Nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại cơ chất đến sự hình thành thể quả nấm đông trùng hạ thảo (cordyceps militaris)

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN -***** - ĐINH PHƢƠNG THẢO NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ LOẠI CƠ CHẤT ĐẾN SỰ HÌNH THÀNH THỂ QUẢ NẤM ĐÔNG TRÙNG HẠ THẢO (Cordyceps militaris) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS LA VIỆT HỒNG HÀ NỘI, 2017 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS La Việt Hồng- Khoa Sinh KTNN Trường Đại học Sư phạm Hà Nội tận tình hướng dẫn, giúp đỡ suốt trình thực đề tài Tôi xin cảm ơn tới Ban Giám hiệu trường ĐHSP Hà Nội 2, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh - KTNN trường ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện để hoàn thành khóa luận Trong thời gian thực đề tài nhận giúp đỡ tận tình cô Mai Thị Hồng - Phòng thí nghiệm Sinh lý học thực vật giúp đỡ, đóng góp ý kiến để hoàn thành đề tài khóa luận, nhân xin gửi lời cảm ơn Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán Phòng thí nghiệm Sinh lí học thực vật, trường ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi thiết bị, phương tiện để hoàn thành khóa luận Cảm ơn gia đình bạn bè động viên, góp ý cho qua trình học tập hoàn thành đề tài Hà Nội, 20 tháng 04 năm 2017 Sinh viên ĐINH PHƢƠNG THẢO LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa công bố Hà Nội, 20 tháng 04 năm 2017 Sinh viên ĐINH PHƢƠNG THẢO MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn NỘI DUNG Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Đông trùng hạ thảo 1.1.1 Sơ lược nấm Đông trùng hạ thảo 1.1.2 Sự phân bố đặc điểm sinh học nấm Đông trùng hạ thảo 1.1.3 Nghiên cứu lâm sàng nấm Đông trùng hạ thảo Cordyceps 1.2 Tổng quan nấm Đông trùng hạ thảo Cordycep militaris 1.2.1 Phân loại mô tả nấm C militaris hu tr nh sống củ nấm Cordyceps militaris 10 1.2.3.Thành phần hóa học giá trị dược liệu C militaris 10 1.3 Các bƣớc trình nuôi trồng nấm C militaris 13 1.4 Tình hình nghiên cứu C militaris nƣớc 15 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nước 15 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 16 1.5 Điều kiện tự nhiên tình hình sản xuất Đông trùng hạ thảo Việt Nam 17 1.5.1 ác điều kiện thích hợp cho nuôi trồng nấm C militaris Việt Nam 17 1.5.2 Tình hình sản xuất nấm C militaris Việt Nam 18 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 20 2.2 Vật liệu nghiên cứu 20 2.3 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 20 .3.1 Thiết bị 20 Dụng cụ 20 2.4 Môi trƣờng điều kiện nuôi cấy 20 2.5.Phƣơng pháp nghiên cứu 21 2.5.1.Bố trí thí nghiệm 21 2.5.2 Phân tích thống kê số liệu thực nghiệm 23 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Ảnh hƣởng nhộng tằm đến hình thành thể C militaris môi trƣờng giá thể gạo tẻ 24 3.2 Ảnh hƣởng gạo tẻ đến hình thành thể nấm C militaris 26 3.3 Ảnh hƣởng gạo lứt đến hình thành thể nấm C militaris 28 3.4.