PHÁT TRIỂN THIẾT BỊ PIN NHIÊN LIỆU TỪ VI SINH VẬT

PHÁT TRIỂN THIẾT BỊ PIN NHIÊN LIỆU TỪ VI SINH VẬT là bộ tài liệu hay và rất hữu ích cho các bạn sinh viên và quý bạn đọc quan tâm. Đây là tài liệu hay trong Bộ tài liệu sưu tập gồm nhiều Bài tập THCS, THPT, luyện thi THPT Quốc gia, Giáo án, Luận văn, Khoá luận, Tiểu luận…và nhiều Giáo trình Đại học, cao đẳng của nhiều lĩnh vực: Toán, Lý, Hoá, Sinh…. Đây là nguồn tài liệu quý giá đầy đủ và rất cần thiết đối với các bạn sinh viên, học sinh, quý phụ huynh, quý đồng nghiệp và các giáo sinh tham khảo học tập. Xuất phát từ quá trình tìm tòi, trao đổi tài liệu, chúng tôi nhận thấy rằng để có được tài liệu mình cần và đủ là một điều không dễ, tốn nhiều thời gian, vì vậy, với mong muốn giúp bạn, giúp mình tôi tổng hợp và chuyển tải lên để quý vị tham khảo. Qua đây cũng gởi lời cảm ơn đến tác giả các bài viết liên quan đã tạo điều kiện cho chúng tôi có bộ sưu tập này. Trên tinh thần tôn trọng tác giả, chúng tôi vẫn giữ nguyên bản gốc. Trân trọng. ĐỊA CHỈ DANH MỤC TẠI LIỆU CẦN THAM KHẢO http:123doc.vntrangcanhan348169nguyenductrung.htm hoặc Đường dẫn: google > 123doc > Nguyễn Đức Trung > Tất cả (chọn mục Thành viên) DANH MỤC TẠI LIỆU ĐÃ ĐĂNG A. HOÁ PHỔ THÔNG 1. CHUYÊN ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC HÓA HỮU CƠ PHẦN 1, PDF 2. CHUYÊN ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC HÓA HỮU CƠ PHẦN 1, Word 3. CHUYÊN ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC HÓA HỮU CƠ PHẦN 2. PHẦN HỢP CHẤT CÓ NHÓM CHỨC 4. CHUYÊN ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC HÓA HỌC VÔ CƠ PHẦN 1. CHUYÊN Đề TRÌNH HÓA VÔ CƠ 10 VÀ 11 5. CHUYÊN ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC HÓA HỮU CƠ PHẦN 2. PHẦN HỢP CHẤT CÓ NHÓM CHỨC 6. BỘ ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC MÔN HÓA HỌC 140 7. BỘ ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC MÔN HÓA HỌC 4170 8. ON THI CAP TOC HỌC HÓA HỮU CƠ PHẦN 1, PDF 9. TỔNG HỢP KIẾN THỨC HÓA HỌC PHỔ THÔNG 10. 70 BỘ ĐỀ LUYỆN THI ĐẠI HỌC MÔN HÓA HỌC, word 11. CHUYÊN ĐỀ VÔ CƠ, LỚP 11 – 12. ĐẦY ĐỦ CÓ ĐÁP ÁN 12. Bộ câu hỏi LT Hoá học 13. BAI TAP HUU CO TRONG DE THI DAI HOC 14. CAC CHUYEN DE LUYEN THI CO DAP AN 48 15. GIAI CHI TIET CAC TUYEN TAP PHUONG PHAP VA CAC CHUYEN DE ON THI DAI HOC. 86 16. PHUONG PHAP GIAI NHANH BAI TAP HOA HOC VA BO DE TU LUYEN THI HOA HOC 274 17. TỔNG HỢP BÀI TẬP HÓA HỌC LỚP 12 18. PHAN DANG LUYEN DE DH 20072013 145 19. BO DE THI THU HOA HOC CO GIAI CHI TIET.doc 20. Tuyển tập Bài tập Lý thuyết Hoá học luyện thi THPT Quốc gia 21. PHÂN DẠNG BÀI TẬP HOÁ HỌC ÔN THI THPT QUỐC GIA 57 22. BỘ ĐỀ LUYỆN THI THPT QUỐC GIA MÔN HOÁ CÓ ĐÁP ÁN 29 ĐỀ 145 23. BỘ ĐỀ LUYỆN THI THPT QUỐC GIA MÔN HOÁ CÓ ĐÁP ÁN PHẦN 2 24. Trắc nghiệm Lý thuyết Hóa vô cơ phần 1 25. Trắc nghiệm Lý thuyết Hóa Hữu cơ phần 1, có đáp án đầy đủ 26. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa có giải chi tiết 01 27. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa có giải chi tiết 02 28. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa có giải chi tiết 04 29. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa có giải chi tiết 05 30. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa 2017 có giải chi tiết 07 31. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa 2017 có giải chi tiết 08 32. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa 2017 có giải chi tiết 09 33. Đề thi thử THPT Quốc gia Môn Hóa 2017 có giải chi tiết 13 34. B. HỌC SINH GIỎI 1. Bồi dưỡng Học sinh giỏi Hoá THPT Lý thuyết và Bài tập 2. Tài liệu hướng dẫn thí nghiệm thực hành học sinh giỏiolympic Hoá học 54 3. CHUYÊN ĐỀ BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI HOÁ LÝ THUYẾT VÀ BÀI TẬP 17 4. ĐỀ THI CHUYÊN HOÁ CÓ HƯỚNG DẪN CHI TIẾT PHẦN ĐẠI CƯƠNG VÔ CƠ 5. Tuyển tập Đề thi Bồi dưỡng Học sinh giỏi Hoá THCS Lý thuyết và Bài tập 6. Chuyên đề Bồi dưỡng HSG Hoá học, 12 phương pháp giải toán 7. Hướng dẫn thực hành Hoá Hữu cơ Olympic hay dành cho sinh viên đại học, cao đẳng C. HOÁ ĐẠI HỌC, SAU ĐẠI HỌC 1. ỨNG DỤNG CỦA XÚC TÁC TRONG HÓA HỮU CƠ 2. CƠ CHẾ PHẢN ỨNG TRONG HÓA HỮU CƠTIỂU LUẬN 3. TL HÓA HỌC CÁC CHẤT MÀU HỮU CƠ 4. GIÁO TRÌNH HÓA HỮU CƠ DÀNH CHO SINH VIÊN CĐ, ĐH, Hóa học Hữu cơ, tập 1 của tác giả Đỗ Đình Rãng Hóa học Hữu cơ, tập 2 của tác giả Đỗ Đình Rãng Hóa học Hữu cơ, tập 3 của tác giả Đỗ Đình Rãng Hóa học Hữu cơ, tập 1 của tác giả Thái Doãn Tĩnh Hóa học Hữu cơ, tập 2 của tác giả Thái Doãn Tĩnh Hóa học Hữu cơ, tập 3 của tác giả Thái Doãn Tĩnh Cơ chế Hóa học Hữu cơ, tập 1 của tác giả Thái Doãn Tĩnh Cơ chế Hóa học Hữu cơ, tập 2 của tác giả Thái Doãn Tĩnh Cơ chế Hóa học Hữu cơ, tập 3 của tác giả Thái Doãn Tĩnh 5. VAI TRÒ SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT VÔ CƠ 44 6. BÀI TẬP NHIỆT ĐỘNG LỰC HỌC 40 7. Giáo trình Hoá học phân tích 8. Giáo trình Khoa học môi trường. http:baigiang.violet.vnpresentshowentry_id489754 9. Giáo trình bài tập Hoá Hữu cơ 1 10. Giáo trình bài tập Hoá Hữu cơ 2 11. Giáo trình bài tập Hoá Phân tích 1 12. Thuốc thử Hữu cơ 13. Giáo trình môi trường trong xây dựng 14. Bài tập Hóa môi trường có đáp án đầy đủ nhất dành cho sinh viên Đại họcCao đẳng 15. Mô hình, mô hình hóa và mô hình hóa các quá trình môi trường 16. Cây trồng và các yếu tố dinh dưỡng cần thiết 17. Đất đồng bằng và ven biển Việt Nam 18. Chất Hữu cơ của đất, Hóa Nông học 19. Một số phương pháp canh tác hiện đại,Hóa Nông học 20. Bài tập Hoá Đại cương có giải chi tiết dành cho sinh viên Đại học 21. Hướng dẫn học Hoá Đại cương dành cho sinh viên ĐH, CĐ 22. Bài giảng Vai trò chất khoáng đối với thực vật PP 23. Giáo trình Thực hành Hoá vô cơ dành cho sinh viên ĐH, CĐ 24. Bài tập Vô cơ dành cho sinh viên Đại học, Cao đẳng có giải chi tiết 25. Bài tập Vô cơ thi Olympic dành cho sinh viên Đại học, Cao đẳng có giải chi tiết 26. Bài giảng Hoá học Phức chất hay và đầy đủ 27. Bài giảng Hoá học Đại cương A1, phần dung dịch 28. Bài tập Hoá lý tự luận dành cho sinh viên có hướng dẫn đầy đủ 29. Bài tập Hoá lý trắc nghiệm dành cho sinh viên có đáp án đầy đủ 30. Khoá luận Tốt nghiệp bài tập Hoá lý 