ĐỀ CƯƠNG ÔN THI KẾT THÚC HỌC PHẦN MÔN VSV THÚ Y 2 2015

ĐỀ CƢƠNG ƠN THI KẾT THÚC HỌC PHẦN Mơn Học : Vi sinh vật thú y Kỳ - Năm 20152016 A: CÂU HỎI ƠN Câu 24, Đặc tính sinh học virus dịch tả lợn? Câu 25, Chẩn đoán virus học bệnh dịch tả lợn? Câu 26, Chẩn đoán huyết học bệnh dịch tả lợn?( phản ứng trung hòa thỏ,phản ứng kết tủa khuếch tán thạch)? Câu 27, Đặc tính sinh học virus lở mồm long móng? Câu 28, Đặc tính sinh học virus dại? Câu 29, Chẩn đoán bệnh dại phản ứng miễn dịch huỳnh quang Câu 30.Đặc tính sinh học virus Newcastle? Câu 31, Trình bày phƣơng pháp làm phản ứng HA( nguyên lý, mục đích cách tiến hành) Câu 32, Trình bày phƣơng pháp làm phản ứng HI để giám định virus Newcastle vàvirus cúm gia cầm? Câu 33 Chuẩn đoán viruts học bệnh Newcastle Câu 34: Dặc tính sinh học viruts gumboro Câu 35: Chuẩn đốn viruts học bệnh gumboro Câu 36:đặc tính sinh học vr cúm gia cầm( Avian Ingluenza Virus) Câu 37: đặc tính sinh học vr dịch tả vịt ( Pestis anatum virus) Câu 38: chẩn đoán virus học dịch tả vịt: Câu 39: đặc tính sinh học vr viêm gan vịt.(Duck Hepatitis Virus) Câu 40:Chẩn đoán virut học bệnh viêm gan vịt Câu 41 : Đặc tính sinh học VR PRRS Câu 42: Kể tên phƣơng pháp chấn đoán bệnh: Newcastle, dại, dịch tả lợn, viêm gan vịt, cúm gia cầm, Gumboro, Đ óng dấu lợn Câu 24, Đặc tính sinh học virus dịch tả lợn? Trả lời : viruts dịch tả lơn : Pestis suum visrus a Hình thái cấu trúc: B: Trả lời -Là thành viên họ Togavirideae, thuộc giống Pestisvirus - ARN dạng sợi ( sợi đơn) -có bọc ngồi lipoprotein có nhứng diềm tua dài - 8mm - có hình cầu, capxit đối xứng khối, có đường kính 40-50nm , đường kính nucleocapsit khoảng 29nm, lớp vỏ bao bọc sợi ARN virus, b Đặc tính ni cấy - Có thể ni cấy VR tổ chức sống lơn thủy xương, thận, dịch hồn, thai lợn, óc -Trên mơi trường tế bào + Tế bào thận lơn thường đc sử dụng VR nhân lên rât tốt VR nhân lên NSC khơng gây bệnh tích tế bào, VR lan truyền Tế bào qua cầu nối NSC tồn lâu tế bào c Động lực kháng nguyên - VR dịch tả lợn lạo VR nhất, Các chủng VR dịch tả lợn giống hoàn toàn cấu trúc kháng nghuyên có động lực khác -Trong tự nhiên chủng có động lực cao thương fgaay bệnh cấp tính , tỉ lệ chết cao - Chủng có động lực trung bình or thấp gây bệnh thể mán tính - dựa Vào độc lực virus dịch tả lợn, tạm chia thành nhóm: +Nhóm cường độc: gồm chủng cường độc Alfort, chủng C, chủng Thiverval +Nhóm động lực vừa: gồm chủng có độc lực thấp phân lập từ lợn bị bệnh mạn tính - Có ý kiến cho rằng, độc lực Viruts DTL có đặc tính bền vững, tăng lên sau hay nhiều giai đoạn lợn *Vì : Nếu tiên truyền viruts liên tiếp 150 đời qua thỏ, VR độc với thỏ không độc với lợn, gọi giống viruts nhược độc DTL qua thỏ, dung để ché vacxin Cấu trúc kháng nguyên cấu trúc ARN virus dịch tả lợn giống với virus gây bệnh tiêu chảy bò virus gây bệnh Border cừu, cần lưu ý phân biệt chẩn đoán huyết học d Sức đề kháng: -Dưới tác nhân vật lý, khả vô hoạt virus phụ thuộc phần vào chất chứa trung gian -Trong môi trường tế bào, vius bị hoạt tính sau 10’ 60*C, máu nhiếm Viruts khử Fibril 68*C 30’ Đun 100*C chết -Bền vững khoảng ph từ - 10, mẫn cảm với tia cực tím - Các dung mơi hịa tan lipit ete, clorofoc( Chloroform) dezoxycolat ( Dẽoycholat) vô hoạt virus nhanh (chết ngay) -Các chất sát trùng như: xút 2% diệt virus nước tiểu sau 15 phút, nước vôi 10% axit phenic giết chết virus sau 15 phút -Trong chuồng phân, víu bị vơ hoạt sau vài ngày (2 ngày) -Trong thịt lợn bệnh & sản phẩm nó, virus trì hoạt tính vài tháng, nguồn lây nhiễm quan trọng e Tính gây bệnh: *Trong tự nhiên: có lồi lơn mắc bệnh DTL -Vius dịch tả lợn gây bệnh cho lợn: lợn nhà, lợn rừng lứa tuổi, lợn bú hay cai sữa mắc nhiều chết nhiều, lợn mắc truyền bệnh cho lợn -Các loài vật khác người không mắc bệnh dịch tả lợn *Trong phịng thí nghiệm: -Lợn cảm thụ với bệnh -Gây bệnh cho lợn con, bệnh xảy giống tự nhiên triệuchứng bệnh tích -Tiêm vius dịch tả lợn cho thỏ & chuột lang gây bệnh thể ẩn -Người ta dùng Vius dịch tả lợn tiêm truyền liên tục cho thỏ trongnhiều đời Độc thỏ tăng lên, độc lực lợn giảmxuống, đến 150 đời giống virus hồn tồn khơng độclực lợn giữ đặc tính kháng nguyên.Đây giống virus nhược độc dịch tả lợn qua thỏ dung để chế vacxin Câu 25, Chẩn đoán virus học bệnh dịch tả lợn? Lấy bệnh phẩm: Bệnh phẩm máu lách, hạch lâm ba, tủy xương gia súc nghi mắcbệnh Kiếm tra kính hiến vi -Lấy bệnh phẩm gia súc làm tiêu bản, nhuộm Gram kiểm tra kínhhiển vi Nếu: +Khơng thấy vi khuẩn nghi mắc bệnh dịch tả lợn túysau chẩn đốn lâm sang xác định bệnh +Nếu có vi khuẩn tụ huyết trùng, phó thương hàn lợn có thểdịch tả lợn ghép với bệnh Tiêm động vật thí nghiệm -Dùng lợn để gây bệnh: lợn từ 3-4 tháng tuổi, lợn khỏe mạnh,không nằm ổ dịch tả lợn, chưa tiêm phòng vacxin dịch tả lợn -Dùng bệnh phẩm 1ml máu 0.5 g lách gia súc nghi mắcbệnh pha thành huyễn dịch tiêm vào da cho lợn Nếu bệnh phẩm có vuruts sau tiêm ngày : lơn trongbệnh phẩm có vius dịch tả lợn a ngày sau tiêm, lợn l ăn,sốt cao 41*C-42*C, giữ vững 4-5 ngày liền, lơn bỏ ăn, táo, phân rắn,có tượng viêm kết mạc mắt,có dử,nước mắt có nhờn chảy Sau tuần lễ, vật tháo,phân lẫn máu có mùi thối đặc biệt Nếu kéo dài thấytriệu chứng thần kinh: ( liệt chân sau) Cuối nhiệt độ hạthấp xuống 35-360C, vật mệt lả & chết - Mổ khám: +Thấy lợn có bệnh tích sau:Niêm mạc miệng, lưỡi, lợi tụ máu, loét +Dạ dày, ruột tụ máu, thấy rõ van hồi manh tràng, ruộtgià , nàn lâm ba lt hình cúc áo có vịng trịn đồng tâm +Lách có tượng nhồi huyết, xuất huyết quanh rìa, láchkhơng sưng sưng +Thận xuất huyết thành chấm nhỏ mặt, bể thận ứmáu có cục máu +Trên da đùi, bụng có chấm xuất huyết đầuđinh ghim, hạt vừng, hạt đỗ *Vậy : Kết luận bệnh phẩm có VR DTL Phƣơng pháp làm tăng cƣờng độc lực virus Newcastle: -Dung mơi trường tế bào dịch hồn lợn lớp nuôi cấy virus dịch tả lợn,sau ngày cấy virus Newcastle thấy virus Newcastle nhân lên mạnh mẽ vàgây bệnh tích tế bào -Nếu mơi trường tế bào dịch hồn lợn cấy virus Newcastle viruskhơng gây bệnh tích tế bào Điều chứng tỏ virus dịch tả lợn đãlàm tăng độc lực virus Newcastle Câu 26, Chẩn đoán huyết học bệnh dịch tả lợn?