Xác định vai trò gây bệnh của vi khuẩn E. coli, C. perfringens trong hội chứng tiêu chảy ở lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tại tỉnh Hƣng Yên và thử nghiệm phác đồ điều trị

-1- -2- Đại học Thái Nguyên Trƣờng đại học Nông Lâm Đại học Thái Nguyên Trƣờng đại học Nông Lâm Lê Thị Hồi Lê Thị Hồi Xác định vai trị gây bệ nh vi khuẩn E coli, C perfringens Xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn E coli, C perfringens hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Hƣng Yên thử nghiệm phác đồ điều trị tỉnh Hƣng Yên thử nghiệm phác đồ điều trị Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 62 50 Luậ n văn t hạc sĩ khoa học nô ng nghiệ p Luậ n văn t hạc sĩ khoa học nô ng nghiệ p Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: T.S Phạm Đức Chƣơng T.S Đỗ Ngọc Thuý Thái Nguyên – 2008 Thái Nguyên - 2008 -3- -4- LỜ I CA M Đ OA N LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn Trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên, Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi trực tiếp thực Viện Thú Y Quốc Gia, Trường trung học KTKT - Tô Hiệu Hưng Yên cho với cộng tác giúp đỡ T.S Phạm Đức Chương T.S Đỗ phép tạo điều kiện giúp đỡ tạo điều kiện cho chúng tơi hồn thành luận Ngọc Th Viện Thú y Quốc gia Các số liệu, hình ảnh kết văn luận văn trung thực chưa công bố cơng trình Xin bày tỏ lịng biết ơn PGS TS Cù Hữu Phú;TS Phạm Đức Chương; khác Tơi xin đảm bảo thơng tin, trích dẫn luận văn TS Đỗ Ngọc Thuý tận tình hướng dẫn, bảo, giúp đỡ tơi hồn thành rõ nguồn gốc luận văn Tôi xin cảm ơn Khoa sau Đại Học - Trường Đại Học Nông Lâm Thái Tác giả luận văn Nguyên; Bộ môn vi trùng - Viện Thú Y Quốc Gia, toàn thể bạn bè đồng nghiệp tận tình giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Để góp phần thực thành công luận văn này, nhận LÊ THỊ HOÀI giúp đỡ động viên đáng kể gia đình đồng nghiệp Nhân dịp này, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành giúp đỡ q báu Xin trân trọng cảm ơn ! Thái Nguyên, tháng năm 2008 Lê Thị Hồi -5- -6- MỤC LỤC 1.3.1 Đặc điểm hình thái cấu trúc 27 Lời cam đoan 1.3.2 Đặc tính ni cấy sinh vật hoá học 29 1.4 Tình hình gây dịch bệnh đàn lợn tỉnh Hưng Yên 33 Lời cảm ơn 1.4.1 Một số đặc điểm tụ nhiên ảnh hưởng đến bệnh tiêu chảy 33 Mục lục 1.4.2 Tình hình dịch bệnh đàn lợn 33 Danh mục bảng Chƣơng ĐỐI TƢỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG Danh mục biểu đồ, đồ thị PHÁP NGHIÊN CỨU 35 Danh mục ảnh tư liệu đề tài 2.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 35 Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt 2.2 Nội dung nghiên cứu 35 MỞ ĐẦU 2.3 Nguyên liệu dùng cho nghiên cứu 36 Tính cấp thiết đề tài 2.4 Phương pháp nghiên cứu 37 Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số hiểu biết chung hội chứng tiêu chảy 1.1.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy 1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy 1.1.3 Bệnh lý, lâm sàng hội chứng tiêu chảy 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ 37 2.4.2 Phương pháp thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 38 2.4.3 Phương pháp xác định số lượng vi khuẩn 40 2.4.4 Phương pháp xác định serotyp kháng nguyên vi khuẩn phân lập 40 2.4.5 Phương pháp xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn phân lập 41 2.4.6 Phương pháp kiểm tra độc lực vi khuẩn phân lập chuột bạch 43 2.4.7 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh 1.1.4 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy 10 chủng vi khuẩn phân lập 44 1.1.5 Biện pháp phòng trị tiêu chảy cho lợn 11 2.4.8 Thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy cho lợn 45 1.2 Một số nghiên cứu vi khuẩn E coli gây bệnh đường tiêu hoá 14 2.4.9 Phương pháp sử lý số liệu 45 1.2.1 Đặc điểm hình thái cấu trúc 14 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 47 1.2.2 Đặc tính ni cấy sinh vật hố học 16 3.1 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 1.2.3 Đặc tính gây bệnh vi khuẩn E Coli 18 1.2.4 Khả kháng kháng sinh vi khuẩn E Coli 23 60 ngày tuổi Hưng Yên 47 3.1.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện thuộc 1.2.5 Vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy 25 tỉnh Hưng Yên 47 1.3 Những nghiên cứu vi khuẩn C perfringens gây bệnh đường tiêu hoá 26 3.1.2 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 49 3.1.3 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 52 -7- -8- 3.1.4 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi lợn 55 DANH MỤC CÁC BẢNG SỐ LIỆU 3.1.5 Các triệu chứng lợn tiêu chảy 58 3.2 Nghiên cứu xác định vai trò vi khuẩn E coli C perfringens hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi 60 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn E.coli C perfringen từ phân lợn bình thường phân lợn tiêu chảy theo lứa tuổi 60 3.2.2 Kết phân lập vi khuẩn E coli C perfringens từ mẫu bệnh phẩm 63 3.2.3 Mức độ biến động vi khuẩn E coli C perfringens phân lợn khoẻ phân lợn tiêu chảy 65 3.2.4 Kết giám định đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn E coli C perfringens phân lập 69 3.2.5 Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bệnh 71 3.2.6 Tỷ lệ chủng vi khuẩn E.coli mang yếu tố gây bệnh 73 3.2.7 Kết xác định độc lực chuột bạch số chủng E coli phân lập từ lợn bệnh 75 3.2.8 Kết xác định khả mẫn cảm kháng sinh với số chủng vi khuẩn E coli C perfringens phân lập từ lợn bệnh 78 3.3 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy cho lợn 81 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 85 Kết luận 85 Đề nghị 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO 88 PHỤ LỤC Bảng Trang 3.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện 48 3.2 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 50 3.3 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 53 3.4 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 55 3.5 Tổng hợp triệu chứng lợn mắc tiêu chảy 59 3.6 Kết phân lập vi khuẩn E.coli C perfringen từ phân lợn bình thường phân lợn tiêu chảy theo lứa tuổi 61 3.7 Kết phân lập vi khuẩn E coli C perfringens từ mẫu bệnh phẩm 64 3.8 Mức độ biến động vi khuẩn E coli C perfringens phân lợn khoẻ phân lợn tiêu chảy 66 3.9 Kết giám định đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn E coli C perfringens phân lập 70 3.10 Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bệnh 71 3.11 Tỷ lệ chủng vi khuẩn E.coli mang yếu tố gây bệnh 74 3.12 Kết xác định độc lực chuột bạch số chủng E coli phân lập từ lợn bệnh 76 3.13 Kết xác định khả mẫn cảm kháng sinh với số chủng vi khuẩn E coli C perfringens phân lập từ lợn bệnh 79 3.14 Kết điều trị thực nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy cho lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi 83 -9- - 10 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ 3.