31. Giáo trình Hoá Phân tích dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 32. Bài giảng Điện hoá học hay dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 33. Bài tập Hoá học sơ cấp hay dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 34. Bài giảng phương pháp dạy học Hoá học 1 35. Bài giảng Công nghệ Hoá dầu 36. Hóa học Dầu mỏ và Khí 37. Bài tập Hóa dầu hay có hướng dẫn chi tiết dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 38. Bài tập Công nghệ Hóa dầu, công nghệ chế biến khi hay có hướng dẫn chi tiết dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 39. Bài giảng Hóa học Dầu mỏ hay dành sinh viên Đại học, cao đẳng 40. Hướng dẫn thực hành Hoá Hữu cơ hay dành cho sinh viên đại học, cao đẳng 41. Phụ gia thực phẩm theo quy chuẩn quốc gia 42. Hướng dẫn thực hành Hoá Vô cơ RC0 Các phản ứng Hoá học mang tên các nhà khoa học hay dành cho sinh viên 43. Bài tập trắc nghiệm Hoá sinh hay dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 44. Bài tập Hoá học Hữu cơ có giải chi tiết dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng P1 45. Bài giảng Hoá học Hữu cơ 1 powerpoint hay 46. Bài tập cơ chế phản ứng Hữu cơ có hướng dẫn chi tiết dành cho sinh viên 47. Bài giảng Hoá học Hữu cơ dành cho sinh viên 48. Bài tập Hoá sinh học hay có đáp án dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 49. Hoá học hợp chất cao phân tử 50. Giáo trình Hoá học Phức chất dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 51. Bài giảng Hoá học Đại cương dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 52. Bài giảng Cơ sở Lý thuyết Hoá Hữu cơ dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng 53. Bài giảng Hoá Hữu cơ dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng phần Hidrocacbon 54. Bài giảng Hoá Hữu cơ dành cho sinh viên Đại học, cao đẳng phần dẫn xuất Hidrocacbon và cơ kim 55. Bài giảng Hoá học Hữu cơ file word đầy đủ và hay nhất 56. Kỹ thuật và an toàn trong thí nghiệm, thực hành Hóa học 57. Báo cáo thực hành Hóa Hữu cơ 2 58. Giáo trình Hóa học môi trường 59. Bài tập Hóa Hữu cơ hay 60. Bài tập Hóa Đại cương hay gồm Tự luận và trắc nghiệm, có giải chi tiết 61. Giáo trình Hóa học Đại cương dành cho sinh viên Đại học, Cao đẳng 62. Giáo trình Hóa Đại cương tập I, Nguyễn Văn Đang, ĐHSP Đà Nẵng 63. Giáo trình Hóa Đại cương tập II, Nguyễn Văn Đang, ĐHSP Đà Nẵng http:violet.vnvinhannan355presentshowentry_id10833446 64. D. HIỂU BIẾT CHUNG 1. TỔNG HỢP TRI THỨC NHÂN LOẠI 2. 557 BÀI THUỐC DÂN GIAN 3. THÀNH NGỬCA DAO TỤC NGỬ ANH VIỆT 4. CÁC LOẠI HOA ĐẸP NHƯNG CỰC ĐỘC 5. GIAO AN NGOAI GIO LEN LOP 6. Điểm chuẩn các trường năm 2015 7. Quy hoạch mạng lưới nghĩa trang năm 2020, tầm nhìn 2030 8. Tham nhũng và phòng chống tham nhũng 9. Tuyển tập các bài ca dao Việt Nam và các bài hát ru hay 10. Nhị Thập tứ hiếu (24 tấm gương hiếu thảo) 11. Bác sĩ giải đáp về chuyện ấy. Giáo dục giới tính 12. Kinh nguyệt và các vấn đề liên quan 13. Các bệnh hiện đại hay gặp và chế độ ăn uống 14. Phong tục tập quán người Việt 15. Giải mộngĐoán điềm 16. Điềm báo tốt xấu E. DANH MỤC LUẬN ÁNLUẬN VĂNKHOÁ LUẬN… 1. Công nghệ sản xuất bia 2. Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong hạt tiêu đen 3. Giảm tạp chất trong rượu 4. Tối ưu hoá quá trình điều chế biodiesel 5. Tinh dầu sả 6. Xác định hàm lượng Đồng trong rau 7. Tinh dầu tỏi 8. Tách phẩm mầu 9. Một số phương pháp xử lý nước ô nhiễm 10. Tinh dầu HỒI 11. Tinh dầu HOA LÀI 12. Sản xuất rượu vang 13. Vấn đề mới và khó trong sách Giáo khoa thí điểm 14. Phương pháp tách tạp chất trong rượu 15. Khảo sát hiện trạng ô nhiễm arsen trong nước ngầm và đánh giá rủi ro lên sức khỏe cộng đồng 16. REN LUYEN NANG LUC DOC LAP SANG TAO QUA BAI TAP HOA HOC 10 LV 151 17. Nghiên cứu đặc điểm và phân loại vi sinh vật tomhum 18. Chọn men cho sản xuất rượu KL 40 19. Nghiên cứu sản xuất rượu nho từ nấm men thuần chủng RV 40 20. NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CÂY DẤU DẦU LÁ NHẴN 21. LUẬN ÁN TIẾN SĨ CHẾ TẠO KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH ĐIỆN HOÁ CỦA ĐIỆN CỰC 21 22. NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI UVARIA L. HỌ NA (ANNONACEAE) 23. Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết từ đài hoa bụp giấm file word RE023 24. Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong quả mặc nưa 25. Nghiên cứu xử lý chất màu hữu cơ của nước thải nhuộm …bằng phương pháp keo tụ điện hóa 26. Nghiên cứu và đề xuất hướng giải quyết các vấn đề khó và mới về hoá hữu cơ trong sách giáo khoa hoá học ở Trung học phổ thông 27. Nghiên cứu chiết xuất pectin từ phế phẩm nông nghiệp, thực phẩm 28. Chiết xuất quercetin bằng chất lỏng siêu tới hạn từ vỏ củ Hành tây 29. Thành phần Hóa học và hoạt tính Kè bắc bộ pp 30. Nghiên cứu phương pháp giảm tạp chất trong rượu Etylic 31. Tối ưu hoá quá trình điều chế biodiesel từ mỡ cá tra với xúc tác KOHγAl2O3 bằng phương pháp bề mặt đáp ứng 32. Tối ưu hoá quá trình chiết ANTHOCYANIN từ bắp cải tím 33. Chiết xuất và tinh chế CONESSIN, KAEMPFEROL, NUCIFERIN từ dược liệu (Ko) RE033 34. Phương pháp tính toán chỉ số chất lượng nước cho một số sông thuộc lưu vực sông Nhuệ sông Đáy 35. Xử lý suy thoái môi trường cho các vùng nuôi tôm (Nghiên cứu và ứng dụng công nghệ tiến tiến, phù hợp xử lý suy thoái môi trường nhằm sử dụng bền vững tài nguyên cho các vùng nuôi tôm các tỉnh ven biển Bắc bộ và vùng nuôi cá Tra ở Đồng Bằng Sông Cửu Long) 36. Đánh giá học sinh dùng lý thuyết tập mờ, W813E0036 (Xây dựng một hệ thống thông tin hỗ trợ đánh giá học sinh dùng lý thuyết tập mờ) 37. Công nghệ lên men mêtan xử lý chất thải làng nghề“Nghiên cứu hiện trạng ô nhiễm và công nghệ lên men mêtan nước thải chế biến tinh bột sắn của một số làng nghề thuộc huyện Hoài Đức, Hà Nội” 38. Tính chất của xúc tác Fe2O3 biến tính bằng Al2O3(Tổng hợp và tính chất xúc tác của Fe2O3 được biến tính bằng Al2O3 và anion hóa trong phản ứng đồng phân hóa nankan”) 39. Tác động môi trường của việc thu hồi đất, Word, 5, E0039 “Đánh giá ảnh hưởng môi trường của việc thu hồi đất tại quận Tây Hồ, Hà Nội” 5 40. Không gian hàm thường gặp, W8, E40 (“Về một số không gian hàm thường gặp”. 