Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (LA tiến sĩ)

Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chốngNghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống

-NGUYỄN THU TRANG

Tên luận án:

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH DO ẤU TRÙNG

Cysticercus tenuicollis GÂY RA Ở LỢN VÀ DÊ

TẠI TỈNH THÁI NGUYÊN, ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG

LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y

Năm 2017

-NGUYỄN THU TRANG

Tên luận án:

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH DO ẤU TRÙNG

Cysticercus tenuicollis GÂY RA Ở LỢN VÀ DÊ

TẠI TỈNH THÁI NGUYÊN, ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG

LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y

Ngành: Ký sinh trùng và vi sinh vật học Thú y

Mã số: 62 64 01 04

Người hướng dẫn khoa học: 1 GS TS Nguyễn Thị Kim Lan

2 TS Nguyễn Văn Quang

Năm 2017

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi Các số liệu và kết quảnghiên cứu trong luận án này là hoàn toàn trung thực và chưa được công bố trongbất kỳ công trình nào khác

Tôi xin cam đoan rằng: mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận án này đã đượccảm ơn Các thông tin trích dẫn trong luận án đều được chỉ rõ về nguồn gốc

TÁC GIẢ

Nguyễn Thu Trang

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành luận án này, tôi xin bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc

tới GS TS Nguyễn Thị Kim Lan, TS Nguyễn Văn Quang - những Nhà khoa học

đã hướng dẫn, chỉ bảo tôi hết sức tận tình trong suốt quá trình nghiên cứu và hoànthành Luận án

Tôi xin trân trọng cảm ơn sự giúp đỡ và tạo điều kiện to lớn về cơ sở vậtchất, nhân lực, vật lực của Ban Giám đốc, Ban Đào tạo - Đại học Thái Nguyên;Đảng ủy, Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo, Ban chủ nhiệm Khoa Chăn nuôi Thú y,

Bộ môn Bệnh động vật, Bộ môn Vi sinh vật - Giải phẫu - Bệnh lý, tập thể cán bộgiảng dạy Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Xincảm ơn các học viên cao học Dương Như Ngọc, Trịnh Đức Long, Nguyễn ThịTâm và sinh viên các khóa 42, 43 Khoa Chăn nuôi Thú y dưới sự hướng dẫn của

GS TS Nguyễn Thị Kim Lan và TS Nguyễn Văn Quang đã giúp tôi trong quátrình thực hiện một số nội dung của đề tài luận án

Tôi xin trân trọng cảm ơn Chi cục Thú y tỉnh Thái Nguyên; các Trạm Thú y vàPhòng Nông nghiệp; các cán bộ, nhân dân địa phương của 6 huyện, thành phố thuộctỉnh Thái Nguyên là: huyện Đại Từ, Phú Lương, Võ Nhai, Đồng Hỷ, Thái Nguyên, PhổYên đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài

Tôi vô cùng biết ơn các thành viên trong gia đình và bạn bè đã luôn ở bêntôi, giúp đỡ và động viên tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thành

luận án.

Thái nguyên, ngày tháng năm 2017

NGHIÊN CỨU SINH

Nguyễn Thu Trang

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN i

LỜI CẢM ƠN ii

MỤC LỤC iii

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vi

DANH MỤC CÁC BẢNG vii

DANH MỤC CÁC HÌNH ix

MỞ ĐẦU 1

1 Tính cấp thiết của đề tài 1

2 Mục tiêu của đề tài 2

3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài 2

3.1 Ý nghĩa khoa học 2

3.2 Ý nghĩa thực tiễn 2

4 Những đóng góp mới của đề tài 2

Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

1.1 Cơ sở khoa học của đề tài 4

1.1.1 Sơ lược quá trình nghiên cứu về thành phần loài sán dây ký sinh ở chó .4

1.1.2 Đặc điểm hình thái, cấu tạo chung của sán dây 5

1.1.3 Đặc điểm sinh học của sán dây T hydatigena và ấu trùng C tenuicollis 7

1.1.4 Kỹ thuật sinh học phân tử trong định danh sán dây và ấu trùng sán dây .10

1.1.5 Một số đặc điểm bệnh ấu trùng C tenuicollis và bệnh sán dây T hydatigena 14

1.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 24

1.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước 24

1.2.2 Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài 25

1.3 Khái quát một số đặc điểm của tỉnh Thái Nguyên 34

Chương 2: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU 37

2.1 Đối tượng, vật liệu, thời gian, địa điểm nghiên cứu 37

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 37

2.1.2 Vật liệu nghiên cứu 37

2.1.3 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 38

2.2 Nội dung nghiên cứu 39

2.2.1 Đặc điểm hình thái, phân tử của ấu trùng C tenuicollis và sán dây T hydatigena 39

2.2.2 Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê tại các huyện, thành thuộc tỉnh Thái Nguyên 39

2.2.3 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis trên lợn và bệnh sán dây T hydatigena trên chó 39

2.2.4 Nghiên cứu sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis 40

2.2.5 Nghiên cứu và đề xuất biện pháp phòng chống bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra trên lợn và dê 40

2.3 Phương pháp nghiên cứu 41

2.3.1 Phương pháp định danh sán dây T hydatigena và ấu trùng C tenuicollis 41

2.3.2 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis 43

2.3.3 Phương pháp nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis trên lợn và bệnh sán dây T hydatigena trên chó 45

2.3.4 Phương pháp thu kháng nguyên và sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis 49

2.3.5 Phương pháp nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên 51

2.4 Phương pháp xử lý số liệu 54

Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 55

3.1 Đặc điểm hình thái phân tử của ấu trùng C tenuicollis thu thập ở lợn, dê và sán dây T hydatigena thu thập ở chó nuôi tại tỉnh Thái Nguyên 55

3.1.1 Mô tả hình thái của ấu trùng C tenuicollis và sán dây T hydatigena thu thập tại Thái Nguyên 55

3.1.2 Thẩm định loài đối với ấu trùng C tenuicollis và sán dây T hydatigena bằng phân tích phân tử 57

3.2 Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê

tại các huyện thành thuộc tỉnh Thái Nguyên 62

3.2.1 Tình hình nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê tại các huyện thành thuộc tỉnh Thái Nguyên 62

3.2.2 Xác định tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó với tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê 69

3.3 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis ở lợn và bệnh sán dây T hydatigena ở chó 73

3.3.1 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis trên lợn gây nhiễm 73

3.3.2 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis trên lợn ở ngoài thực địa 85

3.3.3 Nghiên cứu bệnh do sán dây T hydatigena gây ra trên chó gây nhiễm .88

3.4 Nghiên cứu sử dụng kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis .92

3.4.1 Một số chỉ tiêu đánh giá kháng nguyên dùng để chẩn đoán bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra ở lợn 92

3.4.2 Thử nghiệm kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê trên thực địa 96

3.5 Nghiên cứu và đề xuất biện pháp phòng chống bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra 100

3.5.1 Nghiên cứu hiệu lực của một số thuốc tẩy sán dây T hydatigena cho chó .100

3.5.2 Thử nghiệm thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis trên lợn 103

3.5.3 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis cho lợn và dê ở tỉnh Thái Nguyên 106

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 108

1 Kết luận 108

2 Đề nghị 110

TÀI LIỆU THAM KHẢO 111

I Tài liệu tiếng Việt 111

II Tài liệu tiếng Anh 114

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÓ LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI 121

PHỤ LỤC 122

PHỤ LỤC 1: MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA ĐỀ TÀI 122

PHỤ LỤC 2: TRÌNH TỰ GEN CỦA SÁN DÂY T hydatigena

VÀ ẤU TRÙNG C tenuicollis TẠI THÁI NGUYÊN 131

PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ XỬ LÝ THỐNG KÊ SỐ LIỆU CỦA ĐỀ TÀI

133

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT

C tenuicollis Cysticercus tenuicollis

CO1 Cytochrome coxidase subunit 1

T hydatigena Taenia hydatigena

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 3.1 Khoảng cách di truyền của một số loài sán dây 59

Bảng 3.2 Tỷ lệ, cường độ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê tại các

địa phương 62

Bảng 3.3 Tỷ lệ, cường độ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê theo tuổi 64

Bảng 3.4 Tỷ lệ, cường độ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê theo tính biệt 66

Bảng 3.5 Tỷ lệ, cường độ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê theo mùa vụ 67

Bảng 3.6 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó tại các địa phương (qua mổ khám) 69

Bảng 3.7 Tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó và tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn 71

Bảng 3.8 Tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó và tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở dê 72

Bảng 3.9 Triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn gây nhiễm ấu trùng

C tenuicollis 73

Bảng 3.10 Khối lượng lợn ở các thời điểm mổ khám sau khi gây nhiễm 74

Bảng 3.11 Sự thay đổi một số chỉ số huyết học của lợn gây nhiễm và đối chứng (thời điểm 45 ngày sau gây nhiễm ở 2 đợt) 75

Bảng 3.12 Công thức bạch cầu của lợn gây nhiễm và lợn đối chứng (thời điểm 45 ngày sau gây nhiễm ở 2 đợt) 77

Bảng 3.13 Tổn thương đại thể ở các cơ quan có ấu trùng C tenuicollis ký sinh (n = 16) 80

Bảng 3.14 Sự phát triển của ấu trùng C tenuicollis ở lợn gây nhiễm 83

Bảng 3.15 Biểu hiện lâm sàng của lợn nhiễm ấu trùng C tenuicollis trên thực địa 85

Bảng 3.16 Tỷ lệ các cơ quan nội tạng của lợn có ấu trùng C tenuicollis ký sinh (trong số 133 lợn nhiễm) 86

Bảng 3.17 Tổn thương đại thể ở các cơ quan có ấu trùng C tenuicollis ký sinh .87

Bảng 3.18 Thời gian và tỷ lệ ấu trùng C tenuicollis phát triển thành sán dây trưởng thành ở chó gây nhiễm 89

Bảng 3.19 Tỷ lệ và các biểu hiện lâm sàng chủ yếu của chó bị bệnh sán dây

T hydatigena do gây nhiễm 90

Bảng 3.20 Tổn thương đại thể ở cơ quan tiêu hoá của chó bị bệnh sán dây

T hydatigena do gây nhiễm 91

Bảng 3.21 Đánh giá độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng với kháng nguyên trên lợn gây nhiễm và đối chứng 92

Bảng 3.22 Ảnh hưởng của nhiệt độ - 20oC đến độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng theo thời gian bảo quản kháng nguyên 93

Bảng 3.23 Ảnh hưởng của nhiệt độ 4oC đến độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng với kháng nguyên theo thời gian bảo quản 95

Bảng 3.24 Kết quả thử nghiệm kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis ở lợn trên thực địa 96

Bảng 3.25 Đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của phản ứng sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh C tenuicollis cho lợn trên thực địa 97

Bảng 3.26 Kết quả thử nghiệm kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis ở dê trên thực địa 99

Bảng 3.27 Đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của phản ứng sử dụng kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh C tenuicollis cho dê trên thực địa 99

Bảng 3.28 Hiệu lực của thuốc tẩy sán dây trên chó gây nhiễm 101

Bảng 3.29 Hiệu lực của thuốc tẩy sán dây cho chó trên thực địa 102

Bảng 3.30 Kết quả gây nhiễm ấu trùng C tenuicollis trên lợn 104

Bảng 3.31 Hiệu lực của thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis trên lợn gây nhiễm .104

Bảng 3.32 Hiệu lực của thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis cho lợn trên thực địa .105

DANH MỤC CÁC HÌNH

Hình 3.1 Kết quả Blast tìm kiếm trình tự tương đồng của gen CO1 từ mẫu sán

dây T hydatigena thu từ chó tại Thái Nguyên 57

Hình 3.2 Kết quả Blast tìm kiếm trình tự tương đồng của gen CO1 từ mẫu ấu trùng sán dây T hydatigena thu từ lợn tại Thái Nguyên 58

Hình 3.3 Kết quả Blast tìm kiếm trình tự tương đồng của gen CO1 từ mẫu ấu trùng sán dây T hydatigena thu từ dê tại Thái Nguyên 58

