mycoplasmasv đại học

Vì vậy với Mycoplasma cần phải có sterol trên môi trường nuôi cấy mới phát triển được.. Nuôi cấy Mycoplasma được xếp vào nhóm vi khuẩn vì chúng có khả năng phát triển được trên cả môi tr

Trường Học Y Hà Nội

Khoa Vi Sinh Kí Sinh Trùng Lâm Sàng

TIỂU LUẬN

Môn : Vi Sinh Kí Sinh Trùng Lâm Sàng

CHỦ ĐỀ:

MYCOPLASMA

Người thực hiện: Nhóm 1

Tổ 36

Lớp y3L

Hà Nội ngày 29 tháng 9 năm 2016

Phụ lục

Trang Mục tiêu tiểu luận……… 1

Lịch sử phát hiện… ……… …….2

Đặc điểm sinh học……… 2

Khả năng gây bệnh………… ……… …… 5

Phương pháp chẩn đoán ……….….6

Kết luận ……… 9

Tài liệu tham khảo……….10

MỤC TIÊU

Tìm hiểu về :

1 Lịch sử phát hiện của vi khuẩn mycoplasma

2 Đặc điểm sinh học của vi khuẩn mycoplasma

3 Khả năng gây bệnh của vi khuẩn mycoplasma

4 Phương pháp chẩn đoán phòng thí nghiệm đối với vi Khuẩn mycoplasma

I Lịch sử phát hiện

• Năm 1898, Mycoplasma được phát hiện lần đầu tiên bởi Roux và Nocard

trên phổi của những con bò bị viêm phổi

• Năm 1929 được đặt tên là Mycoplasma.

• Năm 1937, Edzall Dienes phát hiện Mycoplasma ngự trị trọng cơ thể

người

• Năm 1942, Mycoplasma được tìm thấy trong niệu đạo nam giới Và vài

năm sau, mycoplasma gây ra một bệnh truyền qua đường tình dục có hậu quả khá nghiêm trọng

II Đặc điểm sinh học

Phân loại:

- Lớp: Mollicutes

- Bộ: Mycoplamastales

- Họ: Mycoplasmataceae

- Giống: Mycoplasma, Ureaplasma

- Loài: Mycoplasma pneumonia, Mycoplasma hominis,

Mycoplasma genitalium…

1. Hình thái

Mycoplasma là những vi khuẩn rất nhỏ, kích thước 0,15-0,3 μm nên

không quan sát được dưới kính hiển vi quang học thông thường Muốn quan

sát được Mycoplasma phải dùng kính hiển vi nền đen hoặc kính hiển vi

huỳnh quang Vì kích thước chỉ tương đương với các virus cỡ lớn nên chúng

có thể màng qua lọc vi khuẩn cỡ 450nm

Hình thể Mycoplasma đa dạng: hình thoi, hình cầu, hình nhẫn, hình trực

khuẩn hoặc hình xoắn Hình thể vi khuẩn tùy thuộc vào môi trường nuôi cấy

Mycoplasma không bắt màu Gram Để xác định hình thể Mycoplasma cần

thông qua nhuộm Giemsa, nhuộm huỳnh quang cũng rất ít giá trị chẩn đoán phân biệt

Mycoplasma không có hình thái cố định do chúng không có cấu trúc

thành tế bào, chúng chỉ được bao quanh bằng một màng lipid có chứa sterol

Vì vậy với Mycoplasma cần phải có sterol trên môi trường nuôi cấy mới phát triển được Các Mycoplasma đều đề kháng với kháng sinh nhóm beta-lactam.

2. Nuôi cấy

Mycoplasma được xếp vào nhóm vi khuẩn vì chúng có khả năng phát

triển được trên cả môi trường nhân tạo và trên tế bào sống Ở môi trường nhân tạo đòi hỏi phải có những chất dinh dưỡng đặc biệt như huyết thanh ngựa, chiết xuất men Môi trường phải có lipoprotein và sterol Nhiệt độ từ 35-37 độ C, pH từ 7.0 - 7.8

Trên môi trường lỏng, vi khuẩn không làm đục môi trường nên khó nhận biết chúng mọc hay không.Lấy canh thang ly tâm nhuộm Giemsa có thể thấy

sự đa hình thái của vi khuẩn Trên môi trường đặc, vi khuẩn mọc thành khuẩn lạc điển hình: trung tâm khuẩn lạc tối và dày, phần rìa mỏng và bẹt, trông như hình quả trứng ốp mà trung tâm là phần lòng đỏ để nguyên

Trên môi trường nuôi cấy là các tế bào trong ống nghiệm, Mycoplasma

phát triển trên bề mặt tế bào

3. Đặc điểm sinh vật hóa học

Nhiều chủng Mycoplasma sử dụng glucose làm năng lượng tế bào

Mycoplasma hominis sử dụng arginine, Ureaplasma urelyticum

yêu cầu urea Một số chủng có enzyme peroxidase và hemolysin

phân hủy hồng cầu

4. Khả năng đề kháng

Mycoplasma tương đối bền vững khi dùng phương pháp đông băng và

thoát băng Trong huyết thanh, Mycoplasma có thể tồn tại ở 56 độ C trong 2

giờ

Mycoplasma dễ bị phá hủy bởi siêu âm và bị tiêu diệt bởi dung dịch có

pH acid hoặc kiềm cao

Mycoplasma đề kháng với penicillin.

5.Các loại kháng nguyên

Bằng phương pháp hóa học và sắc kí, người ta đã tách được ở

Mycoplasma những thành phần hoá học mang tính kháng nguyên khác nhau.

Mỗi thành phần hóa học có khả năng tham gia vào một phản ứng huyết

thanh nhất định Mycoplasma gây bệnh cho người và động vật có tính kháng

nguyên đặc hiệu cho loài

Mycoplasma có 8 type là A, H, I, J, K, N, P, S

Kháng nguyên của tất cả các Mycoplasma là glycolipid.

III Khả năng gây bệnh

• Độc lực của Mycoplasma bao gồm yếu tố bám vào bề mặt tế bào cảm thụ,

gây tổn thương tế bào trực tiếp do sinh hydrogen peroxide, gốc oxide, hay qua trung gian phản ứng kháng nguyên kháng thể hoặc cạnh tranh chất dinh dưỡng

• Mycoplasma gây bệnh chủ yếu trên đường hô hấp, sinh dục ở người và

nhiều loại động vật

 Ở người: Mycoplasma có một ái tính với niêm mạc hô hấp và niêm

mạc sinh dục

- Bệnh đường hô hấp: Mycoplasma pneumaniae gây viêm phổi.

Khi bị bệnh, cơ thể sẽ có triệu chứng như: sốt rét, toát mồ hôi, ho khan dữ dội, khó thở và đau ngực Bệnh thường gặp ở trẻ em

- Bệnh đường sinh dục:

+ Mycoplasma hominis gây viêm khung chậu ở phụ nữ có thể

gây sẩy thai

+ Mycoplasma genitalium và Mycoplasma urealyticum gây

viêm niệu đạo, áp xe lên tuyến bathorlin, viêm vòi trứng

 Ở động vật:

- Mycoplasma gây bệnh cho nhiều động vật: viêm phổi truyền

nhiễm ở trâu bò, gây suyễn, viêm đường hô hấp trên ở heo, gây viêm khớp ở heo con, gây viêm khớp, gây hô hấp mạn tính ở gà…

IV Phương pháp chẩn đoán

1. Phân lập vi khuẩn

 Bệnh phẩm: chất ngoáy họng, chất bài tiết của cuống phổi, chất dịch từ cơ quan sinh dục ở cả nam và nữ

 Nhuộm soi: quan sát hình thể, nên dùng nhuộm Giemsa hoặc nhuộm huỳnh quang

 Nuôi cấy:

+ Bệnh phẩm nuôi cấy trên môi trường chọn lọc đặc biệt Dựa vào

tính chất điển hình của khuẩn lạc Mycoplasma và các tính chất sinh

vật hóa học để chuẩn đoán xác định: xác định khả năng làm tan máu và hấp thụ hồng cầu, tính chất lên men glucose…

 Ưu điểm,nhược điểm

+ Ưu điểm: rẻ, có thể xác định được căn nguyên gây bệnh, có tác dụng lưu trữ nguồn bệnh, phục vụ cho học tập nghiên cứu