41. Xác định hoạt chất trong thuốc kháng sinh, W 10, E41 (Nghiên cứu xây dựng phương pháp phổ hồng ngoại gần và trung bình kết hợp với thuật toán hồi quy đa biến để định lượng đồng thời một sốhoạt chất có trong thuốc kháng sinh thuộc họ βLactam” 42. Phát hiện vi khuẩn lao kháng đa thuốc bằng kỹ thuật sinh học phân tửW10.2E42 “Nghiên cứu phát hiện vi khuẩn lao kháng đa thuốc bằng kỹ thuật sinh học phân tử” 43. Động lực học của sóng biển, W12, E43. NGHIÊN CỨU ĐỘNG LỰC HỌC CỦA SÓNG SAU ĐỚI SÓNG ĐỔ TẠI BÃI BIỂN NHA TRANG 44. Xử lý chất thải tại nhà máy giấy hiệu quả, file word 13, E44 (NÂNG CAO HIỆU QUẢ XỬ LÝ CỦA CÁC BỂ HIẾU KHÍ BẰNG CÁCH ĐIỀU CHỈNH DINH DƯỠNG THÍCH HỢP CHO VI KHUẨN ĐỐI VỚI HỆ THỐNG XỬ LÝ NƯỚC THẢI CỦA NHÀ MÁY GIẤY 45. Định lượng Paraquat bằng phương pháp sắc ký lỏng, W14, E45. (Nghiên cứu định lượng Paraquat trong mẫu huyết tương người bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao) 46. Định hướng quy hoạch bảo vệ môi trường, W15, E46 “Nghiên cứu xác lập cơ sở khoa học cho định hướng quy hoạch bảo vệ môi trường khu vực Đại học Quốc gia Hà Nội tại Hòa Lạc và các xã lân cận” 47. Giải pháp thực hiện các quyền sử dụng đất của hộ gia đình, cá nhân, W16, E47. “Nghiên cứu thực trạng và đề xuất giải pháp thực hiện các quyền sử dụng đất của hộ gia đình, cá nhân trên địa bàn quận Nam Từ Liêm, thành phố Hà Nội” 48. Phức chất đa nhân của đất hiếm phối tử hữu cơ đa càng, W17, E48. “Phức chất đa nhân của đất hiếm và kim loại chuyển tiếp với một số phối tử hữu cơ đa càng” 49. Phép tính Xentơ và ứng dụng trong cơ học chất rắn (PHÉP TÍNH TENXƠ VÀ MỘT ỨNG DỤNG TRONG CƠ HỌC VẬT RẮN BIẾN DẠNG 50. Mô hình vật lý của Virut, W20, E50 51. Hệ Exciton trong dải băng Graphene, W22, E51. HỆ EXCITON TRONG DẢI BĂNG GRAPHENE 52. Phân tích biến đổi của gen CXCL12 ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng, W23, E52. 53. Thành phần tinh dầu một số loài Bạch đàn (Eucalyptus) trồng ở Việt Nam, W26, E53.( Đánh giá đặc tính thành thành phần tinh dầu một số loài Bạch đàn (Eucalyptus) trồng ở Việt Nam và mối liên hệ của nó với một số vấn đề sinh thái môi trường điển hình’’) 54. Quy trình xử lý và tái sử dụng chất thải từ quá trình mài đá trong sản xuất đá nhân tạo 55. Xử lý chất thải tại các trang trại chăn nuôi lợn 56. Phân tích, đánh giá chất lượng nước sông 57. Tán xạ hạt nhân của các nơtron phân cực trên mặt tinh thể 58. Nghiên cứu điều kiện phân tích các sulfamit bằng phương pháp sắc ký Bùi minh Thái 59. Nghiên cứu, xác định mức độ tồn lưu chất độc da camdioxin và đánh giá hiệu quả thử nghiệm công nghệ Hóa Cơ xử lý dioxin K 60. ẢNH HƯỞNG CỦA CO2 ĐẾN KHẢ NĂNG HÒA TAN PHYTOLITH TRONG TRO RƠM RẠ 61. Nghiên cứu ứng dụng công nghệ viễn thám và mô hình thuỷ văn thuỷ lực để thành lập bản đồ ngập lụt 62. PHÁT TRIỂN THIẾT bị PIN NHIÊN LIỆU TỪ VI SINH VẬT F. TOÁN PHỔ THÔNG 1. TUYEN TAP CAC DANG VUONG GOC TRONG KHONG GIAN 2. Luyện thi THPT Quốc gia môn Toán 500 câu có đáp án 3. Phân dạng Luyện thi THPT Quốc gia môn Toán 4. Bộ đề Trắc nghiệm Luyện thi THPT Quốc gia môn Toán 5. Chuyên đề Trắc nghiệm Luyện thi THPT Quốc gia môn Toán 6. Bộ đề Thi thử Trắc nghiệm THPT Quốc gia môn Toán 7. Bộ đề kiểm tra trắc nghiệm 1 tiết phút môn Toán lớp 12 8. Bài tập trắc nghiệm môn toán lớp 12, luyện thi THPT quốc gia tổng hợp rất nhiều P1 9. Bài tập trắc nghiệm môn toán lớp 12, luyện thi THPT quốc gia tổng hợp rất nhiều P2 10. Bài tập trắc nghiệm môn toán lớp 12, luyện thi THPT quốc gia tổng hợp rất nhiều P3 11. Bài tập trắc nghiệm môn toán Giải tích lớp 12, luyện thi THPT quốc gia P1 có đáp án 12. Bài tập trắc nghiệm môn toán Giải tích lớp 12, luyện thi THPT quốc gia P2 13. Phân dạng Bài tập trắc nghiệm môn toán lớp 12, luyện thi THPT quốc gia 14. Bài tập trắc nghiệm môn toán Hình học lớp 12, luyện thi THPT quốc gia. 15. Bài tập trắc nghiệm môn toán Hình học lớp 12, luyện thi THPT quốc gia có đáp án 16. Phân dạng Bài tập trắc nghiệm môn toán Hình học lớp 12, luyện thi THPT quốc gia 17. Đề Thi thử Trắc nghiệm THPT Quốc gia môn Toán 18. Đề Thi thử Trắc nghiệm THPT Quốc gia môn Toán có đáp án 19. Đề Thi thử Trắc nghiệm THPT Quốc gia môn Toán có giải chi tiết 20. Ôn tập Toán 12, luyện thi THPT Quốc gia 21. Phân dạng bài tập hình học 11 rất hay có giải chi tiết các dạng 22. Bài tập trắc nghiêm Toán 11 23. Đề trắc nghiệm toán đại số 12 dành cho kiểm tra 1 tiêt, 15 phút có đáp án G. LÝ PHỔ THÔNG 1. GIAI CHI TIET DE HOC SINH GIOI LY THCS 2. Chuyên đề luyện thi THPT Quốc gia môn Vật lý, có đáp án H. TOÁN ĐẠI HỌC, SAU ĐẠI HỌC 1. Bài tập Đại số Đại cương, NXB Giáo dục hay 2. Bài tập Đại số Đại cương có giải chi tiết hay 3. Bài tập đại số tuyến tính có giải chi tiết http:www.studyvn.comformulaviewthematic203?thematic_sub=208post_url=DETHIDAISO725 I. SÁNG KIẾN KINH NGHIỆM CẤP TIỂU HỌC 1. SKKN cấp thành phố về nâng cao chất lượng dạy học thể dục ở Tiểu học 2. SKKN dạy học tiếng anh ở Tiểu học 3. SKKN đọc kể diễn cảm 4. SKKN nâng cao chất lượng dạy học môn Tin lớp 4, 5 J. SÁNG KIẾN KINH NGHIỆM CẤP THCS 1. Sáng kiến kinh nghiệm Nâng cao chất lượng dạy và học môn Hóa học THCS 2. Sáng kiến kinh nghiệm Nâng cao chất lượng dạy và học môn Vật Lý THCS lớp 6 http:quephong.violet.vnpresentlistcat_id1327614page3 K. SÁNG KIẾN KINH NGHIỆM CẤP THPT Nhị Thập tứ hiếu (24 tấm gương hiếu thảo) là quyển sách không bao giờ cũ Bất kể trai hay gái khi đọc và có thể noi theo được một phần cũng là điều quá quý, đáng trân trọng cho mỗi gia đình, cho đất nước Ai thực hiện theo những tấm gương này sẽ là những hiền tài có ích cho xã tắc. Tu thân, tề gia, trị quốc, thiên hạ bình Bác sĩ giải đáp về chuyện ấy. Giáo dục giới tính là tài liệu rất cần thiết cho mọi lứa tuổi. Hy vọng tài liệu sẽ giúp chúng ta hiểu hơn, khỏe hơn và có cuộc sống hạnh phúc hơn. Những điềm báo tốt xấu bạn nên biết là tài liệu hay, làm phong phú thêm cuộc sống vốn dĩ muôn màu. Dẫu sao điều ta chưa kiểm chứng thì hãy cứ tin: Có cử có thiên, có kiên có lành Xuất phát từ quá trình tìm tòi, trao đổi tài liệu, chúng tôi nhận thấy rằng để có được tài liệu mình cần và đủ là một điều không dễ, tốn nhiều thời gian, vì vậy, với mong muốn giúp bạn, giúp mình tôi tổng hợp và chuyển tải lên để quý vị tham khảo. Qua đây cũng gởi lời cảm ơn đến tác giả các bài viết liên quan đã tạo điều kiện cho chúng tôi có bộ sưu tập này. Trên tinh thần tôn trọng tác giả, chúng tôi vẫn giữ nguyên bản gốc. Trân trọng.