( phản ứng trung hòa thỏ,phản ứng kết tủa khuếch tán thạch)? Thí nghiệm trung hịa thỏ: a Nguyên lý -Virus dịch tả lợn cường độc & Virus dịch tả lợn nhược độc có tính gây bệnh khác nhaucho thỏ lợn, lại có tính kháng nguyên giống Có thể dùng Virus dịch tả lợncường độc tiêm cho thỏ, gây miễn dịch, sau chứng minh tính miễn dịch thỏ đối vớiVirus dịch tả lợn cách tiêm virus nhược độc dịch tả lợn, VR bị kích thích trung hịa có máu thỏ trung hòa nên k gây bện cho thỏ đc b chuẩn bị -bệnh phẩm lách lợn nghi mắc bệnh nghiền với nước sinh lý thành huyễn dịch1/10 & 1/100 , xử lý kháng sinh, diệt tạp khuẩn - thỏ khỏ mạnh chưa tiếp xuacs với viruts DTL c Tiến hành phản ứng - Thỏ số tiêm 1ml huyễn dịch 1/10 - Thỏ số tiêm 1ml huyễn dịch 1/100 *Sau 5-10 ngày( tb ngày), dung giống virus nhược độc dịch tả lợn pha thành huyễn dịch 1/10 & 1/100 tiêm vào bắp thịt thỏ - Thỏ số tiêm 1ml huyễn dịch 1/10 - Thỏ số tiêm 1ml huyễn dịch 1/100 *Kết :Hai thỏ thí nghiệm khơng có phản ứng sốt lấy máu thỏ đem tiêm cho thỏ khỏe mạnh khác, hai thỏ khơng sốt, điều chứng tỏ virus nhược độc dịch tả lợn bị kháng thể dịch tả lợn trung hịa Kháng thể có bệnh phẩm có virus dịch tả lợn, kích thích thể thỏ sinh Chứng tỏ bệnh phẩm có virus dịch tả lợn *Trong thỏ làm đối chứng: lấy máu, lách lợn khỏe tiêm cho thỏ, sau 5-10 ngày tiêm virus nhược độc dịch tả lợn cho thỏ, thấy thỏ có phản ứng sốt thỏ chưa miễn dịch với virus dịch tả lợn Phản ứng khuếch tán thạch: *Nguyên lý : Trong môi trường Gel, KN KT cách nahu khoảng thạch, chúng khuyeechs tán phía gặp Nếu KN KT tương ứng chúng kết hợp với tạo thành đường tủa quan sát mắt thường or nhuộm màu để thấy rõ a Chuẩn bị: -Kháng nguyên nghi: bệnh phẩm lợn nghi mắc bệnh nghiền với nước sinh lý có phathem 1-2% axit phenic, lọc qua gạc ly tâm lấy nước -Kháng nguyên dương: chế tạo trên, từ phủ tạng lách, hạch lợn tiêmvirus dịch tả lợn cừng độc -Kháng nguyên âm: chế từ hạch, lách lợn khỏe -Kháng thể: huyết dịch tả lợn chế từ lợn thỏ phương pháp gây tốimiễn dịch b Phƣơng pháp tiến hành: - Đun chảy thạch 1,5% nước muối sinh lý - Đổ thạch phiến kính, lượng thạch cần dung 0.12 ml/cm2 , để đông thạch - Đục lỗ theo sơ đồ A, đường kính lỗ 3-4mm Khoảng cách trung tâm củacác lỗ từ 5-6mm - Thể tích thành phần phản ứng 0.02ml, cho vào theo sơ đồ A - Sau cho thành phần phản ứng vào lỗ, đặt phiến kính vào hộp ẩm (đĩa Petri với mẫu bong tẩm nước), cho vào tủ ấm 370C 12-24 *Đọc kết quả: Phản ứng dương tính: kháng thể dịch tả lợn với kháng nguyên nghixuất đường kết tủa trắng -Phản ứng âm tính: kháng thể dịch tả lợn với kháng ngun nghikhơng có đường kết tủa Câu 27, Đặc tính sinh học virus lở mồm long móng? I Hình thái phân loại: - Virus LMLM loại virus nhỏ nhất, thuộc họ Picornavirideae, virus chứa nhân ARN gồm 800 base, phân tử lượng 8,6kilodalton, số lắng 140s -Kíchthước từ 10-20 nm, cấu trúc khối, có dạng hình cầu, bề mặt nhẵn -Capxit viruts có 60 capsome, cấu tạo loại pr VP1, VP2, VP3, VP4 Trong VP1 định tính KN tính độc VR -Virus LMLM có typ: typ O, A, C, Asia, SAT1, SAT2, SAT3 -Các typ virus LMLM gâynhững triệu chứng lâm sàng giống nhau, không gây miễn dịch chéo cho -O, A, C typs gây bệnh phổ biến giới việt nam phát typ O, A Asia typ thương fgawpj typ O -Các typ LMLM lại chia fnhieeuf biến chủng Viruts LMLM gây ổ dịch rộng lớn, có tính chất quốc gia châu lục ĐV cảm thụ mắc gần 100% Bện có mawth hầu hết giới II Đặc tính ni cấy: - Virus LMLM virus hướng thượng bì, thường ni cấy virus tổ chức da thai lợn, thai bò sống - Nếu ni cấy Virus LMLM động vật thí nghiệm thỏ, chuột lang, chuột nhắttrưởng thành virus hay bị biến đổi thường đặc tính gây bệnh - Cịn ni cấy màng niệu nang phơi trứng, có có khơng - Phương pháp nuôi cấy tốt nuôi Virus LMLM tổ chức thượng bì lưỡi bị trưởngthành, phương pháp cho kết tốt sau nhiều lần tiếp đời, độc lực virus giữđược với bò động vật thí nghiệm - Ngồi ni cấy Virus LMLM môi trường tế bào tổ chức, tốt tế bàolấy từ tuyến yên bò lợn, tế bào thận bê thận cừu non dịng tếbào có độ nhạy tương đương, tế bào thận chuột Hamster gọi tắt tế bào BHK( baby hamster kidney) Sau cấy Virus LMLM vào môi trường tế bào để tủ ấm 370C 24, 48, 72 virus làm hủy hoại tế bào nuôi III Sức đề kháng: -Virus LMLM có sức đề kháng cao với ngoại cảnh, với ánh sánh mặt trời chiếu -trên đồng cỏ virus sống tháng mùa đông, ngày mùa hè, lơng gia súcvirus cịn hoạt lực sau tuần lễ, đất ẩm virus sống hàng năm.Với sức nóng virus dễ bị tiêu diệt, từ 30-370C virus sống 4-9 ngày, 500C virusnhanh chóng bị bất hoạt, 700C virus chết sau 5-10 phút.Nhiệt độ lạnh bảo tồn virus sống lâu -Trong phân ủ thành đống, lớp sâu 15 cm virus bị diệt sau ngày, sâu 50 cmbị diệt sau giờ, cỏ khơ virus sống từ 8-15 tuần với chất sát trùng nhưcrezon 3%, sau 6h virus hoạt lực, clorofoc 1% sau 20 ngày virus độc lực, tốtnhất dùng chất sát trùng mạnh NaOH 1% diệt virus 5-10 phút, focmon 2%diệt virus 6h IV Tính gây bệnh: -*Trong tự nhiên: Virus gây bệnh chủ yếu cho trâu, bò, dê, cừu, lợn động vật hoang dã bò rừng, trâu rừng, lợn rừng, lợn lịi, lạc đà, sơn dương - Lồi ăn thịt người mắc thường mắc thể nhẹ - Lồi động vật móng ngựa, lừa, la; gia cầm, chim không mắc bệnh -Đường xâm nhập chủ yếu đương tiêu hóa, xâm nhập qua vào thể qua vết thương, niêm mạc hô hấp sinh dục cai nhiêm bị xẩy thai -ở ng thường sốt cao, có mụn nhỏ mọc lowijn niêm mạc miệng, mụn nước mọc ngón tay, bàn tay, đùi, chân, vú, mặt -Bệnh léo dài 10 - 20 ngày nặng có theer nơn mửa, ỉa chạy - Trong vùng dịch LMLM trâu bò người ta thấy nhím chuột hươu nai, hoẵng bị chếtnhiều *Trong phịng thí nghiệm :chuột lang, chuột nhắt trắng, chuột đồng, chuột Hamster dễ cảm nhiễm, khía da bàn chân chuột chà xát bệnh phẩm có virus lên sau 12-24h chỗ chà xát có nơi mụn nhỏ, màu đỏ, có thủy thũng, đau chỗ khía, sau 2-3 ngày nhiễm trùng tồn than, có mụn mồm, lưỡi, lợi - Bê đẻ chưa bú sữa mẹ tiêm virus LMLM chết sau 36-48h Câu 28, Đặc tính sinh học virus dại? Hình thái cấu trúc, phân loại: a hình thái cấu trúc -Virus dại thuộc học Rhabdovirideae, nhóm Rhadbovirus, ARN virus -Có hình trụ, đầu trịn, đầu dẹt giống hình viên đạn -Kích thước trung bình virion có chiều dài từ 175 - 180nm, đường kính 70 - 80nm Kích thước thay đổi tùy theo chủng gốc -Nucleocapxit viruts có hình đối xứng xoắn, có đường kính đường xoẵn ốc từ 15 - 18 nm trải chiều dài khoảng 4,2 chiều rơng thay đổi từ 20 - 65 ăng grong - Lõi sợi ARN cuộn lại theo hình xoẵn có đôi cấu trúc pr bám vào sợi ARN Virion có vỏ kép bọc ngồi áp xát bề mặt Nucleocapxit *thể negri - Là dấu hiệu bệnh lý đặc trưng bệnh dại -Là hạt nhỏ hình trịn, hình trứng , hình bầu dục, có kích thước 0,5 - 30 nm Định vị bào tương nơ ron thần