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện 48 3.2 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết theo mùa vụ 50 3.3 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 53 3.4 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 56 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Qui trình phân lập vi khuẩn đường ruột (Bộ môn Vi trùng - Viện Thú 39 EEC BHI cs CPU ED EDP EHEC EMB EPEC ETEC HEM Hly KN LT NXB PCR SLT SLT1 SLT2 ST(a,b) ST1 Stx2e Tr TSI tt UV VP VT2e VTEC C perfringens : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : Adherence Enteropathogenic Escherichia coli Brain-heart infusion Cộng Colonial Forming Unit Edema disease Edema disease pathogenic Enterohaemorrhagic Escherichia coli Eosin Methylene Blue Agar Enteropathogenic Escherichia coli Enterotoxigenic Escherichia coli Heamolysin Heamolysin Kháng nguyên Heat-Labile enterotoxin Nhà xuất Polymerase Chain Reaction Shiga-like toxin Shiga-like toxin Shiga-like toxin Heat-Stable Enterotoxin (a,b) Heat-Stable1 Shiga toxin 2e Trang Triple Surgar Iron Thể trọng Ultraviolet Voges Pros Kauer Verotoxin 2e Verotoxigenic Escherichia coli Clostridium perfringens -1- MỞ ĐẦU -2Theo nhiều tác giả, hội chứng tiêu chảy nhiều nguyên nhân gây (virus, vi khuẩn, độc tố, thức ăn, thời tiết, vệ sinh, chăm sóc, ni dưỡng….) qua TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI thực tế theo dõi tình hình dịch bệnh đàn lợn tỉnh Hưng Yên, Nền kinh tế nước ta liên tục phát triển nhờ vào phát triển ngành nhận thấy hội chứng tiêu chảy xảy phổ biến lợn gây nhiều thiệt hại nghề đồng nhau, công nghiệp nông nghiệp phát triển song song Cùng Xuất phát từ lý nhằm hạn chế thấp thiệt hại bệnh đà phát triển, nơng nghiệp ngành có đóng góp quan trọng gây ra, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Xác định vai trò gây bệnh tăng trưởng chung kinh tÕ đất nước, đặc biệt ngành chăn nuôi vi khuẩn E coli, C perfringens hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh trở thành ngành sản xuất cấu kinh tế nông nghiệp, đến 60 ngày tuổi tỉnh Hƣng Yên thử nghiệm phác đồ điều trị” chăn ni lợn ngày phát triển chiếm ưu Người chăn nuôi MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU không dừng lại tập quán sản xuất đơn mà ngày đầu tư áp - Xác định số đặc điểm dịch tễ bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến dụng tiến khoa học kỹ thuật vào sản xuất, không ngừng nâng cao 60 ngày tuổi tình hình nhiễm khuẩn: E coli, C perfringens lợn nuôi xuất chất lượng, đến đáp ứng nhu cầu tiêu dùng nước tỉnh Hưng Yên xuất thị trường giới Ở tỉnh Hưng Yên, chăn ni lợn có tốc độ tăng trưởng nhanh: Tồn tỉnh tổng đàn lợn đạt 600.510 con, tăng 5.553 so với năm 2006, đàn lợn nái 68.155 con, lợn thịt 531.747 con, đàn lợn hướng nạc 330.200 con, chiếm 52,5% tổng đàn (số liệu thống kê tính đến tháng 1/2008) Theo Nghị Đảng tỉnh Hưng Yên định hướng phát triển chăn nuôi chuyên nghiệp, chăn nuôi theo hướng trang trại tập trung, cải thiện môi trường chăn nuôi, ưu đãi đầu tư cho chăn nuôi khoa học kỹ thuật, vốn đầu tư cải thiện đa dạng cấu giống vật nuôi, chăn nuôi lợn bắt đầu chuyển đổi theo hướng sản xuất hàng hoá xuất với định hướng phát triển chăn ni - Phân lập xác định đặc tính, khả gây bệnh, xác định serotyp chủng E coli, C perfringens lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi mắc bệnh tiêu chảy - Xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập - Thử nghiệm số phác đồ điều trị lợn mắc bệnh tiêu chảy tỉnh Hưng Yên Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN - Kết đề tài chứng minh vai trò vi khuẩn E coli, C perfringens bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Hưng Yên Tuy nhiên, chăn nuôi cịn gặp nhiều khó khăn dịch bệnh, phần lớn nguyên - Kết nghiên cứu đề tài sở khoa học phục vụ cho nhân chăm sóc ni dưỡng chưa kỹ thuật, ý thức người chăn nghiên cứu tiếp theo, đồng thời đóng góp tư liệu tham khảo cho nhà nuôi chưa tốt, phát sinh nhiều nguy như: dịch bệnh (cúm gia nghiên cứu thú y người chăn ni cầm, lở mồm long móng, tiêu chảy ) mà nhiều năm qua chưa khắc - Đưa phác đồ điều trị có hiệu quả, giúp cho thú y sở hộ phục triệt để, cụ thể hội chứng tiêu chảy thường gặp lợn chăn ni phịng trị hội chứng tiêu chảy lợn, góp phần giảm thiệt hại nhiều nguyên nhân gây thiệt hại đáng kể tăng thu nhập chăn nuôi lợn -3Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU -41.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn Tiêu chảy tượng bệnh lý có liên quan đến nhiều yếu tố, có yếu tố nguyên nhân nguyên phát, có yếu tố nguyên nhân thứ phát Vì việc 1.1 MỘT SỐ HIỂU BIẾT CHUNG VỀ HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY 1.1.1 Khái niệm chung hội chứng tiêu chảy Tiêu chảy biểu lâm sàng trình bệnh lý đặc thù ë đường tiêu hoá Biểu lâm sàng tuỳ theo đặc điểm, tính chất diễn biến, mức độ tuổi mắc bệnh, tuỳ theo yếu tố coi ngun nhân mà gọi theo nhiều tên bệnh khác như: Bệnh xảy gia súc non theo mẹ gọi bệnh lợn phân trắng gia súc sau cai sữa chứng khó tiêu, chứng rối loạn tiêu hố… Với cách gọi tiêu chảy triệu chứng phổ biến dạng bệnh đường tiêu hoá, xảy lúc nơi đặc biệt gia súc non với biểu triệu chứng ỉa chảy, nước chất điện giải, suy kiệt dẫn đến truỵ tim mạch (Radostits.O.M cộng 1994) [88] Tiêu chảy gia súc tượng bệnh lý phức tạp gây phân biệt nguyên nhân gây tiêu chảy khó khăn (Phạm Ngọc Thạch, 1996 [51]) Bằng nhiều cơng trình nghiên cứu, nhà khoa học đưa nguyên nhân gây hội chứng tiêu chảy lợn sau: 1.1.2.1 Ảnh hưởng mơi trường, khí hậu Mơi trường ngoại cảnh yếu tố quan trọng ảnh huởng đến sức đề kháng thể gia súc Khi có thay đổi yếu tố nhiệt độ, độ ẩm, mưa, nắng, điều kiện chuồng nuôi ảnh hưởng đến sức khoẻ lợn, đặc biệt lợn theo mẹ, cấu tạo chức sinh lý chưa ổn định hoàn thiện, gặp yếu tố bất lợi dễ bị stress dẫn đến nhiều bệnh có tiêu chảy Trong yếu tố khí hậu nhiệt độ lạnh ẩm độ gia súc bị nhiễm lạnh kéo dài làm giảm phản ứng miễn dịch, giảm tác dụng thực bào, làm cho gia súc dễ bị nhiễm khuẩn gây bệnh (Hồ Văn Nam cs 1997 [27]) tác động tổng hợp nhiều yếu tố Một nguyên nhân quan trọng Khẩu phần ăn cho vật ni khơng thích hợp, trạng thái thức ăn không tác động ngoại cảnh bất lợi, gây stress cho thể, mặt khác tốt, thức ăn chất lượng mốc, thối, nhiễm tạp chất, vi sinh vật khâu chăm sóc ni dưỡng gia súc, chuồng trại khơng vệ sinh có hại dễ dẫn đến rối loạn tiêu hố kèm theo viêm ruột, ỉa chảy gia súc thường xuyên sẽ, thức ăn nước uống bị nhiễm khuẩn… tạo điều (Trịnh Văn Thịnh, 1985[54], Hồ Văn Nam, 1997 [327]) kiện thuận lợi cho vi sinh vật gây bệnh xâm nhập vào vật chủ, đặc biệt Khi gặp điều kiện ngoại cảnh không thuận lợi, thay đổi đột ngột vi sinh vật gây bệnh đường tiêu hoá dẫn tới nhiễm khuẩn dễ xảy thức ăn, vitamin, protein, thời tiết, vận chuyển… làm giảm sức đề kháng loạn khuẩn đường ruột Đây ngun nhân đóng vai trị vật vi khuẩn thường trực tăng độc tố gây bệnh (Bùi Quý quan trọng hội chứng tiêu chảy lợn Bệnh lý xuất thường thể Huy, 2003 [19]) cấp tính mãn