Đánh giá độ ngưng tập tiểu cầu với kiểu gen CYP2C192, CYP2C193 và CYP2C1917 ở bệnh nhân hội chứng động mạch vành cấp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THÚY MẬU Đánh giá độ ngưng tập tiểu cầu với kiểu gen CYP2C19*2, CYP2C19*3 CYP2C19*17 bệnh nhân hội chứng động mạch vành cấp Chuyên ngành: Miễn Dịch Mã số : 60720106 LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS NGUYỄN THANH THÚY TS VŨ THỊ THƠM HÀ NỘI - 2017 LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập làm luận văn tốt nghiệp, nhận quan tâm giúp đỡ thầy cô, nhà trường, quan, bệnh viện, gia đình bè bạn Trước hết, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thanh Thúy, TS Vũ Thị Thơm người hướng dẫn khoa học, người Thầy tận tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu, tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ suốt trình thực luận văn Tôi xin gửi lời biết ơn đặc biệt tới TS Lê Ngọc Anh, giảng viên môn Sinh lý bệnh – Miễn Dịch, thầy không cho kiến thức quý báu mà học thầy nhiều đức tính tốt người thầy mẫu mực Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ths Vũ Ngọc Trung – Trưởng phòng khám đa khoa 182 Lương Thế Vinh giúp đỡ nhiều trình thực đề tài Tôi xin cảm ơn đề tài khoa học công nghệ cấp ĐHQGHN, mã số QG.15.32 cung cấp kinh phí, tạo điều kiện để hoàn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy, nhà khoa học hội đồng chấm đề cương luận văn tốt nghiệp đóng góp ý kiến quý báu, giúp hoàn thành luận văn Tôi xin gửi lời biết ơn tới Ban giám hiệu, phòng Đào tạo Sau đại học, thầy cô Bộ môn Sinh lý bệnh – Miễn dịch - trường Đại học Y Hà Nội cho kiến thức quý báu, tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành luận văn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: Các cán Bộ môn Y Dược học sở, Ban lãnh đạo Khoa Y dược, ĐHQGHN giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho trình học tập Các bác sỹ nhân viên Viện Tim mạch Việt Nam Trung tâm Tim mạch Bệnh viện Đại học Y Hà nội giúp đỡ nhiều trình hoàn thành luận văn Xin bày tỏ lòng biết ơn bố mẹ người thân gia đình đặc biệt chồng tôi, với bạn bè đồng nghiệp chỗ dựa vững tôi, thương yêu, khuyến khích, động viên tạo điều kiện tốt tinh thần giúp hoàn thành tốt chương trình học tập thực thành công luận văn Cuối xin gửi lời tri ân tới bệnh nhân tham gia vào nhóm nghiên cứu, đóng góp bệnh nhân giúp có thành công Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Nguyễn Thị Thúy Mậu LỜI CAM ĐOAN Tôi Nguyễn Thị Thúy Mậu, Cao học khóa 24, Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Miễn Dịch, xin cam đoan Đây Luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS.TS Nguyễn Thanh Thúy, TS Vũ Thị Thơm Công trình không trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hoàn toàn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp nhận sở nơi nghiên cứu Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Người viết cam đoan Nguyễn Thị Thúy Mậu DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ACC AHA American college of Cardiology: Trường môn Tim mạch Hoa Kỳ American Heart Association: Hiệp hội Tim mạch Hoa Kỳ ADP CK – MB COX Adenosin diphosphate Creatine Kinase Myocardial