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NÔNG MINH TUẤN NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN THIẾT BỊ PIN NHIÊN LIỆU VI SINH VẬT (MICROBIAL FUEL CELL) SỬ DỤNG LÀM CẢM BIẾN SINH HỌC ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG NƯỚC THẢI Chuyên ngành: Vi Sinh Vật Học Mã số: 60420107 TÓM TĂT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2014 Công trình hoàn thành tại: Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: TS Phạm Thế Hải Phản biện 1: TS Đinh Thúy Hằng Phản biện 2: TS Hồ Tú Cường Luận văn bảo vệ trước Hội đồng chấm luận văn thạc sĩ họp tại: Phòng 327 nhà T1 – Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội Vào 00 ngày 04 tháng 12 năm 2014 Có thể tìm luận văn tại: Trung tâm Thư viện Đại học Quốc Gia Hà Nội I MỞ ĐẦU Nước phần thiết yếu trình sinh hoạt–sản xuất người Tuy nhiên, với phát triển dân số, trình đô thị hóa, công nghiệp hóa, lượng nước người sử dụng ngày gia tăng, kèm với hậu gây ô nhiễm nước nghiêm trọng Ảnh hưởng ô nhiễm nước sức khỏe người thông qua hai đường: (i) ăn-uống phải nước bị ô nhiễm hay loại rau thủy sản nuôi môi trường nước ô nhiễm, (ii) tiếp xúc với môi trường nước trình lao động sinh hoạt Ngoài ô nhiễm nước kéo theo thiệt hại kinh tế bệnh tật, thiệt hại thủy sản nông nghiệp, ảnh hưởng tới nguồn cung cấp nước Một nguyên nhân gây ô nhiễm nguồn nước tình trạng nước thải chưa qua xử lý xử lý trực tiếp xả vào môi trường Để ngăn chặn nguy cần phải có phương pháp hợp lý để đánh giá nhanh chất lượng nước thải sau xử lý, nhằm đáp ứng nhu cầu người sản xuất người quản lý Phương pháp phân tích hóa-lý phổ biến sử dụng cho việc phân tích-đánh giá chất lượng nước thải Phương pháp sử dụng mối tương tác chất cần phát nước với loại hóa chất thêm vào dùng làm thị để định tính định lượng chất cần kiểm tra, áp dụng kỹ thuật như: sắc ký lỏng cao áp (HPCL), sắc ký phối khổ (GC – MS), hay phương pháp so màu Tuy nhiên, tất kỹ thuật đòi hỏi người phân tích phải có tay nghề chuyên môn cao, tốn sử dụng, thời gian phân tích dài Những nghiên cứu gần tập trung phát triển phương pháp sử dụng tác nhân sinh học cảm biến hay hệ thống cảnh báo sớm chất lượng nước Cảm biến sinh học (biosensor) hệ thống phân tích tác nhân sinh học DNA, enzymes, mô, thể sống kết hợp với việc đánh giá – đo lường dấu hiệu hóa – lý tác nhân sinh học Các cảm biến sinh học tỏ thuận lợi việc đánh giá chất lượng nước kiểm tra trực tiếp nguồn nước, nhạy cảm với chất độc phát nhiều độc tố thời điểm, cảnh báo chất độc, không theo dõi độc tính mà theo dõi tốc độ thay đổi thành phần-nồng độ chất độc, theo dõi từ xa, dễ dàng sử dụng Trong đó, cảm biến sinh học khai thác trình trao đổi chất vi sinh vật đặc biệt quan tâm nghiên cứu ứng dụng Pin nhiên liệu vi sinh vật dạng thiết bị cảm biến hoạt động dựa hoạt tính điện hóa vi sinh vật Loại thiết bị nghiên cứu nhiều quốc gia Hàn Quốc, Hoa Kỳ, hay Châu Âu, chúng có ưu điểm có khả dẫn BOD nước thải, có thời gian phản ứng nhanh, dễ dàng sử dụng, chi phí thấp Tại Việt Nam nghiên cứu pin nhiên liệu vi sinh vật ứng dụng chúng làm cảm biến sinh học đánh giá chất lượng nước thải hạn chế Nhằm góp phần vào nghiên cứu pin nhiêu liệu vi sinh phát triển thiết bị cảm biến có khả đánh giá chất lượng nước thải với thời gian phân tích nhanh khả sử dụng nhiều lần… tiến hành đề tài “ Nghiên cứu phát triển thiết bị pin nhiên liệu vi sinh vật (Microbial fuel cell) sử dụng làm cảm biến sinh học đánh giá chất lượng nước thải” II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1.1 Hóa chất, thiết bị dụng cụ Nghiên cứu thực Phòng thí nghiệm môn Vi sinh vật học - Khoa Sinh học, Trường ĐH Khoa học Tự nhiên, sử dụng máy móc, thiết bị chuyên môn dùng nghiên cứu vi sinh vật học, Sinh học phân tử đạt tiêu chuẩn: - Máy PCR 9700 (Applied Biosystems, Mỹ) - Máy ly tâm 5417R (Eppendorf, Đức) - Máy điện di ngang (BioRad, Mỹ) - Máy DGGE K-2401 (C.B.S Scientific, Mỹ) - Bàn soi gel LMW-20 UVP (UK) - Kính hiển vi quang học (Zeiss, Đức) Hóa chất sử dụng cho nuôi cấy vi sinh vật: Pepton, muối (NaCl, MgSO4, (NH4)2SO4, K2HPO4, KH2PO4…); nguyên tố vi lượng (H3BO3, CoCl2.6H2O ) có xuất xứ Trung Quốc (Xilong), Agar (Việt Nam), Cao nấm men (Sigma, Hoa Kỳ) Hóa chất sử dụng phương pháp điện di gel biến tính DGGE: Acrylamide, Bis-AA, 50x TAE buffer, Formamide, TEMED (tetramethyl ethylenediamine), APS (Ammonium persulfate) hãng Affymetric (USB, Mỹ) cung cấp Hoá chất sử dụng thí nghiệm Sinh học phân tử: Bộ hóa chất sử dụng tách ADN (Glycogen 20 mg/ml, Ethanol 100 %, Ammonium acetate) , phản ứng PCR (USB Taq PCR Master Mix 2x), điện di kiểm tra sản phẩm PCR (HydraGreen Safe ADN Stain 20 000x, Loading Dye 6x, GeneRuler 1kb ADN Ladder), tinh sản phẩm PCR (ExoSAP-IT PCR Product Cleanup) Tất cung cấp Affymetric USB, Merck Fermentas (Mỹ) Vật liệu cấu tạo pin nhiên liệu vi sinh vật: - Polyacrylic (Việt Nam) - Vải than chì (Việt Nam) - Thanh than chì (Việt Nam) - Màng nafion 117 (Hoa Kỳ) - Nối nhanh ϕ 4mm (Trung Quốc) - Ống nước phi ϕ 4mm (Đài Loan) - Dây chuyền nước (Trung quốc) Đồng Hồ đo điện: - Đồng hồ vạn Extech (Hoa Kỳ) - Máy đo điện tự động KEITHLEY (Hoa Kỳ) 2.1.2 Nguồn vi sinh vật sử dụng nghiên cứu Chúng tiến hành chọn lựa nguồn quần xã khác phục vụ cho việc làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa có khả tốt cho việc phát triển cảm biến sinh học MFC từ nguồn tự nhiên nguồn bị ô nhiễm gồm: - - Nguồn bùn thải khu dân cư: phố Chùa Láng – quận Đống Đa - Hà Nội Mẫu đất tự nhiên (ĐT): gồm hỗn hợp nguồn đất lấy từ Fansipang – Sapa – Lào Cai, Đất vườn quốc gia Cúc Phương đầm Vân Long – Ninh - Bình Mẫu bùn tự nhiên (BT): gồm hỗn hợp bùn lấy từ Đầm vân Long – - Ninh Bình vàVườn quốc gia Xuân Thủy – Nam Định Mẫu bùn hoạt tính (BH): Gồm bùn kỵ khí hiếu khí (Nhà máy bia Hà Nội – - Hưng Yên – Khu Công Nghiệp Phố Nối A – Hưng Yên) Mẫu Nước Thải (NT): Bùn nước thải hỗn hợp (Làng giấy Phong Khê – Bắc Ninh; Làng tái chế kim loại Đan Hội – Bắc Ninh; Cơ sở dệt nhuộn – Hồi Quan - – Bắc Ninh; Làng tái chế Ni lon – Văn Giang – Hưng Yên) Mẫu hỗn hợp (HH): hỗn hợp mẫu đất tự nhiên, bùn tự nhiên, bùn hoạt tính, nước thải trộn với 2.2 CÁC THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1 Lựa chọn thiết kế tối ưu cho MFC Chúng tiến hành nghiên cứu, tổng hợp, đánh giá ưu nhược điểm dạng thiết kế MFC- vật liệu sử dụng cho MFC công bố, qua tiến hành lựa chọn dạng vật liệu-thiết kế phù hợp cho việc thiết kế MFC có khả làm cảm biến sinh học điều kiện Việt Nam 2.2.2 Thiết kế, lắp đặt hệ thống MFC Pin nhiên liệu vi sinh vật thiết kế dựa thiết kế Kim cộng [26] Trong nghiên cứu tiến hành thử nghiệm hai dạng thiết kế MFC (dạng khoang hình hộp chữ nhật khoang hình trụ) ba thể tích khoang anode (5 ml; 7,5 ml; 10 ml) 2.2.3 Quy trình làm giầu vi sinh vật MFC: Phục vụ thí nghiệm lựa chọn thiết kế MFC tối ưu: Quần xã vi sinh vật thí điểm làm giàu từ mẫu nước thải khu dân cư phố Chùa Láng - quận Đống Đa - thủ đô Hà Nội Quần xã tiến hành làm giầu với dung dịch anode mô nước thải có nồng độ BOD = 50 ppm với tốc độ dòng 0,3 ml/phút Song song với trình làm giầu, tiến hành chạy MFC đối chứng hóa học (MFC không bổ sung vi khuẩn) Phục vụ thí nghiệm lựa chọn nguồn vi sinh vật tối ứu: Sau lựa chọn thiết kế MFC tốt cho việc phát triển cảm biến sinh học đánh giá chất lượng nước thải, tiến hành thử nghiệm MFC với thiết kế hệ vi sinh vật làm giàu từ nguồn quần xã vi sinh vật khác (Mục 2.1.2) Các MFC làm giàu với dung dịch anode mô nước thải có nồng độ BOD 30 ppm với tốc độ dòng 0,3 ml/ phút điều kiện nhiệt độ phòng Ban đầu hai khoang anode cathode MFC bị ngăn lớp màng nilon (không có khả cho ion qua) thời gian 14 ngày, sau tiến hành đổi chúng lớp màng nafion117 2.2.4 Vận Hành Hệ Thống MFC Hệ thống MFC vận hành liên tục: Với khoang cathode chứa nước bão hòa oxy chảy tuần hoàn nhờ bơm (Boyu FP2000, Trung Quốc) dẫn nước từ bồn chứa có sử dụng sục khí (HEIBAO aquarium HB-248A, Trung Quốc), nước bồn thay hàng ngày Tại khoang anode, dung dịch mô nước thải theo Kim cộng (2006) thêm dung dịch có chứa nồng độ BOD cẩn kiểm tra gồm glucose glutamat tính toán nồng độ theo Ủy ban đo lường tiêu chuẩn sức khỏe cộng đồng Hoa Kỳ (1995), dung dịch đựng bình Duran lít chảy vào khoang anode thông qua dây chuyền dịch (Human Luzhou Huikang Development Co., Ltd, Trung Quốc), tốc độ dòng vào điều chỉnh nhờ có van điều tiết [26, 54] Với thí nghiệm làm giàu vi sinh vật anode đánh giá hoạt động MFC, MFC vận hành với dung dịch nước thải mô có giá trị BOD 30 ppm Với thí nghiệm lựa chọn thiết kế ưu việt hơn, MFC vận hành với dung dịch nước thải mô có giá trị BOD 50 ppm, thay đổi luân phiên Với thử nghiệm khả đánh giá chất lượng nước thải thiết bị, MFC vận hành với dung dịch nước thải mô có nồng độ BOD khác (0, 5, 15, 30 50 ppm) 2.2.5 Đo đạc xử lý số liệu Hiệu điện MFC đo đồng hồ vạn EX MN 35 (Extech, Hoa Kỳ), với thời gian 30 phút/ lần-đo ngày tiếng cách sử dụng máy đo điện KEITHLEY (Hoa Kỳ) với thời gian đo 10 phút/lần, hiệu điện MFC xử lý vẽ đồ thị phầm mền Microsoft Excel 2010 Dòng điện MFC tính công thức I = U/ R (Định luật ôm), đó: I cường độ dòng điện (Ampe: A), U điện áp hai đầu đoạn mạch (Vol: V), R điện trở mạch (ohm) 2.2.6 Phương pháp phân tích vi sinh vật theo phương pháp truyền thống Phân lập hệ vi sinh vật điện cực anode: Sau làm giàu vi sinh vật MFC thành công, tiến hành cắt x x mm điên cực anode cho vào ml nước muối sinh lý tiến hành vortex, sau dịch điện cực anode tiến hành pha loãng theo dày nồng độ giảm 10 lần đến 10 nước muối sinh lý, tiếp tiến hành cấy trải dịch điện cực anode môi trường C, LB, BG11, Hansen, PDA Các khuẩn lạc thu chọn lựa làm phương pháp cấy ria ba pha môi trường loại Mẫu vi sinh vật thu bảo quản ống môi trường thạch nghiêng tương ứng với nhiệt độ 4oC glycerol 15% nhiệt đô -20oC Quan sát hình thái vi khuẩn: Các chủng phân lập tiến hành nhuộm gram đem soi kính hiển vi quang học (Zeiss - Đức), vật kính 100 x chụp ảnh máy ảnh Canon G10 (Nhật Bản) độ phóng đại 8.5 x; 11.5 x; 14 x Với quy trình: lấy khuẩn lạc chủng vi khuẩn khuẩn lạc Bacillus subtilis E coli trộn với cố định hai vết bôi lam kính sạch, sau tiến hành nhuộm mẫu với dung dịch tím kết tinh (Crystal violet) phút, tiếp ta rửa mẫu nước cất, mẫu nhuộm tiếp dung dịch Lugol phút Vết bôi rửa lại ethanol 96% 30 giây, sau rửa lại nước cất Mẫu nhuộm tiếp thuốc nhuộm bổ sung màu đỏ Safranin (hay Fuchsin Ziehl) 30 giây Cuối cùng, mẫu rửa nước cất, để khô soi kính hiển vi quang học 2.2.7 Phương pháp DGGE Quy trình tách chiết DNA [30]: Mẫu điện cực anode dịch vi khuẩn tách chiết DNA theo quy trình sau: Các ống Eppendorf có chứa ml mẫu ly tâm máy Eppendorf 5417R (Đức) 8000 rpm, 20oC 10 phút Gạn bỏ dịch nổi; phần lắng mix với 0,5 mL nước vô trùng MQ Sau đó, dung dịch bổ sung 500 µL hỗn hợp Phenol: Chloroform: Isoamyl alcohol (25: 24: 1) vortex khoảng 20 giây trước ly tâm máy Eppendorf 5417R (Đức) 14.000 rpm, 20°C 10 - 15 phút Tiếp đến, thu dịch chuyển vào ống Eppendorf vô trùng khác Các ống tiếp tục bổ sung µL glycogen, 100 µL 7,5 M ammonium acetate 750 µL ethanol 100% trước ủ qua đêm nhiệt độ -20 °C Hỗn hợp tiếp tục ly tâm máy Eppendorf 5417R (Đức) với điều kiện 14.000 rpm, 30 phút, °C thu DNA, DNA thu được rửa lại ba lần dung dịch ethanol 70% Cuối cùng, DNA để khô tự nhiên qua đêm trước pha loãng với 50 µL nước PCR Sản phẩm tách chiết DNA kiểm tra máy điện di BioRad (Mỹ) với nồng độ gel agarose 1% có chứa thuốc nhuộm HydraGreen Safe ADN Stain 20 000x (ACTGene) dung dịch TAE 1x với hiệu điện 100 V-thời gian 20 phút, quan sát máy soi gel LMW-20 UVP (UK) Quy trình khuếch đại đoạn gen 16s rRNA: DNA thu từ điện cực anode chủng nuôi cấy đưa vào chạy PCR máy PCR 9700 (Applied Biosystems, Mỹ) với mục đích khuếch đại gen 16s rRNA (1400 bp) cặp mồi p63F (5′CAGGCCTAACACATGCAAGTC3′, mồi xuôi) p1378R (5’CGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACG3’, mồi ngược) [19] với thành phần phản ứng chu trình Bảng 13, sản phẩm PCR kiểm tra máy điện di BioRad (Mỹ) với nồng độ gel agarose 1% có chứa thuốc nhuộm HydraGreen Safe ADN Stain 20 000x (ACTGene) dung dịch TAE 1x với hiệu điện 100 V-thời gian 20 phút, quan sát máy soi gel LMW-20 UVP (UK) Sau nhân đoạn 16s rRNA mẫu thành công, tiếp tục sử dụng sản phẩm PCR khuếch đại gen 16s rRNA làm khuôn nhằm khuếch đại vùng V3 (200 bp) cặp mồi p338F-GC (với kẹp GC thêm vào) (5’ ACTCCTACGGGAGGCAGCAG 3’, mồi xuôi) p518R (5’ATTACCGCGGCTGCTGG 3’, mồi ngược) [47] theo quy trình Bảng 14 để phục vụ cho trình phân tích DGGE Sản phẩm PCR kiểm tra máy điện di BioRad (Mỹ) với nồng độ gel agarose 1% có chứa thuốc nhuộm HydraGreen Safe ADN Stain 20 000x (ACTGene) dung dịch TAE 1x với hiệu điện 100 V-thời gian 20 phút, quan sát máy soi gel LMW-20 UVP (UK) Quy trình điện di DGGE: Quá trình điện di tiến hành gel polyacrylamide 6% với gradient biến tính Urea/ formamide từ 45% đến 60% (Bảng 15, 16) Ta tiến hành trộn 15 µl mẫu với 10 µl Loading Dye 6x tra vào giếng Quá trình điện di thực điện di DGGEK – 2401 (C.B.S Scientific - Mỹ), đệm TAE 1x, nhiệt độ 60 oC, hiệu điện 38V, thời gian 16 Sau điện di, gel nhuộm dung dịch HydraGreen Safe ADN Stain 1x 30 phút, sau rửa lại nước cất 10 phút quan sát máy soi LMW-20 UVP (UK) Quy trình gel: Những băng phân tách gel DGGE cắt dao cắt gel vô trùng, sau rửa lại nước MQ bổ sung thêm 50 µl nước MQ, để qua đêm oC Dịch ADN dùng làm khuôn để thực phản ứng PCR tương tự phản ứng PCR cho DGGE Bảng 15 với cặp mồi 338F 518R Sản phẩm PCR tinh kit ExoSAP – IT (Affymetric) giải trình tự FirstBase (Singapore) 10 Phân tích kết DGGE: Kết điện di DGGE phân tích nhờ phần mềm NTSYSpc2.0 dựa phân tích ma trận tương đồng – ma trận khoảng cách mẫu từ số lượng băng thu được, sau tiến hành phân tích nhóm (cluster analyses) để xác định tương quan quần xã Trình tự gen 16S rRNA đơn chủng trình tự băng thu điện di DGGE phân tích phần mềm clustalx 2.0, BioEdit Sequence Aligment Editor, sau tiến hành tìm kiếm so sánh trình tự tương đồng công cụ BLAST NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) 11 III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 LỰA CHỌN THIẾT KẾ MFC PHÙ HỢP 3.1.1 Lựa chọn vật liệu cho MFC Chúng tiến hành so sánh ưu nhược điểm loại vật liệu phục vụ cho thiết kế MFC công bố nghiên cứu trước (Bảng 17; 18; 19) Qua đó, lựa chọn sử dụng vải than chì (0,8 Ω) làm điện cực, chúng nối với gom điện làm than chì đường kính 0,6 cm (0,2 Ω) thông qua keo epoxy (Thái Lan) có trộn với bột than chì Tiếp theo, lựa chọn màng CEM nafion 117 làm màng ngăn cách hai khoang MFC, loại màng cho dòng điện phát sinh cao, tạo pH ổn định khoang anode Cuối cùng, qua so sánh, chọn vật liệu polyacrylic làm khung MFC, vật liệu khử trùng dễ dàng cải biến hình dạng 3.1.2 Lựa chọn thiết kế MFC nhằm phát triển cảm biến sinh học Sau lựa chọn vật liệu để chế tạo MFC, tiếp tục nghiên cứu dạng thiết kế MFC công bố giới so sánh phân tích ưu nhược điểm chúng qua lựa chọn dạng thiết kế tối ưu cho việc phát triển cảm biến sinh học đánh giá chất lượng nước thải (Bảng 20, 21) Như ta biết, cảm biến sinh học (biosensor) đánh giá chất lượng nước cần yêu cầu như: dẫn xác chất lượng nước, kiểm tra trực tiếp chất lượng nước, thời gian phản ứng với thay đổi chất lượng nước ngắn, giá thành rẻ… Tuy nhiên, dòng điện sinh MFC chịu ảnh hưởng nhiều nhân tố như: hoạt động vi sinh vật, di chuyển-tốc độ electron từ tế bào đến điện cực, di chuyển proton từ khoang anode tới khoang cathode, điện trở hệ thống, tốc độ lượng oxy phản ứng khoang cathode, oxy hòa tan khoang anode[26]… Do đó, nhằm hạn chế yếu tố ảnh hưởng tới MFC, có nhiều dạng thiết kế MFC nghiên cứu phục vụ cho việc phát triển cảm biến sinh học tối ưu độ hoạt động chúng Ưu nhược điểm dạng thiết kế phân tích Bảng 20 12 Sau tiến hành nghiên cứu so sánh ưu-nhược điểm dạng thiết kế MFC Bảng 20 21, lựa chọn thiết kế MFC dựa mô hình Kim cộng năm 2006 [26] Đây dạng thiết kế MFC tích khoang anode nhỏ nên thời gian phản ứng với nồng độ BOD khác nhanh MFC thiết kế dạng MFC hai khoang với dạng hình hộp hình trụ, với ba thể tích khoang anode là: ml; 7,5 ml; 10 ml Hệ thống MFC vận hành với khoang cathode sử dụng nước bão hòa oxy chạy tuần hoàn (nước thay ngày/lần), khoang anode không sử dụng chất truyền điện tử trung gian, dịch đầu vào anode không sử dụng nitơ để tạo điều kiện kỵ khí Với đặc điểm trên, mong đợi MFC tích khoang nhỏ cho tốc độ cảm ứng với chất lượng nước thải nhanh Việc không sử dụng dung dịch đầu vào anode kỵ khí, không sử dụng chất truyền điện tử trung gian sử dụng cathode chứa dung dịch nước sục khí nhằm tăng khả triển khai cho ứng dụng thực địa Ngoài ra, hoạt động MFC chịu nhiều ảnh hưởng cấu trúc khoang, đường dòng dung dịch tốc độ lưu dịch khoang, tiến hảnh thử nghiệm hai dạng thiết kế khoang hình trụ hình hộp chữ nhật với thể tích khoang anode biến đổi từ 5-7, 5-10 ml nhằm chọn thiết kế tốt cho việc thiết kế cảm biến sinh học có độ nhạy cao ổn định 3.1.3 Thử nghiệm để chọn lựa thiết kế thiết kế ưu việt 3.1.3.1 Kết làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa MFC Để phục vụ cho việc lựa chọn thiết kế tối ưu cho MFC, tiến hành làm giàu quần xã vi sinh vật điện hóa thí điểm MFC từ nguồn bùn thải khu dân cư (Hình 19) Kết cho thấy, dòng điện bắt đầu xuất từ ngày thứ (với MFC dạng thiết kế hình hộp chữ nhật 0,005 mA MFC khoang hình trụ 0,002 mA), sau hệ thống MFC làm giầu với quần xã vi sinh vật nước thải khu dân cư, dòng điện đạt mức ổn định hiệu điện đạt khoảng 0,3 mA từ ngày 16 trở Thêm vào MFC đối chứng (không làm giàu với quần xã vi sinh vật) ta nhận thấy dòng điện xuất 13 Như vậy, làm giàu quần xã vi khuẩn điện hóa thí điểm MFC với thiết kế thử nghiệm 3.1.3.2 So sánh MFC với dạng thiết kế khác Về độ ổn định dòng điện sản sinh hai dạng MFC: Sau làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa thí điểm MFC thành công, so sánh độ ổn định dòng điện dạng thiết kế MFC với Có thể nhận thấy, dòng điện sinh từ MFC khoang hình