Protein tái tổ hợp và virus aujeszky

Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Bài tiểu luận PROTEIN TÁI TỔ HỢP VÀ VIRUS AUJESZKY Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky I Đặt vấn đề: Trong ngành chăn nuôi heo, thường gặp loại bệnh virus gây thiệt hại lớn, gây tử vong hàng loạt trang trại hay heo trở thành vật chủ gây bệnh tiềm ẩn Bệnh Aujeszky ( bệnh giả dại) heo thí dụ điển hình, bệnh ác tính có tốc độ lây nhiễm cao mang ý nghĩa quan trọng mặt kinh tế Bệnh nhiễm virus nguyên nhân gây dấu hiệu thần kinh trung ương tỉ lệ tử vong cao heo con, bệnh tích đường hô hấp heo trưởng thành Các loài khác bị nhiễm tiếp xúc trực tiếp với heo bệnh Bệnh gây giới hạn mặt kinh tế vùng có bệnh phổ biến Những chương trình trừ tiệt bệnh tiến hành thành công nhiều Heo mèo chết bệnh quốc gia Ở Mỹ, tất bang kiểm giả dại (bệnh Aujeszky) soát bệnh đàn heo nuôi Nhưng có mặt virus heo hoang dã vấn đề cần quan tâm Heo nguồn chứa virus chủ yếu, biểu triệu chứng thần kinh hô hấp Bệnh lây nhiễm qua nhiều đường khác nhau, chủ yếu thông qua chất tiết Không lây nhiễm cho người Bệnh thuốc điều trị Chủ yếu phòng bệnh tiêm vaccine cho thú, gây đáp ứng miễn dịch đặc hiệu Nhiều loại vaccine chế tạo kỹ thuật đại, có kỹ thuật sản xuất protein tái tổ hợp có ứng dụng quan trọng công tác kiểm soát bệnh II Tổng quan Giới thiệu chung bệnh Aujeszky 1.1 Khái niệm phân bố địa lý Là bệnh truyền nhiễm virus thuộc họ Herpesviridae, triệu chứng lâm sàng bật hệ thần kinh hô hấp.Ở heo, bệnh lan Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky tràn dạng nhiễm trùng tiềm ẩn, gây tử vong heo chúng viêm não cấp suy đường hô hấp heo lớn Ở loài khác bệnh gây chứng viêm não kèm theo triệu chứng ngứa Năm 1902, Aladar Aujeszky, giáo sư vi trùng học trường Thú y Budapest, phân lập bệnh việc nuôi cấy thỏ mẫu bệnh phẩm lấy từ thần kinh trung ương chó bê (xuất triệu chứng thần kinh giống bệnh dại) với biểu ngứa dội điểm tiêm truyền Nhưng thời gian nung bệnh ngắn ngày, dẫn đến chết 24-48 Về sau, bệnh ghi nhận nhiều loại thú Năm 1966, xác định heo ổ chứa nguồn lây nhiễm bệnh chủ yếu Bệnh xuất số quốc gia Châu Âu, Đông Nam Á, trung tâm nam Mỹ (bao gồm Mexico) Vài quốc gia Áo, Úc, Nhật chưa thấy bệnh xuất Những năm gần gây thiệt hại nhiều quốc gia Singapore, Đài Loan…Tầm quan trọng mặt kinh tế bệnh đề cập dần thay vị trí số bệnh dịch tả heo cổ điển 1.2 Nguồn lây nhiễm Heo vật chủ tự nhiên virus Aujeszky nguồn mang bệnh tiềm ẩn Tuy nhiên, virus lây nhiễm cho tất động vật nuôi hoang dã khác trâu bò, cừu, dê, mèo chó Bệnh không lây nhiễm cho người khỉ, tỉ lệ mắc bệnh ngựa Heo bệnh: Các chất tiết (mũi, miệng, quan sinh dục) tử thi heo giàu virus Heo khỏi bệnh mang virus: Có thể thấy virus nước mũi khoảng tháng sau Heo khỏe mang virus: (thể nhiễm trùng thầm lặng) gặp heo sinh sản hay heo tiêm vaccine Các sản phẩm động vật thịt quan (gan, thận, phổi), tinh trùng, huyết heo Virus tồn thức ăn, nước uống, phương tiện vận chuyển 30-40 ngày gió mang từ vài trăm mét tới km 1.3 Cách lây lan: Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Ở heo lây theo cách: -Trực tiếp (chủ yếu): +Heo bú sữa mẹ mắc bệnh +Heo lớn nuôi nhốt chung +Heo giống giao phối +Qua bào thai: Tùy theo ngày nhiễm virus mà gây sảy thai, thai khô, chết thai, sinh còi cọc -Gián tiếp: Qua xe chở thức ăn, dụng cụ nhiễm Ở loài vật khác: Chó, mèo, thú lấy lông phần lớn tiêu thụ phận heo bệnh chứa virus 1.4 Các triệu chứng bệnh: Ở heo, triệu chứng bệnh khác tùy thuộc độ tuổi Ở heo (nhỏ tuần tuổi), bệnh đặc trưng chết bất ngờ có dấu hiệu báo trước, triệu chứng sốt cao, bơ phờ, chán ăn, nôn mửa, run rẩy, không vững, co giật Một số heo khả di động chân sau ngồi xổm giống chó Số khác có triệu chứng nằm nghiêng, không vững hay vòng tròn Tỉ lệ tử vong nhóm tuổi cao, dấu hiệu thần kinh phát triển, thú thường chết vòng 24-36 Neurological disorders in piglets Ở heo cai sữa (từ tuần tuổi đến tháng tuổi), bệnh thể chủ yếu bệnh đường hô hấp, với triệu chứng sốt, chán Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky ăn, cân nặng giảm, ho, hắt hơi, viêm màng kết khó thở Tỉ lệ chết giảm từ 50% xuống 5% tháng tuổi Ở heo trưởng thành, lây nhiễm bệnh thường ảnh hưởng nhẹ, chủ yếu xảy triệu chứng đường hô hấp chảy nước mũi, ho, hắt hơi, dấu hiệu thần kinh run loạng choạng Tuy nhiên, vài heo trưởng thành có triệu chứng đường hô hấp xấu dẫn đến viêm phổi Tỉ lệ tử vong thấp khoảng 1% Ở heo nái sinh sản, cảm nhiễm thầm lặng, sốt, ăn không ngon hay kén ăn, vật hay ngáp 4-5 ngày Hiếm thấy triệu chứng thần kinh Trên heo nái có mang, tháy xáo trộn sinh sản, sẩy thai 50% trường hợp thấy tháng đầu tháng sau, đẻ heo chết, ổ có sống chết, thai khô thai ngậm nước, heo sữa… Summary of clinical signs in pigs Ở gia súc cừu, triệu chứng ngứa tập trung mảng da, sau thú thường hay liếm, cọ xát thể, day dứt, khó chịu, tự tổn thương thể (self-mutilation) Những thú bị nhiễm thường trở nên yếu chí chết Chứng co giật, kêu rống, nghiến răng, nhịp tim nhanh không đặn, thở khó nhọc thường xảy Các triệu chứng xảy tương tự chó mèo, triệu chứng thần kinh, vùng hầu bị tê liệt, tiết nước bọt Self mutilation of a goat's nhiều giống bệnh dại Những thú bị head Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky nhiễm điển hình chết 1-2 ngày 1.5 Bệnh tích a Đại thể: Không có bệnh tích đặc trưng Trừ heo 10 ngày tuổi bào thai có nhóm hoại tử (gần giống hạt kê) gan lách Ở heo trưởng thành bệnh tích hoại tử hạch amygdale, viêm phổi thùy tích nhiều nước tiểu bàng quang Ở heo có triệu chứng thần kinh thấy rõ: Cho thấy sung huyết màng não, bán cầu não nhiều dịch não tủy White to yellow necrotic foci on spleen (pig) Congestion and consolidation of the lungs b Vi thể: Viêm não tủy virus, có xâm nhập phát tán bạch cầu lympho, có lớp lymphocyte quanh mạch Thể vùi nhân thuộc type cowdry A, NST đẩy sát rìa tế bào thần kinh Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky 1.6 Điều trị bệnh: Bệnh thuốc điều trị đặc hiệu 1.7 Phòng bệnh: Tiêu độc chuồng trại định kỳ hàng tuần Vimekon 100g/20l nước Chỉ mua đưa vào trại heo không mang mầm bệnh, cách ly theo dõi heo nhập đàn 30 ngày Tiêm phòng đàn heo khỏe vaccine Heo khỏi bệnh nên bán thịt, không sử dụng vào việc sinh sản Virus Aujeszky Virus gây bệnh Aujeszky (ADV), gọi virus pseudorabies Giống: Varicellovirus Phân họ: Alphaherpesvirinae Họ: Herpesviridae Suid Herpesvirus I (SHV I) 2.1 