Các hợp chất thơm từ vi sinh vật tổng hợp de novo

Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH MỤC LỤC 5.1.Tóm tắt lịch sử Bioflavors ( chất thơm sinh học) 5.2 Oligo – Isoprenoids (terpen) 5.2.1 Sinh tổng hợp terpenoid prokaryote 5.2.2 Sinh tổng hợp terpenoid tự nhiên từ nấm .13 5.3 Hợp chất béo 16 5.3.1 Acid carboxylic 16 5.3.2 Sản phẩm Lipoxygenase 18 5.3.3 Carbonyls 21 5.3.4 Alkanols 27 5.3.5 Este 30 5.4 Chất thơm (Aromatic) 33 5.4.1 Vanillin 35 5.4.2 Cinnamate 38 5.4.3 Heterocycle .40 5.5 Sự giảm thiểu mùi lạ 46 Tài liệu tham khảo 48 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Chương 5: Các hợp chất thơm từ vi sinh vật Tổng hợp De Novo De novo tổng hợp có nghĩa tổng hợp phân tử phức tạp từ phân tử phân tử đơn giản phân tử đường hay acid amin Các hợp chất thơm truyền thống lên men từ thực phẩm, giai đoạn đầu tiên, từ hệ vi sinh phức tạp mà tác động lên một phần hiểu đường tiền chất hóa học cấu trúc thực phẩm phức tạp (cf chương 2) Hầu hết quy trình cổ điển đánh giá cao tự điều chỉnh kết cấu trúc liên tục chất bay hơi, quy trình khác phụ thuộc vào mặt hạn chế thuộc tính chất xúc tác sinh học biến sản xuất với nguy xảy hình thành chất phi hương vị Sự phối hợp công nghệ sinh học hương liệu đòi hỏi vi sinh vật học xác định môi trường dinh dưỡng thực phẩm Chương sau chủ yếu thảo luận công tác tuyển chọn thực với biến đổi, thường không tối ưu hóa môi trường để làm rõ phạm vi chiều sâu hướng nghiên cứu Từ điểm áp dụng xem phần nhỏ chủ đề theo cấu trúc hóa học xác định cho thích hợp 5.1.Tóm tắt lịch sử Bioflavors ( chất thơm sinh học) Omelianski báo cáo mùi vi sinh vật tự nhiên giải phóng gắn liền với tích tụ ôi sản phẩm trao đổi chất axit hữu rượu môi trường Mycobacterium tuberculosis Pseudomonas aeruginosa Môi trường nuôi cấy vi khuẩn thường sản xuất mùi cụ thể nhiều mức độ khác cường độ cho phép nhận dễ dàng số loài Thông thường, mùi khó chịu đáng ý nơi mà môi trường đại chúng vi khuẩn lưu giữ Mùi sản xuất môi trường nuôi cấy đặc tính chung nhóm hay đặc điểm cụ thể cá nhân Các vi khuẩn gây thối rữa điển hình ví dụ, công nhận mùi riêng chúng, môi trường nấm men, nấm mốc xạ khuẩn dễ nhận hương thơm đặc biệt chúng Môi trường cổ Erythrob, prodigiosus tạo mùi đặc trưng trimethylamine, B fitzianus, mùi mồ hôi (axit caproic ester), B odorificus, mùi phân thối, vv Điều vi khuẩn gây bệnh: môi trường cũ Mycob, bệnh lao phổi phát mùi đặc biệt, Ps pyocyanea, mùi ngọt, giống hoa vôi cây, M tetragenes M pyogenes-mùi phần giống keo, vv Một số lượng lớn ví dụ tương tự trích dẫn, không ý đến chúng Có nhóm đặc biệt vi sinh vật, đại diện số Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH đặt tên "vi sinh vật hương thơm sản xuất", bao gồm loài sản xuất môi trường nuôi cấy mùi hương tao mạnh mẽ cường độ khác nhau, làm gợi lại mùi trái cây: dâu tây, dứa, táo, lê, dưa thơm, vv Đây thuộc vi sinh vật, cung cấp cho "mùi đặc trưng" cho sản phẩm khác sử dụng cho thực phẩm đồ uống sữa, mát, bơ, rượu, vv Tên loài thuộc nhóm hình thành tương ứng cách thêm tính ngữ: cus aromati-, aromafaciens, odorus, odoratus, esterifaciens, fragi, fragariae, nobilis, vv, tác giả thường khác mô tả loài khác tên Có ba tài liệu khác nhau: Bact aromaticum- those of Beijerinck, Pammel van der Leck, ba Bact odoratum-of Henrici, Burri Weiss Bên cạnh tiêu chí hóa học hình thái, chất mùi bắt nguồn vi sinh vật nuôi cấy phục vụ để phân loại loài kỷ XIX Một nghiên cứu tổng thể việc tạo hương thơm vi sinh vật xuất sớm vào năm 1923 (Omelianski) Các mô hình thường trích dẫn Pseudomonas aeruginosa, bệnh nhân có mùi gây 2-amino acetophenone, chứng tỏ giá trị chẩn đoán liên quan đến hiển thị mùi (Mann, 1966) Các bác sĩ có kinh nghiệm ý đến mùi thở, nước tiểu quan bị nhiễm bệnh Loài có bật đặc tính mùi gán cho với epithetons aroma - ticus, esterifaciens, odorus, odoratus, jragi, nobilis Omelianski xem hương thơm tạo nên ‘đặc tính dễ thay đổi’mà hương nhiều nhanh chóng trình 'nuôi cấy nhân tạo' Họ đề nghị hợp chất tự nhiên, ví dụ dâu tây để lấy lại dâu tây Trong ý kiến có lẽ đề cập trước, quan sát chăm tiền chất hương thực vật glycosidic, họ chuẩn bị tảng để tiếp tục sử dụng thành phần môi trường dinh dưỡng phức tạp với hệ sinh hóa không lường họ Omelianski nhận thấy cách xác thay đổi mùi môi trường vi sinh vật phát sinh từ hiển thị phụ thuộc vào tập trung truyền bay đơn lẻ, từ thay đổi động lực toàn hồ sơ chất bay trình canh tác hàng loạt Sự cô lập loại nấm men giống năm 1889 mô tả Mùi Sachsia suaveoleus gây methylbutanols số este chúng Ban đầu gọi 'Weinbouquet Schimmelpilz', dòng giống hệt với dòng Oidium suaveoleus Oospora suaveoleus , gần kỷ sau đó, báo cáo mùi có nguồn gốc trái (Hattori et al., 1974) Omelianskii báo cáo trực khuẩn monotri chous phân lập từ sữa sản xuất mùi dâu tây Các este hoá học vi khuẩn Pseudomonas frafi đánh giá đầy đủ gần (Cormier et al., 1991; Raymond et al., 1991; cf Sect 5.3.5) Tiềm vượt trội nấm bậc cao công nhận sớm (Badcock, 1939) Trong năm Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH 1940 đạo Birkinshaw khởi xướng loạt nghiên cứu chất chuyển hóa dễ bay nấm bậc cao (Birkinshaw and Findlay, 1940; Birkinshaw and Morgan, 1950) Nếu trợ giúp phương pháp sắc ký khí, chất bay Lentinus lepideus Trametes suaveolens xác định anisaldehyde methyl este axit p-methoxy cinnamic, axit anisic, acid cinnamic Các loài Ceratocystis (Endoconidiophora thời điểm đó) hình thành methylpropyl acetate cấu trúc methylheptene Chất dễ bay hơi, terpenes xác định loài Ceratocystis vào khoảng trước năm 1960, sau số loài khác (Sprecher et al., 1975; Drawert and Barton, 1978) Phổ chất bay nhiều loài Ceratocystis mê nhiều nhà nghiên cứu khắp giới (Collins and Morgan, 1962; Collins, 1976; Lanza et al., 1976) Các chất dễ bay vi khuẩn nhận quan tâm, trừ trường hợp, nơi mà có vấn đề mùi lạ, ví dụ gây geosmin nguồn nước uống, cần giải (Gerber, 1968; Collins et al., 1971) Thực phẩm liên quan loài, chẳng hạn Penicillium roqueforti (Gehrig and Knight, 1958) loài Cadida (Okui et al., 1963) nuôi cấy môi trường tối thiểu để nghiên cứu hình thành acid béo dễ bay phân hủy Các phần vi sinh hương mát hương vị nấm ăn làm sáng tỏ nghiên cứu kỹ (for example, Dwivedi and Kinsella, 1974; Pyysalo, 1976) Với đời cặp phương pháp sắc kí khí khối phổ số lượng công bố sáng chế tăng lên đáng kể Tổng kết kỹ thuật ý kiến năm 1980, Kempler kết luận "nhu cầu công nghiệp cho hợp chất hương liệu với việc làmsáng tỏ đường sinh tổng hợp có liên quan phức tạp chắn dẫn đến ứng dụng trình sinh học vi sinh ngày tăng để sản xuất hương năm tới (Kempler, 1983) 5.2 Oligo – Isoprenoids (terpen) Cấu trúc terpene bao gồm monomer gọi isoprene Isoprenoid tên gọi khác terpen Chuỗi hở vòng mono-và sesquiterpene (3 vòng isoprene) với mức độ khác trình oxy hóa nguyên tắc hóa học cảm quan loại dầu thiết yếu Mục đích thương mại monoterpene quan trọng, chẳng hạn D-limonene (giống cam quýt), citral (chanh), tinh dầu bạc hà (làm mát), carvone (cây phòng phong/ bạc hà) -tecpineol (tử đinh hương) có nhiều loại tinh dầu có sẵn thường tinh chế việc tách chiết Kết là, nguồn terpenoid có cách thuận lợi thực vật cạnh tranh với tổng hợp vi sinh vật Việc tổng hợp vi khuẩn Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH terpenoid bay giới hạn geosmin, số dẫn xuất borane, cadin-4-ene-lol (Gerber 1968; Collins et al., 1971; Ger- ber, 1971) Nấm men nguồn tecpen dễ bay đề cập phần 2.3.1 Chủng Kloeckera Torulopsis khả hình thành lượng thấp limonene, linalool, -tecpineol, -myrcene Free farnesol trung tâm terpenoid trung gian cao hơn, xuất thoát từ tế bào S.fermentati, S rosei, S.cerevisiae, điều kiện nuôi cấy không ủng hộ tăng trưởng đặn Citronellol sinh tổng hợp Kluyveromyces lactis không phụ thuộc vào tiền chất đặc biệt, bị kích thích việc bổ sung L-asparagin (Drawert Barton, 1978) Điều có vai trò ưu tiên L-asparagin , đó, khẳng định nhiều vi sinh vật khác Giống Ambrosiozyma, sinh vật nấm men giống với quy tắc phân loại, ngoại lệ cho quy tắc sản xuất monoterpene phổ biến, chẳng hạn geraniol citronellol, mg L-1 mở rộng (Klingenberg and Sprecher, 1985) 'Nấm nhận điểm nhấn không tốt’ (Wainwright, 1992), chúng hẳn nhiên đến nhà sản xuất linh hoạt terpenoid dễ bay Điều bao gồm dòng chuyển hóa hợp chất geraniol, nerol linalool chất tương tự sesquiterpene họ farnesol nerolidol (Hanssen Abraham, 1987; Abraham Berger, 1994), cấu trúc chưa xác định nguồn thực vật (Abraham Arfmann, 1988; Hình 5.1) Nuôi cấy nấm cần phải thông khí Tùy thuộc vào thời gian nuôi cấy điều kiện nuôi cấy chung, linalool nhanh chóng chuyển thành ete vòng, tìm thấy nhiều loại tinh dầu (Abraham Berger, 1994; Hình 5.2.) Linalool thể ngưỡng phát mùi thấp, oxit cyclic nghĩa vụ phải đóng góp cho mùi tinh dầu dư thừa thường lớn chúng Tuy nhiên nghiên cứu tốt vượt trội đa dạng số lượng monoterpene sản xuất loài Ceratocystis (Sprecher et al, 1975; Collins, 1976; Lanza et al, 1976) Các terpenoid phổ biến liệt kê Hình 5.3 Trong số tecpineol, -isomer có ưu acetate Mặc dù tỷ lệ hấp thu 2- 14Cmevalonate thấp, kết luận sinh tổng hợp theo đường hình thành thưc vật bậc cao (Lanza Palmer, 1977) Năng suất thường thấp tăng lên thành công cách áp dụng vật liệu hấp phụ polyme cách thay đổi môi trường lên men (Schindler, 1982) Các chất hấp phụ, XAD-2, chứa bình bên ngoài, canh trường bioreactor luân chuyển qua lòng cố định để tích lũy chất bay