kinh, chủ yếu sừng Anmon tế bào tiểu não -Nhuộm tiểu thể phương pháp nhuộm Giemsa, chúng bắt mầu đỏ tươi Thể negri đc tìm thấy 80% trường hợp dại b phân loại - Viruts dại thuộc họ Rhabdovirideae, gồm 200 loài gây bệnh cho lồi động vật có xương sống khơng xương sống -Loài gây bệnh chon g ĐV máu nóng đc chia làm nhóm “ lyssavirus Vesiculovirus + lyssavirus gồm khaongr 80 laoif khác Và có loại serotype : -VR dại gây bệnh tự nhiên gọi VR dại đường phố ( street viruts) chủng cực độc gây bệnh cao cho động vật với thể : Dại điên cuồn dại bại liệt Đặc tính ni cấy a Trên phơi gà -VR thích ứng đc sau nhiều lần nuôi cấy phôi gà -Dùng phôi - ngày tuổi tiêm vào tú long đỏhoặc phôi 13 ngày tuooirtieem vào màng nhung niệu -VR nhân lên mô thần kinh mô khác phôi, hiệu giá tối đa nagyf thứ 9, phôi chận phát triển không chết tế bào thần kinh tìm thấy thể Negri b Trên mơi trƣờng tế bào - VR nhân lên nhiều hệ tế bào, thận chuột nhắt, thận lợn, cho, tế bào xơ phôi gà, tế bào lưỡng bội , tế bào lưỡng bội BHK 21 , tê bào thường trực phải qua nhiều lần cấy truyền, tác dụng gây hủy hoại tế bào rõ -Trong nuôi cấy tế bào bị nhiễm virus dại phương pháp nhuộm mann, Sellers thấy thể hình trịn, có danh giói rõ rệt thể Nêgry Sức đề kháng: -VR dại mẫn cảm với sức nóng 50*C Viruts bị diệt sau 1h, 60*C 5-10’, 70*C chết -Nhiệt độ lạnh VR tồn lâu, o*C năm, -70*C tồn nhiều năm, đc bảo quản tốt dd glyxerin 50% -VR bị bất hoạt ánh sáng mặt trời, tia cực tím, tia X Nếu làm khơ chạm nơi khơng có ánh sáng VR yếu nhanh chóng, cịn làm khơ nhanh VR giữ khả truyền nhiễm Tính chất miễn dịch: - bị nhiếm VR dại thể tạo kháng thể khác như: KT kết tủa, KT trung hòa, KT cố định bổ thể, -Việc tìm kháng thể dặc thù khơng giúp ích cho việc chuẩn đốn huyết học bệnh dại, bệnh tiến triển nhanh chóng dẫn đến tử vong Phương pháp tơt có vai trị quan trong việc chuẩn đốn phát sớm bệnh dại gia súc kỹ thuật kháng thể huynh quang Khả gây bệnh: *Trong tự nhiên: tất lồi đv máu nóng mắc bệnh, lồi đv chó mèo, trâu bị, ngựa lơn, lặc đà ĐV hoang dã chó sói, mèo rừng, mẫn cảm chó mẫn cảm nhất, người mẫn cảm - Chó chó sói nguồn lây bệnh chủ yếu bệnh truyền trực tieeos qua vết cawbs VR nhiếm vảo thể qua vết thương, vết cắn gần dây thần kinh nguy hiểm (90% người mắc bệnh chó cắn, số lây qua đường hô hấp) thời gian nung bệnh dài hay ngắn phụ thuộc vao chủng viruts vết cắn gần hay xa hệ thần kinh trng ương *Trong phịng thí nghiệm: -Tốt dung thỏ, sau chuột bạch, chuột lang, chuột đất vàng -Dùng thỏ: tiêm viruts vào não thỏ qua đương giác mạc vào tiềm phòng or hậu phòng mắt tùy đường tiêm thời gian ủ bệnh khác Có biểu hiên: co giãn đồng tử mắt - Rối loạn hô hấp - liệt chân - vật lả kiệt sức chết -Dung chuột : tiêm viruts qua đường não time ủ bệnh 8-15 ngày Xuât triệu chứng : long dựng đứng, hình thành cục bướu cộ sống bị kích thíc mạnh -Với chuộ lang xuất hiên triệu chứng kích đọng hán, cắn, liệt tồn thân chết Chất chứa virus: VR dại có tính hướng than fkinh, VR cư trú hệ thần kin : não, tủy sống nhiều sừng Ammon, chất xám vỏ não, đặc biệt tuyến nước bọt có động lực sớm thời kỳ chó nguồn beenhjnguy hiểm Cấu tạo kháng nguyên typ huyết thanh: *pr VR dại đc chia làm loại +pr nucleocapxit hình thành kháng nghun nội mơi +pr bề mặt hình thành kháng nguyên bề mặt Câu 29, Chẩn đoán bệnh dại phản ứng miễn dịch huỳnh quang ( phƣơng pháp trực tiếp gián tiếp)? Kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang trực tiếp: - Dùng kháng thể đặc hiệu nhuộm màu để phát kháng nguyên nghi dại - Chuẩn bị kháng nguyên chẩn đoán: dung bệnh phẩm não, nước bọt áp kính vàovùng sừng Ammon động ật nghi mắc bệnh dại, cố định tiêu ete hơnóng lửa đèn cồn - Chuẩn bị kháng thể đặc hiệu nhuộm huỳnh quang: dung virus dại gây tối miễndịch cho thỏ, lấy máu chắt huyết thanh, tách phần gamma globulin có huyếtthanh miễn dịch đem nhuộm màu thuốc nhuộm huỳnh quang - Tiến hành phản ứng: sau cố định kháng nguyên tiêu bản, nhỏ 1-2giọt kháng thể đặc hiệu chống dại nhuộm màu huỳnh quang lên tiêu bản, để ở370C 30 phút, đem rửa nước, làm khô, quan sát kính hiển vi huỳnh quang + phản ứng dương tính: kháng thể tương ứng với kháng nguyên, kết hợp sẽphát sáng + phản ứng âm tính: khơng có kết hợp kháng thể kháng ngun, khơngphát sáng, bệnh phẩm khơng có virus dại Kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang gián tiếp: - Kỹ thuật không dùng kháng thể đặc hiệu nhuộm màu huỳnh quang, mà dùng khángthể kháng gamma globulin loài vật dùng để chế kháng thể đặc hiệu đem nhuộmmàu huỳnh quang Như kháng thể đặc hiệu có chức năng, chức kháng thểđối với kháng nguyên cần chẩn đoán chức kháng nguyên kháng thểgamma globulinnhuộm màu huỳnh quang Như cần nhuộm màu kháng thể kháng gamma globulincó thể chẩn đốn nhiều bệnh truyền nhiễm - Chuẩn bị kháng nguyên chẩn đoán: giống phần chuẩn bị phản ứng trực tiếp - Chuẩn bị kháng thể kháng gamma globulin: dùng gamma globulin thỏ tiêm cho gàtrống, sau 2-3 tuần lễ máu gà có nhiều kháng thể chống gamma globulin củathỏ, lấy máu gà chắt lấy huyết thanh, tách phần gamma globulin, thu kháng thể kháng gamma globulin thỏ Kháng thể chắn kết hợp đặc hiệu vớigamma globulin thỏ, đem nhuộm màu kháng thể - Tiến hành phản ứng: sau cố định kháng nguyên tiêu bản, nhỏ 1-2 giọt khángthể đặc hiệ, kháng thể kháng nguyên tương ứng, chúng kết hợp chặt chẽ vớinhau, khơng phát sáng xem kính kháng thể đặc hiệu không nhuộmmàu Nhỏ tiếp 1-2 giọt kháng thể kháng gamma globulin nhuộm màu lên tiêu đểtác động thời gian rửa nước, để khơ, quan sát kính hiển vi huỳnh quang sẽthấ phát sáng có kết hợp tầng, tầng : kháng thể kháng nguyên đặc hiệu, tầng 2: kháng thể đặc hiệu với kháng gamma globulin, phản ứng dương tính Kết luận bệnh phẩm có chứa virus dại.Trong trường hợp kháng nguyên nghi không tương ứng với kháng thể đặc hiệu bệnh dại khơng có kết hợp tầng 1, nhỏ kháng thể kháng gamma globuli nnhuộm màu lên tiêu bản, kháng thể kháng thể bị trôi rửa nước, nên khiquan sát kính hiển vi huỳnh quang khơng thấy phát sáng, phản ứng âm tính, bệnh phâm rkhoong chứa virus dại Câu 30.