Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học trong quả mù u Quảng Nam

Header Page of 126 Công trình ñược hoàn thành BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG Người hướng dẫn khoa học: GS.TS ĐÀO HÙNG CƯỜNG NGUYỄN NGỌC SONG Phản biện 1: Phản biện 2: Trần Mạnh Lục NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG QUẢ MÙ U QUẢNG NAM Luận văn ñược bảo vệ Hội ñồng chấm Luận văn tốt nghiệp Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ Mã số: 60.44.27 thạc sĩ khoa học họp Đà Nẵng vào ngày 30 tháng năm 2012 TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Có thể tìm hiểu luận văn tại: - Trung tâm thông tin-Học liệu, Đại học Đà Nẵng - Thư viện trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng Footer Page of 126 Đà Nẵng– Năm 2012 Header Page of 126 MỞ ĐẦU Lý chọn ñề tài - Quả mù u có Quảng Nam Phương pháp nghiên cứu Cây mù u ñược biết ñến từ hàng ngàn năm trước quần ñảo - Nghiên cứu lý thuyết: phương pháp nghiên cứu hợp chất Tahiti Người Tahiti ñã sớm khám phá hạt mù u khô có thiên nhiên, tổng quan tài liệu ñặc ñiểm thực vật, thành phần chứa dầu tìm cách trích ly ñể dùng vào việc chăm sóc, bảo vệ da hóa học, tác dụng sinh học thành phần thuộc mù u chống lại tác nhân tổn hại ánh nắng, gió biển Y khoa Pháp ñã ghi nhận nhiều trường hợp sử dụng thành công dầu mù u - Phương pháp chiết: Lấy dầu phương pháp ép học, chiết soxhlet dung môi có ñộ phân cực khác ñiều trị bệnh lý da làm giảm ñau nhức thần kinh - Phương pháp xác ñịnh số vật lý hóa học: phương bệnh phong làm lành vết bỏng nặng nước sôi, hóa chất pháp xác ñịnh số vật lý tỷ trọng, số khúc xạ, phương pháp X-quang xác ñịnh số axit, este, xà phòng hóa… Nhiều phận ñược dùng làm thuốc Nhựa mù u - Phương pháp xác ñịnh thành phần hóa học, ñịnh danh, xác ñịnh dùng bôi làm tan chỗ sưng tấy, chữa họng sưng không nuốt ñược, cấu trúc cấu tử GC-MS cam tẩu mã thối loét mụn tràng nhạc không tiêu, mụn Bố cục luận văn nhọt, vết loét nhiễm trùng, bệnh dời ñái, tai có mủ Dầu mù u dùng trị Chương Tổng quan ghẻ, nấm tóc bệnh da nói chung, chữa viêm dây thần kinh Chương Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu bệnh cùi, làm lành vết thương, trị bỏng, dùng bôi trị thấp Chương Kết thảo luận khớp Vỏ dùng trị bệnh ñau dày xuất huyết bên Rễ dùng chữa viêm chân Từ ứng dụng quan trọng dầu mù u công CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Khái quát họ Bứa (Họ Măng Cụt) 1.1.1 Họ Bứa nghệ mỹ phẩm, dược phẩm, việc nghiên cứu sản xuất dầu mù u 1.1.2 Cây mù u từ ñó xác ñịnh thành phần có hoạt tính sinh học nhu cầu cần 1.2 Sơ lược "bỏng" dược liệu thiên nhiên có tác dụng trị thiết Vì chọn ñề tài: "Nghiên cứu chiết tách, xác ñịnh thành bỏng phần hóa học mù u Quảng Nam." 1.3 Các dạng axít