tính, tuỳ thuộc vào tính chất nguyên nhân bệnh tác Như nguyên nhân môi trường ngoại cảnh gây bệnh tiêu chảy không động Đặc điểm rối loạn tiêu hoá thường gây tiêu chảy nhiều lần mang tính đặc hiệu mà mang tính tổng hợp Lạnh ẩm gây rối loạn hệ thống ngày, phân có nhiều nước so với bình thường tăng tiết dịch ruột điều hoà trao đổi nhiệt thể, dẫn đến rối loạn trao đổi chất mầm (Blackwell, 1989 [65]) bệnh có thời tăng cường độc lực gây bệnh -51.1.2.2 Nguyên nhân vi sinh vật Vi sinh vật bao gồm loại virus, vi khuẩn nấm mốc Chúng vừa nguyên nhân nguyên phát, vừa nguyên nhân thứ phát gây tiêu chảy * Tiêu chảy vi khuẩn Trong đường tiêu hố gia súc có hệ vi khuẩn gọi hệ vi khuẩn đường ruột chia thành loại: Các vi khuẩn có lợi có tác dụng lên men -6Vũ Bình Minh, Cù Hữu Phú (1999) [39] nghiên cứu E coli Salmonella lợn tiêu chảy cho biết tỷ lệ phát E coli độc phân 80-90% số mẫu xét nghiệm Theo Phan Thanh Phượng cs (1996) [38], vi khuẩn yếm khí C perfringens tác nhân gây bệnh quan trọng hội chứng tiêu chảy lợn lứa tuổi từ 1-120 ngày tuổi Ở lợn theo mẹ, tỷ lệ mắc bệnh vi khuẩn gây đến 100% tỷ lệ chết lªn ®Õn 60% phân giải chất dinh dưỡng, giúp cho q trình tiêu hố thuận lợi Lượng vi khuẩn C perfringens chứa 1g phân lợn lứa tuổi 1-60 ngày vi khuẩn có hại gặp điều kiện thuận lợi gây bệnh tuổi dao động từ 106 ÷ 1010/0,2 ml CFU (Colonial forming unit); số mẫu có Vi khuẩn đường ruột họ vi khuẩn cộng sinh thường trực đường lượng vi khuẩn cao (108, 199, 1010 ) chiếm tỷ lệ 37-45% Ở lợn từ 60-120 ngày ruột Các vi khuẩn này, muốn từ vi khuẩn cộng sinh trở thành vi khuẩn gây tuổi bị tiêu chảy, số lượng vi khuẩn 1g phân mức 10 8, 109 chiếm tỷ lệ bệnh phải có điều kiện (Jones, 1980, dẫn theo Lê Văn Tạo, 1997a [48]): 27,14% - 35,71% - Trên thể vật chủ có cấu trúc giúp cho vi khuẩn thực chức bám dính * Tiêu chảy virus Ngoài nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy cho lợn vi khuẩn cịn có ngun nhân virus Đã có nhiều cơng trình nghiên cứu khẳng định vai trị - Vi khuẩn có khả sản sinh yếu tố gây bệnh, đặc biệt sản sinh số virus như: Rotavirus, Enterovirus, Transmissible Gastroenteritis độc tố, quan trọng độc tố đường ruột Enterotoxin có khả xâm (TGE) nguyên nhân chủ yếu gây viêm dày- ruột gây triệu nhập vào lớp tế bào biểu mơ niêm mạc ruột, từ phát triển nhân lên chứng tiêu chảy đặc trưng lợn Các virus tác động gây viêm ruột gây Một số vi khuẩn đường ruột E coli, Samonella sp., Shigella, C perfringens nguyên nhân gây nên rối loạn tiêu hoá, viêm ruột tiêu chảy người nhiều loài động vật Đào Trọng Đạt cộng (1996) [11] cho biết: Chiếm tỷ lệ cao rối loạn trình tiêu hoá, hấp thu lợn cuối dẫn đến triệu chứng tiêu chảy Theo tài liệu Bergeland (1980) (trích theo Đào Trọng Đạt 1996) [11] số mầm bệnh thường gặp lợn trước sau cai sữa bị mắc tiêu chảy có nhiều loại virus: 20,9% lợn bệnh phân lập Rotavirus; 11,2% có số vi khuẩn đường ruột gây tiêu chảy E coli (45,6%) Cũng theo virus viêm dày- ruột truyền nhiễm; 2% có Enterovirus; 0,7% có Parvovirus tác giả này, vi khuẩn yếm khí C perfringens gây bệnh có điều kiện thuận * Tiêu chảy nấm mốc lợi trở thành vai trị Hồ Văn Nam cộng (1997) [27] Archie,H (2001) [1] nhấn mạnh: Vi khuẩn đường ruột có vai trị thiếu hội chứng tiêu chảy Thức ăn chế biến bảo quản không kỹ thuật dễ bị nấm mốc Một số loài như: Aspergillus, Penicillin, Fusarium có khả sản sinh nhiều độc tố, quan trọng nhóm độc tố Aflatoxin (Aflatoxin B2, G1, G2, M1) -7Độc tố Aflatoxin gây độc cho người gia súc, gây bệnh nguy hiểm cho người ung thư gan, huỷ hoại gan, độc cho thận, sinh dục thần kinh -81.1.3 Bệnh lý lâm sàng hội chứng tiêu chảy 1.1.3.1 Cơ chế sinh bệnh Aflatoxin gây độc cho nhiều loài gia súc, gia cầm, mẫm cảm vịt, gà, lợn Cơ chế sinh bệnh hội chứng tiêu chảy trình rối loạn chức Lợn thường bỏ ăn, thiếu máu, vàng da, ỉa chảy máu Nếu phần có phận máy tiêu hố nhiễm khuẩn Hai q trình diễn đồng 500-700  g Aflatoxin/kg thức ăn làm cho lợn chậm lớn, cịi cọc, giảm thời, q trình trước, trình sau ngược lại song sức đề kháng với bệnh truyền nhiễm khác (Lê Thị Tài,1997) [45] phân biệt rõ trình 1.1.2.3 Tiêu chảy ký sinh trùng Có nhiều loại ký sinh trùng gây bệnh tiêu chảy lợn như: Cầu trùng (Eimeria, Isospora suis), Crytosporidium, Ascaris suum, Trichuris suis số lồi giun trịn khác thuộc lớp Nematoda Bệnh Isopora suis, Crytosporidium thường tập trung vào giai đoạn lợn từ - 25 ngày tuổi, lợn tháng tuổi thể tạo miễn dịch bệnh cầu trùng, nên lợn mang mầm bệnh mà xuất triệu chứng tiêu chảy (Nguyễn Như Pho, 2003[35]) Cầu trùng số loại giun trịn (giun đũa, giun tóc, giun lươn) nguyên nhân gây tiêu chảy lợn sau cai sữa ni hộ gia đình Thái Ngun (Nguyễn Thị Kim Lan cs, 2006a [22]) Đặc điểm chủ yếu tiêu chảy ký sinh trùng vật mắc bệnh bị tiêu chảy không liên tục, có xen kẽ tiêu chảy bình thường, thể thiếu máu, da nhợt nhạt, gia súc ăn, thể trạng sa sút Như thấy, có nhiều nguyên nhân gây tiêu chảy, Theo Phạm Ngọc Thạch (1996) [51], thiếu mật cã tới 60% mỡ khơng tiêu hố gây chứng đầy bụng khó tiêu ỉa chảy, việc giảm hấp thu dẫn đến ỉa chảy Trịnh Văn Thịnh (1985b) [55] cho rằng: Do tác nhân bất lợi đó, trạng thái cân khu hệ vi khuẩn đường ruột bị phá vỡ tất lồi sinh sản q nhiều gây tượng loạn khuẩn, gây biến động nhóm vi khuẩn đường ruột, nhóm vi khuẩn vãng lai, vi khuẩn gây bệnh có hội tăng mạnh số lượng độc lực, vi khuẩn có lợi cho q trình tiêu hố khơng cạnh tranh nên giảm đi, cuối loạn khuẩn xảy ra, hấp thu bị rối loạn gây tiêu chảy 1.1.3.2 Bệnh lý, lâm sàng hội chứng tiêu chảy Bệnh lý, lâm sàng hội chứng tiêu chảy gia súc biến đổi tổ chức, tình trạng nước điện giải, trạng thái trúng độc thể bệnh Khi nghiên cứu tiêu chảy lợn vi khuẩn E coli, Nguyễn Như Pho (2003) [35] cho rằng, ruột xung huyết, khơng thấy xuất huyết, khơng có vết lt hoại tử bệnh phó thương hàn theo số chuyên gia nghiên cứu bệnh tiêu chảy lợn Nguyễn Thị Sự nước kéo theo chất điện giải đặc biệt Nội (1985) [28], Lê Văn Tạo (1993) [46], Hồ văn Nam (1997) [27] cho dù ion: HCO3-, K+, Na+, CL-… đồng thời, gia súc bị rối loạn tiêu hố ngun nhân gây tiêu chảy cho lợn nữa, cuối trình làm cản trở đến khả tái hấp thu nước gia súc ỉa chảy, lượng nhiễm khuẩn, vi khuẩn kế phát viêm ruột, tiêu chảy nặng thêm, dẫn đến dịch di đường ruột vượt lượng dịch đưa vào ăn uống, thận chết viêm ruột tiêu chảy mãn tính cố gắng bù lại cách cô đặc nước tiểu để giảm lượng nước thải Nếu -9thận không bù mức dịch thể tổ chức bị giảm máu bị đặc lại - 10 1.1.4 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy Hiện tượng gọi nước triệu chứng lâm sàng yếu, bỏ ăn, thân Hội chứng tiêu chảy gia súc nhiều ngun nhân gây Chính nhiệt hạ thấp truỵ tim, mắt bị hõm sâu, nhìn lờ đờ, da khô véo da vậy, xuất bệnh phụ thuộc vào xuất nguyên nhân lên nếp da chậm trở lại vị trí cũ (Archie H, 2000 [1]) Lợn bị tiêu chảy gầy tương tác nguyên nhân với thể gia súc Các yếu tố tuổi gia súc, sút nhanh, da nhăn, tính đàn hồi