Hình 3.4 Mối quan hệ tiến hóa phân tử của các mẫu T hydatigena thu tại Việt Nam với các loài thuộc giống Taenia dựa trên trình tự gen CO1 61

Hình 3.5 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê

tại các địa phương 63

Hình 3.6 Đồ thị tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis theo tuổi lợn 65

Hình 3.7 Đồ thị tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis theo tuổi dê 65

Hình 3.8 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê theo tính biệt 67

Hình 3.9 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê theo mùa vụ 68

Hình 3.10 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó tại các địa phương (qua mổ khám) 69

Hình 3.11 Đồ thị biểu diễn tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó và tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn 71

Hình 3.12 Đồ thị biểu diễn tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó và tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở dê 72

Hình 3.13 Biểu đồ sự thay đổi một số chỉ số huyết học của lợn 76

Hình 3.14 Biểu đồ tỷ lệ các loại bạch cầu của lợn gây nhiễm và đối chứng 77

Hình 3.15 Đồ thị độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng với kháng nguyên

bảo quản ở nhiệt độ -20oC trong 6 tháng 94

Hình 3.16 Đồ thị độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng khi sử dụng kháng nguyên bảo quản ở nhiệt độ 4oC 95

Hình 3.17 Biểu đồ kết quả thử nghiệm kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh ở lợn trên thực địa 97

Hình 3.18 Biểu đồ kết quả thử nghiệm kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh ở dê trên thực địa 100

MỞ ĐẦU

1 Tính cấp thiết của đề tài

Bệnh sán dây là bệnh ký sinh trùng rất phổ biến của đàn chó nuôi ở nước ta Ấutrùng một số loài sán dây ký sinh và gây bệnh trên người và nhiều loài gia súc khác,gây nhiều thiệt hại cho ngành chăn nuôi và tác hại lớn đối với sức khoẻ con người Một

trong những ấu trùng đó là Cysticercus tenuicollis (C tenuicollis), là ấu trùng của sán dây Taenia hydatigena (T hydatigena) gây bệnh trên lợn, dê, cừu, trâu, bò, thỏ, ngựa,

kể cả con người

Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15] cho biết, ấu trùng C tenuicollis ký sinh

trên bề mặt các khí quan trong xoang bụng của vật chủ và gây bệnh Ấu trùng là

những bọc nước mang đầu sán dây T hydatigena, có kích thước to, nhỏ không đều,

bám trên bề mặt màng treo ruột, lách, gan, thận, phổi Vì thế, trong quá trình giết

mổ, người ta thường nhầm lẫn ấu trùng với các bọc nước bình thường nên không cóbiện pháp tiêu diệt ấu trùng, từ đó làm tăng nguy cơ nhiễm sán dây ở chó và tăngnguy cơ nhiễm ấu trùng sán dây cho nhiều loài gia súc và người

Theo Phạm Sỹ Lăng (2002) [18], bệnh phân bố ở khắp các vùng, đặc biệt ởnhững nơi nuôi nhiều chó, việc giết mổ gia súc không được kiểm soát chặt chẽ, tìnhtrạng vệ sinh thú y không đảm bảo Tỷ lệ nhiễm bệnh ở gia súc tăng dần theo tuổi

do thời gian và cơ hội gia súc tiếp xúc với mầm bệnh tăng dần Khi bị nhiễm ấutrùng, vật chủ có thể có một số triệu chứng như gầy yếu dần, đau bụng, bụng căng

to, ấn vào vùng bụng con vật có cảm giác đau, nếu nhiễm nặng có thể thấy con vật

có hiện tượng hoàng đản Vật chủ có thể chết do thiếu máu, nội quan bị huỷ hoạihoặc do các bệnh kế phát

Cho đến nay, chưa có công trình nghiên cứu nào công bố về thuốc điều trị

đặc hiệu bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra Ngoài ra, việc chẩn đoán bệnh đối với

con vật còn sống rất khó khăn vì triệu chứng bệnh không điển hình Đặc biệt, khôngthể tìm ấu trùng bằng cách xét nghiệm phân do ấu trùng ký sinh trên bề mặt các khíquan trong xoang bụng

Ở nước ta chó được nuôi phổ biến ở nhiều tỉnh, thành trong cả nước, trong

đó có tỉnh Thái Nguyên Tuy nhiên, chó thường được nuôi theo phương thức thảrông, nếu chó bị nhiễm sán dây thì rất dễ phát tán trứng sán dây, làm cho các vật

nuôi khác và người dễ nhiễm trứng sán và mắc bệnh ấu trùng C tenuicollis Tại tỉnh

Thái Nguyên, việc kiểm soát giết mổ các loài gia súc vẫn còn rất khó khăn, dẫn đến

chó dễ bị bệnh sán dây T hydatigena do ăn phải ấu trùng sán dây, đồng thời các loài gia súc khác như trâu, bò, lợn, dê,… dễ bị bệnh ấu trùng C tenuicollis do nuốt phải trứng sán dây T hydatigena.

Những vấn đề trên cho thấy, việc nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ và chế tạo

kháng nguyên để chẩn đoán bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra ở một số loài vật

nuôi, trong đó có lợn và dê, từ đó xây dựng biện pháp phòng chống thích hợp là rấtcần thiết

Xuất phát từ thực tiễn trên, chúng tôi đã thực hiện đề tài: " Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống"

2 Mục tiêu của đề tài

Đánh giá được tình hình nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên; Xác định được đặc điểm gây bệnh của ấu trùng C tenuicollis ở lợn

và bệnh sán dây T hydatigena ở chó; Xây dựng biện pháp phòng chống bệnh do

ấu trùng C tenuicollis gây ra ở dê, lợn hiệu quả và phù hợp với điều kiện chăn

nuôi ở tỉnh Thái Nguyên, từ đó đề xuất được biện pháp phòng chống bệnh đạthiệu quả cao

3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài

3.1 Ý nghĩa khoa học

Kết quả của đề tài là những thông tin khoa học về đặc điểm dịch tễ của bệnh

do ấu trùng C tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, về hiệu quả của

kháng nguyên trong chẩn đoán bệnh, về quy trình phòng chống bệnh hiệu quả

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

Kết quả của đề tài là cơ sở khoa học để khuyến cáo người chăn nuôi áp dụng

các biện pháp phòng, trị bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra, nhằm hạn chế tỷ lệ và

cường độ nhiễm, hạn chế thiệt hại do bệnh gây ra trên lợn, dê và kể cả trên người

4 Những đóng góp mới của đề tài

Là công trình đầu tiên nghiên cứu tương đối hệ thống về bệnh do ấu trùng

C tenuicollis gây ra trên lợn và dê ở tỉnh Thái Nguyên.

- Nghiên cứu về đặc điểm gây bệnh của ấu trùng C tenuicollis trên lợn - ký

chủ trung gian

- Nghiên cứu chế tạo kháng nguyên chẩn đoán bệnh do ấu trùng C tenuicollis

gây ra bằng phương pháp biến thái nội bì

- Nghiên cứu biện pháp phòng, trị bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra cho

lợn, dê có hiệu quả, khuyến cáo và áp dụng rộng rãi tại các hộ gia đình nuôi lợn, dê,chó và các loại vật nuôi khác

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học của đề tài

1.1.1 Sơ lược quá trình nghiên cứu về thành phần loài sán dây ký sinh ở chó

Nguyễn Thị Kỳ (2003) [11] cho biết: việc nghiên cứu sán dây ở Việt Namđược bắt đầu từ hơn một thế kỷ trước Cụ thể như sau:

Năm 1870, Cande J lần đầu tiên mô tả loài sán dây Diphyllobothrium latum tìm

thấy ở người Nam Bộ, Việt Nam Sau đó 10 năm mới xuất hiện một số công trìnhnghiên cứu lẻ tẻ về một vài loài sán dây gây bệnh cho người Từ đó, việc nghiên cứu vềthành phần loài sán dây ở người được chú ý hơn, đồng thời mở rộng phạm vi nghiêncứu sang một số động vật nuôi và động vật hoang dã

Năm 1914, Casaux đã phát hiện được ở gan người hai nang sán C tenuicollis của loài sán T hydatigena ký sinh ở chó.

Năm 1925, Houdemer tiến hành nghiên cứu ký sinh trùng ở thú nuôi và thú

hoang Bắc Bộ cũng phát hiện thấy ấu trùng C tenuicollis và loài sán Dipylidium caninum, đồng thời tác giả đã bổ sung thêm thông tin về một số loài sán, trong đó

có loài T hydatigena và T pisiformis.

Năm 1967, hai nhà ký sinh trùng học người Ba Lan là Drozdz vàMalczewski đã công bố các loài sán dây ký sinh ở động vật nhai lại của 8 tỉnh miền

Bắc, trong đó có sán dây T hydatigena.

Phan Thế Việt và cs (1977) [47], Nguyễn Thị Kỳ (1994) [10], Nguyễn Thị

Lê và cs (1996) [24] đã công bố các loài sán dây ký sinh trên chó ở nước ta gồm:

Diphyllobothrium mansoni, Diphyllobothrium reptans, Dipylidium caninum, T hydatigena, T pisiformis, Multiceps multiceps, Echinococcus granulosus và Mesocestoides lineatus.

Nguyễn Thị Kỳ (1994) [10] cho biết: so với các nhóm giun, sán khác thì sándây ít được nghiên cứu hơn, những hiểu biết về thành phần loài sán dây còn chưađược đầy đủ

Theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [13], tính đến thời điểm hiện tại,người ta đã biết hơn 30 loài sán dây ký sinh ở loài ăn thịt gây bệnh cho chó, mèo, trong

đó có loài T hydatigena Chúng đều thuộc bộ Cyclophyllidea và Pseudophyllidea.

Kết quả tổng hợp của Phạm Sỹ Lăng (2002) [18] cho thấy, đã phát hiện được

8 loài sán dây ký sinh trên chó ở miền Bắc Việt Nam

Việc mô tả hình thái các loài sán dây này chưa đầy đủ, một số loài chưa có mô

tả trên mẫu vật Việt Nam Cande J (1870) là người đầu tiên mô tả loài sán dây

Diphyllobothrium latum tìm thấy ở người Nam Bộ Sau này, một số nhà ký sinh trùng

học Việt Nam (Đỗ Dương Thái và Đặng Văn Ngữ, 1970; Đỗ Dương Thái, Trịnh Văn

Thịnh, 1976) cho rằng, loài thuộc giống Diphyllobothrium ký sinh ở người Việt Nam không phải là Diphyllobothrium latum mà là loài Diphyllobothrium mansoni Tuy

nhiên, sự phán đoán này không dựa trên mẫu nên không có sự mô tả loài Theo

Yamaguti (1959), loài Diphyllobothrium mansoni là tên đồng vật của loài Spirometra erinacei-europaei thuộc giống Spirometra (họ Diphyllobothriidae).

Theo thống kê của Joyeux và Houdemer (1928), Nguyễn Thị Kỳ (1977), ở

mèo nhà, cầy và chó tại Hà Nội có loài Diphyllobothrium reptans ký sinh Theo Yamaguti, loài này thuộc giống Spirometra

Nguyễn Thị Kỳ (2003) [11] đã xem xét lại toàn bộ vị trí phân loại, tình trạng

mẫu, tình hình nghiên cứu về từng loài sán dây và mô tả hoàn chỉnh loài Spirometra erinacei- europaei (Rudolphi, 1819; Mueller, 1937).

