Lạc, đỗ, ngô Phương pháp xác định dư lượng thuốc trừ nấm bệnh benomylLạc, đỗ, ngô Phương pháp xác định dư lượng thuốc trừ nấm bệnh benomylLạc, đỗ, ngô Phương pháp xác định dư lượng thuốc trừ nấm bệnh benomylLạc, đỗ, ngô Phương pháp xác định dư lượng thuốc trừ nấm bệnh benomylLạc, đỗ, ngô Phương pháp xác định dư lượng thuốc trừ nấm bệnh benomyl
tiêu chuẩn bảo vệ thực vật 10 TCN 293 - 97 Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 293-97 Lạc, đỗ, ngô phơng pháp xác định d lợng thuốc trừ nấm bệnh benomyl Peanut, soyabean, corn Method for determination residue of Benomyl Tiêu chuẩn quy định phơng pháp xác định d lợng thuốc trừ nấm bệnh Benomyl lạc, đỗ, ngô Lấy mẫu bảo quản mẫu: Theo Qui định ban hành kèm theo Quyết định 150/NN-BVTV-QĐ ngày 10/3/1995 Bộ Nông nghiệp CNTP Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn Phơng pháp xác định: 2.1 Qui định chung: 2.1.1 Thuốc thử dùng phép phân tích phân tích 2.1.2 phải loại tinh khiết Nớc cất phải nớc cất theo TCVN 2117-77 2.1.3 Tất phép xác định phải tiến hành song song với hai lợng cân mẫu thử 2.1.4 D lợng thuốc trừ nấm bệnh Benomyl kết d lợng trung bình lợng cân mẫu thử 2.2 Xác định d lợng thuốc Benomyl: 2.2.1 Nguyên tắc: D lợng Benomyl đợc chiết khỏi mẫu dung môi etyl axetat sau đợc thuỷ phân chuyển thành Carbendazim dung dịch axit clohydric Carbendazim đợc phân tích sắc ký lỏng cao áp pha đảo Kết phân tích đợc tính dựa so sánh tỷ số số đo diện tích chiều cao píc mẫu thử píc mẫu chuẩn 2.2.2 Dụng cụ, hoá chất thiết bị: - Bình cầu dung tích 250ml; - Bình định mức dung tích 10ml, 5ml; - Bình tam giác dung tích 250ml; 245 10 TCN 293 - 97 - tiêu chuẩn bảo vệ thực vật Pipet 1ml; Cốc dung tích 250ml; Phễu chiết dung tích 500ml; Microxilanh 10 àl; Chất chuẩn Benomyl biết trớc hàm lợng; Natrisunphat khan (Hoạt hoá 500oC 6-8 giờ, để nguội, cho vào bình đậy kín bảo quản bình hút ẩm); Dung dịch axit clohydric 2N; Dung dịch hydroxit natri 1N,10N; Giấy lọc; Etyl axetat; Clorofom; Pha động: hỗn hợp metanol: nớc: amoniăc tỷ lệ 60:40:0,6 theo thể tích; Cốc nghiền dung tích lít; Máy nghiền (kiểu máy xay sinh tố); Máy lắc; Hệ thống chng cất quay chân không; Cân phân tích (độ xác 0,01mg); Cột sắc ký lỏng cao áp pha đảo C 18 (4mm x 150mm); Máy sắc ký lỏng cao áp với detector tử ngoại; Máy ghi tích phân 2.2.3 Chuẩn bị dung dịch mẫu chuẩn: Cân xác khoảng 10mg chất chuẩn Benomyl xác tới 0,01mg vào bình định mức 10ml Định mức tới vạch n-hexane, đợc dung dịch gốc Bằng phơng pháp pha loãng liên tục từ dung dịch có nồng độ thu đợc ta đợc dãy dung dịch chuẩn Dung dịch Benomyl chuẩn đợc dẫn xuất hoá tơng tự nh trình áp dụng cho mẫu thử mục 2.2.4.2 2.2.4 Chuẩn bị dung dịch mẫu thử: 2.2.4.1 Chiết suất mẫu thử: Nghiền mẫu máy nghiền Cân khoảng 20g mẫu lạc (hoặc đỗ ngô) (mm) xác tới 0,1g vào bình tam giác 250ml, thêm vào 10g natri sunphat khan 100ml etyl axetat, sau để yên 5-10 phút Thêm 2ml dung dịch hydroxit natri 1N Lắc máy lắc 30 phút Lọc qua giấy lọc băng xanh Tráng kỹ 75ml etyl axêtat 2.2.4.2 Dẫn xuất mẫu thử: 246 tiêu chuẩn bảo vệ thực vật 10 TCN 293 - 97 Chiết dịch lọc hai lần lần với 50ml axit clohydric 2N Thu lấy pha nớc, chiết tiếp với 100ml clorofom Loại bỏ pha clorofom Dùng dung dịch hydroxit natri 10N điều chỉnh pha nớc đến pH=10 Sau chiết hai lần lần100ml clorofom Chuyển lớp clorofom vào bình cầu 250ml cô cạn máy chng cất quay chân không 40 oC Thêm vào xác 5ml pha động (V1) 2.2.5 Điều kiện phân tích: Pha động: metanol: nớc: amoniăc tỷ lệ 60:40:0,6 theo thể tích Tốc độ dòng: 1-ml/phút Lợng mẫu bơm: 20 àl 2.2.6 Tiến hành phân tích máy: Bơm dung dịch chuẩn (VC) dung dịch mẫu (Vm), lặp lại lần 2.2.7 Tính toán kết quả: D lợng thuốc trừ nấm bệnh Benomyl có mẫu đợc tính theo công thức: X (mg / kg ) = A m x Vc x C c x V1 x P A c x Vm x m m x R Trong đó: Am: Số đo trung bình diện tích chiều cao píc mẫu thử AC: Số đo trung bình diện tích chiều cao píc mẫu chuẩn VC: Thể tích dung dịch mẫu chuẩn bơm vào máy, àl Vm: Thể tích dung dịch mẫu thử bơm vào máy, àl CC: Nồng độ dung dịch chuẩn bơm vào máy, àg/ml mm: Khối lợng mẫu thử, g V1: Thể tích cuối dung dịch mẫu thử, ml P: Độ tinh khiết chất chuẩn, % R: Hiệu suất thu hồi phơng pháp, % 2.2.8 Hiệu suất thu hồi giới hạn phát phơng pháp: - Hiệu suất thu hồi phơng pháp: 70-110% - Giới hạn phát phơng pháp: 0,002mg/kg 247 ... dịch mẫu chuẩn: Cân xác khoảng 10mg chất chuẩn Benomyl xác tới 0,01mg vào bình định mức 10ml Định mức tới vạch n-hexane, đợc dung dịch gốc Bằng phơng pháp pha loãng liên tục từ dung dịch có nồng... Bơm dung dịch chuẩn (VC) dung dịch mẫu (Vm), lặp lại lần 2.2.7 Tính toán kết quả: D lợng thuốc trừ nấm bệnh Benomyl có mẫu đợc tính theo công thức: X (mg / kg ) = A m x Vc x C c x V1 x P A c x Vm... chuẩn, % R: Hiệu suất thu hồi phơng pháp, % 2.2.8 Hiệu suất thu hồi giới hạn phát phơng pháp: - Hiệu suất thu hồi phơng pháp: 70-110% - Giới hạn phát phơng pháp: 0,002mg/kg 247