Band isoenzyme Cyclooxygenase CRP C-Reactive Protein: Protein phản ứng C ddNTP ĐMV ĐTNKÔĐ Dideoxynucleotide Động mạch vành Đau thắt ngực không ổn định ĐTĐ Điện tâm đồ ĐHT GP G-protein Đồng hợp tử Glycoprotein Group protein GTT Giải trình tự HCĐMVC Hội chứng động mạch vành cấp HDL High Density Lipoprotein: Lipoprotein có tỷ trọng phân tử cao LDL NMCT Low Density Lipoprotein: Lipoprotein có tỷ trọng phân tử thấp Nhồi máu tim NTTC Ngưng tập tiểu cầu MCV Mean Corpuscular Volume: Thể tích trung bình hồng cầu MPV Mean Platelet Volume: Thể tích trung bình tiểu cầu PDGF Platelet derived growth factor: Yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc tiểu cầu PCI Percutaneous Coronary Intervention: Can thiệp động mạch vành qua da PCR Polymerase chain reaction: Phản ứng chuỗi polymerase PGH2 Prostaglandin H2 PGI2 Prostaglandin I2 PLT SNP Platelet Count: Số lượng tiểu cầu Single Nucleotide polymorphism: Đa hình đơn nucleotide TC TXA2 Tiểu cầu Thromboxan A2 THA Tăng huyết áp TNFα Tumor necrosis factor α: Yếu tố hoại tử khối u α RBC Red Blood Cell: Số lượng hồng cầu RFLP Restriction fragment length polymorphism: Đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn RLCH vWF Rối loạn chuyển hóa von Willebrand factor: yếu tố von Willebrand WBC White Blood Cell: Số lượng bạch cầu MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Hội chứng động mạch vành cấp 1.1.1 Định nghĩa .3 1.1.2 Cơ chế bệnh sinh HCĐMVC 1.1.3 Tiêu chuẩn chẩn đoán HCĐMVC 1.2 Tổng quan ngưng tập tiểu cầu 1.2.1 Sinh lý học tiểu cầu .7 1.2.2 Quá trình ngưng tập tiểu cầu 1.2.3 Điều trị ức chế NTTC HCĐMVC 11 1.2.4 Cơ chế tác dụng thuốc aspirin clopidogrel lên trình NTTC 12 Bản thân clopidogrel hoạt tính kháng tiểu cầu Sau hấp thu ruột, khoảng 85% lượng thuốc hấp thu chuyển hóa enzym esterase thành chất hoạt tính 15% chuyển hóa hệ enzym cytochrome P-450 (chủ yếu CYP2C19) thành chất có hoạt tính Sau trở thành chất có hoạt tính clopidogrel ức chế chọn lọc không hồi phục trình gắn phân tử ADP (adenosin diphosphate) vào thụ thể (P2Y12) lên bề mặt tiểu cầu, làm cho cảm thụ GPIIb/IIIa không hoạt hóa, kết tiểu cầu không kết dính với [8] 13 1.3 Tổng quan đa hình di truyền CYP2C19 14 1.3.1 Khái niệm đa hình đơn nucleotide 14 1.3.2 Vị trí cấu, cấu trúc vai trò gen CYP2C19 chuyển hóa thuốc .15 1.3.2.1 Alen đa hình CYP2C19*2 gen CYPC19 17 1.3.2.2 Alen đa hình CYP2C19*3 gen CYPC19 18 1.3.2.3 Alen đa hình CYP2C19*17 gen CYPC19 18 1.3.2.4 Mối liên quan kiểu gen hoạt tính enzyme chuyển hóa thuốc 18 1.3.4 Các phương pháp phân tích ứng dụng để phát kiểu gen CYP2C19 .19 1.3.4.1 PCR-Giải trình tự 19 1.3.4.2 PCR-RFLP (Restriction fragment length polymorphism) .21 1.3.4.3 RT-PCR (Real-time PCR) .23 1.4 Tình hình nghiên cứu mối liên quan độ NTTC với kiểu gen CYP2C19 yếu tố khác bệnh nhân HCĐMVC giới nước 23 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 23 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 25 CHƯƠNG 26 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tượng nghiên cứu 26 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn bệnh nhân 26 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 26 2.1.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu .27 2.2 Phương pháp nghiên cứu 27 2.3 Nguyên liệu phương tiện nghiên cứu .27 2.3.1 Hóa chất 27 2.3.2 Thiết bị 27 2.4 Các bước nghiên cứu 28 2.4.1 Quy trình nghiên cứu 28 Quy trình nghiên cứu thực theo sơ đồ đây: 28 2.4.2 Thu thập, xử lý bảo quản mẫu 29 2.4.3 Tách chiết kiểm tra chất lượng DNA tổng số 29 2.4.4 Khuếch đại đoạn gen chứa SNP CYP2C19*2, *3, *17 PCR kiểm tra chất lượng sản phẩm .30 2.4.5 Tinh sản phẩm PCR .32 2.4.6 Xác định kiểu gen SNP CYP2C19*2, CYP2C19*3 sử dụng phương pháp cắt enzyme giới hạn (RFLP) có đối chiếu với phương pháp GTT 33 2.4.7 Xác định kiểu gen SNP CYP2C19*17 sử dụng phương pháp GTT 34 2.4.8 Cách đọc kết kiểu gen CYP2C19 34 Để tìm kiểu gen bệnh nhân nghiên cứu chúng tôi, trình bày trên, cần tìm kiểu gen alen hay nói cách khác xác định SNP Trong nghiên cứu này, chọn SNP: CYP2C19*2, CYP2C19*3 CYP2C19*17 để phân tích Mặc dù gen CYP2C19 số SNP CYP2C19*4, *5, *6, *7, *8, tần số xuất SNP thấp qua nghiên cứu quần thể người Châu Á, mức độ ảnh hưởng chúng không nhiều hạn chế mặt kinh phí, nên với đề tài coi SNP alen kiểu dại (CYP2C19*1) Sau có kết SNP: CYP2C19*2, CYP2C19*3 CYP2C19*17, tổ hợp kết kiểu gen SNP cho kết kiểu gen CYP2C19 bệnh nhân trình bày bảng đây: 34 2.4.9 Xét nghiệm đo độ ngưng tập tiểu cầu 35 2.5 Xử lý phân tích số liệu 37 2.6 Các loại sai số cách khắc phục .38 2.6.1 Sai số mắc phải 38 2.6.2 Cách khắc phục sai số 38 2.7 Đạo đức nghiên cứu 39 CHƯƠNG 40 KẾT QUẢ 40 3.1 Một số đặc điểm chung .40 3.2 Một số kết cận lâm sàng 41 3.3 Kết đo độ ngưng tập tiểu cầu .43 3.4 Kết phân tích kiểu gen CYP2C19*2, CYP2C19*3 CYP2C19*17 43 3.4.1 Kết tách chiết DNA 43 percutaneous coronary intervention International Journal of Clinical and Experimental Medicine, 8(6), 9266–9274 59 Nguyễn Thị Nữ, Cung Thị Tý Đỗ Trung Phấn (1997) Chỉ số ngưng tập tiểu cầu người trưởng thành Việt nam bình thường, tr 66–68 60 Vũ Hồng Điệp (1998) Nghiên cứu độ ngưng tập tiểu cầu người cao tuổi ,Luận văn Thạc sĩ Y Học, Đại học Y Hà Nội 61 Trương Thị Minh Nguyệt (2003) Nghiên cứu chức ngưng tập tiểu cầu có chất kích tập ADP bệnh nhân thiếu máu cục tim, Luận văn Bác sĩ chuyên khoa cấp II, Học viện Quân Y 62 Nghiêm Hoàng Lan Phương (2007) Nghiên cứu độ ngưng tập tiểu cầu bệnh nhân nhồi máu tim cấp trước sau nong động mạch vành, Luận văn Thạc sĩ Y Học, Đại học Y Hà Nội 63 Quy trình kỹ thuật khám bệnh, chữa bệnh chuyên ngành Huyết học – Truyền máu – miễn dịch – di truyền (2012), Bộ, tr 43 64 Quách Hữu Trung (2014) Nghiên cứu tình trạng kháng aspirin bệnh nhân có yếu tố nguy tim mạch cao, Luận án tiến sĩ y học 65 Bệnh viện đa khoa tỉnh Quảng Ninh (2014) Quy trình xét nghiệm đo độ ngưng tập tiểu cầu 66 Bệnh viện Trung ương quân đội 108 (2016) Các xét nghiệm đánh giá chức cầm – đông máu 67 Falk , Shah P K & Fuster (1995) Coronary plaque disruption Circulation, 92(3), 657–671 68 Roger V.L, Go A.S, Lloyd-Jones D.M, Adams R.J et al (2011) Heart Disease and Stroke Statistics—2011 Update Circulation, 123(4), e18–e209 69 WHO (2001) The World Heart Report (2001) Geneva 70 Frans V.W, Chairperson (Belgium) & Jeroen B (2008) Management of acute myocardial infarction in patients presenting with persistent ST-segment elevation European Heart Journal, 29, 2909–2945 71 Yusuf S, Zhao F, Mehta S.R et al (2001) Effects of clopidogrel in addition to aspirin in patients with acute coronary syndromes without ST-segment elevation The New England Journal of Medicine, 345(7), 494–502 72 Gurbel P.A, Becke R.C, Mann K.G et al (2007) Platelet function monitoring in patients with coronary artery disease Journal of the American College of Cardiology, 50(19), 1822–1834 73 Wang T.H, Bhatt D.L & Topo E.J (2006) Aspirin and clopidogrel resistance: an emerging clinical entity European Heart Journal, 27(6), 647–654 74 Brandt J.T, Close S.L, Iturria S.J et al (2007) Common polymorphisms of CYP2C19 and CYP2C9 affect the pharmacokinetic and pharmacodynamic response to clopidogrel but not prasugrel Journal of thrombosis and haemostasis, 5(12), 2429–2436 75 Umemura K, Furuta T & Kondo K (2008) The common gene variants of CYP2C19 affect pharmacokinetics and pharmacodynamics in an active metabolite of clopidogrel in healthy subjects Journal of thrombosis and haemostasis, 6(8), 1439–1441 76 Hulot J.S, Bura A, Villard E et al (2006) Cytochrome P450 2C19 loss-offunction polymorphism is a major determinant of clopidogrel responsiveness in healthy subjects Blood, 108(7), 2244–2247 77 RF Storey (n.d.) Clopidogrel in Acute Coronary Syndrome: To Genotype or Not? Available at: https://ncbi.nlm.nih.gov/labs/articles/19108882/ [Accessed August 2017] 78 Fre R, Cuiset T, Gaborit B et al (2009) The CYP2C19*17 allele is associated with better platelet response to clopidogrel in patients admitted for non-ST acute coronary syndrome Journal of Thrombosis and Haemostasis, 9, 1409–1433 79 Ewa L, Małgorzata O, Marek K et al (2015) The influence of genetic polymorphisms of CYP2C19 and ABCB1 on ADP-induced platelet aggregation in clopidogrel-treated patients: A comparison between the index hospitalization for myocardial infarction and the 3-month follow-up visit Folia Medica Copernicana, 3(2), 62–71 80 Wallentin L, Becker R C, Budaj A et al (2009) Ticagrelor versus clopidogrel in patients with acute coronary syndromes The New England Journal of Medicine, 361(11), 1045–1057 81 Bride W, Lange R.A, & Hillis L.D (1988) Retenosis after successful coronary angioplasty Pathophysiology and prevention N Engh J Med, 318, 1734–7 82 Steinlhubl S.R, Darrah S, & Brennan D (2003) Optimal duration of pretreatment with clopidogrel prior to PCI: Data from the CREDO trial Circulation, 108 Suppl I:I1742 83 Phạm Nguyễn Vinh, Nguyễn Lân Việt, & Trương Quang Bình (2011) Nghiên cứu quan sát điều trị bệnh nhân nhập viện Hội Chứng Động Mạch Vành Cấp (MEDI- ACS study, Tạp chí tim mạch học biệt nam (58) 84 Nguyễn Đạt Nguyên (2001) Bước đầu đánh giá thông số huyết động NMCT cấp khoa HSCC bệnh viện Hữu Nghị, Công trình nghiên cứu khoa học bệnh viện Hữu Nghị 1998-2001 85 Đào Duy An (n.d.) Đánh giá diễn biến lâm sàng tim mạch tử vong bệnh nhân sau nhồi máu tim cấp tháng, Tạp chí Thời tim mạch học ( 47), tháng 1/2002, tr 18-22 86 Nguyễn Quang Tuấn, Phạm Mạnh Hùng cs, Can thiệp động mạch vành qua da điều trị nhồi máu tim cấp Hội thảo khoa học kỉ niệm 100 năm trường ĐH Y hà nội - Bộ môn Tim Mạch-Tháng 9/2002 87 Đào Thị Thanh Bình, Nguyễn Phú (2002) Khảo sát mối tương quan xơ vữa động mạch cảnh bệnh động mạch vành Tạp chí thời tim mạch học số 48, tháng 2/2002, tr 9-12 88 Nguyễn Cữu Lợi (2005) Tác động yếu tố nguy tim mạch lên chức nội mạc Thông tin Tim mạch học, (10), 12–17 89 Nguyễn Ngọc Minh, & Nguyễn Đình Ái (1996) Nội mô cầm máu, đôngmáu cầm máu: Kỹ thuật ứng dụng lâm sàng, NXB Y Học, Hà Nội 90 Tomoyuki N, Masatoshi M, Kaname N et al (2013) Relationship Between CYP2C19 Loss-of-Function Polymorphism and Platelet Reactivities With Clopidogrel Treatment in Japanese Patients Undergoing Coronary Stent Implantation Circulation Journal, 77, 1436 – 1444 91 Nguyễn Thị Thu Hà (1999) Bệnh lý rối loạn cầm máu tiểu cầu, Bài giảng lớp tập huấn huyết học-truyền máu toàn quân 92 Lê Thị Bích Thuận (2004) Nghiên cứu biến đổi Protein C phản ứng (CRP) bệnh lý mạch vành, Luận án Tiến sỹ Y Khoa), Đại học Huế 93 Gupta A.K (1996) Ischemia and coronary heart disease community outreach health information system, Boston university Medical Center 94 Phạm Tử Dương (2002) Bệnh xơ vữa động mạch, chuyên ngành Tim-Thận -Khớp Hà Nội 95 Trần Thị Hải Hà (2004) Nghiên cứu độ ngưng tập tiểu cầu bệnh nhân nhồi máu tim cấp trước sau điều trị Luận văn Thạc sĩ Y Học, Đại học Y Hà Nội 96 Ngô Thị Khánh Trang (2007) Nghiên cứu biến đổi nồng độ fibrinogen huyết tương bệnh nhân hội chứng động mạch vanh cấp, Luận văn Thạc sĩ Y Học, Đại học Y dược Huế 97 Lê Phúc Nguyên (2006) Nghiên cứu biến đổi nồng độ hs-CRP trước sau can thiệp động mạch vành qua da bệnh viện trung ương Huế, Luận văn Thạc sĩ Y Học, Đại học Y khoa Huế 98 Kannel W.B, D’Agostino R.B, Wilson P.W et al (1990) Diabetes, fibrinogen, and risk of cardiovascular disease: the Framingham experience American Heart Journal, 120(3), 672–676 99 Varon D & Spectre G (2009) Antiplatelet agents Hematology, 267–272 100 Van B.H, Serruys P.W & Giessen W.J (1994) Coronary stent coatings Coron Artery Dis, 5, 590–600 101 Chonlaphat S, Ramaimon T, Montri C et al (2013) CYP2C19 polymorphisms in the Thai population and the clinical response to clopidogrel in patients with atherothrombotic-risk factors Pharmacogenomics and Personalized Medicine, 6, 85–91 102 Morais S.M, Wilkinson G.R, Blaisdell J et al (1994) The major genetic defect responsible for the polymorphism of S-mephenytoin metabolism in humans J Biol Chem, 269(22), 15419–15422 103 Goldstein J.A, Ishizaki & Chiba K (1997) Frequencies of the defective CYP2C19 alleles responsible for the mephenytoin poor metabolizer phenotype in various Oriental, Caucasian, Saudi Arabian and American black populations Pharmacogenetics, 7(1), 59–64 104 Nakamura K, Goto F & Ray WA (1985) Interethnic differences in genetic polymorphism of debrisoquin and mephenytoin hydroxylation between Japanese and Caucasian populations Clin Pharmacol Ther, 38(4), 402–408 105 Trenk D, Hochholzer W, Fromm M et al (2008) Cytochrome P450 2C19 681G>A polymorphism and high on-clopidogrel platelet reactivity associated with adverse 1-year clinical outcome of elective percutaneous coronary intervention with drug-eluting or bare-metal stents Journal of the American College of Cardiology, 51(20), 1925–1934 106 Maeda A, Ando H & Asai T (2011) Differential impacts of CYP2C19 gene polymorphisms on the antiplatelet effects of clopidogrel and ticlopidine Clin Pharmacol Ther, 89, 229–233 107 Matetzky S, Shenkman B & Guetta V (2004) Clopidogrel resistance is associated with increased risk of recurrent atherothrombotic events in patients with acute myocardial infarction Circulation, 109, 3171–3175 108 Bhatt D.L, Paré G & Eikelboom JW (2012) The relationship between CYP2C19 polymorphisms and ischaemic and bleeding outcomes in stable outpatients: the CHARISMA genetics study Eur Heart J, 33, 2143–2150 109 Zabalza M, Subirana & Sala J (2012) Meta-analyses of the association between cytochrome CYP2C19 loss- and gain-of-function polymorphisms and cardiovascular outcomes in patients with coronary artery disease treated with clopidogrel Heart, 98, 100–108 110 Sibbing D, Koch W & Gebhard D (2010) Cytochrome 2C19*17 allelic variant, platelet aggregation, bleeding events, and stent thrombosis in clopidogrel-treated patients with coronary stent placement Circulation, 121, 512–518 111 Siller-Matula J.M, Delle-Karth G & Lang I.M (2012) Phenotyping vs genotyping for prediction of clopidogrel efficacy and safety: the PEGASUS-PCI study J Thromb Haemost, 10, 529–542 112 Shuldiner A.R, O’Connell J.R, & Bliden K.P (2009) Association of cytochrome P450 2C19 genotype with the antiplatelet effect and clinical efficacy of clopidogrel therapy JAMA, 32 113 Lip G.Y & Edmunds E (2001) A cross sectional diual and follow -up study of platelet activation and endothelial dysfuction in malignant phase hypertension Am J Intern Med, 249(3), 205–214 114 Makris T.K (1997) Haemostasis balan disordersin patients with essential hypertension Thromb Res, 88(2), 99–107 115 Gurbel P.A, Bliden K.P, Logan D.K et al (2013) The influence of smoking status on the pharmacokinetics and pharmacodynamics of clopidogrel and prasugrel: the PARADOX study Journal of the American College of Cardiology, 62(6), 505–512 116 Ferreiro J, Bhatt D.L, Ueno M et al (2014) Impact of smoking on long-term outcomes in patients with atherosclerotic vascular disease treated with aspirin or clopidogrel: insights from the CAPRIE trial (Clopidogrel Versus Aspirin in Patients at Risk of Ischemic Events) Journal of the American College of Cardiology, 63(8), 769–777 117 Knobles H, Savion N & Shankman B (1998) Shear induced platelet adhesion and aggregation subendothelium are increased in diabetic patients J endocrinlogy, 90, 181– 90 118 Marcus E Carr (2001) Diabetes mellitus a hypercoagulable state J Diabetes and its complication, 44–54 PHỤ LỤC MẪU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Mã số BN: I Hành chính: Họ tên: Giới: Tuổi: Sinh ngày: Địa chỉ: Bệnh viện điều trị Chấn đoán: Đau thắt ngực không ổn định: Nhồi máu tim không ST chênh lên: Nhồi máu tim có ST chênh lên: II Lý vào viện: III Tiền sử yếu tố nguy bệnh động mạch vành - Béo phì - Tăng huyết áp - Rối loạn chuyển hóa Lipid - Hút thuốc - Đái tháo đường - Tiền sử đau thắt ngực - Tiền sử nhồi máu tim - Tiền sử bệnh mạch vành IV Tiền sử - Tiền sử gia đình: - Tiền sử thân: V Lâm sàng: - Cân nặng: - Chiều cao: - Huyết áp: - Hô hấp: - Tim mạch: VI/ Cận lâm sàng: Công thức máu - Số lượng Hồng cầu (T/l): - Số lượng Bạch cầu (G/l): - Số lượng Tiểu cầu (G/l): - Thể tích hồng cầu trung bình –MCV(fl): - Thể tích tiểu cầu trung bình – MPV(fl): Sinh hóa máu - Cholesterol (mmol/l): - Triglycerid (mmol/l): - HDL (mmol/l): - LDL (mmol/l): - CRP (mg/dL): - Fibrinogen (g/l): - Độ NTTC (%): VII/ Điều trị: - Các thuốc: + Clopidogrel: liều nạp + Clopidogrel: liều trì + Aspirin: liều nạp + Aspirin: liều trì - Thuốc khác: VIII/ Kết phân tích alen kiểu gen: - CYP2C19*2: - CYP2C19*3: - CYP2C19*17: - Kiểu gen BN: - Hoạt tính chuyển hóa thuốc: Quy trình tách DNA tổng số sử dụng E.Z.N.A blood DNA Mini Kit: Rã đông mẫu máu đá để hóa chất nhiệt độ phòng Lắc ống máu Chuyển 250µl mẫu vào ống ly tâm vô trùng Thêm 25 µl OB Protease Solutionvà 250 µl BL Buffer Vortex 10 giây Ủ 650C 10 phút Chú ý: Sau ủ phút, vortex 15 giây Thêm 260 µl Ethanol 100% Vortex 20 giây Ly tâm 1000 vòng/ phút 15 giây để đảm bảo mẫu không dính thành nắp ống Chèn HiBind DNA Mini Column vào Collection Tube2ml Chuyển toàn mẫu vào cột (để pipet mức 790 µl) Ly tâm 14.000 vòng/ phút phút 10 Bỏ dịch lọc Collection Tube 11 Lắp HiBind DNA Mini Column vào Collection Tube 2ml 12 Thêm 500 µl HBC Buffer 13 Ly tâm 14.000 vòng/ phút phút 14 Bỏ dịch lọc sử dụng lại Collection Tub 15 Thêm 700 µl DNA Wash Buffer 16 Ly tâm phút 10.000g 17 Bỏ dịch lọc sử dụng lại Collection Tube 18 Lặp lại bước 14 đến 16 cho bước rửa thứ với DNA Wash Buffer 19 Ly tâm HiBind DNA Mini Column 14.000 vòng/ phút phút để làm khô cột 20 Chuyển HiBind DNA Mini Column vào ống ly tâm 2ml 21 Thêm 100 µl Elution Buffer (đã làm ấm đến 650C) Ủ 650C phút 22 Ly tâm 14.000 vòng/ phút phút 23 Thêm 50 µl Elution Buffer phút nhiệt độ phòng 24 Ly tâm 14.000 vòng/ phút phút 25 Thu bảo quản DNA -200C DANH SÁCH BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU VIỆN TIM MẠCH VIỆT NAM STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 Họ tên Lê Văn T Nguyễn Thị N Phạm Hữu B Nguyễn Văn Đ Nguyễn Đăng B Lê Đình B Lê Văn Q Nguyễn Văn H Lê Thị M Bùi Huy C Hoàng Thị Đ Nguyễn Thị D Nguyễn Thị D Bùi Văn T Tạ Văn T Hoàng Ngọc C Đoàn Quang B Hà Văn E Đàm Hữu T Trần Trọng T Đỗ Bích P Nguyễn Văn H Nguyễn Văn G Sìn Lào S Vũ Thị S Nguyễn Văn C Bùi Ngọc S Nguyễn Văn O Lê Văn H Đặng Thị L Nguyễn Văn Đ Nguyễn Văn T Phạm Quang M Nguyễn Thị Hồng Y Vũ Văn H Khổng Trọng C Lê Thị Hồng T Nguyễn Văn Q Mã số nghiên cứu 15 16 17 18 19 22 23 25 26 27 28 29 32 34 37 38 39 41 42 43 44 45 46 47 49 50 52 57 58 60 66 68 69 71 72 75 79 80 Mã bệnh án 160215216 160016952 160216087 160017230 160019101 160019259 160019232 162001150 160213980 160217843 160216034 160216688 160217509 160215597 160020215 160216908 160216378 160217542 160021271 160217449 160215698 160021437 160216768 160217786 160021606 160216824 160021816 160022054 161601279 161601250 161601320 160023567 160220960 160023679 160028146 160220645 160221134 161601229 Tuổi theo năm 64 73 80 62 55 62 59 60 77 66 54 76 65 77 56 71 78 76 68 83 65 76 43 76 49 66 69 80 66 77 47 62 79 50 79 60 64 72 Giới Nam Nữ Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nữ Nam Nữ Nữ Nữ Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nữ Nam Nam Nam Nữ Nam Nam Nam Nam Nữ Nam Nam Nam Nữ Nam Nam Nữ Nam 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 Dương Quốc D Trần Thanh M Đoàn Thanh M Mai Thị B Vũ Văn T Hoàng Thị N Trương Đại N Phạm Văn H Nguyễn Thị N Đỗ Thị C Nguyễn Trần C Nguyễn Văn N Lương Văn T Hoàng Minh T Sâm Ngọc D Nguyễn Văn S Ngô Doãn C Lê Văn K Trương Thị N Lê Thị T Nguyễn Văn M Nguyễn Thị T Ngô Quang D Bạch Đình D Hoàng Thị L Vũ Đức T Phạm Xuân D Ngô Đức Q Đỗ Đức T Bùi Đức N Hà Thế H Dương Văn P Lê Văn N Trần Văn Y Trần Văn M Phạm Văn T Trương Xuân L Nguyễn Thị T Lý Văn O Hoàng Văn C Nguyễn Quang T Đặng Huy C Lê Hữu M Lê Quang H Phạm Thị T 82 83 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 100 101 102 103 104 105 106 107 108 110 111 113 114 115 116 117 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 135 160219812 160219793 160222666 161601582 160028368 160219292 160028387 161601534 160223222 160223141 160224961 160224779 160224873 160224660 160224702 160224107 161601718 160224340 160224344 160224550 160224016 161601737 161601751 160224069 160223756 160031275 160223353 160226546 160227873 160228824 160229894 162002261 160233766 160234984 160043842 161602847 161602883 160044525 160235162 160235459 160044896 160045099 161602952 160235359 170204646 56 62 58 63 70 51 40 81 69 51 53 69 76 75 54 69 76 64 82 63 45 72 60 73 68 55 59 66 61 60 58 71 74 58 61 74 49 59 70 68 78 75 75 43 66 Nam Nam Nam Nữ Nam Nam Nam Nam Nữ Nữ Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nữ Nữ Nam Nữ Nam Nam Nữ Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nữ Nam Nam Nam Nam Nam Nam Nữ 84 Nguyễn Hùng S 141 XÁC NHẬN CỦA VIỆN TIM MẠCH VIỆT NAM 171600805 54 HỌC VIÊN Nam DANH SÁCH BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU TRUNG TÂM TIM MẠCH BỆNH VIỆN ĐH Y HÀ NỘI STT 10 11 12 13 14 15 16 Họ tên Phạm Minh H Nguyễn Văn H Nguyễn Mạnh C Vũ Quốc Đ Hà Thị C Nguyễn Sơn H Nguyễn Thế C Trần Văn L Trần Văn L Trịnh Thị L Đinh Đức V Phí Thị H Lê Văn B Bùi Thế C Hoàng Đạo Nhật Y Nguyễn Quang K Mã số nghiên cứu 10 11 53 55 86 87 88 XÁC NHẬN CỦA BỆNH VIỆN Mã bệnh án 15170743 15173692 15183796 15217053 15241501 15240154 15246424 16084484 16092118 16093613 16114643 16202590 16202833 16254136 16263225 16263157 Tuổi theo năm 56 62 32 52 89 56 78 67 70 69 54 77 64 76 49 58 HỌC VIÊN Giới Nam Nam Nam Nam Nữ Nam Nam Nam Nam Nữ Nam Nữ Nam Nam Nam Nam ... từ nhu cầu thực tiễn đó, tiến hành nghiên cứu đề tài: Đánh giá độ ngưng tập tiểu cầu với kiểu gen CYP2C19*2, CYP2C19*3 CYP2C19*17 bệnh nhân hội chứng động mạch vành cấp Đề tài tiến hành với mục... Mô tả kiểu gen CYP2C19*2, CYP2C19*3, CYP2C19*17 Đánh giá mối liên quan độ ngưng tập tiểu cầu với kiểu gen CYP2C19*2, CYP2C19*3, CYP2C19*17 số yếu tố khác bệnh nhân hội chứng động mạch vành cấp. .. 1.1 Hội chứng động mạch vành cấp 1.1.1 Định nghĩa Hội chứng động mạch vành cấp (HCĐMVC) thuật ngữ đề cập đến biểu lâm sàng có liên quan đến biến cố tổn thương động mạch vành có tính chất cấp