Theo Vương Đức Chất và Lê Thị Tài (2004) [1], trên thế giới có khoảng 40loài sán dây gây bệnh cho chó và các thú ăn thịt thuộc họ chó, mèo

Cho đến nay, hệ thống phân loại sán dây đã trải qua nhiều thay đổi, song vẫn chưathống nhất và ổn định (Nguyễn Thị Kỳ, 2003) [11]

Theo Phan Thế Việt và cs (1977) [48], Nguyễn Thị Kỳ (2003) [11], Nguyễn

Thị Lê và cs (1996) [24], sán dây ký sinh ở chó gồm các loài: Spirometra europaei, Spirometra mansonoides, Dipylidium caninum, Taenia hydatigena, Taenia pisiformis, Echinococcus granulosus, Multiceps multiceps, Mesocestoides lineatus.

erinacei-1.1.2 Đặc điểm hình thái, cấu tạo chung của sán dây

Nguyễn Thị Kỳ (1994) [10], (2003) [11], Nguyễn Thị Lê và cs (1996) [24]

cho biết: sán dây ký sinh ở chó có những đặc điểm của lớp sán dây nói chung Sán

có hình dải băng màu trắng hoặc trắng ngà Cơ thể dài, dẹp theo hướng lưng bụng,chia thành ba phần: đầu, cổ, thân (gồm những đốt sau cổ, có hình dạng và cấu tạokhác nhau)

Đầu sán dùng để bám vào thành ruột vật chủ, nên có những hình dạng, kíchthước và các cơ quan bám đặc trưng Chiều rộng của đầu thường chỉ nhỏ hơn 1 mm,

nhưng cũng có loài sán có đầu dài vài mm Cơ quan bám nằm trên đầu bao gồm rãnhbám hoặc giác bám, mõm, vòi và có nhiều móc Ở một số loài sán dây trên vòi có cácmóc bé xếp thành nhiều hàng Giác bám là bộ phận đặc trưng của sán dây bậc cao.Móc bám nằm ngay trên đầu hay ở phần cuối vòi, sắp xếp thành một hay hai hàng Sốlượng móc ở các nhóm sán dây dao động từ vài móc đến vài trăm móc, ít khi vòi thiếumóc Kích thước, cấu tạo và số lượng móc cố định cho mỗi loài sán

Cổ là những đốt sán nối tiếp sau đầu Đốt cổ của sán dây là đốt sinh trưởng,

từ các đốt cổ sinh ra các đốt thân, cơ quan sinh sản ở các đốt cổ chưa hình thành rõ

Thân sán dây gồm ba loại đốt Những đốt chưa thành thục về sinh dục (ở gầncổ) có cơ quan sinh dục chưa phát triển đầy đủ, chỉ thấy cơ quan sinh dục đực.Những đốt thành thục về sinh dục (ở giữa thân), cơ quan sinh dục trong những đốtsán này đã phát triển đầy đủ, có đủ cả bộ phận sinh dục đực và cái, có hệ bài tiết,cấu tạo mỗi đốt tương tự như mỗi cơ thể sán lá, nhưng khác sán lá là không có hệtiêu hoá Những đốt già (ở cuối thân sán), bên trong đốt sán chứa tử cung với vô sốtrứng sán dây Ở những đốt già, bộ phận sinh dục đực bị thoái hoá Những đốt giàthường xuyên rời khỏi cơ thể sán và theo phân ra ngoài (đặc điểm này thấy ở những

loài sán dây thuộc bộ Cyclophyllidea)

Chiều dài của sán dây chó dao động từ 0,5 mm đến hàng chục mét Cơ thểsán dây được bao phủ bởi lớp biểu bì, sau đó đến lớp hạ bì, rồi đến lớp cơ vòng, cơdọc Bên trong là các khí quan của sán Sán dây chó cũng giống các loài sán dâykhác ở đặc điểm không có hệ tiêu hóa, sán lấy thức ăn bằng phương thức thẩm thấuqua bề mặt cơ thể

Hệ thần kinh của sán dây kém phát triển, gồm có hạch thần kinh trung ương nằm

ở đốt đầu, từ đó có các dây thần kinh chạy dọc cơ thể Có hai dây phát triển hơn nằm bênngoài ống bài tiết, mỗi đốt nối với nhau bởi các cầu nối ngang

Sán dây không có hệ hô hấp và hệ tuần hoàn, hô hấp yếm khí

Hệ bài tiết của sán dây cấu tạo theo kiểu nguyên đơn thận, gồm 2 ống chính

từ đầu sán đi về cuối thân và thông với lỗ bài tiết Ngoài ra, ở mỗi đốt sán còn cónhững ống ngang nối liền với 2 ống chính

Hầu hết các loài sán dây là lưỡng tính, trong mỗi đốt có cả bộ phận sinh dụcđực và bộ phận sinh dục cái phát triển ở các giai đoạn khác nhau Sự phát triển của

hệ sinh dục theo một thứ tự nhất định: ở các đốt non cơ quan sinh dục chưa pháttriển, sau đó hình thành cơ quan sinh dục đực rồi đến cơ quan sinh dục cái Sau khi

thụ tinh, cơ quan sinh dục đực teo dần, còn lại cơ quan sinh dục cái Ở các đốt già,

cơ quan sinh dục cái chỉ còn tử cung chứa đầy trứng sán

Hệ sinh dục đực gồm tinh hoàn, ống dẫn tinh và các tuyến sinh dục Số lượngtinh hoàn trong mỗi đốt có từ một đến hàng trăm và là dấu hiệu để phân loại mỗiloài Từ tinh hoàn có nhiều ống dẫn tinh nhỏ đi ra và hợp lại với nhau thành ống dẫntinh, ống này đổ vào cơ quan giao phối là lông gai Lông gai nằm trong nang lônggai Phần cuối ống dẫn tinh phình ra gọi là túi tinh Nếu túi tinh ở ngoài nang lông gaigọi là túi tinh ngoài, nếu ở trong nang lông gai thì gọi là túi tinh trong Lông gai dùng đểđưa vào lỗ sinh dục cái khi giao phối Nang lông gai và lông gai ở mỗi loài có hình dạng,kích thước và cấu tạo khác nhau

Hệ sinh dục cái có cấu tạo phức tạp hơn, gồm có buồng trứng, ống dẫn trứng,ootyp, tuyến noãn hoàng, túi nhận tinh, thể Melis và tử cung Thường có hai buồngtrứng nằm giữa hoặc phía sau đốt, ít khi ở phía trước Trong buồng trứng hình thànhcác tế bào sinh dục cái (tế bào trứng) Từ buồng trứng có ống nối với âm đạo, mở ra

ở huyệt sinh dục Ống này phình rộng ra gọi là túi nhận tinh Trứng thụ tinh đượcđưa vào ootyp Tuyến noãn hoàng gồm nhiều bao noãn bé nằm trong nhu mô hoặcthành khối nằm hai bên đốt hoặc phía sau buồng trứng Từ tuyến noãn hoàng, cácchất dinh dưỡng đổ vào ootyp, giúp cho việc hình thành trứng thụ tinh Thể Melistiết ra các sản phẩm cần thiết để hình thành trứng Trong ootyp, trứng thụ tinh đượchình thành, sau đó trứng rơi vào tử cung Cấu tạo tử cung của sán dây rất khác nhau

Ở sán dây bậc thấp (Pseudophyllidea), tử cung là những ống cong, dẫn từ ootyp đến

lỗ ngoài (nằm ở mặt bụng của mỗi đốt) Ở những đốt sán dây này trứng được thải ra

ngoài tùy theo mức độ hình thành của trứng Ở sán dây bậc cao (Cyclophyllidea), tử

cung kín, không có lỗ thông ra ngoài Ở những sán dây này, các đốt già có tử cungchứa đầy trứng và mỗi đốt thực chất biến thành một cái túi chứa trứng Trứng được giảiphóng bằng cách nứt thành đốt sán Quá trình này thực hiện ở môi trường ngoài, ở nơi

mà các đốt sán dây già được thải ra cùng với phân vật chủ

Trứng sán dây bộ Cyclophyllidea hình tròn hoặc hơi bầu dục, có 4 lớp vỏ, trong có phôi 6 móc Còn trứng sán dây bộ Pseudophyllidea giống trứng sán lá, một

đầu có nắp (Nguyễn Thị Kim Lan và cs., 1999) [12]

1.1.3 Đặc điểm sinh học của sán dây T hydatigena và ấu trùng C tenuicollis

1.1.3.1 Đặc điểm hình thái, cấu tạo và ký chủ của sán dây T hydatigena

Nguyễn Thị Kỳ (1994) [10], Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [12] cho

biết: loài T hydatigena dài 70 - 500 cm, gồm 550 - 700 đốt rất rộng Đầu hình

quả lê hay hình thận, đường kính 1 mm, vòi có 26 - 44 móc, xếp thành haihàng, móc hàng trên dài 0,170 - 0,022 mm, có mỏm rất cong, móc hàng dướidài 0,110 - 0,160 mm, có lưỡi rất cong, các giác bám gần nhau và có đườngkính 0,110 mm, cổ dài 0,500 mm Có 600 - 700 tinh hoàn ở giữa các ống bàitiết Xung quanh noãn hoàng, buồng trứng, ống dẫn tinh và âm đạo không cótinh hoàn, ống dẫn tinh có dạng túi hẹp uốn khúc nhiều, không có túi tinh.Nang lông gai hình trụ dài 0,450 mm, rộng 0,130 mm, buồng trứng hai thùy ởnửa dưới của đốt, cạnh phía không lỗ lớn hơn phía có lỗ, noãn hoàng là ống hẹpkéo dài theo chiều ngang, thể Melis tròn ở giữa buồng trứng và noãn hoàng,phần đầu âm đạo phình rộng, sau hẹp dần, tới thùy buồng trứng tạo thành túinhận tinh Ở các đốt già thân tử cung có 5 - 10 nhánh ngang, mỗi đầu tự do lạitạo thành các nhánh phụ, trứng bầu dục, dài 0,031 - 0,038 mm, rộng 0,034 -0,035 mm, vỏ dày 0,004 mm.

Sán dây T hydatigena ký sinh trong ruột non của chó, chó sói, cáo và

một số thú ăn thịt khác

1.1.3.2 Đặc điểm hình thái, cấu tạo và ký chủ của ấu trùng C tenuicollis

Ấu trùng C tenuicollis thấy nhiều ở gan và các cơ quan trong xoang bụng

của lợn, trâu, bò, dê và nhiều loài thú khác, kể cả ở người Ấu trùng này có dạngbọc chứa đầy dịch trong Thành bên trong túi có một đầu sán dây giống đầu sán dây

T hydatigena trưởng thành Đầu có móc và các giác bám, giác bám có đường kính

0,099 0,310 mm, có 28 40 móc, xếp thành hai hàng, móc hàng trên dài 0,185 0,210 mm, móc hàng dưới dài 0,126 - 0,160 mm Ấu trùng được bọc bởi hai lớpmàng, màng ngoài bám vào thành các cơ quan trong xoang bụng của vật chủ, kíchthước của nang phụ thuộc vào nơi ký sinh của ấu trùng (Nguyễn Thị Kỳ, 1994 [10],Nguyễn Thị Lê và cs., 1996 [24], Nguyễn Thị Kim Lan và cs., 1999 [13], NguyễnThị Kỳ, 2003 [11])

-Ấu trùng C tenuicollis ký sinh trên bề mặt gan, màng mỡ chài và các cơ quan

khác trong xoang bụng của gia súc Gia súc nhiễm ấu trùng với số lượng ít thườngkhông có biểu hiện triệu chứng bệnh, khi nhiễm một số lượng lớn ấu trùng thì gia súc

dễ phát bệnh và có thể chết (Johannes Kaufmann, 1996) [71]

Radfar M H (2005) [91] đã mô tả: đầu sán ở trong ấu trùng C tenuicollis có

2 loại móc bám là móc lớn và móc nhỏ Ấu trùng C tenuicollis ký sinh trên cừu có

số lượng móc là 15,33 ± 1,33 móc lớn và 15,44 ± 1,42 móc nhỏ Chiều dài móc lớn

là 199,1 ± 10,93 µm, chiều dài móc nhỏ là 134,85 ± 11,63 µm.