kém; tiêu chảy lâu ngày lợn gày nhô mùa vụ, thức ăn, chuồng trại, điều kiện chăm sóc, ni dưỡng có ảnh xương sống, da thô, lông dựng ngược Mặt khác thể nước chất hưởng đến hội chứng tiêu chảy gia súc điện giải kéo theo biến đổi hàng loạt bệnh lý khác Ở lợn, hội chứng tiêu chảy xảy lứa tuổi Archie.H Hiện tượng trúng độc xảy thức ăn lên men phân giải sinh độc tố, (2000) [1], Frairbrother J.M (1992) [74] cho bệnh tiêu chảy xảy ra, hệ vi khuẩn đường ruột sinh sôi, sản sinh nhiều độc tố Các độc tố thường gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi Bệnh thường xuất giai với sản phẩm viêm, tổ chức phân huỷ ngấm vào máu tác động vào gan làm chức gan rối loạn, gia súc bị trúng độc, đồng thời tác động cản trở q trình tiêu hố tiếp tục, q trình gây tiêu chảy nặng hơn, tăng nguy nhiễm độc máu gây tử vong 1.1.3.3 Hậu cña hội chứng tiêu chảy Hậu trực tiếp nặng nề tượng tiêu chảy nước chất điện giải thể, kéo theo hàng loạt biến đổi bệnh lý (Lê Minh Chí, 1995 [4]) Hiện tượng nước nghiêm trọng gây chết khơng điều chỉnh Gia súc non dự trữ dịch thể tương đối thấp nên đặc biệt mẫn cảm với nước Vì vậy, điều trị tiêu chảy luôn phải đặt vấn đề điều trị nước lên hàng đầu (Archie.H, 2000 [1]) Lợn bị tiêu chảy giảm khả tiêu hoá, chuyển hoá hấp thụ chất dinh dưỡng nên lợn gày còm, chậm tăng trọng, dễ dàng mắc bệnh khác (Phạm Sỹ Lăng cs, 1997 [24]) đoạn phát triển lợn: - Giai đoạn sơ sinh (1-4 ngày tuổi) - Giai đoạn lợn theo mẹ (5-21 ngày tuổi) - Giai đoan lợn sau cai sữa (>21 ngày tuổi) Tỷ lệ mắc bệnh tiêu chảy số sở chăn nuôi lợn phụ thuộc vào điều kiện chăm sóc, vệ sinh thú y, cịn tỷ lệ chết, mức độ trầm trọng bệnh đàn phụ thuộc vào giai đoạn mắc bệnh (Đoàn Kim Dung, 2003[9], Hoàng Văn Tuấn, 1998[59]) Khi nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn từ sau cai sữa hộ chăn nuôi gia đình Thái Nguyên, Nguyễn Thị Kim Lan cs (2006b) [23] cho rằng, bệnh chịu ảnh hưởng rõ rệt lứa tuổi mắc bệnh, mùa vụ năm, loại thức ăn, chuồng tình trạng vệ sinh thú y Ở lợn, tượng tiêu chảy thường có q trình nhiễm khuẩn Khi tiêu Về độ tuổi mắc bệnh, tỷ lệ lợn tiêu chảy giảm theo tuổi, cao giai chảy nhiễm khuẩn, triệu chứng trầm trọng hậu để lại nặng đoạn sau cai sữa đến tháng (13,9%), sau giảm dần cịn 5,55% nề hơn, kế phát nhiều bệnh khác, gây thiệt hại cho ngành chăn nuôi lợn tháng tuổi (Nguyễn Thị Kim Lan cs, 2006b [23] Như vậy, với nguyên nhân gây bệnh khác để lại hậu khác Về mùa vụ, bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ xảy quanh năm, cao tháng 5-8 (Hoàng Văn Tuấn cs, 1998 [59] ) Trong năm, lợn - 75 Kết xác định khả bám dính vi khuẩn E coli thấp nhiều so với kết nghiên cứu Do cs (2006) [71] Khi tiến hành nghiên cứu với 85 chủng vi khuẩn E coli thu thập từ số tỉnh miền Bắc kết luận: có 94,1% số chủng mang kháng nguyên bám dính (F4 F18) 5,9% số chủng khơng mang kháng ngun bám dính Hiện tượng xảy Hưng n giải thích lấy mẫu địa phương khác nhau, thời gian địa điểm lấy mẫu khác việc sử dụng 76 vaccin địa phương khác dẫn tới tỷ lệ chủng mang loại Bảng 3.12: Kết xác định độc lực chuột bạch số chủng E coli C perfringens kháng nguyên bám dính khác phân lập đƣợc từ lợn bệnh 3.2.7 Kết kiểm tra độc lực số chủng vi khuẩn E coli C perfringens phân lập đƣợc động vật thí nghiệm Số chuột Liều tiêm Số chuột chết theo thời gian (con) tiêm đƣờng < 12 khuẩn (con) tiêm giê E-HY5 2 E-HY7 E-HY12 Từ kết nghiên cứu ni cấy, giám định đặc tính sinh vật học khuẩn > 12 - 24 > 24 - 36 > 36 - 48 giê giê giê 0.2 ml canh trùng > 48 giê Tỷ lệ chuột chết (%) 100 50 100 C perfringens phân lập từ lợn mắc bệnh phân trắng lứa tuổi 1- 60 ngày tuổi Hưng Yên, chọn chủng E coli đại diện cho E-HY19 serotyp yếu tố gây bệnh chủng C perfringens để tiến hành kiểm E-HY23 11 C-HY5 0.2ml dịch 12 C-HY7 ly tâm từ C-HY9 canh trùng 100 C-HY11 vào tĩnh 100 C-HY15 mạch đuôi 100 tra độc lực chuột bạch Kết trình bày bảng 3.12 13 14 15 E coli C perfringens Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vào phúc xoang 100 100 2 100 100 http://www.lrc-tnu.edu.vn - 76- chủng vi TT hoá học, xác định số yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli Loại vi Ký hiệu - 77 - - 78 - Kết bảng 3.12 cho thấy: Kết xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli C perfringens + Đối với vi khuẩn E coli: Trong số chủng vi khuẩn E coli chuột bạch cho thấy: chủng vi khuẩn phân lập từ lợn mắc kiểm tra, có chủng giết chết 100% số chuột tiêm thời gian từ 12 tiêu chảy Hưng Yên có độc lực mạnh nguyên nhân quan - 48 giờ, có chủng E-HY7 gây chết 50% số chuột tiêm thời trọng hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh gian 12 - 24 giờ, chứng tỏ chủng vi khuẩn E coli kiểm tra có độc Hưng Yên lực cao 3.2.8 Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng + Đối với vi khuẩn C perfringens: Cả chủng vi khuẩn C perfingens vi khuẩn phân lập đƣợc gây chết 100% số chuột tiêm Riêng chủng C-HY7 có thời gian gây Trong năm gần đây, tượng kháng kháng sinh chủng chuột chết sớm 12 sau tiêm, chủng C-HY5 có thời gian vi khuẩn đường ruột ngày tăng Đây lý giải thích cho gây chết chuột muộn từ 36 - 48 việc kết điều trị kháng sinh tiêu chảy thời gian Các chuột chết có bụng chướng to Khi mổ khám có bệnh tích phổi viêm, xuất huyết bề mặt gan, lách sưng to, ruột xuất huyết, tim nhão Lấy máu tim, ria cấy đĩa thạch máu, thạch Macconkey mơi trường yếm khí phân lập lại vi khuẩn khiết từ máu tim Tác giả Trương Quang (2005) [42] tiến hành kiểm tra độc lực 30 chủng E coli phân lập từ phân lợn từ đến 60 ngày tuổi bị tiêu chảy cho kết quả: 27 chủng E coli (chiếm 90%) giết chết 100% số chuột thí nghiệm chủng giết chết 50% số chuột thí nghiệm sau thời gian từ 24-72 gần mang lại hiệu khơng cao Vì vậy, để lựa chọn loại kháng sinh phù hợp giúp cho việc điều trị bệnh tiêu chảy E coli C perfringens gây cho lợn địa bàn tỉnh Hưng Yên có kết tốt, tiến hành kiểm tra khả mẫn cảm với kháng sinh 30 chủng vi khuẩn E coli 15 chủng vi khuẩn C perfringens với 13 loại kháng sinh khác Kết trình bày bảng 3.13 Kết nghiên cứu chúng tơi phù hợp với tác giả Hồ Sối Đinh Thị Bích Lân (2005) [44] thơng báo kết tương tự kiểm tra độc lực với chủng E coli phân lập từ phân lợn bị tiêu chảy, có chủng giết chết 100% chủng giết chết 50% số chuột tiêm Các tác giả khác như: Nguyễn Thị Kim Lan (2004) [21], Bùi Trung Trực cộng (2004) [62] có kết thử độc lực vi khuẩn E coli gây chết 100% chuột thí nghiệm Với nghiên cứu Trần Thị Hạnh cs (2000)[16] cho thấy chủng vi khuẩn C perfingens phân lập lợn tiêu chảy có độc lực mạnh, hầu hết chủng vi khuẩn gây chết chuột vòng 24 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - 80 - Bảng 3.13 cho thấy: Trong số 13 loại kháng sinh thử - Các chủng E coli phân lập đặc biệt mẫn cảm với Amikacin Ceftiofur, đạt tỷ lệ 100% Một số kháng sinh khác như: Enrofloxacin ,Gentamicin, Ampicillin, Cephalothin Apramycin, có tỷ lệ mẫn cảm cao, 70%, 73,3%, 83,3%, 93,3% 66,7% Tuy nhiên, chủng thử kháng 79 mạnh với Tetracyclin (100%) số loại kháng sinh thông dụng khác như: Bảng 3.13: Kết xác định khả mẫn cảm kháng sinh với số chủng vi khuẩn E coli C perfringens Streptomycin, Neomycin, Sulfamethaxazol/ Trimethoprim, Spectinomycin với phân lập đƣợc từ lợn bệnh tỷ lệ tương ứng 70,0% 76,7%, 93,3%, 96,7% Một số kháng sinh đưa TT Loại kháng sinh 13 Lincomycin (15 g) C perfringens (n=15) Mẫn cảm Kháng Tỷ lệ Số chủng Tỷ lệ (%) Số chủng Tỷ lệ (%) Số chủng Tỷ lệ (%) Số chủng (%) 0 30 100 46,7 53,3 6,7 28 93,3 13,3 13 86,7 25 22 25 28 30 20 30 70,0 73,3 83,3 93,3 100 66,7 100 23,3 3,3 30,0 10 23 29 21 30,3 26,7 16,7 6,7 33,3 76,7 96,7 70,0 20 66,7 10 33,3 10 2 0 11 13,3 66,7 33,3 53,3 13,3 13,3 0 73,3 13 10 13 15 13 15 15 15 86,7 46,6 66,6 46,7 86,7 100 86,7 100 100 100 26,7 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên vào sử dụng như: Enrofloxacin có kết kháng thuốc chiếm tỷ lệ đáng kể 66,7% - Các chủng C perfringens kiểm tra có tỷ lệ kháng cao với hầu hết - 79 - 10 11 12 Tetracyclin (30 g) Sulfamethoxazole/ Trimethoprim (25 g) Enrofloxacin (5 g) Gentamicin (10 g) Ampicillin (10 g) Cephalothin (30 g) Amikacin (30 g) Apramycin (15 g) Ceftiofur (30 g) Neomycin (30 g) Spectinomycin (109 g) Streptomycin (10 g) E coli (n=30) Mẫn cảm Kháng loại kháng sinh kiểm tra, trừ loại Cephalothin Lincomycin có tỷ lệ mẫn cảm >50% (53,3-73,3%) So sánh kết đạt với số tác giả nước nghiên cứu khả kháng kháng sinh mẫn cảm vi khuẩn E coli thấy khơng có sai khác nhiều Đỗ Ngọc Thuý cộng (2002) [57] kiểm tra tính mẫn cảm với kháng sinh 106 chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn theo mẹ bị tiêu chảy giai đoạn từ sơ sinh đến 21 ngày tuổi trại chăn nuôi lợn cho kết http://www.lrc-tnu.edu.vn loại kháng sinh mẫn cảm mạnh với vi khuẩn E coli Apramycin, Ceftiofur Akamicin với tỷ lệ 99,06%, 100% 92,45% Tác giả Đoàn Thị Kim Dung (2003) [9] thử kháng sinh đồ vi khuẩn E coli phân lập cho biết: Vi khuẩn E coli có tính kháng cao với loại kháng sinh dùng rộng rãi Tetracycline (64,0%), Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - 81 - - 82 - Streptomycin (70,7%), Chloramphenicol (75,5%), mẫn cảm mạnh với phác đồ điều trị, thay đổi loại kháng sinh, loại thuốc tăng cường sức kháng sinh Ceftiofur (98,0%), Apramycin (93,0%) đề kháng, thuốc bổ trợ, chất điện giải dùng giống Thử kháng sinh đồ với loại kháng sinh: Akamicin, Doxycyclin, Ampicilin Để đáp ứng yêu cầu thực tế sản xuất phải chọn loại kháng sinh có tác Cefuroxim, Nguyễn Thị Kim Lan (2004) [21] cho biết vi khuẩn E coli gây dụng tốt vi khuẩn không kháng thuốc, chọn thử nghiệm loại dung huyết lợn - tuần tuổi phân lập Bắc Giang Thái Nguyên kháng sinh dùng cho phác đồ điều trị bệnh là: mẫn cảm với kháng sinh Amikacin, yếu với Doxycyclin, không mẫn cảm Phác đồ 1: Gentamicin chế phẩm (Citius 5%) Cephalothin; với loại lại Phác đồ 2: Baytril (Enrofloxacine) (Bio- linco-S) Lincomycin loại Nghiên cứu tính kháng kháng sinh vi khuẩn E coli Salmonella, thuốc tăng cường sức đề kháng, thuốc bổ, chất điện giải với liều lượng cách tác giả cho rằng: quen thuốc số lồi vi khuẩn, có vi dùng giống phác đồ là: Bột điện giải, ADE B-Complex, Glucose 30% khuẩn E coli có chiều hướng tăng theo thời gian sử dụng Nguyên nhân kết hợp vitamin C Kết điều trị trình bày bảng 3.14 tượng kháng thuốc sử dụng khơng kỹ thuật người gen sản sinh yếu tố kháng kháng sinh nằm plasmid R (Resistance) Plasmid di truyền dọc di truyền ngang cho tất quần thể vi khuẩn thích hợp (Falkow, 1975) [73] Vì vậy, số loại kháng sinh có tác dụng mạnh Ceftiofur, Amikacin Apramycin kháng sinh xuất thị trường Việt Nam, nên mẫn cảm cao với chủng vi khuẩn thử; tuỳ theo địa phương khác Vì vậy, cần phải có chiến lược sử dụng thuốc kháng sinh chăn nuôi thú y hợp lý để ngăn chặn kịp thời tượng ảnh hưởng trực tiếp tới người môi sinh 3.3 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM PHÁC ĐỒ ĐIỀU TRỊ TIÊU CHẢY CHO LỢN Trên sở nghiên cứu, xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn kết thử kháng sinh đồ xác định tính mẫn cảm kháng sinh với chủng vi khuẩn E coli phân lập được, xây dựng phác đồ điều trị Trong Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - 84 Bảng 3.14 cho thấy: - Phác đồ I có tỷ lệ điều trị khỏi bệnh (83,1%) cao hẳn phác đồ II (69,1%) Như vậy, để điều trị bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi , dùng phác đồ I, tức dùng kháng sinh: Gentamicin Cephalothin để điều trị tiêu chảy vi khuẩn E coli C perfringens gây Đồng thời, kết hợp với sử dụng loại thuốc như: bột điện giải cho uống để bù nước 81 lượng ion Cl-, Na+, HCO3- bị tiêu chảy; ADE B-Complex thuốc Bảng 3.14: Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi Phác đồ điều trị I Loại thuốc Gentamicin 80mg 4-6 mg/kg TT; tiêm bắp, lần/ngày Citius 5% 1- 3ml/50kgP; tiêm bắp, lần/ ngày Điện giải Pha nước uống, 10 g/con/ngày ADE B-complex 1-2 ml/con; tiêm bắp, ngày/ lần Glucose 30% kết hợp 1ml/ 6-8 kgTT; phúc xoang uống, vitamin C lần/ngày Enrofloxacin 10 - 15 mg/kgTT, tiêm bắp, lần/ ngày Bio - Lincomycin - S 1ml/10kgP; tiêm bắp, 1lần/ ngày Điện giải Pha nước uống, 10 g/con/ngày ADE B-complex 1-2 ml/con; tiêm bắp, ngày/ lần Glucose 30% kết hợp 1ml/ 6-8 kgTT; tiêm phúc xoang uống, vitamin C lần/ngày Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Số lợn đƣợc điều trị (con) Kết điều trị Thời Số lợn gian khỏi điều trị bệnh (ngày) (con) tổng hợp loại vitamin: A, D, E vitamin nhóm B để tăng cường sức đề Tỷ lệ khỏi (%) kháng thể tăng q trình tiêu hố thức ăn Glucose (30%) ưu trương làm tăng cường hoạt động lưới nội mơ, kích thích đơng máu, điều hồ nước thể, tăng cường chức gan, kích thích q trình trao đổi 53 chất, hấp thụ vitamin, chất khoáng (Nguyễn Hữu Vũ cs, 2000 44 83,1 42 29 - 83 - II Liều dùng cách dùng [62]), chống nhiễm độc, tự nhiễm độc (Nguyễn Phước Tương, 1994 [56]) 69,1 http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - 85 - - 86 Vi khuẩn C perfringens với số lần tăng theo tuổi là: 45,6; 42,4; 39,5 lần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 1.5 Các chủng vi khuẩn E coli C perfringens phân lập KẾT LUẬN Dựa kết thảo luận trên, rút số kết luận sau: 1.1 Bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Hưng n mang đầy đủ đặc tính sinh hóa điển tài liệu ngồi nước mô tả 1.6 Các chủng E coli gây bệnh tiêu chảy cho lợn từ sơ sinh đến 60 có số đặc điểm dịch tễ đặc trưng là: - Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy 30,30% tỷ lệ chết tiêu chảy 5,07% ngày tuổi tỉnh Hưng Yên thuộc serotyp là: O8, O101, O138, O139, - Tỷ lệ lợn mắc bệnh chết tiêu chảy có sai khác mùa O141, O149 O149 chiếm tỷ lệ cao (40,0%) thấp năm O138 (10,0%) - Phương thức chăn nuôi khác ảnh hưởng đến tỷ lệ lợn mắc chết tiêu chảy Chăn ni theo phương thức cơng nghiệp có tỷ lệ lợn mắc bệnh chết tiêu chảy thấp - Trong số 30 chủng vi khuẩn E coli kiểm tra yếu tố gây bệnh: có 40,0% chủng mang F4; 30,0% chủng mang F18; loại độc tố phân bố với tỷ lệ sau: độc tố STb chiếm tỷ lệ cao (50,0%), tiếp - Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy giảm dần theo tuổi, cao lợn từ sơ sinh đến ngày tuổi 1.2 Kết phân lập vi khuẩn E coli C perfringens từ phân lợn khoẻ lợn tiêu chảy cho thấy: vi khuẩn E coli phân lập từ 100% theo độc tố VT2e (40,0%) STa (36,7%), thấp LT (23,3%) 1.7 Độc lực chủng vi khuẩn E coli C perfringens chuột bạch mạnh Có 4/5 chủng vi khuẩn E coli gây chết 100% chuột lợn tiêu chảy 96,9% lợn bình thường, tỷ lệ phân lập vi khuẩn vòng 24-36 Có 5/5 chủng vi khuẩn C perfringens gây chết 100% C perfringens phân lợn tiêu chảy 76,4%, phân lợn bình chuột vịng 12-48 1.8 Các chủng vi khuẩn E coli phân lập được, nhìn chung mẫn thường 12,5% 1.3 Kết phân lập vi khuẩn E coli C perfringens từ mẫu bệnh phẩm gan, lách, ruột cho thấy: vi khuẩn E coli có 100% mẫu bệnh phẩm, vi khuẩn C perfringens phân lập từ ruột chiếm tỷ lệ 75%, lách 33,3%, gan 25,0% cảm với số loại kháng sinh Ceftiofur, Amikacin, Apramycin, Gentamycin Enrofloxacin kháng mạnh với Tetracyclin Sulfamethoxazole/Trimethoprim Cịn chủng vi khuẩn C perfringens mẫn cảm chủ yếu với loại kháng sinh Cephalothin Lincomycin 1.4 Mức độ biến động số lượng vi khuẩn có phân lợn tiêu chảy so với lợn bình thường lứa tuổi lợn khác lợn (1 - 21, 22 45, 46 - 60) là: 1.9 Trong phác đồ điều trị thử nghiệm, phác đồ I sử dụng kháng sinh Gentamicin Cephalothin, kết hợp với chất điện giải số vitamin có Vi khuẩn E coli với số lần tăng theo tuổi là: 24,1; 18,2; 23,5 lần Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - 87 - - 88 - hiệu điều trị bệnh tiêu chảy cao hẳn Có thể sử dụng rộng rãi phác đồ I điều trị tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Hưng Yên ĐỀ NGHỊ 2.1 Do thời gian kinh phí thực đề tài có hạn, nên chưa tiến hành nghiên cứu đầy đủ yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn C perfringens phân lập được, vai trò số vi khuẩn khác gây bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Hưng Yên Đề nghị tiếp tục nghiên cứu vấn đề nhằm lựa chọn chủng vi khuẩn phù hợp để chế vacxin phòng bệnh 2.2 Để chăn ni lợn có hiệu hạn chế dịch bệnh, có bệnh tiêu chảy cần khuyến khích đầu tư vào chăn ni theo phương thức công nghiệp, xây dựng trại chăn nuôi đảm bảo yêu cầu kỹ thuật vệ sinh an tồn dịch bệnh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 89 90 10 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng (1985), Bệnh đường tiêu hoá TÀI LIỆU THAM KHẢO lợn, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội I TiÕng viƯt Archie, H (2000), Sổ tay dịch bệnh động vật ,(Phạm Gia Ninh Nguyễn Đức Tâm dịch), NXB Bản đồ, Hà Nội, Tr 53, 207 -214 Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, NXB Nông nghiệp, Hà Đặng Xn Bình (2004), Vai trị vi khuẩn E coli C perfringens Nội, tr 57 - 147 bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ, biện pháp phòng trị, Luận 12 Đào Trọng Đạt, Trần Thị Hạnh, Đặng Phương Kiệt (1998), “Phân lập án tiến sĩ nông nghiệp, Viện Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp Việt vi khuẩn C perfringens số hộ gia đình tỉnh Vĩnh Phú”, Tạp Nam, Hà Nội chí thơng tin Y dược số 10 Bộ Y tế, tr 20 - 30 Chi cục thú y tỉnh Hưng Yên (2007), Các báo cáo dịch bệnh năm lợn Hải Phịng biện pháp phịng chống”, Tạp chí Khoa học Lê Minh Chí (1995), Bệnh tiêu chảy gia súc, Hội thảo khoa học, Bộ kỹ thuật thú y, tập IX, tr 98 - 99 (1999 - 2000), Xác định vai trò E coli C perfringens bệnh ỉa gia cầm tính đến 1/8/2006 Hưng Yên chảy lợn bước đầu nghiên cứu chế tạo số sinh phẩm phòng Đỗ Trung Cứ, Trần Thị Hạnh, Nguyễn Quang Tuyên (2000), ”Sử dụng bệnh, Báo cáo khoa học Chăn nuôi thú y 1999 - 2000- Phần thú y, tr chế phẩm sinh học Biosubtyl để phòng trị bệnh tiêu chảy lợn 83 - 93 Cù Xuân Dần, Nguyễn Xuân Tịnh, Tiết Hồng Ngân, Nguyễn Bá Mùi, Lê Mộng Loan (1996), Sinh Lý học gia súc, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 122- 141 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Văn Đức, Đặng Hồng Mai, Nguyễn Vĩnh Phước (1976), Một số phương pháp nghiên cứu Vi sinh vật, tập 2, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội 14 Trần Thị Hạnh, Kiều Thị Dung, Lưu Quỳnh Hương, Đặng Xuân Bình Cục thống kê Hưng Yên (2007), Báo cáo thống kê tổng đàn gia súc, trước sau cai sữa”, Tạp chí KHKT Thú y ,số Tr 58 13 Bùi Xuân Đồng (2002)” Bệnh phù đầu Escherichia coli gây năm ( 2005 - 2007) Hưng Yên Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm, Hà Nội, tr 20 - 22 11 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Đoàn Kim Dung (2003), Sự biến động số vi khuẩn hiếu khí đường ruột, vai trị E coli hội chứng tiêu chảy lợn phác đồ điều trị, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện 15 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình (2002), “Chế tạo, thử nghiệm số chế phẩm sinh học phòng trị bệnh tiêu chảy phân trắng lợn E coli C perfringens”, Tạp chí Khoa học Ký thuật Thú Y, số 1, tr 19 – 28 16 Phạm Khắc Hiếu (1998), ứng dụng chế phẩm sinh vật hữu hiệu EMI phòng trị hội chứng tiêu chảy lợn con, Báo cáo khoa học hội nghị tổng kết năm 1998 chương trình nghiên cứu đề tài khoa học cấp nhà nước EM, Hà Nội 17 Phạm Khắc Hiếu Bùi Thị Tho (1999), Một số kết nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y, Kết nghiên cứu KHKT Thú Y quốc gia, Hà Nội khoa CNTY (1996-1998), NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 134 - 138 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 91 92 18 Nguyễn Bá Hiên (2001), Một số vi khuẩn thường gặp biến động số 26 Hồ Văn Nam, Trương Quang, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Chu Đức Thắng, lượng chúng gia súc khoẻ mạnh bị tiêu chảy nuôi vùng Phạm Ngọc Thạch, Phùng Quốc chướng (1996), Báo cáo viêm ruột lợn con, ngoại thành Hà Nội, Điều trị thử nghiệm, Luận án tiến sỹ nông nghiệp, Đề tài cấp 27 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trương Quang, Phùng Quốc Hà Nội 19 Bùi Q Huy (2003), Sổ tay phịng chống bệnh từ động vật lây sang người - Bệnh E coli, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 30 – 34 20 Vũ Khắc Hùng, M pilippcinec (2004), Nghiên cứu so sánh yếu tố độc lực chủng E coli phân lập từ lợn bị tiêu chảy cộng hoà Slovakia, Báo cáo khoa học chăn nuôi Thú y, Hà Nội, tr 45 – 46 21 Nguyễn Thị Kim Lan (2004), “Thử nghiệm phòng trị bệnh coli Chướng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997), “Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, (số 1), tr 15 -21 28 Nguyễn Thị Nội (1985), Tìm hiểu vai trị E coli bệnh phân trắng lợn vaccin dự phòng, Luận án PTS khoa học 29 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thị Thu Hà (1989), Nghiên cứu vaccine đa giá Salco phòng bệnh ỉa dung huyết cho lợn Thái Nguyên Bắc Giang“, Tạp chí Khoa chảy cho lợn con, Kết qủa nghiên cứu KHKT Thú y NXB Nông nghiệp, học kỹ thuật Thú y tập XII (số 3), tr 35 - 39 Hà Nội, tr 54 - 58 