Đặc tính sinh học virus Newcastle? a Hình thái, phân loại, độc lực: * Virus Newcastle thuộc họ Paramyxovirideae.Cấu tạo xoắn, hình trịn, hình trụ, hình sợi, kích thước vỉon củavirus từ 120-130 nm, trung bình khoảng 180 nm *Virus có loại protein cấu trúc: -(HN): đặc tính ngưng kết hồng cầu có hoạt tính menNeuraminidaza tác dụng cắt đứt thụ thể hồng cầu - lien hợp tế bào bị nhiễm virus với để tao thành tế bào khổng lồ đa nhân -large - protein (L): chưa rỗ chức -Matrice protein( M): gắn ARN virus với vỏ bọc - phosphor nucleoprotein (NP): hình ống dài xoắn nhiều vòng, chưa rõ chức - nucleoprotein(N): protein kiềm bảo vệ ARN virus -Các đơn vị cấu trúc protein xắp xếp quanh trục, rỗng theohình xoắn ốc, bên axit nucleic định hình dạng virus -Vỏ bọc virus lipid nên vỉion mẫn cảm với chất hòa tannhư ete, cồn, clorofoc, mectiolat -Virus qua màng lọc Berkerfeld, Chamberland màng lọcSeitz -Virus có khả làm ngưng kết hồng cầu: gà, bị người, chuột bạch,chuột lang, khơng làm ngưng kết hồng cầu ngựa, đặc tính đểphân biệt với virus dịch tả gà, virus dịch tả gà lại làm ngưng kết hồngcầu ngựa -Virus Newcastle có nhiều chủng, có động lực khác nhau, chia nhóm: +Nhóm Velogen : chủng có độc lực cao, VR cường đọc tự nhiên +Nhóm Méogen : chủng có động lực vừa, VR gây bệnh cho gà +nhóm Lentogen : chủng có động lực thấp, ko có khả gây bệnh, or gây bệnh nhẹ cho gà nở b Đặc tính ni cấy *Nuôi phôi gà: - Dùng phôi gà ấp 9-10 ngày tuổi, têm viruts xoang niệu đạo mô, thời gian gây chat ohooi tùy thuộc vào động lực viruts ( động lực cao phôi chết 60h chủng động lục thấp phôi chết 100h) Bệnh tích phơi xuất huyết da đầu, chân cánh -Đặc điểm quan trọng sau cấy truyền đời qua phôi thai gà nhiều lần ngta thu đc giống VR Newcastle Nhược độc dung chế tạo vác xin phịng bệnh *Ni cấy mơi trƣờng tế bào: VR nhân lên tốt môi trường tế bào thận lợn, thận khỉ, tế bào xơ phôi gà Sau 24 tới 72 h gây nhiễm, tb bị hoại tử (CPE) chủ yếu hinh thành Syncitium, làm cho tế bào bị biến đổi hình thái, tb co trịn lại vỡ tao thành tế bào khổng lồ *Nuôi cấy động vật cảm thụ : dung gà giò để tiêm truyền, với chủng viruts cường độc Bện phát giống bệnh tự nhiên c Khả gây bệnh *trong tự nhiên: gây bệnh cho lồi gà, gà tây, bồ câu, chim se, cịn vịt, ngan ngỗng cngx mắc nhẹ Gà moi lứa tuổi mắc cảm thụ gà Người nhiễm viruts, nung bệnh 1-4 ngày, sốt cảm mạo *Trong phịng thí ngiệm: thường gây nhiễm cho gà giị, phơi gà ấp 9-11 ngày sau tiêm gà có triệu chứng bệnh giống bệnh tích gà mắc bệnh tự nhiên Có thể dung chim bồ câu gây bệnh tiêm vào bắp thị sau 6-8 ngày bồ cau tê liệt, sau 15-16 ngày chết Dung chuột tiêm vào phúc mạc, chuột chết sau 3-6 ngày d Sức đề kháng: - Có màng bao bọc lipit nên rễ mẫn cảm với chất hóa học ete, clorofoc, cồn -VR Newcastle có sức đề kháng yếu tự nhiên -Ở 60*C viruts bị diệt 30’, 100*C diệt 1’ 4-20*C VR tồn tháng Nhiệt độ âm VR tồn hang năm -khả chịu nhiệt chủng Newcastel đặc tính di truyền , chủng khác chịu nhiệt khác -các chủng chịu nhiệt tồn 25 - 30*c 2-3 tháng, 56*C 6h chủng V4 -các chất sát trùng thong thường diệt vi khuẩn nhanh chóng -Rễ bị diệt tia tử ngoại, dd glycerin 50% giữ vi khuản khả gây nhiễm e Khả tạo miễn dịch - Kháng nguyên VR Newcastle gồm có loại protein : HN, F, L, M, NP, N có khángnguyên: Fusion protein (F), haemagglutinin - neuraminidaza (HN) nẳm lớp vỏ VR có khả sản sinh kháng thểđặc hiệu Kháng thể HN, F kháng thể trung hòa, riêng KT HN KT ức chế -KT đặc hiệu vi rút tạo phụ thuộc vào loại KN VR đưa vào thể Nếu KN VR Newcastle vơ hoạt kháng thể sinh chậm thương 10-14 ngày thời gian tồn kháng thể ngắn 3-4 tháng Kháng nguyên VR Newcastle sống kháng thể sinh nhanh thường 6-7 ngày thời gian tồn lâu từ 6-12 tháng Câu 31, Trình bày phƣơng pháp làm phản ứng HA( nguyên lý, mục đích cách tiến hành)? *nguyên lý : Do capxit vk có bán kn Haemagglutinin - Neuraminidaza (H)N có kháng nguyên gắn với thụ thể hồng cầu làm hồng câu dính kết với sau cắt đứt thụ thể hồng cầu để chúng lại rời *Mục đích : -Xác định viruts có khả gây ngưng kết hồng cầu - Xác định nòng đọ virtus cao hay thấp -Xác định đơn vị ngưng keetsdungf cho phản ứng HL *Cách tiến hành a Chuẩn bị hồng cầu gà 1% -Lấy 10 ml máu tim gà them ml xitrat natri 5% để chống đông máu -Rồi quay ly tâm chohồng cầu lắng xuống,hút bỏ bạch cầu huyết tương ,rồi cho nước sinh lý vào rửa lạiquay ly tâm,hut bỏ phân nươc trên,rồi lại cho nước sinh lý vào rửa,xong lại quayly tâm hút phân nước đi(rửa nước sinh lý lần )chỉ giữ lại hồng cầu,cuối pháhồng cầu 1% với nước sinh lý b Chuẩn bị nƣớc trứng có chúa virust Lây óc gà nghi mắc bệnh Newcaslte nghiền thành huyễn dịch 1/10 với nước sinh lý,khửtạp khuẩn kháng sinh cấy vào xoang niệu mô phôi gà 10-12 ngày ,ấp tiếp ở370c sau 2-4 ngày phôi chết(tùy theo độc lựa mầm bệnh)lấy để tủ lạnh từ 0-4oc trong4 để mạch máu co lại ,sau hút lấy nước trứng,thử vô trùng cách cấy trêncác môi trường ,nước trứng giữ tủ lạnh đƣợc 3-6 tháng c Phƣơng pháp tiến hành phản ứng Dùng ống thí nghiệm ống đối chứng: -Cho vào ống thí nghiệm thứ 0,9ml nước sinh lý,các ống lại từ ống đếnống ống cho 0,5 nước sinh lý -Cho vào ống nghiệm thứ 0,1 ml nước trứng có chứa virust ,trộn ,lắc đềuống nghiệm thứ hút 0,5 ml từ ống thư chuyển sang ống thứ lại trộnđều ống thứ xong hút 0,5 ml tứ ống thứ chuyển sang ống thứ 3,trộn hút 0,5 mlchuyển sang ống thứ 4vaf làm ống thư hút bỏ 0,5ml Như vậylần lượt ta co hiệu giá pha loãng nước trứng tứ đống thứ tới ống thứ 8laf: 1/10 ,1/20 ,1/40, 1/80, 1/160 ,1/320 ,1/640,1/1280 -Cuối cho hồng cầu gà 1% vào tất ống ,mỗi ống 0,5ml ,lắc đều,trộn đềucác ống phút để yên 15-20 phút đọc kết -Ông thứ ống đối chứng có 0,5 ml nước sinh lý có 0,5ml hồng cầu gà ,dođó hồng cầu gà khơng bị ngừng kết mà lắng xuống đáy ống thành cục máu tònđỏ,nước phản ứng âm tính -Phản ứng dương tính hồng cầu ngừng kết thành hạt lấm màu đỏ(thànhquầng đỏ rạn nứt đáy ống nghiệm,hiệu giá ngừng kết đọc ống ngừng kết cuối ,trước ống không ngừng kết).