Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)

Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)Nghiên cứu đặc điểm bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn và dê tại tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống (tt)

BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN NGUYỄN THU TRANG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH DO ẤU TRÙNG CYSTICERCUS TENUICOLLIS GÂY RA Ở LỢN VÀ DÊ TẠI TỈNH THÁI NGUYÊN, ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG Ngành: Ký sinh trùng VSV học thú y Mã số: 62.64.01.04 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y Năm 2017 Công trình hoàn thành tại: TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN Người hướng dẫn khoa học: GS TS Nguyễn Thị Kim Lan TS Nguyễn Văn Quang Phản biện 1:…………………………………………… …………………………………………… Phản biện 2:…………………………………………… …………………………………………… Phản biện Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Đại học Họp tại: TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN Vào hồi giờ, ngày tháng năm 2017 Có thể tìm hiểu luận án thư viện: - Thư viện Quốc gia; - Trung tâm học liệu Đại học Thái Nguyên; - Thư viện Trường Đại học Nông Lâm DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÓ LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI Nguyễn Thu Trang, Nguyễn Thị Kim Lan, Dương Như Ngọc, Nguyễn Thị Ngân, Phạm Diệu Thùy (2015), Một số đặc điểm bệnh ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây lợn Thái Nguyên, Tạp chí Nông nghiệp PTNT, số 20, 89 - 95 Nguyễn Thu Trang, Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Tâm, Phạm Diệu Thùy (2016), Tình hình nhiễm ấu sán cổ nhỏ Cysticercus tenuicollis lợn dê Thái Nguyên mối tương quan với tỷ lệ nhiễm sán trưởng thành Taenia hydatigena chó, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XXIII, số 5, tr 57 - 65 Nguyễn Thu Trang, Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Văn Quang (2016), Một số đặc điểm bệnh sán dây Taenia hydatigena chó tỉnh Thái Nguyên, Tạp chí khoa học công nghệ - Đại học Thái Nguyên, tập 158, số 13, tr - 14 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Bệnh sán dây bệnh ký sinh trùng phổ biến đàn chó nuôi nước ta Ấu trùng số loài sán dây ký sinh gây bệnh người nhiều loài gia súc khác, gây nhiều thiệt hại cho ngành chăn nuôi tác hại lớn sức khoẻ người Một ấu trùng Cysticercus tenuicollis (C tenuicollis), ấu trùng sán dây Taenia hydatigena (T hydatigena) gây bệnh lợn, dê, cừu, trâu, bò, thỏ, ngựa, kể người Khi bị nhiễm ấu trùng, vật chủ có số triệu chứng gầy yếu dần, đau bụng, bụng căng to, ấn vào vùng bụng vật có cảm giác đau, nhiễm nặng thấy vật có tượng hoàng đản Vật chủ chết thiếu máu, nội quan bị huỷ hoại bệnh kế phát Cho đến nay, chưa có công trình nghiên cứu công bố thuốc điều trị đặc hiệu bệnh ấu trùng C tenuicollis gây Ngoài ra, việc chẩn đoán bệnh vật sống khó khăn triệu chứng bệnh không điển hình Đặc biệt, tìm ấu trùng cách xét nghiệm phân ấu trùng ký sinh bề mặt khí quan xoang bụng Những vấn đề cho thấy, việc nghiên cứu đặc điểm dịch tễ chế tạo kháng nguyên để chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis gây số loài vật nuôi, có lợn dê, từ xây dựng biện pháp phòng chống thích hợp cần thiết Xuất phát từ thực tiễn trên, thực đề tài: "Nghiên cứu đặc điểm bệnh ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây lợn dê tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống" Mục tiêu đề tài Đánh giá tình hình nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn dê tỉnh Thái Nguyên; Xác định đặc điểm gây bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn bệnh sán dây T hydatigena chó; Xây dựng biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis gây dê, lợn hiệu phù hợp với điều kiện chăn nuôi tỉnh Thái Nguyên, từ đề xuất biện pháp phòng chống bệnh đạt hiệu cao Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học Kết đề tài thông tin khoa học đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis gây lợn dê tỉnh Thái Nguyên, hiệu kháng nguyên chẩn đoán bệnh, quy trình phòng chống bệnh hiệu 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết đề tài sở khoa học để khuyến cáo người chăn nuôi áp dụng biện pháp phòng, trị bệnh ấu trùng C tenuicollis gây ra, nhằm hạn chế tỷ lệ cường độ nhiễm, hạn chế thiệt hại bệnh gây lợn, dê kể người Những đóng góp đề tài Là công trình nghiên cứu tương đối hệ thống bệnh ấu trùng C tenuicollis gây lợn dê tỉnh Thái Nguyên - Nghiên cứu đặc điểm gây bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn - ký chủ trung gian - Nghiên cứu chế tạo kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis gây phương pháp biến thái nội bì - Nghiên cứu biện pháp phòng, trị bệnh ấu trùng C tenuicollis gây cho lợn, dê có hiệu quả, khuyến cáo áp dụng rộng rãi hộ gia đình nuôi lợn, dê, chó loại vật nuôi khác Bố cục Luận án Luận án gồm 137 trang chia thành chương, phần: Mở đầu trang; chương 1: Tổng quan tài liệu 33 trang; chương 2: Đối tượng, nội dung phương pháp nghiên cứu 17 trang; chương 3: Kết nghiên cứu thảo luận 53 trang; Kết luận đề nghị trang; Tài liệu tham khảo 11 trang; Phụ lục 17 trang Luận án có 32 bảng, 18 hình, 113 tài liệu tham khảo (47 tài liệu tiếng Việt, 66 tài liệu tiếng nước ngoài, đó: 35% tài liệu từ năm 2011 - 2016) 53 ảnh mầu Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU Ấu trùng C tenuicollis có dạng bọc chứa đầy dịch Thành bên túi có đầu sán dây giống đầu sán dây T hydatigena trưởng thành Ấu trùng bám vào thành quan xoang bụng lợn, trâu, bò, dê nhiều loài thú khác, kể người (Nguyễn Thị Kỳ, 2003) [11] Ấu trùng C tenuicollis ký sinh chủ yếu màng mỡ chài: chiếm tỷ lệ 70% cừu, 68% dê (Mosaab Adl Eldin Omar cs., 2016) [78] Endale Mekuria cs (2013) [65] cho biết: tỷ lệ nhiễm ấu trùng dê 26,4%, cừu 22,8% Tỷ lệ nhiễm phụ thuộc vào loài, lứa tuổi, tình trạng thể, địa phương Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [15], vật mắc bệnh ấu trùng C tenuicollis tính thèm ăn, suy nhược thể, hoàng đản rối loạn tiêu hóa, gan sưng to, có nhiều điểm tụ huyết; có nhiều ấu trùng có kích thước khác bề mặt gan, màng treo ruột, màng mỡ chài, thấy ấu trùng hoành phổi gia súc Giai đoạn đầu vật gầy yếu dần, hoàng đản, tiếp có triệu chứng viêm màng bụng cấp tính, thường sốt cao 40 - 41oC, ấn tay vào bụng vật có phản ứng đau Cách phòng ngừa bệnh ấu trùng C tenuicollis tốt hạn chế ô nhiễm trứng sán dây T hydatigena vào nguồn thức ăn, nước uống vật nuôi Việc sử dụng thường xuyên thuốc tẩy giun, sán không định để ngăn ngừa gia súc nhiễm ấu trùng C tenuicollis Có báo cáo cho rằng, thuốc albendazole praziquantel có hiệu quả, liều lượng cao so với liều điều trị thông thường, (Junquera P., 2013) [71] Chương ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng, vật liệu, thời gian, địa điểm nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu - Lợn dê nuôi tỉnh Thái Nguyên - Bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn dê 2.1.2 Vật liệu nghiên cứu * Động vật dùng nghiên cứu: lợn, dê, chó * Các loại mẫu dùng nghiên cứu: mẫu sán dây Taenia hydatigena, mẫu ấu trùng Cysticerscus spp., mẫu máu lợn gây nhiễm ấu trùng C tenuicollis mẫu máu lợn đối chứng, quan lợn dê có ấu trùng C tenuicollis ký sinh * Dụng cụ, thiết bị hóa chất: 2.1.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu * Thời gian nghiên cứu: từ năm 2014 đến 2016 * Địa điểm nghiên cứu: - Địa điểm lấy mẫu: huyện, thành phố thuộc tỉnh Thái Nguyên gồm: huyện Đại Từ, Đồng Hỷ, Phổ Yên, Phú Lương, TP Thái Nguyên Võ Nhai - Địa điểm xét nghiệm mẫu: + Phòng thí nghiệm Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên + Bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên + Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật + Viện Công nghệ sinh học 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.2.1 Đặc điểm hình thái, phân tử ấu trùng C tenuicollis sán dây T hydatigena 2.2.1.1 Mô tả hình thái ấu trùng C tenuicollis sán dây T hydatigena 2.2.1.2 Thẩm định loài ấu trùng C tenuicollis sán dây T hydatigena phân tích phân tử 2.2.2 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn dê huyện, thành thuộc tỉnh Thái Nguyên 2.2.2.1 Tình hình nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn, dê huyện, thành thuộc