7% (El-Ghany et al., 2014). Ở Tây Ban Nha, nhóm nghiên cứu của Cutuli et al. (2015) tìm thấy sự hiện diện của F. oxysporum ở vết thương dưới da cá rô phi (Oreochromis niloticus). Đặc biệt một số nghiên cứu gần đây đã phát hiện các vi nấm phức nhiễm trên động vật thủy sản như F. incarnatum-equiseti complex (FIESC) và F. solani species complex (FSSC) nhiễm trên trứng cá (Odontesthes bonariensis) hay F. oxysporum species complex (FOSC) nhiễm trên cơ cá vằn (Danio rerio) nuôi ở Hàn Quốc (Marino et al., 2016; Kulatunga et al., 2017).
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ ĐẶNG THỤY MAI THY NGHIÊN CỨU VI NẤM TRONG NI CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) VÀ CÁ LĨC (Channa striata) THÂM CANH LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Mã ngành 62620301 Cần Thơ, 2017 3.3 Vật liệu nghiên cứu 28 3.3.1 Môi trường nuôi cấy vi nấm, thuốc kháng sinh, 28 3.3.2 Dụng cụ thiết bị 28 3.4 Phương pháp nghiên cứu 29 3.4.1 Xác định thành phần giống lồi vi nấm mơi trường ao nuôi 30 3.4.1.1 Phương pháp thu mẫu 30 3.4.1.2 Phương pháp phân tích mẫu nước 30 3.4.1.3 Phương pháp định danh vi nấm 30 3.4.2 Xác định thành phần giống loài vi nấm nhiễm cá tra cá lóc 31 3.4.2.1 Phương pháp thu mẫu 31 3.4.2.2 Phương pháp phân lập vi nấm 33 3.4.3 Nghiên cứu đặc điểm bệnh học vi nấm gây bệnh cá tra cá lóc 33 3.4.3.1 Nguồn cá tra cá lóc khỏe sử dụng thí nghiệm cảm nhiễm 33 3.4.3.2 Phương pháp nuôi cấy sinh bào tử vi nấm 34 3.4.3.3 Thí nghiệm cảm nhiễm cá tra: 34 3.4.3.4 Thí nghiệm cảm nhiễm cá tra: 35 3.4.3.5 Thí nghiệm cảm nhiễm cá tra: 36 3.4.3.6 Thí nghiệm cảm nhiễm cá lóc: 37 3.4.3.7 Thí nghiệm cảm nhiễm cá lóc: 38 3.4.3.8 Thí nghiệm cảm nhiễm cá tra cá lóc: 39 3.4.4 Phương pháp định danh vi nấm 40 3.4.4.1 Phương pháp định danh truyền thống 40 3.4.4.2 Phương pháp sinh học phân tử định danh vi nấm 40 3.4.5 Phương pháp mô học 42 3.4.6 Nghiên cứu đặc điểm sinh học vi nấm gây bệnh cá tra cá lóc 42 3.4.6.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả phát triển vi nấm 42 3.4.6.2 Ảnh hưởng pH đến khả phát triển vi nấm 43 3.4.6.3 Ảnh hưởng độ mặn đến khả phát triển vi nấm 43 3.4.6.4 Khả sử dụng carbohydrat vi nấm 43 3.4.6.5 Khả sử dụng nitrite vi nấm 44 3.4.7 Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất thảo dược đến vi nấm điều kiện phòng thí nghiệm 44 3.4.8 Thí nghiệm sử dụng cỏ mực phòng bệnh vi nấm điều kiện phòng thí nghiệm 46 3.4.9 Phương pháp xử lý số liệu 47 viii CHƢƠNG IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 4.1 Vi nấm môi trường ao nuôi cá tra cá lóc 48 4.1.1 Thành phần vi nấm môi trường ao ni cá tra cá lóc 48 4.1.2 Đặc điểm hình thái vi nấm mơi trường ao nuôi 51 4.2 Thành phần vi nấm nhiễm cá tra cá lóc theo chu kỳ nuôi 57 4.3 Thành phần vi nấm nhiễm cá tra thời điểm cá bệnh 59 4.3.1 Thành phần vi nấm nhiễm cá tra giống 