Nghiên cứu pheromone giới tính và nấm ký sinh trong phòng trị sùng khoai lang (Cylas formicarius Fabricius) tại Đồng bằng sông Cửu Long

Chương 1 GIỚI THIỆU 1.1 Tính cấp thiết của luận án Tại Việt Nam, khoai lang được trồng khắp nơi từ đồng bằng đến cao nguyên, là cây trồng chiến lược giúp phát triển kinh tế (Dương Minh, 1999). Tại ĐBSCL, diện tích trồng khoai lang ngày càng phát triển, diện tích khoai lang ở ĐBSCL là 23.000 ha đạt sản lượng 556.900 tấn, riêng huyện Bình Tân, tỉnh Vĩnh Long trở thành vùng trồng khoai lang lớn nhất, với diện tích năm 2010 (5.673,7 ha) đến năm 2014 (10.671,6 ha), sản lượng năm 2010 (166.016 tấn) đến năm 2014 (307.602 tấn) (Niên giám thống kê tỉnh Vĩnh Long năm 2014). Trong quá trình canh tác khoai lang đã làm cho các loài côn trùng phát triển và gây hại trên khoai lang tăng mạnh (Nguyễn Văn Đĩnh, 2005). Sùng khoai lang (SKL) (Coleoptera: Curculionidae) là đối tượng gây hại quan trọng trên khoai lang ở khắp các nơi trồng khoai lang trên thế giới (Hwang and Hung, 1991; Capinera, 1998), đặc biệt nghiêm trọng ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới (Chalfant et al., 1990). Sự gây hại của sùng có thể xảy ra ở tất cả các mùa trồng khoai trong năm (Bourke, 1985). Ở ĐBSCL, SKL xác định là 1 loài duy nhất có tên khoa học Cylas formicarius Fabricius (Nguyễn Văn Huỳnh và Lê Thị Sen, 2011). Sùng gây hại chủ yếu ở giai đoạn ấu trùng, ảnh hưởng chất lượng củ khoai còn tạo điều kiện cho mầm bệnh trong đất tấn công củ (Capinera, 1998; Nguyễn Đức Khiêm, 2006). Sự gây hại có thể làm giảm từ 35-95% năng suất củ (Anonymous, 1978), không chỉ gây hại ở ngoài đồng mà còn gây hại trong thời gian bảo quản củ khoai (Nguyễn Văn Đĩnh, 2005). Để phòng trị SKL, cho đến nay, giải pháp áp dụng thuốc trừ sâu hóa học vẫn là lựa chọn ưu tiên. Do SKL chủ yếu gây hại trong củ dưới mặt đất, để đạt hiệu quả cao nông dân phải sử dụng lượng lớn thuốc trừ sâu hóa học. Kết quả điều tra tại huyện Bình Tân, Vĩnh Long cho thấy nông dân thường áp dụng phun ngừa định kỳ 7 ngày/lần, trung bình 18 lần thuốc trừ sâu/vụ khoai (Lê Thị Thanh Hiền và ctv., 2014). Điều này làm gia tăng chi phí sản xuất đồng thời ảnh hưởng tiêu cực đến sức khỏe con người và môi trường (Marcano et al., 1999). Để hạn chế lượng thuốc trừ sâu sử dụng nhằm giảm chi phí, ảnh hưởng đến sức khỏe con người và môi trường, đồng thời đảm bảo hiệu quả phòng trị. Cần nghiên cứu và áp dụng các biện pháp sinh học an toàn và thân thiện với môi trường để quản lý sự gây hại của SKL theo hướng hạn chế hoặc thay thế dần việc áp dụng thuốc trừ sâu hóa học độc hại là hết sức cần thiết. Pheromone giới tính là loại hóa chất tín hiệu được côn trùng tiết ra để hấp dẫn sự bắt cặp của cá thể khác giới cùng loài. Là loại hóa chất sinh thái có nguồn gốc tự nhiên, tính chuyên biệt cao và hoạt động ở hàm lượng rất thấp, áp dụng pheromone giới tính để quản lý côn trùng gây hại cây trồng xem là giải pháp không độc hại, bền vững, an toàn (Witzgall et al., 2010), là công cụ hữu hiệu của chiến lược quản lý dịch hại tổng hợp (IPM) (Cardé and Minks, 1995; Wakamura, 1992). Hàng năm, ước tính có hàng chục triệu mồi pheromone được sản xuất để ứng dụng cho việc khảo sát diễn biến mật số quần thể và bẫy tập hợp trên diện tích hơn 10 triệu hecta, hơn 1 triệu hecta được áp dụng kỹ thuật quấy rối sự bắt cặp và bẫy tập hợp (Witzgall et al., 2010). Pheromone giới tính của SKL do sùng cái tiết ra đã xác định là hợp chất (Z)-3-dodecenyl-(E)-2-butenoate (Z3-12:E2) (Heath et al., 1986). Áp dụng pheromone giới tính tổng hợp quản lý sự gây hại của SKL cho hiệu quả cao tại các nước như Đài Loan (Hwang and Hung, 1991), Nhật Bản (Yasuda, 1995), Ấn Độ (Pillai et al., 1993) và Indonesia (Braun and Van de Fliert, 1999). Tại ĐBSCL, pheromone giới tính của 11 loài côn trùng bộ cánh vẩy và 1 loài bộ cánh cứng đã nghiên cứu ứng dụng (Lê Văn Vàng, 2016). Theo Nguyễn Văn Đĩnh (2005), pheromone giới tính có tác dụng hấp dẫn mạnh sùng đực và phát huy hiệu quả tốt ở bán kính dưới 100 mét. Những năm gần đây, nấm ký sinh côn trùng đã phát triển ở nhiều nước trên thế giới, xem như tác nhân phòng trừ sinh học côn trùng với hơn 100 sản phẩm đã được thương mại hóa dưới dạng thuốc trừ sâu vi nấm vào năm 2006 (Jaronski, 2010). Nấm trắng Beauveria bassiana đã xác định ký sinh trên SKL C. formicarius ở các giai đoạn thành trùng, ấu trùng và nhộng (Jansson 1992; Lagnaoui et al., 2000). Nấm B. bassiana đã áp dụng phòng trừ SKL cho hiệu quả cao (Su, 1991; Jansson, 1992; Yasuda, 1999). Ngoài ra, nấm xanh Metarhizium anisopliae đã xác định ký sinh trên SKL C. formicarius (Ames et al., 1997; Phạm Thị Thùy, 2004). Tuy nhiên, hiệu quả của nấm xanh phòng trị SKL thì ít được nghiên cứu. Hiện nay, tại ĐBSCL, quy trình sản xuất nấm xanh