đánh giá hiện trạng suy thoái cam sành trồng tại b ắc quang, hà giang và một số giải pháp khắc phục

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM VŨ VĂN HIẾU ĐÁNH GIÁ HIỆN TRẠNG SUY THOÁI CAM SÀNH TRỒNG TẠI BẮC QUANG, HÀ GIANG VÀ MỘT SỐ GIẢI PHÁP KHẮC PHỤC Chuyên ngành: Khoa học trồng Mã số: 62 62 01 10 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thị Phương Thảo PGS.TS Vũ Quang Sáng NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận án trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận án cảm ơn, thông tin trích dẫn luận án ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2016 Tác giả luận án Vũ Văn Hiếu i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận án, nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hoàn thành luận án, cho phép bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thị Phương Thảo PGS.TS Vũ Quang Sáng, người thầy tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho suốt trình học tập thực đề tài Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Sinh lý thực vật, Khoa Nông học, Bộ môn Công nghệ sinh học thực vật, Khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ trình học tập, thực đề tài hoàn thành luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn tập thể Lãnh đạo Sở Nông nghiệp&PTNT tỉnh Hà Giang, Lãnh đạo Trung tâm KHKT giống trồng Đạo Đức, Lãnh đạo Trường Trung cấp KTKT tỉnh Hà Giang tạo điều kiện giúp đỡ công việc tạo điều kiện để tham gia thực chương trình phục hồi, phát triển vùng cam sành Hà Giang theo hướng hàng hóa giai đoạn 2011 – 2015 tầm nhìn 2020 Chân thành cảm ơn bạn đồng nghiệp, cán Trung tâm KHKT giống trồng Đạo Đức; cán bộ, giáo viên Trường Trung cấp Kinh tế kỹ thuật tỉnh Hà Giang nơi mà công tác nhiều năm, nơi sinh hoạt chuyên môn chia sẻ kinh nghiệm quý báu nghiên cứu giúp đỡ phương diện Xin ghi nhận nơi đầy tình cảm yêu thương vợ, con, cha mẹ, anh chị em toàn thể bạn bè, đồng nghiệp hết lòng động viên tinh thần suốt thời gian học tập hoàn thành luận án Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2016 Tác giả luận án Vũ Văn Hiếu ii MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình viii Trích yếu luận án ix Thesis abstract xi Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp luận án 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Cơ sở khoa học đề tài 2.2 Tình hình sản xuất tiêu thụ có múi nước giới 2.2.1 Tình hình sản xuất, tiêu thụ có múi giới 2.2.2 Tình hình sản xuất tiêu thụ có múi Việt Nam 2.3 Tình hình nghiên cứu tượng suy thoái có múi nước giới 2.3.1 Hiện tượng suy thoái ăn có múi 2.3.2 Những nghiên cứu nguyên nhân suy thoái 2.4 Một số kết luận rút từ phân tích tổng quan 32 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 34 3.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 34 3.1.1 Địa điểm nghiên cứu 34 3.1.2 Thời gian nghiên cứu 34 3.2 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 34 iii 3.3 Nội dung nghiên cứu 38 3.3.1 Điều tra đánh giá thực trạng suy thoái cam sành trồng Bắc Quang 38 3.3.2 Phân tích nguyên nhân suy thoái cam sành trồng Bắc Quang 38 3.3.3 Nghiên cứu số giải pháp khắc phục 38 3.4 Phương pháp nghiên cứu 39 3.4.1 Điều tra đánh giá thực trạng suy thoái cam sành Bắc Quang 39 3.4.2 Phân tích nguyên nhân suy thoái cam sành Bắc Quang 39 3.4.3 Nghiên cứu số giải pháp khắc phục 44 Phần Kết nghiên cứu thảo luận 50 4.1 Thực trạng suy thoái cam sành Bắc Quang 50 4.2 Các nguyên nhân suy thoái cam sành trồng Bắc Quang 56 4.2.1 Nguyên nhân suy thoái giống 56 4.2.2 Nguyên nhân suy thoái dinh dưỡng 63 4.2.3 Nguyên nhân suy thoái sâu, bệnh 69 4.3 Một số giải pháp khắc phục suy thoái cam sành Bắc Quang - Hà Giang 76 4.3.1 Tạo nguồn vật liệu bệnh vi ghép đỉnh sinh trưởng 76 4.3.2 Giải pháp bổ sung dinh dưỡng, tăng cường sức sinh trưởng (bổ sung phân hữu vô NPK kết hợp với phân vi lượng bón lá) 86 4.3.3 Kết nghiên cứu biện pháp phòng trừ sâu, bệnh tổng hợp 94 Phần Kết luận kiến nghị 100 5.1 Kết luận 100 5.2 Kiến nghị 101 Danh mục công trình công bố 102 Tài liệu tham khảo 103 Phần phụ lục 111 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt ADN BA Cây S0 Cây S1 Nghĩa tiếng Việt Axit Deoxyribo Nucleic 6- Benzylaminopurin Cây đầu dòng Cây nhân giống vô tính từ đầu dòng Cây S2 CEVd CT CTLV CTV CV DT ĐK HC IPM ISSR KHKT NN&PTNT MĐ MS PCR pH RFLP RAPD RCB SSR TPCG UBND VLGX α-NAA ∑ DT Cây nhân giống vô tính từ S1 Bệnh exocortis (Citrus exocortis viroid) Công thức Bệnh tatter leaf (Citrus latter leaf capillovirus) Bệnh tristeza (Citrus tristeza virus) Cam vinh Diện tích Đường kính Hữu Quản lý dịch hại tổng hợp Inter-simple sequence repeat Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp phát triển nông thôn Mẫu đất Môi trường Murashige Skoog Polymerase Chain Reaction Chỉ số đo độ hoạt động ion hiđrô (H+) dung dịch Restriction fragment length polymorphism Random amplified polymorphic DNA Bố trí khối hoàn toàn ngẫu nhiên (Randomized Complete Design) Simple sequence repeat Thành phần giới Ủy ban nhân dân Vàng gân xanh Α-Naphthalene Acetic Acid Tổng diện tích v DANH MỤC BẢNG TT Tên bảng Trang 2.1 Diện tích, suất, sản lượng có múi năm 2005 - 2013 2.2 Tính lượng vôi bón theo pH KCl thành phần giới đất 16 2.3 Thang chu n xác định mức độ dinh dưỡng qua phân tích 19 2.4 Lượng phân bón cho cam thời kỳ kinh doanh 20 3.1 Mẫu đất thu thập vùng trồng cam sành huyện Bắc Quang 34 3.2 Mẫu cam sành thu thập vùng trồng cam sành huyện Bắc Quang 35 3.3 Mẫu giống sử dụng để đánh giá đa dạng di truyền 35 3.4 Các mồi RAPD 36 3.5 Các mồi ISSR 37 3.6 Thành phần phản ứng RAPD-PCR ISSR-PCR 40 4.1 Tổng diện tích cam sành 4.2 Diện tích cam bị suy thoái trồng đất phù sa cổ 52 4.3 Diện tích cam bị suy thoái trồng đất phiến thạch mica 53 4.4 Diện tích cam bị suy thoái trồng đất phiến thạch sét 54 4.5 Diện tích cam bị suy thoái trồng đất phù sa bồi hàng năm 55 4.6 Quan hệ mức độ suy thoái với loại đất địa điểm khác 56 4.7 Quan hệ mức độ suy thoái với lứa tuổi 56 4.8 Số băng 40 mẫu nghiên cứu với thị RAPD ISSR 58 4.9 Các nhóm di truyền 40 mẫu cam thông qua phân tích kiểu gen 61 4.10 Kết điều tra tình hình áp dụng quy trình kỹ thuật chăm sóc 64 4.11 Kết phân tích mẫu đất 66 4.12 Hàm lượng nguyên tố dinh dưỡng (so với thang chu n theo xã trọng điểm phân theo lứa tuổi 51 Reuther &Smith) 67 4.13 Kết phân tích mẫu 68 4.14 Thành phần sâu bệnh mức độ gây hại cam sành Bắc Quang 70 4.15 Mức độ gây hại sâu bệnh cam sành độ tuổi khác 71 4.16 Ảnh hưởng sâu, bệnh hại đến suất cam sành 72 4.17 T lệ bị bệnh huanglongbing tristeza loại đất khác 73 4.18 Quan hệ bệnh huanglongbing lứa tuổi địa điểm khác 74 4.19 T lệ bệnh huanglongbing tristeza theo địa điểm điều tra 74 vi 4.20 T lệ bệnh huanglongbing tristeza theo lứa tuổi điều tra 74 4.21 Quan hệ bệnh Triteza lứa tuổi địa điểm khác 75 4.22 Quan hệ bệnh Huanglongbing loại đất địa điểm khác 75 4.23 T lệ bệnh huanglongbing tristeza địa điểm điều tra 75 4.24 T lệ bệnh huanglongbing tristeza loại đất khác 76 4.25 Quan hệ bệnh Triteza loại đất địa điểm khác 76 4.26 Ảnh hưởng thời gian khử trùng NaOCl 5,5% 78 4.27 Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh mẫu chồi cam sành Bắc Quang sau tuần nuôi cấy 79 4.28 Ảnh hưởng kích thước chồi ghép đến hiệu vi ghép 80 4.29 Ảnh hưởng tuổi gốc ghép đến hiệu vi ghép 81 4.30 Ảnh hưởng nồng độ đường đến hiệu vi ghép 81 4.31 Ảnh hưởng số cải tiến vi ghép đến hiệu vi ghép cam sành, Bắc Quang – Hà Giang 83 4.32 Kết vi ghép lần cam sành S0 gốc bưởi chua 83 4.33 Kết xét nghiệm S0 với hai bệnh huanglongbing tristeza 84 4.34 Ảnh hưởng phân bón đến chiều cao, đường kính tán đường kính gốc 86 4.35 Ảnh hưởng phân bón đến thời gian xuất lộc cam sành 87 4.36 Ảnh hưởng phân bón tới số lượng lộc cam sành 89 4.37 Ảnh hưởng phân bón tới chất lượng lộc cam sành 92 4.38 Ảnh hưởng phân bón đến t lệ hoa, đậu cam sành năm 2015 93 4.39 Thành phần sâu bệnh mức độ hại vườn thí nghiệm 94 4.40 Ảnh hưởng biện pháp phòng trừ sâu bệnh tổng hợp đến chiều cao cây, đường kính gốc, đường kính tán cam sành 95 4.41 Ảnh hưởng biện pháp phòng trừ sâu bệnh tổng hợp đến thời gian xuất lộc (Đơn vị: ngày/tháng) 96 4.42 Ảnh hưởng biện pháp phòng trừ sâu bệnh tổng hợp đến số lượng lộc 96 4.43 Ảnh hưởng biện pháp phòng trừ sâu bệnh tổng hợp đến chất lượng lộc 97 4.44 Thành phần sâu, bệnh hại mức độ hại 98 4.45 Mức độ tái nhiễm bệnh huanglongbing tristeza 98 vii DANH MỤC HÌNH TT Tên hình Trang 4.1 Sản ph m RAPD-PCR với mồi OPM12 OPX18 59 4.2 Sản ph m ISSR-PCR với mồi T1 T3 60 4.3 Biểu đồ quan hệ di truyền 39 mẫu cam sành Bắc Quang mẫu cam Vinh (giống Xã Đoài) 62 4.4 Sự tạo chồi từ đoạn thân mang mắt ngủ cam sành Bắc Quang 78 4.5 Chồi cam sành Bắc Quang nhân nhanh môi trường MS + mg/l BA (A) môi trường MS + mg/l BA (B) sau 4.6 tuần nuôi cấy 79 Chồi ghép cam sành Bắc Quang gốc bưởi chua (sau nảy mầm tuần) sau tuần nuôi cấy 81 4.7 Cây vi ghép cam sành Bắc Quang gốc bưởi chua sau tuần (A), tuần (B) nuôi cấy sinh trưởng phát triển sau vi ghép (C) 82 4.8 viii Cây cam sành sau ghép 20 ngày (A) cam sành sau ghép 40 ngày (B) 84 150 Hình 13 Mồi OPX1 Hình 14 Mồi OPAW19 Hình 15 Mồi OPAW11 Hình Mồi OPX110 Hình Mồi P3 Hình 18 Mồi P3 Hình 19 Mồi AK12 Hình 20 Mồi OPP05 151 152 Hình 21 Mồi OPX18 Hình 22 Mồi OPD18 Hình 23 Mồi OPA14 Hình 24 Mồi OPM12 Hình 25 Mồi OPA 15 Hình Mồi T1 Hình Mồi T2 Hình 28 Mồi T3 153 Hình 29 Mồi T4 Hình 30 Mồi T5 Phụ lục Hình ảnh cam sành mức suy thoái khác Mức suy thoái I: - Sinh trưởng có tượng suy giảm - Vẫn cho suất (cho suất > 15 kg/cây thời kỳ kinh doanh) Hình Hình ảnh cam sành mức suy thoái I 154 Mức suy thoái II: - Cây sinh trưởng kém, nhỏ, cành - Năng suất thấp (cho suất từ 10 - 14 kg/cây thời kỳ kinh doanh) - T lệ chai, mo, xi măng lớn Hình Hình ảnh cam sành mức suy thoái II Mức suy thoái III: - Cây sinh trưởng kém, còi cọc, cành - Không cho suất ho c lác đác vài - Quả chai, mo, xi măng không sử dụng Hình Hình ảnh cam sành mức suy thoái III 155 Phụ lục : M t số hình ảnh điều tra ây ựng mô hình Hình ảnh thu thập mẫu đất Thực trồng cam mô hình 156 Chu n bị phân bón trồng cam Mô hình cam sau trồng năm Phụ lục Diễn biến thời tiết, khí hậu huyện Bắc Quang 2011 – 2015 - Lượng mưa tháng năm huyện Bắc Quang Năm 2011 Năm 2012 Năm 2013 Năm 2014 Năm 2015 Cả năm 3703,3 4338,3 4118,6 3934,6 3181,5 Tháng 64,7 25,0 59,5 97,4 49,5 Tháng 42,0 55,7 42,2 10,4 34,8 Tháng 168,8 60,1 65,1 26,3 116,7 Tháng 114,1 240,1 422,9 200,3 142,3 Tháng 748,9 629,2 738,0 364,2 383,3 Tháng 1091,2 842,6 786,8 755,8 875,5 Tháng 464,0 610,9 893,6 1083,5 676,8 Tháng 480,3 1063,4 506,0 405,3 259,1 Tháng 140,2 455,0 332,2 530,1 356,8 Tháng 10 82,0 191,7 178,4 209,4 156,5 Tháng 11 267,0 131,0 38,4 56,2 115,0 Tháng 12 40,1 33,6 55,5 195,7 15,2 Tháng - Số nắng tháng năm huyện Bắc Quang Tháng Cả năm Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng Tháng 10 Tháng 11 Tháng 12 Năm 2011 1446,3 39,4 46,7 66,0 93,2 220,1 132,1 215,8 134,6 190,8 134,0 98,2 75,4 Năm 2012 1180,2 55,3 14,3 65,9 77,1 129,1 105,3 139,0 121,0 195,6 86,3 109,6 81,7 Năm 2013 1376,1 61,7 91,7 66,5 83,2 109,8 135,5 140,0 236,0 191,9 92,6 107,1 60,1 Năm 2014 1286,6 52,5 105,8 47,0 94,3 128,9 98,7 161,0 162,2 153,0 118,0 107,7 57,5 Năm 2015 1083,1 17,5 17,4 18,5 49,0 143,0 123,0 164,6 168,1 121,6 82,5 137,9 57,5 157 - Ẩm độ trung bình tháng năm huyện Bắc Quang Tháng Năm 2011 Năm 2012 Năm 2013 Năm 2014 Năm 2015 Cả năm 23,1 22,6 23,4 23,8 22,4 Tháng 15,7 14,6 14,6 18,1 12,5 Tháng 17,1 13,0 21,6 19,9 17,4 Tháng 18,7 20,5 21,0 21,5 16,9 Tháng 23,6 24,5 23,9 23,9 22,8 Tháng 28,1 26,0 25,8 27,8 25,7 Tháng 28,3 27,3 28,0 28,5 28,1 Tháng 28,1 27,7 28,0 28,7 28,8 Tháng 27,6 27,7 28,5 27,9 28,0 Tháng 27,1 27,3 27,4 27,1 26,7 Tháng 10 24,3 25,2 25,3 24,5 23,8 Tháng 11 21,4 19,7 19,7 19,6 21,5 Tháng 12 16,1 16,6 18,1 17,6 16,2 158 Phục lục Quy trình trồng trọt chống tái nhiễm cam sành (1) Chuẩn bị giống: Giống cam sành sử dụng giống cam sành bệnh huanglongbing tristeza nhân từ mẹ bệnh (2) Chuẩn bị đất: - Chọn đất: Đất đồi rừng khai phá, đất bồi tụ, đất bãi ven sông, suối, đất nhiều mùn chất dinh dưỡng, cao ráo, dễ thoát nước, có tầng dầy từ 80 - 100cm, mực nước ngầm sâu 1m, độ dốc đất từ - 20o (tốt - 80), độ pH thích hợp 5,5 - 6,0 - Phát dọn cỏ dại, thực bì: Cần dọn cỏ dại, thực bì sau để khô, dọn khỏi vườn trồng cam ho c thu gom thành luống dọc theo hàng cam tiến hành tiêu hủy (3) Thiết kế vườn trồng Tuỳ theo quy mô diện tích địa hình đất mà có thiết kế vườn trồng cách phù hợp - Đối với đất ho c có độ dốc từ – 50 nên bố trí theo kiểu hình vuông, hình chữ nhật ho c hình tam giác (kiểu nanh sấu) - Đất có độ dốc từ – 100 phải trồng theo đường đồng mức, khoảng cách hàng khoảng cách đường đồng mức độ dốc –100, nên thiết kế đường đồng mức theo kiểu bậc thang đơn giản; 80 áp dụng biện pháp làm đất tối thiểu; 100 phải thiết kế đường đồng mức theo kiểu bậc thang kiên cố - Đối với vườn diện tích nhỏ 1ha, không cần phải thiết kế đường giao thông, song với diện tích lớn chí tới 5-10 cần phải phân thành lô nhỏ có diện tích từ 0,5 đến 1ha/lô có đường giao thông rộng để vận chuyển vật tư phân bón sản ph m thu hoạch xe giới, đ c biệt đất dốc cần phải bố trí đường lên, xuống đường liên đồi Độ dốc đường lên đồi không 100 (4) Mật độ, khoảng cách - ật độ, khoảng cách trồng: Mật độ trồng 500 cây/ha, tương ứng với khoảng cách x m - Đào hố: Kích thước hố 70 x 70 x 70cm - Bón lót: Toàn đất đào lên trộn với 50 kg phân hữu + kg 159 vôi bột + 0,5 kg phân supe lân + kg NPK Lấp hố trước trồng 15 - 20 ngày (5) Thời vụ kỹ thuật trồng - Thời v trồng: + Vụ xuân trồng vào tháng - + Vụ thu trồng vào tháng - 10 - Cách trồng: Cuốc l hố trồng, đ t theo chiều th ng đứng, m t bầu cao m t đất trồng - 5cm, lấp kín đất, vun gốc thành ụ cao m t đất 10 - 15cm Cắm cọc giữ khỏi bị gió lay, tưới đậm nước, dùng rơm, cỏ mục ủ gốc giữ m (6) Chăm sóc sau trồng - Quản lý cỏ ại: Ngoài thời gian trồng xen có m t vườn, vườn làm cỏ, vùng gốc để loại bỏ loại sâu, bệnh công vào gốc - Trồng xen: Có thể sử dụng trồng xen lạc - C t tỉa tạo hình: Cắt tỉa tạo hình theo kiểu bán cầu Thường xuyên cắt tỉa cành tăm, cành vượt, cành mọc xiên tán để điều chỉnh tán cân đối tạo cho vườn thông thoáng - Tư i nư c: Cần giữ đủ m, tiến hành tủ gốc rơm, rạ… - Bón phân + Lượng phân bón hàng năm cho sau: Bón 50 kg phân hữu hoai m c kết hợp v i phân bón NPK tổng hợp 13:13:13 + TE nhãn hiệu Đ u Trâu 2kg/cây sau trồng năm thứ nhất; kg cho trồng năm thứ + Thời k bón: - L n (tháng 2): Bón 1kg (năm 2013), 1, kg (năm 201 ) + phun phân bón Đ u Trâu 502 sau bón 10 ngày - L n (tháng ): Bón 0,7 kg (năm 2013), 1kg (năm 201 ) + phun phân bón Đ u Trâu 502 hai l n sau bón 10 ngày, l n phun cách 10 ngày - L n (tháng 8): Bón 0,7 kg (năm 2013), 0,8kg (năm 201 ) + phun phân bón Đ u Trâu 502 hai l n sau bón 10 ngày, l n phun cách 10 ngày - L n (tháng 11): Bón 0,6 kg (năm 2013), 0,7kg (năm 201 ) + 100% phân hữu + 100% vôi bột + phun phân bón Đ u Trâu 502 hai l n sau bón 10 ngày, l n phun cách nhau10 ngày 160 Cách bón phân: Bón theo tán cây: rạch rãnh ung uanh tán, sâu 7-10cm, r c phân vào rãnh, lấp đất (7) Ph ng tr sâu bệnh hại + Trên vườn mô h nh thường uyên tiến hành kiểm tra có bị nhiễm bệnh s loại bỏ + Sử ng biện pháp học vật lý để phòng trừ sâu bệnh như: Sử ng bẫy, bả sử ng biện pháp tư i nư c áp suất cao lên chồi non mùa nóng để hạn chế bọ trĩ, rệp sáp sâu ăn + Sử d ng biện pháp hoá học c n thiết, không phun định k Thực sử d ng thuốc: thuốc, lúc, li u lượng, nồng độ, cách (8) Thu hái bảo quản - Khi vỏ chuyển sang mầu xanh vàng ho c màu vàng thu hái Chọn ngày khô ráo, dùng kéo cắt để cuống dài > 5cm ho c cắt sát cuống Thu hái nhẹ nhàng, xếp vào hộp, thùng catton xây xước, dập vỡ loại riêng không bảo quản - Không nên giữ lâu làm ảnh hưởng tới sinh trưởng, phát triển suất vụ sau./ 161 Phụ lục Đặc điểm phát sinh triệu chứng bệnh huanglongbing tristeza STT Tên sâu bệnh Đặc điểm phát sinh, triệu chứng Bệnh vân vàng Lúc đầu, triệu chứng bệnh xuất số cành lộc, sau lan sang cành khác toàn huanglongbing Trên già có đốm vàng loang lổ Triệu chứng phổ biến bị bệnh lộc nhỏ lại, phiến chuyển sang màu vàng, gân giữ màu xanh Cây bị bệnh n ng có nhỏ, mọc th ng đứng chủ yếu gân xanh Cây bị bệnh hoa trái vụ Ngoài triệu chứng gân bị sưng ghi nhận Quả bị bệnh thường nhỏ, biến dạng, vỏ dày, vỏ chín phần xanh Múi bị khô sượng, tép có vị đắng, hạt thui lép không phát triển, màu nâu Bổ dọc thấy tâm bị lệch vẹo Rễ bị bệnh bị thoái hóa, lượng rễ không hút dinh dưỡng để nuôi Bệnh 162 lụi Cây bị bệnh thường có toàn bị vàng, cằn c i, nhỏ, nụ hoa bị rụng nhiều Cây bị (bệnh Tristeza) bệnh cho nhỏ, dị hình, khô nước Cây bị bệnh tristeza sớm bị tàn lụi tàn Phụ lục 10 Quy trình công nghệ sản xuất giống có múi bệnh (Theo Cục trồng trọt, B Nông nghiệp PTNT) Nguyên lý chung: Nguyên tắc làm bệnh phương pháp dựa vào đ c điểm lây lan bệnh vàng gân xanh (VLGX) bệnh virus, viroid có múi: + Bệnh lan truyền theo mạch dẫn + Bệnh không lây lan qua hạt Đỉnh sinh trưởng gồm mô phân sinh chưa hình thành mạch dẫn bệnh Ghép mảnh mô phân sinh lên mầm mọc từ hạt nhận bệnh Cách ghép thực phòng thí nghiệm kính hiển vi mảnh ghép mô phân sinh có kích cỡ nhỏ 100 - 150 nanomet (100 150 phần nghìn mét) gốc ghép đoạn mầm mọc từ hạt nuôi ống nghiệm Vi ghép thực điều kiện vô trùng nên hoàn toàn bệnh Kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh trưởng (Microshoot tip grafting) Murashige áp dụng lần vào năm 19 sau cải tiến hoàn chỉnh Navarro 1975, 1976, 1980, 1981 Hong Ji Su 1984 Kỹ thuật vi ghép đỉnh sinh trưởng bao gồm giai đoạn: chu n bị gốc ghép, chu n bị đỉnh sinh trưởng, vi ghép nuôi ống nghiệm sau đem trồng chậu Các bước thực hiện: - Chuẩn bị gốc ghép l n 1: + Xử lý hạt để gieo làm gốc ghép: lấy hạt giống cam bưởi chua, bóc vỏ khử trùng dung dịch Javel 1% phút + Hạt gieo môi trường thạch có chứa chất dinh dưỡng (môi trường MS) ống nghiệm đ t buồng tối nhiệt độ 28oC + Tiêu chu n gốc ghép: chiều cao 10 - 12cm, đường kính thân 1,5 - mm - Chu n bị đỉnh sinh trưởng: Đỉnh sinh trưởng lấy từ chồi non giống gốc tuyển chọn vườn sản xuất hay nhà lưới cách ly Sau thu chồi non, tỉa to xung quanh, giữ lại phần chồi dài khoảng 1,5cm 163 - K thuật vi ghép: + Cây giống cần làm Tỉa xung quanh Cắt đỉnh sinh trưởng Vị trí đ t đỉnh sinh trưởng bệnh Sau 10 ngày tỉa lá, gốc ghép chồi non mọc + Cây gốc ghép 15 ngày tuổi lấy khỏi ống nghiệm, cắt phía cách cổ rễ - 2,5cm; rễ cọc cắt bớt để lại - 5cm + Dùng dao vi ghép kính lúp soi để mở miệng ghép gốc ghép, phải thận trọng để tầng sinh g không bị tổn thương + Đỉnh sinh trưởng phần mô phân sinh dài khoảng 100 - 150 nm, dùng dao lưỡi mỏng cắt đ t nhanh vào vị trí ghép gốc ghép + Cây sau vi ghép đ t ống nghiệm có sẵn môi trưởng lỏng (môi trường MS + đường saccaro) Cây bảo quản nhiệt độ 28oC, cường độ ánh sáng 1000 lux 16 hàng ngày đèn huỳnh quang + Sau tuần dùng kính lúp để kiểm tra xem chồi ghép có sống không Nếu chồi ghép sống, tháng sau có thêm mới, đạt tiêu chu n ghép lần thứ - K thuật ghép l n Sau ghép lần 2, bao chùm túi nilon khoảng tuần Nếu ghép sống, chuyển chậu to bảo quản nhà lưới chống côn trùng - Những sau vi ghép chăm sóc đầy đủ giám định bệnh kỹ thuật PCR, ELISA 164 ... tra đánh giá thực trạng suy thoái cam sành trồng B c Quang 38 3.3.2 Phân tích nguyên nhân suy thoái cam sành trồng B c Quang 38 3.3.3 Nghiên cứu số giải pháp khắc phục 38 3.4 Phương pháp. .. nhân suy thoái sâu, b nh 69 4.3 Một số giải pháp khắc phục suy thoái cam sành B c Quang - Hà Giang 76 4.3.1 Tạo nguồn vật liệu b nh vi ghép đỉnh sinh trưởng 76 4.3.2 Giải pháp b ... suy thoái cam sành trồng B c Quang từ đề xuất số giải pháp khôi phục phát triển b n vững cam sành B c Quang nói riêng Hà Giang nói chung 1.2.2 Mục tiêu cụ thể - Phân tích, đánh giá trạng suy thoái