59 4.3.2 Thành phần vi nấm nhiễm cá tra bệnh giai đoạn nuôi thương phẩm 62 4.4 Đặc điểm bệnh học vi nấm gây bệnh cá tra 63 4.4.1 Khả gây bệnh giống vi nấm cá tra 63 4.4.2 Khả gây bệnh chủng Fusarium sp cá tra 65 4.4.3 Khả gây bệnh chủng Fusarium sp mật độ khác 67 4.4.4 Biến đổi mô học cá tra bệnh Fusarium incarnatum-equiseti species complex (FIESC) 69 4.4.5 Kết định danh vi nấm gây bệnh cá tra 72 4.4.5.1 Đặc điểm hình thái Fusarium incarnatum-equiseti complex (FIESC) gây bệnh cá tra 72 4.4.5.2 Kết định danh vi nấm phương pháp sinh học phân tử 73 4.5 Thành phần vi nấm nhiễm cá lóc bệnh 76 4.5.1 Dấu hiệu bệnh lý 76 4.5.2 Thành phần tỉ lệ vi nấm nhiễm cá lóc bệnh 77 4.6 Đặc điểm bệnh học vi nấm gây bệnh cá lóc 79 4.6.1 Khả gây bệnh giống vi nấm phân lập cá lóc 79 4.6.2 Khả gây bệnh Achlya bisexualis cá lóc 81 4.6.3 Khả gây bệnh Achlya bisexualis cá lóc cá tra 84 4.6.4 Biến đổi mơ học cá lóc bệnh vi nấm 86 4.6.5 Kết định danh nấm gây bệnh cá lóc 90 4.6.5.1 Đặc điểm hình thái Achlya gây bệnh cá lóc 90 4.6.5.2 Kết định danh vi nấm phương pháp sinh học phân tử 92 4.7 Đặc điểm sinh học vi nấm gây bệnh cá tra cá lóc 94 4.7.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển vi nấm 94 4.7.2 Ảnh hưởng pH đến phát triển vi nấm 96 4.7.3 Ảnh hưởng độ mặn đến phát triển vi nấm 98 4.7.4 Khả sử dụng carbohydrat vi nấm 99 4.7.5 Ảnh hưởng nitrite đến phát triển vi nấm 100 ix 4.8 Ảnh hưởng hóa chất đến phát triển Achlya bisexualis Fusarium incarnatum-equiseti complex (FIESC) 101 4.8.1 Bronopol 101 4.8.2 CuSO4 104 4.8.3 Iodine 107 4.9 Ảnh hưởng cỏ mực diệp hạ châu đến phát triển Achlya bisexualis Fusarium incarnatum-equiseti complex (FIESC) 111 4.10 Thử nghiệm bổ sung cỏ mực vào thức ăn cho cá tra cá lóc cảm nhiễm vi nấm 113 4.10.1 Kết cảm nhiễm vi nấm Fusarium incarnatum-equiseti complex cá tra cho ăn thức ăn bổ sung cỏ mực 113 4.10.2 Kết cảm nhiễm vi nấm Achlya bisexualis cá lóc cho ăn thức ăn bổ sung cỏ mực 114 CHƢƠNG V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 117 5.1 Kết luận 117 5.2 Đề xuất 118 TÀI LIỆU THAM KHẢO 119 PHỤ LỤC A 138 PHỤ LỤC B 141 PHỤ LỤC C 144 PHỤ LỤC D 148 PHỤ LỤC E 153 PHỤ LỤC F 158 PHỤ LỤC G 176 x DANH SÁCH BẢNG Số bảng 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 3.13 3.14 3.15 3.16 3.17 3.18 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 Tên bảng Số mẫu cá tra thu định kỳ ao nuôi thâm canh Số mẫu cá tra bệnh thu địa điểm Số mẫu cá lóc thu định kỳ ao ni thâm canh Số mẫu cá lóc bệnh thu địa điểm Các chủng vi nấm thí nghiệm cảm nhiễm Nghiệm thức thí nghiệm cảm nhiễm giống vi nấm cá tra Các chủng Fusarium sp thí nghiệm cảm nhiễm Nghiệm thức thí nghiệm cảm nhiễm Fusarium sp cá tra Nghiệm thức thí nghiệm cảm nhiễm Fusarium sp mật độ bào tử khác cá tra Các chủng vi nấm thí nghiệm cảm nhiễm Nghiệm thức thí nghiệm cảm nhiễm giống vi nấm cá