Khảo sát và tối ưu các điều kiện môi trường nuôi cấy IN VITRO cây sầu riêng (durio zibethinus murray)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP.HCM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài: KHẢO SÁT VÀ TỐI ƯU CÁC ĐIỀU KIỆN MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY IN VITRO CÂY SẦU RIÊNG (DURIO ZIBETHINUS MURRAY) KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC CHUYÊN NGÀNH: NÔNG NGHIỆP-DƯỢC-MÔI TRƯỜNG CBHD: TS Đỗ Thường Kiệt ThS Nguyễn Trần Đông Phương SVTH: Huỳnh Lê Anh Chí MSSV: 1153010083 Khóa: 2011 – 2015 GVHD ký xác nhận: Đỗ Thường Kiệt Nguyễn Trần Đông Phương Tp Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2015 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn ban Giám Hiệu, ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học trường Đại học Mở Tp.HCM tạo điều kiện cho em học tập rèn luyện môi trường tốt Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới tất quý thầy cô khoa Công nghệ sinh học tận tình giảng dạy trang bị cho em kiến thức cần thiết suốt thời gian học đại học Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Đỗ Thường Kiệt không ngại khoảng cách địa lý Bình Dương – Tp Hồ Chí Minh xếp thời gian, công việc để trực tiếp hướng dẫn truyền đạt cho em kinh nghiệm quý báu thời gian thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Nguyễn Trần Đông Phương xếp thời gian công việc để bên cạnh trực tiếp hướng dẫn truyền đạt cho em kiến thức, kinh nghiệm quý báu học sống ý nghĩa suốt thời gian học đại học Chân thành cảm ơn thành viên phòng thí nghiệm Công nghệ tế bào thực vật bên cạnh, nhiệt tình giúp đỡ chia vui buồn, khó khăn suốt thời gian thực đề tài Cuối cùng, xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình Cảm ơn tình cảm mẹ, anh em dành cho con, ủng hộ động viên gia đình giúp vững bước đường học tập đường đời TP Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2015 Huỳnh Lê Anh Chí i CÁC CHỮ VIẾT TẮT MS : Murashige & Skoog BA : N6 – benzyladenin NAA : – Naphthaleneacetic acid PVP : Polyvinylpyrrolidone WSSP : White Spot Syndrome Virus cm : Centimet mm : milimet ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng I.1: Thành phần dinh dưỡng có 100 g cơm Sầu Riêng Bảng II.1: Bảng thể cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng nhiệt độ đến tạo chồi in vitro Sầu Riêng 22 Bảng II.2: Bảng thể cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng độ thoáng khí đến tạo chồi in vitro Sầu Riêng 23 Bảng II.3: Bảng thể cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo chồi in vitro Sầu Riêng 24 Bảng II.4: Bảng thể cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng casein hydrolysate đến tạo chồi in vitro Sầu Riêng 25 Bảng II.5: Bảng thể cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng oligosacharide đến tạo chồi in vitro Sầu Riêng 26 Bảng II.6: Bảng thể cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng PVP đến sinh trưởng chồi Sầu Riêng in vitro 26 Bảng II.7: Bảng thể cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo rễ in vitro Sầu Riêng 27 Bảng III.1: Số chồi, chiều cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần điều kiện nhiệt độ khác 30 Bảng III.2: Số chồi, chiều cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần điều kiện nhiệt độ khác 32 Bảng III.3: Số chồi, chiều cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần điều kiện thoáng khí khác 34 Bảng III.4: Số chồi, chiều cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l bổ sung nồng độ than hoạt tính khác 36 iii Bảng III.5: Số chồi, chiều cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l bổ sung casein hydrolysate nồng độ khác 38 Bảng III.6: Số chồi, chiều cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l bổ sung oligosacharide nồng độ khác 40 Bảng III.7: Đặc điểm chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần môi trường MS bổ sung PVP nồng độ khác 42 Bảng III.8: Tỷ lệ tạo rễ, số rễ, chiều dài rễ chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung NAA mg/l bổ sung than hoạt tính nồng độ khác 44 iv DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1: Cây Sầu Riêng Hình I.1: Auxin 14 Hình I.2: Cytokinin 15 Hình I.3: Casein hydrolysate [29] 18 Hình II.1: Phôi hột Sầu Riêng cấy vào môi trường 22 Hình II.2: Hệ thống thùng xốp để điều chỉnh nhiệt độ 22 Hình II.3: Sơ đồ mô tả thùng xốp để điều chỉnh nhiệt độ 22 Hình II.3: Đóng nắp chai nút gòn (A), bịch nilon (B) nút cao su (C) dùng thí nghiệm khảo sát độ thoáng khí 24 Hình II.4: Quy trình nhuộm hai màu 28 Hình III.1: Chồi bất định (dấu mũi tên) phát triển từ phôi Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l nhiệt độ 25 ± 0C (A), 27 ± 0C (B), 32 ± 0C (C) 37 ± 0C (D) 31 Hình III.2: Chồi bất định (dấu mũi tên) phát triển từ phôi Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l nhiệt độ 25 ± 0C (A), 27 ± 0C (B), 32 ± 0C (C) 37 ± 0C (D) 33 Hình III.3: Chồi bất định (dấu mũi tên) phát triển từ phôi Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l điều kiện thoáng khí 35 Hình III.4: Chồi bất định (dấu mũi tên) phát triển từ phôi Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l (DC) bổ sung nồng độ than hoạt tính 0,5 g/l (A), g/l (B), 1,5 g/l (C) g/l (D) 37 Hình III.5: Chồi bất định (dấu mũi tên) phát triển từ phôi Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l (DC) bổ sung nồng v độ casein hydrolysate 50 mg/l (A), 100 mg/l (B), 150 mg/l (C) 200 mg/l (D) 39 Hình III.6: Chồi bất định (dấu mũi tên) phát triển từ phôi Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung BA mg/l (DC) bổ sung nồng độ oligosacharide 50 mg/l (A), 100 mg/l (B), 150 mg/l (C) 200 mg/l (D) 41 Hình III.7: Chồi Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS (A)và môi trường MS có bổ sung PVP (B) 43 Hình III.8: Rễ Sầu Riêng nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung NAA mg/l (DC) bổ sung nồng độ than hoạt tính 0,5 g/l (A), g/l (B), 1,5 g/l (C), g/l (D), 2,5 g/l (E) g/l (F) 45 Hình III.9: Sơ khởi rễ rễ nhỏ chồi Sầu Riêng (dấu mũi tên) nuôi cấy tuần môi trường MS có bổ sung NAA mg/l (DC) bổ sung nồng độ than hoạt tính 0,5 g/l (A), g/l (B), 1,5 g/l (C), g/l (D), 2,5 g/l (E) g/l (F) 46 vi MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i CÁC CHỮ VIẾT TẮT ii DANH MỤC CÁC BẢNG iii DANH MỤC CÁC HÌNH v MỤC LỤC vii ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN 1: TỔNG QUAN I TỔNG QUAN TÀI LIỆU I.1 Giới thiệu Sầu Riêng I.1.1 Họ Malvaceae [16] [45] I.1.2 Vị trí phân loại [21] [42] I.1.3 Phân bố, sinh thái, sinh trưởng phát triển [21] [47] I.1.4 Thành phần hóa học [25] [46] I.2 Các nghiên cứu nước I.2.1 Trong nước [15] [17] [22] [23] [27] [44] I.2.2 Ngoài nước [35] [37] [38] [41] [42] 10 I.3 Phát sinh hình thái [13] [20] [26] [32] [34] 10 I.3.1 Phát sinh hình thái chồi bất định 10 I.3.2 Phát sinh hình thái rễ bất định [4] [13] [19] 11 I.4 Nuôi cấy mô thực vật 12 I.4.1 Giới thiệu nuôi cấy mô thực vật [2] 12 I.4.2 Vai trò nuôi cấy mô thực vật [12] 13 I.5 Vai trò chất điều hòa sinh trưởng thực vật [19] [26] [36] 14 I.5.1 Auxin 14 I.5.2 Cytokinin [31] [39] 15 I.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình nuôi cấy mô [26] 16 I.6.1 Ánh sáng 16 vii I.6.2 Nhiệt độ [40] 16 I.6.3 pH 16 I.6.4 Sự thoáng khí [14] [30] 17 I.6.5 Muối khoáng 17 I.6.6 Nguồn carbon 17 I.6.7 Vitamin 17 I.6.8 Agar [12] 17 I.6.9 Than hoạt tính [10] [12] 18 I.6.10 Casein hydrolysate [5] [29] 18 I.6.11 Oligosacharide [43] 19 I.6.12 Polyvinylpyrrolidone (PVP) [9] [18] 19 PHẦN 2: VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP 20 II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY 21 II.1 Địa điểm thời gian thực 21 II.2 Vật liệu thực vật 21 II.3 Phương pháp nghiên cứu 21 II.3.1 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 21 II.3.2 Khảo sát ảnh hưởng độ thoáng khí đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 23 II.3.3 Khảo sát ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 24 II.3.4 Khảo sát ảnh hưởng casein hydrolysate đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 25 II.3.5 Khảo sát ảnh hưởng oligosacharide đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 25 II.3.6 Khảo sát ảnh hưởng polyvinylpyrrolidone (PVP) đến sinh trưởng chồi Sầu Riêng in vitro 26 II.3.7 vitro Khảo sát ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo rễ chồi Sầu Riêng in 27 II.3.8 Tính tỷ lệ nảy mầm nhuộm màu 28 II.3.9 Xử lý thống kê 28 viii PHẦN 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .29 III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 III.1 Kết 30 III.1.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 30 III.1.2 Ảnh hưởng độ thoáng khí đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 34 III.1.3 Ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 36 III.1.4 Ảnh hưởng casein hydrolysate đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 38 III.1.5 Ảnh hưởng oligosacharide đến tạo chồi bất định từ nuôi cấy phôi hột Sầu Riêng 40 III.1.6 Ảnh hưởng polyvinylpyrrolidone (PVP) đến sinh trưởng chồi Sầu Riêng in vitro 42 III.1.7 Ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo rễ chồi Sầu Riêng in vitro 43 III.2 Thảo luận [1] [3] [6] [8] [11] [22] [24] [26] [33] 47 PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50 IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 51 IV.1 Kết luận 51 IV.2 Đề nghị 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 Tài liệu nước 53 Tài liệu nước 55 Tài liệu internet 56 PHỤ LỤC i ix c Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -K2.2 ,0 X K3.1 ,0 X K3.2 ,0 X K1.1 2,70875 X DC 2,72875 X K2.1 2,77125 X K1.2 2,8125 X -Contrast Difference -DC - K1.1 ,02 DC - K1.2 -,08375 DC - K2.1 -,0425 DC - K2.2 *2,72875 DC - K3.1 *2,72875 DC - K3.2 *2,72875 K1.1 - K1.2 -,10375 K1.1 - K2.1 -,0625 K1.1 - K2.2 *2,70875 K1.1 - K3.1 *2,70875 K1.1 - K3.2 *2,70875 K1.2 - K2.1 ,04125 K1.2 - K2.2 *2,8125 K1.2 - K3.1 *2,8125 K1.2 - K3.2 *2,8125 K2.1 - K2.2 *2,77125 K2.1 - K3.1 *2,77125 K2.1 - K3.2 *2,77125 K2.2 - K3.1 ,0 K2.2 - K3.2 ,0 K3.1 - K3.2 ,0 -* denotes a statistically significant difference xii Xử lý thống kê thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo chồi phôi hạt Sầu Riêng hữu tính in vitro môi trường MS bổ sung BA nồng độ mg/l 3.1 Thống kê số chồi a ANOVA Table for SO CHOI by NGHIEM THUC ANOVA Table for SO CHOI by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 15,25 3,8125 13,02 , Within groups 10,25 35 ,292857 Total (Corr.) 25,5 39 b Table of Means for SO CHOI by NGHIEM THUC Table of Means for SO CHOI by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 2,875 ,19133 2,60034 3,14966 T1 1,625 ,19133 1,35034 1,89966 T2 3,0 ,19133 2,72534 3,27466 T3 2,25 ,19133 1,97534 2,52466 T4 1,5 ,19133 1,22534 1,77466 -Total 40 2,25 xiii c Multiple Range Tests for SO CHOI by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for SO CHOI by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -T4 1,5 X T1 1,625 X T3 2,25 X DC 2,875 X T2 3,0 X -Contrast Difference -DC - T1 *1,25 DC - T2 -,125 DC - T3 *,625 DC - T4 *1,375 T1 - T2 *-1,375 T1 - T3 *-,625 T1 - T4 ,125 T2 - T3 *,75 T2 - T4 *1,5 T3 - T4 *,75 -* denotes a statistically significant difference 3.2 Thống kê chiều cao chồi a ANOVA Table for CHIEU CAO by NGHIEM THUC ANOVA Table for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2616,96 654,241 116,41 , Within groups 196,711 35 5,62031 Total (Corr.) 2813,67 39 b Table of Means for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Table of Means for CHIEU CAO by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 15,625 ,838176 14,4218 16,8282 T1 35,5 ,838176 34,2968 36,7032 T2 20,9063 ,838176 19,703 22,1095 T3 35,1875 ,838176 33,9843 36,3907 T4 21,625 ,838176 20,4218 22,8282 -Total 40 25,7688 xiv c Multiple Range Tests for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for CHIEU CAO by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -DC 15,625 X T2 20,9063 X T4 21,625 X T3 35,1875 X T1 35,5 X -Contrast Difference -DC - T1 *-19,875 DC - T2 *-5,28125 DC - T3 *-19,5625 DC - T4 *-6,0 T1 - T2 *14,5938 T1 - T3 ,3125 T1 - T4 *13,875 T2 - T3 *-14,2813 T2 - T4 -,71875 T3 - T4 *13,5625 -* denotes a statistically significant difference 3.3 Thống kê đường kính chồi a ANOVA Table for DUONG KINH by NGHIEM THUC ANOVA Table for DUONG KINH by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1,22316 ,305791 1,81 ,1489 Within groups 5,91162 35 ,168904 Total (Corr.) 7,13479 39 b Table of Means for DUONG KINH by NGHIEM THUC Table of Means for DUONG KINH by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 2,72875 ,145303 2,52017 2,93733 T1 3,2 ,145303 2,99142 3,40858 T2 2,7825 ,145303 2,57392 2,99108 T3 2,91625 ,145303 2,70767 3,12483 T4 2,75 ,145303 2,54142 2,95858 -Total 40 2,8755 xv c Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -DC 2,72875 X T4 2,75 XX T2 2,7825 XX T3 2,91625 XX T1 3,2 X -Contrast Difference -DC - T1 *-,47125 DC - T2 -,05375 DC - T3 -,1875 DC - T4 -,02125 T1 - T2 ,4175 T1 - T3 ,28375 T1 - T4 ,45 T2 - T3 -,13375 T2 - T4 ,0325 T3 - T4 ,16625 -* denotes a statistically significant difference Xử lý thống kê thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng casein hydrolysate đến tạo chồi phôi hạt Sầu Riêng hữu tính in vitro môi trường MS bổ sung BA nồng độ mg/l 4.1 Thống kê số chồi a ANOVA Table for SO CHOI by NGHIEM THUC ANOVA Table for SO CHOI by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3,85 ,9625 6,57 , Within groups 5,125 35 ,146429 Total (Corr.) 8,975 39 xvi b Table of Means for SO CHOI by NGHIEM THUC Table of Means for SO CHOI by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -C1 2,75 ,135291 2,55579 2,94421 C2 2,875 ,135291 2,68079 3,06921 C3 3,0 ,135291 2,80579 3,19421 C4 3,625 ,135291 3,43079 3,81921 DC 2,875 ,135291 2,68079 3,06921 -Total 40 3,025 c Multiple Range Tests for SO CHOI by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for SO CHOI by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -C1 2,75 X DC 2,875 X C2 2,875 X C3 3,0 X C4 3,625 X -Contrast Difference -C1 - C2 -,125 C1 - C3 -,25 C1 - C4 *-,875 C1 - DC -,125 C2 - C3 -,125 C2 - C4 *-,75 C2 - DC ,0 C3 - C4 *-,625 C3 - DC ,125 C4 - DC *,75 -* denotes a statistically significant difference 4.2 Thống kê chiều cao chồi a ANOVA Table for CHIEU CAO by NGHIEM THUC ANOVA Table for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 166,022 41,5054 24,20 , Within groups 60,038 35 1,71537 Total (Corr.) 226,06 39 xvii b Table of Means for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Table of Means for CHIEU CAO by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -C1 20,3125 ,463057 19,6478 20,9772 C2 15,3325 ,463057 14,6678 15,9972 C3 17,4375 ,463057 16,7728 18,1022 C4 19,6875 ,463057 19,0228 20,3522 DC 15,625 ,463057 14,9603 16,2897 -Total 40 17,679 c Multiple Range Tests for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for CHIEU CAO by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -C2 15,3325 X DC 15,625 X C3 17,4375 X C4 19,6875 X C1 20,3125 X -Contrast Difference -C1 - C2 *4,98 C1 - C3 *2,875 C1 - C4 ,625 C1 - DC *4,6875 C2 - C3 *-2,105 C2 - C4 *-4,355 C2 - DC -,2925 C3 - C4 *-2,25 C3 - DC *1,8125 C4 - DC *4,0625 -* denotes a statistically significant difference 4.3 Thống kê đường kính chồi a ANOVA Table for DUONG KINH by NGHIEM THUC ANOVA Table for DUONG KINH by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 6,15734 1,53933 9,40 , Within groups 5,73105 35 ,163744 Total (Corr.) 11,8884 39 xviii b Table of Means for DUONG KINH by NGHIEM THUC Table of Means for DUONG KINH by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -C1 2,41625 ,143067 2,21088 2,62162 C2 2,70875 ,143067 2,50338 2,91412 C3 3,27 ,143067 3,06463 3,47537 C4 3,47875 ,143067 3,27338 3,68412 DC 2,72875 ,143067 2,52338 2,93412 -Total 40 2,9205 c Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -C1 2,41625 X C2 2,70875 X DC 2,72875 X C3 3,27 X C4 3,47875 X -Contrast Difference -C1 - C2 -,2925 C1 - C3 *-,85375 C1 - C4 *-1,0625 C1 - DC -,3125 C2 - C3 *-,56125 C2 - C4 *-,77 C2 - DC -,02 C3 - C4 -,20875 C3 - DC *,54125 C4 - DC *,75 -* denotes a statistically significant difference xix Xử lý thống kê thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng oligosaccharide đến tạo chồi phôi hạt Sầu Riêng hữu tính in vitro môi trường MS bổ sung BA nồng độ mg/l 5.1 Thống kê số chồi a ANOVA Table for SO CHOI by NGHIEM THUC ANOVA Table for SO CHOI by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 22,35 5,5875 53,95 , Within groups 3,625 35 ,103571 Total (Corr.) 25,975 39 b Table of Means for SO CHOI by NGHIEM THUC Table of Means for SO CHOI by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 2,875 ,113782 2,71166 3,03834 O1 2,625 ,113782 2,46166 2,78834 O2 2,875 ,113782 2,71166 3,03834 O3 3,0 ,113782 2,83666 3,16334 O4 1,0 ,113782 ,836665 1,16334 -Total 40 2,475 xx c Multiple Range Tests for SO CHOI by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for SO CHOI by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -O4 1,0 X O1 2,625 X O2 2,875 XX DC 2,875 XX O3 3,0 X -Contrast Difference -DC - O1 ,25 DC - O2 ,0 DC - O3 -,125 DC - O4 *1,875 O1 - O2 -,25 O1 - O3 *-,375 O1 - O4 *1,625 O2 - O3 -,125 O2 - O4 *1,875 O3 - O4 *2,0 -* denotes a statistically significant difference 5.2 Thống kê chiều cao chồi a ANOVA Table for CHIEU CAO by NGHIEM THUC ANOVA Table for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3158,07 789,518 172,45 , Within groups 160,239 35 4,57827 Total (Corr.) 3318,31 39 b Table of Means for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Table of Means for CHIEU CAO by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 15,625 ,756494 14,539 16,711 O1 13,605 ,756494 12,519 14,691 O2 14,6262 ,756494 13,5403 15,7122 O3 17,0 ,756494 15,914 18,086 O4 37,25 ,756494 36,164 38,336 -Total 40 19,6212 xxi c Multiple Range Tests for CHIEU CAO by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for CHIEU CAO by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -O1 13,605 X O2 14,6262 X DC 15,625 XX O3 17,0 X O4 37,25 X -Contrast Difference -DC - O1 2,02 DC - O2 ,99875 DC - O3 -1,375 DC - O4 *-21,625 O1 - O2 -1,02125 O1 - O3 *-3,395 O1 - O4 *-23,645 O2 - O3 *-2,37375 O2 - O4 *-22,6238 O3 - O4 *-20,25 -* denotes a statistically significant difference 5.3 Thống kê đường kính chồi a ANOVA Table for DUONG KINH by NGHIEM THUC ANOVA Table for DUONG KINH by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3,34712 ,836779 3,80 , 114 Within groups 7,69956 35 ,219987 Total (Corr.) 11,0467 39 b Table of Means for DUONG KINH by NGHIEM THUC Table of Means for DUONG KINH by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 2,72875 ,165827 2,49071 2,96679 O1 3,08375 ,165827 2,84571 3,32179 O2 2,72875 ,165827 2,49071 2,96679 O3 2,875 ,165827 2,63696 3,11304 O4 3,5 ,165827 3,26196 3,73804 -Total 40 2,98325 xxii c Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for DUONG KINH by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -DC 2,72875 X O2 2,72875 X O3 2,875 X O1 3,08375 XX O4 3,5 X -Contrast Difference -DC - O1 -,355 DC - O2 ,0 DC - O3 -,14625 DC - O4 *-,77125 O1 - O2 ,355 O1 - O3 ,20875 O1 - O4 -,41625 O2 - O3 -,14625 O2 - O4 *-,77125 O3 - O4 *-,625 -* denotes a statistically significant difference Xử lý thống kê thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hưởng than hoạt tính đến tạo rễ chồi Sầu Riêng in vitro môi trường MS bổ sung NAA nồng độ mg/l 