Độ pha lỗng virust lớn mà có tượng ngừng kết hồng cầu thìgọi đơn vị HA - Để yên 15-20 phút, xem kết quả, dùng gương phẳng đặt phía đáyống nghiệm để xác định hiệu giá ngưng kết +Phản ứng dương tính : hồng cầu ngưng kết (NK) nằm dải thàng mảng đáy lỗ +Hiệu giá ngưng kết : độ pha lỗng viruts lớn có tượng ngưng kết hồng cầu rõ +Phản ứng âm tính: Hồng cầu lắng xuống đáy cục mầu đỏ nước bên Câu 32, Trình bày phƣơng pháp làm phản ứng HI để giám định virus Newcastle virus cúm gia cầm? *nguyên lý : Kháng thể đặc hiệu vs viryts có huyết thanh, gặp kháng nguyên tương ứng, phản ứngtrung hòa xảy VR bị kháng thể trung hịa khơng cịn khả ngưng kết hồng cầu *Ứng dụng: -chuẩn đoán bệnh -Giam định VR cúm gia cầm VR Newcastle -Định lượng hàm lượng cá thể có máu gà để đánh giá mức độ miễn dịch gà sử dụng vaxcin -Xác định time tái chủng vác xin l Chuẩn bị: -Kháng thể nghi: viruts phân lập đc có gây ngưng kết hồng cầu đc pha ở; hiệu giá đơn vị HA với viruts Newc astle, hiệu giá đơn vị với VR cúm gia cầm - Pha kháng huyết Newcatle kháng huyết dịch tả gà nồng độ: 1/10, 1/20, 1/40, 1/160, 1/320, 1/640, 1/1280 - Pha nước trứng có chứa virus hiệu giá ngưng kết đơn vị HA Tức tăng sốlượng virus lên lần hay gọi đơn vị ngưng kết hồng cầu làm để: nếutrong huyết khơng có kháng thể Newcatle phản ứng HA chắn xảy - Hồng cầu gà 1%: +Lấy 10 ml máu tim gà them ml xitrat natri 5% để chống đông máu +Rồi quay ly tâm chohồng cầu lắng xuống,hút bỏ bạch cầu huyết tương ,rồi cho nước sinh lý vào rửa lạiquay ly tâm,hut bỏ phân nươc trên,rồi lại cho nước sinh lý vào rửa,xong lại quayly tâm hút phân nước đi(rửa nước sinh lý lần )chỉ giữ lại hồng cầu,cuối pháhồng cầu 1% với nước sinh lý -Kháng thể chuẩn : +KT Newcastle +kháng thể cúm gia cầm Phƣơng pháp tiến hành phản ứng: - Dùng dãy ống nghiệm ngưng kết, dãy cho ống thí nghiệm thêm ống đốichứng dương đối chứng âm Bước 1: - Dãy thứ cho huyết Newcatle vòa ống lượng 0.25ml, cáchiệu giá pha loãng khác từ ống đến ống 1/10, 1/20, 1/40, 1/160, 1/320, 1/640, 1/1280 - Dãy thứ hai cho huyết dịch tả gà vào ống lượng 0.25ml, cáchiệu giá pha loãng khác từ ống đến ống 1/10, 1/20, 1/40, 1/160, 1/320, 1/640, 1/1280 *Bƣớc 2: -Cho vào tất 16 ống nghiệm dãy thí nghiệm, ống 0.25ml nước trứng cóchứa virus hiệu giá đơn vị ngưng kết hồng cầu -Lắc dãy huyết virus trộn lẫn vào nhau, để yên 5-10 phút Bƣớc 3: -Cho vào tất ống dãy thí nghiệm, ống 0.5ml hồng cầu gà 1% -ở ống đối chứng dương cho vào 0.25ml nước trứng; 0.5ml hồng cầu gà 0.25mlnước sinh lý -ở ống đối chứng âm cho vào 0.5ml hồng cầu gà 1% 0.5ml nước sinh lý.Tất ống nghiệm ống đối chứng có khối lượng 1ml.Lắc tất ống để yên vòng 15-20 phút đọc kết -Nếu bên khơng có ngưng kết hồng cầu kết luận có virus tương ứngvới huyết -Nếu dẫy ngưng kết hồng cầu gà kết luận nước có chứacả loại virus dịch tả gà Newcatle Câu 33 Chuẩn đoán viruts học bệnh Newcastle *Bệnh phẩm -Não gà nghi bị bệnh, pha với nước sinh lý thành huyễn dịch 1/10 -Xử lý kháng sinh để diệt tạp khuẩn : ly tâm lây nước hay tiêm qua phôi gà ấp -11 ngày, phôi chết, mổ trứng thu nươc trứng để chuản đốn *Tiêm động vật thí nghiêm -Dùng gà giò đủ tiêu chuẩn để gây bệnh -Tiêm 1ml huyễn dịch bệnh phẩm hay 0,5 ml nước trứng nghi vào bắp thịt, đùi, hay da gà -Nếu bệnh phẩm có viruts sau tiêm - ngày có triệu trứng: ủ rũ, long xù, sã cánh, mắt lim dim, đứng co chỗ, đứng chân, ăn uống nước nhiều, sốt cao bình thường từ 1*C - 1,5 *C, ỉa chảy, phân xanh có bọt, miengj đầy nước dãi dính quanh, dốc ngược chân gà lên có nhiều nước dãi chảy mùi chu khám, - ngày sau gà khó thở mào xám, hay ngáp, ngày 6-7 thân nhiệt hạ gà chêt -Nếu bệnh tích kéo dài gà có triệu chứng thần kinh : siêu vẹo, giật lùi, đầu cổ co giật, mổ không trúng thức ăn, quay quanh chỗ, xác gầy dần chết *Mổ khám thấy: -Dọc theo niêm mạc đườn tiêu hóa: miệng, hộng, thực quản phủ chất nhờn mầu trắng xám hay màu vàng nhạt có xuất huyết điểm -Dạ dày tuyến xuất huyết điểmtạo thành vành đai đoạn đầu hay cuối cuống mề, cạy thấy có vết lốtphủ bực vàng, bóc màng mề thấy có đám mầu đỏ có chất nhớt -Niêm mạc ruột non ,Tổ chức lympho niêm mạc xuất huyết lt thành đám hình trịn, hình bầu dục -Niêm mạc ruột già, trực tràng, hậu môn tụ máu xuất huyết mảng dài Câu 34: Dặc tính sinh học viruts gumboro a Hình thái cấu trúc -VR gumboro hay gọi VR viêm túi huyết truyền nhiễm thuộc họ Birnavirideae giống Birnaviruts -Là loại VR trần, khơng có vỏ bọc ngồi -Có cấu tạo hình khối dda diện kích thước từ 50 - 70 nm, VR chứa ARN sợi cuộn tròn phân làm đoạn riêng biệt( birnaviruts) -Capxit có 32 capxome, đc tạo thành loại pr có câu strucs khác : VP1, VP2, VP3, VP4, VP5(viral protein) -Trong VP2, VP3,là lạo Pr chủ yếu mang tings kháng nguyên đăc hiệu +Loại pr có kháng ngun kích thích thể sin kháng thể kêt tủa, đc gọi kháng nguyên đặc hiệu nhóm (GS - Group specific) +Loại pr có tính kháng ngun kích thích sinh kháng thể trung hịa đc goi kháng nguyên đặc hiệu typ (TS- Typ specific antigen) -Sự thay đổi cấu trúc VP2 dẫn đến thay đổi tính kháng nguyên khả gây bệnh VR -Các change gumboro đc xác định khác phân tử VP2 -Hiện phát đc VR gumboro có serotyp +Serotyp gây bệnh cho gà +Serotyp gây bệnh cho gà tây -giữa typ ko có niễn dịch chéo Trong serotype tính tương đồng có 30%-Khi xác đinh serotype ơhair dựa sỏ phản ưng trung hịa b Đặc tính ni cấy: ' *Trên phơi gà: - Cấy VR vào màng niệu đệm, xoang niệu, phôi gà ấp 10 - 11 tuổi -Phôi chết sau gây nhiễm 3-5 ngày -Bệnh tích : gây xưng huyết phổi, thùy thũng vùng bụng, có điểm xuất huyết da, vùng da đùi, đầu bền sườn phải phơi, gan xưng có điểm xuất huyết hoại tử *Trên môi trƣờng tế bào -Trên môi trường tế bào xơ phôi gà, xơ phôi vịt, thận thỏ, thận khỉ -Sau vài lần cấy chuyển viruts thích ứng gây hủy hoại tế bào: tế bào biến dạng, co tròn -VR gây hủy hoại tế bào sau 48 - 98h gây nhiễm -Nếu cấy chuyển liên tiếp nhiều lần qua môi trường tế bào độc lực viruts giảm dần sử dụng làm vaxin *Trên gà thí nghiệm -Ni cấy VR gà 3-6 tuần tuổi -Sau 2-3 ngày VR nhân lên quan lympho , đăc biệt túi fabricius, làm tú bị viêm, sưng, tổ chức túi bị phá hủy biến màu, tăng kích thước trọng lượng - Ngồi biểu hện gà cịn có triệu chứng lâm sang bệnh tích đăc trưng bệnh gumboro -VR gumboro cấy truyền nhiểu lần gà 3-6 tuần tuổi động lực VR đc tăng cường c Sức đề kháng -VR có sức đề kháng coa tự nhiên VR bị vô hoạt ph =2 ph =12 -ở 56*C VR chết 5h, 60*C chết 30 „, 70*C chết nhanh chóng -Các chất hóa học thong thường diệt đc VR -Trong phân rác, chất độn chuồng chuồng gà bị nhiễm VR tồn rấ lâu, đay nguồn tang chữ VR dẫn tới việc bệnh xảy lưu cữu quanh năm d Khả gây bệnh e *trong tự nhiên: -Gà, gà tây đc coi loại nhiễm bệnh nhất, tất gống gà mắc -Tỉ lệ chết 10-30 %, ghép với bệnh khác tỉ lệ gà chết cao -Bệnh thường xảy gà từ 3-6 tuần tuổi, có trường hợp xớm ( 11 ngày tuổi ) muộn (2o ngày tuổi), thiệt hại kinh tế lớn gà qua khỏi, gà bị cịi cọc chậm lớn, khơng phát triển, mặt khác hệ thong miến dịch là túi fabricius bị phá hủy, bị teo phần mât HOÀN tàn hoạt động miễn dịch, đãn tới giảm miễn dịchor khả đáp ứng miến dịch -Gà chăn nuôi tập trung rễ mắc gằn chăn nuôi nhỏ lẻ -Trong thể bệnh