KỸ THUẬT CHỨNG NGHIỆM PHÙ HỢP Ngun tắc Lựa chọn túi máu phù hợp Bảo đảm an toàn truyền máu Nền tảng phản ứng kháng ngun kháng thể Phản ứng thuận hợp ( phản ứng chéo ) xét nghiệm để tìm túi máu phù hợp cho bệnh nhân Các kỹ thuật trước truyền máu Kiểm tra tiền sử truyền máu bệnh nhân Xác định nhóm máu ABO, Rh bệnh nhân túi máu Sàng lọc kháng thể huyết bệnh nhân túi máu Định danh kháng thể huyết bệnh nhân ( có ) Phản ứng chéo Các loại phản ứng chéo Phản ứng chéo điện tử: + Sử dụng máy vi tính để phân tích liệu túi máu bệnh nhân: Nhóm máu ABO, Rh túi máu bệnh nhân Sàng lọc kháng thể bệnh nhân + Chỉ sử dụng trường hợp sàng lọc kháng thể bệnh nhân (-) + Khi liệu phù hợp máy vi tính in nhãn dán để dán lên túi máu Phản ứng chéo huyết học: + Trước truyền máu, hồng cầu túi máu kiểm tra với huyết bệnh nhân + Nếu huyết bệnh nhân có kháng thể chống lại kháng ngun tương ứng hồng cầu túi máu ngưng kết xuất + Điều thể khơng thuận hợp bệnh nhân túi máu + Nếu khơng có ngưng kết xảy ra, túi máu xem thuận hợp hay an tòan để truyền cho bệnh nhân Mục đích phản ứng chéo Đây bước kiểm tra cuối thuận hợp nhóm máu ABO Có thể phát diện kháng thể huyết bệnh nhân số trường hợp Quy trình phản ứng chéo Gồm bước: Kiểm tra thơng tin bệnh nhân: + Họ tên bệnh nhân phải đầy đủ, rõ ràng + Cần có mã số hồ sơ bệnh án, hay số nhập viện + Tiền sử truyền máu phản ứng truyền máu trước ( có ) 2) Kiểm tra mẫu máu bệnh nhân: + Phải đầy đủ họ tên, mã số bệnh nhân mẫu máu khớp với phiếu u cầu + Mẫu máu lấy tối đa vòng ngày + Kiểm tra tượng tán huyết, cục fibrin mẫu máu 3) Xác định lại nhóm máu ABO, Rh: + Định lại nhóm máu ABO phương pháp + Định lại nhóm máu Rh huyết mẫu D + Để xác định nhóm máu dùng lam kính ống nghiệm 4) Tiến hành phản ứng chéo Trang thiết bị + Nước muối sinh lý 0,9% + Lam kính thủy tinh + Ống nghiệm thủy tinh 10x75mm + Ống nghiệm nhựa 12x75mm + Chai nhựa đựng nước muối dùng để rửa + Pipette có chia độ + Thuốc thử: hồng cầu mẫu, AHG, LISS, hồng cầu cảm ứng + Card gel, dung dòch đệm ( có LISS ) + Máy quay ly tâm ống nghiệm, máy quay ly tâm Card gel + Máy rửa tự động ( có ) + Máy ủ Card gel, ống nghiệm + Kính hiển vi Kỹ thuật Phản ứng chéo sử dụng kỹ thuật ống nghiệm Phản ứng chéo sử dụng kỹ thuật Card gel Phản ứng chéo gồm phần: + Phần chính: phản ứng huyết bệnh nhân hồng cầu túi máu + Phần phụ: phản ứng huyết túi máu hồng cầu bệnh nhân Kỹ thuật ống nghiệm Pha lỗng hồng cầu túi máu từ – 4% nước muối sinh lý 0,9% ( thường 3% ) Cho 50µL hồng cầu pha lỗng vào ống nghiệm Cho thêm 100µL huyết bệnh nhân vào ống nghiệm Trộn kỹ, quay ly tâm dung dịch tốc độ 3000 vòng/phút 15 giây Lắc nhẹ nhàng đọc kết kính hiển vi ( giai đoạn ) Thêm 100µL LISS vào ống nghiệm Trộn kỹ, ủ dung dịch 370C 15 phút Sau ủ, quay ly tâm dung dòch tốc độ 3000 vòng/phút 15 giây, lắc nhẹ nhàng đọc kết ( cần thiết ) Rửa dung dịch 03 - 04 lần nước muối sinh lý 0,9% đổ bỏ hoàn toàn nước rửa cuối Thêm 100µL AHG, trộn kỹ quay ly tâm dung dịch tốc độ 3000 vòng/phút 15 giây Lắc nhẹ nhàng đọc kết kính hiển vi ( giai đoạn ) Nếu kết (-) cho thêm 50µL hồng cầu cảm ứng, trộn kỹ quay ly tâm dung dịch tốc độ 3000 vòng/phút 15 giây Lắc nhẹ nhàng kiểm tra kết lại kính hiển vi Kỹ thuật Card gel Pha lỗng hồng cầu túi máu 1% dung dòch đệm Cho 50µL hồng cầu 1% vào lỗ Card gel Thêm 25µL huyết bệnh nhân vào lỗ Card gel Ủ Card gel 370C 15 phút Sau ủ, quay ly tâm Card gel 10 phút Đọc ghi nhận kết Lưu ý: bước kỹ thuật cần tiến hành theo hướng dẫn nhà sản xuất Kỹ thuật tự chứng Cần tiến hành phản ứng chéo (+) Pha lỗng hồng cầu bệnh nhân nước muối sinh lý 0,9% Tiến hành bước kỹ thuật giống phản ứng chéo Đọc so sánh kết ống tự chứng với phản ứng chéo Lưu ý: nồng độ, tỷ lệ hồng cầu huyết cần tn theo kỹ thuật sử dụng Các ngun nhân (+) phản ứng chéo Khơng nhóm máu ABO Kháng thể miễn dòch huyết bệnh nhân Kháng thể tự sinh huyết bệnh nhân Hồng cầu túi máu tự ngưng kết Các bất thường huyết bệnh nhân Nhiễm trùng Sàng lọc kháng thể (-), phản ứng chéo giai đoạn (+): Khơng nhóm máu ABO túi máu bệnh nhân Hồng cầu túi máu tự ngưng kết Kháng thể chống A1 bệnh nhân A2 A2B Các kháng thể miễn dịch hoạt động nhiệt độ phòng Các kháng thể tự sinh loại lạnh 2) Sàng lọc kháng thể (-), phản ứng chéo giai đoạn (+): Hồng cầu túi máu ngưng kết Kháng thể huyết phản ứng với kháng ngun túi máu Các kháng thể truyền tiểu cầu khơng phù hợp nhóm máu ABO ( thường kháng thể chống A B ) 3) Sàng lọc kháng thể (+), phản ứng chéo (-): Kháng thể tự sinh -I Các kháng thể phụ thuộc vào số lượng kháng ngun 4) Sàng lọc kháng thể (+), phản ứng chéo (+), tự chứng (-): Kháng thể miễn dịch Hồng cầu túi máu ngưng kết 5) Sàng lọc kháng thể (+), phản ứng chéo (+), tự chứng (+): Kháng thể miễn dịch Kháng thể tự sinh loại lạnh Kháng thể tự sinh loại nóng Các vấn đề liên quan đến thuốc thử Các bước giải trường hợp (+) Kiểm tra nhóm máu ABO, Rh túi máu bệnh nhân Làm tự chứng Coombs trực tiếp Kiểm tra lại sàng lọc kháng thể bệnh nhân, định danh kháng thể ( có cần thiết ) Tiến hành thêm kỹ thuật khác Kỹ thuật trường hợp khẩn cấp,Cố gắng xác định nhóm máu ABO, Rh bệnh nhân Nếu khơng xác định được, sử dụng túi máu O- Ngay bệnh nhân truyền máu, phải tiếp tục tiến hành kỹ thuật phản ứng chéo Tài liệu tham khảo Technical manual, 15th edition Modern blood Banking and Transfusion Practices, 4th edition HealthAtoZ.com Redcross.org Nobelprize.org ... tâm ống nghiệm, máy quay ly tâm Card gel + Máy rửa tự động ( có ) + Máy ủ Card gel, ống nghiệm + Kính hiển vi Kỹ thuật Phản ứng chéo sử dụng kỹ thuật ống nghiệm Phản ứng chéo sử dụng kỹ thuật Card... Lưu ý: bước kỹ thuật cần tiến hành theo hướng dẫn nhà sản xuất Kỹ thuật tự chứng Cần tiến hành phản ứng chéo (+) Pha lỗng hồng cầu bệnh nhân nước muối sinh lý 0,9% Tiến hành bước kỹ thuật giống... nhân Kỹ thuật ống nghiệm Pha lỗng hồng cầu túi máu từ – 4% nước muối sinh lý 0,9% ( thường 3% ) Cho 50µL hồng cầu pha lỗng vào ống nghiệm Cho thêm 100µL huyết bệnh nhân vào ống nghiệm Trộn kỹ,