6.1 Thống kê số rễ a ANOVA Table for SO RE by NGHIEM THUC ANOVA Table for SO RE by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 111,482 18,5804 4,13 , 68 Within groups 94,375 21 4,49405 Total (Corr.) 205,857 27 xxiii b Table of Means for SO RE by NGHIEM THUC Table of Means for SO RE by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 3,66667 1,22393 1,86686 5,46648 T1 3,66667 1,22393 1,86686 5,46648 T2 2,25 1,05996 ,691318 3,80868 T3 2,66667 1,22393 ,866856 4,46648 T4 3,0 1,22393 1,20019 4,79981 T5 2,25 1,05996 ,691318 3,80868 T6 7,125 ,749504 6,02285 8,22715 -Total 28 4,07143 c Multiple Range Tests for SO RE by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for SO RE by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -T2 2,25 X T5 2,25 X T3 2,66667 X T4 3,0 X DC 3,66667 XX T1 3,66667 XX T6 7,125 X -Contrast Difference -DC - T1 ,0 DC - T2 1,41667 DC - T3 1,0 DC - T4 ,666667 DC - T5 1,41667 DC - T6 -3,45833 T1 - T2 1,41667 T1 - T3 1,0 T1 - T4 ,666667 T1 - T5 1,41667 T1 - T6 -3,45833 T2 - T3 -,416667 T2 - T4 -,75 T2 - T5 ,0 T2 - T6 *-4,875 T3 - T4 -,333333 T3 - T5 ,416667 T3 - T6 *-4,45833 T4 - T5 ,75 T4 - T6 *-4,125 T5 - T6 *-4,875 -* denotes a statistically significant difference xxiv 6.2 Thống kê chiều dài rễ a ANOVA Table for CHIEU DAI RE by NGHIEM THUC ANOVA Table for CHIEU DAI RE by NGHIEM THUC Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 328,097 54,6828 ,42 ,8569 Within groups 2729,74 21 129,988 Total (Corr.) 3057,84 27 b Table of Means for CHIEU DAI RE by NGHIEM THUC Table of Means for CHIEU DAI RE by NGHIEM THUC with 95,0 percent LSD intervals -Stnd error NGHIEM THUC Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -DC 6,77667 6,58249 -2,90297 16,4563 T1 13,5667 6,58249 3,88703 23,2463 T2 12,0 5,70061 3,61719 20,3828 T3 7,98667 6,58249 -1,69297 17,6663 T4 10,0833 6,58249 ,403697 19,763 T5 17,2925 5,70061 8,90969 25,6753 T6 15,13 4,03094 9,20246 21,0575 -Total 28 12,6232 xxv c Multiple Range Tests for CHIEU DAI RE by NGHIEM THUC Multiple Range Tests for CHIEU DAI RE by NGHIEM THUC -Method: 95,0 percent Duncan NGHIEM THUC Count Mean Homogeneous Groups -DC 6,77667 X T3 7,98667 X T4 10,0833 X T2 12,0 X T1 13,5667 X T6 15,13 X T5 17,2925 X -Contrast Difference -DC - T1 -6,79 DC - T2 -5,22333 DC - T3 -1,21 DC - T4 -3,30667 DC - T5 -10,5158 DC - T6 -8,35333 T1 - T2 1,56667 T1 - T3 5,58 T1 - T4 3,48333 T1 - T5 -3,72583 T1 - T6 -1,56333 T2 - T3 4,01333 T2 - T4 1,91667 T2 - T5 -5,2925 T2 - T6 -3,13 T3 - T4 -2,09667 T3 - T5 -9,30583 T3 - T6 -7,14333 T4 - T5 -7,20917 T4 - T6 -5,04667 T5 - T6 2,1625 -* denotes a statistically significant difference xxvi ... pháp nuôi cấy điều kiện môi trường chưa phù hợp; điều kiện môi trường tạo chồi nuôi cấy vấn đề mà chưa giải Do đó, tiến hành nghiên cứu Khảo sát tối ưu điều kiện môi trường nuôi cấy in vitro Sầu. .. Sầu Riêng (Durio zibethinus Murray) hoàn thiện quy trình nuôi cấy in vitro Sầu Riêng Nghiên cứu nhằm mục đích khảo sát khả tạo chồi in vitro từ phôi hột Sầu Riêng khảo sát số yếu tố môi trường. .. cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần điều kiện nhiệt độ khác 30 Bảng III.2: Số chồi, chiều cao đường kính chồi Sầu Riêng in vitro nuôi cấy tuần điều kiện nhiệt độ khác