liên tục (cf chương 10 , 11) Khoảng 1.9 g L-1 chất chuyển hóa có mùi cuối hồi phục gần đến khối lượng khô có liên quan đến số tinh dầu thực vật cần thiết Các kết tóm tắt sau: Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất - Nhóm – 13CSH Ascomycetes (Ceratocystis) loạt basidiomycetes sản xuất mono-và sesquiterpene chất lượng số lượng gần với nguồn thực vật Hình 5.1 6- ((Z2) -butenyl) -3-methyl- -pyrone, monoterpene liên hợp tạo nấm Fusarium solani (Abraham Arfmann, 1988) Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất - - Nhóm – 13CSH Fig 5.2 Oxidation of genuine (microbial) linalool results in chemically formed linalool Oxide Hình thành tecpen dễ bay chặt chẽ phụ thuộc vào chủng (hay đột biến) sử dụng, chủng sản xuất phải lựa chọn bình thường công nghệ sinh học Tối ưu hóa môi trường dinh dưỡng (ví dụ L-asparagin vs nitrat) ảnh hưởng đến chất lượng số lượng sản phẩm nhiều nuôi dưỡng mevalonate In situ loại bỏ tecpen không tránh khỏi tiếp nhận thứ giống lợi suất hấp dẫn mặt kinh tế Những trở ngại lớn suất cao ứng dụng công nghiệp thể rõ: Hiện thiếu đáng kể kiến thức quy chế sinh tổng hợp terpene vi sinh vật, nghiên cứu hopanoid tiết lộ bước tổng hợp isoprene vi khuẩn không tiến hành theo lộ trình sách giáo khoa nói chung Các aldehyde monoterpene mạnh xeton tìm thấy Một số khó khăn để tổng hợp cấu trúc sesquiterpene, chẳng hạn - copaene (Abraham Berger, 1994), -bisabolol (Gross et ai., 1989), eleganthol (Arnone et al., 1993), xương drimene xác định (Hanssen Abraham, 1987; Abraham Berger, 1994), hợp chất hương vị mùi thơm có cấu trúc liên quan không hình thành (Hình 5.4) Các hydrocacbon sesquiterpene gurjunene, (E) -caryophyllene, cadinene phân lập từ môi trường đất ngập nước có chủng Aspergillus flavus (Zeringue et al., 1993) Bốn số tám chủng tích lũy phân hủy sesquiterpene aflatoxin, chủng nonaflatoxigenic không sản xuất tecpen dễ bay Mối tương quan rõ ràng giải thích nguồn gốc sinh học di truyền phổ biến Tương tự vậy, nhiều vi sinh vật đánh giá cao phổ giàu chất chuyển hóa thứ cấp tạo geosmin norterpenoid (Hình 5.5) Rượu bậc ba mùi trần tục tiềm sản xuất loạt Streptomycetes (Rezanka et al., 1994), Penicillia, Basidiomycetes, vi khuẩn lam (Pollak, 1994) Nano đo cho lít làm cho nước không uống được; hợp chất nhiên, coi có giá trị màu đỏ củ cải whisky hương nước hoa Với điều ý , nỗ lực thực để làm sáng tỏ sinh tổng hợp geosmin ức chế kích thích hình thành nó, bước đột phá chưa đạt (Boland et AI, 1993; Mattheis Roberts, 1992) Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Hình 5.3 Terpenoids of Ceratocystis strains I=6-Methyl-5-hepten-2-o1 and derivatives, R=OH/OAc/O, II=Geraniol/ Nero/ acetates, III=Citronello/ acetate, N=E,E-famesol, V=E- Nerolidol, VI - IX=  - -Terpineol Hình 5.4 Drim-8 (12) dẫn xuất -ene với long diên hương thuộc tính cấu trúc liên quan đến sesquiterpene phân lập từ môi trường basidiomycete Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Hình 5.5 Geosmin, thành phần ảnh hưởng hương vị củ cải đỏ streptomycetes đất 5.2.1 Sinh tổng hợp terpenoid prokaryote Ở prokaryote (vi khuẩn vi khuẩn cổ) terpenoid cần thiết có vai trò quan trọng việc tổng hợp vách màng tế bào (bactoprenol, hopanoids), chuỗi chuyển điện tử (ubiquinone, menaquinone) chuyển đổi lượng ánh sáng thành lượng hóa học ( chlorophylls, bacteriochlorophylls, rhodopsins, carotenoids) nhiều trình khác Nhưng cấu trúc chức đáng ý khác chúng chuyển hóa từ chất tiền thân giống isopentenyl diphosphate (IPP) dimethylallyl di phosphate (DMAPP), hai chất đồng phân có đường tạo chất tế bào :1 Theo đường mevalonate (MVA), Theo đường 2-C- methyl-D-erythritol 4-phosphate (MEP) a Con đường mevalonate (MVA) Trong đường tạo tiền chất tế bào động vật nấm Trong tế bào thực vật tạo IPP cytosolic, lục lạp tạo tiền chất terpenoid theo đường MEP MVA sinh vật bậc cao đường Trong bước đường 3- hydroxyl- 3- methylglutaryl- CoA (HMG- CoA) tạo từ tụ lại liên tiếp ba phân tử acetyi- CoA xúc tác enzyme acetoacetylCoA thiolase (AACT) HMG- CoA synthase (HMGS) Trong biến đổi đầu tiên, HMGCoA chuyển đổi thành MVA phản ứng không thuận nghịch xúc tác HMG- CoA reductase (HMGR) Sau đó, MVA phospholate liên tiếp thành 5phosphomevalonate 5- ddiphossphomevalonate decarboxylate tạo thành IPP enzyme mevalonate kinase (MVK), 5- phosphomevalonate kinase (PMVK) 5điphóphomevalonate kinase decarboxylase (DPMD).Hoạt động enzyme isomerase IPP/DMAPP yêu cầu hình thành DMAPP từ IPP.( hình 1) Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Hình Con đường MVA tổng hợp tiền chất terpenoid Trong tế bào prokaryote, đường MVA tìm thấy vi khuẩn cổ vài chủng vi khuẩn bao gồm xoắn khuẩn Borrelia burgdorferi khuẩn cầu gram dương Staphylococus aureus Streptococus pneumonia.Trong vi khuẩn chứa đường 10 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Sự trao đổi chất ưa thích hợp chất thơm kết từ ổ sinh thái bị phân hủy loại nấm mục trắng (white-rot fungi) gỗ mục gỗ tươi Lignin enzyme peroxidas xúc tácpolymer hóa vô nhóm p-hydroxy-cinnamyl alcohol, bị phân hủy hoàn toàn nấm mục trắng Hầu hết nấm mục trắng thuộc nhóm Basidiomycetes, số Ascomycetes (ví dụ Xylaria hypoxylon) Một số Ascomycetes đại diện vi khuẩn phân hủy lignin, hiệu chưa kiểm tra tạo chất thơm dễ bay Lignin peroxidase, mangan peroxidase, laccase đóng vai trò quan trọng hệ phân hủy Hàng trăm loài nấm mục trắng biết bệnh học thực vật, nhiều chi tiết phân hủy lignin nghiên cứu Phanerochaete chrysosporium mô hình điển hình (Fiechter, 1991) 5.4.1 Vanillin Vanillin, hợp chất có mùi thơm hấp dẫn, tìm thấy vốn có tự nhiên hạt vanilla, có giá trị cao Từ lâu ứng dụng công nghệ sinh học để sản xuất vanillin từ enzyme, vi sinh vật nuôi cấy bào thực vật (Hình 5.10) Vanillin có hạt vanilla, chiếm khoảng đến hai phần trăm trọng lượng, có liên kết với nhiều hợp 35 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH chất thơm khác tùy thuộc vào vị trí vụ thu hoạch, bán với giá 4000 US$/kg Vanillin tinh khiết tổng hợp có giá khoảng 12 US$/kg, có mùi thơm giống vanilla Trong số khoảng 12 000 tiêu thụ hàng năm, có khoảng 20 chiết xuất từ hạt vanilla Chất lượng Vanilla planifolia trồng Madagascar, Réunion (Bourbon), Mexico Indonesia, Vanilla tahitensis Tahiti, với lượng đáng kể heliotropine anisaldehyde (Hình 5.9), dễ dàng phân biệt hương thơm đặc tính chúng Sự khác biệt giá chất lượng tạo nhiều suy đoán mơ hồ trình thay Vanillin tìm thấy vi sinh vật chứng nhận GRAS – chứng nhận tuyệt đối an toàn; không gây tác dụng phụ kể trẻ em, phụ nữ mang thai cho bú Ví dụ số vi khuẩn sinh acid lactic, làm tăng nồng độ vanillin thực phẩm có chứa vanilla tự nhiên hay bột vanilla Hạt vani chứa vanillin dạng β36 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH glucosidic (Ranadive, 1992), hỗn hợp nước/ethanol sử dụng dung môi hòa tan, người ta có tranh luận 'sản xuất' vanillin là phản ứng thủy phân Dioxygenase, enzyme phân lập từ Pseudomonas, hoạt động liên kết đôi liên hợp với vòng benzen styrene (Hasegawa, 1990) Các enzyme loạt R2 đến R6, R1 thẳng phân nhánh, đến mười carbon alkyl, đến sáu carbonaryl, năm đến mười carbon cycloalkyl dẫn xuất carboxy Các enzyme đặc trưng sau nhiều bước tinh chế, tách p-coumaryl alcohol, coniferyl alcohol, số chất để mang lại vanillin Tương tự, phổ rộng phenylpropanoid chấp nhận lipoxygenase thực vật (Quest, 1991) Các phenyl aldehyde tương ứng mô tả sáng chế, vanillin đạt sản lượng vừa phải (4-15%), sử dụng lipoxygenase thương mại Vi sinh vật nguồn thực vật lipoxygenase, Saccharomyces cerevisiae nước ép khoai tây ví dụ Sử dụng enzyme thường liên quan đến trình dị hóa lipid phân hủy oxy hóa (degradation oxidase) phenolic xuất kỳ lạ, xác nhận kết bên thứ ba đạt Proteus vulgaris chuyển đổi methoxy tyrosine thành acid phenyl pyruvic tương ứng (Casey Dobb, 1992) Acid sau chuyển đến aldehyde mục tiêu với kiềm nhẹ Một loạt đáng kể vi sinh vật thực bắt đầu phản ứng Sản lượng cao thu trình đơn giản Những nhược điểm cách tiếp cận sẵn có 3-methoxy tyrosine tự nhiên, bước hóa học cuối Một loạt vi khuẩn nấm chuyển đổi isoeugenol acid ferulic thành vanillin (Abraham et al., 1988) Một quy trình cấp sáng chế phát triển từ sàng lọc (Haarmann & Reimer, 1991) Một số loài Serratia, Enterobacter Klebsiella công bố Trong isoeugenol với 1,4 – hệ thống liên hợp liên kết đôi chuyển đổi suất cao, eugenol không Không may, isoeugenol tự nhiên chưa có sẵn Các sinh hóa tương đồng với xúc tác lipoxygenase hiển nhiên Cách tiếp cận bị không đủ khả hòa tan tiền chất từ phản ứng oxy hóa/xô lệch aldehyde hình thành Một toàn sản phẩm phụ vinyl guaiacol, axit phenyl propanoic, heliotropin, veratraldehyde tìm thấy, Corynebacterium glutamicum ủ diện acid ferulic (Labuda et ai., 1993) Nước hòa tan hợp chất sulfhydryl điều cần thiết việc tăng suất đến 15% (của 0,1% acid ferulic tiền thân) trình lên men mười ngày Không có chất bảo vệcho quy trình sinh học mua lại Những đột biến Pycnoporus sp., nấm đảm (Basidiomycete), phân hủy acid ferulic tự nhiên để vanillin không cần chuyển đổi thêm ý nghĩa aldehyde mục tiêu (Pemod-Ricard, 1991) Một hệ thống sinh học điển hình chứa P.cinnabarinus môi trường hình thành bào tử với nấm men chiết xuất mạch nha, peptone,glucose, biotine, muối khoáng Sản lượng thấp sản phẩm phụ quan sát trongsáu ngày, tế bào pha ổn đinh Như 90 mg vanillin lít thu hồibằng cách chiết xuất dung môi Một số