hộp chữ nhật ổn định so với dạng thiết kế MFC khoang hình trụ Về độ nhạy phản ứng hai dạng MFC với thay đổi giá trị BOD dung dịch andoe: Chúng tiến hành thử nghiệm với hai nồng độ BOD = ppm BOD 50 ppm nhằm so sánh độ nhạy MFC với thiết kế khác (chứa quần xã vi sinh vật điện hóa thí điểm) Có thể thấy rằng, thay đổi nồng độ BOD từ 50 ppm xuống ppm, dòng điện sinh với hai dạng MFC có xu hướng giảm (0,35 - 0,3 mA xuống 0,1 – 0,05 mA), phải đến khoảng 30 phút dòng điện bắt đầu đạt mức ổn định Ngược lại, thay đổi BOD từ ppm lên 50 ppm, MFC dạng khoang hình hộp tích ml 7, ml có tăng dòng điện lần đo (đo 10 phut/ lần thời gian thử BOD) đạt mức ổn định sau 30 phút; MFC lại, phải từ 60 – 90 phút dòng điện bắt đầu đạt mức ổn định với dòng điện tăng từ khoảng 0,05 đến 0,3 mA Trong đó, dòng điện sinh MFC đối chứng (không thay đổi nồng độ BOD) không đổi Khi so sánh phản ứng dòng điện hai MFC dạng khoang hình hộp chữ nhật với thể tích anode ml 7,5 ml, nhận thấy thời gian cảm ứng chúng với nồng độ BOD giống nhau, MFC dạng khoang hình hộp chữ nhật với thể tích anode 7,5 ml có khả phân biệt sai khác giá trị BOD 50 ppm ppm tốt hợn so với MFC dạng khoang hình hộp chữ nhật tích khoang ml Vậy kết thu cho thấy độ nhạy với thay đổi nồng độ BOD MFC dạng khoang anode hình hộp chữ nhật cao so với độ nhạy MFC dạng khoang anode hình trụ Hơn nữa, MFC dạng khoang anode hình hộp chữ nhật với thể tích khoang ml 7,5 ml có độ nhạy cao so với MFC dạng tích khoang anode 10 ml *Ghi chú: ĐC ký hiệu MFC đối chứng, MFC không thay đổi nồng độ BOD 14 3.2 LỰA CHỌN NGUỒN VI SINH VẬT PHÙ HỢP ĐỂ LÀM GIÀU HỆ VI SINH VẬT ĐIỆN HÓA TRONG CÁC MFC 3.2.1 Dòng điện phát sinh MFC giai đoạn làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa Sau thử nghiệm dạng thiết kế khác nhau, tiến hành làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa MFC dạng khoang hình hộp chữ nhật tích anode ml (ký hiệu TX) 7,5 ml (ký hiệu BO) từ năm quần xã vi sinh vật khác (đất tự nhiên-ĐT, bùn tự nhiên-BT, bùn hoạt tính-BH, nước thải-NT, hỗn hợp-HH) Kết cho thấy sau MFC thay màng nilon màng nafion 117 (14 ngày gây nhiễm vi sinh vật từ quần xã), dòng điện xuất đạt giá trị từ 0,1 – 0,13 mA Sau ngày dòng điện MFC làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa từ nguồn hỗn hợp, nước thải, bùn hoạt tính bùn tự nhiên đạt giá trị ổn định (dao động từ 0,35 mA đến 0,5 mA) Còn MFC làm giàu từ nguồn đất tự nhiên, phải sau 19 ngày dòng điện đạt giá trị dòng điện ổn định (0,5 – 0,6 mA) 3.2.2 Độ ổn định dòng điện phát sinh MFC sau làm giàu thành công hệ vi sinh vật điện hóa Một yêu cầu cảm biến MFC đánh giá BOD nước thải là: với nồng độ chất đinh, dòng điện sinh phải có tính ổn định Vì vậy, theo dõi so sánh tính ổn đinh dòng điện sinh MFC với hệ vi sinh vật làm giàu từ nguồn khác nêu Khi so sánh dòng điện phát sinh MFC (trong giai đoạn sau làm giàu thành công) hai thời điểm cách khoảng 20 ngày, thấy rằng: MFC làm giàu từ nguồn đất tự nhiên bùn hoạt tính có dòng điện phát sinh hai giai đoạn ổn định, hai thời điểm theo dõi giá trị dòng điện MFC làm giàu từ nguồn đất tự nhiên (0,45 -0,49 mA) (Hình 27) Ngược lại, với MFC làm giàu từ nguồn 15 bùn tự nhiên, nước thải, hỗn hợp, dòng điện phát sinh sau 20 ngày theo dõi không ổn định có giá trị thấp hơn, dao động khoảng 0.2 mA Hơn nữa, so sánh dòng điện thu sau làm giàu thành công hệ vi vật điện hóa MFC từ nguồn khác nhau, ta nhận thấy MFC làm giàu từ nguồn đất tự nhiên có dòng điện phát sinh (0,45 – 0,49 mA) cao so với nguồn làm giàu từ bùn tự nhiên, nước thải, bùn hoạt tính, nguồn hỗn hợp (dưới 0,4 mA) Các kết chứng tỏ MFC làm giàu từ nguồn quần xã vi sinh vật khác ảnh hưởng tới dòng điện phát sinh độ ổn định dòng điện MFC 3.2.3 Kết phân lập hệ vi sinh vật điện cực anode MFC sau làm giàu thành công Nhằm hiểu rõ ảnh hưởng nguồn vi sinh vật ban đầu đến hệ vi sinh vật hình thành MFC, tiến hành phân lập chủng vi sinh vật điện cực anode MFC nêu Sau phân lập mẫu điện cực anode cắt từ MFC (sau trình làm giàu) môi trường (môi trường LB, C; Hansen; PDA, BG11), thu khuẩn lạc mọc môi trường LB Điều chứng tỏ hệ vi sinh vật điện cực anode MFC đa phần vi khuẩn dị dưỡng Theo nhiều nghiên cứu khác, nhiều vi khuẩn MFC vận hành với chất hữu vi khuẩn dị dưỡng [37] Ngoài ra, số chủng phân lập MFC khác nguồn quần xã ban đầu, chí MFC làm giàu nguồn quần xã ban đầu có số chủng phân lập tỷ lệ có mặt chủng hoàn toàn khác 3.2.4 Kết phân tích quần xã vi khuẩn phương pháp DGGE Dựa kết nuôi cấy, vào công bố trước đây, thấy giả thuyết thuyết phục là: Vi sinh vật anode MFC bao gồm vi khuẩn Để so sánh quần xã vi khuẩn làm giàu từ nguồn khác MFC, tiến hành tách DNA tổng số vi khuẩn từ mẫu nguồn quần xã làm giàu ban đầu mẫu điện cực anode sau phân tích biến đổi quần xã sau làm giàu MFC phương pháp DGGE 16 Khi so sánh mẫu quần xã vi khuẩn trước làm giàu sau làm giàu thành công MFC nhận thấy có biến đổi quần xã làm giàu MFC Điển hình hai quần xã làm giàu từ nguồn nước thải nguồn hỗn hợp, có độ tương đồng với mẫu quần xã MFC sau làm giàu thành công 0,64 Thêm vào đó, ta nhận thấy nguồn bùn tự nhiên đất tự nhiên ban đầu tương đồng (hệ số tương đồng 0,93) nhiên sau làm giàu MFC quần xã hai nguồn đất tự nhiên bùn hoạt tính có hệ số tương đồng khoảng 0,68 Ngoài ra, trừ hai dạng thiết kế MFC làm giàu từ nguồn quần xã hỗn hợp ra, quần xã hai MFC với thiết kế khác làm giàu từ quần xã ban đầu có hệ số tương đồng nhỏ 0,83 Mặt khác, số băng DNA nguồn quần xã ban đầu sau trình làm giàu MFC bị mờ không xuất (không chiếm ưu thế) mẫu DNA khuếch đại từ điện cực Và ngược lại số băng DNA xuất quần xã điện cực anode sau giai đoạn làm giàu MFC lại không xuất nguồn quần xã ban đầu Những kết cho thấy, quần xã vi khuẩn anode MFC có biến đổi lớn so với quần xã nguồn để thích nghi với điều kiện khoang anode Đây minh chứng cho thấy điều kiện MFC giúp làm giàu vi sinh vật điện hóa thích nghi cao từ quần xã nguồn Sự thay đổi quần xã MFC thời gian khác nhận thấy nghiên cứu Kim cộng sự, tác giả nhận thấy quần xã ban đầu sử dụng cho MFC (bùn kỵ khí) quần xã làm giàu sau 97 ngày có mức độ tương đồng thấp (khoảng 0,1) Ngoài MFC có thời gian làm giàu lâu độ tương đông quần xã MFC cao, như: mẫu phân tích lẫy sau 21 ngày làm giàu có độ tương đồng khoảng 0,38; mẫu lấy sau 97 ngày làm giàu có hệ số tương đồng lớn 0,7 3.2.5 Kết phân tích trình tự băng DNA thu từ quần xã DGGE Nhằm hiểu rõ thành phần vi khuẩn có quần xã MFC quần xã nguồn trước làm giàu, tiến hành gel băng DNA thu từ gel điện di DGGE Sau tiến hành giải trình tự mẫu DNA thu sử dụng công cụ BLAST NCBI để phân tích trình tự thu 17 Các băng DNA xuất bảng gel điện di biến tính (Phụ lục 4.4) có trình tự đa phần giống với trình tự DNA loài vi khuẩn điện hóa phát hệ thống MFC nói chung Geobacter sp.; Aeromonas sp.; Shewanella amazonensis; Pseudomonas sp.: Geothrix fermentans; Paludibacter sp; Parabacteroides sp.; Tolumonas sp.; Flavobacterium sp.; Clostridium sp.; Desulfomicrobium sp Theo kết thu được mục 3.2.2 độ ổn định quần xã, quần xã đất tự nhiên sau thời gian dài hoạt động giữ dòng điện phát sinh ổn định có giá trị cao (0,4-0,45 mA) Phân tích DGGE cho thấy: có băng đậm (TD8) MFC làm giầu từ nguồn đất tự nhiên – với trình tự tương ứng với đoạn trình tự gen 16S rRNA vi khuẩn thuộc chi Pseudomonas - có mặt hầu hết mô hình băng nguồn băng bị mờ mô hình băng quần xã làm giàu, trừ quần xã làm giàu từ nguồn đất tự nhiên Quan sát này, kết hợp với kết phân tích quần xã vi khuẩn phương pháp phân lập truyền thống, dẫn đến giả thuyết rằng: Sự hoạt động ổn định MFC làm giàu từ nguồn đất tự nhiên liên quan đến chiếm ưu loài Pseudomonas sp (tương ứng với băng TD Hình 31) Pseudomonas nói chung vi khuẩn biến dưỡng, có khả sống linh hoạt môi trường khác Nhờ đó, chúng dễ dàng thích nghi với điều kiện sống khoang anode so với chủng vi khuẩn khác Ngoài ra, từ kết phân lập vi khuẩn từ MFC khoang hình hộp ml 7,5 ml) với hệ vi sinh vật làm giàu tự nguồn đất tự nhiên, số ba chủng vi khuẩn phân lập được, chủng chiếm ưu Pantoea agglomerans vi khuẩn điện hóa mạnh Hơn nữa, so sánh trình tự DNA khác thu từ băng DGGE MFC làm giàu từ nguồn đất tự nhiên thấy có độ tương đồng cao với chủng vi khuẩn điện hóa Geobacter sp.; Shewanella amazonensis …Vì vậy, giả thuyết mà đưa là: Các vi khuẩn điện hóa khoang anode MFC làm giàu từ nguồn đất tự nhiên có tương tác tốt với Pseudomonas sp cho phép loài chiếm ưu thế, loài có khả sử dụng chất thích nghi linh hoạt; qua quần xã vi khuẩn bị biến động hơn, dẫn đến phát sinh dòng điện ổn định MFC so với MFC làm giàu từ nguồn khác Trong trường hợp quần xã làm giàu từ nguồn khác, ưu Pseudomonas sp có lẽ liên quan đến tính bất ổn định dòng điện sinh 18 Tổng hợp kết nghiên cứu nói trên, định lựa chọn nguồn đất tự nhiên nguồn tối ưu cho việc làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa MFC để sử dụng thử nghiệm đánh giá chất lượng nước thải 3.3 BƯỚC ĐẦU THỬ NGHIỆM HỆ THỐNG MFC VỚI DUNG DỊCH MÔ PHỎNG NƯỚC THẢI SAU XỬ LÝ TRONG PHÒNG THÍ NGHIỆM Sau nghiên cứu ảnh hưởng thiết kế nguồn làm giàu khác nhau, bước đầu tiến hành thử nghiệm MFC dạng thiết kế khoang hình hộp chữ nhật thể tích 7,5 ml làm giàu từ nguồn quần xã đất tự nhiên với dung dịch mô nước thải sau xử lý có nồng độ BOD 0, 5, 15, 30, 50 ppm thu kết Hình 33 Từ kết Hình 33, thấy hệ thống MFC có phản ứng tốt với nồng độ BOD khác Dòng điện có quan hệ tuyến tính với nồng độ BOD khoảng nồng độ BOD từ ppm đến 30 ppm Đối với nồng độ BOD từ 30 ppm trở lên (30 50 ppm), dòng điện đạt mức độ ổn định (“bão hòa”) Khi so sánh với hệ thống MFC biosensor khác (Bảng 21) thấy khoảng giá trị nồng độ BOD mà MFC phân biệt (0 - 30 ppm) cao so với dạng thiết kế MFC biosensor Kim cộng (2,6 - 25 ppm) Tuy nhiên, khoảng thấp so với số hệ thống biosensor khác: MFC Peixoto đo nồng BOD từ 17 - 78 ppm; MFC Chang 20 - 100 ppm MFC Kim đo nồng độ BOD từ 20 - 200 ppm Mặc dù vậy, khoảng đánh giá BOD hoàn toàn phù hợp để sử dụng đánh giá nhanh BOD mẫu nước thải bất kỳ: Với mẫu nước thải xử lý có BOD vượt 30 ppm (ngưỡng cho phép theo tiêu chuẩn A QCVN40 BTNMT-2011) thiết bị cho tín hiệu đạt tới mức dòng điện “bão hòa” (khoảng 0.4-0.5 mA tùy thiết bị 19 KẾT LUẬN Trong nghiên cứu đạt số kết sau: - Đã thiết kế chế tạo thành công thiết bị MFC có khả vận hành với nước - thải mô Đã chọn loại thiết kế MFC khoang hình hộp chữ nhật 7,5 ml có khả - sinh dòng điện cảm ứng tốt với nồng độ BOD Đã lựa chọn đất tự nhiên nguồn phù hợp phục vụ cho việc làm giàu hệ vi sinh vật điện hóa MFC để sử dụng làm cảm biến đánh giá chất - lượng nước thải Đã làm giàu thành công hệ vi sinh vật điện hóa, bao gồm vi sinh vật có khả sản sinh dòng điện mà không cần bổ sung chất nhận điện tử trung - gian Đã xác định vi khuẩn thuộc chi Pseudomonas chiếm ưu quần - xã MFC sinh dòng điện ổn định (làm giàu từ đất tự nhiên) Các MFC phát triển có dòng điện phát sinh tương quan tuyến tính với nồng độ BOD dung dịch nước thải mô (ở anode) khoảng giá trị BOD từ – 30 ppm, điều kiện phòng thí nghiệm KIẾN NGHỊ - Tối ưu quy trình thử nghiệm hệ thống MFC nhằm nâng cao khả đánh giá BOD thiết bị 20 - Tiến hành thử nghiệm hệ thống MFC với yếu tố ảnh hưởng tới dòng điện phát sinh MFC, qua đưa khuyến cáo, thông số hiệu chỉnh nhằm phản ánh chất lượng nước thải - Thử nghiệm thêm giá trị khác (pH, kim loại nặng, thuốc trừ sâu…) nước thải xử lý với hệ thống MFC - Nghiên cứu sâu tương tác vi sinh vật khoang anode thiết bị làm giàu, tìm hiểu hoạt tính điện hóa quần xã vi sinh vật để làm rõ vai trò chúng trình truyền điện tử đến điện cực - Thử nghiệm thiết bị điều kiện thực tế 21 ... biến sinh học khai thác trình trao đổi chất vi sinh vật đặc biệt quan tâm nghiên cứu ứng dụng Pin nhiên liệu vi sinh vật dạng thiết bị cảm biến hoạt động dựa hoạt tính điện hóa vi sinh vật Loại thiết. .. nghiên cứu pin nhiên liệu vi sinh vật ứng dụng chúng làm cảm biến sinh học đánh giá chất lượng nước thải hạn chế Nhằm góp phần vào nghiên cứu pin nhiêu liệu vi sinh phát triển thiết bị cảm biến có... Nghiên cứu phát triển thiết bị pin nhiên liệu vi sinh vật (Microbial fuel cell) sử dụng làm cảm biến sinh học đánh giá chất lượng nước thải” II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN