đặc tính sinh hóa và môi trường chromagar phát hiện stec (shiga toxin producing e coli)

Phân tích nhanh chất lượng thực phẩm ĐẶC TÍNH SINH HĨA VÀ MƠI TRƯỜNG CHROMAGAR PHÁT HIỆN STEC (SHIGATOXIN PRODUCING E COLI) Nhóm SV : Nguyễn Thị Vân Cúc 20130461 Trương Thị Thu 20133826 Mạc Thị Lâm 20132202 Hồ Thị Lan 20132181 ĐẶC TÍNH SINH HĨA CỦA E.COLI Trực khuẩn đường ruột  Gram (-), không tạo bào tử  Yếm khí khơng bắt buộc  Lên men lactoza, sinh khí  Khử Nitrat → Nitrit  Chịu nhiệt, nhiệt độ thích hợp 4244°C  pH 7-7,2  Bền với phenol 0,085%  Sinh indol 42-44°C  Tạo độc tố mạnh  Có thể di động khơng di động  ĐẶC TÍNH SINH HĨA CỦA E.COLI  Được thải môi trường theo phân, chiếm tới 80% VK hiếu khí ruột giữ cân sinh thái nên E.coli chọn làm VSV thị ô nhiễm => dùng để đánh giá mức độ vệ sinh nhà xưởng STEC ( SHIGA-TOXIN PRODUCING E.COLI)  EHEC áp dụng vi khuẩn Verotoxigenic E.coli (VTEC)  Độc tố tạo verotoxin (Shiga like toxin), có loại: • VT-1: Shiga like toxin (SLT1) • VT-2: Shiga like toxin (SLT2) STEC ( SHIGA-TOXIN PRODUCING E.COLI)  STEC gây số bệnh tiêu chảy, xuất huyết, viêm đại tràng, tượng tán huyết Ure  Có 60 chủng STEC gây tiêu chảy, chủng O157:H7 chủng nguy hiểm nhất, ngồi cịn có chủng O26, O103, O111, O145… ĐẶC TÍNH SINH HÓA CỦA STEC Ecoli STEC Coliform Proteus / Morganella & Providencia spp E.Coli thường ß-Glucosidase - + + - +/- α- Galactosidase + +/- - + +/- Gram + STEC ( SHIGA-TOXIN PRODUCING E.COLI)  Quá - trình phát STEC: B1: Tiêm mẫu: Cho mẫu thực phẩm môi trường cần phân tích vào mơi trường có chứa tellurit chất tạo màu - B2: Nuôi cấy điều kiện thích hợp: 37°C 18-24h - B3: Quan sát khuẩn lạc xác định STEC MÔI TRƯỜNG CHROMAGAR PHÂN TÍCH STEC Thành phần Thạch Pepton cao nấm men Muối (NaCl) Mag-alpha-galactoside X-glucoside Tellurite Natri deoxycholate pH: 6,9 ± 0,2 Lượng 15g 8g 5g 0,01g / L 0,01g / L 0,0025 g / l 1g/l Thành phần Tác dụng Thạch Làm rắn môi trường Pepton Là nguồn cung cấp dinh dưỡng axit amin cho sinh trưởng phát triển VSV Cao nấm men Chứa hỗn hợp amino axit, peptit, vitamin tan nước cacbohydrat, nguồn dinh dưỡng cho vi khuẩn Muối (NaCl) Làm tăng khả thẩm thấu màng tế bào Kali tellurit (K2TeO3) Ức chế số vi khuẩn gram – (một số loại Coliforms, E.coli thường, Proteus spp, Morganella morganii…) Natri deoxycholate Ức chế loại vi khuẩn gram + Thành phần Tác dụng X-glucoside (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-Dglucopyranoside) Là chất tạo màu Nhận biết vi khuẩn khác STEC không bị ức chế môi trường tạo khuẩn lạc màu xanh Mag-alpha-galactoside (5-Bromo-6-chloro-3-indoxyl-alpha-Dgalactopyranoside) Là chất tạo màu Nhận biết vi khuẩn STEC tạo màu magenta CƠ CHẾ TẠO MÀU Cơ chất thí nghiệm là: 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-Dglucopyranoside (X-glucoside) 5-Bromo-6-chloro-3-indoxyl-alpha-Dgalactopyranoside (Mag-alpha-galactoside)  Dưới tác dụng enzyme β-Glucosidase, X-glucoside bị thủy phân Màu xanh  Dưới tác dụng enzyme α-Galactosidase, mag-α-glucoside bị thủy phân Màu magenta CƠ CHẾ TẠO MÀU PHÁT HIỆN STEC - Phần lớn nhóm E.coli sản sinh Shiga like toxin có khuẩn lạc màu tím hoa cà - Các nhóm Enterobacteriacae khác tạo khuẩn lạc không màu, màu xanh bị ức chế - Các vi khuẩn Gram dương bị ức chế Vi khuẩn Màu khuẩn lạc E coli O157 H7 Tím E coli O26 Tím E coil O103 Tím E coli O111 Tím Klebsiella Xanh da trời Proteus AR3919 Xanh Enterobacter — E coli AR3740* — cloacae ND36* Bị ức chế Proteus AR5075 Nâu ... nên E. coli chọn làm VSV thị ô nhiễm => dùng để đánh giá mức độ vệ sinh nhà xưởng STEC ( SHIGA -TOXIN PRODUCING E. COLI)  EHEC áp dụng vi khuẩn Verotoxigenic E. coli (VTEC)  Độc tố tạo verotoxin (Shiga. ..  Độc tố tạo verotoxin (Shiga like toxin) , có loại: • VT-1: Shiga like toxin (SLT1) • VT-2: Shiga like toxin (SLT2) STEC ( SHIGA -TOXIN PRODUCING E. COLI)  STEC gây số bệnh tiêu chảy, xuất huyết,... Ure  Có 60 chủng STEC gây tiêu chảy, chủng O157:H7 chủng nguy hiểm nhất, ngồi cịn có chủng O26, O103, O111, O145… ĐẶC TÍNH SINH HĨA CỦA STEC Ecoli STEC Coliform Proteus / Morganella & Providencia