tỉnh Thái Nguyên 2.2.2.2 Xác định tương quan tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena chó tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn, dê 2.2.3 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn bệnh sán dây T hydatigena chó 2.2.3.1 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn 2.2.3.2 Nghiên cứu bệnh sán dây T hydatigena gây chó gây nhiễm 2.2.4 Nghiên cứu sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis 2.2.4.1 Một số tiêu đánh giá kháng nguyên dùng để chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis gây lợn 2.2.4.2 Thử nghiệm kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn dê thực địa 2.2.5 Nghiên cứu đề xuất biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis gây lợn dê 2.2.5.1.Nghiên cứu hiệu lực số thuốc tẩy sán dây T hydatigena cho chó 2.2.5.2 Thử nghiệm thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis lợn 2.2.5.3 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh C tenuicollis cho lợn dê tỉnh Thái Nguyên 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp định danh sán dây T hydatigena ấu trùng C tenuicollis 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis 2.3.2.1 Phương pháp tính dung lượng mẫu 2.3.2.2 Phương pháp xác định tỷ lệ, cường độ nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn dê 2.3.2.3 Phương pháp xác định tình hình nhiễm sán dây chó 2.3.2.4 Phương pháp nghiên cứu tương quan tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena chó tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn, dê 2.3.3 Phương pháp nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn bệnh sán dây T hydatigena chó 2.3.3.1 Phương pháp nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn 2.3.3.2 Phương pháp nghiên cứu bệnh sán dây T hydatigena chó gây nhiễm 2.3.4 Phương pháp thu kháng nguyên sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis 2.3.4.1 Phương pháp thu thập kháng nguyên ấu trùng C tenuicollis 2.3.4.2 Phương pháp xác định độ nhạy, độ đặc hiệu phản ứng sử dụng kháng nguyên 2.3.4.3 Phương pháp nghiên cứu điều kiện bảo quản kháng nguyên 2.3.4.4 Phương pháp sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis dê lợn thực địa 2.3.5 Phương pháp nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn dê tỉnh Thái Nguyên 2.3.5.1 Phương pháp thử nghiệm thuốc tẩy sán dây T hydatigena cho chó 2.3.5.2 Phương pháp thử nghiệm thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis lợn gây nhiễm lợn thực địa 2.4 Phương pháp xử lý số liệu Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Đặc điểm hình thái phân tử ấu trùng C tenuicollis thu thập lợn, dê sán dây T hydatigena thu thập chó nuôi tỉnh Thái Nguyên 3.1.1 Mô tả hình thái ấu trùng C tenuicollis sán dây T hydatigena thu thập Thái Nguyên * Ấu trùng C tenuicollis: Ấu trùng có dạng hình túi cổ mỏng, chứa dịch trong, kích thước 13 66 mm Thành bên túi có đầu sán Đầu có đường kính 0,9 - 1,0 mm, đầu có giác bám, kích thước 0,250 - 0,300 mm Vòi có 28 - 34 móc xếp thành hàng, móc hàng đầu dài 0,150 - 0,200 mm, móc hàng thứ hai dài 0,110 - 0,150 mm * Sán dây T hydatigena: Cơ thể sán gồm nhiều đốt, chiều dài toàn thể khoảng 600 mm, rộng 2,5 - 4,5 mm Đầu hình lê, đường kính 1,37 - 1,50 mm Bốn giác bám hình bán cầu, kích thước 0,500 - 0,650 x 0,625 0,80 mm Vòi dài 0,54 - 0,87 mm, có 28 - 36 móc xếp thành hai hàng Móc hàng thứ dài 0,165 - 0,225 mm, đầu móc sắc cán thường không cong, móc hàng thứ hai dài 0,115 - 0,150 mm, đầu móc nhọn cong Cổ rõ, rộng 0,50 - 0,75 mm Các đốt chưa thành thục đốt thành thục có chiều rộng lớn chiều dài, đốt già chiều dài lớn chiều rộng Nhú sinh dục nhô bên cạnh đốt, xen kẽ không đều, nằm bên đốt 3.1.2 Thẩm định loài ấu trùng C tenuicollis sán dây T hydatigena phân tích phân tử 11 khác ý nghĩa thống kê (P > 0,05) Theo chúng tôi, khác với bệnh giun sán trưởng thành gây nên, bệnh ấu trùng C tenuicollis bệnh ấu trùng khác có đặc điểm riêng Sau nhiễm, ấu trùng C tenuicollis tồn lâu ký chủ (có thể nhiều năm), ảnh hưởng yếu tố mùa vụ đến tỷ lệ nhiễm ấu trùng dường khó xác định cách rõ ràng 3.2.2 Xác định tương quan tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena chó với tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn dê Tương quan tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena chó tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn biểu thị phương trình hồi quy tuyến tính: y = 1,045x + 2,672 Hệ số tương quan R = 0,877 Tương quan tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena chó tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis dê biểu thị phương trình hồi quy tuyến tính: y = 1,142x + 5,696 Hệ số tương quan R = 0,725 Hệ số tương quan tiến sát đến chứng tỏ tương quan chặt 3.3 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn bệnh sán dây T hydatigena chó 3.3.1 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn gây nhiễm 3.3.1.1 Triệu chứng lâm sàng chủ yếu lợn mắc bệnh ấu trùng C tenuicollis gây nhiễm Kết theo dõi cho thấy: 100% số lợn gây nhiễm có biểu lâm sàng Các biểu lâm sàng chủ yếu lợn bị bệnh ấu trùng C tenuicollis bao gồm: lợn xù lông, ăn (100%); hoàng đản (75,0% 87,50%); tiêu chảy (50,00% - 87,50%); gầy yếu (62,50% - 100%), sốt cao (12,50% - 37,50%), bụng chướng to (12,50% - 62,50%) 3.3.1.2 Sự thay đổi số tiêu huyết học lợn mắc bệnh ấu trùng C tenuicollis gây nhiễm Bảng 3.11 Sự thay đổi số số huyết học lợn gây nhiễm đối chứng (thời điểm 45 ngày sau gây nhiễm đợt) Chỉ số huyết học Lợn đối chứng Lợn gây nhiễm n =12 n =12 (x ± mx ) (x ± mx ) Mức ý nghĩa (Pα) 12 Số lượng hồng cầu (triệu/ mm3 máu) Số lượng bạch cầu (nghìn/ mm3 máu) Hàm lượng huyết sắc tố (g%) Tỷ khối hồng cầu (%) 5,19 ± 0,09 15,12 ± 0,04 10,69 ± 0,08 39,60 ± 0,07 4,48 ± 0,07 22,55 ± 0,24 9,18 ± 0,04 34,26 ± 0,09 < 0,001 < 0,001 < 0,05 < 0,05 3.3.1.3 Sự thay đổi công thức bạch cầu lợn mắc bệnh ấu trùng C tenuicollis gây nhiễm Bảng 3.12 Công thức bạch cầu lợn gây nhiễm lợn đối chứng (thời điểm 45 ngày sau gây nhiễm đợt) Lợn đối chứng Lợn gây nhiễm (x ± mx ) (x ± mx ) n =12 n =12 42,59 ± 0,15 33,86 ± 0,22 4,72 ± 0,08 10,38 ± 0,13 1,50 ± 0,07 1,40 ± 0,04 48,04 ± 0,2 50,84 ± 0,23 3,15 ± 0,04 3,52 ± 0,10 Loại bạch cầu Bạch cầu trung tính (%) Bạch cầu toan (%) Bạch cầu kiềm (%) Bạch cầu lympho (%) Bạch cầu đơn nhân lớn (%) Mức ý nghĩa (Pα) < 0,01 < 0,001 > 0,05 < 0,05 > 0,05 Kết bảng 3.11 3.12 cho thấy: Lợn nhiễm ấu trùng C tenuicollis có số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, tỷ khối hồng cầu, tỷ lệ bạch cầu kiềm bạch cầu trung tính giảm; số lượng bạch cầu, tỷ lệ bạch cầu lympho bạch cầu toan tăng so với lợn đối chứng 3.3.1.4 Tổn thương đại thể quan có ấu trùng C tenuicollis ký sinh Bảng 3.13 Tổn thương đại thể quan có ấu trùng C tenuicollis ký sinh (n = 16) Số quan Tỷ lệ có Vị trí có tổn tổn ấu trùng thương thương ký sinh (cơ quan) (%) Gan 16 100 Lách 10 62,50 Màng treo 14 87,50 Tổn thương đại thể chủ yếu Có nhiều ấu trùng bề mặt gan nhu mô gan, gan bị xuất huyết, hoại tử Có nhiều điểm xuất huyết bề mặt lách Có nhiều ấu trùng bề mặt, có Số lượng ấu trùng (*) (min - max) - 17 1-8 - 14 13 ruột Màng mỡ chài 16 100 Thành ruột 16 100 Phổi 12,50 Cơ hoành 12,50 Bàng quang 6,25 nhiều điểm tụ huyết, thủy thũng Có nhiều ấu trùng bề mặt màng mỡ chài, có nhiều điểm tụ huyết xuất huyết Có ấu trùng bám mặt thành ruột, tụ huyết xuất huyết thành ruột Phổi sưng, xuất huyết, có vô số ấu trùng thùy phổi Có ấu trùng bám hoành Có ấu trùng bám bề mặt bàng quang 25 - 43 - 15 2-7 Ghi chú: (*): Số lượng ấu trùng có bề mặt quan Bảng 3.13 cho thấy: Lợn gây nhiễm có tỷ lệ tổn thương quan khác nhau, tổn thương tập trung chủ yếu gan, màng mỡ chài thành ruột (chiếm tỷ lệ 100%) 3.3.1.5 Tổn thương vi thể số quan có ấu trùng C tenuicollis ký sinh Từ kết nghiên cứu tổn thương vi thể, nhận thấy: ấu trùng C tenuicollis gây tổn thương rõ rệt mức tế bào tổ chức gan, màng treo ruột thành ruột lợn bệnh 3.3.1.6 Sự phát triển ấu trùng C tenuicollis lợn gây nhiễm Mổ khám lợn gây nhiễm thời điểm khác thấy số lượng, vị trí ký sinh, kích thước khối lượng ấu trùng C tenuicollis khác Số lượng ấu trùng C tenuicollis biến động từ 37 - 72 ấu trùng; khối lượng biến động từ 0,16 - 4,51 gam Ngoài gan, lách, màng mỡ chài, màng treo ruột, thấy ấu trùng ký sinh hoành, bàng quang thành ruột Qua gây nhiễm thực nghiệm cho chó thấy ấu trùng thu thập thời điểm 60 ngày sau gây nhiễm có khả phát triển thành sán dây T hydatigena trưởng thành (kết gây nhiễm cho chó trình bày bảng 3.18) 14 3.3.2 Nghiên cứu bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn thực địa 3.3.2.1 Biểu lâm sàng lợn nhiễm ấu trùng C tenuicollis thực địa Theo dõi 133 lợn bị nhiễm ấu trùng C tenuicollis địa phương, thấy 37 lợn có triệu chứng lâm sàng, chiếm tỷ lệ 27,82% Lợn nhiễm ấu trùng có triệu chứng chủ yếu như: xù lông, hoàng đản, tiêu chảy, gầy yếu, bụng chướng to Các triệu chứng chiếm tỷ lệ từ 29,73 - 83,78% số lợn theo dõi 3.3.2.2 Tỷ lệ quan nội tạng có ấu trùng C tenuicollis ký sinh lợn mổ khám thực địa Tỷ lệ có ấu trùng C tenuicollis ký sinh gan, lách, màng treo ruột, màng mỡ chài, thành ruột là: 65,41%, 13,53%, 15,79%, 100%, 23,31% Không thấy ấu trùng C tenuicollis ký sinh bề mặt phổi, hoành bàng quang lợn 3.3.2.3 Tổn thương đại thể quan có ấu trùng C tenuicollis ký sinh Trong số quan có ấu trùng ký sinh, có 27,28 - 64,66% thấy tổn thương rõ rệt Tùy theo số lượng ấu trùng ký sinh, giai đoạn phát triển ấu trùng, sức đề kháng lợn… mà mức độ tổn thương khác nhau, rõ xuất ấu trùng bề mặt gan, màng treo ruột, màng mỡ chài, thành ruột tổn thương xung quanh vị trí ấu trùng bám vào quan Tổn thương lợn nhiễm ấu trùng C tenuicollis thực địa tương tự tổn thương lợn gây nhiễm mà quan sát 3.3.3 Nghiên cứu bệnh sán dây T hydatigena gây chó gây nhiễm 15 3.3.3.1 Thời gian tỷ lệ ấu trùng C tenuicollis phát triển thành sán dây trưởng thành đường tiêu hóa chó Bảng 3.18 Thời gian tỷ lệ ấu trùng C tenuicollis phát triển thành sán dây trưởng thành chó gây nhiễm Đợt gây STT nhiễm chó 1+2 4 Số lượng Số ấu sán dây trùng gây trưởng thành nhiễm (con) 72 69 55 63 55 39 68 51 39 - 72 10 7 6 - 10 Tỷ lệ ấu trùng phát triển thành sán dây trưởng thành (%) 13,89 11,59 16,36 11,11 12,73 15,38 13,24 11,76 11,11 - 16,36 Thời gian bắt đầu xuất đốt sán dây phân (ngày) 48 53 59 50 56 54 55 59 48 - 59 Trong thí nghiệm trên, thời gian phát triển sán dây T hydatigena đến thành thục có đốt sán theo phân 48 - 59 ngày Tỷ lệ ấu trùng phát triển thành sán dây trưởng thành biến động từ 11,11- 16,36% 3.3.3.2 Tỷ lệ triệu chứng lâm sàng chó bị bệnh sán dây T hydatigena Bảng 3.19 Tỷ lệ biểu lâm sàng chủ yếu chó bị bệnh sán dây T hydatigena gây nhiễm Số chó Số chó có Đợt gây gây biểu nhiễm nhiễm lâm sàng (con) (con) Tỷ lệ (%) 4 100 4 100 Các biểu chủ yếu Biểu chó Nôn mửa Run rẩy, xiêu vẹo Gầy, rụng lông Khi táo, ỉa chảy Ngứa hậu môn Phân có nhiều đốt sán dây Nôn mửa Gầy, rụng lông Số chó (con) 1 4 4 Tỷ lệ (%) 25,00 25,00 100 100 100 100 50,00 100 16 Khi táo, ỉa chảy Ngứa hậu môn Phân có nhiều đốt sán dây 4 100 100 100 Kết bảng 3.19 cho thấy: Sau đợt gây nhiễm, chó có biểu lâm sàng bệnh, tỷ lệ có biểu lâm sàng 100% Chó mắc bệnh thường thấy phân có nhiều đốt sán dây, ngứa hậu môn, táo ỉa chảy, gầy rụng lông (số chó có triệu chứng chiếm tỷ lệ 100%); số chó hay nôn mửa chiếm 25 - 50%; biểu run rẩy, xiêu vẹo thấy chó đợt gây nhiễm 3.3.3.3 Tổn thương đại thể quan tiêu hoá chó bị bệnh sán dây T hydatigena gây nhiễm Đợt gây nhiễm 1: mổ khám chó gây nhiễm sán dây Taenia hydatygena thấy chó có tổn thương, chiếm tỷ lệ 100% Các tổn thương chủ yếu là: ruột non viêm cata, có nhiều nốt loét nhỏ (75%); xung quanh chỗ có đầu sán dây bám vào niêm mạc ruột sùi lên có nhiều điểm xuất huyết (100%); có chó niêm mạc ruột phủ chất nhầy màu vàng nâu (25%) Đợt gây nhiễm 2: 100% chó có tổn thương đại thể, tổn thương tương tự chó đợt gây nhiễm 3.4 Nghiên cứu sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis 3.4.1 Một số tiêu đánh giá kháng nguyên dùng để chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis gây lợn 3.4.1.1 Xác định độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng sử dụng kháng nguyên Bảng 3.21 Đánh giá độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng với kháng nguyên lợn gây nhiễm đối chứng Kết Xét nghiệm (+) Xét nghiệm (-) Bị nhiễm ấu trùng C Không bị nhiễm ấu tenuicollis trùng C tenuicollis 