22 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006a),” Vai trò ký sinh trùng đường tiêu hoá hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Thái Nguyên, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y tập XIII con, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 35-51 31 Sử An Ninh (1995), tiêu sinh lý, sinh hố máu, nước tiểu hình thái đại thể số tuyến nội tiết lợn mắc bệnh phân trắng, Luận án tiến (số 3), tr 36 - 40 23 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006b), “Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn Thái Nguyên” , Tạp sỹ nông nghiệp, trường ĐHNNI - Hà Nội 32 Nguyễn Khả Ngự (2000), Xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli bệnh phù đầu lợn đồng sông Cửu long, chế chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XIII 24 Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, Trương Văn Dung (1997), Bệnh phổ biến lợn biện pháp phòng trị, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội, vaccin phịng bệnh, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện thú y, Hà Nội 33 Nguyễn Thị Ngữ (2005), Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn huyện Chương Mỹ - Hà Tây, xác định số yếu tố gây bệnh tr 193 -195 25 Vũ Bình Minh, Cù Hữu Phú (1999), “Kết phân lập vi khuẩn E coli Salmonella lợn mắc tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hố học chủng phân lập”, Tạp chí khoa học kỹ thuật Thú y, số vi khuẩn E coli Salmonella, biện pháp phòng trị, Luận văn Thạc sỹ Nông nghiệp, Hà Nội 34 Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Khương Bích Ngọc, Phạm Bảo Ngọc, Đỗ Ngọc Thuý, Đào Thị Hảo (2000), Kết phân lập xác định 1, tr.15 - 22 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 30 Niconxki.V.V (1986) (Phạm Qn, Nguyễn Đình Trí dịch), Bệnh lợn http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 93 94 số đặc tính sinh hố vi khuẩn gây bệnh viêm vú bị sữa biện theo mẹ, Viện Thú Y 35 năm xây dựng phát triển, NXB Nơng pháp phịng trị, Kết nghiên cứu KHKT Thú y , Hà Nội, tr 161 - 170 nghiệp, Hà Nội, tr 110 - 111 35 Nguyễn Như Pho (2003), Bệnh tiêu chảy heo, NXB Nông nghiệp, 42 Trương Quang (2005), “Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E.coli hội chứng tiêu chảy lợn - 60 ngày tuổi”, Tạp chí Khoa TP.Hồ Chí Minh 36 Nguyễn Vĩnh Phước (1974), Vi sinh vật Thú y, tập 2, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội học kỹ thuật Thú Y, tập XII, (số 1), tr 27 -32 43 Trương Quang, Phạm Hồng Ngân, Trương Hà Thái (2006), “Kết 37 Nguyễn Vĩnh Phước (1978), Bệnh truyền nhiễm gia súc, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội nghiên cứu vai trị gây bệnh E coli bệnh tiêu chảy bê, nghé”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, Tr26 – 34 38 Phan Thanh Phượng, Trần Thị Hạnh, Phạm Thị Ngọc, Ngơ Hồng 44 Hồ Sối, Đinh Thị Bích Lân (2005), Xác định nguyên nhân chủ yếu gây Hưng (1996), “Nghiên cứu xác định vai trò vi khuẩn yếm khí bệnh tiêu chảy lợn xí nghiệp lợn giống Triệu Hải - Quảng Trị Clostridium perfringens hội chứng tiêu chảy lợn”, Tạp chí thử nghiệm phác đồ điều trị” Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, tr 26 - Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm (số 12), Hà Nội, tr 49 5- 496 34 39 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh, Đỗ Ngọc Thuý (1999), “Kết phân lập vi khuẩn E coli Salmonella lợn mắc tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hoá học chủng vi khuẩn phân lập biện pháp phịng trị” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tr 47 -51 40 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hường, Đào Thị Hảo, Vũ Ngọc Q , kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn theo mẹ số trại lợn miền bắc Việt Nam, xác định tỷ lệ kháng kháng sinh yếu tố gây bệnh chủng E coli phân lập được, Báo cáo khoa học CNTY (2002 - 2003) 41 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Âu Xuân Tuấn, Nguyễn Xuân Huyên, Văn Thị Hường, Đào Thị Hảo (2004), Lựa chọn chủng E.coli để chế tạo Autovacxin phòng bệnh tiêu chảy cho lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 45 Lê Thị Tài (1997),Ô nhiễm thực phẩm với sức khoẻ người gia súc, Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, Viện thú y quốc gia, tr 65-66 46 Lê Văn Tạo, Khương Bích Ngọc, Nguyễn Thị Vui, Đoàn Băng Tâm (1993), “Nghiên cứu chế tạo vacxin E.coli uống phịng bệnh phân trắng lợn con“, Tạp chí Khoa học công nghệ quản lý kinh tế, tr 324 - 326 47 Lê Văn Tạo, Khương Bích Ngọc, Nguyễn Thị Vui, Đoàn Thị Băng Tâm (1996), Xác định yếu tố gây bệnh di truyền Plasmid vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bị bệnh phân trắng chọn chủng sản xuất vaccine, Báo cáo Hội thảo REI, Hà Nội 48 Lê Văn Tạo (1997a), Bệnh Escherichia coli gây Những thành tựu nghiên cứu phịng chống bệnh vật ni, tài liệu giảng dạy sau đại học cho bác sĩ thú y kỹ sư chăn nuôi, Viện thú y quốc gia, Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 95 96 Hà nội, tr 207- 210 Nam“, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Tập IX, (số 2), tr 21 - 27 49 Lê Văn Tạo (1997b), Bệnh vi khuẩn Salmonella gây lợn 58 Nguyễn Văn Thiện, Nguyễn Khánh Quắc, Nguyễn Duy Hoan (2002), Những thành tựu nghiên cứu phịng chống bệnh vật ni, tài Giáo trình phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, NXB Nông liệu giảng dạy sau đại học cho bác sĩ thú y kỹ sư chăn nuôi, Viện nghiệp , Hà Nội 59 Hoàng Văn Tuấn, Lê Văn Tạo, Trần Thị Hạnh (1998), “ Kết điều Thú y Quốc gia, Hà nội, tr 213 - 217 50 Lê Văn Tạo, Nguyễn Ngũ, Nguyễn Thiên Thu, Đặng Văn Tuấn (2003), “ Độc lực số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli phân lập từ bê tiêu chảy tỉnh Nam trung bộ”, Tạp chí Khoa học kỹ tra tình hình tiêu chảy lợn trại giống hướng nạc“, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú Y , Tập V, (số4) 60 Bùi Trung Trực, Nguyễn Việt Nga, Thái Quốc Hiếu, Lê Thanh Hiếu, Nguyễn Ngọc Tuân, Trần Thị Dân (2004), “ Phân lập định typ thuật Thú Y, tập X, (số 3) 51 Phạm Ngọc Thạch (1996), Một số tiêu phi lâm sàng trâu viêm ruột ỉa chảy biện pháp phòng trị Luận án tiến sĩ Nông Nghiệp, tr 20 – 32 52 Phạm Ngọc Thạch (2005), Hội chứng tiêu chảy gia súc, Trường Đại học Nông nghiệp I Hà Nội - Khoa Chăn nuôi thú y , Hà Nội, Tr -3 53 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 81 -84 54 Trịnh Văn Thịnh (1985a), Bệnh nội khoa ký sinh trùng thú y, NXB kháng nguyên vi khuẩn E Coli phân heo nái, heo tỉnh Tiền Giang“, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, (số 1), tr 12 - 19 61 Tạ Thị Vịnh, Đặng Thị Hoè (2002), Một số kết sử dụng chế phẩm sinh học để phòng trị bệnh tiêu chảy lợn con“, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, tập IX, (số 4), tr 54-56 62 Nguyễn Hữu Vũ, Nguyễn Đức Lưu (2000), Thuốc thú y cách sử dụng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 326 – 328 Tiếng anh Nông nghiệp, Hà Nội, tr 78 - 82 55 Trịnh