Ảnh hƣởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris 30 3.5 Ảnh hƣởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành thể nấm C militaris 32 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 36 PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1: Công thức ảnh hưởng nhộng tằm đến hình thành thể C militaris môi trường giá thể gạo tẻ 21 Bảng 2.2: Công thức ảnh hưởng gạo tẻ đến hình thành thể nấm C militaris 22 Bảng 2.3: Công thức ảnh hưởng gạo lứt đến hình thành thể nấm C militaris 22 Bảng 2.4: Công thức ảnh hưởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris 23 Bảng 3.1: Ảnh hưởng nhộng tằmđến hình thành thể C militaris môi trường giá thể gạo tẻ 25 Bảng 3.2: Ảnh hưởng gạo tẻ đến hình thành thể nấm C militaris 27 Bảng 3.3: Ảnh hưởng gạo lứt đến hình thành thể nấm C militaris 29 Bảng 3.4 Ảnh hưởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris 31 Bảng 3.5 Ảnh hưởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành thể nấm C militaris 32 DANH MỤC HÌNH Hinh 1.1: Đông trùng hạ thảo Hình 3.1: Ảnh hưởng nhộng tằm đến hình thành thể C militaris môi trường giá thể gạo tẻ 26 Hình 3.2: Thể sau 60 ngày nuôi trồng loại chất gạo 28 Hình 3.3: Thể bị dị dạng 30 Hình 3.4: Ảnh hưởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris 31 Hình 3.5: Ảnh hưởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành thể nấm C militaris 33 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ĐTHT: Đông trùng hạ thảo C.militaris: Cordyceps militaris C.sinensis: Cordyceps sinensis Nxb: Nhà xuất PDA: Potato - Dextrose Agar MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Đông trùng hạ thảo có chất dạng ký sinh loài nấm thuộc nhóm Ascomycetes thể ấu trùng loài bướm chi Thitarodes [6] Tên gọi “Đông trùng hạ thảo” xuất phát từ quan sát thực tế; thấy vào mùa đông, nấm xâm nhập kí sinh sâu non đất,đến mùa hạ nấm kí sinh mọc chồi từ đầu sâu non, nhô lên khỏi mặt đất giống loài thực vật Đông trùng hạ thảo bao gồm phần sâu non phần thân nấm hình trụ mọc từ đầu ấu trùng sâu gọi thể Thể phần quan trọng nấm Đông trùng hạ thảo, nơi phát sinh bào tử chứa dược tính cao Đông trùng hạ thảo xếp ngang với nhân sâm công chữa bệnh - thuộc vào loại toàn diện Chi Cordyceps Đông trùng hạ thảo có 356 loài khác nhau, riêng Trung Quốc tìm thấy 60 loài Tuy nhiên, hai loài nghiên cứu nhiều đưa vào nuôi trồng nhiều Cordyceps sinensis Cordyceps militaris [24], [22] C sinensis loại nấm dược liệu có phân bố hạn chế tự nhiên nuôi trồng điều kiện hoang dã, loài nấm chưa nuôi trồng thành công môi trường nhân tạo, sản lượng nấm thu không đáp ứng đủ nhu cầu thị trường [22], [38] Trong C militaris chứa hợp chất hóa học tương tự C sinensis, dễ dàng nuôi trồng môi trường nhân tạo [11] C militaris chứa nhiều chất có hoạt tính sinh học cordycepin, adensin, sterol, mannitol, superoxide dismutase, axit amin thiết yếu… nên việc sử dụng nấm C militaris giúp ngăn ngừa kìm hãm phát triển tế bào ung thư [27], kháng viêm, kháng virut, điều hòa tim mạch, giải độc cho thận [42], bảo vệ gan [25], làm chậm trình lão hóa thể [22], [33], giảm cholesterol máu [20]…Trên giới, nấm C militaris nhà khoa học nghiên cứu thu nhiều thành tựu có giá trị Với công nghệ sinh học tiên tiến, nhiều nước thành công việc nuôi cấy chất Cordyceps phát triển công nghiệp sản xuất C militaris Ở Việt Nam, việc nghiên cứu nấm Đông trùng hạ thảo bắt đầu vài năm gần gặp nhiều khó khăn sở vật chất kiến thức Để góp phần vào nghiên cứu môi trường thích hợp cho nấm Đông trùng hạ thảo nhằm tạo sản phẩm có chất lượng tốt, giá thành hợp lý, thực đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số loại chất đến hình thành thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris)” Mục đích nghiên cứu Đánh giá trình hình thành thể nấm Cordyceps militaris môi trường nhân tạo với số loại chất khác Nội dung nghiên cứu - Ảnh hưởng nhộng tằm đến hình thành thể C militaris môi trường giá thể gạo tẻ - Ảnh hưởng gạo tẻ đến hình thành thể nấm C militaris - Ảnh hưởng gạo lứt đến hình thành thể nấm C militaris - Ảnh hưởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris - Ảnh hưởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành thể nấm C militaris Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn Ý nghĩ kho học: Nhằm bổ sung vào nguồn tư liệu khoa học cho nuôi cấy nấm quy mô phòng thí nghiệm Ý nghĩ thực tiễn: Là sở phục vụ cho nhu cầu tạo số lượng lớn nấm Đông trùng hạ thảo Góp phần nâng cao hiệu nghiên cứu, ứng dụng vào sản xuất nhằm tạo nấm với hiệu suất cao, chất lượng tốt đáp ứng nhu cầu thị hiếu người Hình 3.2: Thể sau 60 ngày nuôi trồng loại chất gạo a: Môi trường GT1; b: Môi trường GT2; c: Môi trường GT3 d: Môi trường GL1; e: Môi trường GL2; f: Môi trường GL3 3.3 Ảnh hƣởng gạo lứt đến hình thành thể nấm C militaris Gạo lứt loại gạo giàu dinh dưỡng đặc biệt sinh tố nguyên tố vi lượng [15] Jae cs (2006) xác định chất thích hợp cho nuôi trồng ĐTHT giá thể nhân tạo gạo lứt Trong nhiều thí nghiệm khác nhà khoa học chọn gạo lứt làm giá thể nuôi trồng ĐTHT nghiên cứu ánh sáng đến sinh trưởng phát triển nấm Cordyceps militaris Đặng Xuân Hoàng cs (2016) Tuy nhiên gạo lứt sử dụng với hàm lượng công bố Trong nghiên cứu thực đánh giá ảnh hưởng hàm 28 lượng gạo lứt khác đến hình thành thể nấm C militaris Sau 60 ngày nuôi trồng, kết thu thể bảng 3.3 hình 3.2 Bảng 3.3:Ảnh hƣởng gạo lứt đến hình thành thể nấm C militaris Công thức Số lượng/bình Chiều cao (cm) Đặc điểm thể Số lượng thể ít, phân bố GL1 12,40 ± 1,82a 2,08 ± 0,37a không đều, kích thước nhỏ, đầu thể nhọn, xẻ thùy có màu cam đậm Số lượng thể tương đối GL2 20,20 ± 1,92b 4,36 ± 0,70b nhiều, phân bố tương đối đồng đều, kích thước lớn, đa số bị xẻ thùy có màu cam Số lượng thể ít, phân bố GL3 10,08 ± 1,92a 4,04 ± 0,63b không đều, kích thước tương đối lớn không đều, bị xẻ thùy có màu cam Trong cột, chữ theo s u há nh u , b, … thể sai khác có ý nghĩ th ng kê với α=0,05 Kết từ bảng 3.3 cho thấy hai công thức GL1 GL3 có số thể quả/bình tương đương (khoảng 10 thể quả/bình), phân bố không Trong đó, công thức GL2 có số lượng thể quả/bình gấp ≈ lần công thức GL1, GL3 với 20,2 thể quả/bình thể phân bố tương đối Trong nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng nước tới sinh trưởng phát triển nấm C militaris, Lương Thị Hương Lan cs cho môi trường có tỉ lệ w/v gạo lứt nước cao số lượng thể thu 29 thấp [2] Tuy nhiên, kết nghiên cứu chúng tôi, điều với công thức GL2 so GL3 Khi so sánh GL1 với GL2 lại thu kết ngược lại Điều hoàn toàn hợp lý, tỉ lệ w/v thấp nghĩa hàm lượng nước cao dẫn đến môi trường lỏng, gây khó khăn cho việc hình thành thể Hình 3.3: Thể bị dị dạng a: Thể bị xẻ thùy đầu tròn ; b: Thể mọc cụm bị phân nhánh ; c: thể bị xẻ thùy kích thước dị dạng Chiều cao công thức có khác biệt rõ ràng Mặc dù số lượng thể quả/bình GL3 GL1 tương đương nhau, chiều cao thể công thức GL3 (4,04 cm) gấp gần lần so với công thức GL1 (2,08 cm) tương đương với chiều cao thể công thức GL2 (4,36 cm) (bảng 3.3) Một số thể có tượng xẻ thùy, phân nhánh hình 3.3 Như vậy, ba công thức thí nghiệm, công thức GL2 (150 g gạo/L) thích hợp cho hình thành thể 3.4.Ảnh hƣởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris Trên môi trường nhân tạo, sử dụng gạo làm chất số chất hữu khác sử dụng để nuôi trồng nấm C militris bao gồm: bột đậu, hạt ngô, lõi ngô, vỏ hạt bông, kê, lúa miến, lúa mì, ngũ cốc, hoa hướng dương [21], [40] Trong nghiên cứu này, sử dụng nguồn tinh 30 bột ý dĩ Ý dĩ loại hạt giàu giá trị dinh dưỡng với 65% chất hydratcacbon, 5,4% chất béo, 13,7% chất protit axit amin [46] Thí nghiệm thực với hàm lượng ý dĩ khác nhau, sau 60 ngày nuôi trồng thu kết bảng 3.4, hình 3.4 Bảng 3.4 Ảnh hƣởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris Công thức Số lượng/bình YD1 0,80 ± 0,84 YD2 0,40 ± 0,55 YD3 2,00 ± 1,58 Đặc điểm thể Chỉ vài bình xuất từ 1-2 thể với kích thước bé, màu vàng cam nhạt Các bình có xuất 1-2 mầm thể không phát triển Có số bình xuất 4,5 thể quả, kích thước bé, đầu nhọn, màu nâu Từ kết thấy ba môt trường YD1, YD2, YD3 hình thành thể hình thành Thể với kích thước bé, đỉnh nhọn, màu nâu gần giá trị sử dụng (hình 3.4) Hình 3.4: Ảnh hưởng củ ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris a: Công thức YD1 ; b: Công thức YD2 ; c: Công thức YD3 Như vậy, ý dĩ nguồn tinh bột không phù hợp cho nuôi cấy nấm C militaris 31 3.5 Ảnh hƣởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành thể nấm C militaris Nitơ có vai trò quan trọng xây dựng khung tế bào thành phần protein enzyme Nấm C militaris có khả sử dụng nguồn nitơ hữu vô Tuy nhiên nguồn nitơ thích hợp cho sinh trưởng phát triển nitơ hữu từ nhộng tằm…và nguồn nitơ vô từ NH4NO3 [32] Bên cạnh đó, nguyên tố Kali, Magie…góp phần quan trọng hình thành thể nấm C militaris Các chất khoáng vô sử dụng nghiên cứu bao gồm: KH2PO4, K2HPO4, NH4NO3, MgSO4.7H2O vitamin B1 Các chất khoáng sử dụng với nồng độ phần 2.5.1 Sau 60 ngày nuôi trồng thu kết bảng 3.5 hình 3.5 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành thể nấm C militaris Công Số Chiều cao Khối lượng thức lượng/bình (cm) tươi/bình (g) Đặc điểm thể Số lượng thể ít, phân CT1 28,60 ± 2,40a 3,48 ± 0,42 7,25 ± 0,71a bố tương đối đều, kích thước không đều, đầu tròn, màu vàng cam Số lượng thể lớn, phân bố kín hết mặt CT2 85,60 ± 2,30b 3,86 ± 0,36 38,76 ± 1,89b môi trường, kích thước lớn tương đối đồng đều, đầu tròn, màu cam đậm Trong cột, chữ theo s u há nh u , b, … thể s i há th ng kê với α=0,05 32 ý nghĩ Kết từ bảng 3.5 cho thấy công thức CT2 (bổ sung khoáng vô cơ) có kết vượt trội công thức đối chứng CT1 (không bổ sung chất khoáng) Mặc dù sai khác chiều cao hai công thức ý nghĩa thống kê hay chiều cao chúng tương đương Nhưng số lượng thể quả/bình CT2 (85,6 thể quả/bình) gấp lần so với CT1 (28,6 thể quả/bình) (hình 3.5) Và khối tượng thể tươi/bình CT2 (38,76 g) gấp 5,3 lần CT1 (7,25 g) Kết phù hợp với nghiên cứu Kang cs (2014) Nghiên cứu Li năm 2004 Dong năm 2012 cho thấy việc bổ sung muối khoáng K+, Mg2+ nồng độ khoảng 0,1 g/L làm tăng suất thể hàm lượng hoạt chất sinh học nấm [11], [18], [21] Hình 3.5: Ảnh hƣởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành thể nấm C militaris a,c: thể môi trường (CT1) không bổ sung chất khoáng vô b,d: thể môi trường (CT2) bổ sung chất khoáng vô 33 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Dựa vào kết thu từ thí nghiệm trên, rút số kết luận sau: 1.1 Hàm lượng nhộng tằm thích hợp cho trình hình thành thể nấm C militaris nuôi trồng nhân tạo 50 g/L Cụ thể, môi trường giá thể gạo tẻ, kết hợp với nhộng tằm 50 g/L thu 28,6 thểquả/bình chiều cao trung bình 3,48 cm 1.2 Môi trường với 100 g gạo tẻ/L môi trường thích hợp cho trình hình thành thể nấm C militaris Khi sử dụng môi trường với hàm lượng gạo tẻ 100 g /L, 20 g glucose/L có bổ sung nhộng tằm với hàm lượng 30 g/L, thu 22,6 thể quả/bình, chiều cao trung bình 2,74 cm 1.3 Đối với chất gạo lứt, môi trường chứa hàm lượng gạo thích hợp cho trình hình thành thể 150 g/L Môi trường với hàm lượng gạo lứt 150 g/L kết hợp với 20 g glucose/L, 30 g nhộng tằm/L thu 20,2 thể quả/bình cao trung bình 4,36 cm 1.4 Môi trường với chất ý dĩ không thích hợp cho hình thành thể Khi sử dụng môi trường với 200 g ý dĩ/L kết hợp với 20 g glucose/L, 30 g nhộng tằm/L thu thể quả/bình, kích thước bé 1.5 Môi trường với thành phần dinh dưỡng: 0,5 g/L MgSO4.7H2O; 0,5 g/L KH2PO4; 0,5 g/L K2HPO4; 1g/L NH4NO3; mg/L Vitamin B1; 100 g gạo tẻ/L; 20 g glucose/L; 50 g nhộng tằm/L thích hợp cho trình hình thành thể Cụ thể, môi trường tạo 85,6 thể quả/bình, chiều cao trung bình 3,86 cm, khối lượng tươi 38,76 g/bình 34 Kiến nghị 2.1 Cordyceps militaris loại nấm có giá trị dược liệu giá trị kinh tế cao Vì cần tiếp tục nghiên cứu môi trường thích hợp cho hình thành thể để nâng cao suất chất lượng sản phẩm 2.2 Nghiên cứu thêm tối ưu hóa giai đoạn nuôi trồng nấm từ hoàn thiện quy trình sản xuất nấm ĐTHT đưa vào sản xuất công nghiệp để đáp ứng nhu cầu thị trường 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO * Tài liệu tiếng Việt Dương Minh Lam, Phạm Văn Nhã, Đặng Xuân Hoàng, Phạm Thị Lan (2016), “Kinh nghiệm nuôi trồng nấm Cordycepsmilitaris chất Trung Quốc”, ỉ u hội thảo: Giới thiệu qu trình nuôi trồng n m mi it ris tr n tằm dâu qu mô phòng thí nghiệm 2016, tr1-7 Lương Thị Hương Lan, Dương Minh Lam (2016), “Ảnh hưởng hàm lượng nước tới sinh trưởng phát triển nấm Cordyceps militaris”, ỉ u hội thảo: Giới thiệu qu trình nuôi trồng n m mi it ris tr n tằm dâu qu mô phòng thí nghiệm 2016, tr31-37 Phạm Thị Lan, Đặng Xuân Hoàng, Nguyễn Thị Hồng Hạnh, Bạc Thị Thu (2016), “Ảnh hưởng chất tới sinh trưởng phát triển nấm Cordyceps militaris”, ỉ mi it ris tr n tằm dâu u hội thảo: Giới thiệu qu trình nuôi trồng n m qu mô phòng thí nghiệm 2016, tr38-52 Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), Ph ơng pháp nghi n ứu sinh ý họ thự vật,Nxb Đại học quốc gia, Hà Nội, tr 179 -200 Phạm Quang Thu, Lê Thị Xuân, Nguyễn Mạnh Hà (2009),”Nghiên cứu đặc điểm sinh học hệ sợi nuôi cấy khiết chủng nấm Đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris (L.:Fr) Link.”, p hí nông nghiệp v phát triển nông thôn số - tháng 8/2009 Nguyễn Thị Liên Thương, Trịnh Diệp Phương Danh Nguyễn Văn Hiệp (2016), “Nấm Đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris: đặc điểm sinh học, giá trị dược liệu yếu tố ảnh hưởng đến trình nuôi trồng nấm.”, p h ho họ r ờng i họ n hơ, 44 (2016): 9-22 Lê Văn Vẻ, Trần Thu Hà, Nguyễn Thị Bích Thùy, Ngô Xuân Nghiễn (2015),“Bước đầu nghiên cứu công nghệ nuôi trồng nhộng trùng thảo (Cordyceps militaris L.ex Fr.) Việt Nam ”, 36 p hí ho họ v Phát triển, 13 (3): 445-454 * Tài liệu nƣớc Byung-Tae P., Kwang-Heum N., Eui-Cha J., JaeWan P., Ha-Hyung K., (2009),”Antifungal and Anticancer Activities of a Protein from the Mushroom Cordyceps militaris”,Korean Journal of Physiol Pharmacology 13: 49 - 54 Chang, H L., Chao, G R., Chen, C C., Mau, J L (2001), “Non-volatile taste components of Agaricus blazei, Antrodia camphorata and Cordyceps militarismtcelia”, Food Chemistry, 74: 203-207 10.Chen L.T.,Cao H.F & Huang W.F (2005),“Components, pharmacological activities and application of Cordyceps militaris”,Modern Food Science, 21 (3): 192-195 11.Dong JZ, Lei C, Ai XR et al.(2012), “Selenium enrichment on Cordyceps militaris Link and analysis on its main active components”, Applied Biochemistry and Biotechnology, 166: 1215-1224 12.Feng-Lin Hu, Zeng-Zhi Li, Ya-Qiong He, Chu-Ru Li, Bo Huang, MeiZhen Fan (2009), “Secondary metabolistes in a soybean fermentation both of Paecilomyces militarys”, Journal of Food Chemistry 116, pp198-201 13.Gao X.H., Wu W., Qian G.C (2000), “Study on influences of abiotic factors on fruitbody differentiation of Cordyceps militaris”, Acta Agriculture Shanghai, 16: 93-98 14.Hyun H., (2008), “Chemical Ingredients of Cordyceps militaris” Mycobiology, 36 (4):233-235 15.Jae M.S., Young J.P., Je O.L., Sang K.H, Won H.L., Sung K.C and Bhushan S (2006), “Selection of Superior Strains of Cordyceps militaris with Enhanced Fruiting BodyProductivity”, Mycobiology 34 (3): 131-137 37 16.Jin L.Y, Du S.T, Ma L (2009),“Optimization on mathematical model ofbasic medium of Cordyceps militaris cultivation”,J Northwest A F Univ (Nat Sci Ed), 37 (11): 175-179 17.Kamble V.R., Agre D.G (2012), “Reinvestigation of insect parasite fungus Cordyceps militaris from Maharashtra”, Bionano Frontier5 (2):224-225 18.Kang C., Wen T.C., Li G.R., Kang J.C and Hyde D.K (2014), “Opimization ofSolid-state Fermentation for Fruiting Body Growth and Cordycepin Production by Cordyceps militaris”, Chiang Mai J Sci.,41 (4): 858- 872 19.Kobayasi Y (1982), “Keys to the taxa of the genera Cordyceps and Torrubiella”, Transactions of the Mycological Society of Japan 23:329364 Herbal, New York 20.Koh J.H., Kim J.M, Chang U.J and Suh H.J (2003), “Hypocholesterolemic effect of hot-water extract from mycelia of Cordyceps sinensis”, Biol Pharm Bull 26: 84-87 21.Li C.B., Tong X.D and Bai J (2004), “Artificial stromata production of Cordyceps militarys”, J Dalian Natl Univ., (5): 29-31 22.Li S.P., Zhang G.H., Zeng Q., Huang Z.G., Wang Y.T., Dong T.T.X and Tsim K.W.K (2006), “Hypoglycemic activity of polysaccharide with antioxidation isolated from cultured Cordyceps mycelia”, Phytomedicien 13: 428-433 23.Lin W.H., Tsai M.T., Chen Y.S., Hou R.C., Hung H.F., Li C.H., Wang H.K., Lai M.N., Jeng K.C (2007), “Improvement in sperm production in subfertile boars by Cordyceps militaris”, The American Journal of Chinese Medicine, 35 (4):631-641 24.Liu Z.Y., Yao Y.J., Liang Z.Q (2001), “Molecular evidence for the 38 anamorphteleomorph connection in Cordyceps sinensis” Mycological Research, 105: 827-832 25.Liu Y.K and Shen W (2003),“Inhibitive effect of Cordyceps sinensis on experimental hepatic fibrosis and its possible mechanism”, World J Gastroenterol 9: 529-533 26.Ohta Y Lee, J B Hayashi, K F ujita A., Park D K (2007), “Invivo antiinfluenza virus activity of animmun omodulatory acidicpolysaccharide isolated from Cordyceps militaris grow on germinated soybeans”, Journal of Agricutural and Food Chemistry, 55 (25): 10194-10199 27.Park B.T., Na K.H and Jung E.C (2009), “Antifungal and anticancer activities of a protein from the mushroom Cordyceps militaris”, Korean J Physiol Pharm 13: 49-54 28.Paul M K., Paul F C., David W M and Stalpers J A (2008), Dictionary of the Fungi, CABI 29 Shih I.L., Tsai K.L., Hsieh C.Y (2007),“Effects of culture conditions on the mycelial growth and bioactive metabolite production in submerged culture of Cordyceps militaris”, Biochemical Engineering Journal, 33: 193-201 30.Shonkor K D., Shinya F., Mina M and Akihiko S (2010), “Efficient Production of Anticancer Agent Cordycepin by Repeated Batch Culture ofCordyceps militaris Mutant”,Lecture Notes in Engineering and Computer Science, 20-22 31.Shrestha B., Zang W., Zhang Y and Liu X.Z (2012), “The medicinal fungus Cordyceps militaris: research and development”, Gmerman Mycological Society and Springer 32.Ting C.W, Guang R.L, Ji C.K, Chao K and Kenvin D.H (2014), “Optimization of Solid - state Fermentation for fruiting body grow and cordycepin production by Cordyceps militaris” J Sci, 41 (4): 858-872 39 33.Wang Y.L., Zheng S.S Lv GZ et al (2009), “Current status of investigation on media used for artificial cultivation of Cordyceps militaris in China”, Edible Fungi 31 (1): 1-2 34.Wen T.C., Kang J.C and Li G.R (2008), “Effects of different solid culture condition on fruit body and corducepinoutput of Cordyceps militaris”,Guizhou Agric Sci., 36 (4): 92-94 35.Wol-Soon J., Yoo-Jin C., Hyoun-Ji K., Jae-Yun L., Byung-Hyouk N., JaeDong L., SangWha L., Su-Yeong S and Min-Ho J (2010), “The Antiinflammatory Effects of Water Extract fromCordyceps militarisinMurine Macrophage”, Mycobiology, 38 (1): 46-51 36.Yahagi N., Yahagi R and Takano F (2004), “Growth ofascoscarps from cultured Cordyceps militaris (L :Fr) Fr and Cordyceps formicarum Kobayasi in an agar medium”, Nippon Kingakukai Kaiho, 45: 15-19 37.Yan H., Zhu D., Xu D., Wu J and Bian X (2008),“A study on Cordyceps militaris polysaccharidepurification, composition and activity analysis”, African Journal of Biotechnology, (22): 4004-4009 38.Zhang J.Y., Wu K.L., Duan J (2010), “Influence of air permeability on growth of Cordyceps militaris”,Guangdong Agricultural Science, 4: 4547 39.Zhang Y.J., Li E., Wang C.S (2012), “Ophiocordyceps sinensis, the flagship fungus of China: terminology, life strategy and ecology”, Mycology, 3: 2-10 40.Zhao C.Y., Li H and Zhang M (2006),“Optimization on conditions of artificial cultivation of Cordyceps militaris”,J Shenyang Agric Univ., 37(1):209-212 41.Zheng P., Xia Y.L., Xiao Ch.H (2011), “Genome sequence of the insect pathogenic fungus Cordyceps militaris, a valued traditional Chinese 40 medicine”, Genome Biology, 23; 12 42.Zhou X., Gong Z., Su Y., Lim J and Tang K (2009), “Cordyceps fungi: natural products, pharmacological funtions and developmental product”, Journnal of Pharmacology, 61: 279-291 *Tài liệu internet 43.http://vafs.gov.vn/vn/2015/03/bao-cao-ket-qua-nghien-cuu-nghien-cuuxay-dung-quy-trinh-nuoi-trong-nam-dong-trung-ha-thao-cordycepsmilitaris-l-fr-link-co-gia-tri-duoc-lieu-va-thuong-mai-cao/ 44.http://vi.mushclubvn.com/node/1574 45.https://vi.wikipedia.org/wiki/Nh%E1%BB%99ng 46.http://www.tuelinh.vn/y-di-1497 41 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH NUÔI TRỒNG NẤM ĐTHT CORDYCEPS MILITARIS ... đến hình thành thể nấm C militaris - Ảnh hưởng gạo lứt đến hình thành thể nấm C militaris - Ảnh hưởng ý dĩ đến hình thành thể nấm C militaris - Ảnh hưởng số chất khoáng vô bổ sung đến hình thành. .. có chất lượng tốt, giá thành hợp lý, thực đề tài Nghiên cứu ảnh hưởng số loại chất đến hình thành thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Mục đích nghiên cứu Đánh giá trình hình thành. .. lược nấm Đông trùng hạ thảo 1.1.2 Sự phân bố đặc điểm sinh học nấm Đông trùng hạ thảo 1.1.3 Nghiên cứu lâm sàng nấm Đông trùng hạ thảo Cordyceps 1.2 Tổng quan nấm Đông trùng hạ thảo