Thành phần hóa học và các thành phần sinh hóa trong dịch nang của ấu trùng

C tenuicollis gồm: canxi (12 - 260 mg /100 ml), natri (130,5 - 424,3 ppm ) và kali

(12,5 - 52,5 ppm); các enzyme aspartate aminotransferase (0,131 - 23 U/L), alanineaminotransferase (1,00 - 86,17 U/L), lactat dehydrogenase (10 - 108 U/L) vàalkaline phosphate (18 - 176 U/L) (Nath S và cs., 2010) [81]

Saad M và cs (2010) [94] cho biết: màng của ấu trùng C tenuicollis được cấu

tạo từ các nguyên bào sợi và các tế bào gốc đa năng, có thể biệt hóa thành nhiều loại

tế bào khác nhau, biểu mô vảy và tế bào không biệt hóa với các mô nhầy

Ở độ phóng đại 10 lần, thấy ấu trùng C tenuicollis có cấu tạo đa lớp với hình

dạng ngoằn ngoèo và các lớp có hiện tượng phân nhánh

Ở độ phóng đại 100 lần, thấy các lớp được cấu tạo từ các tế bào khác nhaunhư nguyên bào sợi, tế bào gốc đa năng, tế bào biểu mô vảy và tế bào không biệthóa với mô nhầy sền sệt

Quan sát mô học, thấy các tế bào biểu mô vảy của ấu trùng có chức năng bảo

vệ và cảm giác Lớp gelatin và các tế bào không chuyên biệt ảnh hưởng đến sự tăngtrưởng, phát triển của ký sinh trùng ở giai đoạn phôi thai Các tế bào gốc đa năng cókhả năng biệt hóa thành nhiều loại tế bào khác nhau, giúp nang sán phát triển vàhoàn chỉnh các cơ quan cần thiết, đặc biệt là phát triển thành sán trưởng thành khi

ấu trùng C tenuicollis vào cơ thể chó và các thú hoang khác.

Thành phần sinh hóa như protein tổng số, glucose, cholesterol, triglyceride,

acid uric và urea trong dịch lỏng của ấu trùng C tenuicollis có vai trò rất quan trọng

cho sự trao đổi chất, sinh lý học, miễn dịch học, di truyền học và biến dị Tỷ lệ các

thành phần có trong ấu trùng C tenuicollis khác biệt đáng kể so với các thành phần

có trong huyết tương của ký chủ mà ấu trùng ký sinh

1.1.3.3 Chu kỳ sinh học của sán dây T hydatigena

Theo Phạm Sỹ Lăng và cs (2011) [21], Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15],

sán dây trưởng thành T hydatigena ký sinh ở ruột non chó và động vật ăn thịt

thường xuyên thải những đốt sán già theo phân ra ngoài môi trường Khi các đốtsán già phân hủy, trứng sán được giải phóng và phân tán ra môi trường Nếu lợn,trâu, bò, dê, cừu và người nuốt phải trứng sán, ở đường tiêu hóa ấu trùng 6 mócđược nở ra, xuyên qua thành ruột, theo hệ tuần hoàn về gan và các cơ quan trong

xoang bụng, di chuyển đến vị trí ký sinh, sau 2 tháng phát triển thành ấu trùng C.

tenuicollis Khi vật chủ cuối cùng (chó, cáo) ăn phải ấu trùng này, sau 50 - 60

ngày ấu trùng phát triển thành sán trưởng thành ký sinh ở ruột non

Khi chó và thú hoang nhiễm sán dây T hydatigena, trong ruột của ký chủ, sán dây T hydatigena trưởng thành rụng các đốt sán già, đốt sán được đưa ra ngoài môi

trường theo phân Một đốt sán già chứa tới hàng nghìn trứng

Trứng sán và đốt sán già ở ngoài môi trường lẫn trong cỏ, đất, nước, thức ăn,

kể cả thức ăn dự trữ Các ký chủ trung gian như cừu, dê, trâu, bò, hươu, nai, ngựa,

lợn ăn phải thức ăn, nước uống có lẫn trứng hay đốt sán già sẽ bị bệnh ấu trùng C tenuicollis Trứng sán có khả năng gây nhiễm trong vòng vài tháng ở ngoài môi

trường tự nhiên

Theo Bamorovat M và cs (2014) [56], sau khi vào ruột ký chủ, trứng nở ra ấutrùng, ấu trùng qua thành ruột vào máu và di chuyển đến gan Trong gan, ấu trùng dichuyển qua các nhu mô gan để ra bề mặt gan và tới bề mặt các cơ quan khác trongxoang bụng như màng treo ruột, màng mỡ chài, thận, ruột trong khoảng 30 ngày Trên

bề mặt các cơ quan trong xoang bụng, ấu trùng hình thành các nang và lớn dần Thờigian ấu trùng phát triển hoàn chỉnh kéo dài 65 - 85 ngày kể từ khi gia súc nuốt phảitrứng sán dây

Chó và các thú hoang ăn phải nội tạng có chứa ấu trùng C tenuicollis còn

khả năng gây bệnh sẽ bị nhiễm sán dây Ở trong đường ruột của chó hay thú hoang,màng bọc phân hủy, giải phóng đầu sán, đầu sán bám vào thành ruột ký chủ để lấychất dinh dưỡng và sản sinh các đốt sán mới Sau 6 - 8 tuần, sán dây trưởng thành

T hydatigena bắt đầu rụng các đốt sán già (Nguyễn Thị Kim Lan, 2012) [15],

1.1.4 Kỹ thuật sinh học phân tử trong định danh sán dây và ấu trùng sán dây

Trong nhiều thập kỷ qua, việc chẩn đoán, giám định và phân loại nhiều loạisinh vật, trong đó có ký sinh trùng cho đến nay vẫn dựa vào hình thái học (kiểuhình) là chính Hiện nay, các phương pháp sinh học phân tử (kiểu gen) đã bước đầuđược ứng dụng trong chẩn đoán phân loại và lập phả hệ sinh vật Phương pháp sinhhọc phân tử đang được ứng dụng ngày càng rộng rãi và có hiệu quả trong mọi lĩnhvực sinh học Đó là việc sử dụng các kỹ thuật ADN (trước hết là kỹ thuật PCR) và

kỹ thuật protein để xác định chuỗi gen hay chuỗi acid amin của từng gen, cũng nhưlập bản đồ gen của từng khu vực nhất định trong hệ gen của loài cần chẩn đoán, từ

đó so sánh đối chiếu với những loài khác, nhằm xác định chính xác loài mongmuốn Nguyên lý của phương pháp phân tích ADN dựa trên việc so sánh các trình

tự ADN ngắn giữa mẫu chưa biết với ngân hàng gen (Genbank) bao gồm trình tựcủa các loài đã biết, từ đó xác định chính xác tên loài của mẫu nghiên cứu.

Hướng sử dụng hệ gen ty thể trong nghiên cứu quan hệ loài và phả hệ đượccoi là có cơ sở vững vàng nhất trong điều kiện hiện nay Các gen của ty thể trongcùng chủng, cùng loài, thậm chí trong các loài có quan hệ gần về sinh học có sự bảotồn rất cao, do vậy, bất cứ sự thay đổi nhỏ nào cũng là dấu hiệu giá trị trong giám

định và phân loại Dựa trên hiểu biết về đặc điểm và chức năng gen Cytochrome

coxidase subunit 1 (CO1) ở các loài sán ký sinh và gây bệnh trên hệ tiêu hoá củangười và động vật, mã hóa cho protein CO1 có vai trò quan trọng trong việc vậnchuyển điện tử thực hiện phản ứng oxy hoá khử của hệ thống hô hấp tế bào Gen này

đã được xác định về mặt cấu trúc bằng sinh học phân tử ở nhiều quốc gia trên thếgiới, trong đó có Việt Nam và đã được đăng ký trong ngân hàng gen Mặt khác, genCO1 có độ bảo tồn rất cao, sự sai khác về thành phần nucleotide cũng như amino acidcho phép kết luận được sự biến đổi về nội loài, ngoại loài, cũng như kết luận phânloại về loài sán Vì vậy, có thể lựa chọn gen CO1 làm chỉ thị phân tử cho việc giámđịnh loài sán dây của Việt Nam (Bowles và cs., 1992) [60]

Trên thế giới, nhiều loài ký sinh trùng đã được giải mã gen và đăng ký trongngân hàng gen, đây chính là nguồn cơ sở dữ liệu để có thể truy cập ứng dụng trongchẩn đoán, giám định và phân loại về loài Hơn nữa với các mẫu nghiên cứu là mẫutrứng hoặc ấu trùng rất khó xác định chính xác loài Do vậy, việc nghiên cứu sinhhọc phân tử đối với các loài giun sán nói riêng và ký sinh trùng nói chung là hết sứccần thiết ở nước ta hiện nay Ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử vào thực tế ngàynay đã trở thành công nghệ do có ưu điểm về độ nhạy, độ đặc hiệu, phát hiện sớm,thời gian xét nghiệm nhanh Sự phát triển của công nghệ sinh học, trên nền tảng củasinh học phân tử, cung cấp nhiều phương pháp phân tử có ý nghĩa ứng dụng lớntrong y học và lĩnh vực thú y để phòng ngừa, chẩn đoán và điều trị bệnh hiệu quả

Phương pháp PCR

PCR là một kỹ thuật được sử dụng trong sinh học phân tử để khuếch đại mộtbản duy nhất hoặc một vài bản sao của một đoạn ADN, tạo ra hàng ngàn đến hàngtriệu bản của một trình tự ADN Nó là một công cụ dễ dàng để khuếch đại một đoạnADN cần nghiên cứu, rất hữu ích trong chẩn đoán và giám sát các bệnh di truyền,lĩnh vực pháp y, nghiên cứu chức năng của các đoạn ADN nghiên cứu

Kỹ thuật PCR đã được sử dụng rộng rãi từ những năm đầu 1990, và hiện nay làmột kỹ thuật được sử dụng phổ biến trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu y học vàsinh học

* Nguyên tắc hoạt động của PCR

PCR là phản ứng xúc tác của enzym ADN polymeraza chịu nhiệt, sử dụng

nhiều nhất là Taq polymearase, trong môi trường có nồng độ ion Magie (Mg++)

thích hợp, với các thành phần dẫn chất nucleotide đầy đủ làm nguyên liệu, hai đoạnngắn nucleotide làm mồi (oligo hay primer) Phản ứng sẽ tiến hành tổng hợp cácđoạn ADN tương ứng trên khuôn ADN, trong giới hạn giữa các primer Primer ởbên trái tác động trên sợi ADN 3’-5’ được gọi là primer thuận (forward primer kýhiệu là F) Primer ở bên phải tác động trên sợi ADN 5’-3’ được gọi là primer ngược(reverse primer ký hiệu là R)

Sự tổng hợp ADN tăng theo cấp số 2n, sau 25 - 40 chu kì, sẽ cho số lượngADN là hàng triệu bản sao Thời gian thực hiện PCR là vài giờ, với chương trình tựđộng hoá, nên không tốn công sức Hiện nay, đã có máy phân tích trình tựnucleotide tự động (automated sequencer), nên sản phẩm PCR sau khi được tinhsạch sẽ được phân tích ngay rất thuận lợi cho nghiên cứu

Hầu như tất cả các ứng PCR sử dụng một enzyme ADN polymerase chịunhiệt, như Taq polymerase (một loại enzyme ban đầu được phân lập từ vi khuẩn

Thermus aquaticus) ADN polymerase phân lập từ T aquaticus ổn định ở nhiệt độ

cao, lại hoạt động ngay sau khi biến tính ADN, do đó không cần phải thêmpolymerase ADN mới sau mỗi chu kỳ Điều này cho phép thực hiện một quá trìnhchu kỳ nhiệt tự động để khuếch đại ADN Polymerase ADN này ráp lại thành mộtsợi ADN mới từ các khối ADN, các nucleotide, bằng cách sử dụng ADN sợi đơnlàm khuôn mẫu và mồi, đó là các thành phần cần thiết cho khởi đầu của sự tổng hợpADN Đa số các phương pháp PCR sử dụng chu kỳ nhiệt, tức là, luân phiên làmnóng - mát các mẫu PCR qua một loạt các bước nhiệt đã được xác định

Mỗi chu kỳ PCR bao gồm ba giai đoạn có nhiệt độ khác nhau (hình 1.1):

Gây biến tính (denaturation) ở 90 - 95 o C Trong giai đoạn biến tính phân tử

ADN khuôn mẫu ở dạng xoắn kép được tách thành hai sợi đơn (single strands)

Gắn primer (annealing) ở 40 - 65 o C Trong giai đoạn này các primer gắn

vào các vị trí có trình tự tương đồng ở ADN khuôn mẫu Các liên kết ion tạo thànhmột đoạn nhỏ (các primer đã lắp ráp chính xác) và trên các đoạn nhỏ ADN sợi đôi

đó (khuôn mẫu và primer) enzyme Taq polymerase có thể bắt đầu quá trình saochép khuôn mẫu

Kéo dài phân tử (extension) ở 70 - 72 o C Đây là khoảng nhiệt độ tối thích

cho Taq polymerase tiến hành tổng hợp ADN bắt đầu từ các vị trí có primer theochiều 5’-3’

Để kiểm tra ADN được tổng hợp hay chưa, lấy từ ống phản ứng khoảng

5 µl sản phẩm và điện di trong gel agarose có pha sẵn ethidium bromide (50µl/ml) hoặc ngâm gel trong dung dịch ethidium bromide sau khi điện di và kiểmtra băng ADN đặc hiệu dưới UV Thông thường để xác định phân tử lượng củasản phẩm người ta điện di ADN MW marker trong một hoặc hai làn bên cạnh cácsản phẩm PCR

Hình 1.1 Sơ đồ nguyên lý hoạt động của PCR

M: dấu thang phân tử lượng; S: sản phẩm PCR được điện di trong gel agarose,

nhuộm bằng ethidium bromide và kích thích bằng UV

Các kỹ thuật phân tử đã được ứng dụng trong định loại và phân tích tiến hóacủa sán dây từ những năm đầu 1990 (Bowles và cs., 1992 [60]; 1995 [61]; Okamoto

và cs 1995 [85]) Các chỉ thị phân tử được sử dụng bao gồm các đoạn gen nhân vàgen ti thể, chúng có ích rất lớn trong việc phân biệt các taxon có quan hệ gần, đặcbiệt là những loài khó phân biệt bằng hình thái học truyền thống (Hebert và cs

2003 [70]; Avise, 2004 [54]) Đặc biệt, chỉ thị gen ty thể mtADN là chỉ thị hấp dẫncủa đa dạng sinh học phân tử bởi vì nó không tái tổ hợp, di truyền theo dòng mẹ,tiến hóa nhanh, không liên kết và có nhiều bản trong mỗi tế bào (Avise, 2000 [53];

2004 [54]) Nó đã trở thành một công cụ phổ biến cho nghiên cứu phát sinh loài vàđịnh loài, dẫn đến rất nhiều thông tin có thể so sánh trong cơ sở dữ liệu (Avise,

2004 [54], Savolainen và cs 2005 [97]) Gen ty thể đã được áp dụng rộng rãi trongcác nghiên cứu về sán dây kể từ khi Bowles và cs (1992) [60] lần đầu tiên sử dụng

một vùng của gen CO1 để mô tả các mẫu sán sây Echinococcus

1.1.5 Một số đặc điểm bệnh ấu trùng C tenuicollis và bệnh sán dây T hydatigena

1.1.5.1 Bệnh ấu trùng C tenuicollis

* Đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis

Lợn, động vật hoang dã và người đều cảm nhiễm trứng sán dây T.

hydatigena và mắc bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra Gia súc và người

nhiễm ấu trùng C tenuicollis do nuốt phải trứng hoặc đốt sán dây T hydatigena

do chó bệnh thải ra ngoại cảnh Tỷ lệ nhiễm bệnh phụ thuộc vào phương thức

chăn nuôi; số lượng, tỷ lệ chó bị nhiễm sán dây T hydatigena Tỷ lệ nhiễm ấu trùng

C tenuicollis tăng dần theo tuổi của gia súc, vì gia súc nuôi càng lâu thì cơ hội tiếp

xúc với mầm bệnh càng nhiều nên tỷ lệ nhiễm bệnh càng cao (Nguyễn Thị KimLan, 1999) [13]

Phan Địch Lân và cs (2002) [23] cho biết: bệnh ấu sán cổ nhỏ do ấu trùng C tenuicollis gây ra thấy phổ biến khắp các vùng Tỷ lệ dê mắc bệnh cao hay thấp phụ

thuộc vào số lượng chó nuôi ở các địa phương, các tỉnh trung du miền núi phía Bắcnhư Thái Nguyên, Bắc Kạn, Tuyên Quang, Cao Bằng, Lai Châu số lượng chó nuôinhiều nên dê nhiễm ấu sán cổ nhỏ tương đối phổ biến (21,12%), có trường hợp nhiễm

rất nặng (35 ấu sán/dê) Tỷ lệ nhiễm C tenuicollis tăng lên theo tuổi dê.

* Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng bệnh ấu trùng C tenuicollis

Theo Phạm Văn Khuê và Phan Lục (1996) [9], bệnh thường ở thể mãn tính,triệu chứng không rõ ràng Khi bị nặng, giai đoạn đầu con vật gầy yếu, hoàng đản,sau đó là viêm màng bụng cấp tính, thường sốt cao, khi ấn mạnh vào bụng con vật cóphản ứng đau, bụng to và căng, một số trường hợp thấy màng bụng xuất huyết Khicon vật mắc bệnh ở thể cấp tính, gan sưng to, mặt gan gồ ghề, màng fibrin phủ kín, cónhiều điểm tụ huyết, có nhiều rãnh do ấu trùng di hành trong gan Thời kỳ đầu trongxoang bụng tích nhiều nước, thời kỳ cuối nước có màu vàng Một vài trường hợpviêm màng bụng cấp tính, có nhiều dịch thẩm xuất lẫn máu và có nhiều đầu sán

Nếu số lượng ấu trùng C tenuicollis nhiều, bệnh ở thể nặng thì có thể gây tử

vong, chủ yếu thấy ở gia súc non Tác động chủ yếu là do ấu trùng gây tổn thươngnặng ở gan và các cơ quan khác

Bệnh ấu trùng C tenuicollis thể cấp tính gan sưng to, mặt gan gồ ghề, có

màng fibrin, có nhiều điểm tụ huyết trên mặt gan, có nhiều rãnh do ấu trùng di hànhtạo ra trong gan Một vài trường hợp viêm màng bụng cấp tính, trong có nhiều dịchthẩm xuất lẫn máu (Phạm Sỹ Lăng và cs., 2011) [21],

Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15], con vật mắc bệnh ấu trùng C.

tenuicollis mất tính thèm ăn, suy nhược cơ thể, hoàng đản và rối loạn tiêu hóa, gan

sưng to, có nhiều điểm tụ huyết; có nhiều ấu trùng có kích thước khác nhau trên bềmặt gan, màng treo ruột, màng mỡ chài, có thể thấy ấu trùng ở cơ hoành và phổi củagia súc Giai đoạn đầu con vật gầy yếu dần, hoàng đản, tiếp đó có triệu chứng củaviêm màng bụng cấp tính, thường sốt cao 40 - 41oC, khi ấn tay vào bụng con vật cóphản ứng đau

Khi nhiễm nhẹ, chức năng của các cơ quan rối loạn không rõ Ấu trùng 6móc chui qua thành ruột, sau 24 giờ vào gan, dừng lại ở các nhánh tĩnh mạch cửa,rồi vào gan, đào thành rãnh, gây viêm gan cấp tính, có khi viêm màng bụng

Ấu trùng di hành chui qua mặt gan vào xoang bụng, ký sinh ở màng treoruột, màng mỡ chài, lách và các cơ quan khác trong xoang bụng

* Chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis ở một số loài gia súc

Phạm Sỹ Lăng và cs (2011) [21] cho biết: có thể chẩn đoán bằng phương

pháp ELISA để phát hiện kháng nguyên hoặc kháng thể kháng T hydatigena Ngoài

ra, những phương pháp khác có thể áp dụng như: Agar gel precipitation (AGD),Immuno blot, siêu âm phát hiện nang sán,…

Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15], đối với động vật còn sống rất khóchẩn đoán Có thể chọc dò để tìm đầu sán trong dịch xoang ngực và xoang bụng,nhưng rất khó khăn Đối với động vật đã chết, có thể mổ khám tìm ấu trùng sán dây

ở bề mặt các khí quan trong xoang bụng và xoang ngực

* Phòng và trị bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra

- Phòng bệnh:

Để phòng bệnh ấu trùng C tenuicollis cần phải phòng bệnh sán dây cho chó,

không cho chó ăn các cơ quan có ấu trùng (gan, phổi, lách, màng mỡ chài, ) Khigiết mổ gia súc, thấy ấu trùng sán dây phải tập trung để tiêu diệt; định kỳ tẩy sán dâycho chó; không nuôi chó trong các trại chăn nuôi gia súc (Phạm Văn Khuê và PhanLục, 1996 [9])

Theo Phan Địch Lân và cs (2002) [23], thực hiện các biện pháp phòng bệnh

ấu trùng C tenuicollis như sau:

Định kỳ tẩy sán cho chó bằng một trong các thuốc: arecolin: 2 - 3 mg/kg thểtrọng, trộn với thức ăn; devermin: 250 mg/kg thể trọng, cho uống hoặc tiêm bắp; cóthể dùng bài thuốc nam theo kinh nghiệm của nhân dân: 200 - 250 gam hạt bí ngôsống bỏ vỏ, nghiền nhỏ, trộn với cơm cho chó ăn Khi mổ lợn, dê, trâu, bò chú ýdiệt ấu trùng sán dây bằng cách đun trong nước sôi hoặc chôn sống và đổ vôi bộtlên trên Tuyệt đối không cho chó ăn các ấu trùng sán dây

Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15] cho biết, có thể phòng bệnh ấu trùng C tenuicollis bằng cách thực hiện các biện pháp sau: phòng bệnh sán dây cho chó

(không cho chó ăn các khí quan có ấu trùng; khi mổ lợn, trâu, bò, dê, cừu, phảitập trung các ấu trùng sán dây để tiêu diệt), định kỳ tẩy sán dây cho chó nuôi ở cácgia đình, không nuôi chó ở trong các trang trại chăn nuôi gia súc, không nuôi lợnthả rông

- Điều trị:

Ấu trùng C tenuicollis gây bệnh ấu sán cổ nhỏ ở người, lợn, trâu, bò, dê, cừu

cho đến thời điểm hiện tại vẫn chưa có thuốc điều trị đặc hiệu (Nguyễn Thị Kim Lan

và cs., 1999 [13])

Theo Phạm Sỹ Lăng và cs (2011) [21], những gia súc quý bị nhiễm ấu trùng

C tenuicollis, muốn điều trị cần thiết phải siêu âm xác định vị trí, dùng kim dài hút

hết dịch để giảm sự chèn ép rồi điều trị bằng thuốc albendazol, liều 30 mg/kg TT;oxfendazol, liều 30 mg/kg TT, cho uống trong 3 ngày liên tục

Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15] cho biết, có thể thử nghiệm điều trị bệnh ấu sán

cổ nhỏ và bệnh gạo lợn bằng một trong hai loại hóa dược sau đây:

- Praziquantel: liều 30 mg/kg TT/ngày x 15 ngày, chia thành 2 - 3 đợt, mỗiđợt cách nhau 10 - 20 ngày

- Praziquantel: liều 20 - 25 mg/kg TT trong ngày đầu, những ngày sau dùngalbendazole liều 15 mg/kg TT/ngày x 30 ngày, chia thành 2 - 3 đợt, mỗi đợt cáchnhau 20 ngày

1.1.5.2 Một số đặc điểm về bệnh do sán dây T hydatigena gây ra ở chó

* Đặc điểm dịch tễ bệnh sán dây T hydatigena

Skrjabin và Petrov (1963) [32] cho biết, nếu như đường xâm nhập của các giunsán truyền trực tiếp thường là qua nước hoặc thức ăn bị nhiễm bẩn, thì nhiều loại giunsán truyền qua sinh vật xâm nhập vào cơ thể ký chủ cuối cùng khi ký chủ đó ăn phải các

mô và các cơ quan của ký chủ trung gian chứa ấu trùng giun, sán ở giai đoạn cảm nhiễm

Với cách xâm nhập này, chó sói cảm nhiễm sán dây T hydatigena do ăn phải cừu có ấu

trùng sán

Đặc điểm dịch tễ bệnh do sán dây T hydatigena gây ra đã được nhiều tác giả

đề cập đến Tuy nhiên, các nghiên cứu còn ít và chưa hệ thống nên chưa phản ánhđầy đủ những vấn đề liên quan đến sự phát sinh và phát triển của bệnh

Theo Đỗ Dương Thái và Trịnh Văn Thịnh (1975) [35], chó nhiễm sán

dây T hydatigena do ăn ấu trùng hoặc phủ tạng của lợn, dê, cừu, trâu, bò có ấu trùng C tenuicollis.

Chó săn thường nhiễm sán dây do ăn thịt thỏ chứa ấu trùng Chó của nhữngngười chăn cừu, bò, chó ở lò mổ mắc sán do ăn phủ tạng của bò, cừu, lợn Chónuôi trong nhà mắc sán do ăn bọ chó trên mình nó chứa ấu trùng Ấu trùng sán dây

ở thỏ, bò, cừu, lợn, bọ chó… là ấu trùng của những loài sán dây khác nhau, nênchó là một trong những loài vật bị nhiều loài sán dây ký sinh nhất (Trịnh VănThịnh, 1977 [39])

Ở nước ta, loài T hydatigena phân bố rộng ở cả 3 vùng đồng bằng, trung

du và miền núi với những kiểu khí hậu khác nhau (Nguyễn Thị Kỳ, 1994) [10]

Dịch tễ học của bệnh sán dây ở chó liên quan chặt chẽ đến số lượng chó nuôi

và chế độ kiểm soát giết mổ Ở những nơi chế độ kiểm soát giết mổ không chặt chẽthì chó dễ mắc bệnh sán dây do ăn phải những cơ quan nội tạng của gia súc có ấutrùng (Nguyễn Thị Kim Lan và cs., 1999) [12],

* Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng bệnh sán dây T hydatigena ở chó

Đỗ Dương Thái và Trịnh Văn Thịnh (1975) [35] đã mô tả bệnh tích thường thấy

ở chó bị bệnh sán dây là: viêm niêm mạc ruột non ở những chỗ đầu sán dây bám vào,

có khi thấy lồng ruột và tắc ruột nếu số lượng sán rất nhiều cuộn lại

Chó chỉ biểu hiện triệu chứng nếu có nhiều sán dây ký sinh, các triệu chứngthường gặp là: đau bụng, đi tả, ăn không đều, ngứa hậu môn, có khi bị co giật Cuốicùng chó thiếu máu, gầy rạc và có thể chết nếu không được điều trị kịp thời Chóthường thải ra những đốt sán ra ngoài, cọ hậu môn vào tường để đẩy sán ra (TrịnhVăn Thịnh, 1977) [39]

Theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [12], trong quá trình ký sinh, sán dây T hydatigena gây ra những tác hại lớn cho chó, biểu hiện ở những tác động sau:

Móc và giác bám của sán trưởng thành làm tổn thương niêm mạc ruột và mởđường cho vi khuẩn xâm nhập vào cơ thể Sán dây tiết độc tố làm ký chủ có cáctriệu chứng thần kinh như có thể có triệu chứng bại liệt gần giống triệu chứng bạiliệt trong bệnh dại ở chó Sán lấy dinh dưỡng của chó làm con vật gầy yếu, chậmlớn, suy dinh dưỡng Nếu số lượng nhiều, sán có thể làm tắc ruột

Tác hại của sán dây đối với chó thể hiện qua bốn tác động sau:

Tác động cơ giới: với số lượng lớn ký sinh, sán dây dùng giác bám bám chặtvào niêm mạc ruột, gây tổn thương, viêm ruột và xuất huyết

Tác động do độc tố: trong quá trình ký sinh, sán dây tiết ra độc tố Độc tố có thểtác động đến hệ thần kinh, gây triệu chứng thần kinh, làm cho chó mệt mỏi, kém ăn.Chó con bị bệnh cấp tính có thể bỏ ăn, tiêu chảy…

Tác động chiếm đoạt chất dinh dưỡng: sán nuôi dưỡng bản thân bằng cách thẩmthấu dinh dưỡng qua toàn bộ bề mặt cơ thể Do số lượng sán nhiều và tồn tại trong thờigian dài làm chó gầy yếu, thiếu máu, giảm sức đề kháng

Tác động mang trùng: sán dây ký sinh gây tổn thương niêm mạc ruột, tạo điềukiện cho vi khuẩn xâm nhập và gây các bệnh khác ghép với bệnh ký sinh trùng.

Vương Đức Chất và Lê Thị Tài (2004) [1] cho biết: chó bị bệnh sán dây thể cấptính thường gặp ở chó từ 1 - 4 tháng tuổi, biểu hiện kém ăn, nôn mửa liên tục do sán bámvào vách ruột gây ra những tổn thương niêm mạc và kích thích gây nôn Chảy máu ruột

do đầu sán có nhiều móc bám vào vách ruột nên phân có màu xám hoặc đen Viêm ruộtthứ phát do vi khuẩn đường ruột bội nhiễm Rối loạn tiêu hóa làm chó lúc táo, lúc tiêuchảy, trong phân có niêm mạc ruột tróc ra và có lẫn những đốt sán rụng ra Nếu khôngđược chăm sóc tốt và điều trị kịp thời, tỷ lệ chết cao tới 60 - 70% do viêm ruột, mất máu,mất nước và rối loạn chất điện giải

Thể mãn tính thường gặp ở chó trưởng thành: chó ăn ít, gầy còm, rối loạntiêu hóa, viêm ruột mạn tính, trong phân có đốt sán già, khi ra bên ngoài đốt sán vẫn

cử động được Giai đoạn cuối chó biểu hiện hội chứng thần kinh: run rẩy hoặc ngơngác, nằm lỳ một chỗ, hoặc trở nên dữ tợn Nếu không được điều trị chó trưởngthành có thể chết trong trạng thái thiếu máu kéo dài và kiệt sức

Theo Phạm Sỹ Lăng và cs (2006) [19], bệnh sán dây ở thể cấp tính chỉ chiếm30% số chó nhiễm sán, thường thấy ở chó dưới 6 tháng tuổi Sán gây ra các tổnthương ở ruột, tạo điều kiện cho các vi khuẩn gây bệnh xâm nhập vào tổ chức ruột,gây hội chứng viêm ruột cấp Chó bệnh thể hiện: nôn mửa liên tục, ỉa chảy nặng,phân tanh khắm và đôi khi có xuất huyết ruột Chó thường chết sau 3 - 5 ngày nếukhông được điều trị kịp thời Ở chó con còn thấy hiện tượng rối loạn thần kinh (ngơngác, run rẩy, đi siêu vẹo…) do độc tố của sán kích thích thần kinh trung ương

Thể mãn tính chiếm tỷ lệ cao, biểu hiện rõ nhất là chó bệnh gầy còm xơ xác,thiếu máu, rụng lông, trông như chỉ còn da bọc xương, nhưng chó vẫn ăn khỏe Ngoài

ra chó còn bị rối loạn tiêu hóa kéo dài, khi táo bón, khi ỉa chảy và nôn khan

Bệnh gây hậu quả nghiêm trọng với chó con, có thể gây tắc nghẽn ruột Chótrưởng thành nhiễm sán dây với số lượng lớn có thể gây viêm ruột và tiêu chảy

Chó nhiễm sán dây có thể ỉa chảy, da khô hoặc giảm cân, đôi khi có hiệntượng quay đầu lại cắn phía sau hoặc chạy xung quanh (Seymour Weiss, 1996) [103]

Theo Tô Du và Xuân Giao (2006) [4], chó bị bệnh sán dây thường gầyyếu, suy nhược, thiếu máu do thiếu dinh dưỡng, viêm ruột, giảm khả năng sinhsản và chết do kiệt sức

Đặc biệt, chó trưởng thành mắc bệnh sán dây vẫn ăn khỏe, nhưng gầy dần,trong phân phát hiện thấy nhiều đốt sán già, những đốt sán khi ra ngoài vẫn cử độngđược trong vài giờ (Phạm Sỹ Lăng và cs., 2009) [20].

Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15], tuổi thọ của sán trưởng thành tươngđối dài, có thể tới hàng chục năm, nên loài ăn thịt mang sán là nguồn gieo rắc cănbệnh Mỗi đốt sán già chứa hàng nghìn trứng sán Chó thải đốt sán làm cho trứngsán phát tán khắp nơi

Sức đề kháng của mầm bệnh ở ngoài tự nhiên cũng góp phần vào sự phát tánmầm bệnh Trứng sán dây có sức đề kháng cao ở ngoại cảnh, có thể sống lâu ởnhững nơi ẩm ướt

* Chẩn đoán bệnh sán dây T hydatigena ở chó

Đỗ Dương Thái và Trịnh Văn Thịnh (1975) [35] cho biết: việc chẩn đoán bệnhsán dây chó có thể khá dễ dàng nếu chó thải ra những đốt sán hoặc đoạn sán dây lòngthòng ở hậu môn, gây ngứa ngáy

Để chẩn đoán bệnh, ngoài theo dõi các biểu biện của chó, trong đó biểu hiệnđáng lưu ý là chó gầy yếu, chậm lớn, bụng chướng to, tiêu chảy, phân có nhiều đốtsán hoặc cả đoạn sán dây, đối với chó còn sống cần xét nghiệm phân tìm đốt sán; đốivới chó đã chết, có thể mổ khám để kiểm tra bệnh tích và tìm sán dây trưởng thành kýsinh ở ruột non (Nguyễn Thị Kim Lan và cs., 1999 [12], 2008 [14])

Theo Chu Thị Thơm và cs (2006) [44], để xác định loài sán dây, cần thuthập sán dây trưởng thành, sau đó để sán dây chết tự nhiên trong nước sạch, rồi

ép mỏng giữa hai phiến kính, cố định trong cồn etylic 70o Sau đó nhuộmCarmine, rút hết nước trong mẫu vật, làm trong và gắn tiêu bản lên phiến kính đểchẩn đoán, từ đó xác định được tên khoa học của các loài sán dây

Sán dây sống ký sinh trong ruột động vật có xương sống, trong chu kỳ pháttriển cần sự tham gia của một hoặc hai vật chủ trung gian Vì vậy, sự phân bố củasán dây phụ thuộc rất nhiều vào vật chủ, quy luật sinh thái học của cả vật chủ và sándây là yếu tố quan trọng nhất chi phối sự khác nhau về tỷ lệ nhiễm sán dây ở vậtchủ (Nguyễn Thị Kỳ, 2003) [11]

* Phòng và trị bệnh sán dây cho chó

- Phòng bệnh

Phạm Văn Khuê và Phan Lục (1996) [9], Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999)

[12]; Vương Đức Chất và Lê Thị Tài (2004) [1]; Tô Du và Xuân Giao (2006) [4];Phạm Sỹ Lăng và cs (2006) [19], Bùi Quý Huy (2006) [7] đã đề xuất biện phápphòng bệnh sán dây ở chó như sau:

Định kỳ tẩy sán dây cho chó 4 lần/năm

Diệt ký chủ trung gian của các loài sán dây bằng cách: thường xuyên tắm chochó; định kỳ tẩy uế, vệ sinh chuồng nuôi, cũi nhốt chó và môi trường xung quanh;hàng ngày dọn chuồng, thu gom phân đổ vào hố ủ Định kì kiểm tra phân phát hiệnđốt sán và tẩy sán dây cho chó

Cho chó ăn thức ăn chín, ăn sạch và uống sạch

Có chế độ kiểm soát giết mổ chặt chẽ, không cho chó ăn những bộ phận

có ấu trùng

Không thả rông chó, mèo; chó bệnh không được cho tiếp xúc với bên ngoài

để hạn chế phát tán mầm bệnh

- Điều trị:

Việc điều trị bệnh sán dây cho chó phải đạt ba yêu cầu:

Thứ nhất, phải tiêu diệt được sán dây: để tẩy sán dây cho chó phải dùngthuốc có tác dụng diệt sán dây nhưng không độc đối với ký chủ Nên chọn thuốc cóhiệu lực cao đối với sán dây, tức là phải loại thải được cả các đốt thân và đốt đầucủa sán dây, nếu đốt đầu vẫn còn sót lại, chỉ sau một thời gian ngắn, nó lại sản sinhcác đốt thân và thành con sán hoàn chỉnh; đồng thời thuốc ít độc đối với chó, giáthành hợp lý và dễ sử dụng

Thứ hai, phải ngăn chặn để chó không bị tái nhiễm sán dây

Thứ ba, phải tăng cường sức đề kháng của chó: cho ăn đủ dinh dưỡng, khoáng

và vitamin Giữ gìn vệ sinh tốt, dùng thuốc chữa các triệu chứng nếu có

Thuốc niclosamid là thuốc có tác dụng tẩy sán dây do thuốc ức chế sự hấp thuđường và ngăn cản quá trình phosphoryl hóa trong ty lạp thể của sán dây Sự phongtỏa chu trình Kreb dẫn đến tích lũy acid lactic và giết chết sán Sự kích thích quá mứchoạt động của adenosine triphosphate (ATP) của ty lạp thể có thể liên quan đến tácdụng của thuốc niclosamid với sán dây Sán dây chết và bị nát trong đường tiêu hóa

ký chủ, vì vậy không tìm thấy đầu và đốt sán trong phân gia súc được tẩy (Phạm ĐứcChương và cs., 2003 [2])

Arecolin là alcaloid có trong hạt cau, hạt cọ Cơ chế tác dụng của thuốc làlàm tê liệt hệ thần kinh trung ương của sán, nhất là đầu và các đốt chưa thành thục.Sán bị tê liệt không bám được vào niêm mạc ruột và bị đẩy ra ngoài theo phân(Bùi Thị Tho, 2003) [42].

Theo Vương Đức Chất và Lê Thị Tài (2004) [1], thuốc niclosamid có dạng bộtmàu vàng, cho uống với liều 80 - 100 mg/kg TT, cho uống một nửa liều vào buổisáng khi chưa cho ăn, sau đó 1 giờ cho uống nốt nửa liều còn lại, 3 giờ sau khi uốngthuốc mới cho ăn bình thường Sau 6 - 10 giờ dùng thuốc, sán bị chết và theo phân

ra ngoài Sau 20 ngày nếu vẫn phát hiện thấy đốt sán trong phân chó thì tẩy lại lần 2theo quy trình như lần đầu

Lopatol là thuốc do hãng CIBA (Thụy Sĩ) sản xuất Thuốc có hiệu lực cao tẩy sándây cho chó, mèo (tẩy sán sạch 80 - 85%), an toàn và không gây phản ứng phụ Có thểdùng cho chó từ 3 tuần tuổi Thuốc có thể uống trực tiếp hay trộn với một ít thức ăn.Chỉ uống một lần, liều 50 mg/kg TT Cho chó uống khi đói và sau đó 1 - 2 giờ cho

ăn uống bình thường, không phải kiêng hay nhịn ăn Nếu chưa sạch sán có thể tẩylại lần 2 sau một tuần như quy trình lần đầu

Theo Phạm Sỹ Lăng và cs (2006) [19], nguyên tắc điều trị bệnh sán dây chochó là tẩy sán kết hợp với điều trị hội chứng viêm ruột do sán gây ra cho vật bệnh Đểđiều trị triệu chứng có thể dùng các loại thuốc sau: điều trị viêm ruột bằng biseptol,trimethoxazol 24%; chống nôn bằng atropin 1%; chống chảy máu ruột bằng vitamin K;

bổ sung các thuốc trợ lực, tăng sức đề kháng cơ thể như: truyền dung dịch mặn, ngọtđẳng trương 100 - 150 ml/10 kg TT/ngày; hoặc dung dịch glucoza 30%, tiêm tĩnhmạch với liều 3 - 5 ml/con; B.complex tiêm bắp, liều 3 - 5 ml/ngày; tiêm vitamin B12

để chống thiếu máu

Theo Phạm Khắc Hiếu (2009) [6], trên thị trường có nhiều loại thuốc có tác

dụng tốt để tẩy các loài sán dây thuộc giống Taenia và giống Dipylidium cho chó.

Có thể sử dụng một trong các thuốc sau:

Thuốc praziquantel là dẫn xuất của pirazino - isoquinolin Thuốc có tác dụngdiệt sán dây nhanh Thuốc làm co thắt ngay lập tức các cơ của sán, sau đó sán bị têliệt và chết Ngoài ra, thuốc còn làm tổn thương lớp vỏ bọc của sán Thuốc đặc biệttốt với sán trưởng thành, cũng có tác dụng tốt với ấu trùng Thuốc hấp thu nhanh ởruột, nằm trong các tuyến ruột Lieberkun rồi tẩm vào đầu sán, như vậy tốt hơn những

thuốc ở trong lòng ruột Thuốc phân bố đồng đều ở tất cả các tổ chức, khí quan của

cơ thể Các dạng phân hủy của thuốc được thải qua nước tiểu Praziquantel có độctính thấp: ở chó, dùng liều gấp 40 lần liều điều trị cũng chỉ gây nôn là dấu hiệu nặngnhất Thuốc an toàn nên sử dụng được cho cả gia súc có thai

Thuốc espirantel có tác dụng diệt sán dây rất tốt, đặc biệt sán dây ký sinh

ở các loài ăn thịt Ở chó liều gấp 90 lần liều điều trị cũng không gây độc Thuốcđược dùng với liều 5,5 mg/kg TT

Thuốc niclosamid: thuốc niclosamid ức chế quá trình phosphoryl hóa trong

cơ thể sán dây và có tác dụng tốt đối với các loài sán thuộc giống T và giống Dipylidium Niclosamid hấp thu kém ở ruột, phần thuốc đã hấp thu cũng nhanh bị

phân hủy và thải trừ Tuy nhiên, cần lưu ý tới tác dụng phụ của thuốc: với liều gấp

3 lần liều điều trị đã gây thoái hóa gan và suy thận ở chó

Theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2012) [15], để tẩy sán dây cho chó có thểdùng arecolin, uống hoặc trộn thức ăn, liều 2 - 3 mg/kg TT, trước khi cho uống thuốc chochó nhịn đói 16 - 20 giờ Để đề phòng con vật nôn mửa có thể cho uống 1 - 2 giọt dungdịch iod trước khi cho uống areconlin 15 - 20 phút Arecolin có thể sử dụng tiêm dưới

da, liều 20 - 50 mg/chó trưởng thành (tương đương 4 - 10 ml dung dịch arecolin0,5%) Nếu cần, có thể tiêm nhắc lại sau 1 giờ

Vương Đức Chất và Lê Thị Tài (2004) [1], Lê Thị Tài và cs (2006) [33]Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2012) [15] đã đề cập đến một số bài thuốc nam dùng

để tẩy sán dây cho chó có hiệu quả cao:

Nước sắc hạt cau: hạt cau giã nhỏ 100 g, nước sạch 500 ml Đun sôi, cô đặccòn lại 20 ml, lọc bỏ bã, cho uống liều 5 - 10 ml/kg TT Trước khi cho uống, chonhịn ăn 4 - 5 giờ Sau nửa giờ uống nước sắc hạt cau thì cho uống thuốc tẩy: Na2SO4hoặcMgSO4

Hạt bí ngô phối hợp với nước sắc hạt cau: nhân hạt bí ngô 50 - 100 g, cho chó ănvào sáng sớm lúc đói; hạt cau 60 - 80 g cho thêm nước, đun sôi, sắc đặc cho uống; saukhi uống nửa giờ cho uống thuốc tẩy: Na2SO4 hoặcMgSO4

Nước sắc hạt cau có tác dụng làm tê liệt đầu sán, hạt bí ngô có tác dụng làm têliệt thân sán Sự phối hợp này sẽ tẩy sán được triệt để hơn

Vỏ lựu khô tán vừa phải 60 g, nước sạch 1000 ml Ngâm vỏ lựu trong nướckhoảng 6 giờ, sau đó sắc còn 300 ml, lọc bỏ bã, cho uống vào buổi sáng, chia làm

2 - 3 lần, mỗi lần cách nhau 30 phút Sau khi cho uống liều cuối cùng 2 giờ thì chouống một liều thuốc tẩy Na2SO4 hoặcMgSO4.

1.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước

1.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước

* Đặc điểm bệnh ấu trùng C tenuicollis

Nguyễn Thị Kim Lan (1999) [13] đã mổ khám 589 dê nuôi ở các tỉnh TháiNguyên và Bắc Kạn, thấy tỷ lệ nhiễm ấu sán cổ nhỏ là 23,8%, cường độ nhiễm sán

là 1 - 18 ấu sán/dê Tuổi dê càng cao thì tỷ lệ nhiễm càng tăng lên và mức độ nhiễmcàng nặng hơn

Nguyễn Quốc Doanh và cs (2002) [3] đã điều tra tình hình nhiễm sán dây T.

và ấu trùng Cysticercus trên lợn tại một số địa phương thuộc tỉnh Bắc Ninh và Bắc

Kạn trong thời gian 1999 - 2000 Kết quả cho thấy: qua mổ khám 26 lợn, có 10 con

có ấu trùng C tenuicollis, không tìm thấy ấu trùng C cellulosae Kiểm tra trên 323

mẫu huyết thanh lợn tại 5 xã ở Bắc Ninh và Bắc Kạn bằng phương pháp ELISA,thấy tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán dây là 9,91%, biến động từ 6,06 - 15,49% Tỷ lệnhiễm khác nhau có liên quan tới phương thức chăn nuôi chó và lợn của người dânđịa phương

Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2012) [16] đã mổ khám 1.273 trâu, bò, lợn tại

ba huyện thành thuộc tỉnh Phú Thọ, phát hiện 294 con nhiễm ấu trùng C tenuicollis, chiếm 23,10%; trong đó tỷ lệ nhiễm ở trâu biến động từ 10,59 - 31,78%,

ở bò từ 9,82 - 28,10% và ở lợn từ 10,28 - 37,66%; cường độ nhiễm từ 1 - 56 ấu

trùng/con Theo tác giả, tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena ở chó và

tỷ lệ nhiễm ấu sán C tenuicollis ở trâu, bò, lợn là tương quan thuận rất chặt, với hệ

số tương quan R lần lượt là 0,881; 0,990 và 0,997.

* Đặc điểm bệnh sán dây T hydatigena

Kết quả kiểm tra 130 chó tại thành phố Huế của Lê Hữu Nghị và NguyễnVăn Duệ (2000) [28] cho thấy: chó bị nhiễm sán dây từ rất sớm, chó ở giai đoạn

sơ sinh đến một năm tuổi đã nhiễm với tỷ lệ cao, trong đó có loài Dipylidium caninum và T hydatigena.

Theo dõi 138 chó bị bệnh sán dây ở Hà Nội, Phạm Sỹ Lăng (2002) [ 18] đãxác định được tỷ lệ nhiễm sán dây ở chó theo giai đoạn tuổi, chó con 27 - 30 ngàytuổi đã bị nhiễm sán dây với tỷ lệ khá cao Tẩy sán dây cho 67 chó nhiễm sán dây

bằng thuốc yomesan, tên khác của niclosamid, thấy tỷ lệ sạch sán và khỏi bệnhđạt 85%.

Nguyễn Hữu Hưng và Cao Thanh Bình (2009) [8] đã kiểm tra 597 mẫuphân chó tại thành phố Cần Thơ, có 95 mẫu nhiễm sán dây (chiếm tỷ lệ 15,91%).Chó nhiễm sán dây ở mọi lứa tuổi, tỷ lệ nhiễm biến động từ 14,78 - 16,58%

Nguyễn Thị Quyên (2011) [31] đã sử dụng thuốc praziquantel liều 10 mg/kg

TT tẩy sán cho 132 chó, có 128 chó sạch sán, tỷ lệ sạch sán là 96,97%

1.2.2 Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài

1.2.2.1 Đặc điểm dịch tễ học

* Đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis

Tình hình nhiễm ấu trùng C tenuicollis trên dê và cừu được nghiên cứu

nhiều ở các nước trên thế giới

Theo Radfar M H và cs (2005) [91], trong thời gian từ tháng 4 năm 2001đến tháng 3 năm 2002, mổ khám 1.336 cừu và 1.674 dê tại lò mổ Kerman, ĐôngNam Iran, thấy 172 cừu (chiếm 12,87%) và 302 dê (chiếm 18,04%) bị nhiễm ấu

trùng C tenuicollis.

Manfredi M T và cs (2006) [74] cho biết: mổ khám 6 dê cái 2 - 4 năm tuổi

và 3 dê 50 ngày tuổi ở một trang trại tại miền Bắc Italy, phát hiện thấy dê bị nhiễm

ấu trùng C tenuicollis ở gan, phổi và màng bụng.

Sissay M M và cs (2008) [102] đã tiến hành mổ khám từ tháng 5 năm 2003đến tháng 4 năm 2005, trên 655 cừu và 632 dê ở Haramaya, Harar, Dire Dawa và

Jijiga tại Ethiopia, thấy: ở cừu, 26% nhiễm ấu trùng C ovis của sán dây T ovis, 79% nhiễm ấu trùng C tenuicollis của sán dây T hydatigena và 68% nhiễm ấu trùng Echinococcus granulosus Với dê, tỷ lệ nhiễm tương ứng lần lượt là 22%,

53% và 65%

Samuel W và Zewde G G (2010) [95] đã mổ khám 768 dê và 630 cừu,

quan sát thấy: 358 dê (46,6%) và 252 cừu (40%) nhiễm C tenuicollis Trong đó, dê

trưởng thành và cừu trưởng thành nhiễm nhiều hơn con non (51,8% so với 41,4%;47,4% so với 35,8%) Dê, cừu ở vùng núi nhiễm ấu trùng sán dây này cao hơn sovới vùng đồng bằng

Saulawa M A và cs (2011) [96] cho biết: mổ khám 261 con cừu, thấy có 34

con bị nhiễm ấu trùng C tenuicollis, chiếm 13,03% Tỷ lệ nhiễm ở cừu đực cao hơn

ở cừu cái, tỷ lệ nhiễm tăng dần theo tuổi

Wondimu A và cs (2011) [111] cho biết: tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis

trên dê nuôi tại Ethiopia là 21,01%, bệnh đã gây thiệt hại lớn về kinh tế cho ngườichăn nuôi dê

Oryan A và cs (2012) [86] đã mổ khám 1050 cừu và 950 dê ở lò mổ Shiraz,

phát hiện thấy 184 cừu (17,52%) và 523 dê (55,05%) nhiễm ấu trùng C tenuicollis Trong đó, tỷ lệ nhiễm C tenuicollis của dê, cừu đực cao hơn dê, cừu cái (P < 0,01),

tỷ lệ nhiễm ở dê cao hơn ở cừu (P < 0,01)

Mổ khám 507 dê và cừu (trong đó có 236 cừu và 271 dê) tại Maiduguri, tỷ lệ

nhiễm C tenuicollis ở cừu là 71,6%, ở dê là 71,9%, tỷ lệ nhiễm tăng theo tuổi.

Trong đó, ở nhóm dê và cừu trên 4 năm tuổi tỷ lệ nhiễm là 90% ở cừu và 81,6% ởdê; nhóm dưới 4 năm tuổi tỷ lệ nhiễm là 68,9% ở cừu và 69,8% ở dê Tỷ lệ nhiễm ởcon cái cao hơn so với con đực Bệnh tích chủ yếu thấy ở màng mỡ chài (37,3% đốivới cừu và 51,3% đối với dê), ở màng treo ruột (36,7% đối với cừu và 27,2% đối với dê),

ở bề mặt gan (14,2% đối với cừu và 9,7% đối với dê), ở xoang phúc mạc (11,8% đối vớicừu và 11,8% đối với dê) (Biu A A và Murtala S., 2012 [57])

Oguz B và Deger S (2013) [84] đã mổ khám 525 cừu và 184 dê, thấy tỷ lệ

nhiễm ấu trùng C tenuicollis là 27,9%

Endale Mekuria và cs (2013) [66] đã nghiên cứu về ảnh hưởng của các yếu tố

liên quan đến tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis trên cừu và dê Tác giả cho biết: tỷ lệ

nhiễm ấu trùng ở dê là 26,4%, ở cừu là 22,8% Ở các loài khác nhau tỷ lệ nhiễm khácnhau Tuổi ký chủ ảnh hưởng tới tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cừu và dê non tỷ lệ nhiễm ấutrùng sán dây thấp hơn ở con trưởng thành (20,9 % so với 24,8%)

Cũng theo tác giả trên, tình trạng cơ thể của vật nuôi có ảnh hưởng nhiều tới tỷ

lệ nhiễm C tenuicollis Tỷ lệ nhiễm C tenuicollis ở dê và cừu có sức khỏe yếu lần lượt

là 39,8% và 29,9%, cao hơn nhiều so với dê và cừu có sức khỏe tốt (tỷ lệ nhiễm ở cừukhỏe là 14,5%; ở dê khỏe là 22,3%) Dê, cừu có sức khỏe ở mức độ trung bình nhiễm

22,7% và 21,8% Các địa phương khác nhau tỷ lệ nhiễm C tenuicollis ở dê và cừu cũng khác nhau Tại Đông Hararge, tỷ lệ nhiễm C tenuicollis ở dê và cừu là 24,3%, ở

Errer là 20,7% và ở Shinilie là 26,9%

Nghiên cứu của Yehualashet Bayul và cs (2013) [113] tại Ethiopia trên1.152 cừu và dê cho thấy: có 25% số gan bị hủy bỏ do tổn thương, trong đó đối với

cừu có 7,81% do nhiễm C tenuicollis, 18,75% do nhiễm Fasciola; đối với cừu có 15,8% do nhiễm C tenuicollis, 2,26% do nhiễm Fasciola Như vậy, ấu trùng C tenuicollis là tác nhân gây hủy hoại gan, dẫn tới phải loại bỏ gan khi giết mổ dê ở

đất nước này

Một nghiên cứu khác tiến hành ở Ethiopia cho thấy: gan cừu và dê bị tiêu hủy

khá nhiều do có ký sinh trùng ký sinh, trong đó 0,71% là do ấu trùng C tenuicollis, 3,65% do Stilesia hepatica và 2,24% do Fasciola Tuy nhiên, không có sự khác biệt

có ý nghĩa thống kê giữa gia súc non và gia súc trưởng thành, cũng như giữa cừu và

dê (Sisay Dejene và cs., 2013) [101]

Theo Junquera P (2013) [72], bệnh do ấu trùng C tenuicollis gây ra phổ

biến trên toàn thế giới, thấy nhiều hơn ở khu vực nông thôn Tỷ lệ nhiễm ở các khu vực

thay đổi rất nhiều Bệnh có thể xảy ra do điều kiện tự nhiên thuận lợi cho sự tồn tại củatrứng sán trên đồng cỏ hoặc các hoạt động của động vật hoang dã mang bệnh Ở nhữngnơi nuôi chó thả rông và việc giết mổ gia súc không kiểm soát chặt chẽ thì tỷ lệ

nhiễm ấu trùng Cysicercus tenuicollis ở lợn rất cao.

Mohammad Mirzaei và Hadi Rezaei (2014) [77] đã nghiên cứu tỷ lệ nhiễm

ấu trùng C tenuicollis ở cừu và dê từ tháng 4 năm 2012 đến tháng 4 năm 2013 ở

Tabriz, Iran Kết quả cho thấy: mổ khám 1.400 con cừu và 1000 con dê, tỷ lệ

nhiễm ấu trùng C tenuicollis là 4,37%, trong đó 4,9% ở dê và 4% ở cừu Nhóm 12

tháng tuổi trở lên có tỷ lệ nhiễm là 4,67% ở cừu và 6,04% ở dê Nhóm dưới 12tháng tuổi có tỷ lệ nhiễm là 0,8% ở cừu và 1,56% ở dê Tỷ lệ nhiễm ấu trùng ở concái cao hơn con đực Tác giả cũng cho biết, ấu trùng ký sinh ở nhiều khí quantrong cơ thể, trong đó gan nhiễm ấu trùng với tỷ lệ cao nhất, cơ hoành nhiễm với

Kiểm tra ấu trùng C tenuicollis trên 3.199 cừu và dê mổ khám (760 con cừu

và 2.439 con dê) ở miền Bắc Ấn Độ, kết quả cho thấy: có 135/3.199 con nhiễm ấu

trùng C tenuicollis, với tỷ lệ là 4,22%, trong đó tỷ lệ nhiễm ở dê là 4,83%; ở cừu là

2,23% Hầu hết các ấu trùng được tìm thấy ở màng treo ruột, một số được thấy ởgan (Singh B B và cs., 2015) [100]

Abebe T G và cs (2015) [50] cho biết: tại miền Đông Ethiopia có 45,69% số

cừu và 72,38% số dê giết mổ nhiễm ấu trùng C tenuicollis

Perl S và cs (2015) [90] đã mổ khám 90 con cừu 2 - 3 tháng tuổi ở phía Bắc

của Israel, thấy có 36 con nhiễm ấu trùng C tenuicollis, chiếm tỷ lệ 40%.

Một nghiên cứu trên chó và cừu nuôi tại Sardinia - Italy cho thấy: tỷ lệ nhiễm

sán dây T hydatigena ở chó là 14,6%, tỷ lệ nhiễm C tenuicollis ở cừu 30 - 40 ngày

tuổi là 14,6%, tổng thiệt hại kinh tế liên quan đến bệnh lên đến gần 330.000 Euro(Scala A và cs., 2015) [99]

Sử dụng kỹ thuật sinh học phân tử, Monteiro D U và cs (2015) [78] chobiết: có 56,9% số mẫu ấu trùng thu thập từ lợn ở khu vực phía Bắc Brazil dương

tính với ấu trùng C tenuicollis

Ali K và cs., 2015 [51] đã mổ khám 2.400 dê và cừu, phát hiện thấy 4,21%

số dê, cừu nhiễm ấu trùng C tenuicollis Trong đó, tỷ lệ nhiễm ở dê là 4,33% và ở

cừu là 4,08%, tỷ lệ nhiễm ở con cái cao hơn con đực (P < 0,001), bệnh tích chủ yếuthấy ở gan của những dê, cừu bệnh

Tại Bishoftu - Ethiopia, Abattoir A A và cs (2015) [49] đã mổ khám 280

con dê và 262 con cừu để xác định tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis Kết quả có

151 dê (53,9%) và 118 cừu (45,0%) nhiễm ấu trùng C tenuicollis Tỷ lệ nhiễm ở dê

nhiều hơn cừu với P < 0,05; dê và cừu trưởng thành mắc nhiều hơn dê và cừu con:60,9% và 54,3% so với 46,3% và 34,7%

Nghiên cứu về tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis ở Ai Cập, Mosaab Adl

Eldin Omar và cs (2016) [79] cho biết: có 16% số cừu và 19% số dê được kiểm tra

nhiễm ấu trùng C tenuicollis Gia súc cái nhiễm nhiều hơn gia súc đực, gia súc trên

2 năm tuổi nhiễm nhiều hơn gia súc non

Kết quả nghiên cứu của Areej O B (2016) [52] cho thấy: Oestrus ovis, C tenuicollis và Echinococcus granulosus là các loại ký sinh trùng phổ biến tại Jeddad

(Saudi Arabia), gây ảnh hưởng tới sức khỏe nhiều loại gia súc, gây tổn thất kinh tếcho ngành công nghiệp thịt, do đó cần thiết phải kiểm tra thịt và có sự quan tâm thíchđáng của ngành y tế và thú y để có biện pháp phòng chống thích hợp

* Đặc điểm dịch tễ bệnh sán dây T hydatigena

Dalimi A và cs (2006) [64] đã kiểm tra 83 chó ở các tỉnh phía Tây của Iran, thấy