15 (a) (b) (c) 16 (d) Tổng số 15 17 17 Tổng số 16 (a + b) 16 (c + d) 15 15 + Độ nhạy phản ứng (Se) = 16 + 16 Độ đặc hiệu phản ứng (Sp) = 32 (a + b + c + d) x 100% = 93,75% x 100% = 100% Bảng 3.21 cho thấy: Thử nghiệm kháng nguyên lợn gây nhiễm đối chứng, độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng 93,75% 100% 3.4.1.2 Xác định nhiệt độ thời gian bảo quản kháng nguyên thích hợp Bảng 3.22 Ảnh hưởng nhiệt độ - 20oC đến độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng theo thời gian bảo quản kháng nguyên Thời gian (tháng) (Sử dụng kháng nguyên bảo quản -20oC) Độ nhạy (%) 93,75 93,75 93,75 93,75 93,75 93,75 Độ đặc hiệu (%) 100 100 100 100 100 100 Bảng 3.23 Ảnh hưởng nhiệt độ 4oC đến độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng với kháng nguyên theo thời gian bảo quản Thời gian (tháng) (Sử dụng kháng nguyên bảo quản 4oC) Độ nhạy (%) Độ đặc hiệu (%) 93,75 93,75 93,75 87,50 87,50 81,25 100 100 100 100 100 100 Kết bảng 3.24 3.25 cho thấy: Bảo quản kháng nguyên nhiệt độ - 20oC tháng cho độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng không thay đổi Bảo quản kháng nguyên 4oC có độ đặc hiệu không thay đổi, song độ nhạy có chiều hướng giảm sau tháng bảo quản 18 3.4.2 Thử nghiệm kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn dê thực địa Bảng 3.25 Đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu phản ứng sử dụng kháng nguyên chẩn đoán bệnh C tenuicollis cho lợn thực địa Xét nghiệm Xét nghiệm (+) Xét nghiệm (-) Tổng số Nhiễm ấu trùng C tenuicollis (con) Không nhiễm ấu trùng C tenuicollis (con) Tổng số (con) 12 (a) (c) 18 (b) 43 (d) 44 13 (a + b) 49 (c + d) 62 (a+b+c+d) Độ nhạy phản ứng (Se) = 12 x 100 = 92,31% 12 + 43 x 100 = 87,76% + 43 Bảng 3.27 Đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu phản ứng sử dụng Độ đặc hiệu phản ứng (Sp ) = kháng nguyên chẩn đoán bệnh C tenuicollis cho dê thực địa Nhiễm ấu trùng C Không nhiễm ấu trùng Tổng số tenuicollis (con) C tenuicollis (con) Xét nghiệm (+) (a) (c) 14 Xét nghiệm (-) (b) 35 (d) 36 Tổng số (a+b) 41 (c+d) 50 (a+b+c+d) Độ nhạy phản ứng (Se) = x 100 = 88,89% 8+1 Xét nghiệm Độ đặc hiệu phản ứng (Sp ) = 35 + 35 x 100 = 85,37% Kết bảng 3.25 3.27 cho thấy: Phản ứng sử dụng kháng nguyên có độ nhạy 92,31%, độ đặc hiệu 87,76% lợn thực địa; độ nhạy 88,89%, độ đặc hiệu 85,37% dê thực địa 19 3.5 Nghiên cứu đề xuất biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis gây 3.5.1 Nghiên cứu hiệu lực số thuốc tẩy sán dây T hydatigena cho chó 3.5.1.1 Xác định hiệu lực thuốc tẩy sán dây chó gây nhiễm Bảng 3.28 Hiệu lực thuốc tẩy sán dây chó gây nhiễm Mổ khám sau tẩy 18 - 20 ngày Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày -15 (+)/(-) + + + + Niclosamid (100 mg + /kg TT) + + + + + + + Praziquantel (10 mg + + + + /kg TT) + + + Ghi chú: - Chó tẩy sán dây có cường độ nhiễm từ 12 - 27 đốt sán/ lần thải phân - Xét nghiệm phân (+): có đốt sán dây phân, (-): đốt sán dây phân - Mổ khám (+): có sán dây ruột, (-): sán dây ruột Tên thuốc Số TT Lô & liều lượng chó Kết xét nghiệm phân sau dùng thuốc (+)/(-) Kết bảng 3.28 cho thấy: Sau dùng thuốc, kiểm tra phân chó lô thí nghiệm thấy: ngày chó thải đốt sán dây; sang đến ngày thứ có chó không đốt sán phân; ngày thứ 4, lô chó đốt sán phân, từ ngày - 15 không chó có đốt sán phân Mổ khám chó sau dùng thuốc tẩy 18 - 20 ngày, thấy không chó sán dây ký sinh ruột non, loại thuốc có hiệu lực tẩy sán dây T hydatigena đạt 100% 20 3.5.1.2 Xác định hiệu lực thuốc tẩy sán dây T hydatigena cho chó thực địa Bảng 3.29 Hiệu lực thuốc tẩy sán dây cho chó thực địa Địa phương (huyện) Phú Lương Đồng Hỷ Tính chung Trước dùng thuốc Sau dùng thuốc 15 ngày Số đốt sán/ Số đốt sán/ Số chó Số chó Số chó Hiệu lần thải lần thải sán nhiễm nhiễm lực phân phân dây (con) (con) (%) (min - max) (min - max) (con) Tên thuốc liều lượng Niclosamid (100 mg/kg TT) 20 - 17 3-8 18 90,00 20 11 - 21 0 20 100 20 14 - 22 11 19 95,00 20 10 - 18 19 95,00 Niclosamid (100 mg/kg TT) 40 - 22 3 - 11 37 92,50 Praziquantel (10 mg/kg TT) 40 10 - 21 39 97,50 Praziquantel (10 mg/kg TT) Niclosamid (100 mg/kg TT) Praziquantel (10 