đã thiết lập. Chế phẩm nấm xanh đã có hiệu quả phòng trị cao đối với một số loài côn trùng, nhất là với rầy nâu hại lúa và có thể thay thế dần việc sử dụng thuốc trừ sâu hóa học (Trần Văn Hai và ctv., 2006 và 2009). Việc nghiên cứu ứng dụng kết hợp pheromone giới tính và nấm xanh để quản lý SKL ở ngoài đồng là giải pháp an toàn cho con người và môi trường sinh thái cần được thực hiện. Trên cơ sở đó, đề tài “Nghiên cứu pheromone giới tính và nấm ký sinh trong phòng trị sùng khoai lang (Cylas formicarius Fabricius) tại Đồng bằng sông Cửu Long” được thực hiện nhằm giới thiệu biện pháp mới an toàn, thân thiện với môi trường để quản lý sự gây hại của SKL ở ngoài đồng phù hợp với vùng ĐBSCL, góp phần giảm thiểu hoặc thay thế dần thuốc trừ sâu hóa học.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ PHẠM KIM SƠN NGHIÊN CỨU PHEROMONE GIỚI TÍNH VÀ NẤM KÝ SINH TRONG PHÒNG TRỊ SÙNG KHOAI LANG (CYLAS FORMICARIUS FABRICIUS) TẠI ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG LUẬN ÁN TIẾN SĨ KHOA HỌC CHUYÊN NGÀNH BẢO VỆ THỰC VẬT Mã ngành: 62 62 01 12 2016 MỤC LỤC Trang DANH SÁCH BẢNG x DANG SÁCH HÌNH xiv DANH SÁCH TỪ VIẾT TẮT xvii Chƣơng GIỚI THIỆU ……………………………………………… 1.1 Tính cấp thiết luận án ……………………………………… 1.2 Mục tiêu nghiên cứu …………………………………………… 1.3 Nội dung nghiên cứu ……………………………………………… 1.4 Đối tượng phạm vi nghiên cứu ………………………………… 1.5 Giới hạn nghiên cứu …………………………………………… 1.6 Những điểm luận án ……………………………………… 1.7 Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án ………………………… Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU………………………………… 2.1 Đặc điểm sùng khoai lang, Cylas formicarius Fabricius ……… 2.1.1 Phân bố ký chủ ……………………………………………… 2.1.2 Đặc điểm hình thái, sinh học, sinh thái học sùng khoai lang… 2.1.3 Tập quán sinh sống cách gây hại sùng khoai lang……… 10 2.1.4 Triệu chứng gây hại sùng khoai lang ……………………… 11 2.1.5 Cách phòng trị sùng khoai lang đồng ruộng ………………… 12 2.2 Nghiên cứu ứng dụng pheromone giới tính sùng khoai lang … 13 2.2.1 Cấu trúc hóa học pheromone giới tính sùng khoai lang……… 13 2.2.2 Tổng hợp pheromone giới tính sùng khoai lang……………… 13 2.2.3 Một số kết nghiên cứu pheromone giới tính sùng khoai lang giới………………………………………………………… 18 2.2.4 Ứng dụng pheromone giới tính phòng trị sùng khoai lang……… 23 2.3 Đặc điểm nấm ký sinh côn trùng…………………… …… 25 2.4 Ứng dụng nấm ký sinh sùng khoai lang ………………………… 28 33 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU……… 3.1 Vật liệu nghiên cứu………………………………………………… 33 3.1.1 Vật liệu…………………………………………………………… 33 3.1.2 Hóa chất ………………………………………………………… 33 3.1.3 Kiểu bẫy pheromone …………………………………………… 34 3.1.4 Nấm ký sinh sử dụng thí nghiệm…………………………… 35 3.1.5 Nguồn sùng khoai lang…………………………………………… 36 3.1.6 Phiếu điều tra nông dân khảo sát đồng………………… 36 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu……………………………… 36 3.2.1 Điều tra tình hình canh tác khoai lang, khảo sát côn trùng gây hại vii thiên địch ruộng khoai lang huyện Bình Tân, Vĩnh Long…… 3.2.2 Nghiên cứu pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang 3.2.3 Nghiên cứu nấm ký sinh sùng khoai lang phòng thí nghiệm …………………………………………………………………… 3.2.4 Khảo sát hiệu ứng dụng pheromone giới tính tổng hợp kết hợp với nấm xanh (Ma) phòng trị sùng khoai lang………………… 3.3 Phương pháp xử lý số liệu ………………………………………… Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN…………………………… 4.1 Điều tra tình hình canh tác khoai lang, khảo sát côn trùng gây hại thiên địch ruộng khoai lang Bình Tân, Vĩnh Long……………… 4.1.1 Điều tra nông dân tình hình canh tác khoai lang ……………… 4.1.2 Khảo sát đồng tình hình côn trùng gây hại thiên địch ruộng khoai lang …………………………………………………… 4.2 Nghiên cứu pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang… 4.2.1 Tổng hợp hợp chất (Z3-12:E2) pheromone giới tính sùng khoai lang phòng thí nghiệm …………………………………… 4.2.2 Ứng dụng pheromone giới tính tổng hợp điều kiện đồng …………………………………………………………………… 4.3 Nghiên cứu nấm ký sinh sùng khoai lang PTN ……… 4.3.1 Phân lập định danh loài từ chi nấm Metarhizium ký sinh côn trùng theo phương pháp phân loại truyền thống ………………………… 4.3.2 Phân loại, xác định loài nấm Metarhizium dựa vào trình tự vùng ITS-rDNA theo phương pháp sinh học phân tử 4.3.3 Khảo sát hiệu lực mẫu phân lập nấm Metarhizium thành trùng sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm ……… 4.3.4 Khảo sát hiệu lực gây chết chủng nấm xanh (Ma) mật số bào tử khác thành trùng SKL điều kiện PTN ……… 4.3.5 Khảo sát khả ký sinh nấm xanh (Ma) quần thể SKL qua hình thức xử lý khác PTN ………………………… 4.4 Khảo sát hiệu ứng dụng kết hợp pheromone giới tính tổng hợp nấm xanh (M anisopliae) sùng khoai lang ………………… 4.4.1 Khảo sát khả lây lan bệnh sùng đực sau tiếp xúc với pheromone giới tính