Hình thái Dạng hình cầu, có vỏ bọc (bao quanh protein màng) Đường kính 150-200nm T=16 Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Capsid bao gồm 162 capsomers bao quanh vỏ hình dạng định (Tegument) Phức hợp Glycoproteins gắn vào màng lipid Phía có điểm mở (Portal vertex) để DNA virus thoát vào nhân tế bào vật chủ AD virion structure with the location of the different proteins 2.2 Bộ gene DNA virus DNA mạch đôi có chứa đoạn Us mã hóa cho loại protein gây bệnh gE gI, chiều dài DNA 120-240kb Bộ gene chứa trình tự cuối trình tự lặp lại bên Biểu gene: Mỗi chép virus luôn mã hóa protein có trình tự promoter, hộp TATA, điểm khởi đầu chép, trình tự đầu 5’ (30-300bp)(không dịch mã), trình tự đầu 3’ không dịch mã (10-30bp), điểm đánh dấu poly A Có nhiều gene bị chồng lấp Chỉ có vài gene ghép với Có số gene không mã hóa Bộ gene DNA dòng ADV phân lập kỹ thuật Restriction endonuclease analysis (RFLP) với BamHI (nghiên cứu Brazil từ 1982 đến 1996) Kết cho 30 dòng virus xếp loại: types I (2 dòng), types II (28 dòng), types III chưa ghi nhận Footer Page of 133 Header Page of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Sau hệ thống hóa phát đoạn sử dụng cho phân loại dòng ADV (Fig.1) Type II đoạn 2, điều dẫn đến xuất đoạn 2a 2b Type III thiếu trình tự cắt đoạn 9, đoạn xuất đoạn Kết sau chạy điện di 2.3 Khả gây bệnh Virus gây bệnh thông qua glycoproteins nằm màng tế bào virus (các protein màng) Người ta phát 11 loại glycoproteins tham gia vào trình xâm nhiễm gây bệnh tế bào chủ có loại điển hình như: gE, gI, gD, gN, gM, gC, gB, gG… Trong glycoprotein biểu glycoprotein gE gI có liên quan trực tiếp đến khả gây bệnh virus Hai glycoprotein dịch mã từ vùng gene Us Capsid chứa protein Thymidine Kinase Footer Page of 133 Header Page 10 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky glycoprotein gây bệnh gC gắn bề mặt tề bào chủ Thymidine Kynase gB, gD, gL giúp virus phân giải màng tế bào chủ Đoạn gene Us mã hóa cho gE gI protein Structure of the DNA of the Aujeszky virus The gene of the proteins gE and gI are located in the Us fragment Chức glycoprotein trình xâm nhiễm virus vào tế bào chủ Glycoprotein C (gC) có khả kết hợp lên bề mặt tế bào, tương tác trung gian phần virus tế bào chủ Sự kết hợp ban đầu yếu sau mạnh lên nhờ vào kết hợp glycoprotein khác, gD, thông qua thụ thể đặc biệt virus tế bào chủ Sự kết hợp thụ thể gD mở đầu cho làm tan màng tế bào chủ protein vỏ Footer Page 10 of 133 10 Header Page 11 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Nucleocapsid protein vỏ vào tế bào chủ nucleocapsid di chuyển theo ống nhỏ để đến lỗ nhân DNA virus sau giải phóng vào nhân, chép tổng hợp virus bắt đầu Glycoprotein B (gB) phức hợp gH/gL đóng vai trò quan trọng tiến trình xâm nhiễm Nếu thiếu hai loại glycoprotein sinh loại virus đột biến: -gH đòi hỏi xác cho lây nhiễm ban đầu, lây truyền trực tiếp từ tế bào sang tế bào -gL cần cho xâm nhập không hoàn toàn quan trọng tiến trình lây nhiễm trực tiếp từ tế bào sang tế bào Initiation of herpesvirus infection Herpesviruses generally initiate infection by attachment of extracellular virions to cell surface receptors followed by fusion of viral envelope and cellular plasma membrane Incoming nucleocapsids are then transported along microtubules to the nuclear pore where genomic viral DNA is released into the nucleus Virus có tính gây bệnh mạnh: virus hướng thần kinh liên quan tới biểu lâm liên phân bố virus thể, virus hướng Footer Page 11 of 133 11 Header Page 12 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky sinh dục liên quan đến việc gây sảy thai sinh heo chết, virus hướng phổi gây xáo trộn hô hấp ( hầu hết cho heo cai sữa) Người ta biến đổi đặc tính gây bệnh virus qua việc truyền cấy liên tục thú( bồ câu), trứng có phôi (như chủng BUCAREST), môi trường tế bào nhiệt độ thường (như chủng K61 Bartha) hay nhiệt độ thấp (như chủng Alfort 25) Khả tái tạo tế bào vật chủ: Virus công lên thụ thể vật chủ thông qua gB, gC, gD gH Bám vào màng tế bào giải phóng lõi vỏ protein vào tế bào chất tế bào vật chủ Capsid vận chuyển qua lỗ nhân nơi mà DNA virus giải phóng vào nhân Những gene đầu chép trực tiếp mRNA virus chép polymerase II tế bào chủ, vận chuyển vào tế bào chất dịch mã thành protein đầu Những protein đầu có liên hệ đến tái tạo DNA virus vận chuyển trở lại vào nhân Tổng hợp nhiều DNA virus polymerase Sự chép mRNA cuối polymerase II vật chủ, vận chuyển vào tế bào chất dịch mã thành protein cuối Những protein cuối protein cấu trúc hay protein lõi, mà vận chuyển trở lại vào nhân 10 Sự sản xuất virus bắt đầu thông qua phần mỏng bên màng nhân mà sửa đổi việc đưa vào glycoproteins herpes, thể Golgi cuối gỉai phóng màng tế bào Sự tái tạo tiềm tàng: Sự tái tạo vòng đời virus gắn với DNA tế bào chủ virus sử dụng máy di truyền tế bào chủ để sản sinh virus 2.4 Đường xâm nhập: Virus thường chủ yếu lây truyền qua tuyến đường hô hấp đường miệng (những chất tiết từ miệng mũi nguồn chứa virus tiềm ẩn), Footer Page 12 of 133 12 Header Page 13 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky lây nhiễm cho loài mẫn cảm với bệnh thông qua tiếp xúc trực tiếp Trong trình lây nhiễm cấp tính, virus tồn tuần biểu mô hạch hạnh nhân, sữa, nước tiểu, âm đạo, chất dịch từ bao quy đầu Virus khả lây nhiễm ngày không khí, độ ẩm không khí 55% Virus lây truyền qua xác súc vật chết Dưới điều kiện bất lợi, virus tồn vài ngày khu vực nước bị ô nhiễm, có khả truyền qua đường sinh dục Các đường lây nhiễm khác: Chất tiết tinh dịch âm đạo, thịt heo nhiễm bệnh, sữa sữa non, nước tiểu, phân, ổ rơm, cỏ xanh, nơi mà nước thải không thoát hay không xử lý trực tiếp, dụng cụ phẫu thuật thú y bị nhiễm, bệnh lây lan nông trại điều kiện bất lợi… 2.5 Cách sinh bệnh: Sau theo đường mũi-miệng, virus nhân lên chỗ (đặc biệt hạch amygdale) lan tỏa theo hướng trung tâm thần kinh, công thần kinh trung ương Mặt khác qua đường máu, tình trạng viremia, virus công nhiều quan phổi (gây xáo trộn hô hấp), quan sinh dục (gây xáo trộn sinh sản) Việc cảm nhiễm thời kỳ phôi thai (thời kỳ heo nái mang thai) dẫn đến sảy thai Thời gian ủ bệnh thường từ 2-4 ngày lợn sữa từ 3-6 ngày lợn cai sữa hay trưởng thành 2.6 Nuôi cấy: Nuôi cấy tế bào: Đây kỹ thuật chọn thực hành để tạo nhiều virus Virus mọc dễ dàng nhiều hệ thống tế bào ( từ loài gia cầm đến động vật hữu nhũ), thường dùng môi trường tế bào PK 15, IBR-S2, BHK 21 Bệnh tích tế bào đặc trưng xuất thể vùi nhân ưa acid hợp bào (syncytia) Footer Page 13 of 133 13 Header Page 14 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Áp dụng thực hành phương pháp này: sản xuất nhiều virus (cho việc chế tạo vaccine) biến đổi độc lực, phân lập chủng virus (chẩn đoán virus) định hiệu giá tìm kiếm kháng thể Nuôi cấy thú (In vivo) Có thể sử dụng nhiều loại thú phòng thí nghiệm hầu hết dùng thỏ Nuôi cấy trứng (In ovo) Có thể thực Đặc biệt, việc cấy qua màng nhung niệu trứng gà dùng để sản xuất vaccine 2.7 Chẩn đoán Các dấu hiệu lâm sàng bệnh virus gây biến đổi nhầm lẫn với bệnh khác bệnh gây sẩy thai, yếu nôn mửa giống bệnh viêm dày-ruột truyền nhiễm (TGE) … nên phải chẩn đoán xác phòng thí nghiệm phương pháp trung hòa kháng huyết (SN), phản ứng virus (VI), kiểm tra cắt lát tổ chức kháng thể huỳnh quang (FATS), ELISA phản ứng kết tủa Latex (LAT)… Phản ứng ELISA Protein tái tổ hợp: Bệnh tích xảy phức tạp, với triệu chứng khác tùy theo lứa tuổi vật nuôi Bệnh gây nhiều thiệt hại cho ngành chăn nuôi heo bệnh cho thú khác mà mẫn cảm với bệnh Footer Page 14 of 133 14 Header Page 15 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Để kiểm soát dịch bệnh phòng bệnh cho vật nuôi (đặc biệt heo), việc nghiên cứu sử dụng kỹ thuật di truyền tạo loại vaccine hệ với hiệu phòng bệnh vượt trội tiến hành thu nhiều kết ban đầu 3.1 Giới thiệu: Vaccine phòng bệnh chế tạo theo nhiều cách khác Nhưng tất có mục đích chung kích thích thể vật nuôi gây đáp ứng miễn dịch (tạo kháng thể) chống lại tác nhân gây bệnh Điển vaccine: vaccine virus nhược độc, vaccine virus sống, vaccine DNA… Trong có vaccine sản xuất từ protein virus ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp cho phép sản xuất lượng lớn protein virus thích hợp chuyển vào yếu tố mang (plasmide) biểu thông qua số hệ thống sản xuất sinh học từ tế bào nấm men, tế bào côn trùng vi khuẩn… Những tế bào nhân thật nấm men (Saccharomyces cerevisiae), tế bào côn trùng (Spodoptera frugiperda), thường hay sử dụng làm hệ thống biểu Các hệ thống biểu làm nhiệm vụ Footer Page 15 of 133 15 Header Page 16 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky tổng hợp nên protein virus qui định gene chèn vào (cloning) Protein virus sau tinh chế sử dụng để sản xuất vaccine Vaccine tiểu phần Để sản xuất protein virus, protein có biến đổi sau phiên mã chế glycosylation việc đảm bảo khả gây đáp ứng miễn dịch chúng, tế bào eukaryotes (nấm men, tế bào động vật hữu nhũ, tế bào côn trùng ) thường sử dụng để làm hệ thống biểu Và sản xuất lượng lớn protein virus thông qua tác nhân gây nhiễm virus baculoviruses mang gene virus vaccine, protein virus biểu vi khuẩn virus chuyển gene 3.2 Ưu điểm: Do vaccine tiểu phần chứa một vài protein riêng biệt tinh bán tinh nên có ưu điểm sau: - Độ an toàn cao - Có thể phối hợp với nhiều loại protein tương ứng với yếu tố kháng nguyên khác nhau, để phòng nhiều bệnh khác nhau, giảm chi phí phân phối, tăng hiệu kinh tế - Tính hướng đến tế bào đích cao - Cho phép phân biệt thú tiêm vaccine thú nhiễm tự nhiên 3.3 Ứng dụng Protein tái tổ hợp sản xuất theo mục đích đưa phân tử sinh học cần thiết vào thể sinh vật Khi thể mang bệnh lý thiếu protein (như sản xuất insulin tái tổ hợp), tạo loại vaccine protein tái tổ hợp với hiệu tác dụng an toàn giá thành rẻ… Trong thú y, để phòng chống kiểm soát bệnh virus gây ra, người ta sử dụng recombinant protein để làm sub-unit vaccine (safe, effective, cheap) 3.4 Quy trình sản xuất: Footer Page 16 of 133 16 Header Page 17 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky Recombinat subunit vaccines were produced by VP2 proteins of canine or porcine parvoviruses The vaccines are safe, effective and cheap Sub-unit vaccine Quy trình sản xuất thực theo bước sau: Đoạn gene qui định protein gây bệnh ADV cắt chèn vào vector mang Baculovirus Tuyển chọn tái tổ hợp Baculovirus tương đồng (thường dòng tế bào Sf9) Dòng Baculovirus tái tổ hợp tổng hợp protein bị bất hoạt (điển hình glycoprotein gE) Protection rates of the four subunit vaccines reached above 85% Kết Footer Page 17 of 133 Một vaccine ADV tạo thành với gE bị bất hoạt gp50 tái tổ hợp ADV phát triển nhằm mục đích phân biệt vaccine cho lợn với loài mẫn cảm khác 17 Header Page 18 of 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky III Kết luận đề nghị Bệnh Aujeszky bệnh có liên quan đến vấn đề tổn thương thần kinh trung ương, hô hấp Bệnh có tính chất lây nhiễm nhanh, mà heo nguồn chứa bệnh tiềm ẩn vật lây nhiễm sang loài mẫn cảm khác Hậu gây thiệt hại mặt kinh tế quan trọng bệnh thuốc đặc trị Virus gây bệnh thuộc nhóm Herpesvirus, gây bệnh thông qua glycoprotein vỏ virus,bộ gene chứa DNA Qua việc nghiên cứu hình thái khả gây bệnh lây truyền virus, từ ta định hướng đến việc sản xuất loại vaccine phòng bệnh cho vật nuôi hiệu tác dụng tốt, an toàn, giá thành rẻ Protein tái tổ hợp với nhiều ứng dụng quan trọng mặt thực tiễn, việc tạo vaccine phòng bệnh với ưu điểm vượt trội, đề nghị tiếp tục mở rộng hướng nghiên cứu liên kết với bệnh truyền nhiễm khác để tạo vaccine protein tái tổ hợp đa giá, tác dụng lúc nhiều bệnh đề nghị nên tiếp tục nghiên cứu tìm hiểu sâu type ADV để biết rõ nguồn gốc, khác biệt, lập nên sinh giầm từ đề hướng kiểm soát dịch bệnh hiệu IV Tài liệu tham khảo www.thepigsite.com www.cfsph.iastate.edu/FastFacts/pdfs/aujeskys_disease_F.pdf www.rda.go.kr/ /eng/research_list0705.jsp www.expasy.ch/viralzone/all_by_species/176.html http://www.aphis.usda.gov/animal_health/area_offices.htm Công nghệ sinh học thú y - Nguyễn Ngọc Hải-Trường ĐH Nông Lâm Tp HCM http://www.vet.uga.edu/vpp/gray_book02/fad/index.pdf Bài giảng bệnh truyền nhiễm virus heo – Trần Thanh Phong – Trường Đại học Nông Lâm Tp HCM Footer Page 18 of 133 18 ... 133 Protein tái tổ hợp virus Aujeszky tổng hợp nên protein virus qui định gene chèn vào (cloning) Protein virus sau tinh chế sử dụng để sản xuất vaccine Vaccine tiểu phần Để sản xuất protein virus, ... gene qui định protein gây bệnh ADV cắt chèn vào vector mang Baculovirus Tuyển chọn tái tổ hợp Baculovirus tương đồng (thường dòng tế bào Sf9) Dòng Baculovirus tái tổ hợp tổng hợp protein bị bất... dụng Protein tái tổ hợp sản xuất theo mục đích đưa phân tử sinh học cần thiết vào thể sinh vật Khi thể mang bệnh lý thiếu protein (như sản xuất insulin tái tổ hợp) , tạo loại vaccine protein tái tổ