BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRUONG DAI HOC CAN THƠ
KHOA CONG NGHE
LUAN VAN TOT NGHIEP DAI HOC
KHAO SAT THANH PHAN HOA HOC
CUA HAT CAU ARECA CATECQHU L
CAN BO HUONG DAN SINH VIEN THUC HIEN
Ts Lê Thanh Phước Nguyễn Hữu Thịnh
MSSV: 2064012
Ngành: Công Nghệ Hóa Học-Khóa 32
Tháng 12/2010
Trang 2LỜI CẢM ƠN cealllso
Sau khoảng thời gian bốn tháng làm việc tại phịng thí nghiệm Hóa hữu cơ, khoa
Khoa học Tự nhiên, tuy có nhiều vất vả, khó khăn và giờ đây em cũng đã đạt được một số kết quả nhất định Qua đây, em xin gửi lời cám ơn chân thành đến toàn thể quý thầy cô Bộ môn Công nghệ Hóa học, khoa Cơng nghệ và Bộ mơn Hóa, khoa Khoa học Tự nhiên, cám ơn các thầy cô đã dạy dỗ, truyền đạt cho em những kiến thức vô cùng bồ ích trong bốn năm học tại trường Đây là hành trang quý báu giúp em khơng chỉ hồn thành tốt luận văn tốt nghiệp này mà còn giúp em thêm vững tin tiếp bước trên con đường sự nghiệp sắp tới của mình
Đặc biệt, em xin gửi lời biết ơn chân thành và sâu sắc đến thầy Lê Thanh Phước,
thầy đã tận tình giúp đỡ, dạy bảo, động viên em trong suốt thời gian thực hiện đề tài
Thầy đã truyền đạt, tạo điều kiện cho em hiểu biết thêm về chuyên ngành Hóa học hợp
chất thiên nhiên, kiến thức Phổ nghiệm, những lĩnh vực hoàn toàn mới với sinh viên
Cơng nghệ Hóa chúng em
Đồng thời, em xin gửi lời cám ơn đến thầy Võ Hồng Thái, cô Bùi Thị Bửu Huê,
cô Tôn Nữ Liên Hương, thầy Lương Huỳnh Vũ Thanh, thày Phạm Quốc Nhiên đã
tạo cho em điều kiện làm việc tốt nhất để hoàn thành luận văn tốt nghiệp này
Em cũng xin gửi lời cám ơn đến anh Bành Nguyễn Anh Hào, học viên cao học
khóa 16, cùng các bạn cử nhân Hóa khóa 32 đã tận tình giúp đỡ, chia sẽ những kinh nghiệm quý báu trong suốt thời gian thực hiện đề tài
Và em xin gửi lời cám ơn đến gia đình, bạn bè đã luôn bên cạnh động viên, giúp đỡ em về vật chất và tinh thần để đạt được kết quả như ngày hôm nay
Trang 3Trường Đại Học Cần Thơ Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam
Khoa Công Nghệ Độc lập - Tự do - Hạnh phúc Bộ môn: Công nghệ hóa học Cần Thơ ngày tháng năm 2010
NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN
1 Cán bộ hướng dẫn: 7s Lê Thanh Phước
2 Tên đề tài: Khảo sát thành phần hóa học của hạt Cau Áreca cafechu L 3 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Hữu Thịnh MSSV:2064012
Lớp Cơng Nghệ Hóa Học - Khóa 32 4 Nội dung nhận xét:
a Nhận xét về hình thức luận văn tốt nghiệp:
b Nhận xét về nội dung luận văn tốt nghiệp:
se Dánh giá nội dung thực hiện để tỒi: LH HH TH nghe
Cần Thơ,ngày tháng năm 2010
Trang 4Trường Đại Học Cần Thơ Cộng Hòa Xã Hội Chủ Nghĩa Việt Nam
Khoa Công Nghệ Độc lập - Tự do - Hạnh phúc Bộ mơn: Cơng nghệ hóa học Cần Thơ ngày tháng năm 2010
NHẬN XÉT VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN
1 Cán bộ hướng dẫn: 7s Lê Thanh Phước
2 Tên đề tài: Khảo sát thành phần hóa học của hạt Cau Áreca cafechu L 3 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Hữu Thịnh MSSV:2064012
Lớp Cơng Nghệ Hóa Học - Khóa 32 4 Nội dung nhận xét:
a Nhận xét về hình thức luận văn tốt nghiệp:
b Nhận xét về nội dung luận văn tốt nghiệp:
se Dánh giá nội dung thực hiện để tỒi: LH HH TH nghe
Trang 5LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
TÓM TẮT LUẬN VĂN
Cây Cau, tên danh pháp khoa học là Areca cafechw L., là loại cây được trồng phố biến ở nhiều miền quê Việt Nam, hạt Cau là bộ phận có nhiều ứng dụng quan trọng nhưng trong thực tế các công trình nghiên cứu trước đây về quá trình chiết, tách hay xác định thành phần hoá học, cấu trúc của các hợp chất chính trong hạt Cau rất ít và chưa hệ thống Theo các nghiên cứu khoa học trước đây thì thành phần hóa học của hạt cau gồm một lượng lớn tannin, hợp chất có khả năng kháng oxy hóa cao và đang được nghiên cứu nhiều trên thế giới Ngồi ra cịn có các thành phần béo như lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, phtalic acid, Tuy nhiên hoạt chất
chính là 4 alkaloid, hàm lượng 2.38 mg/g: chủ yếu là arecoline (CaH¡:NO;), arecaidine (C;H;¡¡NO;), một lượng nhỏ guvacine (CaHsNO;), guvacoline (C;H¡¡NO;), đây là
những hợp chất có dược tính cao và được dùng để điều trị một số bệnh liên quan đến miệng, bệnh huyết áp và tiêu hóa Do đó, trong phạm vi bài báo cáo này, chúng tôi sẽ tập trung nghiên cứu quy trình tách chiết nhằm thu tannin và alkaloid toàn phần, đồng thời xác định hàm lượng và thành phân các alkaloid trong hạt Cau
Trang 6
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
MỤC LỤC
Churong 1 TONG QUAN 2c 33 3E 2E SESEEEEEEEEErkrkrkerrrrrkrrrrrree 1
1.1 Khái quát vỀ họ Cau . 2 S3 3x S33 ST TT 1 TT HH Ty g ryg 1 1.2 Đặc tính thực vật của cây Cau L1 ng TH» ng ng ng kế 2
1.2.1 Phân loại khoa hỌC - cc ng ng ng ng cv ven 2 1.2.2 Đặc tính thực Vật - -cc cn ĐH ng nh ng ng yyn 2
1.2.3 Phân bố và sinh thái tt St tình hư 4
1.2.4 Cơng dụng của hạt CaU - c1 11v kh 5
1.2.5 Thành phần hóa học của hạt Cau ¿- 2-5: 252k E*‡E‡E+E£EsEsEzsrxrkrsee 9
1.3 Khái quát VỀ faiTI 5 - s13 E9 SE TT Tư TT hy) 14
IENNuro.oov ni 14
1.3.2 Các phương pháp loại fann1n: an vn ưu 16
54:00:10 /71‹i9 0 17
1.4.1 Khi nIỆm - - - c + nn S393 Ỳ ky chu cv, 17
1.4.2 Danh pháp - - - c9 Hy ng ng nọ kh kh ngà 17
1.4.3 Phân bố alkaloid ¿- 2-2 t2EitrtEtrritritrirrrrirrirri 17
1.4.4 Sự phân bố alkaloid trong tô chức cây -. ¿5c sxsscxvscve 18 1.4.5 Cần trúc và phân loại alkalOid - - ¿- ¿+ + E33 **£E£E£££Evrxrkrkrkri 19 1.4.6 Tính chất chung của alkalOid -¿- ¿2 + E33 **£EEE‡‡E£EexrErkreei 22
1.4.6.1 LY tinh 6d da 22
1.4.6.2 Hóa tính G11 TH ng ng TH HH nh 23
1.4.7 Tách chiết alkaloid - c2 rrtrtHerrrrirrririie 24
1.4.7.1 Nguyên tắc lựa chọn dung môi + - + s££s£svsrzerxsreszsez 24
1.4.7.2 Tach chiét alkaloid 00 c.scsesssssesssessssseseesssssesnesnsensssneensenseessneenenns 24
1.5 Phương pháp tách chiết các hợp chất ra khỏi cây cỎỏ - 5 xxx 29 1.5.1 Kỹ thuật chiết lỏng-]ỏngg ¿c1 33 3x3, 29
1.5.2 Kỹ thuật chiết rắn-lỏngg ¿6 St s33 11v 3E TETkEkEEEEEEkrkrkrerkrkrrrers 30 1.5.2.1 Kỹ thuật chiết ngâm dầm + - + 13v 33 SE crvrverkra 30
1.5.2.2 Kỹ thuật chiết bằng máy chiết Soxhlet sess s2 32
Chương2_ PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35
2.1 Địa điểm và thời gian nghiên CỨU - c5 + E1 333 S3 EEEESEEkEEExEkekrerkrxrkra 35
Trang 7
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
2.2 Phương tiện nghiÊn CỨU 1 1111100030111 31 9 010 10 11 1 kg kg nh nh 35 “⁄Wy ¡[-¡ i0 0 3 35
2.2.2 Hóa chất và thiết bị thí nghiệm - - 2 t2 3v SE šEsE+keE re rrree 36
2.2.2.1 Hóa chất tt HH H21 rriio 36
2.2.2.2 Dụng cụ và thiết bị thí nghiệm .- ¿SE cv rreei 36
2.3 Phương pháp nghiên CỨU c1 1 1 ng kg hen 37
2.3.1 Thu hái và xử lý mẫu . ¿- ¿k1 SE xxx RE H Hi ryt 37