béo hay gặp tự nhiên Mục tiêu nghiên cứu 1.4 Phương pháp nghiên cứu hợp chất thiên nhiên - Nghiên cứu chiết tách dầu mù u từ mù u 1.5 Chiết tách hợp chất hoá học hạt mù u - Xác ñịnh thành phần hóa học dầu mù u 1.5.1 Sản xuất dầu phương pháp ép học - Thử hoạt tính sinh học dầu mù u 1.5.2 Nguyên tắc chiết tách (trích ly) Đối tượng phạm vi nghiên cứu Footer Page of 126 1.5.3 Chiết chất rắn Header Page of 126 1.5.4 Xác ñịnh thành phần hóa học phương pháp sắc kí khí khối phổ (GC- MS) Lấy khoảng 10g mẫu hạt mù u khô, cho vào giấy lọc, quấn kĩ bỏ vào dụng cụ chiết soxhlet Tiến hành chiết dung CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN môi chloroform, thu ñược dịch chiết, ñem lọc bỏ bã chiết Tiến hành CỨU chạy sắc kí khí ghép khối phổ GC-MS dịch chiết thu ñược ñể xác ñịnh hàm lượng cấu tử dịch chiết 2.1 Nguyên liệu Quả mù u chín, thu mẫu huyện Núi Thành, tỉnh Quảng Nam Cách lấy mẫu: Lấy mù u chín rụng, không sâu mọt Tách 2.3.3.4 Chiết soxhlet mẫu hạt mù u dung môi ethanol Lấy khoảng 10g mẫu hạt mù u khô, cho vào giấy lọc, quấn kĩ bỏ vỏ, lấy nhân hạt ñem xay nhỏ, sấy khô nhiệt ñộ 40 C bỏ vào dụng cụ chiết soxhlet Tiến hành chiết dung 2.2 Dụng cụ hóa chất môi ethanol, thu ñược dịch chiết, ñem lọc bỏ bã chiết Tiến hành 2.3 Phương pháp nghiên cứu chạy sắc kí khí ghép khối phổ GC-MS dịch chiết thu ñược ñể xác 2.3.1 Phương pháp hóa lý xác ñịnh ñộ ẩm hàm lượng tro ñịnh hàm lượng cấu tử dịch chiết 2.3.1.1 Xác ñịnh ñộ ẩm 2.3.4 Khảo sát ñiều kiện chiết tối ưu 2.3.1.2 Xác ñịnh hàm tro 2.3.4.1 Lựa chọn dung môi 2.3.2 Chiết tách dầu mù u phương pháp ép học 2.3.4.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết Lấy khoảng 100 gam mẫu hạt mù u ñã sấy khô cho vào máy ép Cân mẫu, mẫu khoảng 10 gam hạt mù u khô Tiến hành ly tâm Cân xác ñịnh khối lượng dầu mù u thu ñược Dầu thu ñược chiết soxhlet mẫu thời gian khác nhau: giờ, giờ, sau ñã làm ñem chạy sắc kí khí ghép khối phổ GC-MS ñể giờ, giờ, 700C lượng dung môi chiết xác ñịnh hàm lượng cấu tử dầu mù u thử hoạt tính kháng ñịnh, thu ñược dịch chiết tương ứng sinh dầu mù u 2.3.4.3 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ rắn(g)/lỏng(ml) 2.3.3 Trích ly dầu mù u phương pháp chiết soxhlet Cân mẫu, mẫu khoảng 10 gam mẫu hạt mù u khô Tiến 2.3.3.1 Cơ sở phương pháp chiết soxhlet hành chiết soxhlet mẫu lượng thể tích dung môi 2.3.3.2 Chiết soxhlet hạt mù u dung môi n-hexan chiết khác nhau: 100ml, 110ml, 120m, 130ml, 140ml, 150ml Lấy khoảng 10g mẫu hạt mù u khô, cho vào giấy lọc, quấn kĩ thời gian giờ, thu ñược dịch chiết tương ứng bỏ vào dụng cụ chiết soxhlet Tiến hành chiết dung 2.3.4.4 Trích ly dầu mù u quy trình chiết tối ưu môi n-hexan, thu ñược dịch chiết, ñem lọc bỏ bã chiết Tiến hành 2.3.5 Xác ñịnh số vật lý, hóa học dầu mù u chạy sắc kí khí ghép khối phổ GC-MS dịch chiết thu ñược ñể xác 2.3.5.1 Xác ñịnh tỉ khối ñịnh hàm lượng cấu tử dịch chiết 2.3.5.2 Xác ñịnh số khúc xạ 2.3.3.3 Chiết soxhlet hạt nhân mù u dung môi chloroform 2.3.5.3 Xác ñịnh số axit Footer Page of 126 Header Page of 126 2.3.5.4 Xác ñịnh số este CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 2.3.5.5 Xác ñịnh số xà phòng 2.3.6 Phương pháp vi sinh vật thăm dò hoạt tính sinh học Để thực nội dung nghiên cứu ñề tài, tiến hành thực nghiệm theo sơ ñồ hình 2.2 2.4 Sơ ñồ nghiên cứu Quả mù u, tách bỏ vỏ, xay nhỏ Chiết với dung môi khác Ép học, lắng, lọc Xác ñịnh ñộ ẩm, n-hexan hàm Làm khan Na2SO4 lượng tro ethanol Xác ñịnh thành phần hóa học (ño GC - MS) Dầu mù u Xác ñịnh thành phần hóa học (ño GC - MS) cloroform Thử khả kháng vi sinh vật Dịch chiết chứa cấu tử nhiều Xác ñịnh số vật lí, hoá học Hình 2.2 Sơ ñồ nghiên cứu thực nghiệm Footer Page of 126 Khảo sát ñiều kiện chiết tối ưu: thời gian, tỉ lệ rắn/lỏng 3.1 Thu nguyên liệu Quả mù u chín rụng, ñược thu huyện Núi Thành – Quảng Nam vào khoảng tháng 10 – 2010 Trái mù u sau thu ñược làm sạch, sau ñó bóc tách phần vỏ cứng lấy nhân Hạt nhân ñược xay nhỏ, sấy khô 400C ta ñược mẫu hạt mù u khô có màu vàng, mùi thơm ñặc trưng 3.2 Kết khảo sát ñộ ẩm hàm lượng tro 3.2.1 Độ ẩm hạt mù u tươi mẫu hạt mù u khô 3.2.1.1 Xác ñịnh ñộ ẩm hạt mù u tươi Kết khảo sát ñược trình bày qua bảng 3.1 Bảng 3.1 Kết khảo sát ñộ ẩm hạt mù u tươi STT m (g) m1 (g) m2 (g) W (%) WTB (%) 5,382 47,126 50,398 39,205 39,062 5,376 54,154 57,447 38,746 5,378 50,064 53,332 39,234 Nhận xét: Độ ẩm trung bình hạt mù u tươi 39,062% Độ ẩm tương ñối thấp Tuy nhiên ñộ ẩm lại môi trường tốt ñể vi sinh vật phát triển, làm thối rửa mẫu Để bảo quản hạt mù u lâu dài, cần tiến hành phơi khô sấy khoảng 400C, ñể làm giảm ñộ ẩm hạt 3.2.1.2 Xác ñịnh ñộ ẩm mẫu hạt mù u khô Kết khảo sát ñộ ẩm mẫu hạt mù u khô trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2 Kết khảo sát ñộ ẩm mẫu hạt mù u khô STT m (g) m1 (g) m2 (g) W (%) 5,016 32,944 37,701 5,163 5,029 29,905 34,659 5,468 5,022 31,694 36,448 5,337 WTB (%) 5,323 Header Page of 126 10 Kết GC-MS dầu mù u ñược thể qua hình 3.4 bảng Nhận xét: Độ ẩm trung bình mẫu mù u khô 5,323% Độ ẩm thấp Như sau sấy khô 400C, lượng nước 3.5 hạt mù u ñã bay ñáng kể Với ñộ ẩm bảo quản hạt mù u thời gian ñể tiến hành thực nghiệm 3.2.2 Hàm lượng tro Kết khảo sát hàm lượng tro hạt mù u tươi ñược trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3 Kết khảo sát hàm lượng tro hạt mù u tươi STT m (g) mo (g) m3 (g) T (%) 5,382 47,126 47,316 3,530 5,376 54,154 54,339 3,441 5,378 50,064 50,257 3,589 TTB (%) 3,520 Nhận xét: Hàm lượng tro trung bình hạt mù u tươi 3,520% 3.3 Chiết tách dầu mù u phương pháp ép học Hình 3.4 Phổ GC-MS dầu mù u Kết ñược trình bày qua bảng 3.4 Bảng 3.5 Thành phần hoá học dầu mù u Bảng 3.4 Kết hàm lượng dầu hạt mù u phương pháp ép học STT Tên % Cinnamic acid 2,10 n-Hexandecanoic acid 1,90 2-nonadecanone 0,43 Oleic acid 8,55 Nhận xét Stearic acid 4,19 - Dầu mù u sau vừa ép xong có chứa nhiều mảnh nguyên 2,6,10,14-Tetramethylheptadecane 0,23 Adipic acid dioctyl ester 0,30 Xem phổ 1,11 tricosane 0,11 10 Bis (2-ethylhexyl) phthalate STT m (g) m3 (g) m4 (g) X (%) 100,135 39,718 65,968 26,215 100,178 39,824 65,839 25,969 100,202 39,804 65,682 25,873 XTB (%) 26,019 liệu Nên phải tiến hành lắng lọc ñể loại bỏ chúng - Bã hạt mù u sau ép (khô dầu) chứa dầu Như phương pháp ép học cho hiệu suất lấy dầu thấp - Dầu mù u thu ñược có màu vàng, sánh, có mùi thơm ñặc trưng Footer Page of 126 #REF! Header Page of 126 11 12 11 Xem phổ 0,09 12 Xem phổ 0,30 13 Xem phổ 0,97 14 Xem phổ 0,77 15 squalene 5,98 16 Androstan-6-one, oxime,(5Alpha)- 14,04 17 Xem phổ 29,03 18 Xem phổ 2,65 19 Xem phổ 18,35 20 Xem phổ 0,59 21 Xem phổ 1,01 22 Xem phổ 0,74 23 Xem phổ 1,55 24 Xem phổ 1,70 25 Xem phổ 1,27 26 Xem phổ 0,78 Tổng cộng 100 Nhận xét: Kết phân tích phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC– MS) cho thấy dầu mù u thu ñược từ phương pháp ép học 26 cấu tử, có cấu tử ñược ñịnh danh chiếm 37,83%, cấu tử chưa ñược ñịnh danh chiếm 62,17% Trong số cấu tử ñược ñịnh danh thành phần axit béo: Oleic acid chiếm 8,55%, stearic acid chiếm 4,19% Phổ MS cấu tử ñược thể hình 3.5 Hình 3.5 Phổ MS cấu tử dầu mù u 3.4 Khảo sát dung môi chiết 3.4.1 Xác ñịnh thành phần hoá học dịch chiết hạt mù u dung môi n-hexan Sau tiến hành thực nghiệm, dịch chiết thu ñược có màu vàng Kết GC-MS dịch chiết hạt mù u n-hexan ñược thể qua hình 3.7 bảng 3.6 Footer Page of 126 Header Page of 126 13 14 Nhận xét: Kết phân tích phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC– MS) cho thấy dịch chiết hạt mù u dung môi nhexan có 14 cấu tử, có cấu tử ñược ñịnh danh chiếm 81,3%, cấu tử chưa ñược ñịnh danh chiếm 18,7% Các cấu tử chủ yếu axit béo chiếm 79,75%, ñó Cis-9,cis-12-octadecadienoic acid (axit linoleic) chiếm 45,58%, stearic acid chiếm 21,18%, Hexandecanoic acid chiếm 12.99% Phổ MS cấu tử ñược thể hình 3.8 Hình 3.7 Phổ GC-MS dịch chiết hạt mù u dung môi n-hexan Bảng 3.6 Thành phần hoá học dịch chiết hạt mù u dung môi nhexan STT Hợp chất % Hexandecanoic acid 12.99 Cis-9,cis-12-octadecadienoic acid 45.58 Stearic acid 21.18 2,6,10,14-tetramethylheptadecane 0.40 Docosane 0.78 Tricosane 0.48 Xem phổ 0.93 Tetracosane 0.33 Pentacosane 0.50 10 Squalene 2.06 11 Xem phổ 7.21 12 Xem phổ 1.74 13 Xem phổ 1.62 14 Xem phổ 4.20 Tổng cộng 100 Footer Page of 126 Hình 3.8 Phổ MS cấu tử có dịch chiết hạt mù u/n-hexan Header Page of 126 15 16 3.4.2 Xác ñịnh thành phần hoá học dịch chiết hạt mù u Methyl 11-octadecenoate 3,71 dung môi chloroform Cis-9,cis-12-octadecadienoic acid 43,22 Sau tiến hành thực nghiệm, dịch chiết thu ñược có màu vàng Stearic acid 14,54 Kết GC-MS dịch chiết hạt mù u chloroform ñược thể 10 2,6,10,14-Tetramethylheptadecane 0,36 qua hình 3.10 bảng 3.7 11 chloroform ester 3,42 12 Tricosane 0,44 13 Xem phổ 1,17 14 Peptacosane 0,32 15 Xem phổ 0,38 16 Heptacosane 0,55 17 Hình 3.10 Phổ GC-MS dịch chiết hạt mù u dung môi 1,1'-bicyclopropyl-2-octanoic acid,2'-hexyl- methyl 6,10,14-hexandecatrienoic acid,3,7,11,15tetramethyl-methyl ester 2,29 18 Xem phổ 4,38 19 6-pentylidene-4,5-secoandrostane-4,17.beta-diol 9,20 20 Nonacosane 0,39 Tổng cộng 100 Nhận xét: Kết phân tích phương pháp sắc kí khí ghép Bảng 3.7 Thành phần hoá học dịch chiết hạt mù u dung môi khối phổ (GC– MS) cho thấy dịch chiết hạt mù u dung môi chloroform chloroform có 20 cấu tử, có 17 cấu tử ñược ñịnh danh chiếm 93,68% STT Tên % Trong ñó thành phần axit béo chiếm 69,28%, axit Cinnamic acid 0,65 béo có thành phần nhiều là: Cis-9,cis-12-octadecadienoic acid Cyclopentanone,2-methyl-4-(2-methylpropyl)- 0,12 chiếm 43,22%, stearic acid chiếm 14,54% Palmitic acid,etheylester 2,14 3.4.3 Xác ñịnh thành phần hoá học dịch chiết hạt mù u Hexandecanoic acid 10,87 dung môi ethanol 1,E-11,Z-13-Octadecantriene 0,21 Linolelaidic acid,methyl ester 1,64 Footer Page of 126 Sau tiến hành thực nghiệm, dịch chiết thu ñược có màu vàng Header Page of 126 17 18 Kết GC-MS dịch chiết hạt mù u ethanol ñược thể qua hình 3.13 bảng 3.8 11 Cyclopentaneudecanoic acid 0,17 12 Linolelaidic acid,methyl ester 2,10 13 Oleic acid, methy ester 5,64 14 Cis-9,cis-12-octadecadienoic acid 40,50 15 Stearic acid 15,03 16 2,6,10,14-Tetramethylheptadecane 0,18 17 Oleic acid, 2-hydroxyethyl ester 0,26 18 1,1'-bicyclopropyl-2-octanoic acid,2'-hexyl- methyl 3,06 ester 19 Xem phổ 0,77 20 Xem phổ 0,31 21 6,10,14-hexandecatrienoic acid,3,7,11,15- 1,59 tetramethyl-methyl ester Hình 3.13 Phổ GC-MS dịch chiết hạt mù u dung môi ethanol 22 Xem phổ 7,61 Bảng 3.8 Thành phần hoá học dịch chiết hạt mù u dung môi 23 6-pentylidene-4,5secoandrostane-4,17.beta-diol 4,76 ethanol STT Tên Tổng cộng % 100 Nhận xét: Kết phân tích phương pháp sắc kí khí ghép 2,6-dimethyl-2,7-octadiene 0,22 khối phổ (GC– MS) cho thấy dịch chiết hạt mù u dung môi erythritol 0,81 ethanol có 23 cấu tử, có 20 cấu tử ñược ñịnh danh Trong ñó thành 3,6-dimethyldecane 0,12 phần là: Cis-9,cis-12-octadecadienoic acid chiếm 43,22%, tetradecane 0,26 stearic acid chiếm 14,54% Cinnamic acid 0,41 Hexadecane 0,16 nonadecane 0,10 - Dung môi ethanol có ñộ phân cực cao nên có khả chiết Palmitic acid,etheylester 