mg/kg TT) Từ kết bảng 3.29, so sánh hiệu lực hai loại thuốc, nhận thấy thuốc praziquantel sử dụng tẩy sán dây T hydatigena cho chó hai địa phương đạt hiệu lực 97,50%, cao so với thuốc niclosamid (hiệu lực đạt 92,50%) Từ kết này, khuyến cáo hộ nuôi chó địa phương rằng: sử dụng hai loại thuốc để tẩy sán dây cho chó, nhiên, có điều kiện nên lựa chọn thuốc praziquantel để tẩy sán dây T hydatigena cho chó 3.5.2 Thử nghiệm thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis lợn 3.5.2.1 Xác định hiệu lực thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis lợn gây nhiễm Bảng 3.30 Kết gây nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn Lô thí nghiệm Số lợn gây nhiễm Số lợn (+) Tỷ lệ với kháng (+) nguyên (%) (con) Số lợn mổ khám ngẫu nhiên (con) Số lợn mổ khám có ấu trùng (con) Số ấu trùng/lợn 21 Tính chung 10 10 20 10 10 20 100 100 100 2 2 49 57 53 66 49 - 66 Bảng 3.31 Hiệu lực thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis lợn gây nhiễm Thuốc sử dụng Albendazol (20 mg/kg TT/ ngày x ngày) Praziquantel (30 mg/kg TT/ ngày x ngày) Tính chung Số lợn dùng thuốc (con) Kết mổ khám sau dùng thuốc 20 ngày Số lợn ấu trùng Số lợn ấu trùng Tỷ lệ Tỷ lệ chết hoàn toàn chưa chết hoàn (%) (%) (con) toàn (con) 75,00 25,00 87,50 12,5 16 13 81,25 18,75 Kết bảng 3.30 3.31 cho thấy: gây nhiễm ấu trùng C tenuicollis thành công cho 20 lợn Mổ khám sau dùng thuốc cho lợn 20 ngày cho kết quả: hiệu lực diệt 100% ấu trùng thuốc albendazol 75,00%, thuốc praziquantel 87,50% 3.5.2.2 Xác định hiệu lực thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis cho lợn thực địa Bảng 3.32 Hiệu lực thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis cho lợn thực địa Thuốc sử dụng Albendazol (20 mg/kg TT/ ngày x ngày) Praziquantel (30 mg/kg TT/ ngày x ngày) Tính chung Số lợn (+) dùng thuốc (con) (*) Kết mổ khám sau dùng thuốc 20 ngày Số lợn mổ Số lợn ấu trùng Tỷ lệ khám chết hoàn toàn (%) (con) (con) 25 10 80,00 25 10 90,00 50 20 17 85,00 Ghi chú: (*): lợn (+) với kháng nguyên ấu trùng C tenuicollis Từ kết thử nghiệm hai loại thuốc diệt ấu trùng C tenuicollis lợn gây nhiễm lợn thực địa, thấy: sử dụng 22 hai loại thuốc với liều lượng liệu trình để diệt ấu trùng C tenuicollis cho lợn, thuốc praziquantel thuốc có tác dụng diệt ấu trùng C tenuicollis tốt so với thuốc albendazol 3.5.3 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis cho lợn dê tỉnh Thái Nguyên * Đối với chăn nuôi chó: Tẩy sán dây cho chó Hạn chế nuôi chó thả rông Vệ sinh chuồng, cũi nuôi chó sẽ, khô ráo; định kỳ cọ rửa phun chất sát trùng chuồng cũi, môi trường xung quanh Không cho chó tiếp xúc ăn ấu trùng sán dây giết mổ lợn, trâu, bò, dê Vệ sinh thức ăn nước uống, tăng cường chăm sóc, nuôi dưỡng chó để tăng sức đề kháng cho chó * Đối với chăn nuôi lợn dê: Khi chưa có kháng nguyên để chẩn đoán, người chăn nuôi dựa vào lâm sàng tình trạng lợn, dê đàn mổ khám có ấu trùng C tenuicollis ký sinh để sử dụng thuốc praziquantel albendazol điều trị Khi có kháng nguyên định kỳ dùng kháng nguyên tiêm nội bì vành tai lợn dê để phát dương tính, dùng thuốc điều trị Vệ sinh chuồng trại, vệ sinh thức ăn xanh cho lợn dê Không nuôi lợn thả rông để hạn chế lợn nuốt đốt trứng sán dây chó thải Tăng cường chăm sóc nuôi dưỡng để nâng cao sức đề kháng gia súc, hạn chế tỷ lệ nhiễm bệnh Thực giết mổ lợn, dê sở có kiểm soát quan thú y, xử lý tiêu hủy ấu trùng sán dây mổ khám phát quan xoang bụng 23 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Từ kết nghiên cứu đề tài, có số kết luận sau: 1.1 Đặc điểm hình thái phân tử ấu trùng C tenuicollis sán dây T hydatigena Qua nghiên cứu hình thái phân tích phân tử xác định xác ấu trùng sán dây thu thập thuộc loài T hydatigena 1.2 Đặc điểm dịch tễ bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn dê - Lợn nhiễm ấu trùng C tenuicollis với tỷ lệ 20,25%; biến động từ 15,38% - 23,29%, cường độ nhiễm 18,54 ± 0,58 ấu trùng/lợn Dê nhiễm ấu trùng C tenuicollis với tỷ lệ 18,05%; biến động từ 12,07% - 21,84%, cường độ nhiễm 12,72 ± 0,74 ấu trùng/dê - Tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis tăng dần theo lứa tuổi