2.3.2 Phương pháp xác định độ âm hạt Cau -¿- ¿2-2 2x3 xe rexd 37 2.3.3 Thu và định lượng béo trong hạt Cau c1 vs 37
2.3.4 Khảo sát tỷ lệ thể tích cao tổng và nước thu tannin cực đại 37
2.3.5 Tách chiết và định lượng alkaloid toàn phần .- ¿5s xxx ssc+2 38
2.3.6 Phương pháp sắc ký-khối phố - - s33 33 ng rerkeo 38
Chương3 KẾT QUÁ THUC NGHIỆM VÀ THẢO LUẬN - 40
3.1 Thu hái và xử lý mẫu .- +: - 211213 E1 1 E31 ExExEEEHn HYnhvrxrnrhưyp 40
3.2 Xác định độ âm hạt Cau - 5 2t tt tEEEtrtrrtttrrtrrrrrrrrrrrtrrrriee 41
3.3 Xác định hàm lượng tannin trong hạt Cau .- n1 kg 41 3.3.1 Khảo sát hàm lượng tannin trong hạt Cau xanh .-. -s« xxx s+<++ 42
3.3.1.1 Xác định tỷ lệ thể tích cao tong va nuoc tua tannin cuc dal 43 3.3.1.2 Định lượng tannin trong hạt Cau xanh « s «+ +++s++sss+s 44
3.3.2 Khảo sát hàm lượng tannn trong hạt Cau gl1à 757cc <<sx << 44
3.3.2.1 Xác định tỷ lệ thể tích cao tổng và nước tủa tannin cực đại 44
3.3.2.2 Định lượng tannin trong hạt Cau gl1à -.- «5+ s+<++ssssssss 46 3.4 Tách chiết alkaloid trong hạt Cau già - - - + SE EEEEEEkekrEkkrrrrrerree 48
3.4.1 Tách chiết alkaloid trong hạt Cau già . ¿5-2 xxx +Ezsrrverreri 48
3.4.2 Dinh tinh alkaloid toàn phan thu ẨƯỢC c2 52
3.4.3 Két qua GC-MS cececcscsssscscsesscsssessssssvsvsvsvsssssessssssvsssssesevavscssassavens 53
3.4.4 Định lượng alkaloid toàn phần trong hạt Cau già - - s5: 65 3.4.5 Định lượng alkaloid toàn phần trong hạt Cau xanh - 55c: 66
Chương 4 KẾT LUẬN -:-L- E3 333v TT ng nh rkp 67 Chương 5_ KIÊN NGHỊ ¿ L :52 S31 313111315 E111 1111k rrryto 68
IV.100)2000:7.10.4:7.0 1 70
Trang 8
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TAT
PE MeOH DCM EtOH Ea TLC GC-MS Petroleum ether Methanol Dichloromethane Ethanol Ethyl acetate
Thin Layer Chromatography
Gas chromatography mass spectrometry
Trang 9
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
DANH MUC CAC BANG
Bang 1 Alkaloid cé N 6 dị vòng
Bảng 2 Gia tri pK, cua một s6 alkaloid Bang 3 Số liệu tia tannin cia hat Cau xanh
Bảng 4 Số liệu tủa tannin trong trong 2 mL cao tổng hạt Cau xanh
Bảng 5 Số liệu tủa tannin của hạt Cau già
Bảng 6 Số liệu tủa tannin trong 2.5 mL cao tổng hạt Cau già Bảng 7 Cơ chế phân mảnh của arecoline
Bảng 8 Cơ chế phân mảnh của guvacoline Bảng 9 Cơ chế phân mảnh của methyl nicotinate
Bảng 10 Cơ chế phân mảnh của ethyl N-methyl-1,2,5,6-tetrahydro-pyridine- 3-carboxylate
Bảng 11 Cơ chế phân mảnh của guvacine
Bảng 12 Cơ chế phân mảnh của arecaidine
DANH MỤC CÁC SƠ ĐỎ
Sơ đồ 1 Quy trình nghiên cứu tách chiết tannin, alkaloid toàn phần trong hạt Cau Sơ đồ 2 Quy trình tách chiết tannin, alkaloid toàn phân trong hạt Cau
Trang 19 24 45 46 47 48 56 58 60 62 64 66 69
Trang 10LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
DANH MỤC CÁC HÌNH
Trang
Hình 1 Một số loài cây thuộc họ Cau 1
Hinh 2 Hoa Cau, hat Cau, trai Cau 2
Hinh 3 Cay Cau vuon tai Hau Giang 3
Hinh 4 Cay Cau lin 3
Hinh 5 Cây Cau rừng 4
Hình 6 Kỹ thuật chiết lỏng-lỏng 30
Hình 7 Kỹ thuật chiết ngâm dầm 32
Hinh 8 Chiét bang may Soxhlet 33
Hình 9 Địa điểm thu hái, buồng Cau 36
Hình 10 Hạt Cau sau khi tách vỏ, hạt Cau khơ 36
Hình 11 Máy sắc ký khí-khối phơ 39
Hình 12 Nguyên liệu hạt Cau xanh, hạt Cau già 41
Hình 13 Hạt Cau trước và sau khi phơi khơ 41
Hình 14 Hệ thống chiết Soxhlet 43
Hình 15 Ngâm dầm hạt Cau đã loại béo 44 Hình 16 Tua tannin trong 2.0 mL cao tong 46
Hinh 17 Tua tannin trong 250 mL cao tong 48
Hình 18 Định tính tannin bằng thuốc thử Gelatin mặn 49
Hình 19 Định tính tannin bằng thuốc thử Stiasny 49
Hình 20 Chiết cao tổng với hệ dung mơi DCM:Ea 50
Hình 21 Lắc dịch chiết với dung dịch H;ạSOx 2% 51
Hình 22 Lắc dịch chiết nước acid với hệ dung môi DCM:Ea 52
Trang 11LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
Hinh 23 Alkaloid toan phan thu duoc giri do GC-MS 52
Hình 24 Định tính alkaloid bằng thuốc thử Dragendorff 53
Hình 25 Định tính alkaloid bằng thuốc thử Wagner 53
Hình 26 Định tính alkaloid bằng thuốc thử Mayer 53
Hình 27 Sắc ký đồ GC sản phẩm chiết hạt Cau già 54
Hình 28 Thành phần hóa học alkaloid tồn phần 54
Hình 29 Alkaloid toàn phần hạt Cau xanh gửi đo GC-MS 66
DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC
Phụ lục 1 Kết quả phân tích GC-MS sản phẩm chiết trong hạt Cau già 72
Phụ lục 2_ Sắc ký đồ GC sản phẩm chiết trong hạt Cau già 73
Phu luc 3 Phé GC-MS cua methyl nicotinate 74 Phu luc 4 Phé GC-MS cua arecoline 75 Phụ lục 5 Phố GC-MS của øuvacoline 76 Phu luc 6 Phố GC-MS của arecaidine 77
Phu luc 7 Phé GC-MS cia ethyl N-methyl-1,2,5,6-tetrah ydro-pyridine-3-carbox ylate,
guvacine 78
Trang 12
LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
LOI MO DAU
Nước ta là một nước nằm trong vùng nhiệt đới gió mùa nên hệ thực vật rat phong
phú và da dạng Từ xưa đến nay, con người đã biết khai thác nguồn tài nguyên sinh học quý giá này để làm thực phẩm, thuốc chữa bệnh, các vật liệu cũng như nhiên liệu cho cuộc sống thường ngày Cùng với sự phát triển của khoa học kỹ thuật, việc khai thác và sử dụng những cây thuốc q khơng cịn đơn thuần chỉ dựa vào kinh nghiệm mà cịn có những cơ sở khoa học nhất định
Cau là loại cây trồng phổ biến ở các vùng quê của Việt Nam, hầu hết các gia đình ở nông thôn đều trồng một vài hàng Cau ở trước hoặc sau nhà vừa để lấy quả, vừa tô điểm cho cảnh yên bình nơi miền quê Cây Cau cũng gắn với nhiều tập tục của dân ta: từ giao tiếp (miếng trâu là đầu câu chuyện), cưới hỏi (buồng cau và cơi trầu đi hỏi vợ),
đến các bài ca dao, khúc hát dân ca, những lời tỏ tình, cả đến việc thờ cúng tổ tiên, Theo kinh nghiệm dân gian thì các bộ phận của cây Cau đều có tác dụng trị một số
bệnh Hạt Cau là một trong những vị thuốc đã được sử dụng từ lâu trong dân gian với
công năng trị giun sán, bụng đầy chướng, tả ly, chữa bỏng, Quả Cau thường được kết hợp với lá trâu, vơi sử dụng làm món nhai vui miệng rất đỗi thân quen với mỗi
người dân Việt Nó là nét đẹp văn hóa của người Việt Nam Trên thế giới, một số
nghiên cứu cho thấy rằng thành phần tannin trong hạt Cau có khả năng giúp ngăn ngừa
các bệnh răng miệng, các alkaloid trong hạt Cau đã được kết hợp một số nguyên liệu
thiên nhiên khác tạo chất kháng oxy hóa dùng làm mỹ phẩm, làm thuốc chống bệnh
tram cảm, bệnh cao huyết áp, Cau còn được chế biến thành cháo trị các chứng bệnh
ở trẻ em Các công năng này chủ yếu dựa vào tác dụng các alkaloid có trong hạt Cau Cau có nhiều ứng dụng quan trọng nhưng trong thực tế các cơng trình nghiên cứu trước đây về quá trình chiết, tách hay xác định thành phần hoá học, cấu trúc của các hợp chất chính trong hat cau rất ít và chưa hệ thơng Với mong muốn tìm hiểu về hạt cau nhằm làm sáng tỏ công dụng của nó, chúng tơi đã chọn đề tài “Khảo sát thành phan hóa hoc cua hat Cau Areca catechu L.”