nhóm nghiên cứu tổng hợp vanillin cách nuôi cấy tế bào thực vật Một số phương pháp tăng suất nuôi cấy tế bào: chọn lọc loại hormon thực vật (phytohormone) chất kích thích bảo vệ thực vật (elicitor), cố định tế bào hấp thu 37 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH vanillin Cung cấp tiền chất (precursor) có giá thành rẻ acid ferulic, phenylalanine, acid dehydroshikimic,vanillyl alcohol chứng minh phù hợp Việc bổ sung tiền chất trình sinh tổng hợp nội bào vào môi trường nuôi cấy tăng lượng sản phẩm mong muốn số hợp chất trung gian nhanh chóng bắt đầu sinh tổng hợp hợp chất thứ cấp làm tăng lượng sản phẩm cuối Ví dụ: cung cấp acid ferulic nuôi cấy tế bào Vanilla planifolia tăng tích lũy vanillin… Stress sinh học (hợp chất có nguồn gốc vi khuẩn nấm) stress phi sinh học (abiotic stress) nguyên nhân hình thành chuyển hóa thứ cấp thực vật, có chất bay (Xem Sects 1.5, 9.3.4) Các hợp chất hình thànhkhôngcần thiết phải thường xuyên thường xuyên có thành phần loài thực vật tương ứng; ví dụ, nuôi cấy gián đoạn Apium graveolens sản xuất khoảng 10 mg vanillin/kg chất khô bị thiếu ánh sáng (Berger, chưa công bố kết quả) Sử dụng ecilitor phương thức để thu hợp chất thứ cấp cách hiệu Ứng dụng công nghệ sinh học nhiều hay gặp vấn đề giống nhau: - Thiếu tổng hợp de novo mà trình phụ thuộc vào chất tiền chất tự nhiên, Thiếu loại bỏ sản phẩm chọn lọc, Thiếu thông tin di truyền sinh học ngăn chặn kiểm soát hiệu hình thành sản phẩm phụ phản ứng vanillin Một số lượng đáng ý công việc thực phát triển trình sinh học sản xuất vanillin, tranh rõ ràng chi tiết chuyển hóa nhà sản xuất tế bào đa dạng Trong tế bào bị gián đoạn Daucus carota với elicitor nấm dẫn đến tổng hợp acid p-hydroxybenzoic Tiền chất nghiên cứu cho thấy phân hủy phụ chuỗi từ acid p-coumaric thành acid p-hydroxybenzoic không tương tự với β-oxi hóa axit béo, có liên quan hình thành (vanilin có liên quan) p-hydroxybenzaldehyde trung gian Trong đường nuôi cấy tế bào Vanilla planifolia từ axit 3,4-dimethoxycinnamic (không axit ferulic!) qua axit dimethoxybenzoic thành axit vanillic Đề nghị hỗ trợ phục hồi nhãn carbon phóng xạ axit vanillic sau bổ sung 14C-cinnamate, không 14C-ferulate 5.4.2 Cinnamate Trong số acid cinnamic lấy từ chất dễ bay cinnamaldehyde (quế), benzaldehyde (hạnh nhân đắng, anh đào), benzyl acetate (hoa nhài), methyl benzoat (trái sấy khô), methyl cinnamate (trái ngoại lai, balsamic) có ý nghĩa thương mại 38 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH tiềm (Hình 5.11) Rất nhiều chất thơm tổng hợp khác Basidiomycete chất lignin Bổ sung vào môi trường dinh dưỡng với chất trung gian đường shikimate thường dẫn đến sản phẩm chuyển hóa dễ bay Nếu chất tiền thân, chẳng hạn phenylalanine acid cinnamic chiếm vị trí chuyển hóa trung tâm, loạt chất dễ bay có liên quan đến sinh hóa hình thành Khi cung cấp L-phenylalanine L-tyrosin lên men chìm Ischnoderma benzoinum, hình thành benzaldehyde phydroxybenzaldehyde quan sát (Berger et al., 1987) Việc bổ sung dầu thầu dầu để Polyporus sp bất ngờ tăng nồng độ benzoates, 2-phenylacetate, cinnamate, cinnamaldehyde, chuẩn bị lignin kích thích hình thành eugenol, guaiacol, isoeugenols, vanillin (Tiefel Berger, 1993a) Nồng độ dao động từ vài đến vài trăm mg lít, mở phạm vi cho việc mở rộng số hương vị sinh học (accessible bioflavor) Kết luận, nhiều Basidiomycetes có enzyme hoạt động để xử lý chất chuyển hóa chất thơm nên ý cho mục tiêu chất thơm dễ bay 39 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH 5.4.3 Heterocycle Nitrogen, sulfur oxy chứa vòng dễ bay thường tạo từ chất không dễ bay trước xử lý nhiệt nấu nướng Các cấu trúc hóa học, chất lượng cảm quan phản ứng nối dài liên quan tới hình thành cấu trúc 40 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH chúng trình bày rõ (Teranishi et al., 1992; Schreier Winterhalter, 1993) Các chất dị vòng thành phần tạo hương tách pea-like, green, caramel-like, vị dừa hay vị trái tế bào thực vật hệ thống vi sinh vật, cung cấp dấu hiệu chúng hình thành phản ứng lạnh (vd: Tiefel Berger, 1993b) Đây điều vô đặc biệt cho phổ biến alkanolides ( hợp chất dị vòng chứa nito), cách tạo mùi hương đặc trưng nhiều loại thực phẩm Các lactone (thành phần hữu có chứa nhóm este -OCO- vòng) quan trọng chứa đến 12 Carbon vòng Nó hình thành thông qua đông tụ nội phân tử beta-oxidatively shortened hydroxy acids từ từ suy giảm tương ứng hay keto acid Cả chèn nhóm OH vào phân tử acid béo suy giảm chức keto bố trí cố định hệ thống sinh học Lactones tạo biểu độ tinh khiết cao, điều quan trọng phụ thuộc vào đặc tính dạng đồng phân quang học khác Điều thảo luận nhiều liệu dạng lactone vi sinh vật giải phóng hydroxy acids thông qua trình tạo lactone môi trường acid hay thông qua enzyme nội bào Xử lý tế bào tự canh môi trường nhiệt cho kết tăng lên nồng độ 4-decanolide nhiều thông qua đường hóa học Tuy nhiên, racemic hydroxy acids có lại thông qua trình photoperoxidation/ giảm thiểu oleic linoleic acid thêm vào để bảo quản chủng nấm men hoang dại, lactone tinh khiết thu nhận (Fuganti et al., 1993) Cadida lipolytica hình thành (4S)-dodecanolide, Pichia ohmeri thu nhận đồng phân đối hình khác., điều đề xuất phản ứng ngưng tụ enzym (Ercoli et al., 1992) Điều đưa đến kết luận tùy thuộc vào vi sinh vật biến đổi cấu trúc cách nhẹ nhàng dạng tiền thân trước tác động lên tới cấu hình lactone sản phẩm Deuterium có gắn acid béo dạng tiền thân thí nghiệm sử dụng nấm men Sporobolomyces odorus để chứng minh tham gia enzyme lipoxygenase vi sinh vật (Tressl et al., 1993) Về hoạt động quang học, lactone gắn thêm biểu thị cách riêng biệt (Fig 5.12) Trong hay 10-hydroperoxidations tạo 4-alkanolides, hydropexidation vị trí thứ 13 nối theo phân tách heterolytic acid béo không bão hòa sinh 5-olide Enzyme lipoxygenase thể vi sinh vật biểu đặc trưng bị ức chế nồng độ chất cao Xử lý sinh học thương mại cho hệ sau lactone phụ thuộc vào hydroxy acid (thực vật) (Bảng 5.2) Hai thập niên sau Okui 41 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH mô chuyển đổi recinoleic acid (12-hydroxy oleic acid) thành 4-hydroxydecanoic acid nấm men Cadida Xét chất, trình chuyển hóa acid ricinoleic thành glactone trình beta-oxy hóa nhờ hoạt động enzyme acyl-CoA-oxydase (Aox) Dưới tác động enzyme này, acid ricinoleic bị cắt thành Acetyl-CoA, chất sau vào chu trình citrat chuỗi hô hấp, tạo lượng ATP cung cấp hoạt động sống cho vi sinh vật, sản phẩm trung gian trình 4-hydroxy decanoic, acid tự đóng vòng tạo thành g-decalactone Trong trình chuyển hóa này, nồng độ lactone tích lũy cao ức chế hoạt động vi sinh vật Đây nguyên nhân làm giảm 42 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH hiểu suất trình chuyển hóa Kết nghiên cứu invitro môi trường glucose cho thấy xâm nhập lactone vào màng tế bào nấm men nguyên nhân gây chết tế bảo nấm men Để làm rõ nguyên nhân gây chết tế bào nấm men lactone, đại học Bourgone, Pháp, người ta nghiên cứu trình lactone vào tế bào nấm men Kết môi trường nuôi cấy, lactone làm hoạt tính khử nấm men, phá vỡ cấu trúc màng, tạo lỗ hổng làm điện màng tế bào làm thay đổi tính thấm màng, tạo điều kiện để phân tử ngoại lai xâm nhập vào bên Trong nhiều năm trước, giá thành cao sản phẩm công nghệ sinh học sản xuất (4R) -(+)-decanolide (lên đến 20.000 US$ cho kg) bắt đầu đua cho chất xúc tác inh học khác acid tiền thân khác (Bảng 5.2) Ví dụ, Nấm men làm bánh chuyển đổi 11-hydroxy hexadecanoid acid thành 5-octanolide Coriolic acid (13-hydroxy (Z9, E11)-octadecadienoic acid), acid béo khởi đầu Coriana nepalensis seed oil, dạng tiền thân phù hợp cho việc sản xuất 5-decanolide Cladosporium suaveoleus Bây tất công ty sản xuất hương liệu phát triển quy trình riêng, nhiều đặc tính sinh hóa dạng lactone biết (Gatfield et al., 1993) Quá trình oxy hóa hợp chất trung gian 4-hydroxy decanoic từ tự suy thoái ricinoleic acid dài thu nhiều ,4-dihydroxy decanoic acid Thành phần trải qua tới 3-hydroxy-4decanolide Quá trình nước làm tăng 2- 3decen-4-olide với đặc tính mùi nấm, kem hay trái Toàn hydroxy acid tiền thân chứng minh lên men canh Candida Từ năm 1985, việc hình thành lactone by Fusarium poae nghiên cứu nhóm nhà nghiên cứu Pháp (Latrasse et al.,) Các đặc tính bất đối xứng mùi thơm latone nấm làm rõ cách sử dụng cấu trúc bất đối xứng GC GC-O.Sự hình thành 4dodecanolide, (Z6)-4-dodecenolide, (E6)-4-dodecenolide liên quan mật thiết tới nồng độ acid béo loài dự trữ lipid Một cách thú vị, tỉ lệ đồng phân đối hình lactone không phụ thuộc vào loại dinh dưỡng môi trường mà phụ thuộc vào giai đoạn phát triển Sự chênh lệch lớn nồng độ lactone độc thân suốt chu trình phát triển phát Rõ ràng, có đường hình thành lactone thực loại nấm Một lactone từ nấm khác với lịch sử công nghệ sinh học dài 6-pantyl-2pyrone (Bảng 5.2) Nhiều bước tổng hợp bao gồm phản ứng với nhiệt độ gần 500 độ C đủ khả tạo chất Mùi dừa thành phần tham gia sản phẩm công nghệ việc kiểm soát yếu tố gây nhiễm sinh học thu hút ý nhiều nhóm nghiên cứu Các hợp chất ức chế sinh trưởng yếu tố gây bệnh Zygomycetes Deuteromycetes,và tích trữ trình sinh học tối ưu lên đến 400 mgxL^-1 Lượng C/N 60 giới hạn phát triển Trichoderma harzianum thúc đẩy sản xuất lactone (Derrano Carreon et al., 1992) Các hoạt động kích thích mạnh mẽ methyl ricinoleate lần đưa vấn đề thiếu hiểu biết quy tắc sinh hóa Phần lớn công việc ngày thừa nhận tìm 43 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH rộng lớn việc tạo lactone nấm men nấm: Hợp chất có mùi thơm 2-phenyl5,6-dihydro-4-pyrone tách từ bề mặt môi trường nuôi cấy Mycoleptodonoides aitchinsonii mức độ 60 mgxL-1 (Akita Jujo Kasei, 1992) Hợp chất với đặc tính nấm lớn quế thực nước hoa thực phẩm Nhiều loài Basidiomycetes Saccharomyces cerevisiae hydro hóa alpha, beta-unsaturated lactone dầu Massioi bark (Cryptocaria massoia) quy trình công nhận (Van der Schaft et al., 1992b) Hoạt động hydro hóa cao nấm men quan sát 35 độ C, pH 5.5, với lượng thêm vào glucose không đổi lượng dư oxygen Sản lượng thu là 1.7g 5-decanolide thực lit Lượng acid béo lại dùng để nuôi chủng Penicillium roquefortii chuyển đổi thành lactone (Chalier Crouzet, 1992) Những thông số biến động xác định thông số chất tham gia điều kiện ủ Công nghệ sinh học lactone bay có tín hiệu riêng Nhiều thành công biểu dạng độc nhẹ sản phẩm hệ thống phân tích sinh học Do đó, nhiều lactone mức gxL^-1 tích trữ mà không cần tác động ức chế mạnh Môi trường chọn lọc cho trình sản xuất chứa lactone nguồn carbon (Nago et al., 1993) Với nhiều trường hợp ngoại lệ, hình thành parazine dễ bay hạn chế vi khuẩn Nồng độ gxL^-1 phạm vi tích trữ Corynebacterium, Bacillus, Pseudomonas streptomyces Sản phẩm tetramethylpyrazine quan sát quy trình sản xuất acetoin giống với đường sản xuất nhiệt, phản ứng ngưng tụ với ammonia dược thực để đưa anolamine chất tiền thân trực tiếp Hỗn hợp parazine thay Pseudomonas Streptomyces phát lần nhân tố tạp nhiêm gây mùi hương thực phẩm nước uóng Những hợp chất sử dụng cho ứng dụng tạo hương môi trường hóa học thích hợp Vòng nitrogen rõ ràng chuyển hóa từ amino acid nhiều vi sinh vật tạp nhiễm sinh chưỡng alkyl valine, leucine isoleucin vị trí alpha Những công việc ngày Leete cộng (1992) tóm tắt xuất parazine côn trùng, vi sinh vật thực phẩm Các amino acid gắn nhãn đánh dấu acid pyruvic dùng để nuôi Ps perolens để chuyển đổi tổng hợp 3-isopropyl-2methoxypyrazine thể sinh vật amide alpha-amino acid glyocal loại trừ chất tiền thân nềnt ảng NMR liệu MS Mặc dù đẩy mạnh sinh hóa học liệu quang phổ đưa ra, chưa chắn khởi đầu đơn vị Carbon đưa để phản ứng với alpha-amino acid Nitrogen thứ giả định kết biến đổi từ ammonia 44 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Để kích thích hình thàmnh tetramethylparazine, phải bỏ nhiều công sức để nâng cao nồng độ ammonia acetoin Lactococus lactis (Kim Lee, 1992) Những vòng dị hợp khác 3-methylfuran hay indol skatol tác từ Pennicillium Aspergillus sp (Boerjesson et al., 1992) từ Coprinus picaceus (Laatsch Matthies, 1992) Các vòng Nito dễ dàng biến đổi vi khuẩn cỏ chứa tryotophan hoạt động (Onodera et al., 1992) Nhiều loại hợp chất dị vòng biểu đặc tính loại mùi hương xua đuổi hợp chất tinh khiết Khi pha loãng, có tác động mong muốn nhiều loại thực phẩm Pyrazines có nhiều ý đặc biệt cung cấp nhiều loại mùi nướng, rán hay mùi dừa, việc bổ sung hương liệu lò vi sóng loại khác thường không làm ảnh hưởng thực phẩm Các hợp chất sulfur có khổi lượng phân tử thấp thuộc phần lớn mùi mạnh với biểu nhẹ nhàng gần với ngưỡng phát mùi xua đuổi nồng độ tăng lên Theo kết này, tạo hợp chất thio từ vi sinh vật thường kết hợp với mùi lạ Các hợp chất sulfur methyl hóa quan sát môi trường nuôi cấy vi khuẩn kỵ khí bổ sung thành phần methoxylated aromatic (Bak et al., 1992) Sự phân lập vi khuẩn dự kiến phân loại Pelobacter affored methanthiol dimethyl sulfide hợp chất methyl hóa không xuất suốt trình phát triển trihydroxybenzenes Cyanobacterium Microcystis earuginosa thống trị vi thực vật hồ chứa nước Nam Phi sản xuất dimethyl trisulfide bên cạnh việc sản xuất geosmin (Wnorowski Scott, 1992) Một loại vi sinh vât tương tự phát triển vũng nước đất liền Nhật Bản sản xuất methyl isothiocyanate isopropyl methylsulfide hợp chất khác (Tsuchiya et al., 1992) Phương pháp tiếp cận công nghệ sinh học bị cản trở điều kiện ánh sáng khắc nghiệt Một vài loài Penicillium Aspergillus nuôi cấy môi trường agar có bột yến mạch thùng đựng, điều cho phép thu mẫu khí (Boerjesson at al., 1993) GC-O cho biết dimethyl disulfide nguyên nhân gây mùi mốc lạ số loài Ngoài ra, 1-octen-3-ol, 2-methylisoborneol, geosmin, 1-methoxy-3-methylbenzene methylphenol phát Sự hình thành mùi lạ xảy lúc với việc hình thành bào tử Sự hư hỏng thực phẩm chứa protein biết nguyên nhân Pseudomonas, Moraxella loài khác với hoạt tính protase cao (Stutz et al., 1991) Các chất dễ bay hydrogen sulfide methyl oligosulfide đề nghị số tạp nhiễm thực phẩm, mùi thể điều Trong thịt bò, lượng chất dễ bay sơ cấp xem như số độ tươi thịt Đối với cá surimi, mùi lạ mùi dầu 45 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH hỏa sản xuất Debaromyces hansenii nhận biết styrene (Koide et al., 1992a) loại mốc không xác định tìm thấy 1,3-pentandione từ giảm thiểu sorbate (Koide et al., 1992b) Loại móc không xác định đoán loài Penicillium Mùi phenol beer rượu nhận biết 4vinyphenol 4-vinyl guaicol, tạo từ phenylpropanoic acid thêm vào enzyme decarboxylase từ nấm men (Dugelay et al., 1993) Trong suốt hình thành rượu, vinylphenol làm giảm tăng lên nồng độ ethylphenols (cf, Sect 2.3.2) 5.5 Sự giảm thiểu mùi lạ Thành phần mùi lạ thường xuyên có thành phần ảnh hưởng, thành phần ảnh hưởng sung cách tích cực, làm giàu thêm hay lọc mùi định Ví dụ sản phẩm trình oxy hóa allylic limonene, hydrogene sulfide, methional aldehyde béo - nhân tố gây mùi lạ ảnh hưởng tới thành phần mùi thực phẩm Hơn nữa, chất xúc tác sinh học gián tiếp cải thiện chất lượng mặt cảm quan thực phẩm giảm thiểu mùi lạ tới không mùi chí tới mùi sản phẩm mong đợi Vấn đề trình sản xuất đậu nành lipoxygenase cảm ứng hình thành n-hexanal loại hợp chất dễ bốc mùi khác, nguyên nhân gây mùi đậu thối (Kobayashi et al., 1992; cf Sect 2.6) Nhiều loài vi khuẩn loại bỏ cách hiệu mùi lạ ảnh hưởng hoạt động enzyme aldehyde dehydrogenase Nấm Neurospora ceassa hoạt động này, cải thiện mùi cách Alcaligenes faecalis làm Cơ chế khử mùi thực ảnh hưởng có lợi việc thêm NADH để chuẩn bị enyme Những phát minh tài trợ công dụng N crassa, đạt chất lượng cảm quan cao việc xử lý đậu nành theo cách (Ajinomoto, 1993) 46 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Có hẳn ngành công nghiệp sử dụng đặc tính hương vị bị xuống cấp môi trường nuôi cấy vi khuẩn: Lọc sinh học ứng dụng thành công quy mô công nghiệp ngành phân bón ủ, nhà máy hóa chất sản xuất hương liệu, sở nước thải (William Miller, 1992) Về bản, hệ thống khử mùi lò phản ứng trạng thái rắn với độ ẩm không đổi, thường bổ bổ sung khí người vệ sinh, lọc than (Bảng 5.3) Pha rắn thông thường gồm than bùn, rơm rạ, thạch thảo gỗ ren Nhân tố tẩy rửa sinh học với bọt polyurethane vật liệu bao bọc mô tả (Colanbeen Neukermans, 1992) Oxy chuyển đổi thành dạng màng lỏng xung quanh hạt cố định chất tải nhận nhân tố đánh giá Sự cung cấp liên tục microflora với với chất hữu metabolizable yêu cầu cho việc giữ vững hiệu xuất phân hủy xinh học Những chất cấy lọc sinh học bắt nguồn từ xử lý nước thải nhà máy 47 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Tài liệu tham khảo http://www.biomedia.vn/review/cac-xu-huong-phan-tich-trong-cong-nghiep-thucpham.html http://www.biomedia.vn/review/sac-ky-khi.html http://www.vast.ac.vn/images/Thanhha/lvts%20thuan%20-%20final.pdf https://en.wikipedia.org/wiki/%CE%9413C Biotechnological routes in flavour industries http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download?doi=10.1.1.463.6730&rep=rep1&type=pdf https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3274093/ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC379026/ Jens Schrader, Jorg Bohlmann, Biotechnology of Isoprenoids 2015 Ralf G Berger, Aroma Biotechnology, 1995 http://aem.asm.org/content/81/6/1892.full http://s4.zetaboards.com/BioFood_Tech/topic/8414777/1/ http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00253-008-1758-x https://books.google.com.vn/books?id=o_dOSHGDYgAC&lpg=PA334&ots=gzBNRqdw Eh&dq=Fungal%20lipoxygenases%20(EC%201.13.11.12)&hl=vi&pg=PA334#v=onepag e&q&f=false https://www.researchgate.net/publication/260375684_Cheddar_Cheese_Ripening_and_Fl avor_Characterization_A_Review http://www.slideshare.net/LamNguyen98/chuyen-hoa-lipid http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-pho-mai-va-che-pham-enzyme-hoan-thien-mui-vi-cuapho-mai-52929/ http://aem.asm.org/content/79/8/2636.full https://www.researchgate.net/figure/260307576_fig5_Figure-1-The-pathway-fromricinoleyl-CoA-to-g-decalactone-a-and-enzymes-involved-in 48 Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH https://www.researchgate.net/profile/Ngoc_Ta2/publication/269928808_Biotransformatio n_of_lactone_for_use_in_food_technologies/links/54996fe70cf21eb3df60cf38.pdf 49 ...Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH Chương 5: Các hợp chất thơm từ vi sinh vật Tổng hợp De Novo De novo tổng hợp có nghĩa tổng hợp phân tử phức tạp từ phân tử phân tử... thường tinh chế vi c tách chiết Kết là, nguồn terpenoid có cách thuận lợi thực vật cạnh tranh với tổng hợp vi sinh vật Vi c tổng hợp vi khuẩn Chuyển hóa sinh học sản phẩm trao đổi chất Nhóm – 13CSH... kiến thức quy chế sinh tổng hợp terpene vi sinh vật, nghiên cứu hopanoid tiết lộ bước tổng hợp isoprene vi khuẩn không tiến hành theo lộ trình sách giáo khoa nói chung Các aldehyde monoterpene mạnh