nấm xanh điều kiện phòng thí nghiệm… 4.4.2 Khảo sát ảnh hưởng pheromone giới tính tổng hợp nấm xanh (Ma) lên khả sinh sản thành trùng SKL PTN 4.4.3 Khảo sát hiệu pheromone giới tính tổng hợp kết hợp với nấm xanh (Ma) phòng trị SKL huyện Bình Tân, Vĩnh Long………… 4.4.4 Khảo sát hiệu pheromone giới tính tổng hợp kết hợp với nấm xanh (Ma) phòng trị SKL huyện Cù Lao Dung, Sóc Trăng…… viii 36 38 50 59 65 66 66 66 74 77 77 86 112 112 120 125 128 130 133 133 136 140 142 4.4.5 Khảo sát hiệu pheromone giới tính tổng hợp kết hợp với nấm xanh (Ma) phòng trị SKL huyện Duyên Hải, Trà Vinh……… 4.4.6 Khảo sát hiệu pheromone giới tính tổng hợp kết hợp với nấm xanh (Ma) phòng trị SKL huyện Tri Tôn, An Giang ………… Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT ……………………………… 5.1 Kết luận 5.2 Đề xuất ……………………………………………………… TÀI LIỆU THAM KHẢO …………………………………………… PHỤ LỤC………………………………………………………………… ix 147 152 157 157 158 159 170 DANH SÁCH BẢNG Bảng 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 3.13 3.14 Tên Bảng Thông tin ruộng khoai lang điều tra thành phần côn trùng gây hại Các nghiệm thức khảo sát hiệu hấp dẫn pheromone giới tính tổng hợp khối lượng/bẫy khác sùng khoai lang đồng, năm 2010……………………………………… Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng kiểu tuýp mồi lên hiệu hấp dẫn pheromone giới tính sùng khoai lang đồng, năm 2010……………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng kiểu bẫy lên khả hấp dẫn pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang đồng, năm 2010…………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng màu sắc bẫy lên khả hấp dẫn pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang đồng, 2010…………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng độ cao đặt bẫy lên khả hấp dẫn pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang đồng, 2010…………………………………………… Thể tích thành phần hóa chất sử dụng phản ứng PCR… Các nghiệm thức khảo sát hiệu lực gây chết nấm xanh (Ma) mật số bào tử khác thành trùng SKL phòng thí nghiệm, năm 2012……………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát khả ký sinh gây chết nấm xanh (Ma) qua hình thức xử lý khác thành trùng SKL PTN, năm 2012……………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát khả lây lan bệnh nấm xanh (Ma) từ sùng đực bị nhiễm nấm quần thể SKL điều kiện PTN, năm 2012…………………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng pheromone giới tính nấm xanh (Ma) lên khả sinh sản sùng khoai lang PTN, năm 2013…………………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát hiệu kết hợp pheromone giới tính tổng hợp với nấm xanh phòng trị sùng khoai lang tỉnh Vĩnh Long, năm 2011…………………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát hiệu kết hợp pheromone giới tính tổrng hợp với nấm xanh phòng trị sùng khoai lang tỉrnh Sóc Trăng, năm 2011……………………………………………… Các nghiệm thức khảo sát hiệu kết hợp pheromone giới x Trang 37 43 44 44 45 46 55 58 58 60 61 62 63 3.15 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 4.10 4.11 4.12 4.13 4.14 4.15 tính tổng hợp với nấm xanh phòng trị SKL ruộng khoai canh tác huyện Duyên Hải, tỉnh Trà Vinh, năm 2011………… Các nghiệm thức khảo sát hiệu kết hợp pheromone giới tính tổng hợp với nấm xanh phòng trị SKL ruộng khoai canh tác lâu năm huyện Duyên Hải, tỉnh Trà Vinh, năm 2011……… Tỉ lệ nông hộ điều tra theo thâm niên diện tích canh tác ……… Tỉ lệ nông hộ điều tra trồng khoai lang đạt lợi nhuận vụ khoai trước ……………………………………………………………… Tỉ lệ nông hộ điều tra theo số vụ canh tác, nguồn hom xử lý hom ……………………………………………………………… Tỉ lệ nông hộ điều tra theo phương pháp xử lý củ, xử lý dây nuôi củ, thời gian neo củ xử lý ruộng sau thu hoạch………………… Tỉ lệ nông hộ điều tra theo biện pháp phòng trừ sâu hại tỉ lệ củ khoai bị sùng vụ trước ………………………………………… Thành phần côn trùng nhện hại diện ruộng khoai lang địa bàn khảo sát thuộc huyện Bình Tân, tỉnh Vĩnh Long, năm 2010…………………………………………………………… Thành phần thiên địch diện ruộng khoai lang khảo sát huyện Bình Tân, tỉnh Vĩnh Long, năm 2010 Hiệu hấp dẫn pheromone giới tính tổng hợp khối lượng sản phẩm khác sùng khoai lang xã Thành Lợi, huyện Bình Tân, Vĩnh Long, năm 2010……………………… Ảnh hưởng kiểu tuýp mồi lên hiệu lực hấp dẫn pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang điều kiện đồng, năm 2010…………………………………………………………… Hiệu kiểu bẫy lên khả hấp dẫn pheromone giới tính thành trùng SKL ruộng khoai lang huyện Bình Tân, năm 2010…………………………………………………… Ảnh hưởng màu sắc bẫy thành trùng sùng khoai lang xã Thành Lợi, huyện Bình Tân, tỉnh Vĩnh Long, năm 2010…… Ảnh hưởng độ cao đặt bẫy lên khả hấp dẫn bẫy pheromone giới tính SKL Bình Minh, năm 2010……… Thành phần côn trùng gây hại ruộng khoai lang vụ huyện Bình Tân, Vĩnh Long, từ tháng 12 năm 2009 đến tháng năm 2010 ……………………………………………………………… Thành phần côn trùng gây hại ruộng khoai lang vụ huyện Bình Tân, Vĩnh Long, từ tháng đến 12 năm 2010……… Thành phần thiên địch ăn thịt ruộng khoai lang vụ huyện Bình Tân, Vĩnh Long, từ tháng 12 năm 2009 đến tháng năm xi 64 64 66 67 69 70 73 75 77 87 89 90 91 92 101 102 4.16 4.17 4.18 4.19 4.20 4.21 4.22 4.23 4.24 4.25 4.26 4.27 4.28 4.29 4.30 4.31 2010………………………………………………………………… Thành phần thiên địch ăn thịt ruộng khoai lang vụ huyện Bình Tân, Vĩnh Long, từ tháng đến 12 năm 2010………… Tỉ lệ củ khoai bị sùng gây hại ruộng khoai lang vụ huyện Bình Tân, Vĩnh Long, từ tháng 12 năm 2009 đến tháng năm 2010………………………………………………………………… Tỉ lệ củ khoai lang Tím Nhật bị sùng gây hại ruộng thí nghiệm vụ huyện Bình Tân, Vĩnh Long, từ tháng đến 12 năm 2010…………………………………………………………… Các nguồn nấm Metarhizium phân lập, định danh số côn trùng gây hại trồng số tỉnh ĐBSCL………………… Các mẫu Metarhizum giới sử dụng để xác định loài Mức độ tương đồng (%) trình tự DNA vùng ITS-rDNA mẫu phân lập nấm Metarhizium số tỉnh ĐBSCL mẫu Metarhizium giới Hiệu lực gây chết mẫu phân lập Metarhizium thành trùng SKL điều kiện phòng thí nghiệm, năm 2011………… Hiệu lực gây chết mật số bào tử nấm xanh (Ma) thành trùng sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm, năm 2012…………………………………………………………… Độ hữu hiệu (%) nồng độ bào tử nấm xanh (Ma) thành trùng SKL điều kiện nhiệt độ 25oC phòng thí nghiệm, năm 2012………………………………………………… Khả ký sinh nấm xanh (Ma) sùng khoai lang qua hình thức xử lý khác điều kiện phòng thí nghiệm Tỉ lệ chết (%) thành trùng SKL qua lây lan bệnh quần thể từ sùng đực sau tiếp xúc với pheromone giới tính nấm xanh (Ma) điều kiện phòng thí nghiệm, năm 2012………… Ảnh hưởng pheromone giới tính nấm xanh lên số lượng sùng thời gian sống sùng bố mẹ điều kiện phòng thí nghiệm, năm 2013……………………………………………… Số lượng sùng thoát từ cặp sùng bố mẹ theo thời gian điều kiện phòng thí nghiệm, năm 2013……………………… Tỉ lệ củ khoai Tím Nhật bị sùng gây hại thời điểm sau trồng xã Thành Đông, huyện Bình Tân, tỉnh Vĩnh Long, năm 2011…………………………………………………………… Số lượng SKL vào bẫy pheromone ruộng khoai Trắng Sữa xã An Thạnh Tây, huyện Cù Lao Dung, tỉnh Sóc Trăng, năm 2011 Tỉ lệ củ khoai bị sùng gây hại giống khoai Trắng Sữa thời xii 104 105 106 110 112 121 124 125 128 129 132 135 138 139 141 142 4.32 4.33 4.34 4.35 4.36 4.37 4.38 4.39 4.40 điểm tháng 2,5 tháng xã An Thạnh Tây, huyện Cù Lao Dung, tỉnh Sóc Trăng……………………………………………… Tỉ lệ gây hại sùng khoai lang củ khoai thu từ ruộng thí nghiệm…………………………………………………………… Số lượng sùng đực vào bẫy pheromone giới tính ruộng khoai lang thí nghiệm sau thu hoạch huyện Cù Lao Dung, tỉnh Sóc Trăng, 2013…………………………………………………… Số lượng sùng khoai lang vào bẫy pheromone ruộng khoai lang canh tác thuộc huyện Duyên Hải, tỉnh Trà Vinh………… Số lượng sùng khoai lang vào bẫy pheromone ruộng khoai lang canh tác lâu năm thuộc huyện Duyên Hải, tỉnh Trà Vinh…… Tỉ lệ củ bị gây hại sùng khoai lang ruộng khoai lang canh tác huyện Duyên Hải, tỉnh Trà Vinh……………………… Tỉ lệ củ bị gây hại sùng khoai lang ruộng khoai lang canh tác lâu năm huyện Duyên Hải, tỉnh Trà Vinh……………………… Số lượng sùng khoai lang vào bẫy khu vực ruộng đặt bẫy pheromone kết hợp với nấm xanh huyện Tri Tôn, An Giang… Tỉ lệ củ bị hại SKL khu vực ngoại vi ruộng khoai lang Trắng Sữa huyện Tri Tôn, tỉnh An Giang………………… Tỉ lệ củ bị hại SKL gây khu vực trung tâm ruộng khoai lang Trắng Sữa huyện Tri Tôn, tỉnh An Giang………… xiii 143 146 147 148 149 150 152 153 155 156 DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 2.9 2.10 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 3.13 3.14 3.15 Tên Hình Trang Thành trùng sùng khoai lang (A) đặc điểm râu đầu thành trùng đực (B) (C) …………………………………………… Các giai đoạn phát triển sùng khoai lang……………………… Ấu trùng Cylas formicarius……………………………………… Sự gây hại sùng khoai lang dây (A, B) củ (C) ……… 12 Con đường tổng hợp hợp chất (Z)-3-dodecenyl-(E)-2-butenoate, pheromone giới tính SKL theo Heath et al., (1986)…………… 14 Con đường tổng hợp hợp chất (Z)-3-dodecenyl-(E)-2-butenoate, pheromone giới tính sùng khoai lang theo Lo et al., (1992)… 15 Con đường tổng hợp hợp chất (Z)-3-dodecenyl-(E)-2-butenoate, pheromone giới tính SKL theo Sureda et al., (2006)………… 16 Con đường tổng hợp hợp chất (Z)-3-dodecenyl-(E)-2-butenoate, pheromone giới tính SKL theo Mithran Subbaraman (1999) 17 Con đường tổng hợp hợp chất (Z)-3-dodecenyl-(E)-2-butenoate, pheromone giới tính SKL theo Nguyen Cong Hao et al., (1996) 18 Cơ quan sinh bào tử nấm Metarhizium anisopliae ………………… 26 Bẫy pheromone dạng bẫy dính đặt ruộng khoai lang…… 34 Bẫy pheromone dạng bẫy nước đặt ruộng khoai lang………… 35 Các dạng nấm xanh: đĩa nấm nguồn (A), chế phẩm sản xuất PTN (B) chế phẩm nấm xanh sản xuất nông hộ (C) ……… 35 Sơ đồ vị trí điểm điều tra cố định ruộng khoai lang, ô vuông điểm điều tra cố định ghi nhận côn trùng thiên địch … 37 Cách tiến hành kỹ thuật sắc ký lớp mỏng ………………………… 39 Cách ghi nhận khoảng cách di chuyển mẫu dung môi…… 39 Các bước điều chế mồi pheromone giới tính tổng hợp…………… 42 Kiểu tuýp mồi sử dụng thí nghiệm………………………… 44 Bẫy màu xanh bẫy màu vàng đặt ruộng khoai lang……… 45 Vị trí điểm thu củ khoai lang ruộng thí nghiệm………… 49 Củ khoai sau rữa kiểm tra sùng gây hại bên vỏ bên củ khoai lang Tím Nhật …………………………… 50 Công đoạn chuẩn bị gel agarose thực phản ứng PCR………… 53 Công đoạn ly trích DNA mẫu phân lập nấm thu thập…… 54 Chu trình nhiệt nấm Metarhizium với primer ITS1 ITS4…… 55 Thí nghiệm xử lý nấm Metarhizium thành trùng SKL điều kiện phòng thí nghiệm, năm 2011……………………… 57 xiv 3.16 Khảo sát khả ký sinh nấm xanh qua hai hình thức rãi phun nấm quần thể SKL hộp nhựa lớn…… 3.17 Bẫy pheromone giới tính hấp dẫn SKL lây nhiễm nấm xanh (Ma) 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 4.10 4.11 4.12 4.13 4.14 4.15 4.16 4.17 4.18 4.19 4.20 4.21 4.22 Tỉ lệ (%) loại giống khoai lang địa bàn điều tra …………… Tỉ lệ (%) sâu hại phổ biến ruộng khoai khu vực điều tra … Tỉ lệ (%) bệnh hại phổ biến ruộng khoai địa bàn điều tra … Quy trình tổng hợp hợp chất (Z)-3-dodecenyl (E)-2-butenoate, pheromone giới tính sùng khoai lang ………………………… Phân tích GC-MS hợp chất Z3-12:E2 tổng hợp……………… Các bước điều chế mồi pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang………………………………………………………… Diễn biến mật số quần thể SKL xã Đông Bình, Thành Lợi, Tân Quới, Tân Hưng, tỉnh Vĩnh Long từ 05/8/2009 đến 03/9/2010 Diễn biến mật số quần thể SKL xã Đông Bình, huyện Bình Minh, tỉnh Vĩnh Long, từ ngày 05/8/2009 đến ngày 03/9/2010 … Diễn biến mật số quần thể sùng khoai lang huyện Bình Tân, tỉnh Vĩnh Long, từ ngày 05/8/2009 đến ngày 03/9/2010………… Diễn biến mật số SKL ruộng thí nghiệm vụ 1…………… Diễn biến mật số SKL ruộng thí nghiệm vụ 2…………… Số lượng sùng đực vào bẫy đêm khảo sát ruộng địa bàn thí nghiệm vụ xã Thành Đông, huyện Bình Tân…… Sơ đồ vị trí ruộng khoai khảo sát đặt bẫy pheromone đêm sau thu hoạch vụ xã Thành Đông, huyện Bình Tân…… Sùng đực vào bẫy pheromone đêm sau thu hoạch ruộng khoai thí nghiệm vụ xã Thành Đông, huyện Bình Tân, Vĩnh Long, 2010……………………………………………… Nấm Metarhizium ký sinh số côn trùng gây hại trồng…… Khuẩn lạc MPL Metarhizium phát triển môi trường PDA Khuẩn lạc MPL Metarhizium phát triển môi trường PDA (tt) Cấu trúc hình dạng cành bào đài chi nấm Metarhizium ……… Hình dạng bào tử (trái) cấu trúc cành bào đài (phải) MPL Metarhizum chụp qua KHV điện tử ………………………… Hình dạng bào tử (trái) cấu trúc cành bào đài (phải) MPL Metarhizum chụp qua KHV điện tử (tt)……………………… Hình dạng bào tử (trái) cấu trúc cành bào đài (phải) MPL Metarhizum chụp qua KHV điện tử (tt)…………………… Sản phẩm PCR khuếch đại vùng ITS-rDNA MPL Metarhizium, sử dụng hai primer ITS1 ITS4 xv 59 60 67 72 73 80 84 86 93 94 95 98 99 107 108 109 113 115 116 117 118 119 120 121 Phụ lục C CÁC BẢNG ANOVA VỀ ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ HẤP DẪN CỦA PHEROMONE GIỚI TÍNH TỔNG HỢP Bảng 1: Khảo sát hiệu hấp dẫn kiểu mồi pheromone SKL điều kiện đồng K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob -1 Replication 0.205 0.103 0.8361 Factor A 5.805 1.935 15.7552 0.0030 -3 Error 0.737 0.123 -Total 11 6.747 -Coefficient of Variation: 23.40% Bảng 2: Khảo sát ảnh hưởng kiểu bẫy lên khả hấp dẫn pheromone giới tính sùng khoai lang điều kiện đồng K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob -1 Replication 0.259 0.129 2.4487 0.1669 Factor A 6.489 2.163 40.9557 0.0002 -3 Error 0.317 0.053 -Total 11 7.065 -Coefficient of Variation: 13.30 Bảng 3: Đánh giá ảnh hưởng màu sắc bẫy lên khả hấp dẫn mồi pheromone giới tính sùng khoai lang điều kiện đồng K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob -1 Replication 0.540 0.270 1.4793 0.3004 Factor A 9.121 3.040 16.6434 0.0026 -3 Error 1.096 0.183 -Total 11 10.758 -Coefficient of Variation: 28.57% 186 Bảng 4: Khảo sát ảnh hưởng độ cao đặt bẫy pheromone giới tính lên khả hấp dẫn sùng khoai lang điều kiện đồng K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob -1 Replication 1.578 0.789 4.3432 0.052 Factor A 3.857 0.964 5.3065 0.0219 -3 Error 1.454 0.182 -Total 14 6.889 -Coefficient of Variation: 43.09% Bảng 5: Hiệu lực số chủng nấm lên thành trùng sùng khoai lang thời điểm NSKC (số liệu chuyển sang log(x+20)) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob -Between 0.443 0.148 5.370 0.0256 Within 0.220 0.027 -Total 11 0.663 Coefficient of Variation = 11.66% Bảng 6: Hiệu lực số chủng nấm lên thành trùng sùng khoai lang thời điểm NSKC (số liệu chuyển sang log(x+20)) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.870 0.290 15.198 0.0011 Within 0.153 0.019 Total 11 1.022 Coefficient of Variation = 8.97% Bảng 7: Hiệu lực số chủng nấm lên thành trùng SKL thời điểm NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 13281.381 4427.127 82.054 0.0000 Within 431.629 53.954 Total 11 13713.011 Coefficient of Variation = 24.48% 187 Bảng Anova hiệu lực số loại nấm lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 13955.314 4651.771 151.300 0.0000 Within 245.963 30.745 Total 11 14201.277 Coefficient of Variation = 15.50% Bảng Anova hiệu lực số loại nấm lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm 11 NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 14198.244 4732.748 115.636 0.0000 Within 327.425 40.928 Total 11 14525.669 Coefficient of Variation = 16.37% Bảng 10 Anova hiệu lực số loại nấm lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm 13 NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 15208.847 5069.616 179.813 0.0000 Within 225.550 28.194 Total 11 15434.397 Coefficient of Variation = 13.00% Bảng 11 Anova hiệu lực số loại nấm lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm 15 NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 15441.300 5147.100 287.724 0.0000 Within 143.112 17.889 Total 11 15584.413 Coefficient of Variation = 9.40% 188 Bảng 12 Anova hiệu lực nấm xanh lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 0.024 0.006 0.176 Within 10 0.342 0.034 Total 14 0.366 Coefficient of Variation = 13.81% Bảng 13 Anova hiệu lực nấm xanh lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 9173.493 2293.373 83.603 0.0000 Within 10 274.316 27.432 Total 14 9447.808 Coefficient of Variation = 24.07% Bảng 14 Anova hiệu lực nấm xanh lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 14091.101 3522.775 90.827 0.0000 Within 10 387.857 38.786 Total 14 14478.958 Coefficient of Variation = 19.32% Bảng 15 Anova hiệu lực nấm xanh lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 15693.813 3923.453 151.756 0.0000 Within 10 258.536 25.854 Total 14 15952.349 Coefficient of Variation = 12.96% 189 Bảng 16 Anova hiệu lực nấm xanh lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm 11 NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 16758.645 4189.661 93.934 0.0000 Within 10 446.020 44.602 Total 14 17204.665 Coefficient of Variation = 14.89% Bảng 17 Anova hiệu lực nấm xanh lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm 13 NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 18189.126 4547.282 70.827 0.0000 Within 10 642.027 64.203 Total 14 18831.153 Coefficient of Variation = 20.02% Bảng 18 Anova hiệu lực nấm xanh lên thành trùng sùng khoai lang C.formicarius thời điểm 15 NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 17343.173 4335.793 49.326 0.0000 Within 10 879.005 87.901 Total 14 18222.178 Coefficient of Variation = 19.99% Bảng 19 Anova khả lây lan nấm xanh quần thể sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm vào thời điểm NSKC (chuyển sang arcsin( x  0.5 )) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1.055 0.528 0.244 Within 12 25.951 2.163 Total 14 27.007 Coefficient of Variation = 7.79% 190 Bảng 20 Anova khả lây lan nấm xanh quần thể sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm vào thời điểm 10 NSKC (chuyển sang arcsin( x  0.5 )) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8.192 4.096 0.863 Within 12 56.956 4.746 Total 14 65.148 Coefficient of Variation = 10.06% Bảng 21 Anova khả lây lan nấm xanh quần thể sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm vào thời điểm 15 NSKC (chuyển sang arcsin( x  0.5 )) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 17.636 8.818 1.948 0.1851 Within 12 54.326 4.527 Total 14 71.962 Coefficient of Variation = 9.10% Bảng 22 Anova khả lây lan nấm xanh quần thể sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm vào thời điểm 20 NSKC (chuyển sang arcsin( x  0.5 )) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 125.806 62.903 4.955 0.0270 Within 12 152.349 12.696 Total 14 278.155 Coefficient of Variation = 13.35% Bảng 23 Anova khả lây lan nấm xanh quần thể sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm vào thời điểm 25 NSKC (chuyển sang arcsin( x  0.5 )) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 211.680 105.840 2.222 0.1511 Within 12 571.714 47.643 Total 14 783.395 Coefficient of Variation = 23.24% 191 Bảng 24 Anova khả lây lan nấm xanh quần thể sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm vào thời điểm 30 NSKC (chuyển sang arcsin( x  0.5 )) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 489.568 244.784 5.282 0.0226 Within 12 556.152 46.346 Total 14 1045.720 Coefficient of Variation = 20.82% Bảng 25 Anova khả lây lan nấm xanh quần thể sùng khoai lang điều kiện phòng thí nghiệm vào thời điểm 35 NSKC (chuyển sang arcsin( x  0.5 )) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 751.465 375.732 13.826 0.0008 Within 12 326.121 27.177 Total 14 1077.585 Coefficient of Variation = 14.31% Bảng 26 Thời gian sống thành trùng sùng đực sau tiếp xúc với pheromone nấm xanh điều kiện phòng thí nghiệm (chuyển sang log10(x+1)) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 9.012 3.004 44.068 0.0000 Within 96 6.544 0.068 Total 99 15.556 Coefficient of Variation = 19.78% Bảng 27 Thời gian sống thành trùng SKL sau tiếp xúc với pheromone nấm xanh điều kiện phòng thí nghiệm (chuyển sang log10(x+1)) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 17069.416 5689.805 139.016 0.0000 Within 16 654.864 40.929 Total 19 17724.280 Coefficient of Variation = 11.24% 192 Bảng 28 Anova số lượng sùng sinh từ thành trùng sùng khoai lang qua tiếp xúc với pheromone nấm xanh điều kiện phòng thí nghiệm (chuyển sang log10(x+1)) Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 14.864 4.955 16.548 0.0000 Within 96 28.745 0.299 Total 99 43.609 Coefficient of Variation = 28.98% Bảng 29 Thành phần hóa chất môi trường SDAY3 STT Thành phần Trọng lượng (g) Pepton 10 Dextrose 40 Yeast extract NaNO3 KH2PO4 MgSO4.7H2O 0,5 Agar 20 Nước cất 100 ml pH = 6,5 Phân tích thống kê chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae nhiệt độ 250C Bảng 30: 3NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1094.097 273.524 23.299 0.0000 Within 10 117.398 11.740 Total 14 1211.495 Coefficient of Variation = 15.56% Bảng 31: 5NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 6725.897 1681.474 24.832 0.0000 Within 10 677.134 67.713 Total 14 7403.031 Coefficient of Variation = 18.79% 193 Bảng 32: 7NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 9347.552 2336.888 31.974 0.0000 Within 10 730.877 73.088 Total 14 10078.430 Coefficient of Variation = 14.74% Bảng 33: 9NKSC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8283.853 2070.963 19.332 0.0001 Within 10 1071.237 107.124 Total 14 9355.090 Coefficient of Variation = 16.78% Bảng 34: 11NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8283.773 2070.943 44.594 0.0000 Within 10 464.402 46.440 Total 14 8748.175 Coefficient of Variation = 10.31% Bảng 35: 13NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8186.885 2046.721 57.033 0.0000 Within 10 358.868 35.887 Total 14 8545.753 Coefficient of Variation = 8.98% 194 Bảng 36: 15NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8287.778 2071.944 68.126 0.0000 Within 10 304.132 30.413 Total 14 8591.910 Coefficient of Variation = 8.22% Bảng 37: Tỉ lệ mọc nấm Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 1378.618 459.539 9.247 0.0056 Within 397.581 49.698 Total 11 1776.199 Coefficient of Variation = 11.30% Phân tích thống kê chủng nấm xanh Metarhizium anisopliae nhiệt độ 300C Bảng 38: NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 2020.038 505.010 8.289 0.0032 Within 10 609.269 60.927 Total 14 2629.307 Coefficient of Variation = 28.28% Bảng 39: 5NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 7450.436 1862.609 59.432 0.0000 Within 10 313.399 31.340 Total 14 7763.836 Coefficient of Variation = 10.90% Bảng 40: 7NSKC Degrees of Sum of Mean 195 Freedom Squares Square F-value Prob Between 8310.102 2077.526 41.549 0.0000 Within 10 500.019 50.002 Total 14 8810.121 Coefficient of Variation = 12.19% Bảng 41: 9NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8373.228 2093.307 41.758 0.0000 Within 10 501.298 50.130 Total 14 8874.526 Coefficient of Variation = 11.44% Bảng 42: 11NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8353.639 2088.410 54.059 0.0000 Within 10 386.317 38.632 Total 14 8739.956 Coefficient of Variation = 9.79% Bảng 43: 13NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8416.171 2104.043 40.445 0.0000 Within 10 520.226 52.023 Total 14 8936.397 Coefficient of Variation = 11.15% Bảng 44: 15 NSKC Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 8562.806 2140.702 38.659 0.0000 Within 10 553.738 55.374 Total 14 9116.544 Coefficient of Variation = 11.10% 196 Bảng 45: Tỉ lệ mọc nấm Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 79.487 26.496 1.172 0.3790 Within 180.800 22.600 Total 11 260.287 Coefficient of Variation = 7.30% Thí nghiệm: So sánh hiệu phòng trị sùng khoai lang (C fomicarius) huyện Duyên Hải, Trà Vinh Bảng 46: T-test hai trung bình mật số SKL vào bẫy suốt vụ đợt 1: T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 0.0023 Standard Deviation of the difference: 0.0483 t Value: 0.4435 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.6729 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 47: T-test hai trung bình mật số SKL vào bẫy suốt vụ đợt 2: T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 0.0354 Standard Deviation of the difference: 0.1883 t Value: 0.1615 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.8795 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 48: T-test hai trung bình mật số SKL vào bẫy ruộng phòng trị huyện Tri Tôn T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 23.3867 Standard Deviation of the difference: 4.8360 t Value: 5.2358 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0064 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): 197 Bảng 49: T-test so sánh Tỉ lệ sùng củ VNV ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 60NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 13.8477 Standard Deviation of the difference: 3.7212 t Value: 6.1559 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0086 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 50: T-test so sánh Tỉ lệ sùng củ VNV ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 75NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 132.4093 Standard Deviation of the difference: 11.5069 t Value: 7,7566 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0051 Result: Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 51: T-test so sánh Tỉ lệ sùng củ VNV ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 60NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 9.4334 Standard Deviation of the difference: 3.0714 t Value: 5.5057 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0118 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 52: T-test so sánh Tỉ lệ sùng VNV ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 75NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 46.9774 Standard Deviation of the difference: 6.8540 t Value: 3.9809 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0284 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): 198 Bảng 53: T-test so sánh Tỉ lệ sùng VTT ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 60NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 76.7798 Standard Deviation of the difference: 8.7624 t Value: 3.7405 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0473 Result: Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 54: T-test so sánh Tỉ lệ sùng VTT ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 60NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 67.8803 Standard Deviation of the difference: 8.2389 t Value: 3.0396 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0933 Result: Non-Significant t - Accept the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 55: T-test so sánh Tỉ lệ sùng củ ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 60 NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 17.6784 Standard Deviation of the difference: 4.2046 t Value: 6.2728 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0008 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 56: T-test so sánh Tỉ lệ sùng củ ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 75NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 69.3426 Standard Deviation of the difference: 8.3272 t Value: 5.6237 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0014 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): 199 Bảng 57: T-test so sánh Tỉ lệ sùng củ ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 60NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 12.9713 Standard Deviation of the difference: 3.6016 t Value: 5.6630 Effective degrees of freedom: Probability of t: 0.0013 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): Bảng 58: T-test so sánh Tỉ lệ sùng củ ruộng huyện Tri Tôn thời điểm 75NSKT T-TEST FOR THE HYPOTHESIS "MEAN = MEAN 2" Variance of the difference between the means: 43.4168 Standard Deviation of the difference: 6.5891 t' Value: 5.7404 Effective degrees of freedom: Probability of t': 0.0012 Result: Significant t - Reject the Hypothesis Confidence limits for the difference of the means (for alpha=0.05): 200 ... tác khoai lang khảo sát côn trùng gây hại thiên địch ruộng khoai lang huyện Bình Tân, tỉnh Vĩnh Long - Nghiên cứu pheromone giới tính tổng hợp sùng khoai lang - Nghiên cứu nấm ký sinh sùng khoai. .. hóa học pheromone giới tính sùng khoai lang …… 13 2.2.2 Tổng hợp pheromone giới tính sùng khoai lang …………… 13 2.2.3 Một số kết nghiên cứu pheromone giới tính sùng khoai lang giới ………………………………………………………... pheromone giới tính phòng trị sùng khoai lang …… 23 2.3 Đặc điểm nấm ký sinh côn trùng…………………… …… 25 2.4 Ứng dụng nấm ký sinh sùng khoai lang ………………………… 28 33 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN