AZITHROMYCIN Azithromycinum P.t.l: 749,0 Azithromycin (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-Dideoxy-3-C-methyl-3-Omethyl-α-L-ribo-hexopyranosyl)oxy]-2-ethyl-3,4,10-trihydroxy-3,5,6,8,10,12,14-heptamethyl11-[[3,4,6-trideoxy-3-(dimethylamino)-β-D-xylo-hexopyranosyl]oxy]-1-oxa-6azacyclopentadecan-15-on, phải chứa từ 94,0 đến 102,0% C 38H72N2O12 tính theo chế phẩm khan Tính chất Bột trắng gần trắng Thực tế không tan nước, dễ tan ethanol methylen clorid Định tính A Phương pháp quang phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) Phổ hồng ngoại chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại azithromycin chuẩn (ĐC) Nếu so sánh phổ có sai khác, chuẩn bị dung dịch thử dung dịch chuẩn methylen clorid (TT) có nồng độ 9,0% tiến hành đo phổ B Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Trên sắc ký đồ dung dịch thử phần định lượng phải cho pic có thời gian lưu tương ứng với pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu Độ màu sắc dung dịch Dung dịch S: Hòa tan 0,500 g chế phẩm ethanol (TT) pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Dung dịch S phải (Phụ lục 9.2) không màu (Phụ lục 9.3; phương pháp 2) pH Từ 9,0 đến 11,0 (Phụ lục 6.2) Hòa tan 0,100 g chế phẩm 25,0 ml methanol (TT) pha loãng thành 50,0 ml với nước carbon dioxyd (TT) Góc quay cực riêng Từ -45o đến -49 o tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4) Dùng dung dịch S Tạp chất liên quan Xác định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Chuẩn bị dung dịch trước dùng Pha động: Dung dịch có chứa dikali hydrophosphat 3,484% điều chỉnh pH đến 6,5 acid phosphoric - acetonitril - nước (10 : 35 : 55) Dung môi pha mẫu: Acetonitril - nước ( : 6) Dung dịch thử (1): Hòa tan 0,100 g chế phẩm dung môi pha mẫu pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Dung dịch thử (2): Pha loãng 5,0 ml dung dịch thử (1) thành 20,0 ml với dung môi pha mẫu C38H72N2O12 Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 50,0 mg azithromycin chuẩn (ĐC) dung môi pha mẫu pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng 1,0 ml dung dịch thử (1) thành 100,0 ml với dung môi pha mẫu Dung dịch đối chiếu (3): Hòa tan 5,0 mg azithromycin chuẩn (ĐC) 5,0 mg tạp chất chuẩn A azithromycin (ĐC) dung môi pha mẫu pha loãng thành 50 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (4): Hòa tan mg tạp chất chuẩn B azithromycin (ĐC) dung môi pha mẫu pha loãng thành 50 ml với dung môi Dung dịch dùng để xác định thời gian lưu pic tạp chất B Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) nhồi pha tĩnh end-capped polar-embedded octadecylsilyl amorphous organosilica polymer (5 µm) Duy trì nhiệt độ cột 70 oC Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 215 nm Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút Thể tích tiêm: 100 µl Cách tiến hành: Tiêm dung dịch thử (1), dung dịch đối chiếu (2), (3) (4), tiến hành sắc ký dung dịch thử với thời gian rửa giải 4,5 lần thời gian lưu azithromycin Thời gian lưu tương đối tạp chất so với azithromycin (thời gian lưu khoảng 26 phút): tạp chất D khoảng 0,37; tạp chất J khoảng 0,39; tạp chất A khoảng 0,42; tạp chất I khoảng 0,5; tạp chất C khoảng 0,65; tạp chất K khoảng 0,9; tạp chất F khoảng 1,6; tạp chất B khoảng 1,7 tạp chất G khoảng 2,8 Độ thích hợp hệ thống: Trên sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3), độ phân giải pic tạp chất A pic azithromycin phải 7,0 Yêu cầu: Trên sắc ký đồ dung dịch thử (1), diện tích pic tạp chất B không lớn lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) (2,0%) Diện tích pic tạp chất khác không lớn diện tích pic dung dịch đối chiếu (2) (1,0%) Tổng diện tích tất pic tạp chất không lớn lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (2) (5,0%) Bỏ qua pic phụ có diện tích nhỏ 0,1 lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (2) (0,1%) Ghi chú: Tạp chất A: 6-demethylazithromycin Tạp chất B: 3-deoxyazithromycin (azithromycin B) Tạp chất C: 3′-O-demethylazithromycin (azithromycin C) Tạp chất D: 14-demethyl-14-(hydroxymethyl)azithromycin (azithromycin F) Tạp chất E: 3′-(N,N-didemethyl)azithromycin (aminoazithromycin) Tạp chất F: 3′-N-demethyl-3′-N-formylazithromycin Tạp chất G: 3′-N-demethyl-3′-N-[(4-methylphenyl)sulphonyl]azithromycin Tạp chất H: 3′-de(dimethylamino)-3′,4′-didehydroazithromycin Tạp chất I: 3′-N-demethylazithromycin Tạp chất J: decladinosylazithromycin Tạp chất K: (2S,4′R,4aR,5′S,6′S,7R,8S,9R,10R,13R,15R,16R,17S,17aS)-7-ethyl-5′,8,9,15tetrahydroxy-4′-methoxy-4′,6′,8,10,11,13,15,17-octamethyl-16-[[3,4,6-trideoxy-3(dimethylamino)-β-D-xylo-hexopyranosyl]oxy]octadecahydro-5H-spiro[1,3-dioxino[4,5-m] [1,6]oxazacyclopentadecin-2,2′-[2H]pyran]-5-on (azithromycin E) Kim loại nặng Không 25 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Hòa tan 2,0 g chế phẩm hỗn hợp nước - ethanol (15 : 85), pha loãng thành 20 ml với dung môi Lấy 12 ml dung dịch thu tiến hành thử theo phương pháp Pha loãng dung dịch chì mẫu 100 phần triệu với hỗn hợp nước - ethanol (15 : 85) để thu dung dịch chì mẫu 2,5 phần triệu Dùng dung dịch chì mẫu 2,5 phần triệu (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu Nước Từ 1,8 đến 6,5% (Phụ lục 10.3) Dùng 0,20 g chế phẩm Tro sulfat Không 0,2% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) với điều kiện sắc ký chuẩn bị dung dịch phần thử tạp chất liên quan Thể tích tiêm: 20 µl Tiến hành sắc ký với dung dịch thử (2) dung dịch đối chiếu (1), ghi lại sắc ký đồ Tính hàm lượng azithromycin (C38H72N2O12) dựa vào diện tích chiều cao pic đáp ứng Bảo quản Đựng đồ bao gói kín Nhãn Phải quy định rõ thời hạn sử dụng điều kiện bảo quản Loại thuốc Kháng khuẩn Chế phẩm Nang azithromycin, viên nén azithromycin, hỗn dịch uống azithromycin