lợn dê - Tính biệt mùa vụ ảnh hưởng không rõ rệt đến tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis - Chó nuôi huyện, thành phố tỉnh Thái Nguyên nhiễm sán dây T hydatigena với tỷ lệ 24,49%, biến động từ 17,65% - 27,82% - Tương quan tỷ lệ nhiễm sán dây T hydatigena chó tỷ lệ nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn dê tương quan thuận chặt với hệ số R 0,877 0,725 1.3 Bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn bệnh sán dây T hydatigena chó 1.3.1 Bệnh C tenuicollis lợn - Lợn gây nhiễm ấu trùng C tenuicollis xù lông, ăn kém; hoàng đản; tiêu chảy; gầy yếu; sốt cao, bụng chướng to (tỷ lệ có triệu chứng biến động từ 12,50 - 100%) - Lợn nhiễm ấu trùng C tenuicollis có số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, tỷ khối hồng cầu, tỷ lệ bạch cầu kiềm bạch cầu trung tính giảm; số lượng bạch cầu, tỷ lệ bạch cầu lympho bạch cầu toan tăng so với lợn đối chứng - Ấu trùng ký sinh gây tổn thương đại thể chủ yếu gan, màng mỡ 24 chài thành ruột lợn gây nhiễm - Tổ chức gan sung huyết, xuất huyết nặng, tế bào gan bị thoái hóa; tổ chức thành ruột bị thoái hóa, long tróc, xâm nhập tế bào viêm… tổ thương vi thể ấu trùng gây - Thời gian ấu trùng phát triển đến thành thục 60 ngày sau gây nhiễm, ấu trùng tập trung gan, màng mỡ chài, thành ruột màng treo ruột; khối lượng đường kính ấu trùng C tenuicollis biến động từ 0,16 - 4,51 gam - 52 mm theo thời gian sau gây nhiễm - Triệu chứng lâm sàng, tổn thương ấu trùng C tenuicollis lợn thực địa tương tự lợn mắc bệnh gây nhiễm 1.3.2 Bệnh sán dây T hydatigena gây chó gây nhiễm - Thời gian ấu trùng C tenuicollis phát triển thành sán dây T hydatigena trưởng thành chó gây nhiễm 48 - 59 ngày; có 11,11% 16,36% số ấu trùng C tenuicollis sử dụng gây nhiễm phát triển thành sán dây trưởng thành - Chó gây nhiễm sán dây T hydatigena gầy yếu, rụng lông, ngứa hậu môn, phân có đốt sán, rối loạn tiêu hóa nôn mửa; chó có tổn thương viêm cata, loét xuất huyết ruột non 1.4 Chế tạo thử nghiệm kháng nguyên từ ấu trùng C tenuicollis để chẩn đoán bệnh cho lợn dê - Thử nghiệm kháng nguyên lợn gây nhiễm đối chứng, độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng 93,75% 100% - Bảo quản kháng nguyên nhiệt độ - 20 oC tháng cho độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng không thay đổi Bảo quản kháng nguyên 4oC có độ đặc hiệu không thay đổi, song độ nhạy có chiều hướng giảm sau tháng bảo quản - Độ nhạy phản ứng đạt 92,31%, độ đặc hiệu 87,76% lợn thực địa Độ nhạy phản ứng đạt 88,89%, độ đặc hiệu 85,37% dê thực địa 1.5 Biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis cho lợn dê tỉnh Thái Nguyên Tẩy sán dây cho chó thuốc niclosamid praziquantel hiệu 25 lực tẩy đạt 92,50% 97,50% Cả loại thuốc an toàn, không gây phản ứng phụ - Thuốc albendazol liều 20 mg/kg TT/ngày, cho uống ngày liên tục; thuốc praziquantel liều 30 mg/kg TT/ngày, cho uống ngày liên tục có tác dụng diệt ấu trùng C tenuicollis tốt an toàn với lợn - Kết hợp biện pháp phòng chống bệnh sán dây T hydatigena cho chó, biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn, dê áp dụng số biện pháp khác để đạt kết phòng bệnh tốt cho chó, dê, lợn loại gia súc khác Đề nghị - Sử dụng rộng rãi hai loại thuốc albendazol praziquantel với liều lượng liệu trình để điều trị bệnh ấu trùng C tenuicollis cho lợn dê địa phương - Tiếp tục có nghiên cứu chế tạo kháng nguyên tái tổ hợp ấu trùng C tenuicollis để chủ động nguồn kháng nguyên chẩn đoán bệnh cho gia súc ... cần thiết Xuất phát từ thực tiễn trên, thực đề tài: "Nghiên cứu đặc điểm bệnh ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây lợn dê tỉnh Thái Nguyên, đề xuất biện pháp phòng chống" Mục tiêu đề tài Đánh... nhiễm ấu trùng C tenuicollis lợn dê tỉnh Thái Nguyên; Xác định đặc điểm gây bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn bệnh sán dây T hydatigena chó; Xây dựng biện pháp phòng chống bệnh ấu trùng C tenuicollis. .. thống bệnh ấu trùng C tenuicollis gây lợn dê tỉnh Thái Nguyên - Nghiên cứu đặc điểm gây bệnh ấu trùng C tenuicollis lợn - ký chủ trung gian - Nghiên cứu chế tạo kháng nguyên chẩn đoán bệnh ấu trùng