3,82 ñược nhiều cấu tử Ngược lại, dung môi n-hexan không phân Hexandecanoic acid 11,87 cực nên chiết ñược số cấu tử 10 1,E-11,Z-13-Octadecantriene 0,23 Footer Page of 126 Nhận xét chung: Từ kết thành phần hóa học dịch chiết hạt mù u dung môi ñi ñến kết luận sau: Header Page 10 of 126 19 20 - Cấu tử dịch chiết ñều axit béo Trong ñó Cis-9,cis-12-octadecadienoic acid (axit linoleic) chiếm 40%, axit stearic chiếm 15% Ngoài có axit khác: Hexandecanoic acid, Cinnamic acid, Oleic acid… - Thành phần hóa học dầu mù u có chứa hàm lượng axit béo cao, nên dầu mù u ñược sử dụng y học ñể làm lành vết thương, chữa mụn nhọt, côn trùng ñốt Trong công nghệ mỹ phẩm, dầu mù u ñược dùng ñể sản xuất dầu gội dầu xà phòng, kem dưỡng da… 3.5 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng ñến trình chiết tách hạt Hình 3.15 Đồ thị thể ảnh hưởng thời gian chiết ñến hàm mù u Dung môi n-hexan chiết ñược cấu tử dịch chiết lượng dầu hạt mù u n-hexan lại có hàm lượng cấu tử nhiều Nhận xét: Từ kết khảo sát, kết luận thời gian Vì chọn n-hexan làm dung môi ñể khảo sát chiết mẫu hạt mù u n-hexan tốt 150 ml dung ñiều kiện ảnh hưởng tới trình trích ly môi thu ñược 6,046 gam dầu, lượng dầu chiết ñược chiếm 60,213% 3.5.1 Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết mẫu hạt mù u Kết ñược thể qua bảng 3.9 hình 3.15 3.5.2 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ rắn(g)/lỏng(ml) Bảng 3.9 Hàm lượng dầu hạt mù u thu ñược chiết n-hexan theo thời gian Thời gian Bảng 3.10 Hàm lượng dầu mù u thu ñược chiết n-hexan mo(g) m3(g) m4(g) m4 – m3(g) X(%) 10,045 39,725 44,782 5,057 10,042 39,863 45,341 10,038 39,748 10,041 10,032 chiết (giờ) Footer Page 10 of 126 Kết thể qua bảng 3.10 hình 3.16 theo tỉ lệ rắn(g)/lỏng(ml) mo(g) V(ml) m3(g) m4(g) m4 – m3(g) X(%) 50,342 10,035 100 39,768 45,346 5,578 55,585 5,478 54,541 10,056 110 39,865 45,662 5,797 57,645 45,538 5,790 57,681 10,024 120 39,827 45,857 6,030 60,162 39,825 45,871 6,046 60,213 10,052 130 39,795 45,844 6,049 60,177 39,845 45,897 6,052 60,327 10,048 140 39,837 45,886 6,049 60,202 10,057 150 39,568 45,621 6,053 60,186 Header Page 11 of 126 21 22 sánh, có màu vàng xanh, không tan nước, nhẹ nước, có mùi thơm ñặc trưng Hàm lượng dầu thu ñược: phương pháp ép học cho hiệu suất lấy dầu thấp (26,019%) phương pháp trích ly (60,197%) Thành phần hóa học: Dầu mù u thu ñược phương pháp ép học có chứa axit béo tương ñối thấp chiếm 16,74%, ñó thành phần không ñịnh danh ñược chiếm tỷ lệ cao Ngược lại dầu mù u thu ñược phương pháp trích ly lại chứa Hình 3.16 Đồ thị thể ảnh hưởng tỉ lệ rắn(g)/lỏng(ml) ñến hàm lượng dầu nhiều axit béo ñó có axit có vai trò quan trọng axit linoleic, axit stearic, tổng hàm lượng axit béo dầu chiếm tới Nhận xét: Từ kết khảo sát kết luận rằng, tỉ lệ rắn(g)/lỏng(ml) ñể chiết mẫu hạt mù u tốt 10g/120 ml thu ñược 6,030 gam dầu, lượng dầu chiết ñược chiếm 60,162% mẫu hạt mù u 67,98% ethanol, 69,28% chloroform 79,75% nhexan 3.7 Kết xác ñịnh số vật lý số hóa học dầu mù u 3.7.1 Xác ñịnh tỉ khối 3.5.3 Trích ly dầu mù u quy trình chiết tối ưu Kết xác ñịnh tỉ trọng dầu mu u ñược trình bày bảng Kết hàm lượng dầu thu ñược chiết theo quy trình tối ưu 3.12 ñược trình bày qua bảng 3.11 Bảng 3.12 Tỷ trọng dầu mù u Bảng 3.11 Hàm lượng dầu mù u thu ñược chiết theo quy trình tối ưu STT m0(g) m3(g) m4(g) m4 – m3(g) X(%) 10,058 39,865 45,914 6,049 60,141 10,098 39,795 45,875 6,080 60,210 10,055 39,768 45,825 6,057 60,239 XTB(%) 60,197 3.6 So sánh lượng dầu mù u thu ñược phương pháp trích ly với phương pháp ép học Lần TN m1 (g) m2 (g) Tỉ trọng 49,061 45,381 0,925 49,059 45,346 0,924 49,060 45,412 0,927 Footer Page 11 of 126 0,925 Kết khảo sát cho thấy dầu mù u nhẹ nước 3.7.2 Xác ñịnh số khúc xạ Kết xác ñịnh số khúc xạ dầu mù u ñược thể qua bảng 3.13 Đánh giá dầu mù u cảm quan: dầu mù u thu ñược phương pháp ép học phương pháp trích ly ñều chất lỏng Trung bình Bảng 3.13 Chỉ số khúc xạ dầu mù u Lần Lần Lần Trung bình 1,468 1,469 1,468 1,468 Header Page 12 of 126 23 24 Nhận xét: Chỉ số khúc xạ dầu mù u 1,468, ñiều chứng 3.7.5 Chỉ số xà phòng Chỉ số xà phòng hóa trung bình = Ax + Es = 41,858 + 15,638 = tỏ dầu mù u có ñộ nhớt cao 57,496 3.7.3 Chỉ số axit Kết số axit dầu mù u ñược thể qua bảng 3.14 Kết quả, dầu mù u thu ñược phương pháp ép học thể Bảng 3.14 Chỉ số axit dầu mù u Lần TN m (g) V (ml) Ax (mg) 1,280 9,4 41,256 1,268 9,6 42,467 1,294 9,7 41,852 Trung bình 3.8 Thử hoạt tính sinh học hoạt tính kháng chủng vi sinh vật Staphylococcus aureus Bacillus subtilis với giá trị IC50 tương ứng 80,00 µg/ml 73,45µg/ml Kết thử hoạt tính kháng sinh dầu mù u ñược trình bày hình 3.17 41,858 3.7.4 Chỉ số este Kết số este dầu mù u ñược thể qua bảng 3.15 Bảng 3.15 Chỉ số este dầu mù u Lần TN m (g) V1 (ml) V2 (ml) Es 1.208 9,4 10,1 16,254 1.268 9,5 10,2 15,485 1.294 9,4 10,1 15.174 Hình 3.17 Kết thử hoạt tính kháng khuẩn dầu mù u 15,638 Kết cho thấy dầu mù u mà thu ñược từ phương Trung bình Nhận xét: Chỉ số axit dầu mù u thu ñược từ phương pháp pháp ép học, có hoạt tính kháng khuẩn giống tính kháng trích ly dung môi n-hexan tương ñối cao, ñiều chứng tỏ khuẩn dầu mù u mà công trình nghiên cứu ñã công bố trước hàm lượng axit tự có dầu cao Chỉ số este dầu lại ñây tương ñối thấp chứng tỏ tổng hàm lượng este dầu thấp Chỉ số axit cao chứng tỏ dầu mù u dễ bị oxi hóa trình bảo quản sử dụng Như ñể sử dụng dầu mù u có hiệu cao phải bảo quản mù u chai lọ ñậy kín, tránh tác nhân ánh sáng, nhiệt ñộ sử dụng thời gian ngắn Footer Page 12 of 126 Header Page 13 of 126 25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Quá trình nghiên cứu thực nghiệm rút kết luận 26 Hoạt tính kháng khuẩn Kết quả, dầu mù u thu ñược phương pháp ép học thể sau hoạt tính kháng chủng vi sinh vật Staphylococcus aureus Xác ñịnh ñược số tiêu hóa lí hạt mù u Bacillus subtilis với giá trị IC50 tương ứng 80,00 µg/ml * Độ ẩm hạt mù u tươi: 39,062% 73,45µg/ml * Độ ẩm hạt mù u khô: 5,323 % Công dụng dầu mù u * Hàm lượng tro: 3,520% Phương pháp thu nhận dầu mù u Từ thành phần hóa học, khả kháng khuẩn dầu mù u kinh nghiệm dân gian, thấy dầu mù u có tác dụng làm * Phương pháp ép học máy ép ly tâm cho hiệu suất lấy nhanh lành vết thương, kháng viêm, trị bỏng, mụn nhọt, lở loét, côn dầu thấp, hàm lượng dầu thu ñược: 26,019 %, hàm lượng axit trùng ñốt… Trong công nhệ mỹ phẩm, dầu mù u dùng ñể sản xuất xà béo dầu chiếm tỷ lệ thấp nên không dùng ñể sản xuất dầu mù u phòng, dầu gội ñầu, kem dưỡng da… ñược Kiến nghị * Phương pháp trích ly dung môi n-hexan cho hiệu suất lấy Cây mù u loại thực vật mọc hoang dã nhiều nơi, dầu cao, hàm lượng dầu thu ñược khoảng 60%, axit béo chiếm tỷ thuốc quý, phổ biến có nhiều ứng dụng quan trọng ñối với y lệ cao Trong ñó axit linoleic 45,58%, axit stearic chiếm 21,18%, học dân gian Chúng mong muốn ñược tạo ñiều kiện ñể tiếp tục hexadecannoic 12,99% Như sử dụng phương pháp ñể nghiên cứu thành phần hóa học, phân lập axit béo cấu tử sản xuất dầu mù u Tuy nhiên, sản xuất dầu mù u công có hoạt tính sinh học có dầu mù u, từ ñó có ứng dụng dầu nghiệp giá dung môi ảnh hưởng lớn tới giá thành sản phẩm mù u vào thực tiễn Mở rộng nghiên cứu cách toàn diện * Quy trình trích ly dầu mù u tối ưu là: 10 gam hạt mù u khô (ñộ ẩm 5,323%, kích thước hạt khoảng 0,5mm – 1,0mm) ñem trích ly với 120 ml dung môi n-hexan Hàm lượng dầu mù u thu ñược quy trình trích ly tối ưu là: 60,197% Xác ñịnh số số hoá học vật lý dầu mù u * Tính chất vật lý: chất lỏng sánh, màu vàng xanh, có mùi thơm ñặc trưng, không tan nước, nhẹ nước (d = 0,925 g/ml), số khúc xạ:1,468 * Chỉ số hoá học mẫu dầu: số axit: 41,858; số este: 15,638 Footer Page 13 of 126 phận khác lá, vỏ, rễ mù u  ... Mục ti u nghiên c u 1.4 Phương pháp nghiên c u hợp chất thiên nhiên - Nghiên c u chiết tách d u mù u từ mù u 1.5 Chiết tách hợp chất hoá học hạt mù u - Xác ñịnh thành phần hóa học d u mù u 1.5.1... Nguyên li u Quả mù u chín, thu m u huyện Núi Thành, tỉnh Quảng Nam Cách lấy m u: Lấy mù u chín rụng, không s u mọt Tách 2.3.3.4 Chiết soxhlet m u hạt mù u dung môi ethanol Lấy khoảng 10g m u. .. pháp ñể nghiên c u thành phần hóa học, phân lập axit béo c u tử sản xuất d u mù u Tuy nhiên, sản xuất d u mù u công có hoạt tính sinh học có d u mù u, từ ñó có ứng dụng d u nghiệp giá dung môi