VR tập trung nhiều túi fabricius, sau lách, thận ác quan phủ tạng khác -Sau vào hệ tiêu hóa VR vào máu đến túi fabricius , Vr nhân lên nhanh công phá hủy tế bào lympho B chin chưa chin -Khi tb B bị phá huyrsex gây tương suy giảm miễn dịch dịch thể, gà rễ mắc bệnh truyền nhiếm khác -Gà nhỏ tuổi bị nhiễm VR hậu lại nặng nề *Trong phịng thí nghiệm -Dùng phôi gà ấp 10 -11 ngày gà 3-6 tuần tuổi để gây bệnh thực ngiệm, sau gây bệnh gà có bệnh tích gioongs bệnh tích gà mắ bệnh tự nhiên Câu 35: Chuẩn đoán viruts học bệnh gumboro *Bệnh phẩm: -là túi fabricius lách gà bị bệnh -Ngiền với nước sinh lý theo tỉ lệ 1/5 or 1/10 -Đong tan 2-3 lần , xử lý kháng sinh -Ly tâm lấy nươ gây bệnh cho gà *Động vật thí nghiệm -chon gà 3-4 tuần tuổi , đủ tiêu chuẩn gây bệnh -Dùng bệnh phẩm nhỏ vào miệng, mắt, hậu môn cho gà Nếu bệnh phẩm có viruts sau 2-3 ngày gà có biểu hiên bệnh *Triệu chứng -Triệu chứng sớm thấy ddc gà quay mở lại gãi vào phao câu -Sau gà ủ rũ, bỏ ăn, lạo hướng, xù long, ỉa chảy phân trắng, lỗng tồn nước lấn máu -Gà sốt cao, than nhiệt giảm, gà nằm liệt chết nước nhiều *Bệnh tích: -Chủ yếu túi fabricius +Túi biến đổi kích thước, hình dạng đọ bền, mầu sắc +Túi bắt đầu xưng, phù thũng, có bã đậu, phù ngày thứ 2-3, tới ngày thứ túi xưng to gáp 3-4 lần, ngày tứ 5-6 túi trở lai kích thước trọng lượng bình thường, sau teo dần ngày thứ trọng lượng túi 1/3 so với bân đầu +Xuất huyết ngực đùi, ruột tăng sinh dày lên *KẾT LUẬN: bệnh phẩm có VR gumboro Câu 36:đặc tính sinh học vr cúm gia cầm( Avian Ingluenza Virus) Trả lời: *phân loại:Virus cúm gia cầm có tên Avian Ingluenza Virus, thuộc họ Orthonyxoviridea - gâybệnh cho lồi chim, số dv có vũ lây xag người - họ Orthonyxoviridea có nhóm : typ a, typ B, typ C Thogotoviruts -VR cúm gọi A VR cúm thứ gọi B, VR cúm thư gọi C Hình thái, cấu trúc: - Vr cúm gia cầm thuộc họ Orthonyoviridae, type A -Vr có dạng hình cầu, đơi dạng sợi, kích thước đường kính hạt VR 80 - 100nm, phân tử lương = 25 triệu dalton - VR cúm có hệ gen sợi ARN , dài 10.000 - 15.000 nucleotide, phân thành - đoạnmang mật mã cho 10 loại protein cấu trúc khác viruts - Capsit bao quanh sợi ARN, mang KN H N, ngồi cịn mang lKNmàng M1 KN có khả kết hợp với bổ thể hòa tan NS - Vỏ bao bọc ngồi, chất lipit Đặc tính nuụi cy: r A Ơ ' /V /V ã ' *lrên phôi gà : -VR nhân lên dễ dàng, dùng phôi - 11 ngày tuổi 13 ngày tuổi Ttiêm VR vào túi ối or niệu mô -vr nhân lên tế bào biểu mô màng ối màng túi ối -xâm nhập vào phôi gây chết phôi sau 24 - 48 h - bệnh tích vr gây xuất huyết nặng tồn phơi *Mơi trƣờng tế bào: -Có thể nuôi cấy VR tế bào thận khỉ, thận phơi người, thận chuột lang -ít sử dụng phương pháp hoặt tính gây nhiếm hiệu giá viruts giảm dần cấy chuyển nhiều lần, không gay hủy hoại tế bào *Trên động vật cảm thụ - Động vật cảm thụ dùng gây nhiễm cho chồn, chuột nhắt, phương pháp khôngđược sử dụng Cấu trúc kháng nguyên:cấu trúc kháng nguyên VR cúm phức tạp có kháng nguyên nằm capxit cảu VR - Kháng nguyên H (Hemaggnutinin) : +gây ngưng kết hồng cầu gần 20 loài động vật, phân nhiều loại từ H1,H2, H3 H15, giúp vr bám vào tế bào xâm nhập vào bên +Ngta hay dung hồng cầu gà, hồng cầu ng có nhóm máu O hồng caaud chuột lang để phát viruts pứ ngưng kết hồng cầu HA -Kháng nguyên (Neuraminidara) N: + Là loại enzyme làm tách cầu nối axit neuraminic với plysecasrit để giả phóng axit neuraminicvà phá hủy thụ thể mucoprotein +cónhiều loại từ N1, N2 N9, giúp vr khỏi tế bào xâm nhập vào tế bào khác +đối với lây nhiễm 2KN : H N CĨ VAI TRÕ LỚN GIƯP VR gây bệnh: Kháng nguyên H giúp VR xâm nhập vào bên tế bào Kháng nguyên N giúp VR khỏi tb lan sang tb lành khác Sự biến đoi gen: Bệnh cúm đv VR cúm ttyp A gây nặng nhất, gây đại dịch a, biến đổi nội gen: khả nguy hiểm vr - Là thay đổi nucleotide đoạn gen - Những thay đổi thường xảy phân đoạn gen mã hóa cho KN H KN N - Thay đổi số cấu trúc nu sợi ARN tạo dòng vr tránh phần Miễn Dịch có quần thểĐV vụ dịch cúm trươc tạo b,Sự trao đổi gen: - Khả nguy hiểm vr - Gây tượng vr tái tổ hợp gen với dòng vr cúm khác đồng nhiễm vào cơthể tạo dịng vr hồn tồn mới, tránh hồn tồn MD có quần thể -Đây trowe ngại lớn việc ngiên cứu vacxin phòng bệnh cúm cho ng động vật 5.Khả gây bệnh độc lực VR *Khả gây bệnh a,trong tự nhiên : -Vr cúm type A có khả gây bệnh cho chim, động vật có vú -ở người VR cúm A gây bệnh thường VR có KN h từ H1 TớiH3 Cácchủng VR cúm phổ biến là: A/H1N1, A/H2N2, A/H3N2 Ngaoif người mắc bệnh cúm VR cúm Typ B, C -Ở gia súc :lợn , ngựa, đà điểu mẫn cảm với vr cúm type A -Với loài chim : gà, gà tây, loại chim cảnh, ngan , ngỗng mẫn cảm với viruts.Trong gà mẫn cảm nhất,con non mẫn cảm -Thủy cầm lồi mang trùng -Ni gia cầm lẫn thủy cầm : nguy mắc bệnh gấp lần a phịng thí nghiệm: -Khơng gây bệnh đơng vật cảm thụ,chỉ gây bệnh phôi môi tế bào *động lực -Đối với nhóm vr có độc lực cao (HPAI) +Gà động vật mắc bệnh nhất, tỉ lệ chết 100%., thời gian nung bệnh từ vài tới ngày +Bệnh phát triệu chứng đa dạng: điển hình chết đột ngột, chết nhạnh, chếtnhư trúng độc +Gà có biểu sốt cao, ủ rũ,da chân xuất huyết, thâm tím, có biểu khó thở, hắt hơi, viêm kết mạc +Xưng phù đầu, mào sưng phù thâm tím, triệu chứng thần kinh: co giật, xoaytrịn, giật lùi *Bệnh tích: xuất huyết tồn đường tiêu hóa, tuyến tụy -Đối với nhóm vr độc lực thấp (LPAI) +Triệu chứng lâm sàng biểu hiện, tỉ lệ gia cầm chết thấp +Nếu gia cầm kế phát số vi khuẩn độc lực vr tăng lên, chúng biếnchủng thành chủng có độc lực cao, nguy hiểm cho vật ni.và người *Bệnh tích: viêm xoang cata, vieemnhej đường hơ hấp, phù khí quản, ruột viêm cata 6.Sức đề kháng: -giacầm: gà, gà tây, ngan ngỗng mắc bệnh, thủy cầm mang trùng -Vr không bền nhiệt độ 560C , chết 1000C Ở 40C nước trứng vr tồn tháng, phân gà 40C vr tồn được35 ngày.ở -70*c làm lạnh bảo quản viruts lâu dài -Thịt gà lạnh 23 ngày vr khả gây bệnh -Chất sát trung thơng thường có khả diệt vr Câu 37: đặc tính sinh học vr dịch tả vịt ( Pestis anatum virus) Trả lời: vr gây bệnh truyền nhiễm cấp tính, gây tử vong cao cho vịt, ngan ngỗng thiên nga 1.Phân loại vr: - Là loại ADN virus thuộc họ Herpesvirideae nhóm Herpes - Có nhiều chủng có độc lực khác tự nhiên - Khơng có khả gây ngưng kết hồng cầu 2.Hình thái kích thƣớc: - Gần trịn, có vỏ bọc bên lõi - Sau 24h xâm nhập vào tế bào, thấy hạt virus nhân nguyên sinh chất - Thể vùi nhân tập hợp khơng có hình thù, giống bụi - Trong nhân tế bào có khơng vùi xuất khoảng trống, đócó virus hay tập hợp virus có capxit hình cầu sáu cạnh Nucleocapxitcó o = 93,5 nm - Khi vào nguyên sinh chất, đường kính hạt virus tăng đến 136nm - Khi vào khơng bào virus thành thục có đường kính 250nm 3.Chất chứa virus : - Trong thể vịt bệnh , vius có máu, dịch nội tiết, quan nội tạng,nhiều gan, lách, não - Vịt bệnh thải virus qua phân dịch xuất - Nguồn nước nhiễm virus, động vật thủy sinh chứa virus time định có vai trị chuyền bệnh 4.Đặc tính ni cấy: *Ni cấy phơi: - Nuôi cấy vr màng niệu đệm hay xoang niệu mô thai vịt ấp 12 ngày - Sau - ngày phơi chết với bệnh tích: + Xuất huyết da vùng lưng, rìa cánh, đầu, + Gan, tối có điểm xuất huyết hoại tử + Màng nhung niệu sưng dày lên - Nếu tiếp truyền 12 đời liên tiếp phôi gà, từ đời thứ ba phôi gà chết sau 4- 5ngày tiêm vào màng niệu đệm chết sau 6- ngày tiêm vào xoang niệumô - Khi gây nhiễm phôi gà vr nhược độc nhân lên mạnh , chứa nhiều xoang niệuđệm nước niệu, túi long đỏ vr - Vr cảm nhiễm với phơi ngỗng ấp 12 ngày tuổi giết chết phôi sau 3- ngày -Người ta dung chủng vr nhược độc qua phôi để chế vacxin *Nuôi cấy tế bào: - Sử dụng tế bào xơ phôi vịt, ngan, gà lớp - Sau ngày gây bệnh phương pháp quan sát p-lê-cơ ngta nhân thấy pleco bắt đầu hình thành phát triển tối đa sau ngày *Nuôi cấy động vật cảm thụ: -VR thích ứng mơi trường ni tb xơ phơi gà , sau 24h tb bắt đầu có tượng hủy hoại, bệnh tích tb chủ yếu tượng tế bào bị biến dạng, co trịn, phình to ra, tập trung thành dám, nhìn rõ kinh shieenr vi quang học Tính gây bệnh: a, tự nhiên: - Vịt loài cảm nhiễm lứa tuổi giống vịt, loài thủy cầm khác bị mắcbệnh - Biếu hiện: +vịt ngại xuống nước bị liệt chân, bại cánh, +đầu xưng to,sốt ăn, phù thũng hàm, mí mắt sưng chảy nước mắt, sau đócơ mi dính lại có nhiều dử mắt - Sau tuần vịt chết kiệt sức, xác gầy - Bệnh tích mổ khám: + phân dính bết hậu mơn + tồn niêm mạc đường tiêu hóa xuất huyết, có vết lt rõ rệt + gan sưng tích máu có nhiều điểm hoại tử trắng b,trong phịng thí ngiệm: - Gây bệnh cho vịt con, ngỗng con, ngan gà ngày tuổi - Các động vật thí nghiệm khác thỏ, chuột, chim bồ câu không cảm thụ với bệnh - Đường gây nhiễm chủ yếu đường tiêu hóa, gây bệnh nhân tạo tiêm vrdưới da, bắp thịt tĩnh mạch nhỏ mũi Sức đề kháng : - Mẫn cảm với chất làm tan mỡ Cồn 75 độ diệt viruts 5-30’ - Bất hoạt mt pH < pH> 10 - nhiệt độ cao đề kháng kém: 30oC chết sau 2h,70oC/20’ 80oC/5’ - Nhiệt độ lạnh : bảo quản thời gian dài Câu 38: chẩn đoán virus học dịch tả vịt: a Bệnh phẩm - Lấy bệnh phẩm gan lách, phủ tạng b Làm tiê soi kính hiến vi: Dùng bệnh phẩm máu phủ tạng làm tiêu quan sat kính hiển vi quang học phát có VK Pasteurella, Salmonella hay VK khác cần thận ko thể kết luận khơng có VR dịch tả vịt bệnh ghép với VK c Tiêm động vật thí nghiệm: *Gây nhiễm cho vịt: - Gây nhiễm cho vịt 0,6 - 1kg, đủ tiêu chuẩn - Ngiền bệnh phẩm với nước sinh lý nồng độ 10-20%, xử lý kháng sinh với liều 500-1000 UI penixilin, 200 mg streptomyxin cho 1ml, để 4*C 6h sau tiêm cho vịt khỏe vào da hay bắp thịt -Nếu bệnh phẩm có VR sau 2-3 ngày vịt bắt đầu sốt, thân nhiệt len tới 43-44*C , vịt ủ rũ, ăn, xù long, xã cánh, khắt nước -Đén ngày thứ hai chân mềm, mí mắt xưng, chảy nước mắt, lúc đầu niêm dịch sau dử đặc mầu vàng - Ngày thứ 5, bại chân, ỉa chảy, Ngày thứ - vịt kiệt sức chết ♦ Bệnh tích: - Xuất huyết da đầu, lưng , bụng, vết xuất huyết lấm giống muỗi đốt - Niêm mạc thực quản bị viêm, xuất huyết,có màng giả màu vàng, có vết loét to hatk đậu xanh,Dạ dày tuyến có chất nhày mủ, xuất huyết, ruột viêm cata, xuất huyết cóvết loét -Gan sưng tụ máu, có điểm hoại tử trắng, mật sưng, lách có chấm hoại tử, xoangbao tim có nước vàng -Ngoại tâm mạc có điểm xuất huyết, phổi sưng, đơi bụng thấy dịch thẩmxuất màu vàng ♦ Kết luận :Bệnh phẩm có viruts dịch tả vịt *Gây nhiễm cho phôi vịt: - Tiêm huyễn dịch 10 - 20 % liều 0,2 ml cho phôi vịt 12 ngày tuổi vào xoangniệu Sau - ngày, bệnh phẩm có vr, phơi chết ♦ Bệnh tích: Xuất huyết thủy thũng da tổ chức da, gan hoại tử, màng nhung niệu phủ dày.ở lần tiêm đầu tiên, tỉ lệ chết chưa cao, tiêm thêm nhiều lần vr thích nghi giết chết tồn phơi gây nhiễm Câu 39: đặc tính sinh học vr viêm gan vịt.(Duck Hepatitis Virus) Phân loại hình thái: a, phân loại :Có tuýp khác nhau: *Tuýp 1: - Thuộc họ Picornavideae, kích thước 20 - 40 nm - Gây bệnh chủ yếu giới tỉ lệ chết 80 - 85% *Tuýp 2: - Là cistrovirus, chủ yếu gây bệnh Anh, kích thước 28 - 30 nm - Gây bệnh cho vịt từ 10 ngày - tuần tuổi - Tỉ lệ chết 10 - 50 % *Tuýp 3: - Thuộc Picornarideae riêng biệt với tuýp - Gây bệnh chủ yếu Mỹ - Kt : 30nm, gồm vr có độc lực thấp - Tỉ lệ chết 10 - 30% a Hình thái cấu trúc - Nhân 1ARN, - Vỏ capxit gồm 32 capsom, - Vr có hình cầu,kt nhỏ, bề mặt xù xì, khơng có vỏ bọc bên ngồi - Khơng có Khả gây ngưng kết hồng cầu - Khơng có MD chéo với VR viêm gan người vr dịch tả vịt Đặc tính ni cấy: a Ni cấy phôi: *Nuôi cấy phôi vịt: - VR viêm gan vịt thích ưng streen phơi vietj 10-14 ngày tuổi phôi gà 8-10 ngày tuổi -Đường gây nhiếm tốt xoang niệu - Phần lớn phôi gà chết sau 5- ngày , phôi vịt sau 24 - 48h - Bệnh tích: phù phơi, xuất huyết nặng vùng đầu,da, tứchi Gan sưng, có xuất huyết, bề mặt gan có nhiều hoại tử mầu vàng b Nuôi cấy môi trƣờng tế bào: - Dùng tế bào xơ phôi gà, xơ phôi vịt, thận phôi gà - Sau - ngày gây bệnh tích tế bào: phá vỡ màng tế bào, tan NSC lại nhântế bào c Nuôi cấy động vật cảm thụ: - Nuôi cấy vr vịt đủ tiêu chuẩn từ 1- ngày tuổi cảm thụ Trên VR bệnh phát giống tự nhiên - Gây bệnh tích đặc trưng Sức đề kháng: - Sđk cao, không mẫn cảm với chất làm tan mỡ - Nhiệt độ: 37*C tồn 48h, 50*C /1h, 6*C / 30p, 4*C /2 năm, -20*C /9 năm - Trong tự nhiên tồn thời gian dài, phân vịt, chất độn chuồng tồn trong10 tuần - Chất sát trùng thường phải có nồng độ cao, thời gian tác dụng lâu diệt Tính gây bệnh: *Trong tự nhiên: - Vịt 1-3 tuần tuổi mắc bệnh chủ yếu gặp vịt nở or vịt 5-6 tuần tuổi - Vịt trưởng thành cà lồi gia cầm khác khơng mẫn cảm - Ngan có khả mắc bệnh -ở vịt 1-3 tuần tuổi xảy ác liệt với tỉ lệ chết 50-90% *trong phịng thí ngiệm -Dùng vị or phơi vịt để gây nhiễm Câu 40:Chẩn đoán virut học bệnh viêm gan vịt *Bệnh phẩm: - gan vịt nghi bệnh, gan , lách , máu *Làm bệnh phẩm - nghiền nát với nước sinh lý thành nồng độ 20% - xử lí kháng sinh - li tâm lấy nước - xử lí với chloroform 5%/10p’ *Kiếm tra kính hiến vi *Tiêm động vật thí nghiệm: vịt 1-7 ngày tuổi, phơi vịt 10-14 ngày tuổi -Gây nhiễm cho phôi: +dùng phôi vịt 10-14 ngày tuổi,liều 0.2ml/phôi, tiêm virut vào xoang niệu mơ +nếu có virut phơi chết vịng 24-48h với bệnh tích đặc trưng: phù phơi, xuất huyế nặng, gan xưng, xuất huyết điểm -Gây bệnh cho vịt con: +Đây phương pháp có độ tin cậy cao +Mỗi mẫu bệnh phẩm pha với nồng độ 1/10 tiêm cho 6-10 vịt độ tuổi 1-7 ngày với liều 0.2ml/con +Nếu có VR sau 1-3 ngày vịt có triệu chứng:bỏ ăn,buồn ngủ.sã cánh.ỉa chảy,niêm mạc xanh tím,vịt nằm ngửa,co dật,chân duỗi thẳng,đầu ngoẹo sang bên sườn lưng( tưthế chết đặc trưng bệnh) - Mổ khám thấy bệnh tích: + Chủ yếu tập trung Gan: gan sưng,xuất huyết lốm đốm gan,xuất huyết thànhđám,vệt nốt xuất huyết đầu đinh ghim mầu đỏ, nhỏ li ti lan tràn khắp bề mặt gan, tổ chức gan bị thối hóa + Ngồi cịn thấy: tim nhợt nhạt bị luộc chin, màng bao tim túi khí bịviêm Thận tụ huyết nhẹ, lách sưng Câu 41 : Đặc tính sinh học VR PRRS a phân loại -Là VR thuộc họ arterivilidae -Có chủng nguyên mẫu( prototype) + Chủng Bắc Mĩ VR 2332 + Chủng Châu Âu Lelystad VR ( LV) Gây bệnh ĐV cảm thụ với bệnh cảnh giống có cấu trúc KN khác biệt vào khoảng 40% b Hình thái: +Hạt VR có đường kính 50 - 70 nm + Nucleocapsid kích thước có cấu trúc đối xứng 20 mặt đường kính 35 nm + Bao bọc bên ngaoif lớp vỏ đính chặt với cấu trúc bề mặt Nucleocapsid nên trông hạt vi rút giống tổ ong c Cấu trúc : + Bộ gen : phân tử ARN đơn chuỗi dương, kích thước 13-15 kb + Sợi ARN virus có cổng đầu 5’ dải cổng đầu 3’ + Gen ARN Polimeraza chiếm khoảng 75% đầu 5’ hệ gen + Gen mã hoá cho protein cấu trúc Vr nằm đầu 3’ + Hệ gen VR có ORF( Openreadeng frame) mã hóa cho loại pro cấu trúc + phân tử kháng thể có khả trung hịa phân tử glycoprotein, phân tử pr màng (M) phân tử pr vỏ(N) d Nuôi cấy : thể vật bệnh VR nhân lên tế bào đại thực bào phương pháp ni cấy áp dụng : ĐV mơi trường ni cấy dịng tế bào đại thực bào(TB ĐTB) lợn e Động lực VR : tồn dạng + Dạng cổ điển : động lực thấp, tỷ lệ chết thấp 1-5% tổng đàn + Dạng biến thể động lực cao : gây nhiễm làm chết nhiều lợn.Sự khác biệt đa dạng tính KN, khả biến đổi cấu trúc KN VR làm tăng them khó khăn việc sản xuất Vacine f Sức đề kháng + VR tồn năm nhiệt độ lạnh từ -20oC đến -70o C, 4oC tháng + Với nhiệt độ cao PRRSV có sức đề kháng 37 oC 48h, 56oC 1h + Khoảng pH mà VR tồn 6.5 - 7.5 + Ánh sáng môi trường tia tử ngoại vô hoạt VR nhanh chóng, dung mơi hịa tan chất béo dễ dàng phá hủy + Các thuốc sát trùng thông thường diệt VR Trong ổ dịch sử dụng để tiêu độc, sát trùng: Iodin 4%, Cloramin 23%, NAOH 3% g Khả gây bệnh + PRRSV bệnh riêng cho loài lợn: giống lợn nhà, lợn rừng cảm nhiễm, nắc lứa tuổi mẫn cảm lợn lợn nái mang thai + Lợn rừng nhiễm VR thường khơng có dấu hiệu lâm sàng -> nguồn dịch thiên nhiên + Trong chăn nuôi công nghiệp bệnh lây lan nhanh, rộng, tồn lâu đàn lợn nái, khó tốn, lợn nái mắc bệnh thường truyền cho bào thai gây chết, xảy thai + Người động vật khác không mắc bệnh + Thủy cầm chân màng vịt trời mẫn cảm với VR PRRSV nhân lên lồi động vật -> nguồn reo rắc mầm bệnh diện rộng h Cơ chế sinh bệnh +VK xâm nhập vào thể lơn theo nhiều đường : hô hấp, tiêu hóa, nội đường âm đạo Sauk hi xâm nhập đích cơng VR cac ĐTB +Đây TB có Receptor phù hợp với cấu trúc hạt VR VR hấp thụ thực hiên trình nhân lên lạo tế bào phá hủy +Ở lợn tỉ lệ lớn TB ĐTB nang phổi bị xâm nhiễm sớm phá hủy làm giảm khả phòng vệ phổi +PRRSV kích thích tăng sinh ĐTB 2-3 ngày VR giết chết chúng Virion đc giải phóng oy ạt xâm nhiễm xang tế bào khác tiwwps tục trình nhân lên phá hủy ĐTB thể lơn ốm có 40% số lượng TB ĐTB bị viruts giết chết -Triệu chứng tùy thuộc : nhiễm lần đầu hay lần sau, sức đề kháng biến đổi VR +Đực giống: Kém ăn, sốt lừ đừ Số lượng, chất lượng tinh dịch giảm, tinh shawng sinh dục giảm +LLợn theo mẹ: yếu ớt, bỏ bú Mắt có nghèn nâu, da phồng dộp iả chảy, thở mạnh, chân choãi, run rẩy tăng tỉ lệ chết +Lơn nái: biếng ăn, sốt lừ đừ, sảy thai, sữa, tăng tỉ lệ heo sơ sinh bị loại bỏ, giảm tỉ lệ thụ thai Thời gian lên giống trở lại kéo dài Câu 43: Kể tên phương pháp chấn đoán bệnh: Newcastle, dại, dịch tả lợn, viêm gan vịt, cúm gia cầm, Gumboro, Đóng dấu lợn? Newcaste a Chuẩn đốn VR học -Tiêm động vật thí ngiệm -Thí nghiệm trung hịa +Trên gà thí ngiệm +Trên mơi trường TB tổ chức phơi thai gà ĐVTN b Chuẩn đốn Huyết học Pứ ngưng kết hồng cầu (HA) -Pứ ngăn trở ngưng kết hồng cầu(Hi) Dại a chuẩn đoán VR học -Kiểm tra thể Negri Tiêm ĐV thí nghiệm b Chuẩn đoán huyết học -Phản ứng miễn dịch huỳnh quang : Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp gián tiếp Dịch tả lợn(DTL) -Chuẩn đoán VR học -Chuẩn đốn huyết học +TN trung hịa thỏ +P.ứ kết tủa khuếch tán thạch +Phản ứng ngưng kết gián tiếp HC +Phản ứng miễn dịch huỳnh quang Viêm gan vịt a Chuẩn đoán virut học b Chuẩnđốn huyết học -P.ứ trung hịa -P.ứ kết hợp bổ thể -P.ứ AGP -P.ứ ELISA Cúm gia cầm a chuẩn đoán vr học b Chuẩn đoán huyết học - Phản ứng HI - Phản ứng AGID - Phản ứng ELISA - Kĩ thuật IF -Ngồi chuẩn đoán VR cúm = pứ RT_PCR ( Reverse Transcription - Polymerase chain Reaction) Gumboro: a chuẩn đoán vr học b Chuẩn đoán huyết học -Phản ứng kết tủa khuếch tán thạch (AGID) -Phản ứng trung hòa virus -Phản ứng miễn dịch đánh dấu ELISA -Pứ AGP (Agar Gell precipitation test) đóng dấu lợn a chuẩn đoán vr học b Chuẩn đoán huyết học Pứ ngưng kết -Pứ miễn dịch huỳnh quang *Thường sử dụng pứ ngưng kết nhanh phiến kính PRRS: a chuẩn đoán lâm sang: dựa vào triệu chứng lâm sang bệnh tích đặc trƣng b chuẩn đốn huyết học - Phản ứng ELISA - Phản ứng kháng thể huỳnh quang gián tiếp ( IFA) - Phản ứng PCR phân tích từ máu lấy giai đoạn đầu bệnh để xác định có mặt virus THE END Khuất Minh Thanh K58 - TYA Email: khuatminhthanh@gmail.com ... thay đổi tính kháng nguyên khả g? ?y bệnh VR -Các change gumboro đc xác định khác phân tử VP2 -Hiện phát đc VR gumboro có serotyp +Serotyp g? ?y bệnh cho gà +Serotyp g? ?y bệnh cho gà t? ?y -giữa typ... 1 /20 , 1/40, 1/160, 1/ 320 , 1/640, 1/ 128 0 - D? ?y thứ hai cho huyết dịch tả gà vào ống lượng 0 .25 ml, cáchiệu giá pha loãng khác từ ống đến ống 1/10, 1 /20 , 1/40, 1/160, 1/ 320 , 1/640, 1/ 128 0 *Bƣớc 2: ... SAT1, SAT2, SAT3 -Các typ virus LMLM gâynhững triệu chứng lâm sàng giống nhau, không g? ?y miễn dịch chéo cho -O, A, C typs g? ?y bệnh phổ biến giới việt nam phát typ O, A Asia typ thương fgawpj typ O