Văn Thịnh (1985b), Bệnh lợn Việt Nam, NXB Khoa học 63 Becht J.L (1986), Fluid therapy in large animal patients, proceeding of applications of intestive care therapies and parenteral nutrition in large kỹ thuật, Hà Nội, tr 90-95 56 Nguyễn Phước Tương (1994), Thuốc biệt dược thú y, NXB Nông animal medicine, p 26-30 64 Bergeland M.E (1986), clostridium Infection Disease of Swine, Sixth nghiệp, Hà Nội, tr 363 – 364 57 Đỗ Ngọc Thuý, Darren Trot, Alan Frost, Kirsty Townsend, Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hường Vũ Ngọc Quý (2002), ”Tính kháng kháng sinh chủng Escherichia coli phân lập từ lợn tiêu chảy số tỉnh miền Bắc Việt Edition IOWA- USA p 549 – 557 65 Blackwell T.E (1989), Enteritidis and diarrhoea, veterynary dima North America large animals pract, p, 547 - 575 66 Bertchinger H.U, Faibrother J.M, Nielsen N.O, Pohlenz J.F, Escherichia coli infection Diseases of swine, IOWA State University Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 97 98 press / AMES, IOWA U.S.A 7th Edition 1992, p 487 - 488 Infection and Immunity 23, 700 - 705 67 Casey, T A., Nagy, B & Moon, H W (1992), Pathogenicity of porcine 76 Guinee, P A M & Jansen, W H (1979), Bihaviour of Escherichia enterotoxigenic Escherichia coli that not express K88, K99, F41, or coli K antigen K88ab, K88ac, and K88ad in immunoelectrophoresis, 987P adhesins, American Journal of Veterinary Research 53, 1488-1492 double diffusion, and haemagglutination, Infection and Immunity 23, 68 Carter G.R, Chengapa, M.M, Rober T.S.A.W (1995), Essentials of veterinary Microbiology, A warerly Company, 1995, p.45-49 69 Dean E A, Whipp S C & Moon H W (1989), Age-specific colonization of porcine intestinal epithelium by 987P-piliated enterotoxigenic Escherichia coli, Infection and Immunity 57, 82-87 70 Dean-Nystrom E A & Samuel, J E (1994), Age-related resistance to 987P fimbria-mediated colonization correlates with specific glycolipid receptors in intestinal mucus in swine, Infection and Immunity 62, 700 - 705 77 Hogh P.( 1974), Porcine infection necrotizing enteritis due to C perfringens, Theses copenhagen, p 287 – 289 78 IsaaCSon, R E., Nagy, B & Moon, H W (1977), Colonization of porcine small intestine by Escherichia coli: Colonization and adhesion factors of pig enteropathogens that lack K88, Journal of Infectious Diseases 135, 531-539 79 Ketyle I Emodyl, Kentrohrt (1975), Mouse lang Oedema caused by a 4789-4794 71 DO T N, Cu H.P, Van H.T, Tran N.P.T& Trott.D.J (2006), Vulence factors of E coli isolates obtained from pigs with postweaning diarhoea or oedema disease in Viet Nam In IPVS, pp336 toxin substance of Escherichia coli strains, Acta Microbiol, A cad-Sci Hung-25, P.307-317 80 Konowalchuk, J., Speirs, J I & Stavric, S (1977) ,Vero response to a cytotoxin of Escherichia coli, Infection and Immunity 18, 775-779 Copenhagen, Denmark 72 Eisenstein T.K, Angeman C.R, Odonell S, Specter S, Fiedman H, 81 Links, I., Love, R & Greenwood, P (1985), Colibaccillois in newborn (1980), Relationship between protective immunity, minogenic and piglets associates with class enterotoxigenic E coli In Infectious E.coli activation diarrhoea of the young: strategies for control in humans and animals , by Salmonella vaccines, Plenum publising coporadiol, p 39 - 50 pp 281 - 287 editer by S Tzipori Gêlong, Autralia: Elsevier Science 73 Falkow, S (1975), Plasmid which contribute to pathogenity, In infection multiple drug resistance Pion Ltd London 82 Nagy, B., Arp, L H., Moon, H W & Casey, T A (1992), 74 Fairbrother.J.M (1992), Enteric colibacillosis Diseases of swine, IOWA State University Press/AMES, IOWA U.S.A 7th Edition, 1992, p.489 - 497 Colonization of the small intestine of weaned pigs by enterotoxigenic Escherichia coli that lack known colonization factors, Veterinary Pathology 29, 239-246 75 Giannella, R.A (1976), Suckling mouse model for detection of heat stable Escherichia coli enterotoxin: characteristics of the model, Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Publishers http://www.lrc-tnu.edu.vn 83 Nagy, B., Awad-Masalmed, M., Bodoky, T., Munch, P & Szekrenyi, M T (1996), Association of shiga-like toxin type II (SLTII) and heat Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 99 100 stable enterotoxins with F18ab, F18ac, K88 and F41 fimbriae of Escherichia coli from weaned pigs, In Proceedings of 14th Congress International Pigs Veterinary Society, pp 264 Bologna Italy IOWA state University Press/ AMES U.S.Ath Edition, p 454 - 468 HÌNH ẢNH MINH HỌA 84 Nagy, B & Fekete, P Z (1999), Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) in farm animals, Veterinary Research 30, 259-284 85 Orskov, I Orskov, Sojka, W.J Wittig, W (1964), K antigens K88ab (L) and K88ac (L) in E.coli A new O antigen: O147 and a new K antigen K89 (B), Acta Pathologica et Microbiologica Scandinavica sect, B62, P 439 - 447 86 Orskov, F (1978), Vilurence Factor of the bacterial cell surface, J Infect., P 630 87 Quin P J, Carter M.E, Mackey B.K, Carter G R (1994), Clinical Verterynary Microbiology, P 190 - 206 88 Radostits O.M, Blood D Cand Gay C (1994), Veterinary medicine, the textbook of the cattle, sheep, pig, goats and horrses, Diseases caused by Escherichia coli London, Philadenphia, Sydney, Tokyo, Toronto, p 703 - 730 ảnh 1: Đàn lợn sau cai sữa bị tiêu chảy 89 Roeder B.L, Chengapa M.M end Nagaraja T.G (1987), Isolation of CL.perfringens from neonatal calves with ruminal and abomas tympamy, abomsitis and abomasuucretion, Tam Vet.Med Assoc, p.1150 - 1155 90 Rippinger.P., Bertschinger.H U., Imberechts.H., Nagy.B., Sorg.I., Stamm.M., Wild P & Wittig W (1995), Designations F18ab and F18ac for the related fimbrial types F107, 2134P and 8813 of Escherichia coli isolated from porcine postweaning diarrhoea and from oedema disease, Veterinary Microbiology 45, 281-295 91 Smith H.W & Halls.S (1967), Observations by the ligated segment and oral inoculation methods on Escherichia coli infections in pigs, calves, lambs and rabbits, Journal of Pathology and Bacteriology 93, 499 92 Taylor D.J, Bergelan M.E (1986), Clostridial infection diseases of swine, Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 101 102 ảnh 2: Mổ khám kiểm tra bệnh tích lợn sau cai sữa bị tiêu chảy ảnh 4: Kiểm tra hình thái vi khuẩn E coli kính hiển vi điện tử ảnh 3: Khuẩn lạc vi khuẩn E coli môi trƣờng thạch MacConkey Ảnh 5: Khuẩn lạc C perfringens môi trng thch ym khớ ảnh 4: Hình thái vi khuẩn E.coli trªn kÝnh hiĨn vi Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 103 104 ảnh 8: Kết thử phản ứng sinh Indol vi khuẩn E.coli Ảnh 6: Hình thái vi khuẩn C perfringens dƣới kính hiển vi thƣờng (độ phóng đại x7000 lần) ảnh 7: Phản ứng lên men đƣờng xác định vi khuẩn E.coli ảnh & 10: Khả mẫn cảm kháng kháng sinh chủng E.coli phân lập đƣợc Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn