1. Trang chủ
  2. » Giáo Dục - Đào Tạo

Tổng quan về các sản phẩm glycat hóa bền vừng AGE (advanced glycation endproduct)

74 449 1

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 74
Dung lượng 1,67 MB

Nội dung

Bên cạnh nguồn gốc nội sinh liên quan tới các quá trình chuyển hóa và lão hóa, một lượng đáng kể các AGE trong cơ thể còn có nguồn gốc ngoại sinh, đặc biệt là từ thức ăn [12].Các công tr

Trang 1

BỘ Y TẾ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

NGUYỄN QUỐC VIỆT

Mã sinh viên: 1201705

TỔNG QUAN VỀ CÁC SẢN PHẨM GLYCAT HÓA BỀN VỮNG AGE (ADVANCED GLYCATION

ENDPRODUCT) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

HÀ NỘI – 2017

Trang 2

BỘ Y TẾ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

NGUYỄN QUỐC VIỆT

Mã sinh viên: 1201705 TỔNG QUAN VỀ CÁC SẢN PHẨM GLYCAT HÓA BỀN VỮNG AGE (ADVANCED GLYCATION

ENDPRODUCT) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

PGS.TS Nguyễn Văn Rư

Nơi thực hiện: Bộ môn Hóa Sinh

HÀ NỘI – 2017

Trang 3

LỜI CẢM ƠN

Trong suốt thời gian thực hiện khóa luận tốt nghiệp tôi đã nhận được rất nhiều sự chỉ bảo, những lời khuyên hữu ích cũng như sự động viên từ các thầy cô, gia đình và bạn bè

Lời đầu tiên, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới người thầy đáng kính PGS.TS

Nguyễn Văn Rư, trưởng bộ môn Hóa Sinh- người đã tận tâm hướng dẫn, chỉ bảo tôi

trong quá trình thực hiện, bổ sung đóng góp ý kiến để tôi hoàn thiện khóa luận này Thầy không những dạy cho tôi phương pháp nghiên cứu khoa học hiệu quả mà còn khơi gợi ở tôi tinh thần làm việc hết mình vì khoa học

Tôi cũng xin gửi lời cám ơn tới các thầy cô của bộ môn Hóa Sinh, trường Đại học Dược Hà Nội Các thầy cô đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình tìm hiểu và hoàn thành khóa luận

Tôi xin cám ơn gia đình, những người đã luôn động viên, hỗ trợ và tiếp thêm sức mạnh để tôi vượt qua những khó khăn trong suốt thời gian thực hiện khóa luận Cuối cùng, tôi xin cảm ơn bạn bè đã luôn sát cánh và cho tôi những góp ý chân thành và hữu ích nhất để tôi hoàn thiện khóa luận này

Trang 4

MỤC LỤC Trang DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

CHƯƠNG I NGUỒN GỐC, CẤU TRÚC VÀ SỰ HÌNH THÀNH CÁC SẢN PHẨM GLYCAT HÓA BỀN VỮNG AGE 2

1 Khái niệm và sơ lược lịch sử nghiên cứu về AGE 2

2 Cấu trúc hóa học và sự hình thành AGE 3

2.1 Phản ứng Maillard và vai trò đối với sự hình thành AGE 3

2.2 Cấu trúc và sự hình thành AGE do sự chuyển vị sản phẩm Amadori 6

2.3 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ các hợp chất dicarbonyl 7

2.3.1 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ glyoxal (GO) 7

2.3.2 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ methylglyoxal (MGO) 8

2.3.3 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ 3-deoxyglucoson (3-DG) 10

3 Nguồn gốc của các AGE trong cơ thể 12

3.1 Các AGE có nguồn gốc nội sinh 12

3.2 Các AGE có nguồn gốc ngoại sinh 13

4 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hình thành AGE 13

4.1 Ảnh hưởng của các tác nhân tham gia phản ứng Maillard 14

4.2 Ảnh hưởng của các chất ức chế sự hình thành AGE 15

4.3 Ảnh hưởng của điều kiện nấu nướng lên sự hình thành AGE trong thực phẩm 16

CHƯƠNG II CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG AGE 17

1 Các phương pháp định lượng AGE 17

1.1 Phương pháp phân tích dụng cụ 17

1.2 Phương pháp hóa miễn dịch 18

Trang 5

2 Vấn đề lựa chọn chất chỉ điểm (marker) trong định lượng AGE 19

CHƯƠNG III ẢNH HƯỞNG CỦA AGE LÊN SỨC KHỎE CON NGƯỜI 21

1 Cơ chế tác động của AGE 21

1.1 Sự phá vỡ cấu trúc và tạo liên kết chéo với các protein 21

1.2 Tương tác với các receptor 22

1.2.1 Receptor RAGE 22

1.2.2 Receptor AGER1 26

2 Ảnh hưởng của AGE đến một số tình trạng bệnh lý 28

2.1 Ảnh hưởng của AGE lên các biến chứng đái tháo đường (ĐTĐ) 28

2.2 Ảnh hưởng của AGE lên bệnh lý võng mạc 28

2.3 Ảnh hưởng của AGE lên bệnh đục thủy tinh thể 29

2.4 Ảnh hưởng của AGE lên bệnh lý thận 30

2.5 Ảnh hưởng của AGE lên các bệnh lý thần kinh 31

2.6 Ảnh hưởng của AGE lên bệnh lý tim mạch 32

2.7 Ảnh hưởng của AGE lên tình trạng lão hóa da 33

2.7.1 Ảnh hưởng của AGE lên các protein cấu trúc nền ngoại bào 33

2.7.2 Ảnh hưởng của AGE lên các protein nội bào 34

2.7.3 Ảnh hưởng của AGE lên tế bào da 34

CHƯƠNG IV CÁC BIỆN PHÁP XỬ LÝ TÁC ĐỘNG BẤT LỢI LÊN SỨC KHỎE CỦA AGE 36

1 Thiết kế chế độ ăn và lựa chọn phương pháp chế biến hợp lý 36

2 Tăng cường rèn luyện thể chất 39

3 Các chiến lược phân tử để hạn chế tác động bất lợi của AGE 40

3.1 Các chất ức chế sự tạo thành AGE 40

3.1.1 Các chất chống oxi hóa 40

3.1.2 Các chất tạo phức với ion kim loại 41

3.1.3 Các chất bắt giữ các hợp chất dicarbonyl hoạt động 42

3.2 Các chất phá vỡ và tăng thanh thải AGE 44

3.3 Liệu pháp nhắm đích RAGE 45

Trang 6

CHƯƠNG V BÀN LUẬN 47

1 Về nguồn gốc, cấu trúc và sự hình thành các AGE 47

2 Về các phương pháp định lượng AGE 49

3 Về ảnh hưởng của AGE lên sức khỏe con người và các biện pháp xử lý tác động bất lợi của AGE 50

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO

Trang 7

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT

receptor

Thụ thể của sản phẩm glycat hóa bền vững

bFGF Basic fibroblast growth factor Yếu tố tăng trưởng nguyên

bào sợi cơ bản

DOLD Deoxyglucosone lysine dimer Deoxyglucoson lysin dimer

ELISA Enzyme-linked immunosorbent

assay

Phương pháp hấp phụ miễn dịch liên kết enzym

ERK Extracellular signal regulated

kinase

Kinase điều tiết bởi tín hiệu ngoại bào

Trang 8

esRAGE Endogenous secretory RAGE RAGE bài tiết nội sinh

HDL High density lipoprotein Lipoprotein tỷ trọng cao HPLC High performance liquid

chromatography

Sắc ký lỏng hiệu năng cao

ICAM-1 Intracellular adhesion molecule

MOLD Methylglyoxal lysine dimer Methylglyoxal lysin dimer mRNA Messenger ribonucleotide acid ARN thông tin

dinucleotide

Nicotinamid adenin dinucleotid

NADPH Nicotinamide adenine

dinucleotide phosphate

Nicotinamid adenin dinucleotid phosphat

Trang 9

Nrf2 Nuclear factor

(erythroid-derived 2)-like 2

Yếu tố nhân 2 kiểu có nguồn gốc từ dòng tế bào hồng cầu

2 PPAR-γ Peroxisome proliferator

RCS Reactive carbonyl species Gốc carbonyl hoạt động

SIRT1 NAD-dependent deacetylase

sirtuin 1

Deacetylase sirtuin 1 phụ thuộc NAD

VEGF Vascular endothelial growth

factor

Yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu

Trang 10

2 Các thử nghiệm lâm sàng với chế độ ăn hạn chế AGE 37

3 Ví dụ về các loại thực phẩm chứa AGE hàm lượng cao và thấp 38

DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ

1 Sơ đồ tóm tắt ba giai đoạn của phản ứng Maillard cổ điển: giai

đoạn sớm, giai đoạn trung gian và giai đoạn muộn

3

3 Cấu trúc và sự hình thành các AGE do sự chuyển vị sản phẩm

Amadori

6

4 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ glyoxal in vivo 8

5 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ methylglyoxal in vivo 10

6 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ 3-deoxyglucoson in vivo 11

7 Cấu trúc của RAGE nguyên dạng và các biến thể của nó 23

8 Cơ chế tác dụng của tương tác AGE-RAGE thông qua hoạt hóa

con đường p21ras và MAPK

24

9 Cơ chế tác động của AGER1 qua trung gian nhập bào và điều hòa

ngược con đường truyền tín hiệu do tương tác AGE-RAGE

27

Trang 11

ĐẶT VẤN ĐỀ

Một nhóm các chất chuyển hóa bất thường đã được nghiên cứu kỹ lưỡng bởi các nhà khoa học trên khắp thế giới trong hơn ba thập kỷ qua là các sản phẩm glycat hóa bền vững, được biết đến rộng rãi với tên viết tắt AGE (advanced glycation endproduct) AGE là sản phẩm của phản ứng không cần xúc tác enzym, diễn ra giữa đường với các phân tử sinh học khác như protein, acid nucleic [63] Bên cạnh nguồn gốc nội sinh liên quan tới các quá trình chuyển hóa và lão hóa, một lượng đáng kể các AGE trong cơ thể còn có nguồn gốc ngoại sinh, đặc biệt là từ thức ăn [12].Các công trình nghiên cứu trên thế giới về AGE trong khoảng 30 năm qua đã tìm hiểu nhiều về cấu trúc, cơ chế và các yếu tố ảnh hưởng tới sự hình thành AGE trong cơ thể cũng như trong thực phẩm Bên cạnh đó, các kết quả nghiên cứu đã làm rõ các con đường hóa sinh phân tử mà qua đó AGE gây ra các tác hại cho cơ thể đến mức

độ tế bào Trên cơ sở các hiểu biết này, các nhà khoa học đã tìm ra các hợp chất thiên nhiên và một số thuốc có thể loại bỏ hay hạn chế tác hại của AGE, giúp phục vụ cho công tác chăm sóc sức khỏe và điều trị một số bệnh lý liên quan

Kế thừa các thành quả nghiên cứu trên thế giới về AGE, trong những năm gần đây ở Việt Nam bắt đầu có một số nghiên cứu khám phá các hợp chất nguồn gốc từ dược liệu có khả năng loại bỏ tác hại của các AGE nhằm phục vụ cho công tác phòng

và điều trị bệnh Để góp phần tạo nền tảng hiểu biết cơ bản cho các nghiên cứu phát

triển thuốc đó, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài “Tổng quan về các sản phẩm

glycat hóa bền vững AGE (advanced glycation endproduct)” với các mục tiêu sau:

1 Tìm hiểu về nguồn gốc, cấu trúc, sự hình thành và phương pháp xác định các sản phẩm glycat hóa bền vững AGE

2 Tìm hiểu về các ảnh hưởng bất lợi của AGE lên sức khỏe con người và các biện pháp xử lý tác hại của chúng

Trang 12

CHƯƠNG I NGUỒN GỐC, CẤU TRÚC VÀ SỰ HÌNH THÀNH CÁC SẢN

PHẦM GLYCAT HÓA BỀN VỮNG AGE

1 Khái niệm và sơ lược lịch sử nghiên cứu về AGE

Theo quan điểm hóa học, sản phẩm glycat hóa bền vững AGE là tên gọi của một nhóm các hợp chất có cấu trúc phức tạp và không đồng nhất được tạo thành từ phản ứng glycat hóa theo các cơ chế khác nhau, có nguồn gốc nội sinh hoặc ngoại sinh Phản ứng glycat hóa là phản ứng không cần xúc tác enzym diễn ra giữa đường khử (ví dụ glucose) với protein, lipid hay acid nucleic [4, 63] Cần phân biệt giữa phản ứng glycat hóa với phản ứng glycosyl hóa- đây là loại phản ứng có enzym xúc tác

Sự hình thành các AGE được mô tả lần đầu tiên trên thực phẩm bởi Maillard vào năm 1912, có liên quan mật thiết tới phản ứng nâu hóa thực phẩm (do đó còn gọi là phản ứng Maillard) Đây là quá trình tạo thành sản phẩm màu vàng nâu đặc trưng khi đun nóng protein với đường, xảy ra khi chế biến thực phẩm ở nhiệt độ cao [26] Cơ chế hóa học của phản ứng này được mô tả lần đầu tiên bởi Hodge vào năm 1953 [26] Trong suốt nhiều năm, các nghiên cứu về phản ứng Maillard tập trung chủ yếu trên thực phẩm, khi nó xảy ra trong quá trình chế biến, bảo quản và đóng vai trò quan trọng tạo nên màu sắc, hương vị và giá trị dinh dưỡng cho thực phẩm [81]

Protein glycat hóa nội sinh đầu tiên được phát hiện bởi Kunkel và Wallenius vào năm 1955 (hemoglobin glycat hóa HbA1C, trong đó đơn phân valin N-tận phản ứng với glucose để tạo thành N-α-fructosylvalin) Tuy nhiên phải đến tận những năm

1980, khi mà các nghiên cứu sơ khai của Monnier và Cerami đã phát hiện ảnh hưởng của sự glycat hóa protein lên các bệnh lý liên quan tới sự lão hóa thì sự quan tâm đối

với các AGE trong cơ thể người và quá trình glycat hóa các protein in vivo mới thực

sự tăng lên Kể từ đó, ngày càng có nhiều hiểu biết chi tiết hơn về các cơ chế hình thành cũng như mối liên quan của sự tích lũy AGE với các tình trạng bệnh lý khác nhau [81]

Trang 13

2 Cấu trúc hóa học và sự hình thành AGE

2.1 Phản ứng Maillard và vai trò đối với sự hình thành AGE

Quá trình glycat hóa diễn ra theo các cơ chế hết sức phức tạp, trong đó một con đường có vai trò quan trọng đối với sự hình thành các AGE đã được biết đến sớm nhất là con đường của phản ứng Maillard cổ điển

Phản ứng Maillard là một quá trình đa bước bao gồm các bước phản ứng đơn giản và phức tạp, có thể tạo thành rất nhiều sản phẩm khác nhau bao gồm các hợp chất thơm, các chất màu và các AGE [59] Quá trình phản ứng có thể được chia thành

3 giai đoạn: giai đoạn sớm, giai đoạn trung gian và giai đoạn muộn (Hình 1)

Hình 1 Sơ đồ tóm tắt ba giai đoạn của phản ứng Maillard cổ điển: giai đoạn

sớm, giai đoạn trung gian và giai đoạn muộn [64].

Trang 14

Trong giai đoạn sớm, nhóm carbonyl ái điện tử trong phân tử glucose (hoặc đường khử như fructose, pentose, galactose) phản ứng với nhóm amino tự do của các amin sinh học (đặc biệt là các nhóm amin của lysin và arginin) để tạo thành dẫn chất carbinolamin, chất này sau đó loại nước tạo thành một hợp chất imin kém ổn định gọi

là base Schiff Ở điều kiện sinh lý hay ở nhiệt độ phòng, base Schiff trải qua sự chuyển

vị tự phát tạo ra sản phẩm ketoamin không màu bền vững hơn gọi là sản phẩm Amadori [81] Sự tạo thành các sản phẩm Amadori diễn ra thuận lợi ở pH kiềm và khi có mặt ion phosphat Giai đoạn tạo thành base Schiff và sản phẩm Amadori là thuận nghịch [81]

Trong giai đoạn trung gian, sản phẩm Amadori thoái hóa thành các hợp chất dicarbonyl có khả năng phản ứng cao như glyoxal (GO), methylglyoxal (MGO) và 3-deoxyglucoson (3-DG) thông qua các phản ứng loại nước, oxi hóa- khử, polymer hóa và các phản ứng khác [64] Các sản phẩm của giai đoạn trung gian là các dẫn chất không màu hoặc có màu vàng, có độ không bão hòa cao và rất dễ trùng hiệp hóa [78] Nhìn chung, các sản phẩm Amadori có thể tạo ra các α-dicarbonyl chủ yếu qua sự phân cắt oxi hóa hoặc phân cắt retro-aldol Sự phân cắt oxi hóa được xúc tác bởi các ion kim loại chuyển tiếp [81]

α-Trong giai đoạn cuối cùng hay giai đoạn muộn, các hợp chất AGE được tạo thành không thuận nghịch thông qua các phản ứng oxi hóa, loại nước và đóng vòng, enol hóa, phân cắt [64]

Quá trình glycat hóa diễn ra phụ thuộc nồng độ trong giai đoan sớm thay vì giai đoạn cuối của phản ứng Maillard, do đó sự glycat hóa tăng lên trong điều kiện đường huyết tăng [54] Nếu sự oxy hóa đi kèm sự glycat hóa thì sản phẩm tạo thành được

gọi là các sản phẩm glycoxi hóa bền vững (advanced glycoxydation endproducts) Ví

dụ điển hình cho các hợp chất này là pentosidin và carboxymethyllysin (CML) [63] Thực tế cho thấy sự tạo thành các AGE không chỉ đi theo ba giai đoạn phức tạp của phản ứng Maillard với sự tham gia của nhóm carbonyl từ đường khử và nhóm amino của protein mà còn có thể có nguồn gốc từ các tiền chất khác như lipid, amino acid, acid nucleic [78] Từ hình 2 có thể thấy có hai con đường chủ yếu dẫn tới sự

Trang 15

hình thành AGE Con đường đầu tiên liên quan tới sự chuyển vị không thuận nghịch các sản phẩm Amadori bằng con đường oxi hóa hoặc con đường không oxi hóa Các AGE được tạo ra trực tiếp từ sản phẩm Amadori mà không trải qua các giai đoạn trung gian và giai đoạn cuối của phản ứng Maillard Con đường thứ hai liên quan tới

sự ngưng tụ chuỗi bên của lysin, cystein và arginin với các hợp chất dicarbonyl được tạo ra từ sự enol hóa các sản phẩm Amadori cũng như thoái hóa trực tiếp từ đường, lipid hay amino acid [78]

Hình 2 Các con đường khác nhau tạo thành các AGE [78]

Hình 2 cũng cho thấy vai trò trung tâm của các hợp chất dicarbonyl hoạt động đối với sự hình thành AGE Các α-dicarbonyl này có thể được xem là “trạm trung chuyển” mà qua đó glucose có thể tiếp tục tạo thành AGE bằng phản ứng Maillard

cổ điển, con đường polyol cũng như từ các nhân tố in vivo như sự chuyển hóa thể

ceton, threonin và sự peroxy hóa lipid [63] Các α-dicarbonyl có thể được tạo ra từ

Trang 16

tất cả các giai đoạn của quá trình glycat hóa, bằng sự thoái hóa glucose hay base Schiff trong giai đoạn glycat hóa sớm hoặc từ các sản phẩm Amadori như fructosamin trong giai đoạn glycat hóa trung gian [73]

2.2 Cấu trúc và sự hình thành AGE do sự chuyển vị sản phẩm Amadori

Hình 3 Cấu trúc và sự hình thành các AGE do sự chuyển vị sản phẩm

Amadori [81]

Hình 3 cho thấy fructose hoặc glucose khi ngưng tụ với lysin chuỗi bên tạo ra sản phẩm cộng N-ε-fructosyl lysin hoặc N-ε-glucosyl lysin Ở pH sinh lý, N-ε-fructosyl

lysin có thể tiếp tục oxi hóa tạo ra N-ε-carboxymethyllysin (CML) và acid erythronic

[81].N- ε-glucosyl lysin có thể phản ứng với arginin chuỗi bên tạo ra sản phẩm cộng

liên kết chéo không phát huỳnh quang hai vòng glucosepan, cơ chế tạo thành của nó

vẫn còn chưa rõ ràng [65] Sản phẩm Amadori nguồn gốc pentose có thể trải qua các

phản ứng tương tự tạo thành sản phẩm cộng phát huỳnh quang pentosidin [10]

Trang 17

Các sản phẩm Amadori nguồn gốc glucose và lysin có thể phản ứng tiếp với đơn phân lysin thứ hai tạo thành ba sản phẩm cộng pyrrolopyridinium liên kết chéo phát

huỳnh quang, đó là vesperlysin A, B và C Bên cạnh đó, các sản phẩm Amadori này

còn có thể phản ứng với nhau để tạo thành các sản phẩm cộng liên kết chéo dimer (tạo thành trực tiếp hoặc thông qua chất trung gian 1,4-dideoxy-5,6-dioxoglucoson) Trong trường hợp các dimer tạo thành trực tiếp, chúng tạo thành sản phẩm cộng

imidazolium GLUCOLD Trường hợp thông qua chất trung gian, sản phẩm cộng crosslin sẽ được tạo thành [81].

2.3 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ các hợp chất dicarbonyl

2.3.1 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ glyoxal (GO)

2.3.1.1 Nguồn gốc của glyoxal

Glyoxal là dicarbonyl đơn giản nhất, có thể có nguồn gốc ngoại sinh từ thức ăn

và môi trường (như khói thuốc lá hay khói xe cộ) lẫn nguồn nội sinh liên quan tới nhiều phản ứng oxi hóa và chuyển hóa khác nhau [81]

Về nguồn ngoại sinh, tất cả các thực phẩm được chế biến bằng cách lên men, nướng hay rang, rán đều là các nguồn giàu GO [81] Về nguồn nội sinh, GO được tạo

ra chủ yếu từ đường và lipid GO được tạo thành từ đường thông qua hai con đường chính Thứ nhất là các phản ứng tự oxi hóa, được thúc đẩy khi có mặt phosphat và ion kim loại chuyển tiếp, mặc dù sự chuyển đổi trực tiếp đường thành glyoxal có thể thông qua phân cắt retro-aldol Con đường thứ hai thông qua phản ứng Maillard và xảy ra từ sự enol hóa sản phẩm Amadori [81] Bên cạnh đó, GO cũng có thể được tạo thành từ sự peroxi hóa lipid, ví dụ sự oxi hoá các các acid béo không bão hòa đa như acid linoleic và acid linolenic [90]

2.3.1.2 Các AGE nguồn gốc glyoxal

Glyoxal phản ứng với lysin tạo ra N-ε-carboxymethyllysin (CML) thông qua sản

phẩm trung gian aldimin Phản ứng của glyoxal với arginin chuỗi bên tạo thành hai hợp chất trung gian dihydroimidazolidin G-DH1 và G-DH2 Hai hợp chất trung gian

này có thể mở vòng tạo ra sản phẩm cộng carboxymethylarginin (CMA) hoặc loại nước tạo ra ba dẫn chất imidazolon khác nhau G-H1, G-H2 và G-H3 [81]

Trang 18

Hình 4 Cấu trúc và sự hình thành các AGE từ glyoxal in vivo [81]

Glyoxal cũng có thể phản ứng với hai đơn phân lysin và arginin thu được các sản phẩm cộng imidazol liên kết chéo Khi phản ứng với hai phân tử lysin tạo thành

glyoxal lysin dimer (GOLD) Phản ứng liên kết chéo giữa arginin, lysin và glyoxal tạo thành sản phẩm GODIC, trong đó lysin phản ứng đầu tiên với glyoxal tạo hợp

chất trung gian imin sau đó phản ứng tiếp với nhóm guanidin của arginin, loại nước

để tạo thành sản phẩm cuối cùng Hai đơn phân lysin cũng có thể phản ứng với

glyoxal thông qua thoái phân Strecker tạo thành sản phẩm cộng amid GOLA [81]

2.3.2 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ methylglyoxal (MGO)

2.3.2.1 Nguồn gốc của methylglyoxal

Methylglyoxal có mặt trong hầu hết các loại thực phẩm, hàm lượng của chúng trong thực phẩm tăng lên sau các quá trình nấu nướng, lên men và bảo quản kéo dài [81] Trong thực phẩm và đồ uống, MGO chủ yếu có nguồn gốc từ đường và lipid [81] Bảo quản trong thời gian dài có thể thoái hóa đường tạo thành MGO đặc biệt

Trang 19

khi thực phẩm có hàm lượng cao các carbohydrat đơn giản Lipid có thể thoái hóa tạo

ra MGO thông qua quá trình đun nóng và quang thoái hóa [81] Tương tự như glyoxal, MGO cũng có thể có nguồn gốc từ môi trường như khói thuốc lá hay từ nước mưa [21]

Các nguồn nội sinh của MGO liên quan tới các con đường khác nhau và có thể chia thành các phản ứng có và không có xúc tác enzym Con đường chính tạo thành MGO bao gồm sự thoái hóa có enzym và không có enzym của các hợp chất trung gian triose phosphat (glyceraldehyd-3-phosphat và dihydroxyaceton phosphat) có nguồn gốc từ quá trình gluco phân MGO cũng có thể tạo thành thông qua phản ứng

Maillard in vivo trong điều kiện sinh lý [81]

Lipid có thể tham gia tạo thành MGO thông qua sự chuyển hóa thể ceton nhờ hệ cytochrom P450 2E1 qua trung gian acetol Glycerol có nguồn gốc từ sự thủy phân triacylglycerol có thể chuyển thành MGO thông qua trung gian glycerolphosphat được tạo thành nhờ glycerol kinase đặc hiệu Threonin và glycin cũng có thể tạo thành MGO thông qua trung gian aminoaceton [81]

2.3.2.2 Các AGE nguồn gốc methylglyoxal

MGO phản ứng với arginin thu được các sản phẩm cộng imidazolon đóng vòng, cấu trúc khác nhau phụ thuộc vào nguyên tử nitơ tham gia đóng vòng và pH môi

trường MG-H1, MG-H2 và MG-H3 Các sản phẩm này có thể mở vòng tạo ra sản phẩm cộng carboxyethylarginin (CEA) Các sản phẩm cộng imidazolon trên còn có thể cộng hợp thêm một phân tử MGO thứ hai tạo ra hoặc THP hoặc argpyrimidin

[81]

MGO phản ứng với đơn phân lysin tạo ra carboxyethyllysin (CEL) thông qua

trung gian aldimid Hợp chất trung gian aldimid còn có thể phản ứng với nhóm guanidin arginin thu được hợp chất trung gian đóng vòng, sau khi loại nước và chuyển

vị tạo ra hợp chất cộng imidazol liên kết chéo MODIC [81]

Khi phản ứng với hai đơn phân lysin MGO tạo ra sản phẩm trung gian ban đầu diimin sau đó thêm tiếp một phân tử MGO thứ hai tạo thành sản phẩm cộng

imidazolium MOLD [57]

Trang 20

Hình 5 Cấu trúc và sự hình thành các AGE từ methylglyoxal in vivo [81] 2.3.3 Cấu trúc và sự hình thành AGE từ 3-deoxyglucoson (3-DG)

2.3.3.1 Nguồn gốc của 3-deoxyglucoson

3-Deoxyglucoson có cả nguồn gốc ngoại sinh lẫn nội sinh Về nguồn ngoại sinh của 3-DG, tất cả thực phẩm có hàm lượng đường cao và trải qua các quá trình nấu nướng, ủ chín hoặc lên men đều là các nguồn cung cấp đáng kể lượng 3-DG, đặc biệt

là các đồ uống không cồn chứa hàm lượng đường lớn dưới dạng monosaccharid như glucose và fructose [24, 81]

DG nội sinh chủ yếu có nguồn gốc từ sự chuyển vị các sản phẩm Amadori

3-DG còn có thể được tạo ra nội sinh thông qua con đường polyol, trong đó 3-3-DG được tạo ra bởi sự oxi hóa fructose không enzym Quá trình này cũng có thể bắt đầu từ glucose thông qua trung gian sorbitol nhờ hoạt tính xúc tác của aldose reductase và sorbitol dehydrogenase 3-DG cũng có thể được tạo thành từ sự thủy phân fructose-3-phosphat, sản phẩm này tạo ra từ fructose nhờ xúc tác fructosamin-3-kinase [81]

Trang 21

2.3.3.2 Các AGE nguồn gốc 3-deoxyglucoson

Hình 6 Cấu trúc và sự hình thành các AGE từ 3-deoxyglucoson in vivo [81]

3-DG phản ứng nhanh với các đơn phân protein tạo thành các cấu trúc AGE khác nhau, trong đó AGE cấu trúc imidazolon và carboxymethyllysin là phổ biến nhất [39]

Sản phẩm cộng hợp phổ biến nhất giữa 3-DG và lysin là carboxymethyllysin (CML)

[81] Khi phản ứng với đơn phân lysin 3-DG còn có thể tạo thành sản phẩm cộng

chứa nhân pyrrol gọi là pyrralin [81] 3-DG tấn công dễ dàng vào đơn phân arginin

tạo thành dẫn chất dihydroimidazolon, sau đó loại nước tạo thành sản phẩm cộng

imidazolon cuối cùng 3DG-H1, 3DG-H2, 3DG-H3 [81]

Về các sản phẩm cộng liên kết chéo, 3-DG có thể phản ứng với hai đơn phân

lysin để tạo ra 3-deoxyglucoson lysin dimer DOLD Ngoài ra 3-DG có thể liên kết

chéo với arginin và lysin tạo sản phẩm cộng imidazol tồn tại dưới dạng hỗn hợp hai

Trang 22

đồng phân không đối quang với tên gọi DOGDIC 3-DG khi phản ứng với hai đơn phân lysin tạo thành sản phẩm cộng liên kết chéo lysyl-pyrropyridin [81]

3 Nguồn gốc của các AGE trong cơ thể

Hai nguồn quan trọng đóng góp vào lượng AGE tổng số trong cơ thể bao gồm nguồn nội sinh liên quan tới các quá trình chuyển hóa bình thường và quá trình lão hóa của cơ thể và nguồn ngoại sinh Các AGE nguồn gốc ngoại sinh chủ yếu có mặt trong thức ăn và thuốc lá Hàm lượng AGE trong thức ăn tăng lên sau các quá trình chế biến và bảo quản thực phẩm

3.1 Các AGE có nguồn gốc nội sinh

Phản ứng glycat hóa nội sinh xảy ra trong tất cả các mô và dịch cơ thể dưới điều kiện sinh lý, ở nhiệt độ thấp hơn so với ở thực phẩm và do đó số hợp chất AGE được tìm thấy cũng ít đa dạng hơn [59] Trên thực tế, người ta đã phát hiện hàng chục sản phẩm glycat hóa nội sinh và có thể chia chúng thành 3 nhóm: 1) AGE liên kết chéo phát huỳnh quang như pentosidin và crosslin; 2) AGE liên kết chéo không phát huỳnh quang như imidazolium dilysin liên kết chéo (MOLD, GOLD), arginin-lysin imidazol liên kết chéo (MODIC, GODIC); 3) AGE không liên kết chéo như pyrralin và CML [64] Trong số đó, CML là AGE được tìm thấy phổ biến nhất và được nghiên cứu kỹ

lưỡng nhất trong điều kiện in vivo, nó được mô tả lần đầu tiên bởi Ahmed vào năm

1986 [3] Cần lưu ý rằng quá trình glycat hóa hemoglobin tạo thành HbA1C trước kia được mô tả như một sản phẩm Amadori nhưng nó không phải là một AGE [63] Quá trình glycat hóa nội sinh xảy ra kéo dài hàng tuần trong cơ thể, do đó nó thường tác động lên cấu trúc và chức năng của các protein có tuổi thọ dài Các thành phần cấu trúc của mô liên kết hay màng cấu trúc như collagen, elastin là các ví dụ điển hình, tuy nhiên cũng có thể bao gồm cả myelin, C3 bổ thể, tubulin, chất hoạt hóa plasminogen và fibrinogen Trong hội chứng tăng urê huyết có liên quan với sự tích lũy AGE với nồng độ cao thì ngay cả những chất có tuổi thọ ngắn như các hợp phần lipid và acid nucleic cũng bị ảnh hưởng [63]

Trang 23

3.2 Các AGE có nguồn gốc ngoại sinh

Bên cạnh nguồn AGE nội sinh, các bằng chứng chỉ ra rằng các AGE ngoại sinh cũng là yếu tố đóng góp quan trọng vào lượng AGE trong cơ thể, nơi mà chúng không thể nào được phân biệt với AGE nội sinh cả về cấu trúc và chức năng [12] Mặc dù vai trò của khói thuốc lá trong các bệnh lý mạch máu đã được thừa nhận rộng rãi, vai trò thực sự của AGE ngoại sinh đóng góp vào quá trình này chưa thực sự được biết

rõ Tuy nhiên các AGE nguồn gốc từ thuốc lá đã được tìm thấy trong crystallin thủy tinh thể và các mảng xơ vữa động mạch vành [63]

Các AGE ngoại sinh chủ yếu có nguồn gốc từ thực phẩm, sự tạo thành chúng có liên quan tới các quá trình chế biến và bảo quản thực phẩm, đặc biệt là khi chế biến

ở nhiệt độ cao Nhìn chung, các loại thịt chế biến sẵn và sản phẩm thay thế thịt cũng như các loại thưc phẩm giàu chất béo và protein, trải qua quá trình chế biến phức tạp

là các nguồn thực phẩm có hàm lượng AGE cao [59] Các AGE tiêu thụ từ thức ăn được hấp thu vào cơ thể với tỷ lệ khoảng 10% Sau khi được hấp thu vào máu, chúng liên kết với các protein huyết thanh, lưu hành trong tuần hoàn và lắng đọng tại các

mô giống như các AGE nội sinh [59]

Tương tự như trường hợp các AGE nội sinh, CML cũng là AGE phổ biến nhất

và được nghiên cứu nhiều nhất trong thực phẩm Bên cạnh CML, nhiều AGE khác

đã được tìm thấy và định lượng trong thực phẩm như pyrralin, pentosidin Thông tin

về hàm lượng các AGE liên kết chéo trong thực phẩm còn hạn chế do các khó khăn

về phân tích và việc thủy phân các protein bị AGE hóa [59]

4 Các yếu tố ảnh hưởng tới sự hình thành AGE

Sự hình thành các AGE nói chung và phản ứng Maillard nói riêng chịu tác động bởi rất nhiều yếu tố Bên cạnh yếu tố thuộc về bản chất cấu tạo của tác nhân tham gia phản ứng, sự hình thành các AGE còn liên quan tới sự có mặt của các tác nhân xúc tác như ion kim loại chuyển tiếp hay phosphat, các tác nhân ức chế như các chất chống oxi hóa Sự tạo thành AGE nội sinh được điều khiển bởi rất nhiều yếu tố phức tạp nằm ngoài phạm vi của tổng quan này, tuy nhiên có thể kể đến cấu trúc, tuổi thọ protein bị AGE hóa hay vai trò của các hệ enzym Đối với sự tạo thành AGE từ thức

Trang 24

ăn, bên cạnh bản chất, thành phần của thực phẩm thì việc xử lý chế biến thực phẩm cũng có vai trò quan trọng, sẽ được bàn kỹ trong phần này

4.1 Ảnh hưởng của các tác nhân tham gia phản ứng Maillard

Trong phản ứng Maillard một nhóm amin từ amin, amino acid, peptid hoặc protein, nucleotid phản ứng với một nhóm carbonyl có mặt trong đường khử, lipid bị oxi hóa, vitamin C hoặc quinon [59]

Vị trí và cấu trúc nhóm amin ảnh hưởng đáng kể tới khả năng tham gia phản ứng glycat hóa Những vị trí glycat hóa quan trọng là mạch nhánh lysin, nhóm amino N-tận và nhóm arginyl guanidin của protein, base guanyl của nucleotid và nhóm amino của phosphatidylethanolamin và phosphatidylserin Về nguyên tắc, tất cả các vị trí đó đều có có thể tham gia phản ứng glycat hóa nhưng những nhóm amino và guanidino

có tính base mạnh và các nucleotid không bắt cặp base sẽ nhạy cảm hơn Do đó, nhóm amin bậc 1của mạch nhánh lysin có hoạt tính phản ứng mạnh nhất trong protein [59] Nguồn gốc nhóm amino tham gia tạo thành các AGE ảnh hưởng lên trọng lượng phân tử của sản phẩm tạo thành Người ta phân chia các AGE thành nhóm phân tử lượng thấp LMW AGE (low molecular weight AGE) và nhóm phân tử lượng cao HMW AGE (high molecular weight AGE), tuy nhiên ranh giới chính xác giữa các HMW và LMW AGE không thực sự rõ ràng Nhìn chung, các HMW AGE thường

có nguồn gốc từ protein trong khi các LMW AGE chủ yếu có nguồn gốc từ các amin

tự do, peptid và amino acid [59]

Nhóm carbonyl tham gia phản ứng Maillard thường là của đường khử, có thể kể đến các monosaccharid (glucose, fructose), disaccharid khử (maltose và lactose), oligo và polysaccharid cũng như các pentose khử (ví dụ trong thịt) [59] Khả năng phản ứng của các monosaccharid có liên quan trực tiếp với tỷ lệ của dạng mở vòng hay dạng khử, có thể thay đổi từ 0,0002% đối với glucose tới 0,7% đối với fructose Điều này giúp giải thích tại sao glucose với độ ổn định cao của dạng đóng vòng pyranose là loại đường có khả năng phản ứng kém nhất Fructose dạng đóng vòng furanose kém ổn định hơn có khả năng phản ứng cao hơn glucose khoảng 7,5 lần [60, 81] Các sản phẩm chuyển hóa của fructose như fructose-6-phosphat hay

Trang 25

glyceraldehyd-3-phosphat có khả năng phản ứng rất cao, gấp 200 lần so với glucose [81] Mặc dù có hoạt tính phản ứng thấp nhưng glucose đóng góp đáng kể vào sự glycat hóa protein do nó có thể chuyển thành fructose thông qua con đường polyol Bên cạnh tỷ lệ dạng đường mở vòng, các yếu tố khác ảnh hưởng lên khả năng phản ứng Maillard bao gồm độ dài của đường, hoạt tính nội tại của các nhóm chức Các aldose hoạt động hơn ketose vì nhóm aldehyd dễ tiếp cận hơn và ái điện tử hơn so với nhóm keton [81]

4.2 Ảnh hưởng của các chất ức chế sự hình thành AGE

Quá trình glycat hóa liên quan tới hàng loạt phản ứng tuần tự và song song, với

sự tham gia trực tiếp và xúc tác của nhiều tác nhân khác nhau Hiểu biết đầy đủ về quá trình này cho phép chúng ta tìm ra các chất có khả năng kiểm soát sự tạo thành AGE để ứng dụng làm thuốc điều trị trên lâm sàng Nhiều hợp chất thiên nhiên hoặc tổng hợp khác nhau đã được kiểm tra khả năng ức chế hay đảo ngược sự glycat hóa Chúng tác động lên quá trình hình thành AGE theo một, hai hoặc đồng thời cả ba cơ chế: chống oxi hóa, tạo phức với các ion kim loại và thu dọn các hợp chất trung gian carbonyl hoạt động

Các chất chống oxi hóa như các polyphenol, vitamin C, vitamin E có thể bảo vệ chống lại sự phá vỡ cấu trúc protein gây ra bởi sự thoái hóa oxi hóa các sản phẩm Amadori thành AGE và hạn chế sự phân cắt đường từ đó hạn chế tạo thành các hợp chất α-dicarbonyl hoạt động hóa học như GO và MGO [5, 59]

Các chất tạo phức với ion kim loại chuyển tiếp có khả năng khóa các ion này và làm mất khả năng xúc tác của chúng đối với các phản ứng glycat hóa nâng cao liên quan tới cơ chế oxi hóa [5]

Các chất thu dọn các hợp chất dicarbonyl hoạt động có khả năng phản ứng với các gốc carbonyl này, bất hoạt và thúc đẩy sự thải trừ chúng khỏi cơ thể, qua đó làm giảm nguồn cung cấp tiền chất cho sự tạo thành AGE Các hợp chất tác động theo cơ chế này rất phong phú và nhận được nhiều sự quan tâm nghiên cứu nhất

Về các chất ức chế tạo thành AGE sẽ được bàn thêm chi tiết trong Chương IV Các biện pháp xử lý tác động bất lợi lên sức khỏe của AGE

Trang 26

4.3 Ảnh hưởng của điều kiện nấu nướng lên sự hình thành AGE trong

thực phẩm

Mức độ tạo thành và sự đa dạng của các AGE trong thực phẩm phụ thuộc vào nhiều yếu tố liên quan tới bản chất, thành phần của thực phẩm và các điều kiện trong quá trình chế biến chúng

Thời gian phản ứng, nhiệt độ quá trình, nồng độ các tác nhân phản ứng, sự có mặt của nước và pH là các yếu tố có ảnh hưởng quyết định lên mức độ của phản ứng Maillard diễn ra trong quá trình nấu nướng Theo kinh nghiệm, mức độ và tốc độ phản ứng Maillard ít nhất tăng gấp đôi khi nhiệt độ tăng thêm 10oC [59] Các yếu tố như hàm lượng nước và pH cũng có ảnh hưởng đáng kể lên sự tạo thành các sản phẩm của phản ứng Maillard Mức độ phản ứng Maillard tăng theo cấp số nhân khi hàm lượng nước tăng lên và đạt tối đa ở khoảng hàm lượng nước trung bình (hoạt độ của nước aw 0,4-0,7) do nó làm tăng sự linh động của các tác nhân phản ứng [59] Khi hàm lượng nước cao hơn, mức độ phản ứng giảm xuống do sự pha loãng các tác nhân phản ứng Nước đồng thời là sản phẩm phản ứng do đó theo nguyên tắc chuyển khối điều kiện hàm lượng nước cao có thể làm giảm mức độ phản ứng [59] pH ban đầu của các tác nhân phản ứng và dung lượng đệm của hệ ảnh hưởng cả lên mức độ và hướng của phản ứng Maillard Phản ứng Maillard diễn ra với mức độ thấp ở pH acid nhưng tăng lên khi pH tăng và đạt tối đa ở khoảng pH 10 Điều này có thể được giải thích là do sự chuyển vị Amadori xảy ra thuận lợi hơn ở môi trường kiềm [59] Nấu nướng thực phẩm ở nhiệt độ cao trong điều kiện khô làm tăng sự tạo thành các AGE trong thực phẩm Mức độ tăng có thể lên gấp hàng trăm lần so với thực phẩm chưa qua chế biến đối với hầu hết các nhóm thực phẩm [59] Tuy nhiên, sự tạo thành AGE giảm đi khi chế biến sử dụng lò vi sóng trong điều kiện độ ẩm cao, thời gian nấu nướng ngắn hơn, nhiệt độ nấu nướng thấp hơn hoặc bằng cách thêm các thành phần có tính acid như nước chanh hay giấm Ví dụ, sự hình thành AGE trong thịt đang chế biến bị ngăn lại bằng cách thêm các dung dịch hay nước xốt có tính acid như nước chanh và giấm [79]

Trang 27

CHƯƠNG II CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG AGE

Các phương pháp quang phổ hoặc huỳnh quang cổ điển giúp phát hiện các hợp chất riêng lẻ hoặc cả nhóm hợp chất có các đặc điểm quang học chung (hấp thụ tia UV-VIS hoặc phát huỳnh quang) [59, 78] Một số quy trình vẫn còn được sử dụng để đánh giá sự tích lũy AGE trong mô do chúng khá đơn giản và không yêu cầu các thiết

bị quá tinh vi hay người phân tích có trình độ cao [78] Gần đây người ta đã phát triển các phương pháp để đo lường nồng độ của AGE một cách trực tiếp trong da không

xâm lấn theo kỹ thuật huỳnh quang Thiết bị quét TrũAge Scanner hoạt động dựa trên

nguyên lý này đã trở thành một công cụ hữu ích cho các xét nghiệm sinh hóa nhằm theo dõi sự tích lũy AGE trong da và đánh giá mức độ lão hóa da [55] Tuy nhiên sử dụng đơn độc detector huỳnh quang không thể phân biệt bản chất của mỗi huỳnh quang cụ thể và có thể không hoàn toàn đặc hiệu đối với AGE [78]

Sắc ký lỏng với các detector khác nhau là công cụ hữu ích cho phân tích các hợp chất AGE nhờ khả năng phân tách hiệu quả rất nhiều hợp chất có cấu trúc hóa học hay tính chất hóa lý khác nhau Sắc ký lỏng hiệu năng cao với detector huỳnh quang được sử dụng để phát hiện các AGE có khả năng phát huỳnh quang như pentosidin

Ví dụ để xác định pentosidin trong nước tiểu, người ta áp dụng sắc ký lỏng pha đảo cặp ion Với detector huỳnh quang phát hiện ở 325 nm và 385 nm cho kích thích và phát xạ, quy trình thích hợp để xác định pentosidin ở nồng độ cỡ pM Đối với các chất không phát huỳnh quang như CML, việc phân tích có thể thực hiện sau bước dẫn

Trang 28

chất hóa tạo sản phẩm có khả năng phát huỳnh quang Các tác nhân dẫn chất hóa thường sử dụng như ortho-phthalaldehyd (OPA) và 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl-carbamat (AQC) [59]

Sắc ký lỏng hiệu năng cao với detector mảng diod HPLC-DAD đã được sử dụng

để phát hiện lượng pyrralin trong các loại thực phẩm nhưng để sử dụng phương pháp này yêu cầu chất phân tích phải có khả năng hấp thụ UV [59] Người ta đã kết hợp nhiều detector với nhau trong một quy trình phân tích nhằm cải thiện tính chọn lọc cho phương pháp, ví dụ kết hợp detector quang phổ với detector huỳnh quang thành một chuỗi Phương pháp này cho phép thực hiện với 60 mẫu/giờ và có thể áp dụng cho phân tích mẫu huyết thanh, nước tiểu, mẫu nước bọt hay da [23]

Sắc ký lỏng hai lần khối phổ LC-MS/MS được sử dụng chủ yếu cho định lượng CML [93, 94] Ưu điểm của phương pháp này là có độ nhạy cao hơn so với sử dụng detector UV hay huỳnh quang và không cần trải qua bước tạo dẫn chất hóa Sắc ký khí- khối phổ GC-MS được sử dụng để định lượng CML trong sữa và thịt Tuy nhiên khi sử dụng GC-MS, cần phải có các dẫn chất có khả năng bay hơi, do đó yêu cầu một bước phụ nữa trước khi phân tích [59]

Kỹ thuật ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay- xét nghiệm hấp phụ miễn dịch liên kết với enzym) đã được sử dụng khá phổ biến để đo lường AGE, bao gồm cả AGE không đặc hiệu lẫn AGE đặc hiệu (chủ yếu là CML) [27, 79] Nguyên tắc chung của phương pháp này dựa trên sự kết hợp đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thể, trong đó kháng thể được gắn với một enzym Khi cho thêm cơ chất thích hợp vào phản ứng, enzym sẽ thủy phân cơ chất thành một chất có màu, thông qua cường độ màu mà biết được nồng độ kháng nguyên hay kháng thể cần phát hiện [2] Phương pháp ELISA cạnh tranh với kháng thể đơn dòng kháng CML đặc hiệu (4G9) được sử đụng để đo lường CML trong nhiều loại thực phẩm, cung cấp số liệu

để thiết lập nên cơ sở dữ liệu về hàm lượng AGE trong thực phẩm [27, 79] Phương pháp ELISA sử dụng kháng thể đơn dòng kháng MGO (3D11 mAb) cũng được sử dụng để thiết lập cơ sở dữ liệu cho hàm lượng MGO trong thực phẩm [59]

Trang 29

Việc sử dụng đơn lẻ phương pháp ELISA có thể đưa đến các kết quả định lượng không thuyết phục Sự khác biệt về kết quả phân tích khi sử dụng các kỹ thuật sắc ký

và phương pháp ELISA có thể lên tới hàng chục lần Theo như kết quả thu được từ phương pháp ELISA, bơ và dầu oliu có chứa lượng CML cao gấp hàng trăm lần so với vỏ bánh mì Điều này khá vô lý do bơ và dầu oliu là các nguồn giàu lipid không thể chứa hàm lượng lớn các dẫn chất của amino acid như vậy [59] Bên cạnh yếu tố

về điều kiện phân tích, có thể một phần nguyên nhân là do phương pháp ELISA không đặc hiệu đối với một AGE riêng lẻ nào mà các thành phần như các tiểu phân chất béo hay các sản phẩm lipoxi hóa bền vững ALE (advanced lipoxidation endproduct) cũng

có thể liên kết với các kháng thể ELISA [78] Việc sử dụng các đơn vị khác nhau khi thể hiện kết quả định lượng AGE bằng kỹ thuật ELISA (kilounit AGE/100g thực phẩm) [79] và LC/MS/MS (mg/kg protein hoặc mg/kg thực phẩm) [34] cũng khiến việc so sánh và thẩm định các phương pháp phân tích gặp nhiều khó khăn

2 Vấn đề lựa chọn chất chỉ điểm (marker) trong định lượng AGE

Để đảm bảo việc định lượng AGE có độ chính xác cao, việc lựa chọn chất chỉ điểm AGE (marker AGE) đóng vai trò hết sức quan trọng, đặc biệt khi đánh giá hàm lượng AGE tổng số hoặc khi đánh giá các mẫu thực phẩm khác nhau Phương pháp phổ biến nhất được sử dụng để xác định hàm lượng AGE trong thực phẩm hay các mẫu sinh học chủ yếu dựa trên một marker riêng lẻ hoặc định lượng AGE tổng số không đặc hiệu bằng phép đo huỳnh quang hay đo màu Việc chỉ sử dụng một marker đơn lẻ để xác định hàm lượng AGE trong thực phẩm có thể dẫn tới sự ước tính thấp hoặc cao hơn lượng AGE thực sự trong thực phẩm Các nguồn dữ liệu hiện nay về hàm lượng AGE trong thực phẩm chủ yếu dựa trên hai marker là CML và furosin để ước tính AGE tổng số [18, 79] Furosin đươc tạo thành khi thủy phân trong môi trường acid sản phẩm Amadori của lysin vì vậy không thể phân biệt được các tiền chất tạo thành các AGE [45] CML có thể có nguồn gốc từ sự oxi hóa lipid cũng như

sự glycat hóa dẫn tới sự ước tính quá cao phản ứng glycat hóa trong thực phẩm với hàm lượng chất béo cao, đặc biệt khi sử dụng kỹ thuật phân tích ELISA [32] Sử dụng marker CML để định lượng AGE trong thịt có thể cho ra các kết quả thấp hơn thực

Trang 30

tế bởi vì thịt giàu arginin Để đánh giá lượng AGE, các marker AGE phải bao gồm

cả loại có nguồn gốc từ arginin và lysin [59]

Một số AGE quan trọng đã được tổng hợp hóa học với hàm lượng từ vài trăm miligam tới vài gam, có thể kể đến CML dưới dạng tinh thể tự do lưỡng tính, các hydroimidazolon nguồn gốc MGO (MG-H1, MG-H2, MG-H3) ở cả dạng liên kết peptid lẫn protein Nhiều AGE khác cũng đã được tổng hợp ở quy mô nhỏ, bao gồm pentosidin, pyrralin, GOLD, MOLD, argpyrimidin, hydroimidazolon nguồn gốc GO, GODIC và MODIC [59] Việc tổng hợp các hợp chất AGE dưới dạng tự do hoặc liên kết cung cấp nguồn chất chuẩn cho các phép phân tích định lượng AGE trong cơ thể hay các thử nghiệm phơi nhiễm với AGE ngoại sinh, do đó hỗ trợ đắc lực cho các

nghiên cứu in vitro lẫn in vivo

Trang 31

CHƯƠNG III ẢNH HƯỞNG CỦA AGE LÊN SỨC KHỎE CON NGƯỜI

1 Cơ chế tác động của AGE

AGE ảnh hưởng tới sức khỏe và gây ra các tình trạng bệnh lý chủ yếu thông qua hai cơ chế riêng biệt Cơ chế thứ nhất liên quan tới sự phá vỡ cấu trúc hoặc hình thành các liên kết chéo với các protein trong cơ thể, qua đó làm thay đổi các đặc tính và chức năng của chúng Cơ chế thứ hai liên quan tới sự tương tác với các receptor AGE

và hoạt hóa các con đường truyền tín hiệu, dẫn tới làm tăng sản xuất các gốc tự do oxi hóa và các cytokin viêm…[59]

1.1 Sự phá vỡ cấu trúc và tạo liên kết chéo với protein

Sự phá vỡ cấu trúc và liên kết chéo với protein bởi AGE là cơ chế quan trọng trong bệnh sinh các biến chứng đái tháo đường bao gồm biến chứng trên mạch máu, võng mạc, thận và thần kinh cũng như các bệnh lý liên quan tới sự lão hóa, đặc biệt

là lão hóa da [26]

Các AGE khi liên kết với các protein trong cơ thể sẽ làm thay đối cấu trúc, do đó ảnh hưởng lên đặc tính và làm mất các chức năng sinh học của chúng Đặc biệt khi AGE tạo thành các mạng lưới liên kết chéo với protein và dẫn đến hình thành các đại phân tử, chúng có thể làm mất đi tính linh hoạt và khả năng tương tác bình thường của protein với các thành phần tế bào và các protein khác Mức độ tạo thành liên kết chéo của AGE phụ thuộc nhiều vào nồng độ đường và tuổi thọ của protein trong cơ thể, trong đó các protein có tuổi thọ dài như các protein cấu trúc và liên kết như collagen, myelin sẽ bị tác động bởi sự glycat hóa nhiều nhất [63] Collagen và lipoprotein tỷ trọng thấp LDL rất dễ hình thành liên kết chéo với AGE, kết quả làm thành động mạch thêm xơ cứng hoặc khó bị bắt giữ bởi các receptor hơn Khi AGE liên kết chéo với crystallin thủy tinh thể chúng có thể gây ra biến đổi cấu trúc và thay đổi chức năng, trong khi AGE liên kết chéo với protein ở mô thận làm dày màng đáy cầu thận [59]

Độc tính và khả năng gây bệnh của các AGE còn liên quan tới ái lực cao của một

số AGE với protein và khả năng gây kết tập một số cấu trúc protein nhất định của chúng Điều này thể hiện qua mối liên quan của AGE đối với sự kết tập các protein

Trang 32

trong bệnh thoái hóa tinh bột (amyloidosis) hay một số bệnh thoái hóa thần kinh như bệnh Alzheimer Các kết tập protein trong các trường hợp amyloidosis gia đình chứa một tỷ lệ cao argpyrimidin gợi ý rằng methylglyoxal có vai trò quan trọng trong sự kết tập protein bệnh lý [28, 59]

1.2 Tương tác với các receptor

Tương tác của AGE với các receptor nhạy cảm và một trong những cơ chế gây bệnh chính và đóng vai trò quan trọng trong bệnh sinh của các biến chứng ĐTĐ [64] Bên cạnh RAGE là receptor của AGE được phát hiện đầu tiên và cũng được nghiên cứu sâu sắc nhất, người ta cũng đã tìm ra nhiều receptor khác của AGE, có thể kể đến như oligosaccharyl transferase 48 (OST-48 hoặc AGER1), 80 K-H phosphoprotein (AGER2),galectin-3 (AGER3), lactoferrin, lysozym, một số receptor thu dọn typ I

và II [59, 64] Các receptor của AGE phân bố ở nhiều tế bào khác nhau, ví dụ bạch cầu mono, đại thực bào, tế bào biểu mô, tế bào mô mỡ và tế bào có chân [74] Trong

số các receptor của AGE, RAGE và AGER1 đóng vai trò quan trọng nhất [59]

1.2.1 Receptor RAGE

1.2.1.1 Cấu trúc của RAGE

RAGE là receptor trên bề mặt tế bào và là một thành viên trong siêu họ immunoglobulin được phân lập lần đầu tiên từ tế bào biểu mô phổi bò RAGE có thể được biểu hiện ở rất nhiều mô khác nhau, bao gồm mạch máu, biểu mô, tế bào cơ trơn, mô thần kinh và tế bào đơn nhân [59, 61] Bên cạnh AGE, các phối tử khác của

RAGE đã được phát hiện bao gồm peptid amyloid-beta (Aβ), amphoterin (protein

nhân được giải phóng khi hoại tử tế bào và khi ở ngoại bào, nó có thể thể hiện các hoạt tính tiền viêm) và calgranulin (chất trung gian cytokin tiền viêm) [64] Do đó, RAGE hiện nay được xem là một receptor đa phối tử và đóng vai trò chủ chốt trong quá trình viêm [78]

Về mặt cấu trúc, RAGE được tạo nên bởi 3 khu vực ngoại bào, bao gồm một khu vực V có khả năng liên kết phối tử và hai khu vực C (C1 và C2) có đặc tính immunoglobulin, một khu vực xoắn xuyên màng và một đuôi nằm trong bào tương Khu vực xuyên màng giúp RAGE liên kết với màng tế bào Khu vực đuôi nội bào

Trang 33

tích điện cao đóng vai trò trung gian tương tác với các phân tử truyền tín hiệu của bào tương (Hình 7) [69]

Hình 7 Cấu trúc của RAGE nguyên dạng và các biến thể của nó (Nguồn:

http://pace-cme.org/2010/01/20/prof-kathryn-tan/) Dạng nguyên thể với cấu trúc 5 phần (ba khu vực V, C1, C2 có khả năng nhận biết và liên kết phối tử, hai khu vực xuyên màng và tế bào chất) Ngoài ra còn có các biến thể cắt đầu N-tận hoặc cắt đầu C-tận Sự cắt đầu C-tận xảy ra do sự thủy phân RAGE nguyên dạng bởi protease hoặc do sự thiếu hụt trình tự mã hóa của mRNA, tạo thành các RAGE tan được (sRAGE)

Trang 34

1.2.1.2 Sự tương tác AGE-RAGE

Hình 8 Cơ chế tác dụng của tương tác AGE-RAGE thông qua hoạt hóa con

đường p21ras và MAPK [64]

RAGE tác động như một receptor truyền tín hiệu đối với carboxymethyllysin CML và nhiều AGE khác [44] RAGE liên kết với AGE ở khu vực V và sau khi được hoạt hóa RAGE có thể gây ra các stress oxi hóa và viêm ở mức độ cao [44, 86] Tương tác của AGE với RAGE dẫn tới sự hoạt hóa NF-κB thông qua hoạt hóa p21ras và các con đường truyền tín hiệu của protein kinase kích hoạt bởi yếu tố gây gián phân MAPK (Hình 8), NADPH oxidase, kinase điều tiết bởi tín hiệu ngoại bào ERK 1 và

2, phosphatidyl-inositol 3 kinase [26, 88] NF-κB điều hòa phiên mã gen của

Trang 35

endothelin-1, yếu tố mô và thrombomodulin và tạo thành các cytokin tiền viêm như interleukin-1α (IL-1α), interleukin 6 (IL-6) và yếu tố hoại tử u α (TNF-α) [64] Bên cạnh đó mức độ biểu hiện các phân tử kết dính bao gồm phân tử kết dính tế bào mạch máu VCAM-1 và phân tử kết dính nội bào ICAM-1 cũng tăng lên cùng sự tăng tính thấm thành mạch Sự tăng cường sản xuất TNF-α gây ra bởi NF-κB còn dẫn tới tăng tạo thành các gốc tự do oxy hóa ROS, từ đó lại hoạt hóa thêm NADPH oxidase và làm trầm trọng các stress oxi hóa Các ROS và tình trạng viêm gây ra bởi tương tác RAGE-AGE đóng vai trò quyết định trong bệnh sinh các biến chứng ĐTĐ, các bệnh

lý tim mạch và thoái hóa thần kinh [64] Bên cạnh đó, tương tác AGE-RAGE còn dẫn tới điều hòa xuống các enzym trong hệ glyoxalase (hệ enzym có vai trò khử độc các tiền chất carbonyl), làm giảm khả năng chống lại sự glycat hóa protein gây ra bởi stress carbonyl [75]

RAGE được biểu hiện ở mức cơ bản trong các mô khỏe mạnh nhưng sự biểu hiện của nó tăng lên đáng kể khi nồng độ phối tử tăng lên trong điều kiện bệnh lý (như ĐTĐ hay khi có tình trạng viêm) hoặc khi có sự tiêu thụ nhiều AGE từ thực phẩm

Sự biểu hiện của RAGE tăng lên ở các cơ quan khác nhau (bao gồm gan, thận, lách, tim, mô mạch máu, cơ xương và mô mỡ) trên động vật được cho ăn chế độ ăn giàu AGE so với nhóm được cho ăn chế độ nghèo AGE Việc thêm tiền chất MGO vào nước uống cũng dẫn tới mức độ biểu hiện cao hơn của RAGE ở chuột [59, 64]

1.2.1.3 RAGE tan được (sRAGE)

RAGE tồn tại các biến thể khác nhau trong đó dạng tan được tồn tại trong tuần hoàn của RAGE, được gọi là sRAGE (soluble RAGE) đóng vai trò quan trọng mRNA của RAGE dạng cắt ngắn đầu C-tận thiếu hụt trình tự mã hóa khu vực xuyên màng và tế bào chất do đó tạo ra khu vực ngoại bào tan được của RAGE [78] Dạng này được giải phóng khỏi tế bào vào lưu hành trong tuần hoàn, do đó được gọi là RAGE bài tiết nội sinh esRAGE (endogenous secretory RAGE) (Hình 7)

Các esRAGE làm mất các tác động của AGE trên các dòng tế bào nuôi cấy Sự biểu hiện quá mức các esRAGE trên chuột giúp phục hồi các chức năng mạch máu

Trang 36

bị rối loạn trong bệnh ĐTĐ Kết quả này gợi ý rằng esRAGE có thể đóng vai trò như cácc receptor “mồi nhử” [66, 78], chúng liên kết kết với các phối tử và ngăn chặn con đường truyền tín hiệu của RAGE, do đó hạn chế các tác động bất lợi gây ra bởi sự hoạt hóa RAGE Các isoform khác của sRAGE có thể tác động như các receptor “mồi nhử” bao gồm các phân đoạn protein thủy phân của RAGE được biểu hiện trên bề mặt tế bào [78]

Nhiều nghiên cứu đã tập trung vào vai trò của sRAGE và esRAGE trong tuần hoàn đối với nhiều tình trạng bệnh lý khác nhau, đặc biệt là các bệnh tim mạch [89] Nồng độ sRAGE tổng số thấp hơn đáng kể ở các bệnh nhân không ĐTĐ nhưng có bệnh mạch vành so với nhóm chứng khỏe mạnh ở cùng độ tuổi [66] Nồng độ sRAGE tuần hoàn và LDL oxi hóa (LDL biến đổi bởi malondialdehyd) có mối tương quan nghịch gợi ý rằng sRAGE có thể có tác dụng thu dọn các LDL oxi hóa và góp phần vào tác động chống xơ vữa động mạch Người ta thấy rằng nồng độ sRAGE tăng lên sau khi điều trị cơn đột quỵ, mức độ tăng phụ thuộc vào các tiến triển lâm sàng Do

đó chúng có thể trở thành một marker chẩn đoán tiềm năng [78]

1.2.2 Receptor AGER1

AGER1 là một protein xuyên màng typ 1, nó tạo điều kiện thuận thuận lợi cho

sự thanh thải AGE bằng tác dụng trung gian trong thu nhận, thoái hóa và thải trừ AGE [83] AGER1 được tìm thấy đầu tiên ở các đại thực bào với vai trò là một receptor thu nhặt theo cơ chế trung gian nhập bào các protein bị AGE hóa Ở chuột biến đổi

gen có sự biểu hiện quá mức AGER1, sự thải trừ in vivo của AGE huyết tương và mô

tăng lên khi so sánh với nhóm chuột chủng hoang dại [59]

Bên cạnh làm tăng thải trừ AGE, AGER1 còn góp phần vào cơ chế đề kháng của

cơ thể chống lại độc tính của AGE thông qua tác động điều hòa ngược con đường truyền tín hiệu cảm ứng bởi tương tác AGE-RAGE (Hình 9) [83] AGER1 chống lại stress oxi hóa và phản ứng viêm gây ra bởi RAGE thông qua việc ức chế hoạt động của NF-κB và sự phosphoryl hóa MAPK Bên cạnh đó, AGER1 cũng ức chế receptor yếu tố tăng trưởng biểu mô, ức chế sự phosphoryl hóa Ser36 của isoform protein p66 SHC cảm ứng bởi AGE và sự hoạt hóa NADPH oxidase, từ đó giúp tăng cường khả

Trang 37

năng của tế bào chống lại các stress oxi hóa [59] AGER1 cũng thể hiện chức năng của nó thông qua deacetylase sirtuin-1 phụ thuộc NAD (SIRT1) SIRT1 có tác động điều tiết đối với con đường truyền tín hiệu của insulin và adipokin và có tác dụng chống viêm Sự ức chế của AGE đối với SIRT1 bị mất đi khi có sự biểu hiện quá mức của AGER1 [59, 83]

Hình 9 Cơ chế tác động của AGER1 qua trung gian nhập bào và điều hòa

ngược con đường truyền tín hiệu do tương tác AGE-RAGE

Tương tự với RAGE, sự thay đổi nồng độ AGE do bệnh lý hay do chế độ ăn có thể ảnh hưởng lên mức độ biểu hiện của AGER1 ở các cơ quan khác nhau bao gồm gan, thận, lách, tim, mạch, cơ xương và mô mỡ trắng [47, 59] Ở người khỏe mạnh,

sự biểu hiện AGER1 ở tế bào đơn nhân máu ngoại biên có tương quan với nồng độ AGE huyết tương và nước tiểu [82] Người ta cho rằng vai trò của AGER1 trong sự

đề kháng của cơ thể chống lại AGE phụ thuộc vào khoảng thời gian phơi nhiễm với AGE, cụ thể là AGER1 bị điều hòa xuống sau khi phơi nhiễm kéo dài và ở mức độ cao với AGE [82, 83]

Ngày đăng: 09/10/2017, 16:34

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
1. Bộ Y tế (2015), Báo cáo chung tổng quan ngành y tế năm 2014 - Tăng cường dự phòng và kiểm soát bệnh không lây nhiễm, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội Sách, tạp chí
Tiêu đề: Báo cáo chung tổng quan ngành y tế năm 2014 - Tăng cường dự phòng và kiểm soát bệnh không lây nhiễm
Tác giả: Bộ Y tế
Nhà XB: Nhà xuất bản Y học
Năm: 2015
3. Ahmed MU., Thorpe SR., Baynes JW. (1986), “Identification of N-epsilon- carboxymethyllysine as a degradation product of fructoselysine in glycated protein”, J Biol Chem, 261(11), pp.4889-4894 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Identification of N-epsilon-carboxymethyllysine as a degradation product of fructoselysine in glycated protein”, "J Biol Chem
Tác giả: Ahmed MU., Thorpe SR., Baynes JW
Năm: 1986
4. Ahmed N. (2005), “Advanced glycation endproducts- role in pathology of diabetic complications”, Diabetes Res ClinPract, 67(1), pp.3-21 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Advanced glycation endproducts- role in pathology of diabetic complications”, "Diabetes Res ClinPract
Tác giả: Ahmed N
Năm: 2005
5. Aldini G., Vistoli G., Stefek M., Chondrogianni N., Grune T., Sereikaite J., Sadowska- Bartosz I, Bartosz G (2013), “Molecular strategies to prevent, inhibit, and degrade advanced glycoxidation and advanced lipoxidation end products”, Free Radical Research, 47: Suppl 1, pp.93-137 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Molecular strategies to prevent, inhibit, and degrade advanced glycoxidation and advanced lipoxidation end products”, "Free Radical Research
Tác giả: Aldini G., Vistoli G., Stefek M., Chondrogianni N., Grune T., Sereikaite J., Sadowska- Bartosz I, Bartosz G
Năm: 2013
6. Amore A., Cirina P., Mitola S., Peruzzi L., Gianoglio B., Rabbone I., Sacchetti C., Cerutti F., Grillo C., Coppo R. (1997), “Nonenzymatically glycated albumin (Amadori adducts) enhances nitric oxide synthase activity and gene expression in endothelial cells”, Kidney Int, 51(1), pp.27-35 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nonenzymatically glycated albumin (Amadori adducts) enhances nitric oxide synthase activity and gene expression in endothelial cells”, "Kidney Int
Tác giả: Amore A., Cirina P., Mitola S., Peruzzi L., Gianoglio B., Rabbone I., Sacchetti C., Cerutti F., Grillo C., Coppo R
Năm: 1997
7. Antonetti DA., Barber AJ., Khin S., Lieth E., Tarbell JM., Gardner TW. (1998), “Vascular permeability in experimental diabetes is associated with reduced endothelial occludin content: vascular endothelial growth factor decreases occludin in retinal endothelial cells. Penn State Retina Research Group”, Diabetes, 47(12), pp.1953-1959 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Vascular permeability in experimental diabetes is associated with reduced endothelial occludin content: vascular endothelial growth factor decreases occludin in retinal endothelial cells. Penn State Retina Research Group”, "Diabetes
Tác giả: Antonetti DA., Barber AJ., Khin S., Lieth E., Tarbell JM., Gardner TW
Năm: 1998
8. Avery NC., Bailey AJ. (2006), “The effects of the Maillard reaction on the physical properties and cell interactions of collagen”, Pathol Biol (Paris), 54(7), pp.387-395 Sách, tạp chí
Tiêu đề: The effects of the Maillard reaction on the physical properties and cell interactions of collagen”, "Pathol Biol (Paris)
Tác giả: Avery NC., Bailey AJ
Năm: 2006
9. Beisswenger P., Ruggiero-Lopez D. (2003), “Metformin inhibition of glycation processes”, Diabetes Metab, 29: Suppl 6, pp.95-103 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Metformin inhibition of glycation processes”, "Diabetes Metab
Tác giả: Beisswenger P., Ruggiero-Lopez D
Năm: 2003
10. Biemel KM., Reihl O., Conrad J., Lederer MO. (2001), “Formation pathways for lysine-arginine cross-links derived from hexoses and pentoses by Maillard processes- Unraveling the structure of a pentosidine precursor”, J Biol Chem, 276(26), pp.23405-23412 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Formation pathways for lysine-arginine cross-links derived from hexoses and pentoses by Maillard processes- Unraveling the structure of a pentosidine precursor”, "J Biol Chem
Tác giả: Biemel KM., Reihl O., Conrad J., Lederer MO
Năm: 2001
11. Bucala R., Tracey KJ., Cerami A. (1991), “Advanced glycosylation products quench nitric oxide and mediate defective endothelium-dependent vasodilatation in experimental diabetes”, J Clin Invest, 87(2), pp.432-438 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Advanced glycosylation products quench nitric oxide and mediate defective endothelium-dependent vasodilatation in experimental diabetes"”, J Clin Invest
Tác giả: Bucala R., Tracey KJ., Cerami A
Năm: 1991
12. Cai W., Gao Q-D., Zhu L., Peppa M., He C., Vlassara H. (2002), “Oxidative stress-inducing carbonyl compounds from common foods: novel mediators of cellular dysfunction”, Mol Med, 8(7), pp.337-346 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Oxidative stress-inducing carbonyl compounds from common foods: novel mediators of cellular dysfunction”, "Mol Med
Tác giả: Cai W., Gao Q-D., Zhu L., Peppa M., He C., Vlassara H
Năm: 2002
13. Cai W., Uribarri J., Zhu L., Chen X., Swamy S., Zhao Z., Grosjean F., Imonaro C., Kuchei GA., Schnaider-Beeri M., et al (2014), “Oral glycotoxins are a modifiable cause of dementia and the metabolic syndrome in mice and humans”, Proc Natl Acad Sci USA, 111(13), pp.4940-4945 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Oral glycotoxins are a modifiable cause of dementia and the metabolic syndrome in mice and humans”, "Proc Natl Acad Sci USA
Tác giả: Cai W., Uribarri J., Zhu L., Chen X., Swamy S., Zhao Z., Grosjean F., Imonaro C., Kuchei GA., Schnaider-Beeri M., et al
Năm: 2014
14. Chen F., Zhang HQ., Zhu J., Liu KY., Cheng H., Li GL., et al (2012), “Puerarin enhances superoxide dismutase activity and inhibits RAGE and VEGF expression in retinas of STZ- induced early diabetic rats”, Asian Pac J Trop Med, 5(11), pp.891- 896 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Puerarin enhances superoxide dismutase activity and inhibits RAGE and VEGF expression in retinas of STZ- induced early diabetic rats”, "Asian Pac J Trop Med
Tác giả: Chen F., Zhang HQ., Zhu J., Liu KY., Cheng H., Li GL., et al
Năm: 2012
15. Chen F., Wollmer MA., Hoerndll F., Munch G., Kuhla B., Rogaev EI., Toslaki M., Papassotiropoulos A., Gotz G. (2004), “Role for glyoxalase I in Alzheimer’s disease”, Proc Natl Acad Sci USA, 101(20), pp.7687-7692 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Role for glyoxalase I in Alzheimer’s disease”, "Proc Natl Acad Sci USA
Tác giả: Chen F., Wollmer MA., Hoerndll F., Munch G., Kuhla B., Rogaev EI., Toslaki M., Papassotiropoulos A., Gotz G
Năm: 2004
16. Dearlove RP., Greenspan P., Hartle DK., Swanson RB., Hargrove JL. (2008), “Inhibition of protein glycation by extracts of culinary herbs and spices”, J Med Food, 11(2), pp.275-281 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Inhibition of protein glycation by extracts of culinary herbs and spices”, "J Med Food
Tác giả: Dearlove RP., Greenspan P., Hartle DK., Swanson RB., Hargrove JL
Năm: 2008
17. Edelstein D., Brownlee M. (1992), “Mechanistic studies of advanced glycosylation end product inhibition by aminoguanidine”, Diabetes, 41(1), pp.26-29 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Mechanistic studies of advanced glycosylation end product inhibition by aminoguanidine”, "Diabetes
Tác giả: Edelstein D., Brownlee M
Năm: 1992
18. Erbersdobler HF., Somoza V. (2007), “Forty years of furosine- Forty years of using Maillard reaction products as indicators of the nutritional quality of foods”, Mol Nutr Food Res, 51(4), pp.423-430 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Forty years of furosine- Forty years of using Maillard reaction products as indicators of the nutritional quality of foods”, "Mol Nutr Food Res
Tác giả: Erbersdobler HF., Somoza V
Năm: 2007
19. Forbes JM., Cooper ME., Oldfield MD., Thomas MC. (2003), “Role of advanced glycation end products in diabetic nephropathy”, J Am Soc Nephrol, 14(8 Suppl 3), pp.254-258 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Role of advanced glycation end products in diabetic nephropathy”, "J Am Soc Nephrol
Tác giả: Forbes JM., Cooper ME., Oldfield MD., Thomas MC
Năm: 2003
21. Fu TM., Jacob DJ., Wittrock F., Burrows JP., Vrekoussis M., Henze DK. (2008), “Global budgets of atmospheric glyoxal and methylglyoxal, and implications for formation of secondary organic aerosols”, J Geophys Res Atmos, 113(D15303), pp.1- 17 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Global budgets of atmospheric glyoxal and methylglyoxal, and implications for formation of secondary organic aerosols”, "J Geophys Res Atmos
Tác giả: Fu TM., Jacob DJ., Wittrock F., Burrows JP., Vrekoussis M., Henze DK
Năm: 2008
22. Gada E., Owens AW., Gore MO., See R., Abdullah SM., Ayers CR., Rohatgi A., Khera A., de Lernos JA., McGuire DK. (2013), “Discordant effects of rosiglitazone on novel inflammatory biomarkers”, Am Heart J, 165(4), pp.609-614 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Discordant effects of rosiglitazone on novel inflammatory biomarkers”, "Am Heart J
Tác giả: Gada E., Owens AW., Gore MO., See R., Abdullah SM., Ayers CR., Rohatgi A., Khera A., de Lernos JA., McGuire DK
Năm: 2013

TỪ KHÓA LIÊN QUAN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w