lóc Các chủng Achlya bisexualis thí nghiệm cảm nhiễm Các nghiệm thức thí nghiệm cảm nhiễm Achlya bisexualis cá lóc Thí nghiệm cảm nhiễm Achlya bisexualis cá lóc cá tra Số lượng mẫu cá thu phân tích mơ học Hóa chất nồng độ sử dụng nghiên cứu Nồng độ thảo dược sử dụng thí nghiệm Nghiệm thức thí nghiệm sử dụng cỏ mực cá tra cá lóc Thành phần vi nấm môi trường ao nuôi cá tra cá lóc địa điểm thu mẫu Thành phần số chủng vi nấm ao nuôi cá tra cá lóc theo chu kỳ tháng ni Thành phần số chủng vi nấm nhiễm cá tra cá lóc theo chu kỳ tháng ni Thành phần vi nấm nhiễm quan cá tra cá lóc Số lượng chủng vi nấm phân lập cá tra bệnh Tỉ lệ nhiễm Fusarium incarnatum-equiseti complex (FIESC) bóng cá tra cảm nhiễm với mật độ bào tử khác Kết mối tương quan trình tự ITS rDNA chủng Fusarium incarnatum-equiseti species complex (FIESC) với chủng FUSARIUM-ID Thành phần vi nấm cá lóc địa điểm thu mẫu Tỉ lệ nhiễm vi nấm quan cá lóc xi Trang 31 32 32 33 34 35 35 36 37 37 38 38 39 40 42 44 45 47 48 50 57 58 63 68 74 77 78 Số bảng 4.10 4.11 4.12 4.13 4.14 4.15 4.16 4.17 4.18 4.19 4.20 4.21 4.22 4.23 Tên bảng Biến đổi mô học ghi nhận tiêu mẫu mơ Kết mối tương quan trình tự ITS rDNA vi nấm Achlya với chủng Genbank Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển vi nấm Ảnh hưởng pH đến phát triển vi nấm Ảnh hưởng độ mặn đến phát triển vi nấm Khả sử dụng carbohydrat vi nấm Ảnh hưởng nitrite đến phát triển vi nấm Khả ức chế bronopol A.bisexualis Fusarium incarnatum-equiseti complex (FIESC) thời gian thí nghiệm Khả ức chế CuSO4 A.bisexualis Fusarium incarnatum-equiseti complex (FIESC) mức thời gian Khả ức chế iodine A.bisexualis Fusarium incarnatum-equiseti complex (FIESC) mức thời gian Ảnh hưởng nồng độ cỏ mực diệp hạ châu đến sợi nấm Ảnh hưởng cỏ mực diệp hạ châu đến tỉ lệ nẩy mầm bào tử vi nấm Tỉ lệ chết tỉ lệ nhiễm vi nấm cá tra cảm nhiễm Fusarium incarnatum-equiseti complex Tỉ lệ chết tỉ lệ nhiễm vi nấm cá lóc cảm nhiễm Achlya bisexualis xii Trang 86 92 94 97 98 99 101 103 106 108 111 112 114 114 DANH SÁCH HÌNH Số Tên hình Trang hình 2.1 Cấu trúc vi nấm Đặc điểm hình thái túi động bào tử vi nấm thuộc lớp 2.2 13 Oomycotae 2.3 Vòng đời vi nấm Saprolegnia 14 2.4 Hình thái bào tử vi nấm Fusarium 18 3.1 Sơ đồ nghiên cứu cá bệnh vi nấm 29 4.1 49 Tỉ lệ % vi nấm môi trường nước ao nuôi cá tra cá lóc thâm canh 4.2 Đặc điểm hình thái vi nấm Achlya Saprolegnia 52 4.3 53 Đặc điểm hình thái vi nấm Aspergillus Fusarium 4.4 Đặc điểm hình thái vi nấm Mucor Rhizopus 54 4.5 Đặc điểm hình thái vi nấm Geotrichum, Acremonium Trichoderma 56 4.6 Cá tra giống (Pangasianodon hypophthalmus) bị nhiễm vi nấm 60 4.7 Tỉ lệ % giống vi nấm nhiễm cá tra giống 60 4.8 Tỉ lệ % vi nấm nhiễm quan cá tra giống 61 4.9 Cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) bị bệnh trương bóng 62 4.10 Tỉ lệ chết tích lũy (%)của cá tra cảm nhiễm giống vi nấm 64 4.11 Tỉ lệ chết tích lũy (%) cá tra nhiễm vi nấm Fusarium sp 65 4.12 Cá tra cảm nhiễm vi nấm Fusarium sp 66 Tỉ lệ chết tích lũy (%) cá tra nhiễm Fusarium sp mật độ bào tử 4.13 67 khác 4.14 Mơ bóng cá tra bệnh thu ao nuôi thâm canh (H&E) 69 4.15 Mơ bóng cá tra cảm nhiễm Fusarium incarnatum-equiseti complex 71 4.16 Đặc điểm hình thái vi nấm Fusarium incarnatum-equiseti complex 73 Cây phát sinh loài dựa trình tự ITS rDNA chủng vi nấm 4.17 75 Fusarium incarnatum-equiseti species complex (FIESC) 4.18 Cá lóc (Channa striata) bệnh vi nấm 76 4.19 Tỉ lệ chết tích lũy (%)của cá lóc cảm nhiễm giống vi nấm 79 Tỉ lệ chết tích lũy (%) cá lóc cảm nhiễm Achlya bisexualis mật độ 4.20 81 106 bào tử/ml Tỉ lệ chết tích lũy (%) cá lóc cảm nhiễm Achlya bisexualis mật độ 4.21 82 104 bào tử/ml 4.22 Cá lóc cảm nhiễm vi nấm Achlya bisexualis 83 4.23 Tỉ lệ chết tích lũy (%) cá lóc cá tra cảm nhiễm Achlya bisexualis 85 4.24 Cá cảm nhiễm vi nấm Achlya bisexualis 85 xiii Số Tên hình Trang hình 4.25 Biến đổi mơ da cá lóc nhiễm vi nấm (H&E) 87 4.26 Biến đổi mơ cá lóc nhiễm vi nấm (200x) 89 4.27 Đặc điểm hình thái vi nấm Achlya bisexualis 91 Cây phát sinh lồi dựa trình tự ITS rDNA vi nấm Achlya 4.28 93 bisexualis 4.29 Ảnh hưởng nhiệt độ đến tỉ lệ nẩy mầm (%) bào tử vi nấm 95 4.30 Ảnh hưởng bronopol đến phát triển sợi nấm 102 4.31 Ảnh hưởng bronopol đến phát triển bào tử 103 4.32 Ảnh hưởng CuSO4 đến phát triển sợi nấm 105 4.33 Ảnh hưởng CuSO4 đến phát triển bào tử 105 4.34 Ảnh hưởng iodine đến phát triển sợi nấm 107 4.35 Ảnh hưởng iodine đến phát triển bào tử 108 xiv DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BioEdit Biological sequence alignment editor BP Bronopol ĐBSCL Đồng sông Cửu Long DNA Deoxyribose Nucleic Acid dNTP Deoxyribonucleoside Triphosphate FIESC Fusarium incarnatum-equiseti complex GY Glucose Yeast GYA Glucose Yeast Agar ITS Internal Transcribed Space MEGA Molecular Evolutionary Genetics Analysis MIC Nồng độ ức chế tối thiểu MT 2-methyl-4isothiazolin-3-one NCBI National of Centre Biotechnology Information NT Nghiệm thức NTĐC Nghiệm thức đối chứng PCR Polymerase Chain Reaction PDA Potato Dextrose Agar rDNA Ribosomal Deoxyribose Nucleic Acid RNA Ribonucleic Acid SA Sabouraud Agar Taq Thermus aquaticus TE Tris EDTA xv CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Giới thiệu Vi nấm tác nhân gây bệnh động vật thủy sản bệnh vi nấm gây thiệt hại cho nghề nuôi thủy sản nhiều quốc gia giới Vi nấm bậc thấp với đa dạng thành phần loài gây bệnh nhiễm giai đoạn khác động vật thủy sản, đặc biệt Achlya Saprolegnia giống vi nấm thường gây bệnh loài cá nước với sợi nấm phát triển nhanh tạo thành búi màu trắng bơng gòn (Bruno and Woo, 1994; Yanong, 2003) Vi nấm nhiễm động vật thủy sản thơng thường bệnh mãn tính, nhiên gây thiệt hại kinh tế cho nghề nuôi thủy sản Điển nghiên cứu giai đoạn phát triển cá chình (Anguilla Anguilla), cá hồi bạc (Oncorhynchus kisutch) nuôi Nhật Bản cho thấy tỉ lệ cá chết năm nhiễm vi nấm cao, khoảng 50% (Bruno and Woo, 1994; Hatai and Hoshiai, 1994) Tỉ lệ cá chết lồi cá hồi ni Nhật Bản lên đến 100% bị nhiễm vi nấm S parasitica (Hussein and Hatai, 2002) Vi nấm Saprolegnia sp gây cảm nhiễm cá nheo (Ictalurus punctatus) cho thấy 92% cá nheo bị bệnh có dấu hiệu tổn thương da tỉ lệ chết lên đến 67% sau 21 ngày (Bly et al., 1992) Bên cạnh đó, vi nấm bậc cao bao gồm Fusarium moniliforme F udum phát gây bệnh phổ biến số lồi cá ni nước Ấn Độ cá chành dục (Channa punctatus), cá chốt giấy (Mystus tengra), cá leo (Wallago attu), cá trôi Ấn Độ (Labeo rohita), cá chạch bơng (Mastaceamblus armatus), cá đòng đong (Puntius sophore) cá ngạnh (Barbus rana) (Deepa et al., 2000) Ở Ai Cập, nghiên cứu phát cá dĩa (Symphysodon) bị nhiễm vi nấm F solani, F oxysporum F moniliform với tỉ lệ 50; 33,3 16,7% (El-Ghany et al., 2014) Ở Tây Ban Nha, nhóm nghiên cứu Cutuli et al (2015) tìm thấy diện F oxysporum vết thương da cá rô phi (Oreochromis niloticus) Đặc biệt số nghiên cứu gần phát vi nấm phức nhiễm động vật thủy sản F incarnatum-equiseti complex (FIESC) F solani species complex (FSSC) nhiễm trứng cá (Odontesthes bonariensis) hay F oxysporum species complex (FOSC) nhiễm cá vằn (Danio rerio) nuôi Hàn Quốc (Marino et al., 2016; Kulatunga et al., 2017) KẾT QUẢ KIỂM ĐỊNH THỐNG KÊ ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN SỢI NẤM Achlya bisexualis ĐT0105 Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 12819.82 4273.272 961.7447 Within Groups 71.092 16 4.44325 Total 12890.91 19 P-value F crit 2.8496E-18 3.238872 ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN BÀO TỬ Achlya bisexualis AG0205 Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 2171476 723825.3 172.5962 Within Groups 67100 16 4193.75 Total 2238576 19 173 P-value F crit 2.1463E-12 3.238872 KẾT QUẢ KIỂM ĐỊNH THỐNG KÊ ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN BÀO TỬ Achlya bisexualis Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total CT0109 SS 1561911 63949.6 1625861 df 16 19 MS 520637.1 3996.85 F 130.2619 ĐT0332 Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 1890007 630002.2 106.4831 Within Groups 94663.2 16 5916.45 Total 1984670 19 174 P-value 1.8787E-11 F crit 3.238872 P-value F crit 8.7515E-11 3.238872 KẾT QUẢ KIỂM ĐỊNH THỐNG KÊ ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN BÀO TỬ Achlya bisexualis CT0403 Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 1868223 622740.9 275.1898 Within Groups 36207.2 16 2262.95 Total 1904430 19 ĐT0105 Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 2115469 705156.5 168.2941 Within Groups 67040.4 16 4190.025 Total 2182510 19 175 P-value F crit 5.6505E-14 3.238872 P-value F crit 2.6096E-12 3.238872 PHỤ LỤC G - THÍ NGHIỆM BRONOPOL VÀ Fusarium incarnatum-equiseti species complex (FIESC) Nồng độ (ppm) 50 100 200 300 400 SỢI NẤM FVN1301 71 73 68 67 69 38 45 42 39 35 15 16 16 17 19 12 9 11 0 0 0 0 0 BÀO TỬ F1401 F1402 F1503 F1509 76 76 77 71 72 45 36 45 41 39 16 21 17 19 16 5 10 0 0 0 0 0 74 75 72 68 70 51 46 41 37 46 18 17 15 21 21 16 11 0 0 0 0 0 77 74 78 70 70 50 49 45 42 56 18 29 22 22 25 11 5 12 0 0 0 0 0 176 78 76 81 73 70 43 46 34 36 41 19 20 18 20 20 0 0 0 0 0 FVN1301 1340 1160 1020 1280 1360 795 706 807 785 692 420 425 427 422 429 150 161 163 254 168 53 55 37 60 63 0 0 F1401 F1402 F1503 F1509 1100 1230 1250 1190 1260 794 797 799 696 695 488 392 392 484 387 146 155 160 136 146 14 16 58 20 21 0 0 1250 1130 1060 1180 1200 694 703 704 683 801 457 460 562 562 470 237 253 255 226 241 21 31 35 43 54 0 0 1350 1160 1200 1120 1110 946 855 760 836 746 595 606 607 585 592 320 225 227 322 229 70 58 51 56 56 0 0 1220 1250 1140 1130 1240 843 746 834 736 841 519 420 418 520 420 257 260 262 262 270 31 32 25 37 37 0 0 PHỤ LỤC G - KẾT QUẢ KIỂM ĐỊNH THỐNG KÊ THÍ NGHIỆM BRONOPOL VÀ VI NẤM Fusarium incarnatum-equiseti complex Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Anova: Single Factor ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS df 62066.03 1511.68 96 63577.71 99 SS 21008598 507062.1 21515660 MS F P-value F crit 20688.68 1313.84 8.8E-78 2.69939 15.74667 df MS 5252150 120 4225.517 124 177 F 1242.96 P-value F crit 1.3E-96 2.44724 PHỤ LỤC G - THÍ NGHIỆM BRONOPOL VÀ Achlya bisexualis Nồng độ (ppm) 50 100 200 300 400 SỢI NẤM BÀO TỬ AG0205 ĐT0232 ĐT0105 CT0109 CT0403 AG0205 ĐT0232 ĐT0105 CT0109 CT0403 71 73 68 67 69 32 31 32 39 33 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 76 76 77 71 72 40 42 45 36 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 74 75 72 68 70 31 33 33 37 39 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 77 74 78 70 70 41 39 35 35 40 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 78 76 81 73 70 33 36 34 36 41 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 178 1340 1160 1020 1280 1360 696 606 570 585 592 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1100 1230 1250 1190 1260 794 732 711 682 672 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1250 1130 1060 1180 1200 590 603 623 651 679 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1350 1160 1200 1120 1110 646 655 634 636 611 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1220 1250 1140 1130 1240 644 654 638 636 655 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 PHỤ LỤC G - KẾT QUẢ KIỂM ĐỊNH THỐNG KÊ THÍ NGHIỆM BRONOPOL VÀ VI NẤM Achlya bisexualis t-Test: Two-Sample Assuming Equal Variances mg/L Mean Variance Observations Pooled Variance Hypothesized Mean Difference df t Stat P(T