+ Nhược điểm: mất thời gian dài mới có kết quả Dễ bị bội nhiễm trong quá trình lấy bệnh phẩm và nuôi cấy…làm ảnh hưởng đến tính chính xác của việc định danh vi khuẩn

2. Phương pháp chẩn đoán huyết thanh

 Gồm: phản ứng kết hợp bổ thể, phương pháp ELISA, phản ứng ngưng kết hồng cầu thụ động…

 Nguyên lý phương pháp ELISA: dựa trên sự kết hợp đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thể, trong đó kháng thể được gắn với một enzyme Khi cho thêm cơ chất thích hợp vào phản ứng, enzyme sẽ thủy phân cơ chất thành một chất có màu Sự xuất hiện màu chứng

tỏ đã xảy ra phản ứng đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thể,

qua cường độ màu mà phát hiện nồng độ kháng nguyên hay kháng thể cần phát hiện

 Ưu điểm, nhược điểm:

+Ưu điểm: độ đặc hiệu cao, đơn giản, cho phép xác định kháng nguyên kháng thể ở nồng độ rất thấp

3. Phản ứng PCR

 PCR (Polymerase chain reaction) là một kĩ thuật phổ biến trong sinh học phân tử nhằm khuyếch đại một đoạn ADN mà không cần

sử dụng các sinh vật sống như E.coli hay nấm men.

 Ưu điểm, nhược điểm

+ Ưu điểm: nhanh, chỉ cần 3h là có thể khuếch đại được một trình

tự đáng quan tâm Các bước thực hiện đơn giản, ít tốn kém

+ Nhược điểm: dễ bị ô nhiễm bởi các ADN khác có trong phòng thí nghiệm Cần phải có ADN (ARN) đặc trưng cho quá trình khuếch đại

4. Phương pháp dùng bộ kit DUO

 Kit DUO: dựa vào khả năng dử dụng arginine của

Mycoplasma hominis và urea của Ureaplasma urealyticum

qua việc tạo ra amoni và sinh môi trường kiềm

 Ưu điểm, nhược điểm:

+Ưu điểm: xác định nhanh Mycoplasma đường tiết niệu sinh

dục

+Nhược điểm: chỉ có tác dụng chuẩn đoán Mycoplasma

hominis và Ureaplasma urealyticum, không có tác dụng với

những loại Mycoplasma khác.

V Kết luận

Mycoplasma được phát hiện lần đầu vào cuối những năm của thế kỉ XIX bởi

Roux và Nocard

Mycoplasma là vi khuẩn nhỏ nhất còn có khả năng sinh sản, không có vách

tế bào, hình thể thay đổi Mycoplasma có thể phát triển trên môi trường có hoặc

không có tế bào sống, hiếu khí hoặc kỵ khí tuyệt đối Trên môi trường lỏng khó quan sát vi khuẩn mọc vì canh khuẩn trong suốt

Mycoplasma có tỉ lệ DNA/RNA nhỏ hơn 1 Quá trình nhân lên của

Mycoplasma khá phức tạp.

Mycoplasma bền với phương pháp đóng băng và kháng penicillin ở tất cả các

loài

Trong 36 loài gây bệnh cho người và động vât có 3 loài thường gặp:

M.pneumaniae, M.hominis, M.urealiticum

Có nhiều phương pháp dùng để chẩn đoán trong phòng thí nghiệm đối với

Mycoplasma Tùy từng trường hợp cụ thể có thể sử dụng 1 hay nhiều phương

pháp để xác định căn nguyên Mycoplasma.

Tài liệu tham khảo

1.Vi sinh kí sinh trùng tập 1 (Tạ Thành Văn)

2 Một số link tham khảo

https://www.google.com.vn/search?

q=mycoplasma&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwiJl8mhsbPPAh UBO5QKHaUtDUoQ_AUICCgB&biw=1300&bih=681#imgrc=Z5lKGuRbwqo KcM%3A

http://www.benhvien103.vn/vietnamese/bai-giang-chuyen-nganh/vi-sinh-vat/rickettsia-chlamydia-mycoplasma/1180/

http://xetnghiemdakhoa.com/diendan/showthread.php?tid=3160

TRÂN TRỌNG CẢM ƠN!