Trang 13
Chuong 1 TONG QUAN
Chương 1
TONG QUAN
1.1Khái quat vé ho Cau *?
Họ Cau (Arecaceae) (còn gọi là Palmae hay họ Cọ hoặc họ Dừa), là một họ thực
vật có hoa, thuộc về lớp thực vật một lá mam va nam trong bộ Arecales (bộ Cau) Hiện
nay, bộ Cau được biết có 202 chi với khoảng 2600 loài, phần lớn sinh sống ở vùng
nhiệt đới hoặc cận nhiệt đới Trong các họ thực vật thì họ Cau có lẽ là dễ nhận biết nhất Loài điển hình trong họ này là Cau, ngồi ra cịn có các loài khác như chà là, cọ, dừa, mây, Các loài cây thuộc họ này đã được tìm thấy trong các hóa thạch có niên đại khoảng 70+80 triệu năm trước, trong thời kỳ cuối của kỷ Phấn trắng (Cretaceous)
Cây chà là Cây mây
Hình 1 Một số loài cây thuộc họ Cau
Trang 14
Chuong 1 TONG QUAN
1.2Đặc tính thực vat cia cAy Cau **
1.2.1 Phan loai khoa hoc
Cây Cau tên khoa học là Areca cafechu L Ngồi ra nó còn được gọi là Mạy làng (Tay), Po lang (K’ho), Tan lang hay Binh lang (Trung Quốc), Pinang (Malaysia), Aréquier (Phap), Arecanut (Anh),
Giới _: Plantae
Nganh : Magnoliophyta
Lớp : Liliopsida Bộ : Arecales
Họ : Arecaceae (Cau) hay họ Palmae (Dừa) Chì : Areca L
Lồi : Areca catechu
1.2.2 Đặc tính thực vật *°
Cây Cau là cây sống lâu năm, cây có thân mọc thắng đứng Thân mọc thăng, hình trụ rỗng, khơng chia cành, có nhiều vòng đốt là vết tích của những tàu lá rụng Lá tập trung ở ngọn, cuỗng phát triển thành bẹ to ôm lẫy thân, phiến lá to, rộng Gốc thân hơi phình ra, mang nhiều rễ nỗi trên mặt đất Ở ngọn cây có một chùm lá rộng, lá có cuống và bẹ to, mang hai dãy lá chét xếp đều đặn dạng lông chim, lá chét hẹp ngang, màu lục bóng, có gân to
Hoa tự mọc thành bng, ngồi có mo bao bọc, hoa đực ở trên, hoa cái ở đưới
Hoa đực nhỏ màu trăng, thơm, màu lục Hoa cái to, bao hoa không phân hố Quả hạch
hình trứng, lúc cịn non có màu xanh, vỏ bóng nhẫn, khi già có màu vàng, vàng cam hoặc đỏ Quả bì có sợi, hạt có nội nhũ xếp cuốn Hạt hơi hình nón cụt, đầu trịn giữa đáy hơi lõm, màu nâu nhạt, vị chát Mùa hoa: tháng 5 Mùa quả: tháng 10
Hình 2 Hoa Cau, hạt Cau, trái Cau
Trang 15
Chuong 1 TONG QUAN
Cau có 2 loại chính: Cau vườn và Cau rừng
Cau vườn cao độ 10+20 m, đường kính khoảng 10~15 cm, lá có bẹ to dài từ 1.5
m đến 2 m, hình lơng chìm Hoa nhỏ, màu trang nga, thom Qua hach hinh tring, to
gần bằng quả trứng gà, lúc non xanh, vỏ bóng nhấn, khi già thành màu vàng đỏ Quả bì
có sợi, hạt có nội nhũ xếp cuốn Hạt hơi hình nón cụt, đầu trịn, màu nâu nhạt, vị chát
Cau được trồng bằng quả, sau 5-6 năm mới thu hoạch
=-—_ ast š - 1- Ko Ộ
Hình 3 Cây cau vườn tại Hậu Giang
Hiện nay, ở Việt Nam có trồng các giống Cau nhập từ Đài Loan đó là Cau lùn, cao khoảng 2-3 m, ra trái quanh năm (cau tứ thời) Cau lùn cho năng suất cao, khi cịn non
có màu xanh và khi chín có màu đỏ
Hình 4 Cây Cau lùn
Trang 16
Chuong 1 TONG QUAN
Cau rừng (Areca laosensis O.Becc): cây bé, thân trụ mọc thắng đứng đơn độc,
cao 2-6 m, có đốt đều đặn, cách xa nhau 8-10 cm, lá đài khoảng 1 m, dạng kép lông
chim, các lá chét xếp vào rất sát nhau, khơng đều hình cong liềm, mép hơi có răng, lá
tập trung ở ngọn, hoa vàng nhạt Quả nhỏ, nhọn, chắc, hình trứng, khi chín có màu
vàng cam, có quả vào tháng 11-12 Nước ta, vùng núi Nghệ An, Thanh Hóa có nhiều Cau rừng
Hình 5 Cây Cau rừng
1.2.3 Phân bố và sinh thái '”
Chi Areca L có khoảng 20 lồi trên thế giới, phân bố chủ yếu ở vùng nhiệt đới Châu Á, Châu Đại Dương Tuy nhiên, trung tâm đa dạng của chỉ này lại ở vùng nhiệt đới Ấn độ - Malaysia
Cau là loài cây có nguồn gốc ở Malaysia, sau này được nhập trồng sang các nước
khác ở Đông Nam Á và Nam Á như Philippin, Thái Lan, Indonesia (Samatra, Java), Srilanca, Mianmar va sang ca Madagasca va Dong Phi
Cây được trồng với nhiều mục đích, trong đó thường được lấy quả đề ăn trầu và
hạt để làm thuốc
Một số loài khác cũng cho quả được dùng để ăn trau nhu Areca concinna (6
Srilanca, Naga va Assam - An d6); A.triandrac (6 dao Andaman - Ân độ và
Sumatra - Indonesia)
Cau là cây trồng lâu đời rất quen thuộc ở Việt Nam Cây được trồng ở khắp nơi,
nhất là ở vùng trung du và đồng bằng Các tỉnh phía nam trồng nhiều hơn các tỉnh phía
Trang 17
Chuong 1 TONG QUAN
bắc Cây thích nghi cao với điều kiện khí hậu nhiệt đới nóng và ầm, ở nhiệt độ trung bình 22-26°C Ở vùng núi cao trên 1000 m ở các tỉnh phía bắc, không trồng được Cau Cây trồng từ hạt sau 4-5 năm có thể có hoa quả lứa đầu Các năm về sau hoa quả nhiều
hơn Cây có thể sống được 60 năm, thậm chí 100 năm
1.2.4 Công dụng của hạt Cau “”
Hạt Cau kết hợp với lá trầu là món vui miệng rất đỗi thân quen với mỗi người dân Việt Tục ăn Trầu tương truyền có từ thời Hùng Vương và gắn liền với một chuyện cơ tích nồi tiếng-Chuyện Trầu Cau Miếng trầu cũng làm người ta âm lên trong những ngày đông giá lạnh, làm vơi bớt nỗi buồn khi nhà có tang, được sẻ chia cảm thông bởi họ hàng, bạn bè, làng xóm Miếng trầu cịn là sự thể hiện lòng thành kính
của thế hệ sau với các thế hệ trước nên trên mâm cỗ thờ cúng gia tiên của người Việt
bao giờ cũng có Trầu Cau
Theo các nghiên cứu trước đây, chất chát của hạt Cau làm cho chân răng co lại, ôm sát răng Răng trở nên chắc, không lung lay
Hạt Cau chứa arecoline, guvacoline, đây là những chất gây độc hại cho gen nhưng khi ăn trầu có vơi, Ca(OH); làm thủy phân arecoline thành arecaidine, guvacoline thành guvacine khơng độc, làm kích thích thần kinh, tạo cảm giác sảng
khối Vơi có khả năng ức chế methyl mercaptan tiết ra ngoài nên ăn trầu đỡ hôi miệng
Các alkaloid trong hạt Cau có khả năng thay đổi màu (nhuộm đỏ nước miếng người ăn trau) Tuy nhiên, không nên ăn nhiều vì có thê làm tôn thương tế bào miệng thậm chí có thể gây ung thư vùng miệng
Người ta đã dùng dịch chiết từ hạt Cau để làm thuốc nhuộm vải Tannin được trộn với Na;SOa, Na;CO; làm thuốc nhuộm tóc đen xám Nhờ chất proanthocyanidin,
đặc biệt chất epicatechin-catechin, Cau được hòa với axetyl glutamin, butylen glycol
trong ethanol và nước thành thuốc kích thích tóc mọc
Trong những năm gần đây, hạt Cau còn xuất khẩu sang Trung Quốc để làm kẹo cau Ăn kẹo Cau có tác dụng chống lạnh Hiện nay, Trung Quốc đang cung cấp kẹo Cau cho toàn bộ thị trường Nga và Đông Nam Á
Quả Cau, miếng trầu không chỉ là đầu câu chuyện, là vật kết nối xe duyên cho
hạnh phúc trăm năm của mọi lứa đơi mà chúng cịn là phương thuốc hữu dụng trong
mỗi gia đình Hạt Cau trị giun sán cho người và súc vật, giúp sự tiêu hóa, chữa viêm
Trang 18
Chuong 1 TONG QUAN
ruột, viêm túi mật cấp tính, bụng đầy chướng, tả, ly, trẻ con chốc đầu, hợp với trường sơn, thảo quả trong đơn thuốc "trường sơn triệt ngược" chữa sốt rét Hỗn hợp dầu vừng-hạt Cau làm giảm nhanh phù nể, xung huyết quanh vết bỏng, giúp vết bỏng không lan rộng, chóng khơ và liền sẹo
4% Một số bài thuốc có hạt Cau
* Trị bệnh giun, sán
Hạt Cau làm tê liệt thần kinh giun, sán; làm cho nó không bám vào thành ruột
được mà bị đây ra ngoài
- Tây sán dây: Cau 30 ø, hạt bí ngơ 30 ø hoặc cau 60 ø, sơn tra 500 g, sắc uống - Tẩy giun móc: Hạt Cau 20 g, vỏ lụa trắng rễ xoan 30 g, sắc đặc, thêm đường
chế thành 60 mL Uống trước khi đi ngủ, lúc bụng đói Dùng liền 2 ngày
- Giun đũa, giun kim: Dùng 21 hạt Cau sao, tán nhỏ Chia uống 2-3 lần trong
ngày, dùng với nước sắc vỏ quả Cau làm thang Uống bụng đói
Theo kinh nghiệm Đông y, để tây giun sán, nên đùng hạt cau sống, còn để tiêu
tích tuệ thì mới phải nâu chín * Chữa trùng roi
Cau 100 g cắt lát mỏng hoặc giã nát cho vào 500 mL nước ngâm trên 12 giờ Đun còn 200 mL chia làm 3 lần, uống trong buổi sáng sớm, đói bụng
* Viêm túi mật cấp tỉnh đơn thuần
Cau 10 g, hat củ cai 10 g, tran bi 10 g Cau tan bột, tran bi cat nhỏ, cho nước vào Cau 10 g, hat cu cai 10 g, tran bi 10 g Cau tán bột, trần bì cắt nhỏ, cho nước vào
đun sôi một lúc là được Mỗi ngày uống 2 lần sau bữa ăn, có thể pha ít đường để dễ
uống
* Chita ăn không tiêu, đây trưởng, ợ chua
Hạt cau 200 g, định hương 10 øg, đậu khấu 10 g, trần bì 20 ø, sa nhân 10 ø, muối
100 g Nau thanh cao long Lấy hạt Cau ra thái nhỏ, uống 5-10 ø sau bữa cơm chiều
bằng nước đã sắc
* Chữa trẻ bị suy định dưỡng
- Hat Cau 1/2 hat, tim lon 300 ø, gạo nếp 100 g Gid Cau nho loc lay 300 mL nước nấu sôi, rồi cho gạo nấu cháo chín mới cho tim lợn đã thái nhỏ vào nấu chín Ăn
1 tuần 3 lần, ăn trong 2 tuần
Trang 19
Chuong 1 TONG QUAN
- Hạt Cau 1 hạt, cà rốt 50 g hai thứ nghiền thành bột, gạo nếp 150 g, gia vị vừa
du Nau cháo với 300 mL nước cho nhừ rồi cho Cau, cà rốt vào, nẫu chín, ăn ngày 3
lần, ăn liền 3 ngày Chữa trẻ đi tiêu phân xanh
- Cau 15 øg mài lẫy nước, gừng tươi 12 g, giã lẫy nước, gạo xay 100 g, mat ong 20 ø Nâu cháo nhừ rồi cho các thứ vào, đun sôi lại, ăn ngày 1 lần để tiêu tích trệ, sát trùng ở đường tiêu hóa, trừ ho
- Buồng Cau điếc đốt tồn tính (khơng để cháy thành than), tán nhỏ Mỗi lần 4-6 g
ăn với cháo, chữa hen suyến
* Chữa trị bỏng: hỗn hợp dầu vừng - bột hạt Cau (tỷ lệ khối lượng 1:1)
* Dùng ngoài, bột hạt Cau rắc làm thuốc cầm máu
* Chữa băng huyết: buồng Cau điếc (40 g) phối hợp với gương sen (1-2 cái) thái nhỏ, phơi khô, nấu nước đặc uống trong ngày
* Chữa hàn thấp, cước khí thời kỳ đâu, chân đùi sưng đau, hoặc tức ngực, buôn nôn: hạt Cau 12 ø, mộc qua 9 g, trần bì 4.5 ø, cát cánh 6 g, gừng sống 6 g, tia tô 3g
* Chita trẻ bị chốc đầu: hạt Cau xay nhỏ phơi trong bóng ram cho khơ, trộn dầu
vừng để bôi đắp lên đầu trẻ bị chốc
* Liều dùng
Trong hạt Cau có arecoline Ở liều nhỏ, chất này có tác dụng kích thích thần kinh
Ở liều cao, nó làm tăng tiết nước bọt và dịch vị, thu nhỏ đồng tử, gây liệt thần
kinh Đối với giun, hạt Cau gây độc đối với hệ thần kinh, 20 phút sau khi thuốc vào tới ruột, giun bị tê liệt các cơ trơn, khiến chúng không bám được vào thành ruột và theo
phân ra ngoài Đề tây giun, dùng hạt Cau ở dạng bột không quá 4 g/lần/người; có thê
dùng sống hay sao lửa nhẹ, sắc uống
Đối với người, dùng không quá 0.0043 + 0.0065 g arecoline/người/lân
Đề chữa bệnh cho ngựa, dùng 0.065 + 0.097 ø arecoline/lần/con Người ốm yếu, trẻ em và phụ nữ có thai không nên dùng hạt Cau
% Bài thuốc có rễ Cau
Rễ Cau treo (hay còn gọi là rễ Cau nổi - phần rễ Cau còn lơ lửng trên mặt đất) là một vị thuốc có tác dụng bổ dương tất tốt
Dùng dao lẫy phần rễ Cau còn lơ lửng trên mặt đất, mỗi đoạn dài 1.5-2 cm, chẻ
nhỏ, sao vàng, hạ thơ Khi có nhu cầu: lay 50 g sắc với 200 mL nước còn 50 mL, uống
Trang 20Chuong 1 TONG QUAN
30 phút sẽ thấy có hiệu quả Nếu lấy rễ vào lúc trời sắp mưa (lúc đó đầu múc rễ sẽ có
màu trắng) tác dụng sẽ cao hơn
Dùng độc vị rễ Cau nỗi (20-30 g) thái nhỏ, sắc với 400 mL nước còn 100 mL,
uống làm hai lần trong ngày, chữa liệt dương
Dé chữa đái nhất, đái són, lẫy rễ Cau (10 ø) phối hợp với rễ trầu khơng (10 g, có
thể dùng thân hoặc lá) thái nhỏ, sắc uỗng ngày một thang Dùng vài ngày Phụ nữ có thai khơng được dùng rễ Cau
Rễ Cau có trong thành phần của bài thuốc hạn chế sinh đẻ theo kinh nghiệm dân gian Rễ Cau phối hợp với rễ cây móc, rễ cây tre, rễ cây cọ (lượng bằng nhau), xắt
mỏng, phơi khơ, sắc với nước cịn 100 mL, uống làm hai lần trong ngày Dùng 4-5 ngày Kiêng chất tanh
Để gây sây thai, người ta dùng rễ Cau phối hợp với rễ rau ngót, rễ thầu dầu tía, rễ
chua me đất, rễ chỉ thiên, rễ cây mắc cỡ “ Bài thuốc có lá Cau
Lá Cau phối hợp với vỏ núc nác, mỗi thứ 20-30 g, xắt nhỏ, sắc uống; kết hop lay
lá đỉnh lăng lót giường nằm, chữa động kinh ở trẻ em
s* Bài thuốc có vỏ quả Cau
Vỏ quả Cau già (Pericarpiưn Arecae) phơi khô, gọi là Đại phúc bì (Trung Quốc)
Đã được ghi vào Dược điển Việt Nam (1983), Dược điển Trung Quốc (1997)
Vỏ quả Cau tách ra đem đập cho tơi, ngâm vào nước, vớt ra phơi khô rồi lại đập
tơi, cho tróc lớp da ngồi
Loại đại phúc bì vỏ khô, mềm, màu vàng ngà, không lẫn tạp chất là tốt
Đại phúc bì: Theo Đơng y, vị cay, tính hơi ẫm, vào hai kinh Tỳ và Vị, có tác
dụng đưa hơi đi xuống, làm tiêu thoát nước
Dùng chữa các chứng bệnh thủy thũng cước khí, bụng đầy tức (tác dụng chậm nhẹ, không mạnh như Binh lang), đại tiện không thông, tiêu tiện khó khăn Ngày dùng 6-9 g dưới dạng nước sắc
s* Bài thuốc có bng Cau
Bng Cau đang ra hoa và hình thành quả non bị thui chột, không phát triển, tự khô héo, màu vàng xám, gọi là buồng Cau điếc (tên dân gian) hay tua Cau ri (tén trong sách thuốc cô)
Trang 21
Chuong 1 TONG QUAN
Buông Cau điếc đốt tồn tính (khơng để cháy thành than) tán nhỏ, mỗi lần 4-6 g
ăn với cháo hoa, chữa hen suyễn hoặc 8 ø uống với nước tiểu trẻ em vào lúc đói, chữa khí hư
Bng Cau điếc (40 g) phối hợp với gương sen (1-2 cái) thái nhỏ, phơi khô, nẫu
nước đặc uống trong ngày, chữa băng huyết “+ Bài thuốc có mốc cây Cau
Mốc cây Cau hay phẫn Cau, rêu Cau là những mảng mỏng màu trắng xám bám ở gốc và thân cây Cau Khi dùng, cạo lẫy mốc, sao qua, lẫy 40 g giã nhỏ với bồ hóng (20 ø), xát vào vết thương đang chảy máu, máu sẽ cầm ngay
Đề chữa băng huyết, non ra mau, lay mốc Cau (20 g), tinh tre (20 g), 1a chuỗi hột (10 g) Đốt tồn tính, tán nhỏ, sắc uống làm hai lần trong ngày
1.2.5 Thành phần hóa học của hạt Cau °$?°
Các cơng trình nghiên cứu trước đây cho thấy hạt Cau chứa các hành phần sau: e© Hạt Cau chứa 10-15% dầu béo, trong dầu có các glycerid của lauric acid 50%,
myristic acid 21%, oleic acid 29%, protid 5-10%, glucid (mannan, galactan) 50-60%
e Tannin ham luong co trong hạt xanh khoảng 70% nhưng trong hạt già chỉ còn
khoảng 15% đến 20%
e Alkaloid dang két hop véi tannin 0.3-0.5%, cdc alkaloid 18 arecoline (alkaloid chủ yếu) 0.2%, arecaidine (arecain), guvacine, isoguvacine, arecolidine, guvacoline
Các alkaloid cũng có ở vỏ hạt Cau nhưng với hàm lượng thấp hơn trong hạt Cau
e Hạt cau còn chứa acid amin, một it tryptophan, methionin, hon 15% prolin, hơn 10% tyrosin, phenylalanin arginin, muối vô cơ 5%, tinh dầu gôm, một lượng nhỏ
tinh dầu dễ bay hơi như lignin
Ngoai ra con chita saponin, sitosterol, carotene,
ny Kk Ke gan ok ~ A JA 4h A 1,8,9,11,13
“+ Mot so hop chat tiêu biêu đã được cô lập từ cây Cau
(1) Arecoline (N-methyl-1,2,5,6-tetrahydropyridine-3-carboxylate) Công thức phân tir: CsH,;NO,
Arecoline là chat lỏng như dâu, khơng màu, khơng mùi, có tính kiêm mạnh, sơi ở
209°C, có thê cất kéo được bằng hơi nước, dễ tan trong nước, côn, ether, chloroform
Trang 22
Chuong 1 TONG QUAN
Cho muối kết tinh với acid pK = 6.84 Arecoline được dùng dưới dạng chlohydrate,
bromhydrate CHạ H Oo N N HạC „CH; Oo O q) (2) (3)
(2) Arecaidine (1,2,5,6-tetrahydro- I-methyl-3-pyridine-carboxylic acid) Arecaidine ở dạng kết tinh, nóng chảy ở 223-224°C
Công thức phân tử: C;H¡¡NO;
(3) Guvacine (1,2,5,6-tetrahydronicotinic acid)
Guvacine dạng tỉnh thể nhỏ sáng bóng, nhiệt độ nóng chảy 271-272°C Guvacine không tan trong ether, chloroform, benzene và ethanol, nhưng tan trong nước Công
thức câu tạo của guvacine được Freudenberg, K xác định Công thức phân tử: CaHsNO;
H H OCH 3
N N cn
O Oo OH CH,
(4) (5) (6)
(4) Guyacoline (N-methylguvacine)
Guvacoline là một chất dầu, nhiệt độ sôi 114°C/13-14 mmHg, nhiệt độ nóng
chảy 27°C
Cơng thức phân tử: C;H¡¡NO;
(5) isoguvacine
Winterstein, E va Weinhagen, A B tu cao ban đầu sau khi cô lập được arecoline
đã cô lập được một base, nóng chảy ở 220°C và khẳng định đó là isoguvacine
Công thức phân tir: CsH»NO,
Trang 23Chuong 1 TONG QUAN
(6) Arecolidine
Arecolidine là đồng phân của arecoline Arecolidine là tinh thể khơng màu hình kim, kết tỉnh trong ether, nóng chảy ở 110°C
Công thức phân tir: CgH,;;NO,
(7) Methyl nicotinate
Là chất bột màn trắng, nhiệt độ nóng chảy 42-44°C, nhiệt độ sôi 208-210°C
Công thức phân tử: C;H;NO;
Khối lượng phân tử: 137.14 g/mol
\ _/ |
N \ O N \ O N ƒ ầ
= O = O N
(7) (8) (9)
(8) Ethyl nicotinate
Công thức phân tử: CaHsNO;
Khối lượng phân tử: 151.16 g/mol
Nhiệt độ nóng chảy: 8-10°C
Nhiệt độ sôi: 223-224°C
Trọng lượng 1.107 g/mL ở 25°C,
(9) Nicotine
Nicotine được D K Holdsworth, R A Jones và R Self tìm thấy trong hạt cau bằng phương pháp GC/MS
Nicotine là một chất lỏng như dầu, hút ẩm và có thể trộn lẫn với nước trong dạng
base của nó Là một base gốc nitơ, nicotine tạo ra các muối với các acid, thông thường có dạng rắn và hòa tan được trong nước Nicotine dễ dàng thâm thấu qua da
Công thức phân tử: C¡oH¡xN;
Khối lượng phân tử: 162.23 g/mol
Ty trong 1.01 g/cm” Nóng chảy ở -79°C
Nhiệt độ sôi 247°C
Trang 24
Chuong 1 TONG QUAN
e=: Oo ty Oo ty / O
(10) (11) (12)
(10) Methyl N-methylpiperidine-3-carboxylate
Chat long tir khong mau dén mau vang nhat
(11) Ethyl N-methylpiperidine-3-carboxylate
(12) Ethyl N-1,2,5,6-tetrahydro-pyridine-3-carboxylate (13) Lauric acid
Dang ran mau trang, nong chay 6 44°C, sdi 6 298.9°C
Công thức phân tử: C¡;H;x„O;
Khối lượng phân tử: 200.3 g/mol
Độ hòa tan trong nước 0.481 g/100 mL
Chiết suất np 1.423
O Oo
AWA K OH wee KK,
(13) (14)
(14) Myristic acid
Dạng rắn màu trắng, nóng chảy ở 58.8°C, sôi ở 250.5°C (ở 100 mmHg)
Công thức phân tử: C 14H 302
Khối lượng phân tử: 228.37 g/mol
(15) Oleic acid
Là một acid béo có một nối đơi omega-9 được tìm thấy trong nhiều động và thực
vật
Công thức phân tử: C¡ạH;„O; (hay CH;(CH;)›;CH=CH(CH;);COOHNH) Theo
IUPAC, tên của oleic acid là c¡s-9-octadecenoic acid, và tên ngắn gọn là 18:1 c¡s-9
Khối lượng phân tử: 282 g/mol
Trang 25
Chuong 1 TONG QUAN
Dang bao hoa cua oleic acid 1a stearic acid
Oleic acid là chất lỏng như dầu màu vàng nhạt hay vàng hơi nâu Có mùi giỗng
mỡ lợn Khơng hoà tan trong nước Nhiệt độ nóng chảy 13-14°C, nhiệt độ sôi 360°C
(760 mmHg) Ty trong: 0.895-0.947 g/cm’
OH
(15)
(16) (+)-Catechin Chất rắn không màu
Công thức phân tử: C:zH;4Os
Khối lượng phan tir: 290.3 g/mol
Nhiệt độ nóng chảy: 175-177°C [a]p = +14.0° OH OH OH OH OH HO Ov HO OL HO On cv S U You l9 OH OH OH OH OH (16) (17) (18) (17) Epicatechin Nhiệt độ nóng chảy 237-245°C [a]p = -69.0° (EtOH)
Công thức phân tử: C¡zH¡4Os
Khối lượng phân tử: 290.3 g/mol
(18) (+)-Leucocyanidin
Công thức phân tử: C:zH;4O»
Khối lượng phân tử: 306.26 g/mol
Trang 26
Chuong 1 TONG QUAN
1.3 Khái quát về tannin 7
Tannin là loại hợp chất polyphenol, phân bố rộng rãi trong họ thực vật, có khả
năng tạo liên kết bền vững với protein và một số hợp chất cao phân tử thiên nhiên Tannin được phát hiện dương tính với phản ứng thuộc da và được định lượng dựa vào mức độ hấp phụ trên bột da sống chuẩn
Tannin thường ở dạng vơ định hình, xốp, có màu vàng nhạt đến nâu và sậm dân
dưới ánh sáng và khơng khí Tannin khơng có nhiệt độ nóng chảy xác định TannIn có
trọng lượng phân tử khác nhau, từ 500 đến trên 3000 (ester acid gallic) và lên đến
20000 (proanthocyanidin) Các tannin do mang nhiều nhóm -OH nên ít nhiều (tùy
theo khối lượng phân tử) hòa tan trong nước tạo nên dung dịch nhớt
Khi nếm tannin, có cảm giác se lưỡi là do tannin làm kết tủa các enzym có trong
nước bọt, khiến nước bọt mất đi tính chất của nó là làm trơn láng phần bề mặt trong
của miệng, cũng vì lý do này mà các loài động vật ăn cỏ ít chọn ăn các lồi cây có hàm
lượng tannin cao
Tannin làm đông tụ một số protein do tạo các nỗi hydrogen liên phân tử giữa các
nhóm -OH hoặc —-NH; của protein với các nhóm —OH phenol cua tannin Đặc biệt tannin có khả năng tạo kết tủa với gelatin, albumin, các base hữu cơ và một số alkaloid
Ngồi ra, tannin cịn hịa tan trong rượu, acetone, ethyl acetate, khéng hoa tan trong diethyl, disulfur carbon, tetraclorua carbon
1.3.1 Phân loại
TannInn được chia ra 2 nhóm lớn
s* Tannin thủy giải được: là ester của glucose với gallic acid Người ta cũng chia tannin nay 1am 2 loai 1a tannin gallic va tannin ellagic
e Tannin gallic: có cấu trúc hóa học gồm một nhân trung tâm, là đường
ølucose Các nhóm -OH tại các carbon C-1,2,3,4 hoặc 6 của đường glucose này tạo
nối ester với từ 1 đến n số phân tử gallic acid
Oo OH
HO OH
HO
Gallic acid
Trang 27
Chuong 1 TONG QUAN OH HO ° oO O OH OH Oo HO OH OH Oo oo »0 HO B-1,2.3,4,6-Pentagalloyl-o-D-glucose
se Tannin ellagic: Do sự hiện diện của các nôi carbon-carbon trong nhân
ølucose và các nôi carbon-carbon giữa hai nhân benzene của hai phân tử acid gallic,
lam cho cau tric tannin thém sat chat, ran chắc nhiêu hơn, cũng vì thê độ hịa tan cũng
kém di
Tamnin ellagie
s* Tannin hóa đặc: là sự polymer của một vài flavanol như catechol hoặc
epicatechol Tannin hóa đặc khác với tannin thủy giải được vì nó không bị thủy giải dưới tác dụng của acid vô cơ loãng
GH OH OH OH HO OV HO OL OH “OH OH OH Flavan-3-ol(+)-Catechin Flavan-3-ol(-)-Epicatechin
Trang 28Chuong 1 TONG QUAN
Trong hạt Cau, thành phần tannin chính là các tannin hóa đặc và tannin thủy giải được như catechin, epicatechin, tannic acid, leucocyanadin, Là những hợp chất có tính kháng oxy hóa cao, có khả năng kháng khuan Streptococcus mutans, m6t tac nhan gây ung thư miệng 34,
1.3.2 Các phương pháp loại tannin
e Sử dụng dung dịch gelatin mặn (là dung dịch nước gồm 5% NaCI (w/v) và
0,5% (w/w) gelatin) Rót từ từ dung dịch gelatin vào dung dịch chiết, khuấy nhẹ và để yên qua đêm Tannin trong dịch chiết nước bị kết tha boi dung dich gelatin man Loc
bỏ tủa
e Sử dụng nước NaOH 1%: với dung dịch chiết là dung môi hữu cơ không tan
trong nước: sử dụng bình lóng để lắc dung dịch chiết này với đung dịch nước NaOH
1% Các polyphenol (tannin) tạo thành phenolat tan trong nước, tách riêng Pha hữu cơ cịn lại khơng cịn tannin Phương pháp này có thê loại luôn các hợp chất là dẫn xuất cua phenol nhu flavonoid,
e Sử dụng dung dịch nước NaCl 1%: với dung dich chiét 14 chloroform: str dụng bình lóng để lắc dung dịch chiết này với dung dịch nước NaCl 1% Tannin phan bố vào trong nước ở lớp trên, pha chloroform ở lớp dưới khơng cịn tannin Tách riêng pha chloroform làm khan nước
e Sử dụng protein: tương tự, tannin cũng bị tủa bởi protein Có thể lẫy phần tròng trắng trứng gà (là albumin, một loại protein) rót vào dung dịch nước chiết và khuay nhe, tannin sé bi tua, lọc bỏ tủa
e Sử dụng sắc ký cột với chất hấp thu là resin polyamid; silica gel; polyvinyl pyrrolidone (viét tat PVP): cho dung dịch chiết chảy ngang qua một cột nhỏ có chứa
một trong những chất hấp thu nêu trên, do các chất hấp thu tạo cầu nối hydrogen với
cac nhém polyhydroxy cua tannin khién cho tannin bi giữ lại trong cột Hoặc sử dụng
một becher chứa dung dịch chiết, cho chất hấp thu nói trên vào, khuấy đều, để yên
trong một đêm rồi lọc bỏ
Phương pháp này cũng có nhược điểm resin polyamid; silica gel; polyvinyl
pyrrolidone cũng có thể hấp thu vài loại hợp chất hữu cơ phân cực khác
Trang 29
Chuong 1 TONG QUAN
e Sử dụng sắc ký cột với chất hấp thu là nhựa trao đỗi ion DE 52: Nhựa trao
đổi ion với phần nền là cellulose có gắn nhóm chức đietylaminoetyl, sẽ gắn tốt các tannin mà không giữ các hợp chất khác không phải là polyphenol
1.4 Khái quát về alkaloid >’ 1.4.1 Khái niệm
Theo Polonopski: "Alkaloid là những hợp chất hữu cơ, có chứa nữơ, đa số có
nhân dị vịng, có phản ứng kiềm, thường gặp trong thực vật và đôi khi trong động vật,
thường có hoạt tính sinh học mạnh và cho phản ứng hóa học với một số thuốc thử gọi
là thuốc thử chung của alkaloid”
1.4.2 Danh pháp
Các alkaloid thường có cầu tạo phức tạp, người ta thường gọi tên theo danh pháp
thông thường Tên của các alkaloid ln có đuôi ine và xuất phát từ:
— Tên chi hoặc tên loài của cây + Ine
Ví dụ: Cocaine xuất phát từ Erythroxylum Coca Papaverine xuất phát từ Papaver somniferin Arecoline xuất phát từ Areca catechu
— Đôi khi dựa vào tác dụng của alkaloid đó hoặc có thể xuất phát từ tên người tìm
Ta nó
1.4.3 Phan bé alkaloid °
Cromwell (1955) wc tinh alkaloid phan bé trong khoảng 1/7 trong tông số họ thực vật có hoa Hegnauer (1963) cho rằng, alkaloid có từ 12% đến 20% trong tong số cây có nhựa Còn Willaman va Schubert (1955) thi cho rang trong hơn 300 họ của ngành hạt kín thì 1/3 họ có chứa alkaloid Nhiều tổng kết cho thấy rằng đại đa số cây
có chứa alkaloid là cây có 2 lá mầm, chỉ có một số ít cây có alkaloid là cây 1 lá mầm, hạt trần Cây một năm có nhiều alkaloid hơn cây lâu năm (Levin 1976) Alkaloid
khơng có trong các loài sống đưới nước, ngoại trừ họ Sen
Thực ra có rất nhiều lồi có alkaloid nhưng ở mức độ vết hoặc ở tỷ lệ phần vạn, mười vạn Một cây được xem là có alkaloid phải chứa thì ít nhất 0.05% alkaloid so với
dược liệu khô
Trong cây, alkaloid và các chất khác có liên quan chặt chẽ với nhau Cây chứa nhiều alkaloid thường chứa ít hoặc khơng chứa tinh dầu, tannin và ngược lại
Trang 30
Chuong 1 TONG QUAN
Quá trình sinh tổng hợp alkaloid trong cây bắt nguồn tir cdc acid amin
1.4.4 Sự phân bố alkaloid trong tổ chức cây °
Trong cây, alkaloid tập trung chủ yếu trong các tổ chức sinh trưởng hoạt động, ở nội bì, ngoại bì và các túi nhựa mủ
Điều đáng chú ý nhất là nơi tích lũy alkaloid khéng han 1a noi tong hop alkaloid Chẳng hạn nicotine trong cây thuốc lá được tông hợp ở rễ nhưng lại tích lũy ở lá Các
alkaloid tropan của các loài Datura tổng hợp ở rễ, tích lũy ở lá nhưng đồng thời tiếp tục chuyên hoá đáng kế ở lá, trong khi alkaloid có trong hạt của một số loài như Ipomea thi noi tong hop lai là ở lá
Một số trường hop cho thay qué trinh sinh tong hop alkaloid thường là sự phỗi
hợp giữa nhiều tổ chức khác nhau trong cây Ví dụ: cây ba gạc, các alkaloid sơ khai thuộc dẫn xuất indol có cầu trúc E-Seco (vịng E mờ) hình thành sớm nhất ở lá Trong quá trình sinh tổng hợp, các alkaloid này biến thành các alkaloid nhóm Sarpazan (tiêu biểu Sarpagine) được xem là các sản phẩm trung gian Các sản phẩm cuối cùng của quá trình sinh tổng hợp là các dẫn xuất dihidroindol (amaline) và 1,8—hidroxyohimbine
(reserpine, rescinnamine) thì lại hình thành và tích lũy ở vỏ rễ
Mặc dù alkaloid tập trung chủ yếu ở các tổ chức sinh trưởng hoạt động nhất nhưng nông độ alkaloid cao nhất không phải ở các tế bào non của tổ chức này mà là ở
các tế bào đang hoá khơng bào Vì vậy, tại các khơng bào có chứa nhiều alkaloid Sự
biến đổi hàm lượng alkaloid của 1 tổ chức trong quá trình sinh trưởng rất đáng kê Nói
chung hàm lượng alkaloid tăng nhanh trong giai đoạn phát triển tế bào và hoá không
bào, giảm dân trong giai đoạn già cỗi Hiện tượng này thể hiện rõ nhất ở lá.Trong quá trình sinh trưởng của cây, thời kỳ ra hoa kết quả ảnh hưởng nhiều đến sự tạo thành alkaloid Sự phân bố alkaloid trong hạt và thời kì hạt nây mầm rất khác nhau Trong
nicotiana, papaver, datura, erythroxylon khơng có hoặc có rất ít alkaloid ở hạt Ngược lai, trong hat cua coffee, delphinium, physostima, ., thi ham lượng alkaloid là cao
nhất trong cây Đối với một số hạt, alkaloid có thể bắt đầu xuất hiện một vài ngày (nicotiana, lycopersicon) hoac vai tuần (datura) sau khi hạt nay mam
Tóm lại, hàm lượng và sự phân bố alkaloid trong cây biến động rất lớn Điều này cho thấy sự cần thiết phải xác định đúng thời điểm thu hái được liệu
Trang 31
Chuong 1 TONG QUAN
1.4.5 Cầu trúc và phân loại alkaloid “”
Đến nay đã biết trên 16000 alkaloid thiên nhiên với trên 300 dạng cấu trúc khác
nhau Việc phân loại chủ yêu dựa vào câu trúc nhân cơ bản hoặc dựa vào nguôn gôc
tạo ra alkaloid
Phân loại cầu trúc
“ Alkaloid khéng cé N ở di vong (Proto alkaloid)
OH CHạO NH, CHạO CHạO CH;CH;N(CH;); Mescan Hordenine s*_ Alkaloid có N ở đị vòng Bang I Alkaloid cé N ở dị vòng
Tên câu trúc Công thức Hợp chất ví dụ Pyrrole Làm Hygrine Pyrrolidine - wi H N~ C-CO-CH, CH; Rixinine OCH, A Pyridine | | a N 1 O CHạ Coniline Piperidine C) C1 _ N H I H
Trang 32Chuong 1 TONG QUAN Tropane Cocaine oe Pyrrolizidine Retronecine OH H OH | Ị | Isoquinoline Papaverine Boldine OH É ) N- CHạ CHạO œ CHạO OH Berberine Quinolizidine
Trang 33Chương 1 TONG QUAN Serotonine [ ] ] HO Indol N N | NH, H I H Cafeine ; Oo « N bề N Purine UL » meen ys n~ N an 2 O N N CH; Glicorine Oo Oo Quinazoline X3 " N Fm N x2 l CH; Morphine HO Mocphinane N- O » NCH, noZ ¬Z o Acborinine O OH Acridone É ) (> CK N I N OCH; CH; CH;
Trang 34Chuong 1 TONG QUAN
1.4.6 Tinh chat chung cia alkaloid
1.4.6.1 Ly tinh
Trạng thái tự nhiên: Phần lớn alkaloid trong cơng thức cấu tạo có oxy thường ở
thể răn ở nhiệt độ thường Ví dụ: Morphine (C¡;H¡oNO¿), codeine (C¡zHạ¡NO2),
Những alkaloid trong công thức cầu tạo khơng có oxy thường ở thê lỏng
Ví dụ: Coniine (CạH;zN), nicotine (C¡oH;¿N;)
Các alkaloid ở thể rắn thường kết tỉnh được và có điểm nóng chảy rõ ràng
- Mùi vị: đa số các alkaloid khơng có mùi, có vị đắng và một số ít có vị cay như capsaicine, piperine,
- Mau sac: hau hét cdc alkaloid đều không màu trừ một vài alkaloid có màu vàng
nhu berberine, palmatine, chelidonine
- Độ tan: Hầu hết alkaloid ở dạng base thường không tan trong nước nhưng tan
trong dung môi hữu cơ như chlorofom, ether, benzen và các alcol bậc 1 có số C nhỏ
như CH;OH, C;H;OH Một số alkaloid do có thêm nhóm phân cực nên tan một phần
trong nước hoặc kiêm Ví dụ: morphine, cephaline do có nhóm -OH phenol nên tan
trong dung dịch kiềm và các base của chúng thì gần như khơng tan trong ether
Ngược lại với base, các mudi alkaloid nói chung tan được trong nước và cồn nhưng hầu như không tan trong dung môi hữu cơ như chloroform, ether, benzen Có một số trường hợp ngoại lệ như ephedrine, colchicine, ecgovonine, các base của chúng
tan được trong nước đồng thời cũng khá tan trong dung môi hữu cơ và các muối của
chúng thì ngược lại
Dựa vào độ tan khác nhau của alkaloid dạng base và dạng muối người ta sử dụng
dung mơi thích hợp để chiết xuất, phân lập va tinh ché alkaloid
Năng suất quay cực: phần lớn alkaloid có khả năng quay cực vì trong phân tử có C bất đối Năng suất quay cực là hằng số giúp ta kiểm tra độ tỉnh khiết của alkaloid
Alkaloid có dạng L bao giờ cũng có hoạt tính sinh học manh hon alkaloid dang D hoac
dạng biến thé raxemic 1.4.6.2 Hóa tính
AIkaloid nói chung có tính kiềm yếu là do trong phân tử có N Tính base của các
alkaloid không giống nhau do mật độ electron tự do trên nguyên tử N của các alkaloid
khác nhau Tính base thể hiện qua giá trị pKy, các base yếu trị số pKụ cao và ngược lại
Trang 35
Chuong 1 TONG QUAN
Voi cac alkaloid cé tinh base yếu cần môi trường acid mạnh hơn để tạo thành muối
trong dung dịch nước Vì vậy trong môi trường acid yếu một số alkaloid base mạnh có
thể chuyên thành muối trong khi các base yếu vẫn tôn tại trong dung dịch đưới dạng
base Đặc tính này được ứng dụng trong việc tách các nhóm alkaloid có trị sỐ pK, khac
nhau khỏi hỗn hợp của chúng Người ta có thể tính được độ kiềm của các chất thông qua giá trị pKy (Bảng 2)
Bảng 2 Giá trị pKy của một sé alkaloid °
Alkaloid pK, Alkaloid pK, Pinendi *perieane Quinoline Ệ — N-H 2.8 Ce 9.2 Fm N N-Metyl piperidine Isoquinoline
® 3.0 CO 9.5 N-CH3 <N Pyrrolidine Aniline [) 2.9 CL 9.4 N-H NH, Pyridine Benzylamine S | 8.8 oO 4.6 N CHạNH; Coniine Codeine 6.1 CLA 3.1 N I H Narcotine 7.8 Papaverine 8.1
Dua vao pK, ngwoi ta xép dé kiém ctia cdc alkaloid nhu sau:
+ Alkaloid có độ kiềm mạnh thì gid tri pK, < 3
+ Alkaloid có độ kiềm trung bình thì pKy : 3-7
+ Alkaloid có độ kiềm yếu thì pKy : 7-10
Trang 36Chuong 1 TONG QUAN
+ Alkaloid cé d6 kiém rat yéu thi pK, > 10-12
Ngoại lệ: alkaloid khéng con tinh kiềm nhv ricinine, colchicine, hoặc có chất có
phản ứng acid yếu như arecaidine, guvacine
- Tác dụng với acid, các alkaloid tạo ra các muối tương ứng
- Alkaloid kết hợp với kim loại nang (Hg, Bi, Pb, .) tao ra mudi phức - Các alkaloid có phản ứng với một số thuốc thử chung
1.4.7 Tach chiết alkaloid “
Muốn định tính một hợp chất nói chung, trước hết ta phải chiết được chất đó ra
khỏi hỗn hợp và loại những chất kèm theo gây trở ngại cho phép thử Chọn dung mơi thích hợp là một khâu rất quan trọng trong quá trình chiết tách hợp chất thiên nhiên 1.4.7.1 Nguyên tắc lựa chọn dung môi
Theo quy tắc chọn dung môi, dung môi chiết phải có độ phân cực phù hợp với
tính base của alkaloid Cụ thể, alkaloid là các base yếu, dùng dung mơi có độ phân cực
yếu, alkaloid là các base trung bình, mạnh thì dùng dung mơi có độ phân cực trung
bình hay mạnh Đối với các alkaloid chưa biết thì bắt đầu thăm dị từ dung môi kém
phân cực đến dung môi phân cực mạnh Để các vết alkaloid di chuyên cao hơn và tách phù hợp có thê thêm vào dung môi một chất kiềm
Trong cây, alkaloid thường không tổn tại dạng tự do do nó có khả năng kết hợp
với tannin (nhất là những cây có nhiều tannin) tạo thành muối Vì vậy, đối với được
liệu có nhiều tannin, can tâm bột dược liệu bằng kiềm một thời gian dé chuyén
alkaloid thành dạng base tự do trước khi chiết Cần dùng dung mơi có độ phân cực mạnh hơn hoặc chiết nóng để tách alkaloid ra khỏi tannin và hoà tan vào dung mdi
1.4.7.2 Chiét tach alkaloid
Việc chiết xuất alkaloid dựa vào tính chất của nó Hầu hét alkaloid 6 dạng base tan được trong dung mơi hữu cơ ít phân cực, không tan trong nước Ngược lại, ở dạng muỗi, alkaloid tan trong nước ethanol không tan trong dung mơi hữu cơ ít phân cực Mặt khác, tùy thuộc vào khả năng hóa hơi, khả năng chịu nhiệt của alkaloid mà dùng phương pháp chiết xuất cho thích hợp
Trang 37
Chuong 1 TONG QUAN
Nói chung alkaloid có thể chiết từ bột dược liệu tán khô Dé hạn chế bớt khó
khăn trong quá trình chiết tách, đối với các nguyên liệu nhiều chất béo, chất màu nên
có giaI đoạn loại tạp sơ bộ Có 2 cách:
- Ngâm bột dược liệu với PE hoặc ether trong vài giờ đến 1 ngày
- Chiết liên tục bằng Soxhlet hoặc hồi lưu với PE trong 1-2 giờ Bột loại tạp xong
đề khơ tự nhiên
Có 2 cách để chiết xuất alkaloid: chiết bằng dung môi hữu cơ và chiết bằng dung
dịch nước acid hoặc alcol
Phương pháp 1: Chiết bằng dung môi hữu cơ
Dé chiét alkaloid bang dung môi hữu cơ, trước hết bột dược liệu phải được tâm
dung dịch base để chuyển alkaloid muối trong được liệu thành dạng base Base thường
dùng là dung dịch NHạ, Ca(OH);, Na;COa, NaOH
Dung mơi có thê dùng là chlorofom, ether, benzen, ethyl chlorua Chlorofom là
dung môi thích hợp nhất cho hầu hết alkaloid base (trừ alkaloid N bậc 4 và N-oxit có
cách xử lí riêng)
Các bước tiến hành:
e Bột dược liệu tâm dung dịch NHẠOH đặc (hoặc dung dịch Na;CO;, NaOH,
vôi) để yên 1-2 giờ
° Cho bột được liệu đã tắm kiềm vào bình Soxhlet Cho CHC]; vào ngập bột
được liệu, ngam 1-2 giờ
e Tiến hành chiết nóng, với lượng dược liệu bé thường thì từ 3-6 giờ là đủ Nếu chiết trên 1 kg thì chiết bằng đun hồi lưu từ 6-10 giờ và chiết lại lần 2 từ 2-4 giờ để lấy kiệt alkaloid
e Dịch chiết chlorofom, cất thu hồi dung mơi cịn độ 1/2 hay 1/3 thể tích Sau
đó lắc với dung dịch acid hữu cơ hoặc vô cơ 1-2% Các acid có thể dùng là tactric acid, acetic acid, sunfuric acid, clohidric acid Như đã nói ở trên, cần xem xét pK, cua cdc
alkaloid định chiết để cho đủ lượng acid cần thiết để chuyển alkaloid base trong dịch
chiết CHC]; thành muối tan trong nước Nếu không đủ acid alkaloid sẽ nằm lại trong CHCl
Lượng dung dịch acid mỗi lần chiết không cần nhiều nhưng cần chiết nhiều lượt
Với 100 mL dung dịch CHC1; thì cần dùng 20-30 mL dung dịch acid và các lần sau (5-
Trang 38
Chuong 1 TONG QUAN
7 lần) chỉ cần dùng 15 mL mỗi lần Theo dõi quá trình chiết sau bằng thuốc thử
alkaloid
Phải chiết kiệt nhưng không dé dung dịch bị nhũ hoá Thường mỗi lần chiết lắc bình qua lại khoảng 80 lần Nếu bị nhũ hoá khơng nhiều ta có thể xử lý bằng cách ly
tâm hoặc lọc qua lớp giấy lọc khô Nếu nhũ hoá nhiều phải để lắng một thời gian trong
tủ lạnh
Dung dịch chiết này chứa một số tạp nhưng số trường hợp đã có thể dùng để định
lượng sơ bộ bằng phép cân hoặc so màu
øe Để loại tạp (chlorophyl, chất màu, nhựa) có thể lắc dung dịch acid alkaloid
với dung môi hữu cơ như ether, PE, CHC]s một vai lần
e Cho dung dich acid alkaloid vào bình gạn, rót vào đó một lượng ether hoặc
CHCl, sau do cho ti ty dung dich NHạ 10% hoặc loại kiém khac dén pH đã chọn tùy theo yêu cầu định chiết
Cu thé: Néu trong dung dịch acid có nhiều nhóm alkaloid thì cần chiết phân đoạn
ở môi trường pH khác nhau Trước tiên cho dung dịch pH = 2-3 để chiết lẫy riêng các alkloid base yếu Sau đó, nâng pH dung dịch lên 6-7 để chiết lay cdc alkaloid base trung bình Sau cùng nâng dung dịch lên pH = 10-12 để chiết lay alkaloid base manh Nếu chỉ cần chiết lấy alkaloid toàn phần thì kiềm hóa dung dịch acid đến môi trường
pH = 10-12 và chiết CHC1; như trên
e Dịch chiết CHCI; tách riêng, làm khan bằng Na;SO¿ khan (thường dùng 1-2 g cho 60 mL CHC]; hoặc cho 50 mL ether vao lac trong 15 phút) Loại nước bằng
natri sunfat khan, bốc hơi dung môi đến cạn Hoà cặn trong chlorofom hoac methanol dé cham sac ky Néu cé diéu kién dé dung dich CHCl; nay vao binh hit 4m qua đêm, sau đó lọc và cất thu hồi dung môi, được alkaloid
Phương pháp 2: Chiết bằng dung dịch acid hay acid loãng trong alcol
Khác với phương pháp trên, phương pháp này sử dụng dung dịch acid vô cơ hay
hữu cơ kết hợp với rượu để chiết alkaloid đưới dạng muỗi hoà tan
Acid thường dùng là acetic acid, tactric acid, chlohydric acid, sulfuric acid,
phosphoric acid Tùy thuộc vào từng loại alkaloid cần chiết mà lựa chọn acid cho thích hợp
Trang 39
Chuong 1 TONG QUAN
> Chiét bang acid
Dich chiét trung hòa acid, cơ cạn, hịa tan cặn trong acid, loại tạp, kiềm hoá rồi chiết lại bằng dung môi hữu cơ, bốc hơi dung mơi, hịa cặn trong chlorofom để chấm sắc ký Cách chiết này loại được nhiều tạp và nếu dùng natri hydrocarbonat để kiềm
hố có thê chiết được alkaloid có chứa phenol
> Chiết bằng dung dịch acid loãng trong alcol
Thu dịch chiết được liệu trong dung môi alcol-acid Bốc hơi dung môi, lắc dịch
chiết đậm đặc với dung môi hữu cơ (ether, chlorofom) để loại tạp Kiềm hoá dung dịch nước acid rồi chiết bằng dung môi hữu cơ, bốc hơi dung môi thu được cặn alkaloid thô
Với cách chiết này, alkaloid không bị mất nhưng dịch chiết lẫn nhiều tạp
Phương pháp chiết tốt nhất đối với dung môi alcol-acid là ngẫm kiệt và áp dụng kĩ thuật chiết ngược dòng (dịch chiết đầu đề riêng, phần dịch chiết sau làm dung mơi
cho mẻ mới) Vì trong môi trường acid, ở nhiệt độ cao, alkaloid dễ bị phân hủy nên
dịch chiết cần trung hoà đến pH =7-8 trước khi cất thu hồi alcol Dung dịch thu được
để yên 1-3 ngày, loại tạp
Cách loại tạp (nhựa, chlorophin, protein, hydrat cacbon): Dé yên dung dịch acid ở lạnh một đêm Lặp lại nhiều lần như vậy, sau đó gạn hoặc lọc lẫy dung dịch trong
Dich lọc tiếp tục tiến hành như các bước của phương pháp trên
Trong sản xuất hiện nay chưa có đủ dung mơi hữu cơ để chiết alkaloid base thì
phương pháp thích hợp nhất là kết tủa dung dịch chiết bằng kiềm Lọc lấy tủa, hoà tan alkaloid base vào dung dịch acid, lại kết tủa bằng kiềm Lặp đi lặp lại nhiều lần đồng thời chiết lẫy alkaloid
Để kết tủa được tốt hơn và dễ lắng nên thực hiện ở nhiệt độ 60-70°C Kết tủa
xong không lọc ngay mà nên để 1-2 ngày Alkaloid sẽ tiếp tục kết tủa trong thời gian
này Khi lọc lấy tủa, dùng dung dịch NHOH hoặc kiềm loãng rửa tủa và cuối cùng rửa lại bằng nước
s* So sánh - nhận xét :
Nước acid là dung mơi rẻ tiền và thích hợp nhất cho sản xuất alkaloid hiện nay
nhưng nó có nhược điểm là khó bốc hơi Vì vậy trong điều kiện cho phép nên thay
nước acid bằng alcol-acid Alcol có thể dùng là methanol, ethanol hoặc propanol
Trang 40
Chuong 1 TONG QUAN
Alcol-acid có khả năng hoà tan alkaloid mạnh hơn nước acid, đồng thời ít hoà tan tạp chất (protein, thực vật, carbohydrat, .) hơn
Ưu điểm nỗi bật của cồn là dễ bốc hơi nên dễ đàng cô đặc dịch chiết để kết tủa
triệt để alkaloid Vì vậy, hiệu suất chiết alcol bao giờ cũng cao hơn chiết bằng nước Hiện nay, người ta sử dụng cột nhựa trao đổi cationic để tách alkaloid ra khỏi dung dịch chiết Dung dịch nước acid alkaloid cho chảy qua cột nhựa cationic Alkaloid bi git lại trong cột Sau đó dùng dung dịch kiềm NH; cho qua cột để đây alkaloid ra khỏi cột nhựa và cuối cùng rửa cột thu alkaloid base
s* Một số lưu ý trong quá trình chiết xuất
— Trong cây, alkaloid tồn tại đưới dạng muối của các acid hữu cơ Một số
alkaloid kết hợp với tannin nhất là những cây có nhiều tannin Vì vậy, đối với được
liệu có nhiều tannin cần dùng dung mơi có độ phân cực mạnh hơn hoặc chiết nóng dé
tách alkaloid ra khỏi tannin hoà tan vào dung môi
— Một số alkaloid là các ester như atropine, cocaine, heliotrine cé thé bi thuy
phân trong quá trình chiết xuất nên hạn chế sử dụng nhiệt độ cao
— Ngược lại, một số alkaloid tồn tại trong cây dưới dạng glycoside như solamacgine trong các loài Solanum Để chiết các alkaloid này cần có giai đoạn thủy phân
— Nói chung, alkaloid là một chất tương đối bền vững so với nhiều hợp chất tự
nhiên khác Tuy nhiên, một sỐ hợp chất thuộc dẫn xuất indol rất dễ bị huỷ hoặc biến
chất bởi ánh sáng và các tác nhân oxy hoá-khử nên cần chú ý khống chế các yếu tố có thể làm hỏng alkaloid trong quá trình chiết xuất
— Đại đa số alkaloid là chất kết tinh không màu và có điểm chảy xác định, chỉ có
một số alkaloid có màu vàng như berberine, palmatine, serpentine, .; có thể sử dụng sự thay đổi màu này theo dõi chúng trong quá trình chiết tách
1.4.7.3 Thuốc thử phát hiện alkaloid
— _ Các thuốc thử thông thường tạo kết tủa với alkaloid :
+ Thuốc thử Dragendorff tạo kết tủa vàng da cam đến đỏ với alkaloid + Thuốc thử Mayer tạo kết tủa màu trắng hoặc vàng cam với alkaloid
+ Thuốc thử Wagner (Bouchardat) tạo két tia vàng nau voi alkaloid